Sjálfkrafa kyrningahvítblæði í A NOD/Shi-scid IL-2R núll mús

Ágrip:Hér greinum við frá tilviki sjálfkrafa kyrningahvítblæðis í 51-viku gömlum karlkyns NOD/Shi-SCIDIL-2R núll (NOG) mús. Músin sýndiversnandi blóðleysioggrófar öndunarhreyfingar. Stórspeglun var milta mislitað og stækkað. Vefjafræðilega er beinmergurinn íbringubeinog lærleggur var mjög frumulaga og nær eingöngu fyllt meðæxlisfrumur. Kjarnar æxlisfrumna voru stórir, sporöskjulaga til örlítið óreglulegir í lögun og fáeinar frumur höfðunýru- eða hringlaga kjarna.Æxlisfrumursíast mikið inn í líffærin og milta og lifur voru áberandi við sögu. Ónæmisvefjaefnafræðilega var stór hópur æxlisfrumna í rauðum kvoða milta og sinusoid lifr jákvæður fyrirmyeloperoxidasa. Byggt á vefjafræðilegum einkennum var þetta tilfelli greind meðkyrningahvítblæði. Þessar skáldsögur upplýsingar umsjálfkrafa æxligetur verið gagnlegt fyrir viðeigandi notkun þessa músastofns í frekari rannsóknum. (DOI: 10.1293/tox.2020-0092; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

Leitarorð: kyrningahvítblæði, NOG mús, sjálfsprottið æxli

SMELLTU HÉR TIL AÐ FÁ NÁTTÚRULEGA LÍFFRÆNT CISTANCHE ÚTDRÆT MEÐ 25% ECHINACOSIDE OG 9% ACTEOSIDE FYRIR NÝRAVERKUN

Stuðningsþjónusta Wecistanche - Stærsti útflytjandi cistanche í Kína:

Netfang:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Sími:+86 15292862950

Verslaðu fyrir frekari upplýsingar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Sjálfkrafa kyrningahvítblæðisjaldan er greint frá nokkrum músastofnum, þó að efnafræðileg efni og jónandi geislun geti aukið tíðni sumra músastofna1, 2. NOD/Shi-scid IL-2R núll (NOG) mýs eru alvarlegardýr með ónæmisbrest, og sýna galla í T-, B- og náttúrulegum drápsfrumum, og illa starfandi átfrumur og dendritic frumur með því að IL-2 viðtaka-keðju (IL2R c) er útrýmt í NOD-scid stofn3. Þessi músastofn er notaður fyrir ekki-klínískar prófanir, svo sem æxlismyndunarprófið, til að meta gæði og öryggi líffræðilegra vara fyrir endurnýjunarlækningar með því að nota frumur/vef úr mönnum, vegna áberandi betri ígræðslu útlendingafruma4–6. Þrátt fyrir að ónæmisbrest og áhrif þess á xenografts hafi verið vel rannsökuð, eru litlar upplýsingar tiltækar um sjálfsprottinn æxli sem koma fram í þessum músastofni, svo sem t.d. thymic eitilfrumukrabbamein,brjóstamjólkkirtill kirtilæxli/kirtilkrabbamein, berkju- og lungnakrabbamein, rákvöðvasarkmein, og teratoma7. Hér greinum við frá tilfelli af kyrningahvítblæði í 51-viku gamalli NOG karlkyns mús.

Dýrið var fengið frá In-Vivo Science Inc. (Kanagawa, Japan) við 6 vikna aldur og var haldið ómeðhöndlað. Dýrið var hýst fyrir sig í plastbúri með sérloftræstu búrakerfi (Maxi Miser Caging System; Oriental Giken Inc., Tókýó, Japan) í umhverfisstýrðu hindrunarkerfisherbergi, sem haldið var við 22 ± 2 gráðu hita með rakastig 50 ± 20% og 12-klst ljós/myrkur hringrás. Músinni var gefið með autoclaved pelletated fæði (CRF-1; Charles River Japan, Inc., Tokyo, Japan) með autoclaved kranavatni og libitum. Dýrið var meðhöndlað í samræmi við siðareglur samþykktar af Institutional Animal Care and Use Committee of CMIC Pharma Science Co., Ltd., sem er viðurkennt af AAALAC International.

Þessi mús sýndi klínísk einkenni veikingar, svo sem blóðleysi, grófar öndunarhreyfingar og líkamsþyngdarminnkun á milli 49 og 51 vikna aldurs. Dýrið var aflífað 51 vikna gamalt. Við krufningu var milta mislitað og stækkað. Engar augljósar óeðlilegar grófar niðurstöður komu fram í hinum líffærunum. Hóstarkirtli og eitli voru rýrnuð, svipað og hjá venjulegum NOG músum.

Öllum líffærum og vefjasýnum var reglulega safnað, fest í 10% hlutlausu jafnaðri formalíni, fellt inn í paraffín og skipt í um það bil 3 μm. Fyrir meinafræðilega skoðun hans voru hlutar litaðir með hematoxýlíni og eósíni (HE). Hlutar milta og lifur voru litaðir með ónæmisvefjaefnafræðilega litun fyrir kanínum and-manna myeloperoxidasa (MPO) fjölstofna mótefni (Dako Japan, Tókýó, Japan) sem mergfrumumerki, CD3 einstofna mótefni gegn mönnum (Nichirei Biosciences Inc., Tokyo, Japan) ) sem T frumumerki, og kanínu and-manneskju Pax-5 einstofna mótefni (Abcam Inc., Cambridge, Bretlandi) sem B frumumerki8. Hlutar voru ræktaðir með mótefnum við stofuhita í 1 klst og ónæmisgreining var framkvæmd með því að nota Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) með 3,3'-díamínóbensidíni/H2O2 sem litningi. Ónæmislitaðir hlutar voru þámótlitað með hematoxýlíni.

Vefjameinafræðilega var beinmergurinn í bringubein og lærlegg mjög frumulaga og nær eingöngu fylltur af æxlisfrumum (mynd 1A). Fituvefurinn var gjörsamlega tilfærður. Einstaka sinnum voru frumuherðir sem samanstanda af rauðkorna- og megakaryocytískum þáttum í merg, sem voru taldir vera leifar afeðlileg blóðmyndun. Flestar æxlisfrumur sýndu blast útlit, sem einkenndist af stórum, sporöskjulaga til örlítið óreglulega löguðum kjarna, og með reticular chromatin sem inniheldur einn eða fleiri áberandi kjarna. Lítill fjöldi frumna var með nýrna- eða hringlaga kjarna og nokkrar frumur með kjarna með flipað voru einnig til staðar (mynd 1B). Korn í umfrymi æxlisfrumna voru ekki áberandi í köflunum sem litaðir voru með HE. Fjölmargar mítótískar fígúrur fundust í mergnum og einstaka apoptotic líkamar sáust einnig. Æxlisfrumur réðust verulega inn í beinhimnuna og nærliggjandi beinagrindarvöðva. Mikil íferð var í æxlisfrumum inn í önnur líffæri og vefi og milta og lifur voru áberandi við sögu. Í milta sáust æxlisfrumur um alla rauða kvoðu (mynd 2). Hylkisíferð æxlisfrumna var augljós. Nokkrar þróaðar rauðkorna röð og megakaryocytes sáust. Megakaryocytes sem innihéldu eina eða nokkrar mergfrumur í umfryminu, sem benda til emperipolesis, komu stundum fram. Í lifrinni fóru æxlisfrumur inn í Glisson's hylkið og sinusoids í lifur (mynd 3). Æxlisfrumur með nýrna- eða hringlaga kjarna voru einnig áberandi í sumum æðum. Sumar lifrarfrumur á periportal svæðinu, með áberandi íferð æxlisfrumna, sýndu hrörnun eða drep, en eðlileg uppbygging lifrarblaðsins hélst ósnortinn. Íferð æxlisfrumna fannst einnig í öðrum líffærum, þar á meðal í lungnablöðruvegg og æðakerfi lungna, milli leikvanga í nýrum, sinusoid í nýrnahettum og slímhúð og undirslímhúð í magavegi (maga og þörmum). Ónæmisvefjaefnafræðilega var stór stofn æxlisfrumna í rauðum kvoða milta (mynd 4) og sinusoid lifrarinnar jákvæð fyrir MPO. CD3 og Pax-5 jákvæðar frumur fundust ekki. Niðurstöður CD3 og Pax-5 ónæmislitunar voru svipaðar og í milta venjulegra NOG músa, sem voru vefjafræðilega vanþroska og sýndu engar CD3 eða Pax-5 jákvæðar frumur.

Ónæmisvefjaefnafræðileg rannsókn leiddi í ljós að æxlisfrumurnar komu frá mergfrumuættum. Á sumum viðkomandi svæða, sérstaklega milta og lifur, var lítill fjöldi frumna með nýrna-, hring- eða fleyglaga lögun sem benti til aðgreiningar mergfruma. Þessar niðurstöður benda til þess að æxlisfrumur séu fengnar úr óþroskuðum kyrningafrumum. Tilfelli alvarlegrar mergmyndunar getur verið augljóst af nærveru allra tegunda af þróun mergfruma, öfugt við yfirburði óþroskaðra frumna í hvítblæði. Að auki er versnandi blóðleysi algengt klínískt merki um kyrningahvítblæði og aukning á rauðkornafrumum og stórkjörnungafrumum er lítil1. Minni þýði kyrninga með blaðkjarna á sýkta svæðinu án augljósrar bólgu bendir til þess að niðurstöður þessa tilviks séu æxlismyndun en ekki hvarfgjörn mergmyndun.

Í kyrningahvítblæði getur beinmerg verið skipt út fyrir óþroskaðar og þroskaðar mergfrumur. Í fyrri skýrslu um aðra músastofna, voru þessar æxlisfrumur að fullu síast inn í lifur, milta, eitla osfrv.2, og þessar frumur í milta og lifur voru aðallega staðsettar í rauða kvoða og í kringum Glisson hylkið1. Þannig var dreifing hvítblæðisfrumna í þessu tilviki eins og í fyrra tilvikinu. Byggt á formgerð frumna er kyrningahvítblæði í músum flokkað í tvær gerðir: unga tegundina, sem er sambærileg við bráða kyrningahvítblæði í mönnum, og fullþroska tegundin við krónískt kyrningahvítblæði úr mönnum1. Í ungviðinu voru æxlisfrumur í beinmerg, milta og lifur einkennist af illa aðgreindum frumum, á meðan má sjá mergfrumur sem tákna mismunandi þroskastig og hlutfall mergfruma var lágt í sumum þroskaðum tilfellum2, 9. Í Í þessu tilviki voru hvítblæðisfrumur einkennist af óþroskuðu formi með stórum, sporöskjulaga til örlítið óreglulega löguðum kjarna. Að auki, með hliðsjón af klínískum niðurstöðum um að almenn heilsuversnun, þ.mt versnandi blóðleysi og gróf hreyfing í öndunarfærum, þróaðist bráð; er því gert ráð fyrir að mál þetta sé af ungmennagerð.

Mynd 1. Vefjafræðilegar myndir af beinmerg lærleggsins. A: Æxlisfrumur fjölga sér á dreifðan hátt og koma þar með í stað beinmergs. B: Kjarnarnir eru stórir, sporöskjulaga til örlítið óreglulegir í lögun. Fáeinar frumur eru með nýrna- (gulur örvaroddur), hring- (grænn örvaroddur) eða lobe- (hvítur örvaroddur) kjarna. Mítósumyndin er auðkennd með hvítu örinni. HANN blettur. Svart strik =50 μm (A), 10 μm (B).

Í fyrri útgáfu um NOG mýs voru æxlisskemmdir almennt sjaldgæfar; hins vegar hefur verið greint frá thymic eitilfrumukrabbameini við 0.82% í aldurshópnum á bilinu 16 til 40 vikur7, 10. Eftir því sem við best vitum hefur ekki áður verið greint frá sjálfsprottnu kyrningahvítblæði í NOG músum. Hjá nokkrum músastofnum, þar á meðal B6C3F1 og BALB/c, kom sjaldan kyrningahvítblæði fram2, 11 og hefur ekki verið greint frá því hjá þessum músum 12 mánaða eða yngri. Í þessu tilviki kom fram kyrningahvítblæði við 51 vikna aldur, sem var tiltölulega ungur aldur. Þessar nýju upplýsingar um sjálfsprottinn æxli geta verið gagnlegar fyrir viðeigandi notkun þessa músastofns í frekari rannsóknum.