Áhrif Ludwigia Octovalvis gegn öldrun á Drosophila Melanogaster og SAMP8 mýs Part 1

ÁgripVið könnuðum öldrunaráhrif Ludwigia octovalvis (Jacq.) PH Raven (Onagraceae), sem er þykkni sem er mikið neytt sem holls drykkjar í nokkrum löndum. Með því að nota ávaxtafluguna, Drosophila melanogaster, sem fyrirmyndarlífveru, sýndum við fram á að L. octovalvis þykkni (LOE) lengdi verulega líftíma flugunnar á háum kaloríufæði, sem gefur til kynna að LOE gæti stjórnað líftíma með takmörkun á mataræði ( DR)-tengd leið. LOE dró einnig úr aldurstengdri vitsmunalegri hnignun bæði hjá flugum og öldrunarhröðuðu 8 (SAMP8) músinni, án þess að valda neinum áberandi neikvæðum skiptum, þar á meðal vatnsneyslu, fæðuinntöku, frjósemi eða sjálfsprottinni hreyfivirkni. LOE innihélt mikið magn af pólýfenólum og flavonóíðum, sem hafa sterka DPPH róttæka hreinsivirkni og sýnt var að þau draga úr oxunarskemmdum af völdum paraquats og dauða í flugum. Gasskiljun-massagreining (GC-MS) greindi 17 þekktar sameindir, þar af -sítósteról og skvalen voru tvær algengustu. Við sýndum ennfremur fram á að -sítósteról gæti lengt líftíma, líklega með því að virkja AMP-virkjaðan próteinkínasa (AMPK) í fitulíkama fullorðinna flugna. Gögn okkar benda til þess að LOE sé öflugt inngrip gegn öldrun með möguleika á að meðhöndla aldurstengda sjúkdóma.

Glýkósíð af cistanche getur einnig aukið virkni SOD í hjarta- og lifrarvef og dregið verulega úr innihaldi lipofuscins og MDA í hverjum vef, hreinsar í raun ýmsar hvarfgjarnar súrefnisradicals (OH-, H₂O₂, osfrv.) og verndar gegn DNA skemmdum af völdum af OH-róttækum. Cistanche phenylethanoid glýkósíð hafa sterka hreinsunargetu sindurefna, meiri afoxunargetu en C-vítamín, bæta virkni SOD í sæðisviflausn, draga úr innihaldi MDA og hafa ákveðin verndandi áhrif á virkni sæðishimnu. Cistanche fjölsykrur geta aukið virkni SOD og GSH-Px í rauðkornum og lungnavef í tilraunamúsum af völdum D-galaktósa, auk þess að draga úr innihaldi MDA og kollagens í lungum og plasma og auka innihald elastíns, hafa góð hreinsunaráhrif á DPPH, lengja tíma súrefnisskorts í öldruðum músum, bæta virkni SOD í sermi og seinka lífeðlisfræðilegri hrörnun lungna í öldruðum tilraunamúsum. Með frumuformfræðilegri hrörnun hafa tilraunir sýnt að Cistanche hefur góða andoxunargetu og hefur tilhneigingu til að vera lyf til að koma í veg fyrir og meðhöndla öldrunarsjúkdóma í húð. Á sama tíma hefur echinacoside í Cistanche umtalsverða getu til að hreinsa DPPH sindurefna og getur hreinsað hvarfgjarnar súrefnistegundir, komið í veg fyrir niðurbrot á kollageni af völdum sindurefna og hefur einnig góð viðgerðaráhrif á anjónaskemmdir af sindurefnum af týmíni.

Smelltu á cistanches herba

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

LeitarorðLudwigia octovalvis. Takmörkun á mataræði. Lífskeið. AMPK

Kynning

Skilningur á öldrun er mikil áskorun samtímans í ljósi lýðfræðilegrar þróunar og spáðra byrða öldrunarsamfélags. Rannsóknir sem rannsaka aldurstengda sjúkdóma eins og taugahrörnunarsjúkdóma, krabbamein og hjarta- og æðasjúkdóma hafa þegar skilað verulegri innsýn í öldrun manna. Fæðutakmörkun (DR), með því að draga úr kaloríuinntöku án næringarskorts eða breytinga á jafnvægi fæðuþátta, er þekkt fyrir að vera áhrifaríkasta inngripið til að lengja heilbrigðan líftíma milli tegunda, allt frá ger til flugur til spendýra (Lin o.fl. 2000; Wood o.fl. 2004; Bonkowski o.fl. 2006; Wu o.fl. 2013). Hjá nagdýrum getur DR verulega aukið líftíma hjá venjulegum músum og skammlífum öldrunarhröðun 8 (SAMP8) músum (Weindruch og Walford 1982; Choi og Kim 2000; Simons o.fl. 2013). Hjá flugum má einnig sjá sláandi líftímalengingu (Zheng o.fl. 2005; Soh o.fl. 2013). Þrátt fyrir að rannsóknir á prímötum (rhesus öpum) hafi ekki enn skilað endanlegum niðurstöðum varðandi áhrif DR á dánartíðni, þá er ljóst að DR í öpum hefur jákvæð lífeðlisfræðileg áhrif svipuð þeim sem sjást í nagdýrum og flugum (Colman o.fl. 2009; Mattison et al. al. 2012). Sýnt hefur verið fram á að líftímalenging með DR er líklega miðlað í gegnum nokkrar erfðafræðilegar leiðir sem fela í sér næringarefnaskynjun og efnaskipti, svo sem insúlín/IGF, sirtuins (Sir), SKN-1, mark rapamýsíns og AMP-virkjað próteinkínasa (AMPK) leiðir (Lin o.fl. 2000; Kaeberlein o.fl. 2005; Bishop og Guarente 2007; Alcedo og Kenyon 2004; Stenesen o.fl. 2013). Svo virðist sem Sir2/Sirt1 (Lin o.fl. 2004) og AMPK (Xiao o.fl. 2011) geti verið virkjað með auknum AMP/ATP, ADP/ATP eða NAD/NADH hlutföllum, sem endurspeglar lægri frumuorkustöðu. Þetta framkallar aftur á móti röð af boðunaratburðum sem umbreyta efnaskiptaástandi frumna frá orkunotkun til orkugeymslu og orkuframleiðslu.

Með hliðsjón af hagnýtum takmörkunum fyrir menn við að æfa DR í daglegu lífi, hefur þróun DR eftirlíkinga komið fram sem spennandi svið fyrir rannsóknir gegn öldrun. Fæðubótarefni sem innihalda næringarefnasambönd eða plöntuþykkni gætu veitt örugg og árangursrík inngrip til að lengja heilbrigt líf. Þegar hefur verið sýnt fram á að ávaxtaþykkni úr nektarínum og eplum, sem og jurtaseyði úr Rhodiola rosea og Curcuma longa, lengja líftíma ávaxtaflugna, með því að draga úr oxunarskemmdum (Boyd o.fl. 2011; Peng o.fl. 2011; Schriner o.fl. 2009; Lee o.fl. 2010; Schriner o.fl. 2013). Helstu efnisþættirnir sem tilgreindir eru í þessum heilsueflandi plöntum sem líklegir möguleikar til að lengja líftíma eru pólýfenól, sem hafa tilhneigingu til að virka sem sindurefnahreinsar eða redoxvirkir málmklóarar (Galleano o.fl. 2010). Resveratrol, pólýfenólískt efnasamband sem finnst að mestu leyti í húð rauðra vínberja, er þekktasta dæmið um þennan flokk sameinda og hefur verið sýnt fram á að lengja líftíma tegunda sem eru eins fjarlægar í þróun og Saccharomyces cerevisiae, Caenorhabditis elegans, Drosophila melanogaster og Nothobranchius furzeri (Howitz o.fl. 2003; Wood o.fl. 2004; Valenzano o.fl. 2006). Þrátt fyrir að sýnt hafi verið fram á andoxunareiginleika resveratrols, bendir uppsöfnun sönnunargagna til þess að þetta efnasamband geti einnig virkað sem öflugur virkjandi fyrir nokkur langlífstengd gen, þar á meðal Sir2/Sirt1 sem nefnd eru hér að ofan (Hubbard o.fl. 2013).

Ludwigia octovalvis (Jacq.) PH Hrafn (Onagraceae) hefur mikla útbreiðslu á hitabeltissvæðum í mörgum löndum um allan heim. Þrátt fyrir að fullkominni efnasamsetningu L. octovalvis hafi ekki verið lýst að fullu, hefur þessi planta langa sögu um notkun sem jurtalyf til að meðhöndla ýmsar aðstæður, þar á meðal bjúg, nýrnabólgu og lágþrýsting. Stórir íbúar í Asíu neyta L. octovalvis þykkni (LOE) sem hollan drykk daglega. Eiturefnafræðilegt mat á músum hefur bent til þess að langvarandi LOE meðferð geti veitt ónæmisstýrandi, lifrarverndandi og hjarta- og æðaverndandi eiginleika, án sjáanlegra aukaverkana (Kadum Yakob o.fl. 2012). Að auki hefur verið greint frá því að LOE hafi bakteríudrepandi og krabbameinslyfjavirkni (Chen o.fl. 1989; Chang o.fl. 2004). Í þessari rannsókn könnuðum við öldrunaráhrif LOE með því að nota bæði ávaxtaflugur og SAMP8 mýs sem fyrirmyndarlífverur. Niðurstöður okkar benda til þess að LOE geti þróast sem inngrip gegn öldrun.

Aðferðir

LOE undirbúningur

Heilum plöntum af L. octovalvis var venjulega safnað yfir sumartímann og þurrkaðar plöntur voru fengnar frá landbúnaðarbætingarstöðinni á staðnum og Taiwan Herbal Biopharma Company Ltd. í Taívan. Gæðaeftirlit fyrir L. octovalvis var fylgst með af Taiwan Herbal Biopharma Company Ltd. og sýnishorn af skírteini (nr. 034) var afhent á herbarium Hsiehyu Biotech Company Ltd. Fyrir LOE undirbúning voru 100 g af L. octovalvis dufti bleytt í 400 ml af 95 prósent etanóli yfir nótt við 4 gráður og síðan dregið út tvisvar við 55 gráður í 30 mín. Yfirvatnið var skilið í skilvindu (við 8,000×g í 5 mínútur) og síað (TOYO nr. 1) til að fjarlægja rusl. LOE var fengin eftir þjöppunarferli.

Gasskiljun-massagreining (GC-MS)

GC-MS greining á LOE var framkvæmd með því að nota HP- 6890 gasskiljun og HP-5973 massasértækan skynjara (MSD, Agilent Technologies), búin háræðagasskiljunarsúlu HP-5MS (12,5 m×0,2 mm auðkenni, 0,33 μm filmuþykkt) (J&W Scientific). Inndælingarrúmmál var 2 ul í klofningslausri stillingu og inntakshiti var 290 gráður. Helíum var notað sem burðargas (flæðihraði 0,6 ml/mín.) og hitastig ofnsins var forritað sem hér segir: upphafshiti: 35 gráður, hækkaður um 5 gráður/mín í 90 gráður, síðan um 10 gráður/mín í 200 gráður , og að lokum um 20 gráður / mín til 290 gráður, þar sem það var haldið í 8 mín. Greining var framkvæmd í EI ham, með jónunarspennu sem var fast á 70 eV. Skannaöflun (m/z 45-550) á MSD var framkvæmd með HP Chemistation hugbúnaði.

2,2-Dífenýl-1-píkrýlhýdrasýl (DPPH) radical-hreinsivirkni og heildarinnihald fjölfenóla og flavonóíða

DPPH radical scavenging virkni var mæld með breyttri aðferð sem lýst var áður (Brand-Williams o.fl. 1995). Í stuttu máli var 100 ul af mismunandi styrk af LOE, askorbínsýru, resveratrol, skvaleni eða - sitósteróli (Sigma) bætt við 200 ul af 100 μM DPPH í 96-míkróbrunnsplötum til að ná lokastyrk af 0, 1, 5, 10 og 50 ug/ml. Hvarfblandan var ræktuð í myrkri við stofuhita í 30 mín. Lækkun á gleypni mældist við 520 nm í örplötulesara (AccuReader 965). Heildarfenól innihaldsefni LOE voru ákvörðuð með Folin-Ciocalteu hvarfefninu, með gallsýru sem staðal (Slinkard og Singleton 1977). Allt innihald flavonoids var mælt með litamælingu álklóríðs, þar sem rútín var notað sem staðall (Shih o.fl. 2010).

Frumuræktun og Western blot greiningar

Drosophila Schneider (S2) frumur voru ræktaðar við 25 gráður í Drosophila miðli Schneider (Invitrogen), bætt við 10 prósent hitaóvirkjuð nautgripasermi (Gibco). Frumur voru meðhöndlaðar með mismunandi styrkleika af LOE og -sítósteróli (Sigma) við eðlilegar (1× miðlungs, eins og hér að ofan) vaxtarskilyrði eða við DR aðstæður (0,5× miðlungs, 1:1 þynning af 1× miðlinum í fosfat-buffuðum saltvatni ( PBS)) í 12 klst. Próteinmagn fosfór-AMPK og -túbúlíns (mótefni frá Cell Signaling Technology) voru greind með Western blot eins og áður hefur verið lýst (Wang o.fl. 2005).

Flugur og líftímapróf

Canton-S (CS), w1118, feitur líkami GeneSwitch driver S106 (Bloomington Stock Center #8151), og UASAMPK.RNAi (Bloomington Stock Center #32371) hlutabréf voru hækkaðir á venjulegum súkrósa/geri/maísmjöli. . S106 meyjar voru krossaðar með UASAMPK.RNAi karldýrum í AMPK knockdown tilraunum. Fyrir líftímaprófanir voru flugur sem höfðu horfið innan 48 klst. (u.þ.b. 100 karldýr og 100 kvendýr) fluttar í 1-l stofnbúr og haldið í rakaðri hitastýrðri útungunarvél með 12-klst á/ slökkt ljós hringrás við 25 gráður (Wang o.fl. 2009). Boðið var upp á ferskan mat annan hvern dag og skorað var á fjölda og kyn dauðra flugna. Kaloríarík og kaloríasnauð matvæli innihéldu 15 eða 5 prósent af bæði dextrósa og geri, í sömu röð. Tveimur prósent agar og 0,23 prósent Tegosept (Apex) var bætt í alla matvæli. Mismunandi styrkur af LOE, skvaleni, -sítósteróli, RU486 (Mifepriston, Sigma) eða burðarefnisstýringu var bætt við matvælin sem lýst er í hverri tilraun.

Fóðrun, frjósemi og sjálfkrafa hreyfivirkni flugna

Tíu daga gamlar flugur, sem haldnar voru á kaloríuríkum fæðu sem innihélt mismunandi styrk af LOE, voru fluttar yfir í fersk hettuglös af sama fæðu, með því að bæta við 0,5 prósent FD&C nr. 1 blár matarlitur. Eftir 24 klst. voru 10 flugur einsleitar í einni túpu sem innihélt PBS og magn inntekins litarefnis var ákvarðað með litrófsmæli fyrir gleypni litarins við 625 nm. Frjósemi kvenna var ákvörðuð með daglegri talningu á eggjum sem framleidd voru af þremur pörum. Flugur voru fluttar daglega í ný hettuglös sem innihéldu viðeigandi fæðu og fjöldi eggja var talinn og skráður fyrstu 20 daga fullorðinsára. Til að fylgjast með virknistigi voru hettuglös úr gleri sem innihéldu eina karlflugu á viðeigandi fæðugjafa komið fyrir í hreyfimyndaklefum sem hafa hringlaga hringa af innrauðum ljósgjafa; geislabrot eru skráð sem virkni (TriKinetics). Gögnin voru skráð á 20 sekúndna fresti á 72-klst. tímabili. Virknimælar voru til húsa í hitakassa sem lýst er hér að ofan.

Pavlovískt lyktarskynsamlegt skammtímaminni flugna

Flugur á mismunandi aldri voru þjálfaðar með því að verða fyrir raflost (70 V) sem var parað við eina lykt í 60 s. Í kjölfarið voru flugur útsettar fyrir annarri lykt án raflosts í 60 s. Flugur fengu að hvíla sig í 45 sekúndur og voru síðan látnar fara í T-völundarhúspróf í 2 mín, þar sem þær þurftu að velja á milli lyktanna tveggja. Lyktin sem notuð var voru metýlsýklóhexanól (1:1,000 þynning í jarðolíu) og eða oktanól (1,5:1,000 þynning í jarðolíu). Fyrir allar tilraunir voru að minnsta kosti fimm fundir gerðar fyrir hverja lykt-rafstuð pörun. Öll gögn voru meðaltal og þau eru sýnd sem hlutfall af minnisvísitölu fyrir hvern hóp. Frammistöðuvísitalan var reiknuð út með því að draga fjölda flugna inn í handlegginn þar sem lyktin var pöruð við raflostið frá fjöldanum sem kom inn í hinn handlegginn, þar sem lyktin var ekki pöruð við raflostið, og deila með heildarfjölda flugna.

Oxunarálag af völdum paraquats og 4-hýdroxý-2-nafnákvörðun (HNE)

Tíu daga gamlar flugur sem haldnar voru á kaloríuríkum fæðu sem innihélt mismunandi styrk af LOE voru fluttar í hettuglös með síupappír í bleyti í lausn af 0 eða 20 mM paraquat og 6 prósent dextrose. Fjöldi dauðra flugna var talinn á 3 til 4 klst fresti. Eftir 12 klst. var sumum af paraquat-meðhöndluðu flugunum safnað og HNE var mældur með OxiSelect™ HNE Adduct ELISA Kit (Cell Biolabs), samkvæmt samskiptareglum frá framleiðanda.

Dýr

Allar tilraunareglur fylgdu staðbundnum siðareglum um dýravernd. SAMP8 mýs voru ræktaðar og viðhaldnar í Modular Animal Caging System® (Alternative Design), og fæða þeirra var sótthreinsuð með gammageislun. Herbergið var með 12-klst. kveikt/slökkt ljóslotu, þar sem dimmi fasinn hófst klukkan 20:00. Fyrir mýs var LOE bætt við drykkjarvatnið í lokastyrknum 0, 50 og 100 ug/ ml. Fylgst var reglulega með fæðuinntöku, vatnsneyslu og breytingu á líkamsþyngd.

RNA undirbúningur, cDNA nýmyndun og magn pólýmerasa keðjuverkun (qPCR)

Heildar-RNA var útbúið úr að minnsta kosti 30 flugum með því að nota RNeasy Mini Kit (Qiagen). RNA var meðhöndlað með DNase og breytt í cDNA með því að nota oligo-d(T)15 (Invitrogen) og SuperScript III bakrita (Invitrogen) eins og áður hefur verið lýst (Chou o.fl. 2013). qPCR viðbrögð voru framkvæmd með því að nota StepOnePlus rauntíma PCR kerfi (Applied Biosystems), SYBR Green Master Mix (Applied Biosystems), og genasértækir primers voru CAAG AGCTATCTGCTCGACTTCAA og CACATTTCGA AAAACTCCATGGT fyrir AMPK-, og GACGAAAT CAAGGATCTAAGGAGTCG og GACGAAAT CAAGGATCTAAGGAGTCG og GACGAAAT CAAGGATCTAAGGAGTCG. Tveggja þrepa PCR hvarf var framkvæmt með eðlisbreytingu við 95 gráður í 15 s, glæðingu og framlengingu sameinuð við 60 gráður í 1 mín í samtals 40 lotum. MRNA tjáningarstig hvers markgena samanborið við GAPDH var magnmælt með frádrætti: Cttarget − CtGAPDH=ΔCt. Munur á einni PCR lotu jafngildir tvíþættri breytingu á tjáningarstigi mRNA. Sérstaða amplicons var staðfest með því að nota dissociation curves.

Skáldsaga hlutaþekking, hækkuð T-völundarhús og próf á opnum vettvangi

Fyrir nýja hlutgreiningarprófið voru mýs fyrst vanar opnum kassa (50 cm × 25 cm × 50 cm) í 10 mínútur á dag í tvo daga í röð, án þess að hlutir voru til staðar. Á þriðja degi voru mýs settar í kassann í 2 mínútur og tveir svipaðir hlutir voru síðan kynntir fyrir hverja mús. Tíminn sem fór í að skoða hvern hlut var skráður á næsta 5-mínúta tímabili (skilgreint sem þjálfunarlotan). Músunum var síðan skilað aftur í búrið sitt. Einni, tveimur eða þremur klukkustundum síðar voru sömu dýrin prófuð aftur í 5 mínútur í kassanum með kunnuglegum og nýjum hlut (skilgreint sem minnisprófunarlotan). Hlutamismununarstuðullinn var reiknaður út með því að draga tímann sem fór í að skoða kunnuglegan hlut frá þeim tíma sem fór í að skoða nýjan hlut og deila honum með heildartímanum sem varið í að skoða báða hlutina.

Hækkað-T völundarhúsið var breytt frá fyrri rannsóknum (Cruz-Morales o.fl. 2008; De-Mello og Carobrez 2002; Maia o.fl. 2010; Santos o.fl. 2006; Takahashi o.fl. 2005). Það samanstóð af einum handlegg sem var lokaður af veggjum 15 cm á hæð, hornrétt á tvo andstæða opna handleggi. Armarnir þrír voru jafnstórir (30 cm×5 cm) og allt tækið var hækkað 50 cm yfir gólfið. Á þjálfunardeginum var hver mús sett í fjarlæga enda meðfylgjandi handleggsins, sem snýr að gatnamótum handleggjanna, og var leyft að kanna lokaða handlegginn. Prófinu lauk þegar músin annað hvort fór í opna handleggina (allar fjórar lappirnar voru á opna handleggnum) eða var í lokuðum handleggnum í 300 sek. Fjöldi rannsókna sem þarf til að ná forðunarviðmiðinu var notaður til að meta námsgetu músanna meðan á þjálfuninni stóð. Tuttugu og fjórum tímum eftir þjálfunarloturnar voru mýsnar endurútsettar fyrir lokuðum handleggnum og tíminn sem þær voru eftir í lokuðum handleggnum var skráður sem mat á varðveislu minni.

Vöruprófið var gert í opnum kassa (50 cm×25 cm×50 cm). Hver mús var sett í miðju opna reitsins og var leyft að skoða tækið frjálslega í 1 klst. Stefna og ferðahraði hverrar músar var skráð með sjálfvirkri athugun (Diagnostic and Research Instruments).

Niðurstöður

LOE-framkölluð líftímalenging tengist DR

Til að prófa hvort LOE hafi öldrunaráhrif in vivo, skoðuðum við fyrst líftíma CS flugna sem alin eru á matvælum sem innihalda mismunandi styrk af LOE. Karlkyns CS flugur á kaloríuríkum fæðu höfðu að meðaltali 41,5 dagar og að bæta 50, 100 og 1,000 ug/ml af LOE við flugufóðurið lengti líftíma karlflugna um 8,9, 16,1 og 9,6 prósent í sömu röð (mynd 1a og tafla 1). Kvenkyns CS flugur á kaloríuríkum mat höfðu að meðaltali aðeins 32,2 daga, stuttan í samanburði við karlkyns hliðstæða þeirra. Hins vegar framkallaði LOE enn meiri líftímalengingu hjá kvenkyns CS flugum, þar sem 100 ug/ml af LOE hafði mest áhrif (24,2 prósent lenging; mynd 1b og tafla 1), og 100 ug/ml LOE lengdi einnig líftíma hjá bæði karlkyns og kvenkyns w1118 flugur, sem bendir til þess að LOE-lengdur líftími sé ekki takmarkaður við CS erfðafræðilegan bakgrunn (mynd 1c, d og tafla 1).

Þar sem DR er vel skjalfest inngrip til að lengja líftíma, vildum við prófa hvort langlífisáhrif LOE myndu breytast af DR. Karlkyns og kvenkyns CS flugur aldar á kaloríusnauðu matvæli sýndu 17,8 og 49,4 prósenta aukningu á meðallíftíma, í sömu röð, samanborið við CS flugur aldar á kaloríuríkum matvælum (Mynd 1e, f og Tafla 1). LOE olli hins vegar ekki framlengingu á líftíma umfram það sem þegar hefur sést fyrir flugur á kaloríusnauðu fóðri (Mynd 1e, f og Tafla 1), sem bendir til sambands milli LOE og DR-framkallaðrar líftímalengingar, sem gefur til kynna að þessar inngrip geti hugsanlega starfa, að minnsta kosti að hluta, í gegnum sömu leiðir.

Langvarandi LOE meðferð veldur ekki neikvæðum málamiðlun

Þar sem LOE-framkölluð líftímalenging er hugsanlega tengd við DR-ferilinn, skoðuðum við hvort LOE gæti dregið úr fæðuinntöku flugna og leitt til DR-líkrar stöðu. Við fylgdumst með fæðuinntöku flugna með því að nota staðlað kerfi til að bæta litarefni í fæðu þeirra (Wang o.fl. 2009). Að meðaltali neyttu kvenkyns CS flugur mun meiri fæðu samanborið við aldurssamsvörun karldýra, en enginn munur á fæðuinntöku kom fram á milli samanburðarflugna og flugna sem fengu LOE fyrir hvorugt kynið (mynd 2a).

Auk minnkaðrar fæðuneyslu geta inngrip sem lengja líftíma falið í sér neikvæðar hliðstæður, eins og minnkuð frjósemi og hreyfingu (Flatt o.fl. 2008; Wang o.fl. 2009; Sohal og Buchan 1981). Við komumst að því að LOE-meðhöndlaðar CS flugur sýndu engan mun á eggjaframleiðslu fyrstu 20 daga fullorðinslífsins (Mynd 2b). Bæði LOE-meðhöndlaðar flugur og CS-viðmiðunarflugur sýndu einnig eðlilega dægurtakta og sjálfsprottna hreyfivirkni (mynd 2c), eins og áður hefur komið fram (Wang o.fl. 2009).

LOE dregur úr aldurstengdum minnisbrestum hjá ávaxtaflugum og SAMP8 músum

Virkni hnignun taugafrumna er algengt einkenni öldrunarferlisins. Við skoðuðum virkniminni flugna með Pavlovian lyktarskyns tengingu skammtímaminnisprófi. CS flugur á kaloríuríkum fæðu sýndu hægfara vitsmunalega hnignun á fyrstu 20 dögum fullorðinslífsins (Mynd 3a). Þessi minnislækkun var dregin af DR, með tölfræðilega marktækum mun sem sást á degi 20 (mynd 3a, b). LOE minnkaði einnig aldurstengda minnislækkunina á skammtaháðan hátt, þar sem flugur á 100 ug/ml LOE náðu hálendisstigi svipað því sem sést fyrir DR flugur (mynd 3b).

Við rannsökuðum frekar forvitnunaráhrif LOE í SAMP8 músum, sem vitað er að þróa snemma skort á námi og minni og sýnt hefur verið fram á að þau séu hentug líkan til að rannsaka grundvallaraðferðir Alzheimerssjúkdóms (Flood og Morley 1992, 1993) ; Chan o.fl. 2006; Takeda 2009). Í nýjustu hlutgreiningarprófunum sýndu 3-mánaðargamlar SAMP8 mýs viðvarandi greiningarminni allt að 3 klst. eftir þjálfunarlotuna og eyddu meiri tíma í nýja hlutnum samanborið við kunnuglega hlutinn (mynd 3c, d). Þessi minni varðveisla kom hins vegar ekki fram hjá 8-mánaðargömlum SAMP8 músum (mynd 3c, d). Að bæta við LOE (100 ug/ml) við drykkjarvatnið í 5 mánuði (frá 3 mánaða gömul) jók marktækt greiningarminni varðveislu SAMP8 músa, jafnvel 3 klst eftir þjálfun (Mynd 3d). Vatnsuppbót upp á 50 ug/ml af LOE hafði færri jákvæð áhrif, en gat bætt minni varðveislu í allt að 2 klst (mynd 3d).

Í hækkuðu T-völundarhúsaprófunum þurftu allir hópar músa svipaðan fjölda þjálfunartilrauna til að ná forðunarviðmiðinu, sem bendir til þess að allar mýs hafi svipaða námshæfileika (Mynd 3e). Í 24-h minnisupptökuprófunum sýndu aðeins 8-mánaðargamlar, en ekki 3-mánaðargamlar, SAMP8 mýs verulegan skort á minni varðveislu (mynd 3f). Þessum aldurstengda skorti á hræðsluminni í SAMP8 músum væri einnig hægt að bjarga með 5-mánaðar LOE viðbót í drykkjarvatni (mynd 3f). Forvitnunaráhrif LOE sem sést hér að ofan má ekki rekja til neinnar breytinga á almennri hreyfivirkni músanna, þar sem enginn munur á ferðahraða eða fjarlægð kom fram í prófunum á opnum vettvangi (mynd 3g og gögn ekki sýnd). SAMP8 mýs sem fengu 5-mánaðar LOE meðferð sýndu engin áhrif á fæðuinntöku eða vatnsneyslu og engar breytingar á líkamsþyngd (mynd 3h–j).

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】