Hlutfall kjarnfóðurs í fóðri mjólkurkúa snemma á mjólkurgjöf hefur andstæður áhrif á hringrás hvítkorna.

Ágrip:Virkni hvítfrumna í blóði í mjólkurkúum er bæld eftir burð, með neikvæðu orkujafnvægi sem áhættuþátt. Hvítfrumuafritasnið voru borin saman sérstaklega í 44 fjölfættum (MP) og 18 frumburum (PP) Holstein-Friesian kúm sem fengu fóður með mismunandi kjarnfóðurhlutfalli til að kanna hvort hægt væri að draga úr ónæmisröskun með viðeigandi næringu. Eftir burð var kúnum boðið annað hvort (1) lítið kjarnfóður (LC); (2) miðlungs þykkni (MC), eða (3) háþykkni (HC) fæði með hlutfalli kjarnfóðurs og grasvottar upp á 30%:70%, 50%:50% og 70%:30%, í sömu röð. Upplýsingum um svipgerð kúa sem safnað var voru umbrotsefni í blóðrás, mjólkuruppskeru og heilsu- og frjósemisskrár. RNA raðgreining hvítfrumna í blóðrás eftir 14 daga í mjólk var gerð. HC mataræðið bætti orkujafnvægi í báðum aldurshópum. Það voru fleiri gen sem tjáðust á mismunandi hátt í PP en í MP kúm (460 á móti 173, HC á móti LC samanburður) með fáum skörun. MP-kýrnar á LC-fóðrinu sýndu uppstýringu á komplement- og storkufalli og meðfædda ónæmisvörn gegn sýkla og höfðu tilhneigingu til fleiri tilfella af júgurbólgu og lakari frjósemi. Aftur á móti sýndu PP-kýrnar á HC-fóðrinu meiri ónæmissvörun byggð á bæði genatjáningu og svipgerðargögnum og lengri burðarbili til getnaðar. Hvítfrumur MP og PP kúa brugðust því misjafnlega við fæðunni á milli aldurs, næringarefnaframboðs og ónæmis sem hafði áhrif á heilsu þeirra og síðari frjósemi.

cistanche ávinningur fyrir karla styrkir ónæmiskerfið

Smelltu hér til að skoða Cistanche Enhance Immunity vörur

【Biðja um meira】 Netfang:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Leitarorð:ónæmisbæling eftir fæðingu; meðfædd ónæmi; Efnaskipti; hvítfrumur; brjóstagjöf mataræði; umskrift; fjölgun; kýr

1. Inngangur

Snemma eftir fæðingu einkennast mjólkurkýr af ónæmisbælingu sem hefur áhrif á meðfædda og aðlögunarhæfni ónæmi, þar með talið bæði frumumiðlað og húmorískt ónæmi. Hvítfrumur í hringrás eru safnaðar inn í vefi eins og mjólkurkirtla og legslímu við bólgu. Fyrri rannsóknir hafa hins vegar sýnt fækkun bæði hvítkornafjölda og starfsgetu þeirra á fæðingartímabilinu [1,2]. Tilkynnt áhrif eru meðal annars skert átfrumnafjölgun og oxunarvirkni [3-5], minni svörun T-frumna í blóðrás fyrir mítavaldandi efnum og minni framleiðslu B-frumna á immúnóglóbúlíni [6,7]. Orsakirnar eru margþættar en virðast tengdar skiptingu næringarefna í þágu mjólkurframleiðslu í upphafi brjóstagjafar, sem skerðir ónæmisvirkni [8-10]. Hvítfrumur þurfa nægilegt framboð af glúkósa, ýmsum fitusýrum og kólesteróli eða oxýsterólum til að viðhalda og virka [8,11,12]. Tiltæku næringarefnaframboði er hins vegar forgangsraðað í mjólkurkirtlinum eftir burð, sem krefst um það bil 25% meiri orku og próteins sem umbrotnar er meira en fóðurinntaka gefur [8,13,14]. Að auki einkennist fæðing af bólguferlum sem tengjast breytingum á seytingu ýmissa prostaglandína, stera og cýtókína og mögulegum meiðslum í fæðingarferlinu sjálfu [15-17]. Bólgusvörun við burð og umbrotsefni sem losna við vefjahreyfingu hafa öflug lystarleysisáhrif, draga enn frekar úr inntöku og versna neikvæða orkujafnvægið (NEB) [18]. Þegar fóðurneysla getur ekki mætt aukinni orkuþörf fara kýr inn í tímabil með NEB, þar sem sumir einstaklingar verða í efnaskiptaójafnvægi [19–21]. NEB tengist insúlínviðnámi, minni tjáningu vaxtarhormóns (GH) viðtaka í lifur og minni IGF-1 nýmyndun í lifur [22,23]. Aftenging GH við insúlín hjá kúm eftir fæðingu er aðlögun sem setur glúkósaframboð til vefja eins og brjóstaþekjufrumna í forgang, þar sem upptaka er óháð insúlíni [8]. Við þessar aðstæður er samkeppni um orkuframboð milli mjólkurkirtla og ónæmiskerfis óumflýjanleg þar sem þau treysta báðir á sömu nauðsynlegu hvarfefnin og báðir eru stórneytendur orku. Kvidera o.fl. [24] sýndi fram á að virkjun fullrar ónæmissvörunar í kúm krafðist 2,5 til 3,1 kg af glúkósa á dag. Þetta er svipað og áætluð þörf á 2,7 kg/d af glúkósa sem tekin er upp af mjólkurþekjufrumum fyrir mjólkurframleiðslu upp á 40 kg/d [8].

Vefjahreyfing tengist einnig aukinni styrk óestraðra fitusýra (NEFA), beta-hýdroxýbútýrats (BHB) og minnkað IGF-1 í blóðrás, sem allt stuðlar að truflun á ónæmisstarfsemi [5,9,10,20 ]. Til dæmis sýndi nýleg rannsókn okkar að viðloðun hvítfrumna við frumu var hindruð þegar NEFA styrkur fór yfir 750 µM [25]. Þrátt fyrir að vefjahreyfing sé eðlileg aðlögun spendýra til að styðja við mjólkurgjöf, hafa margar rannsóknir sýnt að alvarlegt NEB hefur mikil áhrif á getu kúnna til að verða þunguð á réttum tíma [26]. Þetta getur stafað af ýmsum þáttum, þar á meðal seinkun á endurheimt viðeigandi legi umhverfi [2]; langvarandi egglos [27], lélegt umhverfi innan eggbús [28] og skert gæði eggfrumna [29]. Mjólkurkvígur kálfa almennt um 90% af þroskaðri líkamsþyngd [30]. Fyrri rannsókn okkar sýndi að frumdýr (PP) kýr höfðu hærri styrk insúlíns, IGF-1 og leptíns í blóðrásinni, lægri styrk umbrotsefna í blóði (BHB, NEFA og þvagefni) og hærri glúkósaþéttni en fjölfættar (MP) ) kýr í að minnsta kosti 7 vikur eftir burð [31,32]. Þetta bendir til þess að minni aftenging á sematotrophic ásnum sé snemma í mjólkurgjöf hjá PP-kýr samanborið við MP-kýr, sem tengist veikari forgangsröðun næringarefna í mjólkurkirtlinum, sem gerir áframhaldandi vöxt kleift. Genatjáningarsniðin í hvítfrumum í blóði eru einnig mismunandi á milli PP og MP kúa við snemma mjólkurgjöf [33].

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Hagræðing næringarstjórnunar á þurru tímabili getur aukið þurrefnisneyslu (DMI), dregið úr tíðni fæðingarsjúkdóma og bætt frjósemi [34]. Það eru almennar leiðbeiningar um hvernig draga megi úr sjúkdómsáhættu sem tengist fóðrun og meðferð [35]. Hins vegar eru litlar upplýsingar tiltækar um fæðublöndur fyrir einstaka kú í efnaskiptaójafnvægi á tímabilinu eftir fæðingu sem getur bætt ónæmisvirkni, dregið úr sjúkdómstíðni og bætt æxlunargetu í kjölfarið. Að móta mataræði með mikla næringarefnaneyslu er hagnýt aðferð [36]. Í þessari rannsókn var kúm í byrjun mjólkurgjafar boðið upp á lágt (LC), miðlungs (MC), eða mikið kjarnfóður (HC) fóður byggt á hlutföllum kjarnfóðurs og grasvottar, og áhrifum á efnaskiptaheilsu og sjúkdóma, og almennt ónæmi ( með því að meta hnattræna tjáningarsnið hvítfrumna genatjáningar) voru ákvörðuð. Gögn frá PP og MP kúm voru greind sérstaklega til að koma í veg fyrir truflandi áhrif sem stafa af jöfnuði. Tilgáta okkar var sú að mataræði með háum styrk myndi bæta ónæmisvirkni og gagnast frjósemi.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

2. Úrslit

2.1. Áhrif mataræðis á þurrefnisneyslu, mjólkurframleiðslu, orkujafnvægi og umbrotsefni í blóði

Mjólkurbreytur, líkamsþyngd (BW), DMI, líkamsástandsskor (BCS), orkujafnvægi (EBAL) og umbrotsefni í blóði fyrir bæði MP og PP kýr í kringum 14 daga í mjólk (DIM) eru teknar saman í töflu 1. DMI fyrir MP kýrnar voru marktækt ólíkar á milli fæðuhópanna þriggja í röðinni HC > MC > LC (p < 0.01–0.0{{11 }}1). Mjólkurafrakstur MP-kýranna sem fengu HC-fóðrið var marktækt hærri en þeirra sem fengu LC-fóðrið (p < 0.05). Munurinn á orkuleiðréttri mjólkurframleiðslu (ECM) milli LC og HC hópanna var marktækur (p < 0.05), með milligildi í MC hópnum. EBAL gildin í öllum þremur MP hópunum voru neikvæð en hjá MC og HC kúnum voru marktækt betri (minna neikvæð) en í LC kúnum (p < 0,01). Styrkur blóðrásar bæði glúkósa (p < 0,01) og IGF-1 (p < 0,001) í HC-kýrunum var marktækt hærri en í LC-kýrunum. MP kýrnar sem buðu upp á HC fóður framleiddu einnig minna þvagefni í blóðrás (p < 0,001), BHB (p < 0,05) og NEFA en þær sem boðið var upp á LC fóður með styrknum LC > MC > HC, þó munur á styrk NEFA milli fóðurhópanna voru ekki tölfræðilega marktækar.

Tafla 1. Heildarþurrefnisneysla, mjólkurstærðir, líkamsþyngd, orkujafnvægi, líkamsástandsstig og umbrotsefni í blóði um 14 dögum eftir burð, greind eftir jöfnuði og fæði 1,2

Hjá PP kúnum höfðu þeir sem fengu MC eða HC fæði hærra DMI en þeir sem fengu LC fæði (p < {0}}.01). Mjólkuruppskeran var ekki marktæk frábrugðin. EBAL var jákvætt hjá kúm sem boðið var upp á MC eða HC fóður en fyrir þær sem buðu LC fæði var það neikvætt. Munur á EBAL milli HC og LC PP kúa var marktækur (p < 0,05). Af mældum umbrotsefnum var aðeins þéttni þvagefnis mismunandi á milli hópanna og var lægri í HC kúnum (LC > MC > HC, p < 0,001 fyrir LC á móti HC eða MC).

2.2. Áhrif mataræðis á bólgubreytur

Áhrif fæðis á bólgubreytur mældar í legi og mjólkurkirtlum eru sýndar í töflu 2. Hjá PP kúnum var hlutfall fjölbreytilegra hvítkorna og legþekjufrumna (PMNs: UECs) sem safnað var úr legi með umfrymisbursta marktækt hærra fyrir kýrnar á HC samanborið við LC fæði (p < 0.05). Hjá MP kúnum var þróunin í sömu átt, með LC < MC < HC, en náði ekki tölfræðilegri marktekt. Í mjólk höfðu MP-kýrnar á LC-fóðrinu marktækt hærra SCC en þær á annaðhvort MC- eða HC-fóðrinu (p < 0.05), en í PP-kýr var ómarktæk þróun í gagnstæða átt . Styrkur N-asetýl- -d-glúkósamínídasa (NAGase) og laktatdehýdrógenasa (LDH), mjólkurensím sem benda til júgurbólgu, fylgdi sömu almennu þróun og SCC gildin en enginn munur var marktækur. Þessar niðurstöður voru studdar af sjúkraskrám. MP kýrnar á HC fóðrinu fundu ekki fyrir neinum tilfellum af júgurbólgu (0/15) en 4/14 (28,6%) kúa á LC fóðri greindust með klíníska júgurbólgu innan 16 daga frá burð. Þróunin var aftur í gagnstæða átt hjá PP-kýrunum með eina af sex (16,7%) á LC-fóðri með klíníska júgurbólgu samanborið við eitt tilfelli af klínískri og tvö af undirklínískri júgurbólgu á HC-fóðri (50%).

Tafla 2. Bólgustærðir um það bil 14 dögum eftir burð eftir burðarhlutfalli og fæði 1,2.

2.3. Frjósemisgögn

Upplýsingar um frjósemisgögn eru gefnar upp í töflu 3. Fyrir MP-kýrnar voru þær sem voru á LC-fóðri aðeins lengur að verða þungaðar og þurftu meiri þjónustu á hverri getnaði en HC-kýrnar (2,4 ± 0,42 á móti 1,6 ± 0.23), þó að fleiri af HC-kýrunum hafi annað hvort ekki verið afgreiddar (ákvörðun stjórnenda) eða alls ekki orðið þunguð (6{{10}}.0% vs. 71,4%). Enginn af þessum mun var þó marktækur. Hjá PP-kýrunum var hið gagnstæða uppi á teningnum, þar sem LC-kýrnar voru með stysta bilið til getnaðar um 29 daga (p < {{20}}.05), þar sem fimm af sex dýrum voru þunguð í fyrsta sinn. . Aftur á móti fékk helmingur HC hópsins annaðhvort ekki þjónustu (n=2) eða tókst ekki að verða þunguð (n=1), þar sem þeir þrír sem urðu þungaðir þurftu 2,0 ± 0,41 þjónustu á hverja getnað. Þetta leiddi til þess að HC hópurinn var með marktækt hærra "in caf by" (ICB) stig (p < 0,05).

Tafla 3. Frjósemisgögn eftir jöfnuði og mataræði 1,2

2.4. Hvítfrumnaafritunarsnið í kúm bjóða upp á mismunandi hlutföll kjarnfóðurs

Viðmiðunarerfðamengi nautgripa ARS-UCD 1.2 sem RefSeq (https://www. ncbi.nlm.nih.gov/assembly, skoðaður 1. maí 2022) inniheldur 35.158 gen, þar af 19.001 hvítfrumnagen sem var hægt að mæla þegar raðgreiningin var lesin. í FASTQ skrárnar voru kortlagðar á það. Eldfjallauppdrættir sem sýna tjáningarsnið bæði í MP og PP kúm sem fá hinar þrjár mismunandi fóður eru sýndar á mynd 1. Í MP kúnum voru 173 mismunandi tjáð gen (DEG) í samanburði á HC og LC, 126 milli MC og LC. LC og 68 fyrir HC á móti MC (viðbótarskrá S1A–C). Venn skýringarmynd sýndi að ekkert gen (algengt DEG) var marktækt í öllum þremur mataræðissamanburðinum (Mynd 2A). Í PP kúnum voru 460 gráður í samanburði á HC á móti LC, 178 á milli MC á móti LC og 128 á milli HC á móti MC (viðbótarskrá S2A–C). Aðeins eitt algengt gen (DCN, fold change (FC)=-7.3) var marktækt í öllum þremur mataræðissamanburðinum (Mynd 2B). Þetta umritar decorin, prótein sem gegnir hlutverki í samsetningu kollagentrefja. Á heildina litið var áberandi að meiri fjöldi DEGs fannst í fæðusamanburði á tjáningu hvítfrumna gena í PP en MP kúnum þrátt fyrir smærri hópastærð, þar sem meirihluti þessara gena var stýrt á HC fæði. Ennfremur var lítil skörun í genum sem greindust á milli mismunandi aldurshópa, eins og sýnt er á Venn skýringarmyndum á mynd 3. Þetta bendir til þess að fóðrið hafi haft mismunandi áhrif á hvítkorna umrit í PP og MP kúm. Í báðum aldurshópum fannst mestur munur á þeim kúm sem boðið var upp á LC á móti HC fóðri, þannig að við lögðum áherslu á þennan samanburð í síðari greiningum.

Mynd 1. Eldfjallauppdrættir sýna tjáningarsnið í bæði MP og PP kúm sem fá þrjú mismunandi fóður. (A) MP kýr HC á móti LC, (B) MP kýr HC á móti MC, (C) MP kýr MC á móti LC, (D) PP HC á móti LC, (E) PP HC á móti MC og (F) ) PP MC gegn LC. HC: mikið kjarnfóður (n=6 í PP kúm og n=14 í MP kúm), MC: miðlungs kjarnfóður (n=5 í PP kúm og n=15 í MP kúm ), og LC: lítið kjarnfóður (n=6 í PP kúm og n=14 í MP kúm). Brotbreytingunum var2-skrá breytt. Grænu punktarnir gefa til kynna niðurstýrðu genin með p (BH) < 0.05 og falt breytingar Minna en eða jafnt og -1,5 og rauðu punktarnir benda til uppstýrðra gena með p (BH) < {{ 16}}.05 og fold breytingar Stærri en eða jöfn 1,5. Appelsínugulu punktarnir gefa til kynna genin með p (BH) < 0,05 en alger faltbreytingar < 1,5.

Mynd 2. Venn skýringarmyndir sem sýna genin sem eru tjáð misjafnlega af hvítfrumum í blóðrásinni á milli fæðuhópanna þriggja í (A) fjölburum (MP) kúm og (B) frumdýrum (PP) kúm. HC: mikið kjarnfóður (n=6 í PP kúm og n=14 í MP kúm), MC: miðlungs kjarnfóður (n=5 í PP kúm og n=15 í MP kúm ) og LC: lítið kjarnfóður (n=6 í PP kúm og n=14 í MP kúm).

Mynd 3. Venn skýringarmyndir sem sýna genin sem eru tjáð misjafnlega með því að dreifa hvítfrumum á milli PP og MP kúnna í samanburði á (A) hátt þykkni (HC) og lágt þykkni (LC); (B) HC með miðlungsþykkni (MC) og (C) MC með LC. HC: n=6 í PP kúm og n=14 í MP kúm, MC: n=5 í PP kúm og n=15 í MP kúm og LC: n {{5 }} í PP-kýr og n=14 í MP-kýr

2.5. Samanburður á tjáningarsniðum hvítfrumna gena milli fjölkynja kúa sem fá mikið eða lágt kjarnfóður

20 efstu upp- og niðurstýrðu DEG-gildin raðað eftir p-gildum (BH leiðrétt) í MP-kýrum sem fengu HC samanborið við þær sem fengu LC-fæði eru gefnar upp í viðbótarskrá S1D, E. Meðal uppstýrðu DEG-gildanna tóku flestir þátt í GO virkni ónæmiskerfisferlisins, efnaskipta og viðbragða við áreiti, þar sem mörg kóðaprótein hafa margþætt hlutverk. Til dæmis hefur ALAS2 (kóðar 50 -aminolevúlinat synthasa 2) hlutverk í efnaskiptaferlinu, svörun við áreiti og þroskaferli. COL1A1 (kollagen tegund I alfa 1 keðja) og DAB2 taka þátt í efnaskiptum, svörun við áreiti, fjölfrumulífveru, hreyfingu og þroska. 20 efstu genin sem lækka stjórna sýna skýrt þema um breytingar á ónæmi með 14 tengdum DEG. Þar af kóða DMTB1, FGA, FGB og TF örverueyðandi peptíð, ALB og TF kóða fyrir neikvæð bráðafasaprótein (APP) og FGA og FGG kóða jákvæð APP. Átta gen gegna hlutverki í efnaskiptum og 10 taka þátt í svörun við áreiti.

cistanche plöntuaukning ónæmiskerfi

Hvítfrumurnar DEG sem fengnar voru úr samanburði á HC við LC hópinn voru næst gerðar GO auðgunargreiningu. 76 uppstýrðu DEGs voru marktækt auðguð með 208 aðgerðum, þar af eru efstu 20 miðað við auðgunarstig sýndar á mynd 4A. Þetta tengdist ýmsum þáttum frumustarfsemi, með vaxtarþáttabindingu af blóðflögum ofan á. Margar aðgerðir tengdust próteina- og amínósýruumbrotum (meðal annars APLP1, COL1A1, COL1A2, COL3A1, HTR1B og P2RY12 í flestum þeirra), lífrænt efni og kollagenvinnslu (sem felur í sér COL1A1, COL1A2, SPP1 og TUFT1) og frumusamskipti. Aftur á móti höfðu efstu aðgerðir 97 niðurstýrðra DEG skýrt þema ýmissa ónæmisvarnarferla (Mynd 4B) sem voru aðallega tengd 20 DEG. Þar af var FGA (jákvætt APP) lækkað 85-falt í samanburði á HC á móti LC. GO vafraverkfæri tók saman líffræðilega virkni bæði upp- og niðurstýrðra DEGs í átta mikilvæga flokka (tafla 4). Fyrir utan lífefnavæðingu voru allar aðrar líffræðilegar aðgerðir, sérstaklega þær sem tengjast ónæmisvörn, aðallega tengdar niðurstýrðu DEGs.

Mynd 4. Top 20 GO aðgerðir sem tengjast DEGs fengnar úr HC vs LC samanburði. (A) MP upregulated DEGs, (B) MP downregulated DEGs, (C) PP upregulated DEGs og (D) PP downregulated DEGs.

Tafla 4. Samantekt á helstu hlutverkum GO auðgunar hvítfrumna DEG í samanburði á fjölfættum kúm sem fengu mikið (n=14) og lítið (n=14) kjarnfóðurfóður snemma á mjólkurgjöf.

Tafla 4. Frh.

Samanlögð upp- og niðurstýrð DEG (n=173) auðgaðist marktækt með 23 KEGG ferlum sem voru aðallega tengdar ýmsum ónæmis- og efnaskiptaferlum (tafla 5). Viðbótar- og storkufall voru efst með átta niðurstýrðum DEG (CFB, FGA, FGB, FGG, KNG1, PROC, SERPINA1 og VTN). Bólguferill NOD-líkra merkja var tengdur við sex DEG (IFNB1, MAPK10, OAS1X, OAS1Y, OAS1Z og OAS2), þar af var allt nema MAPK10 lækkað. Leiðin fyrir meltingu og frásog próteina innihélt sex DEG, þar af þrjár (COL1A1, COL1A2 og COL3A1) voru uppstýrðar og þrjár niðurstýrðar (CELA2A, COL5A3 og ELN). Fimm niðurstýrð DEGs tóku þátt í peroxisome proliferator-activated receptors (PPAR) boðleiðinni (APOA2, APOC3, FABP1, HMGCS2 og PCK1). Ferðir utanfrumufylkis-viðtaka víxlverkunar, fókusviðloðun og sphingólípíðboða taka allir þátt í viðhaldi frumu- og vefjabyggingar.

Tafla 5. Marktækar leiðir sem auðkenndar voru með KEGG-ferilsauðgun í tengslum við mismunandi tjáð hvítfrumnagen í fjölfættum kúm buðu upp á mikið kjarnfóður (n=14) samanborið við þá sem boðið var upp á lágþykkni fóður (n=14).

2.6. Samanburður á tjáningarmynstri hvítfrumna gena milli frumakúa sem fá mikið eða lítið kjarnfóður

20 efstu DEG hvítkorna í blóðrás í PP kúm sem fengu HC samanborið við LC fæði eru skráð í viðbótarskrá S2D, E. Immune, og efnaskiptaferlar voru ríkjandi í líffræðilegum aðgerðum efstu uppstýrðu DEG, sem innihéldu 11 og 12 DEG í sömu röð. Meðal þeirra taka ACSL6, MMP9 og SLC11A1 þátt í fjölgun hvítkorna og ACSL6, ADGRG3, COL1A2, DUSP1, HCK, MMP9 og PADI4 í þroskaferli. SLC40A1 er stórt járnflutningstæki sem gegnir lykilhlutverki við að koma jafnvægi á frumu- og almennt járnmagn. Sum þessara DEG umrita prótein með margar aðgerðir. Til dæmis eru MMP9, DUSP1, SLC11A1 og COL1A2 tengd flestum ofangreindum GO aðgerðum. Líffræðileg virkni DEG-stiganna sem var sett ofan á var fjölbreyttari. Það voru átta DEG sem tóku þátt í ónæmiskerfisferlinu, fimm gegndu hlutverkum í efnaskiptum og tveir tengdust bæði hvítfrumnafjölgun og þroskaferli (EPCAM og FCRL3). Aftur, sum DEG, til dæmis CD96 og FCRL3, kóða prótein með mörgum hlutverkum.

Hjá PP kúnum voru 382 uppstýrðar DEGs fengnar úr HC á móti LC samanburði marktækt tengd 690 GO aðgerðum, þar sem efstu 20 eru sýndar á mynd 4C. Allt þetta fól í sér 116 DEG (viðbótarskrá S2F) með ýmsum ónæmisaðgerðum. Helsta hlutverkið var boðleið frumuyfirborðs viðtaka. Þetta var tengt 43 DEG sem innihélt gen sem kóða marga viðtaka fyrir ónæmisbindla, eins og CXCR1, CXCR2, IL17RD og IL1RAP. Þessi virkni hafði sex marktækar undiraðgerðir, þar á meðal lípópólýsykru (LPS)-miðlaða boðferil (PTAFR, TLR4 og SCARB1) og ónæmissvörun-stýrð frumuyfirborðsviðtaka boðleið. Helsta undiraðgerðin í stjórnun fjölfruma lífveruferlis var stjórnun frumuefnaframleiðslu, með 24 uppstýrðum DEG, eins og MARK13, LTF og TLR4. Það voru færri niðurstýrðar DEGs (aðeins 78) sem tengdust 298 marktækum GO aðgerðum, með lægri auðgunarstigum og fjölbreyttari líffræðilegum ferlum. Mynd 4D sýnir efstu 20 aðgerðirnar. Fjöldi þessara tengdist þáttum ónæmis, svo sem frumuviðloðun, stjórnun á framleiðslu á miðlara ónæmissvörunar, svörun við LPS og svörun við sameindum af bakteríuuppruna. Aðrir tengdust viðhaldi á samvægi, svo sem frumuyfirborði, frumusundrun, flutningi yfir himnu og endópeptíðasa af seríngerð. Samantekt á mikilvægum líffræðilegum aðgerðum sem tengjast bæði upp- og niðurstýrðum DEGs mynduðu sjö flokka (tafla 6), með ónæmiskerfisferlinu ofan á og flestar aðrar aðgerðir tengdar einnig ónæmisvörn. Til dæmis var hreyfing auðgað af DEGs með efnafræðilegum og ónæmiseiginleikum og víxlverkun milli tegunda milli lífvera, sem felur í sér að drepa innrásarsýkla. Bæði frumuferli og líffræðileg stjórnun tengdust miklum fjölda DEG. Frumuferli (n=239 DEG) innihélt margar undiraðgerðir sem tengjast frumuviðloðun, frumudrápi, virkjun ónæmisfrumna og fjölgun frumna. Líffræðileg stjórnun (125 gráður) felur einnig í sér margar ónæmisaðgerðir, svo sem stjórnun á ferli ónæmiskerfisins, hreyfingu og viðbrögð við áreiti. Allar þessar aðgerðir innihéldu aðallega uppstýrðar DEGs á HC mataræðinu.

Tafla 6. Samantekt á helstu hlutverkum GO auðgunar DEGs í samanburði á frumkýrunum sem voru með mikið (n=6) og lágt (n=6) kjarnfóðurfóður snemma á mjólkurgjöf.

Tafla 6. Frh.

Samanlögð upp og niðurstýrð DEG (460) í PP kúnum voru auðguð með 35 marktækum KEGG ferlum (tafla 7). Margir tengdust efnaskiptaferlum þar sem amínósýrur (valín, leusín, ísóleucín, arginín og glútaþíon), prótein, lípíð (arakídonsýra, glýserólípíð og kólesteról), vítamín B6 og sum hormón (aldósterón, kortisól, skjaldkirtill og vaxtarhormón) tengdust ). Þessar efnaskiptaleiðir voru að mestu auðgaðar með DEGs sem var stjórnað á HC mataræðinu. Til dæmis tengdist nýmyndun amínósýra fimm uppstýrðum DEG (ARG2, ASS1, GPT2, SDS og SDSL), leið vaxtarhormónsmyndunar, -seytingar og verkunar var auðgað með sex uppstýrðum (ADCY6, CREB3L2, CREB5, FOS , MAPK13 og SOCS3) og ein niðurstýrð (BCAR1) DEG, og umbrot arakidonsýru innihéldu fimm uppstýrða DEG (CYP2J2, GGT5, GPX3, PLB1 og TBXAS1). Nokkrar leiðir tengdar ónæmis-/bólguferlinu auðguðust einnig verulega, aftur aðallega með uppstýrðum DEG. Þetta innihéldu chemokine, MAPK og TNF boðleiðir og viðbótar- og storkufall. Til dæmis, chemokine boðferillinn innihélt átta uppstýrðar (ADCY6, CCL16, CCR1, CXCL13, CXCR1, CXCR2, GNG7 og HCK) og tvær niðurstýrðar DEGs (BCAR1 og CCR5), TNF merkjaferillinn innihélt sex uppstýrðar DEG (CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, CREB3L2, BCAR1 og CCR5) (BCAR1 og CCR5). , FOS, MAPK13, MMP9 og SOCS3), og MAPK merkjaleiðirnar innihéldu 12 uppstýrðar DEG, þar á meðal IL1A, MAP3K6 og MAPK13.

Tafla 7. Marktækar leiðir sem auðkenndar voru með Kegg-ferilsauðgun sem tengjast mismunandi tjáðum hvítfrumnagenum í frumkýrunum sem buðu upp á mikið kjarnfóður (n=6) samanborið við þá sem boðið var upp á lágþykkni fóðrið (n=6).

3. Umræður

Mjólkurkýr eftir fæðingu hafa homeostatic aðferðir til að stjórna skiptingu næringarefna á milli mjólkurgjafar og annarra mikilvægra lífsaðgerða, svo sem ónæmis og vaxtar [8]. Vefjahreyfing er eðlileg aðlögun spendýra til að styðja við mjólkurgjöf, en sumar kýr verða í efnaskiptaójafnvægi [35,37]. Slík dýr upplifa of mikla hreyfingu fituvef, insúlínviðnám og kerfisbundna bólgu sem stuðla að skert ónæmi sem oft sést á þessum tíma [38]. Þetta tengist bólgumiðlum eins og TNF og IL6 [39,40]. Á 14. degi eftir burð, þegar hvítkornasýnum í blóðrásinni í þessari rannsókn var safnað, höfðu frumurnar því verið útsettar fyrir bólguörvunartímabili. Við höfum sýnt fram á með því að nota næstu kynslóðar raðgreiningu og lífupplýsingagreiningu að fóður með mismunandi hlutföllum kjarnfóðurs hafði mismunandi áhrif á hvítkornaumritið í blóðrásinni í PP og MP kúm snemma á mjólkurgjöf. Þetta tengdist mismunandi heilsu þeirra og frjósemi. Þessar upplýsingar hafa bætt nýjum niðurstöðum við fyrri skýrslu okkar um áhrif mataræðis á mjólkurframleiðslu og ónæmi [32].

3.1. Samanburður á áhrifum háfæða og lágs kjarnfóðurs í fjölfættum kúm

MP-kýrnar á HC-fóðrinu voru með hærra DMI en MC- og LC-kýr og þetta tengdist hærri styrkleika bæði glúkósa og IGF í blóðrásinni {{0}}. Þetta leiddi til þess að HC kýrnar voru í minna alvarlegum NEB og gáfu meiri mjólk. HC fóðrið var mótað til að uppfylla orku- og próteinþörf fyrir bæði mjólkurgjöf og viðhald á jafnvægi líkamans og umbrotsefnismælingar staðfestu að efnaskiptaástand þeirra var örugglega betra en hjá LC kýrunum, með minni þörf fyrir vefjahreyfingu til að mæta orkuþörf. Þetta ætti að hjálpa til við að flýta fyrir úrlausn bólguferla eftir fæðingu, þar sem margir bólgusjúkdómar í byrjun mjólkurgjafar eru tengdir eða af völdum efnaskiptasjúkdóma [38] og við sýndum áður að legbólga leystist hraðar hjá kúm með betra orkujafnvægi. [2]. Í þessari rannsókn var enginn munur á hlutfalli PMNs og þekjufrumna í legholum eftir mataræði MP-kúanna. Þessi stuðull er oft tekinn sem vísbending um frumufræðilega legslímubólgu [41]. Mismunur eftir fæði kom hins vegar fram í mjólkurkirtlinum þar sem LC kýrnar voru með hærra SCC og það tengdist meira hlutfalli þeirra sem fengu klíníska júgurbólgu á fyrstu 16 DIM (28,6% á móti 0% í LC vs. HC hópa).

Flest DEG sem greint var frá í greiningu á hvítkornaumritinu tóku þátt í ónæmis- og/eða efnaskiptaferlum, eins og búist var við í ónæmisfrumuþýði. Mikilvægasta KEGG-ferillinn var komplement- og storkufallið, sem innihélt sex af mest niðurstýrðu genunum í HC-kýrunum. Þar af umritar CFB complement þáttur B, sem er hluti af annarri leið til complement virkjunar. FGA, FGB og FGG kóða þrjár undireiningar af storkuþættinum fíbrínógen, lykilþáttur blóðtappa sem er einnig mikilvægur til að binda bakteríur við blóðflögur [42]. Kínínógen með mikla mólþunga, kóðað af KNG1, er einnig nauðsynlegt fyrir blóðstorknun og kínínógen losar bradykinin, peptíð með ýmsar aðgerðir, þar á meðal bakteríudrepandi og sveppaeyðandi virkni. Vitronectin, kóðað af VTN, tekur einnig þátt í stjórnun á storknunarferlinu og sáragræðslu, en heparínbindandi svið þess veitir örverueyðandi eiginleika. PROC kóðar plasma glýkóprótein þar sem virkjað form inniheldur serín próteasa lén sem virkar í niðurbroti virkjaða form storkuþátta V og VIII, en SERPINA1 kóðar serín próteasa hemla þar sem markmiðin eru plasmín, trombín og plasmínógen virkja. Uppstjórnun á komplement- og storkufallinu hefur áður verið sýnt fram á í brjóstavef sem snemma hýsilsvörun við E. coli eða Staph. aureus sýking [43]. Þar sem þessi leið kom meira fram í kúnum á LC-fóðri, styður þetta vísbendingar um hærri tíðni júgurbólgu hjá þessum dýrum.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Önnur helsta virkni sem GO vafrarinn tók saman var sjúkdómsdrepandi ferli (samspil lífvera milli tegunda), sem tengdist 14 niðurstýrðum DEG í HC kúm (tafla 4). Þetta innihélt fjölda gena sem taka þátt í veirueyðandi virkni (IFI6, IFNB1, ISG15, MX2, OAS1Y, OAS1Z, OAS2 og RSAD2) sem voru tjáð á lægri stigum. Þar af kóðar IFNB1 fyrir interferón beta 1 á meðan hin eru öll interferón-örvuð gen [44,45]. Þeir eru allir einnig hluti af NOD-like receptor (NLR) boðleiðinni. NLR eru frumumynsturþekkingarviðtakar sem eru virkjaðir af ýmsum ósjálfsþáttum, þar á meðal bakteríupeptíðóglýkani, sem hugsanlega koma af stað NF-kappa B-/AP-1-háðri tjáningu bólgueyðandi frumuefna, tjáningu interferóna af tegund I, sjálfsát og bólga [46]. Nýleg rannsókn okkar sýndi fram á að þessi leið var uppstillt í hvítfrumum úr E. coli sýktum kúm [47]. Annað gen sem greindist var MPO, sem kóðar myeloperoxidasa, ensím sem er geymt í azurophilic kornum PMNs og átfrumna. Það losnar út í utanfrumuvökva við bólguferli og hefur verið notað sem merki um bólgu og oxunarálag [48]. IL1R2 kóðar meðlim af interleukin 1 viðtakafjölskyldunni og var einn sá marktækasta niðurstýrði DEG sem greindist í MP kúm. Þetta getur bundið IL1A, IL1B og interleukin 1 viðtaka, gerð I (IL1R1/IL1RA) en virkar sem tálviðtaki til að hindra bindilvirkni.

Genið með marktækustu mismunatjáningu milli MP kúa á mismunandi fóðri var FCER1A, með minni tjáningu í HC kúm. Þetta kóðar undireiningu IgE viðtakans, sem er upphafsmaður ofnæmisviðbragða sem gætu hafa þróast til að stuðla að vörn hýsils gegn sníkjudýrum með losun miðla eins og histamíns [49]. Athyglisvert er að FCER1A var eitt af aðeins 18 genum þar sem tjáningarstig þeirra var auðkennt sem mismunun á frjósemi nautakjöts [50]. Nákvæmt hlutverk þess í nautgripum er enn óákveðið en í bóluefnisprófi á kálfum sem voru sýktir í tilraunaskyni með efnahagslega mikilvæga sníkjuþráðormunni Ostertagia ostertagi, var tjáningargildi þess í blóði jákvæða fylgni við mastfrumufjölda og neikvæða við fjölda orma [51]. Þrjú önnur uppstýrð gen í HC kúnum með einhverja ónæmisvirkni voru ALAS2, GZMB og LIF. ALAS2 umritar 50 -amínólívúlínat synthasa 2, rauðkornasértækt hvatbera staðsett ensím sem hvatar fyrsta og hraðatakmarkandi skrefið í heme biosynthetic ferlið. Heme er ómissandi þáttur í ýmsum lykilferlum, þar á meðal súrefnisflutningi, en stökkbreytingar í þessu geni hafa verið tengdar ýmsum sjúkdómum í mönnum, þar á meðal blóðleysi [52]. GZMB kóðar forpróprótein sem er seytt af náttúrulegum drápsfrumum og frumudrepandi T eitilfrumum og er unnið til að mynda virkan próteasa sem framkallar frumudauða markfrumna og vinnur einnig frumufrumur og brýtur niður utanfrumu fylkisprótein [53]. Cýtókínhvítblæðishemjandi þátturinn, kóðaður af LIF, var upphaflega auðkenndur með þátttöku í átfrumum aðgreiningu en einnig hefur verið sýnt fram á að hann gegnir mikilvægu hlutverki í þróun fósturvísa og staðfestingu á meðgöngu í ýmsum tegundum, þar á meðal nautgripum [54].

DEG-gildin sem fengin voru úr samanburði á HC á móti LC í MP-kýrum voru einnig auðguð með nokkrum mikilvægum ferlum sem tengjast umbrotum glúkósa, próteina og fitusýru. Þar á meðal voru fjórar niðurstýrðar DEG sem taka þátt í PPAR merkjaleiðum (APOA2, APOC3, FABP1 og PCK1). Í þessari rannsókn greindust þrjú helstu PPAR ísóform (A, D, G) í hvítkornaþýðinu. Þrátt fyrir að tjáning PPAR sjálfra hafi ekki verið undir áhrifum af mataræði getur þessi leið haft áhrif á tjáningu gena sem taka þátt í efnaskiptum glúkósa og fituefna, aðgreining fitufrumna og bólgusvörun [55,56] og stuðlar að efnaskiptaaðlögun að takmörkuðu næringarefnaframboði með framkalla gen sem taka þátt í -oxun [57]. Retínól efnaskiptaferillinn var einnig niðurstýrður í HC kúnum, með minni tjáningu á RBP4 og TTR (kóðar retínólbindandi prótein og transtýretín, í sömu röð), sem bæði virka sem retínól flutningsefni í blóði. Samspil retínóls við PPAR merkjaferilinn hefur áhrif á umritun margra annarra gena aftan við [58]. APOA2 og APOC3 ásamt APOH eru einnig hluti af efnaskiptaferli kólesteróls. Kólesteról er stór hluti af plasmahimnunni og hefur áhrif á bæði skipulag hennar og virkni [59,60]. Nýlegar rannsóknir hafa undirstrikað hlutverk kólesteróls sem mikilvægur mótunaraðili á meðfædda og aðlagandi ónæmisvirkni [61].

Ferill glýkólýsu/glúkónógens var tengdur þremur niðurstýrðum DEG í kúm sem fengu HC (ADH1C, ALDOB og PCK1). Þar af kóðar PCK1 fosfóenólpýrúvat karboxýkínasa 1 sem virkar sem aðalviðmiðunarpunktur fyrir stjórnun glúkónógenmyndunar. Þetta ensím, ásamt GTP, hvatar myndun fosfónólpýrúvats úr oxalóasetati, með losun koltvísýrings og landsframleiðslu. Virkjun ónæmis-/bólguferla stuðlar að umritun glúkógengena í gegnum toll-like receptor 4 (TLR4) [62]. Þetta getur valdið því að ónæmisfrumur breyti umbrotum glúkósa frá oxandi fosfórun yfir í glýkólýsu til að framleiða bæði orku og næringarefni sem þarf til útbreiðslu og framleiðslu ónæmissameinda [12,63]. Þetta leiðir til aukinnar eftirspurnar eftir glúkósa sem keppir við kröfuna um laktatframleiðslu [64].

Í stuttu máli, munur á genatjáningu milli MP kúa á HC og LC fóðri gefur vísbendingar um meiri uppstýrða ónæmisvirkni og bólgu í LC kúm. Þessu fylgdi hærri tíðni júgurbólgu. Aftur á móti voru gen sem kóða sum prótein sem líkleg eru til að gagnast heilsu og frjósemi eins og ALAS2 og LIF uppstýrt í HC kúnum. Þetta styður efnaskiptavísitölurnar sem mældar voru og sýna að það var bætt EBAL staða í MP kúnum á HC fóðrinu, sem líklega hjálpaði til við að vernda þær gegn þróun smitsjúkdóma eða efnaskiptasjúkdóma.

3.2. Samanburður á áhrifum háfæða og lágs kjarnfóðurs í frumkýr

Líkt og MP-kýrnar voru PP-kýrnar á HC-fóðrinu einnig með hærra DMI, um 4 kg/d, en mjólkuruppskeran jókst ekki marktækt. Enginn marktækur munur var á styrk glúkósa, NEFA, BHB eða IGF-1 í blóðrásinni, þar sem aðeins þvagefni var hærra í LC mataræðinu. Aftur á móti var marktækari munur á tjáningu hvítfrumnagena milli fæðuhópa en hjá MP-kýrunum, með 460 á móti 173 gráðum sem greindust í samanburði á HC á móti LC, þar af 83% með uppstýringu í PP-kúm á HC-fóðri. Aðeins lítill hluti DEGs skarast á milli aldurshópanna tveggja (Mynd 3), sem bendir til þess að breytingar á virkni hvítfrumna fyrir snemma mjólkurgjöf hafi verið næmari hjá PP kúm en MP kúm. Við höfðum búist við því að HC fóðrið myndi gagnast PP-kýrunum með því að auka DMI þeirra og uppfylla að fullu reiknaða óbrjótanlegu og umbrotshæfu próteinþörf í fæðunni. EBAL var vissulega bætt á HC mataræði en genatjáningargreiningin sýndi mun meiri uppstjórnun gena sem taka þátt í ónæmisvörn. HC-fóðruðu kýrnar voru einnig með hærra hlutfall PMNs: UEC í legi ásamt tölulega hærra SCC og fleiri tilfellum af júgurbólgu. Þetta bendir til þess að þeim hafi í raun verið meira, frekar en minna, viðkvæmt fyrir sjúkdómum. Við komumst áður að því að daufkyrningum sem safnað var úr PP-kýrunum í þessari rannsókn á fyrstu þremur vikum mjólkurgjafar höfðu marktækt hærri átfrumuvísitölu og oxunarstuðul samanborið við MP-kýrnar, en 2-áhrif fæðis og jöfnunar á ekki var greint frá þessum mælingum [32].

Ónæmiskerfisferlarnir sem greindir voru í samanburði á HC á móti LC innihéldu uppstýringu á frumuyfirborðs viðtaka og mynsturþekkingarboðferlum, krabbameinslyfjum, frumumyndun og flutning hvítfrumna í kúm sem fengu HC. Skilgreind DEG voru tengd ýmsum ónæmisvörnum, þar á meðal ýmsum sýklalyfjapeptíðum (AMP) (CATHL6, CXCL13, DEFB1, LTF, PGLYRP1, PGLYRP4, SA100A8, SA100A9, S100A1 og SLC11A1). Þetta getur ekki aðeins drepið innrásar lífverur beint heldur einnig aðstoðað með því að móta önnur ónæmis- og sýklalyfjaferli [65-67]. Uppstýring örverueyðandi peptíða í hvítfrumna umritunarsniði hefur áður verið sýnt fram á hjá kúm með klíníska júgurbólgu [47,68] og metritis/legslímsbólgu [69,70]. Hvítfrumuviðloðunin tengdist 16 uppstýrðum og fimm niðurstýrðum DEG í dýrum sem fengu HC. Viðloðun hvítfrumna við háræðaveggi er mikilvægt fyrsta skref til að gera þeim kleift að flytja úr blóði og umferð í átt til vefjaskemmda, sýkinga og bólgu [71]. Bæði frumu-frumu- og frumu-fylkisvíxlverkanir hafa áhrif á svipgerð hvítkorna og truflun á viðloðunferlum getur leitt til viðvarandi hvítfrumnavirkjunar með óuppgerðri bólgu [72]. Af uppstýrðu DEG sem greint hefur verið, eru ADAM8, ANGPTL3, CD24, ICAM3 og THY1 allir þátttakendur í utanæðum [73,74] á meðan FN1, NRP1, TNFAIP6 og VCAN hafa hugsanlega hlutverk í verslun með hvítfrumur og virkni í bólguvef [72, 75]. Genin sem kóða fyrir chemokine viðtakana CXCR1 og CXCR2 voru einnig uppstillt í kúnum sem fengu HC; þetta er bæði mikilvægt til að örva efnafræðilega virkni PMN í átt að sýkingarstöðum sem og að virkja lífefnafræðilega ferla sem drepa innrásarbakteríur [76].

Af niðurstýrðu genum sem tengjast viðloðun í HC-fóðruðum kúm, kóðar BCAR1 fyrir fjölvirkt prótein sem kallast cas með þátttöku í frumuhreyfingu, frumudauða og frumuhringsstýringu [77]. Fjölbreytni í BCAR1 hefur áður verið tengd við SCC og júgurbólguþol [78]. ADGRG1 (einnig þekkt sem GPR56) kóðar G prótein-tengdan viðtaka sem bindur kollagen 3 og transglutaminasa 2, báðir þættir vefja stroma. Sýnt hefur verið fram á að ADGRG1 gegnir hlutverki í náttúrulegum drápsfrumum manna (NK), þar sem það hamlar frumueitrun þeirra [79]. Eigin tjáning þess er stjórnað niður í kjölfar virkjunar af völdum cýtókíns, sem væri í samræmi við niðurstöðurnar sem sýndar eru hér. CD96 prótein virkar einnig sem hamlandi eftirlitsviðtaka á NK frumum [80]. Fyrri rannsóknir á breytingum á hvítkorna umritinu á umbreytingartímabilinu hafa einnig fundið breytingar á tjáningu gena sem tengjast flutningi yfir æðaþels, þó með mismunandi niðurstöðum, þar sem annaðhvort er greint frá virkjun eftir burð [81] eða hömlun [82], í sömu röð. Greining okkar benti einnig á fjölda muna á merkjum um efnaskipti amínósýra í PP kúm á HC fóðrinu samanborið við þá sem eru á LC fóðri, sem tengist ensímum sem eru kóðuð af fimm uppstýrðum DEG (ARG2, ASS1, GPT2, SDS og SDSL) . Þar af kóðar ASS1 arginín súksínatsyntasa 1, sem hvatar næstsíðasta skrefið í lífmyndunarferli arginíns, en ARG2 umritar arginasa, sem hvatar vatnsrof arginíns í ornitín og þvagefni. L-arginín er einnig hægt að breyta í nituroxíð, boðsameind sem gegnir lykilhlutverki í meingerð bólgu [83]. Glutamic-pyruvic transaminasi 2 (GPT2) er hvatberaensím sem hvetur afturkræfu transaminningu milli alaníns og 2-oxoglútarats til að mynda pýruvat og glútamat. Þetta gen er uppstýrt við aðstæður efnaskiptaálags og gegnir hlutverki við að knýja fram glúkógenmyndun frá amínósýruumbrotum [84]. Serín dehýdrasi (SDS) kóðar fyrir ensím sem breytir L-seríni í pýruvat og ammoníak, en því er spáð að serín dehýdrasi (SDSL) taki þátt í lífmyndun ísóleucíns úr þreóníni.

Umbrotsferill kólesteróls var tengdur fjórum uppstýrðum DEG-gildum á HC mataræði (ANGPTL3, LRP1, SCARB1 og SORT1). Þetta gæti leitt til uppsöfnunar kólesteróls í hvítfrumum kúnna sem fengu HC og stuðlað að bólgu, þar á meðal aukningu á TLR merkjum, bólgueyðandi virkjun og meiri framleiðslu á einfruma og daufkyrningum í beinmerg og milta [85]. Umbrotsferill arakidonsýru með fimm uppstýrðum DEG-gildum (eins og áður hefur verið skráð) leiðir til framleiðslu á hlaupum af for- og bólgueyðandi efnum, eins og prostaglandínum og hvítótríenum [86]. Umbrotsferill glýserólípíða var tengdur fjórum uppstýrðum DEG (DGAT2, DGKG, GK og GPAT3) sem kóða fyrir fitumyndandi gena sem taka þátt í myndun tríacýlglýseróls. Uppsöfnun þess getur valdið virkjun hvítkorna og bólgu [87,88]. Allar þessar niðurstöður styðja þá ályktun að HC mataræðið hafi stýrt efnaskiptaferlum hvítkorna í PP kúm á þann hátt sem jók ónæmis-/bólgusvörun þeirra. Fyrri vinna í kúm hefur einkum beinst að þurrkatímabilinu og hefur sýnt að offóðrun og hátt BCS á þessum tíma stuðlar að síðari blóðfituhreyfingu og aukinni bólgusvörun á fæðingartímabilinu [34]. Í þessari rannsókn styðja legi PMN: UEC hlutfall og tilhneiging í átt að hærra SCC tillögunni um að það hafi verið aukin hvítfrumnaflutningur til legs og mjólkurkirtla í PP kúm sem fengu HC fæði. Þó að þetta sé mikilvægur þáttur í ónæmisvörn, getur ofvirkjun stuðlað að ofurbólgu. Frekari rannsókn með stærri úrtaksstærð er nauðsynleg til að staðfesta þessar niðurstöður.

3.3. Líkindi í viðbrögðum við mataræði hjá fjölburum og frumberum kúm

In terms of metabolic changes, both the MP and PP cows had higher circulating concentrations of urea when on the LC diet. Blood urea in both late pregnancy and early lactation may rise following mobilization of amino acids stored in skeletal muscle [89] or when dietary protein supply exceeds energy availability or protein needed [90], so these situations could have applied here. Elevated levels of urea have been associated with reduced fertility, but only at >4,5 mmól/L, hærri en styrkurinn sem náðist í dýrum sem fengu LC í þessari rannsókn [91]. Varðandi umritunargögn hvítfrumna gena, þá er athyglisvert að DEG-gildin sem fengin eru úr samanburði á HC á móti LC í báðum aldurshópum voru auðguð með ferli próteinameltunar og frásogs, þar sem genin sem kóða ýmis ísóform kollagens gegna mikilvægu hlutverki . Meðal þeirra voru þrjú uppstýrð kollagen gen (COL1A1, COL1A2 og COL3A1) í bæði MP og PP kúm og eitt niðurstýrt (COL5A3) kollagen gen í MP kúnum. Tjáningargildi þeirra í sýnunum voru lítil en munurinn var marktækur. Hluti af þessu RNA gæti komið frá trefjafrumum, frumuþýði sem samanstendur af aðeins 0.1–0,5% af órauðkorna frumum í útlægum blóði [92,93]. Kollagen er langreyndur ónæmisstyrkur sem tekur þátt í mörgum ónæmis-/bólguferlum [93,94]. Stýrð framleiðsla þess í blóðrásinni með HC mataræði getur því haft áhrif á starfsemi hvítkorna.

3.4. Áhrif á frjósemi

Margar fyrri rannsóknir hafa greint frá því að samtengd efnaskipta- og ónæmisstaða og sjúkdómstíðni kúa í upphafi mjólkurgjafar hafi mikil áhrif á síðari frjósemi þeirra (td [38,95]). Okkar eigin verk sýndu að MP kýr með lága IGF-1 styrk við 14 DIM voru ólíklegri til að verða þungaðar yfirleitt [37]. Nýlega greindum við frá því að 63% kúa með lágt IGF-1 á þessum tíma upplifðu fleiri en eitt heilsufarsvandamál í fyrstu 35 DIM þeirra samanborið við aðeins 26% af háum IGF-1 kúm. Þetta innihélt fleiri dýr með legsýkingar og klíníska júgurbólgu [10]. Foley o.fl. [69] greindi á milli heilbrigðra kúa, sem gátu endurheimt jafnvægi innan 3 vikna eftir burð, og annarra sem upplifðu alvarlegri og langvarandi bólgusvörun sem síðan þróaðist með klínískri legslímubólgu. Tengsl við útlægt blóð voru sýnd af Galvão o.fl. [96] sem sýndu að daufkyrninga úr kúm í verra EBAL hafði lægra glýkógeninnihald við sjö DIM og þessi dýr upplifðu meiri legsjúkdóma, sem hugsanlega tengist minnkandi framboði á oxandi eldsneyti fyrir ónæmissvörun. Klínísk júgurbólga snemma á brjóstagjöf er einnig tengd aukinni tíðni fósturvísamissis fyrir ígræðslu, með einhverjum vísbendingum um að lágt BCS auki hættuna enn frekar [97]. Stungið hefur verið upp á fjölda aðferða sem tengjast frumu- og prostaglandínframleiðslu og öðrum bólgumiðlum sem gætu haft áhrif á eggjastokkinn og/eða valdið óhagstæðu legi umhverfi [98,99]. Frjósemisgögnin sem fengust frá kúnum í rannsókninni okkar studdu niðurstöður sem tengjast ónæmisstöðu þeirra og heilsu snemma á mjólkurgjöf. MP kýrnar á LC fóðrinu þurftu tölulega meira S/C í samræmi við lakari EBAL þeirra ásamt vísbendingum frá greiningu á hvítkornaumriti um virkari ónæmisvörn í gangi, sem studd er af hærri tíðni þeirra á júgurbólgu. Aftur á móti tóku PP-kýrnar á HC-fóðrinu verulega lengri tíma að verða þungaðar og færri urðu þungaðar í samanburði við LC-fóðraðar kýrnar. Þeir höfðu fleiri vísbendingar um bólgu snemma á meðgöngu, jafnvel þó að útreiknuð EBAL þeirra væri betri. Sem stendur eru undirliggjandi aðferðir sem valda slæmu heilsuástandi þeirra og frjósemi óvissar þó við höfum einnig fundið vísbendingar byggðar á alþjóðlegri genatjáningu um aukna lifrarbólgu og bandvefsbólgu (Cheng, Little, Ferris, Takeda, Ingvartsen, Crowe og Wathes, óbirtar athuganir) .

3.5. Takmarkanir rannsóknarinnar

Það voru færri PP kýr í hverjum hópi tiltækar og það dró úr tölfræðilegum krafti greininganna sem tengjast svipgerðunum. Frekari rannsókn með stærri úrtaksstærð er því nauðsynleg til að staðfesta áhrif fæðu á æxlun og sjúkdóma. Í þessari rannsókn unnum við allt RNA úr heilu útlægu blóði með því að nota Tempus rör og einangrunarkerfi þess. Þetta auðveldar söfnun fyrir umfangsmikla búrannsókn en aðskilur ekki frumugerðirnar, sem munu innihalda T- og B-eitilfrumur, náttúrulegar drápsfrumur, blóðflögur, einfrumur, kyrninga (daufkyrninga, eósínfíkla og basófíla) og trefjafrumur. Genatjáningargögnin sem kynnt eru hafa því verið undir áhrifum af hugsanlegum meðferðaráhrifum á hlutfallsleg hlutföll tiltekinna frumutegunda auk einstakra umritunarbreytinga þeirra. Þessar niðurstöður eru einnig byggðar á umritunarstigum gena og innihalda ekki upplýsingar um vinnslu þeirra eftir þýðingu, sem mun einnig hafa áhrif á hversu mikið starfhæft prótein er framleitt.

4. Efni og aðferðir

4.1. Dýr og mataræði

Allar aðgerðir voru framkvæmdar samkvæmt lögum um dýr (vísindaleg verklag) 1986 og falla undir verkefnaleyfi innanríkisráðuneytisins PPL2754 og vottorð um tilnefningu fyrir starfsstöðina. Verkið var einnig samþykkt af siða- og velferðarnefnd Agri-Food and Biosciences Institute (AFBI, Belfast, Norður-Írland, Bretlandi). Sextíu og tvær Holstein-Friesian mjólkurkýr voru fengnar úr AFBI hjörðinni. Þar af voru 18 PP (mjólkurgjöf 1) og 44 MP með mjólkurtölur 2–7 (3,5 ± 1,28) og voru allar kýr heilbrigðar samkvæmt skoðun dýralæknis. Fæðingarþyngd var 680 ± 62 (Meðal ± STD) kg fyrir MP-kýr og 550 ± 39 kg fyrir PP-kýr. Eftir burð var PP og MP kýrunum skipt sérstaklega í þrjá fæðuhópa, þar sem skiptingin í hverjum aldurshópi var jöfnuð með tilliti til spáðrar sendingargetu fyrir fitu plús prótein (kg), BW fyrir burð og BCS. MP-kýrnar voru einnig jöfnuð með tilliti til jöfnunar og fyrri mjólkurframleiðslu 305-daga. Kýrunum var boðið annaðhvort (1) lítið kjarnfóður (LC, 30% kjarnfóður auk 70% grasvothey, n=6 fyrir PP og n=14 fyrir MP); (2) meðalþykkni (MC, 50% kjarnfóður auk 50% grasvotfóður, n=6 fyrir PP og n=15 fyrir MP) eða (3) mikið kjarnfóður (HC, 70% kjarnfóður auk 30% grasvottun, n=6 fyrir PP og n=15 fyrir MP) fæði (hlutfall miðað við þurrefni). Kjarninn fyrir hverja meðferð var samsettur til að ná sameiginlegum heildarstyrk hrápróteins (CP) fyrir hverja LC, MC og HC (152, 152 og 154 g/kg DM í sömu röð), en reiknuð heildarorka sem umbrotnar í fæði ( ME) innihald var 12,0, 12,4 og 12,8 MJ/kg DM. Áætlað var að mataræðið myndi veita 1556, 1997 og 2420 g/d virkt niðurbrjótanlegt prótein í vömb; 559, 733 og 888 g/d óbrjótanlegt prótein í fæðu og 1346, 1817 og 2275 g/d umbrotsprótein fyrir LC, MC og HC, í sömu röð. Aðgangi að meðferðarskammti var stjórnað með Calan Broadbent fóðrunarkerfi (American Calan Inc., Northwood, NH, Bandaríkjunum) tengt rafrænu auðkenningarkerfi, sem gerði kleift að skrá töku einstakra kúa daglega. Mataræði fyrir hverja meðferð var boðið upp á 107% af inntöku daganna á undan til að tryggja neyslu að vild. Öllum kúm var einnig boðið 0,5 kg kjarnfóður til viðbótar við hverja mjaltir í gegnum fóðurkerfi í skálanum til að viðhalda skilvirku kúaflæði. Þessi rannsókn var hluti af víðtækara verkefni og áður var lýst öllum upplýsingum um fæði sem boðið er upp á, fóðurstjórnun og fóðursamsetningu [32].

4.2. Söfnun gagna af svipgerð kúa

Líkamsþyngd var skráð tvisvar í viku með vigtarvogum. BCS var metið á um 14 DIM [100]. Allar kýrnar voru mjólkaðar tvisvar á dag og dagleg afrakstur þeirra skráð. Mjólkursýni voru greind tvisvar í viku með mið-innrauða greiningu fyrir styrk próteins, fitu og laktósa, og líkamsfrumur í mjólk voru taldar. Viðbótarsýnum úr morgunmjólk (2 × 8 ml) var safnað tvisvar í viku og geymt við -18 ◦C til að greina LDH (EC. 1.1.1.27) og NAGase (EC 3.2.1.30) með því að nota flúormælingar [101]. Orkuleiðrétt mjólkurávöxtun (ECM; kg/dag) var reiknuð eftir aðferðum sem notaðar voru í okkar hópi [32]. EBAL hverrar kú var metið með aðferðinni sem lýst var áður [102].

Klínísk júgurbólga var greind með stöðluðum aðferðum byggðar á daglegum athugunum á óeðlilegum breytingum á útliti mjólkur (td flögur, blóðtappa), gæðum, mjólkurframleiðslu og bólguviðbrögðum í brjóstum (roði, þroti, hiti eða sársauki). Mjólkur SCC mælingar ásamt klínískum greiningum voru notaðar til að flokka kýrnar í þrjá hópa. Heilbrigðar kýr voru skilgreindar með SCC < 100,000 frumur/ml mjólk og engin klínísk einkenni. Undirklínískt júgurkýr voru skilgreindar sem með SCC á milli 100,000 og 400,000 frumur/mL mjólk og engin augljós klínísk einkenni. Kýr sem greindust með klíníska júgurbólgu voru með SCC > 400,000 frumur/ml mjólkur og sýndu nokkur af ofangreindum klínískum einkennum. Kýr voru sæðdar við estrus sem mældist með því að nota eðlilega hjörðahætti og frjósemisgögn meðan á síðari mjólkurgjöf stóð eða þar til dýrið var fellt voru sóttar úr hjörðaskrám. Gögnin sem greint var frá innihéldu dagar til fyrstu þjónustu (DFS), dagar til getnaðar (opnir dagar), þjónustu á getnað og hlutfall kúa sem urðu þungaðar. Að auki voru getnaðargögnin gefin út með því að nota 4-punkt í kálfi eftir (ICB) skori sem (1)<100 days, (2) 100–200 days, (3) >200 dagar, eða (4) tókst ekki að verða þunguð eða felld.

4.3. Frumugreining í legi

Frumburstasýni úr legi (Minitube, Minitüb GmbH, Tiefenbach, Þýskalandi) var tekið úr hverri kú um 14 DIM til að meta frumufræði legslímu, eins og áður hefur verið lýst [103]. Tvívarður frumubursti var leiddur handvirkt í gegnum leghálsinn inn í legið, innri hlífin var þrýst út úr ytri hlífinni og burstanum var snúið varlega upp að legslímuveggnum. Burstinn var síðan dreginn inn í innri hlífina og fjarlægður. Skyggnur fyrir frumurannsókn voru útbúnar með því að rúlla frumuburstanum á hreina glersmásjárglasmynd og festa sýnið með Fisherbrand™ CytoPrep™ Cytology Fixative (Fishers Scientific, Blanchardstown, Írlandi). Fastar glærur voru sendar til UCD School of Veterinary Medicine, University College Dublin, Írlandi til vinnslu og litaðar með breyttum Giemsa lit. Frumfræðilega matið var framkvæmt með því að telja PMNs UECs við 400× stækkun (Leitz Labourlux-S, Wetzlar, Þýskalandi) og ákvarða hlutfall þeirra, með meðaltalsfjölda upp á 10 aflsvið í hverri rennibraut.

4.4. Greining á umbrotsefnum í hringrás og IGF-1

14 ± 2 (meðaltal ± STD) dögum eftir burð, var 10 ml af blóðsýnum safnað úr hálsbláæð allra kúa í Na-heparínglös fyrir plasma og slétt glös fyrir sermi. Eftir aðskilnað plasma eða sermis með skilvindu voru þau geymd við -20 ◦C fram að greiningu. Styrkur glúkósa, þvagefnis, BHB, NEFA og kólesteróls í plasma var mældur með aðferðunum sem lýst var áður [20,25]. Í stuttu máli var styrkur NEFA í sermi ákvarðaður með ACS-ACOD aðferðinni með því að nota NEFA C Kits (Wako, Neuss, Þýskalandi). Plasma glúkósa var magngreindur með ensímaðferð (ADVIA 1800 Clinical Chemistry System, Siemens Healthcare Diagnostics, Ballerup, Danmörku). BHB í sermi var ákvarðað með því að mæla gleypni við 340 nm vegna framleiðslu á NADH við basískt pH í nærveru BHB dehýdrógenasa. Þvagefni í sermi var greint með litrófsmælingu. Innan- og milligreiningarstuðlar (CV) voru í öllum tilfellum undir þremur og fjórum prósentum, í sömu röð, fyrir bæði lág og há viðmiðunarsýni. Styrkur IGF í sermi-1 var magnmældur með geislaónæmisgreiningu eftir sýruetanólútdrátt [104]. Innan prófunar CV var 12,4, 7,5 og 9,9% fyrir lág, miðlungs og há viðmiðunarsýni, í sömu röð.

4.5. Blóð RNA útdráttur

Blóðsýnum til útdráttar RNA var safnað með hálsbláæðastungum úr öllum kúm við 14 ± 2 DIM í Tempus blóð RNA glös (Thermo-Fisher Scientific, Loughborough, Bretlandi). Glösin voru hrist kröftuglega í 15–20 sekúndur strax við söfnun, síðan fryst og geymd við -80 ◦C fyrir RNA-útdrátt. RNA í heilblóði var dregið út með Tempus Spin RNA einangrunarsettum (Thermo-Fisher) eftir leiðbeiningum framleiðanda eins og áður var lýst [20]. Agilent BioAnalyzer 2000 (Agilent Technologies UK Ltd., Cheadle, Bretlandi) með Agilent RNA 6000 Nano Kit (Agilent Technologies UK Ltd., Cheadle, Bretlandi) var notaður til að meta RNA magn og heilleika. Að auki var magn og hreinleiki staðfest með NanoDrop 1000 (Thermo Fischer). Gæðagögn eru tekin saman í viðbótarskrá S3. Þetta sýndi að öll RNA sýni voru með þokkalega heilleika (RIN tala > 8,7, 9,3 ± 0,3) og hreinleika (260/280 á milli 2,01 og 2,15, meðaltal ± STD 2,10 ± 0,03), þannig að engin dýr voru fjarlægð úr greiningunni. RNA var geymt við -80 ◦C fyrir síðari RNA raðgreiningu.

4.6. RNA-raðgreining, kortlagning og magngreining

Útdregið hvítkorna RNA var raðgreint á Illumina NextSeq 500 pallinum eins og áður hefur verið lýst [68]. Í stuttu máli, með því að nota epMotion vökva meðhöndlunarvinnustöðina (Eppendorf, Hamborg, Þýskalandi) var 750 ng heildar RNA umritað í öfugt við cDNA raðasöfn með Illumina TruSeq Stranded Total RNA Library Prep Ribo-Zero Gold Kit (Illumina, San Diego, CA, Bandaríkjunum ). Sameinaða cDNA söfnin voru raðgreind á Illumina NextSeq 500 raðgreiningartæki við 75 núkleótíða lengd eins-enda lestur til að ná að meðaltali 33,5 milljón lestum á sýni. Óunnar FASTQ skrárnar voru afhentar í European Nucleotide Archive (E-MTAB-9347 og E-MTAB-9431). Allar raðgreiningar voru gerðar með því að nota CLC Genomic Workbench v21 (Qiagen, Manchester, Bretlandi). Hvert sýnishorn innihélt lesturnar frá fjórum brautum og þær voru sameinaðar í eina fastq skrá. Gæði bæði óunnar og klipptrar fastq skráa voru metin eftir Illumina Pipeline 1.8 og allar misheppnaðar lestur voru fjarlægðar. Aflestur var síðan kortlagður á viðmiðunarerfðamengi Bos taurus samsetningu (ARS-UCD1.2 veitt af RefSeq á https://www. ncbi.nlm.nih.gov/assembly, aðgangur að 1. janúar 2021) og magngreind sem lestur fyrir hvert gen, lestur á hverja milljón kílóbasa (RPKM), og afrit á hverja milljón kílóbasa (TPM). Þessar voru geymdar sem genatjáningarskrár (GE) í CLC Genomics Workbench til að nota til eftirfarandi greiningar á mismunadrifatjáningu gena.

4.7. Greining á mismunandi genatjáningu milli mataræðishópanna

Fyrir mismunatjáningargreiningu fyrir áhrif á fæðu, notuðum við aðalþáttagreiningu (PCA) með RPKM-gildum til að bera kennsl á útlæg, og þetta sýndi að tvær kýr (Blóð020009, MP og Blood020103, PP) voru útlægar stofna og voru því útilokaðir frá frekari greiningu (viðbótarskrá S4A). Aðalþáttagreining sýndi einnig að það var aðeins takmörkuð skörun í heildargenatjáningarmynstri milli PP og MP kúnna (Supplementary File S2B). Þetta studdi upphaflega hönnun rannsóknarinnar til að greina hvern aldurshóp fyrir sig. GE skrárnar sem fengnar voru úr öllum einstökum sýnum voru því aðgreindar eftir aldurshópum (PP, n=5–6 á hóp og MP, n=14–15 á hóp). DEGs milli fæðuhópa í PP eða MP kúm voru auðkennd með CLC Genomics Workbench V21 með einstefnu ANOVA-líkri aðferð. False discovery rates (FDR) fyrir margar prófanir voru leiðréttar með Benjamini–Hochberg (BH) og marktekt var talin vera p < 0,05. Foldabreytingarnar (FCs) voru reiknaðar sem genatjáningarhlutfall hærra þykknihópsins og lægri þykknihópsins (td HC á móti LC, MC á móti LC, eða HC á móti MC) ef gildi hærra þykknihópsins var meiri en hjá neðri þykknihópnum (jákvæð fellingabreyting, uppstjórnun). Ef gildi neðri þykknihópsins var meira en hærra þykknihópsins, var hlutfall lægri þykknihópsins og hærra þykknishópsins notað (td LC á móti HC, MC á móti HC og LC á móti MC ) (neikvæð fellingabreyting, niðurstýring). DEG-gildin sem voru upp- og niðurstýrð með algerri faltbreytingu Stærri en eða jafnt og 1,5 milli fæðuhópa voru valin til frekari greiningar.

4.8. Gene Ontology (GO) auðgunargreining

DEG-gildin sem fengnar voru úr samanburðarpörum á milli fæðuhópanna voru settar inn í Partek Genomics Suite V7.1 (Partek Incorporation, Chesterfield, MO, USA) fyrir GO auðgunargreiningu til að rannsaka líffræðilega virkni og samspil milli DEGs og tilheyrandi Kyoto Encyclopedia of Gen og erfðamengi (KEGG) ferlar með erfðamengi Bos taurus ARS-UCD1.2. Nákvæmt próf Fisher með BH-aðlögun var notað og tölfræðileg marktækni var talin við p < 0.05.

4.9. Tölfræðileg greining á svipgerðagögnum

Gögnin úr öllum kúm voru fyrst skipt eftir aldurshópum (PP og MP kúm), samkvæmt hönnun rannsóknarinnar. Gildi DMI, BW, mjólkurbreytur, EBAL, BCS, umbrotsefni í blóðrás (glúkósa, þvagefni, BHB, NEFA, kólesteról og IGF{{0}}), SCC (logaritmískt umbreytt) og frumufjöldi í legi og hlutföll þeirra voru tekin saman sem meðaltal ± staðalvilla meðaltals (SE). Tölfræðileg greining var notuð til að bera saman muninn á fæðuhópunum með því að nota einstefnu ANOVA innbyggða í SPSS V28 hugbúnaðarpakkann (Chicago, IL, USA). Einsleitni dreifni fyrir hverja breytu var prófuð með Levene's tölfræði fyrir ANOVA. Niðurstöðurnar sýndu að einsleitni milli hópa fyrir ECM, EBAL, glúkósa, þvagefni, BHB og IGF-1 í PP kúnum náðist ekki, svo logaritmísk umbreyting var beitt fyrir þessar breytur. Þar sem ANOVA sýndi þýðingu var margfaldur samanburður gerður við Fishers LSD aðferð til að bera kennsl á upptök mismunarins. Þar sem ekki tókst að ná fram einsleitni dreifni í gögnum um SCC í mjólk og frumufræði legs eftir logaritmíska umbreytingu, voru þessar breytur prófaðar með Kruskal–Wallis einstefnu ANOVA með Dunn's margfeldi samanburði. Frjósemisgögnin voru prófuð með Wilcoxon aðferðinni. Í öllum tilfellum var marktekt talin p < 0,05.

5. Ályktanir

Þessi rannsókn styður fyrri vinnu við að sýna fram á skýr tengsl milli efnaskiptaástands kúa í byrjun mjólkurgjafar og ónæmisvirkni þeirra. Flestar fyrri rannsóknir sem miða að því að bæta heilsu eftir fæðingu með betri næringu hafa beinst að fæðingartímabilinu og sýnt fram á að offóðrun og hár BCS á þessum tíma stuðla að síðari blóðfituhreyfingu og aukinni bólgusvörun á fæðingartímabilinu [34]. Við höfum þess í stað metið hvort hægt sé að breyta ónæmisvirkni eftir burð með því að breyta mjólkurmataræðinu. Við komumst að því að svörun við viðbótar kjarnfóðri, sem gaf fóður sem var samsett til að mæta orku- og próteinþörf dýrsins, hafði mismunandi áhrif á hvítkorna umritið í MP og PP kúm. Hjá MP kúnum var HC fæði greinilega gagnlegt, þar sem hvítfrumur LC-kýrarinnar höfðu uppstjórnun á komplement- og storkufalli og meðfædda ónæmisvörn gegn sýklum. Aftur á móti sýndu hvítfrumur í PP kúm á HC fóðrinu meiri ónæmis-/bólgusvörun og þær höfðu hærra PMN: UEC hlutfall, sem bendir til aukinnar flutnings hvítfrumna til legsins. Þessar kýr fengu síðan lengri burðarbil fram að getnaði, sem bendir til lakari frjósemi. Frekari vinna með fleiri kúm er réttlætanleg til að staðfesta niðurstöður um áhrif fæðu á frjósemi og til að skilja betur hvernig efnaskiptaviðbrögð fæðu eftir fæðingu eru mismunandi hjá yngri dýrunum.

Heimildir

1. Mallard, BA; Dekkers, JC; Írland, MJ; Leslie, KE; Sharif, S.; Vankampen, CL; Wagter, L.; Wilkie, BN Breyting á ónæmissvörun á fæðingartímabilinu og afleiðingar þess á heilsu mjólkurkúa og kálfa. J. Dairy Sci. 1998, 81, 585–595. [CrossRef] [PubMed]

2. Wathes, DC; Cheng, Z.; Chowdhury, W.; Fenwick, MA; Fitzpatrick, R.; Morris, DG; Patton, J.; Murphy, JJ Neikvætt orkujafnvægi breytir alþjóðlegri genatjáningu og ónæmissvörun í legi mjólkurkúa eftir fæðingu. Physiol. Erfðamengi. 2009, 39, 1–13. [Krossvísun]

3. Ingvartsen, KL; Moyes, K. Næring, ónæmisvirkni og heilbrigði mjólkurbúa. Dýr 2013, 7 (Viðauki 1), 112–122. [CrossRef] [PubMed]

4. Kehrli, ME, Jr.; Nonnecke, BJ; Roth, JA Breytingar á virkni daufkyrninga í nautgripum meðan á fæðingu stendur. Am. J. Vet. Res. 1989, 50, 207–214. [PubMed]

5. Ster, C.; Loiselle, MC; Lacasse, P. Áhrif styrks óesteraðra fitusýra í sermi eftir burð á virkni ónæmisfrumna í nautgripum. J. Dairy Sci. 2012, 95, 708–717. [CrossRef] [PubMed]

6. Lacetera, N.; Scalia, D.; Bernabucci, U.; Ronchi, B.; Pirazzi, D.; Nardone, A. Eitilfrumnastarfsemi í ofþroskaðri kúm í kringum fæðingu. J. Dairy Sci. 2005, 88, 2010–2016. [CrossRef] [PubMed]

7. Nonnecke, BJ; Kimura, K.; Goff, JP; Kehrli, ME, Jr. Áhrif mjólkurkirtlanna á starfhæfa getu einkjarna hvítfrumnastofna í blóði frá kúm sem eru í fæðingu. J. Dairy Sci. 2003, 86, 2359–2368. [Krossvísun]

8. Habel, J.; Sundrum, A. Misræmi í úthlutun glúkósa milli mismunandi lífsstarfa á aðlögunartímabili mjólkurkúa. Dýr 2020, 10, 1028. [Krossvísun]

9. Horst, EA; Kvidera, SK; Baumgard, LH Boðsbundin endurskoðun: Áhrif ónæmisvirkjunar á heilsu og frammistöðu kúa umbreytingar - Gagnrýnt mat á hefðbundnum kenningum. J. Dairy Sci. 2021, 104, 8380–8410. [Krossvísun]

10. Wathes, DC; Becker, F.; Buggiotti, L.; Crowe, MA; Ferris, C.; Foldager, L.; Grelet, C.; Hostens, M.; Ingvartsen, KL; Marchitelli, C.; o.fl. Tengsl milli styrks IGF-1 í blóðrás, sjúkdómsstöðu og hvítkorna umrits í mjólkurkúm snemma á mjólk. Jórturdýr 2021, 1, 147–177. [Krossvísun]

11. Dimeloe, S.; Burger, AV; Grahlert, J.; Hess, C. T-frumuefnaskipti sem stjórna virkjun, fjölgun og aðgreiningu; mát útsýni. Ónæmisfræði 2017, 150, 35–44. [CrossRef] [PubMed]

12. Loftus, RM; Finlay, DK Ónæmisskipti: Umbrot í frumum breytast í ónæmisstjórnun. J. Biol. Chem. 2016, 291, 1–10. [CrossRef] [PubMed]

13. Bauman, DE; Currie, WB Skipting næringarefna á meðgöngu og við brjóstagjöf: Endurskoðun á aðferðum sem fela í sér homeostasis og homeorhesis. J. Dairy Sci. 1980, 63, 1514–1529. [CrossRef] [PubMed]

14. Drackley, JK ADSA Foundation Scholar Award. Líffræði mjólkurkúa á aðlögunartímabilinu: Endanleg landamæri? J. Dairy Sci. 1999, 82, 2259–2273. [CrossRef] [PubMed]

15. Jabbour, HN; Sala, KJ; Catalano, RD; Norman, JE Bólguleiðir í æxlunarheilbrigði kvenna og sjúkdómum. Fjölföldun 2009, 138, 903–919. [Krossvísun]

16. Pascottini, OB; LeBlanc, SJ Stöðun ónæmisvirkni í legi nautgripa. Theriogenology 2020, 150, 193–200. [Krossvísun]

17. Sheldon, IM; Lewis, GS; LeBlanc, S.; Gilbert, RO Skilgreina legsjúkdóm eftir fæðingu í nautgripum. Theriogenology 2006, 65, 1516–1530. [Krossvísun]

18. Kuhla, B. Endurskoðun: Bólgueyðandi frumudrep og undirstúkubólga: Afleiðingar fyrir ófullnægjandi fóðurinntöku umbreytingarmjólkurkúa. Dýr 2020, 14, s65–s77. [Krossvísun]

19. Ingvartsen, KL; Moyes, KM Þættir sem stuðla að ónæmisbælingu í mjólkurkúnni á fæðingartímabilinu. Jpn. J. Vet. Res. 2015, 63 (fylgi 1), S15–S24.

20. Wathes, DC; Cheng, Z.; Salavati, M.; Buggiotti, L.; Takeda, H.; Tang, L.; Becker, F.; Ingvartsen, KI; Ferris, C.; Hostens, M.; o.fl. Tengsl efnaskiptasniða og genatjáningar í lifur og hvítfrumum mjólkurkúa snemma á mjólkurgjöf. J. Dairy Sci. 2021, 104, 3596–3616. [Krossvísun]

21. Pinedo, P.; Melendez, P. Lifrarsjúkdómar sem tengjast efnaskiptaójafnvægi í mjólkurkúm. Dýralæknir. Clin. N. Am. Matur Anim. Æfðu þig. 2022, 38, 433–446. [CrossRef] [PubMed]

22. Fenwick, MA; Fitzpatrick, R.; Kenny, DA; Diskin, MG; Patton, J.; Murphy, JJ; Wathes, DC Innbyrðis tengsl milli neikvæðs orkujafnvægis (NEB) og IGF-stjórnunar í lifur mjólkandi mjólkurkúa. Innlent. Anim. Endocrinol. 2008, 34, 31–44. [CrossRef] [PubMed]

23. Kobayashi, Y.; Boyd, CK; Bracken, CJ; Lamberson, WR; Keisler, DH; Lucy, MC Lækkuð vaxtarhormónviðtaka (GHR) boðberi ríbonucleic sýra í lifur nautgripa sem eru í fæðingu er af völdum sérstakrar lækkunar á GHR 1A sem tengist minnkaðri insúlínlíkum vaxtarþáttum I. Endocrinology 1999, 140, 3947–3954. [Krossvísun]

24. Kvidera, SK; Horst, EA; Abuajamieh, M.; Mayorga, EJ; Fernandez, MV; Baumgard, LH Glúkósaþörf virks ónæmiskerfis í mjólkandi Holstein kúm. J. Dairy Sci. 2017, 100, 2360–2374. [CrossRef] [PubMed]

25. Cheng, Z.; Wylie, A.; Ferris, C.; Ingvartsen, KL; Wathes, DC; Gplus, EC Áhrif mataræðis og magns óesteraðra fitusýra á alþjóðlegt umritasnið í einkjarna frumum í útlægum blóði í mjólkurkúm snemma á mjólkurgjöf. J. Dairy Sci. 2021, 104, 10059–10075. [Krossvísun]

26. Wathes, DC; Fenwick, M.; Cheng, Z.; Bourne, N.; Llewellyn, S.; Morris, DG; Kenny, D.; Murphy, J.; Fitzpatrick, R. Áhrif neikvæðs orkujafnvægis á hringrás og frjósemi hjá mjólkurkúnni sem gefur mikið af sér. Theriogenology 2007, 68 (Viðauki 1), S232–S241. [Krossvísun]

27. Santos, JE; Bisinotto, RS; Ribeiro, ES Vélar sem liggja að baki skertri frjósemi hjá egglaga mjólkurkúm. Theriogenology 2016, 86, 254–262. [Krossvísun]

28. Pascottini, OB; Leroy, J.; Opsomer, G. Vanaðlögun að breytingatímabilinu og afleiðingar á frjósemi mjólkurkúa. Reprod. Dom. Anim. 2022, 57 (fylgiskjal 4), 21–32. [Krossvísun]

29. Leroy, JL; Valckx, SD; Jordaens, L.; De Bie, J.; Desmet, KL; Van Hoeck, V.; Britt, JH; Marei, WF; Bols, PE Næring og efnaskiptaheilbrigði móður í tengslum við gæði eggfruma og fósturvísa: Gagnrýnar skoðanir á því sem við lærðum af mjólkurkúamódelinu. Reprod. Frjósemi. Dev. 2015, 27, 693–703. [Krossvísun]

30. Coffey, þingmaður; Hickey, J.; Brotherstone, S. Erfðafræðilegar hliðar á vexti Holstein-Friesian mjólkurkúa frá fæðingu til þroska. J. Dairy Sci. 2006, 89, 322–329. [Krossvísun]

31. Wathes, DC; Cheng, Z.; Bourne, N.; Taylor, VJ; Coffey, þingmaður; Brotherstone, S. Mismunur á frumburðum og fjölburum mjólkurkúm í innbyrðis tengslum efnaskiptaeiginleika, mjólkurframleiðslu og líkamsástandsstigs á fæðingartímabilinu. Innlent. Anim. Endocrinol. 2007, 33, 203–225. [CrossRef] [PubMed]

32. Lítið, MW; Wylie, ARG; O'Connell, NE; Welsh, læknir; Grelet, C.; Bell, MJ; Gordon, A.; Ferris, CP Ónæmisfræðileg áhrif þess að breyta styrk kjarnfóðurs í grasvottun sem byggir á fóðri fyrir snemma mjólkurgjöf Holstein Friesian kýr. Dýr 2019, 13, 799–809. [CrossRef] [PubMed]

33. Buggiotti, L.; Cheng, Z.; Salavati, M.; Wathes, geisladiskur; Arfgerð auk Umhverfis, C. Samanburður á umritinu í hvítfrumum í blóðrás snemma á mjólkurgjöf milli frum- og fjölkynja kúa gefur vísbendingar um aldurstengdar breytingar. BMC Genom. 2021, 22, 693. [CrossRef] [PubMed]

34. Cardoso, FC; Kalscheur, KF; Drackley, JK Málþing endurskoðun: Næringaráætlanir til að bæta heilsu, framleiðslu og frjósemi á umbreytingartímabilinu. J. Dairy Sci. 2020, 103, 5684–5693. [CrossRef] [PubMed]

35. Ingvartsen, KL Fóður- og stjórnunartengdir sjúkdómar í umskiptakúm. Anim. Feed Sci. Tækni. 2006, 126, 175–213. [Krossvísun]

36. Ferris, CP; Gordon, FJ; Patterson, DC; Mayne, CS; McCoy, MA Skammtímasamanburður á frammistöðu fjögurra graslendismiðaðra mjólkurframleiðslukerfa fyrir haustkálfandi mjólkurkýr. Grasfóður Sci. 2003, 58, 8. [Krossvísun]

37. Taylor, VJ; Cheng, Z.; Pushpakumara, PG; Beever, DE; Wathes, DC Tengsl milli plasmaþéttni insúlínlíks vaxtarþáttar-I í mjólkurkúm og frjósemi þeirra og mjólkurframleiðslu. Dýralæknir. Rec. 2004, 155, 583–588. [Krossvísun]

38. LeBlanc, SJ Milliverkanir efnaskipta, bólgu og heilsu æxlunarfæra á tímabilinu eftir fæðingu hjá mjólkurbúum. Reprod. Domc. Anim. 2012, 47 (fylgi 5), 18.–30. [Krossvísun]

39. Vailati-Riboni, M.; Kanwal, M.; Bulgari, O.; Meier, S.; Prestur, NV; Burke, CR; Kay, JK; McDougall, S.; Mitchell, læknir; Walker, CG; o.fl. Líkamsástandsskor og fæðingarstig fyrir fæðingu hafa áhrif á umbrots- og bólgustjórnun fituvefs á efnaskiptum og bólgu í beitandi mjólkurkúm á aðlögunartímabilinu. J. Dairy Sci. 2016, 99, 758–770. [Krossvísun]

40. Trevisi, E.; Minuti, A. Mat á meðfæddu ónæmissvörun í fæðingarkýr. Res. Dýralæknir. Sci. 2018, 116, 47–54. [Krossvísun]

41. Druker, SA; Sicsic, R.; van Straten, M.; Goshen, T.; Kedmi, M.; Raz, T. Greining á legslímubólgu í frumum á móti fjölburum mjólkurkúm. J. Dairy Sci. 2022, 105, 665–683. [CrossRef] [PubMed]

42. Hamzeh-Cognasse, H.; Laradi, S.; Osselaer, JC; Cognasse, F.; Garraud, O. Minnkun Amotosalen-HCl-UVA sýkla breytir ekki umbrotum á leysanlegum CD40 bindli, Ox40 bindli og interkeukin-27 eftir geymslu, cýtókínunum sem almennt tengjast alvarlegum aukaverkunum. Vox söng. 2015, 108, 205–207. [CrossRef] [PubMed]

43. de Greeff, A.; Zadoks, R.; Ruuls, L.; Toussaint, M.; Nguyen, TK; Downing, A.; Rebel, J.; Stockhofe-Zurwieden, N.; Smith, H. Snemma hýsilsvörun í mjólkurkirtli eftir tilrauna Streptococcus uberis áskorun í kvígum. J. Dairy Sci. 2013, 96, 3723–3736. [CrossRef] [PubMed]

44. Cheng, Z.; Chauhan, L.; Barry, AT; Abudureyimu, A.; Oguejiofor, CF; Chen, X.; Wathes, DC Bráð veirusýking í nautgripum með niðurgangi hamlar tjáningu á interferón tau-örvuðum genum í legslímu nautgripa. Biol. Reprod. 2017, 96, 1142–1153. [Krossvísun]

45. Schoggins, JW Interferon-örvuð gen: Hvað gera þau öll? Annu. Séra Virol. 2019, 6, 567–584. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Ohto, U. Virkjunar- og stjórnunaraðferðir NOD-líkra viðtaka byggt á byggingarlíffræði. Framan. Immunol. 2022, 13, 953530. [Krossvísun]

47. Cheng, Z.; Palma-Vera, S.; Buggiotti, L.; Salavati, M.; Becker, F.; Werling, D.; Wathes, DC; Gplus, EC Transcriptomic greining á hvítkornum í blóðrás sem fengust við bata eftir klíníska júgurbólgu af völdum Escherichia coli í Holstein mjólkurkúm. Dýr 2022, 12, 2146. [Krossvísun]

48. Loria, V.; Dato, I.; Graziani, F.; Biasucci, LM Myeloperoxidasi: Nýr lífmerki bólgu í blóðþurrðarhjartasjúkdómum og bráðum kransæðaheilkennum. Miðlun. Bólga. 2008, 2008, 135625. [Krossvísun]

49. Olivera, A.; Beaven, MA; Metcalfe, DD Mastfrumur gefa til kynna mikilvægi þeirra í heilsu og sjúkdómum. J. Ofnæmislæknir. Immunol. 2018, 142, 381–393. [Krossvísun]

50. Dickinson, SE; Griffin, BA; Elmore, MF; Kriese-Anderson, L.; Elmore, JB; Dyce, PW; Rodning, SP; Hlutdrægni, FH Transcriptome snið í útlægum hvítum blóðkornum á þeim tíma sem tæknifrjóvgun er gerð greinarmun á nautakjötum með mismunandi frjósemisgetu. BMC Genom. 2018, 19, 129. [Krossvísun]

51. Van Meulder, F.; Van Coppernolle, S.; Borloo, J.; Rinaldi, M.; Li, RW; Chiers, K.; Van den Broeck, W.; Vercruysse, J.; Claerebout, E.; Geldhof, P. Granule exocytosis granulysin og granzyme B sem hugsanlegur lykilbúnaður í ónæmi af völdum bóluefnis í nautgripum gegn þráðorminu Ostertagia ostertagi. Smitast. Ónæmi. 2013, 81, 1798–1809. [CrossRef] [PubMed]

52. Taylor, JL; Brown, BL Byggingargrundvöllur fyrir vanstjórnun á amínólevúlínsýrusyntasa við sjúkdóma í mönnum. J. Biol. Chem. 2022, 298, 101643. [CrossRef] [PubMed]

53. Trapani, JA; Sutton, VR Granzyme B: Pro-apoptotic, veirueyðandi og æxlishemjandi aðgerðir. Curr. Opin. Immunol. 2003, 15, 533–543. [CrossRef] [PubMed]

54. Campanile, G.; Baruselli, PS; Limone, A.; D'Occhio, MJ Staðbundin virkni cýtókína og ónæmisfrumna í samskiptum milli hugtaks og legs á mikilvægu tímabili snemma fósturþroska, viðhengi og ígræðslu - Afleiðingar fyrir lifun fósturvísa í nautgripum: endurskoðun. Theriogenology 2021, 167, 1–12. [CrossRef] [PubMed]

55. Bougarne, N.; Weyers, B.; Desmet, SJ; Deckers, J.; Ray, DW; Staels, B.; De Bosscher, K. Sameindaaðgerðir PPARalpha í fituefnaskiptum og bólgu. Endocr. 2018, 39, 760–802. [Krossvísun]

56. Sobolev, VV; Tchepourina, E.; Korsunskaya, IM; Geppe, NA; Chebysheva, SN; Soboleva, AG; Mezentsev, A. Hlutverk umritunarþáttar PPAR-gamma í meingerð psoriasis, húðfrumna og ónæmisfrumna. Alþj. J. Mol. Sci. 2022, 23, 9708. [Krossvísun]

57. Söngur, S.; Attia, RR; Connaughton, S.; Niesen, MI; Ness, GC; Elam, MB; Hori, RT; Cook, GA; Park, EA Peroxisome proliferator-activated receptor alfa (PPARalpha) og PPAR gamma coactivator (PGC-1alpha) örva karnitín palmitóýltransferasa IA (CPT-1A) með óháðum genaþáttum. Mol. Cell. Endocrinol. 2010, 325, 54–63. [Krossvísun]

58. Ziouzenkova, O.; Plutzky, J. Retinoid umbrot og viðbrögð við kjarnaviðtaka: Ný innsýn í samræmda stjórnun PPAR-RXR flókins. FEBS Lett. 2008, 582, 32–38. [Krossvísun]

59. Espenshade, PJ; Hughes, AL Reglugerð um sterólmyndun í heilkjörnungum. Annu. Séra Genet. 2007, 41, 401–427. [Krossvísun]

60. Van Meer, G.; Voelker, DR; Feigenson, GW Himnulípíð: Hvar þau eru og hvernig þau hegða sér. Nat. Séra Mol. Cell. Biol. 2008, 9, 112–124. [Krossvísun]

61. Aguilar-Ballester, M.; Herrero-Cervera, A.; Vinue, A.; Martinez-Hervas, S.; Gonzalez-Navarro, H. Áhrif kólesterólefnaskipta á starfsemi ónæmisfrumna og æðakölkun. Næringarefni 2020, 12, 2021. [CrossRef] [PubMed]

62. Mamedova, LK; Yuan, K.; Laudick, AN; Fleming, SD; Mashek, DG; Bradford, BJ Toll-eins viðtaka 4 boð eru nauðsynleg til að framkalla glúkógengenatjáningu með palmitati í lifrarkrabbameinsfrumum manna. J. Nutr. Biochem. 2013, 24, 1499–1507. [CrossRef] [PubMed]

63. Soto-Heredero, G.; Gomez de Las Heras, MM; Gabande-Rodriguez, E.; Oller, J.; Mittelbrunn, M. Glycolysis-A lykilmaður í bólgusvörun. FEBS J. 2020, 287, 3350–3369. [CrossRef] [PubMed]

64. Kominsky, DJ; Campbell, EL; Colgan, SP Efnaskiptabreytingar í ónæmi og bólgu. J. Immunol. 2010, 184, 4062–4068. [Krossvísun]

65. Afacan, NJ; Yeung, AT; Pena, OM; Hancock, RE Meðferðarmöguleiki hýsilvarnarpeptíða í sýklalyfjaónæmum sýkingum. Curr. Pharm. Des. 2012, 18, 807–819. [Krossvísun]

66. Auvynet, C.; Rosenstein, Y. Fjölvirk varnarpeptíð hýsils: Örverueyðandi peptíð, litlu en þó stóru leikmennirnir í meðfæddu og aðlagandi ónæmi. FEBS J. 2009, 276, 6497–6508. [Krossvísun]

67. Hilchie, AL; Wuerth, K.; Hancock, RE Ónæmismótun með margþættum katjónískum hýsilvörnum (sýklalyfja) peptíðum. Nat. Chem. Biol. 2013, 9, 761–768. [Krossvísun]

68. Cheng, Z.; Buggiotti, L.; Salavati, M.; Marchitelli, C.; Palma-Vera, S.; Wylie, A.; Takeda, H.; Tang, L.; Crowe, MA; Wathes, DC; o.fl. Alþjóðleg umritunarsnið hvítfrumna í blóðrás í kýr snemma á mjólkurgjöf með klíníska eða undirklíníska júgurbólgu. Mol. Biol. þingmaður 2021, 48, 4611–4623. [Krossvísun]

69. Foley, C.; Chapwanya, A.; Callanan, JJ; Whiston, R.; Miranda-CasoLuengo, R.; Lu, J.; Meijer, WG; Lynn, DJ; O'Farrelly, C.; Meade, KG Samþætt greining á staðbundnum og kerfisbundnum breytingum á undan þróun legslímubólgu eftir fæðingu. BMC Genom. 2015, 16, 811. [Krossvísun]

70. Machado, VS; Silva, TH Aðlagandi ónæmi í legi eftir fæðingu: Hugsanleg notkun bóluefna til að stjórna metritis. Theriogenology 2020, 150, 201–209. [Krossvísun]

71. Ley, K.; Hoffman, HM; Kubes, P.; Cassatella, MA; Zychlinsky, A.; Hedrick, CC; Catz, SD Neutrophils: Ný innsýn og opnar spurningar. Sci. Immunol. 2018, 3, eaat4579. [CrossRef] [PubMed]

72. Wahl, SM; Feldman, GM; McCarthy, JB Reglugerð um viðloðun hvítkorna og merkjagjöf í bólgu og sjúkdómum. J. Leukoc. Biol. 1996, 59, 789–796. [CrossRef] [PubMed]

73. Schubert, K.; Polte, T.; Bonisch, U.; Schader, S.; Holtappels, R.; Hildebrandt, G.; Lehmann, J.; Simon, JC; Anderegg, U.; Saalbach, A. Thy-1 (CD90) stjórnar útflutningi hvítfrumna við bólgu. Eur. J. Immunol. 2011, 41, 645–656. [CrossRef] [PubMed]

74. Dreymueller, D.; Pruessmeyer, J.; Schumacher, J.; Fellendorf, S.; Hess, FM; Seifert, A.; Babendreyer, A.; Bartsch, JW; Ludwig, A. Málmópróteinasinn ADAM8 stuðlar að nýliðun hvítkorna in vitro og við bráða lungnabólgu. Am. J. Physiol. Lungnafruma. Mol. Physiol. 2017, 313, L602–L614. [Krossvísun]

75. Kostelnik, KB; Barker, A.; Schultz, C.; Mitchell, TP; Rajeeve, V.; Hvítur, IJ; Aurrand-Lions, M.; Nourshargh, S.; Cutillas, P.; Nightingale, TD Kvik mansal og velta á JAM-C er nauðsynleg fyrir flutning æðaþelsfrumna. PLoS Biol. 2019, 17, e3000554. [CrossRef] [PubMed]

76. Stillie, R.; Farooq, SM; Gordon, JR; Stadnyk, AW Virka mikilvægi þess að tjá tvær IL-8 viðtakagerðir á PMN. J. Leukoc. Biol. 2009, 86, 529–543. [Krossvísun]

77. Bouton, AH; Riggins, RB; Bruce-Staskal, PJ Virkni millistykki próteins Cas: Merkjasamruni og ákvörðun frumuviðbragða. Oncogene 2001, 20, 6448–6458. [Krossvísun]

78. Chen, X.; Cheng, Z.; Zhang, S.; Werling, D.; Wathes, DC Með því að sameina tengslarannsóknir um erfðamengi og greiningar á mismunandi genatjáningargögnum er bent á frambjóðandi gen sem hafa áhrif á júgurbólgu af völdum tveggja mismunandi sýkla í mjólkurkúnni. Opnaðu J. Anim. Sci. 2015, 5, 358–393. [Krossvísun]

79. Chang, GW; Hsiao, CC; Peng, YM; Vieira Braga, FA; Kragten, NA; Remmerswaal, EB; van de Garde, læknir; Straussberg, R.; Konig, GM; Kostenis, E.; o.fl. Viðloðun G prótein-tengdi viðtakinn GPR56/ADGRG1 er hamlandi viðtaki í NK frumum manna. Cell. þingmaður 2016, 15, 1757–1770. [Krossvísun]

80. Bi, J.; Tian, ​​Z. Vanstarfsemi NK frumna og ónæmismeðferð við eftirlitsstöð. Framan. Immunol. 2019, 10, 1999. [Krossvísun]

81. Minuti, A.; Gallo, A.; Lopreiato, V.; Bruschi, S.; Piccioli-Cappelli, F.; Uboldi, O.; Trevisi, E. Áhrif gotstærðar á efnaskipta- og amínósýrusnið fyrir fæðingu hjá kanínum. Dýr 2020, 14, 2109–2115. [CrossRef] [PubMed]

82. Crookenden, MA; Moyes, KM; Kuhn-Sherlock, B.; Lehnert, K.; Walker, CG; Loor, JJ; Mitchell, læknir; Murray, A.; Dukkipati, VSR; Vailati-Riboni, M.; o.fl. Transcriptomic greining á daufkyrningum í blóði í efnaskiptastressuðum mjólkurkúm á beit á hliðarhlutum. J. Dairy Sci. 2019, 102, 7408–7420. [CrossRef] [PubMed]

83. Sharma, JN; Al-Omran, A.; Parvathy, SS Hlutverk nituroxíðs í bólgusjúkdómum. Inflammopharmacology 2007, 15, 252–259. [CrossRef] [PubMed]

84. Martino, MR; Gutierrez-Aguilar, M.; Yew, NKH; Lutkewitte, AJ; Söngvari, JM; McCommis, KS; Ferguson, D.; Liss, KHH; Yoshino, J.; Renkemeyer, MK; o.fl. Að þagga niður alanín transamínasa 2 í lifur með sykursýki dregur úr blóðsykrishækkun með því að draga úr glúkógenmyndun frá amínósýrum. Cell Rep. 2022, 39, 110733. [CrossRef] [PubMed]

85. Hár, AR; Yvan-Charvet, L. Kólesteról, bólga og meðfædd ónæmi. Nat. Séra Immunol. 2015, 15, 104–116. [Krossvísun]

86. Wathes, D.; Cheng, Z.; Mareiy, W.; Fouladi-Nasht, A. Fjölómettaðar fitusýrur og frjósemi í kvenkyns spendýrum: Uppfærsla. CABI Rev. 2013, 8, 1–14. [Krossvísun]

87. Alipour, A.; van Oostrom, AJ; Izraeljan, A.; Verseyden, C.; Collins, JM; Frayn, KN; Plokker, TW; Elte, JW; Castro Cabezas, M. Virkjun hvítkorna með þríglýseríðríkum lípópróteinum. Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 2008, 28, 792–797. [Krossvísun]

88. Castoldi, A.; Monteiro, LB; van Teijlingen Bakker, N.; Sanin, DE; Rana, N.; Corrado, M.; Cameron, AM; Hassler, F.; Matsushita, M.; Caputa, G.; o.fl. Tríacýlglýseról nýmyndun eykur bólguvirkni átfrumna. Nat. Commun. 2020, 11, 4107. [Krossvísun]

89. Bell, AW Reglugerð um umbrot lífrænna næringarefna við umskipti frá seint meðgöngu til snemma brjóstagjafar. J. Anim. Sci. 1995, 73, 2804–2819. [Krossvísun]

90. Moore, DAPSU; Varga, G. BUN og MUN: Þvagefnisniturprófun í mjólkurbúum. Samantekt 1996, 18, 712–720.

91. Wathes, DC; Bourne, N.; Cheng, Z.; Mann, GE; Taylor, VJ; Coffey, MP Margfeldisgreiningar á efnaskipta- og innkirtlasniðum við frjósemi í frum- og fjölkynnum kúm. J. Dairy Sci. 2007, 90, 1310–1325. [CrossRef] [PubMed]

92. Abe, R.; Donnelly, SC; Peng, T.; Bucala, R.; Metz, CN Fibrocytes í útlægum blóði: Aðgreiningarleið og flutningur til sársstaða. J. Immunol. 2001, 166, 7556–7562. [CrossRef] [PubMed]

93. Schreier, S.; Triampo, W. Sjaldgæf frumufjöldi í blóði. Hvað er það og hvað er það gott fyrir? Cells 2020, 9, 790. [CrossRef] [PubMed]

94. Lynn, AK; Yannas, IV; Bonfield, W. Mótefnamyndun og ónæmingargeta kollagens. J. Biomed. Mater. Res. 2004, 71, 343–354. [Krossvísun]

95. Roche, JR; Burke, CR; Crookenden, MA; Heiser, A.; Loor, JL; Meier, S.; Mitchell, læknir; Phyn, CVC; Turner, SA Frjósemi og umskiptin mjólkurkýr. Reprod. Frjósemi. Dev. 2017, 30, 85–100. [Krossvísun]

96. Galvao, KN; Flaminio, MJ; Brittin, SB; Sper, R.; Fraga, M.; Caixeta, L.; Ricci, A.; Vörður, CL; Butler, WR; Gilbert, RO Samband milli legsjúkdóms og vísbendinga um daufkyrninga og almenna orkustöðu í mjólkandi Holstein kúm. J. Dairy Sci. 2010, 93, 2926–2937. [Krossvísun]

97. Dahl, MO; Maunsell, FP; De Vries, A.; Galvao, KN; Risco, CA; Hernandez, JA Vísbendingar um að júgurbólga geti valdið þungunartapi hjá mjólkurkúm: Kerfisbundin endurskoðun á athugunarrannsóknum. J. Dairy Sci. 2017, 100, 8322–8329. [Krossvísun]

98. Hansen, PJ; Soto, P.; Natzke, RP Júgurbólga og frjósemi í nautgripum, möguleg þátttaka í bólgu eða ónæmisvirkjun í fósturdauða. Am. J. Reprod. Immunol. 2004, 51, 294–301. [Krossvísun]

99. Malinowski, E.; Gajewski, Z. Júgurbólga og frjósemissjúkdómar í kúm. Pol. J. Vet. Sci. 2010, 13, 555–560.

100. Edmonson, AJ; Halla, IJ; Weaver, LD; Farver, T.; Webster, GA Stigarit yfir líkamsástand fyrir Holstein mjólkurkýr. J. Dairy Sci. 1989, 72, 11. [Krossvísun]

101. Larsen, T.; Rontved, CM; Ingvartsen, KL; Vels, L.; Bjerring, M. Ensímvirkni og bráðafasaprótein í mjólk notuð sem vísbendingar um bráða klíníska E. coli LPS-framkallaða júgurbólgu. Dýr 2010, 4, 1672–1679. [CrossRef] [PubMed]

102. Krogh, MA; Hostens, M.; Salavati, M.; Grelet, C.; Sorensen, MT; Wathes, DC; Ferris, CP; Marchitelli, C.; Signorelli, F.; Napolitano, F.; o.fl. Breytileiki milli og innan hjarðs í blóð- og mjólkurlífmerkjum í Holstein kúm snemma á mjólkurgjöf. Dýr 2020, 14, 1067–1075. [CrossRef] [PubMed]

103. Buggiotti, L.; Cheng, Z.; Wathes, DC; Gplus, EC Mining ókortlagðra lestra í RNA-Seq gögnum úr nautgripum sýnir algengi herpesveiru-6 í evrópskum mjólkurkúm og tengdar breytingar á svipgerð þeirra og hvítkornaumriti. Veirur 2020, 12, 1451. [CrossRef] [PubMed]

104. Beltman, ME; Forde, N.; Furney, P.; Carter, F.; Roche, JF; Lonergan, P.; Crowe, MA Einkenni á tjáningu legslímugena og efnaskiptabreytur í nautakjötum sem gefa lífvænlegum eða ólífvænlegum fósturvísum á 7. degi eftir sæðingu. Reprod. Frjósemi. Dev. 2010, 22, 987–999. [CrossRef] [PubMed]