Forspárgildi lifrarkínasa B1 (LKB1) í magakrabbameinsbundnu æxlisónæmi

Ágrip:

Lifrarkínasi B1 (LKB1) er æxlisbælandi gen sem óvirkjun á sér stað oft í mismunandi æxlisgerðum. Hins vegar er ekki vitað hvort LKB1 tengist klínískum einkennum magakrabbameins (GC) og stjórna æxlisónæmi. Í þessari rannsókn sýndum við að LKB1 er mjög tjáð í sermi heilbrigðra einstaklinga (n = 176) samanborið við GC sjúklinga (n = 416) og tengist einnig klínískum árangri og góðri lifunartíðni hjá GC sjúklingum. Ennfremur gen sem tengjast ónæmiseftirlitsstöðvum og virkjun T-frumna, svo sem PD−1, PD−Sýnt var fram á að L1, CD8A, CD8B, CD28 og GZMM voru mjög tjáð í GC undirhópum með mikla LKB1 tjáningu. Í samanburði við ferskan magakrabbameinsvef kom LKB1 mjög fram í CD3+CD8+ og CD3+CD8+CD28+ T-frumum í ferskum aðliggjandi non- krabbameinsvef. CD3+CD8+ T frumur framleiddu IFN−andstæðingur−krabbameins ónæmissvörun. Ennfremur hafði hlutfall CD3+CD8+ T frumna sem tjáðu LKB jákvæða fylgni við IFN−tjáningu. Þar að auki höfðu GC sjúklingar með lága LKB1 tjáningu lélega hlutlæga svörunartíðni og verri lifun án versnunar og heildarlifun þegar þeir fengu meðferð með pembrolizumabi. Að lokum getur LKB1 verið hugsanlegt ónæmiseftirlit hjá GC sjúklingum.

Kostir cistanche tubulosa-antitumor

Leitarorð:

LKB1; magakrabbamein; klínísk útkoma; ónæmiseftirlit; CD3+CD8+ T frumur

1. Inngangur

Á heimsvísu er magakrabbamein (GC) lýðheilsuvandamál og er það fimmta algengasta illkynja sjúkdómurinn [1,2]. Þrátt fyrir að algengar meðferðaraðferðir fyrir GC, svo sem maganám, krabbameinslyfjameðferð, geislun og markvissar meðferðir, séu mikið notaðar í klínískri starfsemi [3], eru 5.−lifunarhlutfall langt gengið GC á ári er < 20%. Vegna framfara í GC meðferð [4,5] er ónæmismeðferð talin nýstárleg nálgun [6] sem hefur skýrt meðferð þessa sjúkdóms [7]. Á tímum ónæmismeðferðar, forritaður frumudauði 1 (PD−1)% 2fPD−bindill 1 (PD−L1) hefur verið sýnt fram á að vera lífmerki fyrir krabbameinsgreiningu og spá um svörun við ónæmismeðferð, en er ekki nægilega næmur. Þess vegna er mikilvægt að bera kennsl á ný forspár lífmerki í ónæmismeðferð fyrir GC.

Lifrarkínasi B1 (LKB1), einnig þekktur sem STK11, er serín/þreónín kínasi sem er víða til staðar í fjölmörgum vefjum [8]. Vaxandi vísbendingar hafa sýnt að LKB1 er lykilæxlisbæli í mörgum tegundum krabbameina, svo sem krabbamein í brisi [9], sortuæxli [10,11], ekki−smáfrumukrabbamein [12,13] og leghálskrabbamein [14]. Ennfremur er vitað að LKB1 tekur þátt í stjórnun á starfsemi ónæmisfrumna [10]. Skortur á LKB1 í T-frumum stuðlar að myndun fjölpípu í meltingarvegi [15] og felur einnig í sér IL−11−JAK/STAT3 ferill sem leiðir til æxlismyndunar í meltingarvegi [16]. Að auki gegnir LKB1 mikilvægu hlutverki í virkni átfrumna með því að taka þátt í ferlum, svo sem frumuvexti, efnaskiptum og skautun [17]. Nýlegar rannsóknir hafa sýnt að tap á LKB1 getur átt þátt í mótun æxlisónæmis örumhverfis [18]. Nánar tiltekið bælir LKB1 skortur T−frumuvirkni með því að stuðla að bólgueyðandi frumumyndun og nýliðun daufkyrninga í æxlismíkróumhverfi sjúklinga með lungnakrabbamein [19]. Takmarkaður fjöldi rannsókna hefur skýrt tengslin milli LKB1 tjáningar, klínískra niðurstaðna, ónæmissamhengis og meðferðarsvörunar í GC. Í þessari rannsókn sýndum við fram á tengsl milli LKB1 tjáningar og klínískra útkomu hjá GC sjúklingum. Að auki sýndum við fram á að lítil LKB1 tjáning stuðlar að ónæmisbælandi örumhverfi og gæti leitt til slæmra horfa meðal GC sjúklinga. Þar að auki fengu GC sjúklingar með mikla tjáningu á LKB1 meiri ávinning af pembrolizumab meðferð. Fjallað er um forspárgildi og hugsanlegt hlutverk LKB1 í æxlisónæmisfræði hér og getur það stuðlað að skilningi á mögulegum fyrirkomulagi sem liggur að baki GC.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

2. Efni og aðferðir

2.1. Sjúklingar og blóðsýni

Þessi afturskyggna rannsókn var samþykkt af staðbundinni siðanefnd Zhejiang krabbameinssjúkrahússins (IRB−2021−154). Við söfnuðum blóðsýnum frá 176 heilbrigðum fullorðnum og 416 GC sjúklingum á tímabilinu janúar 2015 til ágúst 2022 og söfnuðum 26 pörum af ferskum krabbameinsvef og aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbamein frá 26 GC sjúklingum. Sjúklingar með sögu um önnur illkynja æxli voru útilokaðir.

2.2. Tjáning CEA, CA19−9, AFP og LKB1

Til sölu ELISA prófunarsett (RX106671H; Ruixinbio, Quanzhou, Fujian, Kína) var notað til að meta magn LKB1 tjáningar í plasmasýnunum í samræmi við staðlaða siðareglur. Í stuttu máli var samsvarandi plasmasýnum (50 µL) og stöðluðum módelpróteinum (50 µL) bætt við 96-brunn plötur. Næst var 100 µL af HRP-merktu mótefni bætt við og 96-brunn plöturnar ræktaðar í 1 klst við 37 ◦C. Síðan voru plöturnar þvegnar þrisvar sinnum með þvottabuffi. Hvarfefnisblöndunni (100 µL) var bætt við og plöturnar greindar í örplötulesara við OD 450. Efnaljómun var notuð til að ákvarða CEA (CFDA 20163402679, Siemens Healthcare Diagnostic Products., Shanghai, Kína), CA19−9 (CFDA 2018140 20178140 Siemens Healthcare Diagnostic Products., Shanghai, Kína), og AFP tjáningu (CFDA 20173400053, Siemens Healthcare Diagnostic Products., Shanghai, Kína). SPSS 19.0 hugbúnaður (IBM, Armonk, NY, USA) var notaður til að ákvarða flatarmál undir rekstrareinkennum móttakara (ROC) kúrfanna CEA, CA19−9, AFP og LKB1. Byggt á TNM meinafræðilegu stigi, FIGO stigi og HER2 tjáningu var 416 GC sjúklingum skipt í mismunandi undirhópa. Pöruð t-próf ​​var notuð til að greina LKB1 tjáningu í mismunandi undirhópum GC sjúklinga.

2.3. Greining á LKB1 tjáningu í ónæmisfrumum og tengsl við ónæmiseftirlit

Alhliða greining á margvíslegum ónæmismeðferð við krabbameini [CAMOIP] (http://www.camoip.net/) (sótt 1. janúar 2{{10}}23) er tæki til að greina tjáningar- og stökkbreytingargögn frá The Cancer Genome Analysis (TCGA) og ónæmiseftirlitshemlum (ICI)-meðhöndluðum verkefnum. Stöðluð vinnsluleiðsla var notuð til að greina ónæmingargetu og leiðaauðgun hjá GC sjúklingum. CAMOIP var einnig notað til að greina mismunandi tjáningu ónæmisfrumna í samræmi við LKB1 tjáningu hjá GC sjúklingum. UCSC Xena gagnagrunnurinn (https://xena.ucsc.edu/public) (aðgengilegur 1. janúar 2023) er gagnagreiningarvettvangur fyrir erfðafræði krabbameins sem styður sýn og greiningu á vefjafræðilegum gögnum úr mörgum krabbameinssýnum. UCSC Xena gagnagrunnurinn veitir LKB1, T-frumu ónæmiseftirlitsgen, T-frumuvirkjun og mótefnavakakynningu mRNA tjáningar. Flókið hitakort var gert með því að nota R tungumálið (4.2.1). SPSS 19.0 hugbúnaður (IBM, Armonk, NY, USA) var notaður til að greina LKB1 tjáningu út frá kvartilum. Við skiptum GC sjúklingunum í LKB1 háa og lága tjáningarhópa í samræmi við miðlungsgildi LKB1 tjáningar. T-próf ​​var notað til að greina T-frumu ónæmiseftirlitsgen, T-frumuvirkjun og mótefnavakakynningu á mRNA tjáningu hjá GC sjúklingum í LKB1 há og lágtjáningu GC sjúklinga undirhópa. p gildi < 0,001 voru talin tölfræðilega marktæk.

Kostir cistanche tubulosa-antitumor

2.4. Flæðisfrumumæling

Ferskur krabbameinsvefur (n {{0}}) og ferskur aðliggjandi vefur sem ekki er krabbameinsvaldur (n=26) sem fengust í aðgerð voru malaðir í vefjamölunarlausn innan 30 mín. Mölunarlausn og einkjarna frumum í útlægum blóði (PBMC) (1 × 106 frumur/ml) var safnað í fosfat-bufferða saltvatn (PBS) (50 µL, CR20012; Zhejiang Crenry, Zhejiang, Kína) bætt við 0,5% nautgripasermi (BSA) albúm (Thermo Fisher, Waltham, MA, Bandaríkjunum) og ræktað með einstofna mótefnum gegn mönnum í 15 mín. Einstofna mótefni gegn mönnum voru notuð, eins og sýnt er í töflu 1 og aukatöflu S1 og viðbótarmynd S1: and-LKB1 (PTG, Wuhan, Hubei, Kína); anti−CD68 (Biolegend, San Diego, CA, Bandaríkjunum); anti−CD209 (Biolegend, San Diego, CA, Bandaríkjunum); anti−CD28 (Biolegend, San Diego, CA, Bandaríkjunum); anti−CD45/CD56/CD19 (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); anti−CD45/CD4/CD8/CD3 (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); anti−CD4, CD3 (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); anti−CD45RO (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); anti−CD8 (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); anti−CD38 (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum); og and-CD45RA (Beckman Coulter, St. Louis, MO, Bandaríkjunum). CD3/CD4/CD8/CD28/PD−1 greiningarsett var keypt frá Raise Care (Hangzhou, Kína). CXP greiningarhugbúnaður og Beckman Coulter FC 500 flæðifrumumælir voru notaðir til að greina niðurstöðurnar [20,21]. Cýtókíngreiningarsett (Seager, Dalian, Kína) var notað til að greina cýtókín í plasmasýnum frá GC sjúklingum samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.

Tafla 1. Samanburður á GC sjúklingum og heilbrigðum einstaklingum með klínískar breytur.

2.5. Ónæmisfrumuhlutföll í ferskum vefjum

T-próf ​​var notað til að greina hlutföll ónæmisfrumna í ferskum krabbameinsvef (n=26) og ferskum aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbameinsvaldandi (n=26). Munurinn á LKB1+ og PD1+LKB1+ ónæmisfrumuhlutföllum í ferskum krabbameinsvefjum og ferskum aðliggjandi krabbameinslausum vefjum var greindur með pöruðu t-prófi. SPSS 19.0 hugbúnaður (IBM, Armonk, NY, USA) var notaður til að ákvarða fylgni á milli hlutfalla ónæmisfrumna og frumuefna í ferskum krabbameins- og ferskum aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbamein.

2.6. Vefjaónæmisvefjaefnafræði (IHC)

Lífbanki Zhejiang krabbameinssjúkrahússins útvegaði nýjan krabbameinsvef (n=26) og ferskan aðliggjandi vef sem ekki var krabbameinsvaldandi (n=26) sem notaður var í þessari rannsókn. IHC kit (Beijing Zhongshan Golden Bridge Biotechnology Co., Ltd., Peking, Kína) var notað til að framkvæma IHC í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda. Í stuttu máli voru paraffínsneiðar í röð afparaffínaðir, endurvötnaðir og soðnir til að endurheimta mótefnavaka. Aðal LKB1 mótefnið (IPB0924 [þynningarhlutfall, 1:100]; Baijia, Taizhou, Jiangsu, Kína) og interferón gamma (IFN− ) mótefni (IPB0703 [þynningarhlutfall, 1:100]; Baijia, Taizhou, Jiangsu, Kína) voru ræktaðar í 2 klst við stofuhita. Hlutarnir voru þvegnir þrisvar sinnum með PBS. Vefefnafræðilegum fjölliðaaukandi (400 µL) var bætt við paraffínhluta í 20 mínútur, fylgt eftir með 3 þvotti með PBS. Næst var aukamótefnum bætt við paraffínhlutana og ræktað í 20 mínútur, fylgt eftir með þvotti, DAB litun, mótlitun og uppsetningu.

2.7. Meðferðarsvörun GC sjúklinga við Pembrolizumab Byggt á LKB1 tjáningu

Meðferðarsvörun við pembrolizumabi og klínísk gögn um GC sjúklinga sem gangast undir ónæmiseftirlitsstöðvun (ICB) voru fengin úr fyrri skýrslu [22]. SPSS 19.0 hugbúnaður (IBM, Armonk, NY, USA) var notaður til að greina LKB1 tjáningu út frá kvartilum. Við skiptum GC sjúklingunum í LKB1 háa og lága tjáningarhópa í samræmi við miðlungsgildi LKB1 tjáningar. R tungumál (4.2.1) var notað til að ákvarða pembrolizumab meðferðarsvörun GC sjúklinga í samræmi við LKB1 tjáningu. Tjáning PD−L1 var greind með SPSS 19.0 hugbúnaði (IBM, Armonk, NY, USA) byggt á kvartilum. GC sjúklingum var skipt í PD−L1 háa og lága tjáningarhópa eftir miðlungsgildi. Byggt á LKB1 og PD−L1 tjáningu, voru GC sjúklingar lagskiptir í LKB1 háa og lága innan PD−L1 háa og lága tjáningar undirhópa og Python var notað til að endurspegla pembrolizumab meðferðarsvörun í undirhópunum. Heildarlifun og lifun án versnunar GC sjúklinga sem fengu pembrolizumabi voru greind með Kaplan-Meier aðferð með log-rank prófi.

2.8. Tölfræðigreining

Tölfræðilegar greiningar voru gerðar með SPSS 19.0 hugbúnaði (IBM, Armonk, NY, USA). Lifun sjúklinga var staðfest símleiðis og var greind með Kaplan-Meier aðferð með log-rank prófi. p gildi < 0.05 voru talin tölfræðilega marktæk. Jafnframt var Kaplan−Meier Plotter (http://www.kmplot.com) (sótt 1. janúar 2023) notaður til að staðfesta áhrif LKB1 (hár á móti lágri tjáningu) á lifun GC sjúklinga. Python var notað til að endurspegla klíníska eiginleika og breytur GC sjúklinganna.

3. Úrslit

3.1. Tengsl milli LKB1 tjáningar og eiginleika lækna hjá GC sjúklingum

Í þessari rannsókn voru 416 GC sjúklingar (268 karlar og 148 konur) og 176 heilbrigðir einstaklingar (87 karlar og 89 konur) teknir með. Eiginleikar heilbrigðra einstaklinga og GC sjúklinga eru teknir saman á mynd 1A og töflu 1. Klínískar niðurstöður GC sjúklinganna eru teknar saman, þar á meðal CEA, CA19−9, AFP og HER2 tjáning, meinafræðileg einkunn, Union for International Cancer Control (UICC) ) æxlisstig, þátt eitla og fjarmeinvörp (Mynd 1B, Tafla 1 og 2). Eins og sést á mynd 1C voru CEA, CA19−9 og AFP mjög tjáð í sermi GC sjúklinga, en LKB1 var mjög tjáð í heilbrigðum einstaklingum. Í samanburði við CEA, CA19−9 og AFP hafði LKB1 bestu sértækni og næmi (AUC=0.727; mynd 1D). Meðal klínískra þátta var LKB1 ótrúlega lægra á stigi T3−4, N2−3, M1 og stigi III-IV samkvæmt UICC stigunarviðmiðum (p < {{30}}.0 5, p < 0.05, p < 0.001, og p < 0.01, í sömu röð; mynd 1E og tafla 2). Að auki kom LKB1 tölulega mikið fram hjá HER2-neikvæðum GC sjúklingum (Mynd 1F). Þessar niðurstöður bentu því til þess að LKB1 gæti hugsanlega tekið þátt í framvindu GC.

Mynd 1. Tengsl LKB1 tjáningar og klínískra eiginleika. (A, B), Klínískir eiginleikar hjá heilbrigðum einstaklingum (n=176) og GC sjúklingum (n=416) voru kortlögð með Python. (C), Tjáning CEA, CA19-9 og AFP var mæld í sermi GC sjúklinga og heilbrigðra einstaklinga. (D), samanborið við CEA, CA19-9 og AFP, hafði LKB1 hærra næmi og sérhæfni. (E), LKB1 tjáning var lægri hjá stigi N2-3, M1 og stigi III-IV GC sjúklingum. (F), LKB1 kom tölulega mikið fram hjá HER2-neikvæðum GC sjúklingum. HER2-~+: HER2 neikvæðir GC sjúklingar. HER2++~+++: nema fyrir HER2 neikvæða GC sjúklinga. Óparað t-próf, * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0.001.

Tafla 2. Grunneiginleikar GC sjúklinga.

3.2. LKB1 stuðlar að ónæmisbælandi örumhverfi hjá GC sjúklingum

Samkvæmt TCGA gagnagrunnum var T-frumuviðtakaflókið marktækt frábrugðið milli GC sjúklinga með mikla og litla LKB1 tjáningu (Mynd 2A). Við sýndum ennfremur að tjáning T-frumna var mismunandi hjá GC-sjúklingum í háum og lágum LKB1 tjáningu undirhópum, þar á meðal CD8+ T-frumum, stjórnandi T-frumum, daufkyrningum og eósínófílum (Mynd 2B). Að auki sáust sterk fylgnimynstur á milli LKB1 tjáningar og uppstjórnun gena sem taka þátt í T-frumu ónæmiseftirlitsstöðvum, T-frumuvirkjun og mótefnavakakynningu (Mynd 2C). Við lagskiptum GC sjúklingum frekar út frá PD-1, PD-L1, CD8A, CD8B, CD28 og GZMM mRNA tjáningu innan LKB1 háa og lága tjáningar undirhópanna. Athyglisvert er að genin voru öll mjög tjáð í LKB1-hátjáningar undirhópnum (Mynd 2D). LKB1, PD-1 og PD-L1 tjáning sýndi takmarkaðan mun á slímhúð og dreifðri gerð (viðbótarmynd S2). Þessar upplýsingar benda til þess að LKB1 gæti tengst T-frumuvirkjunarsvipgerð og T-frumu ónæmiseftirlitsstöð hjá GC sjúklingum.

3.3. LKB1 er sértækt tjáð í T (CD3+CD8+) frumuíferð í GC

Til að ákvarða tjáningu LKB1 í ónæmisörumhverfinu mældum við tjáningu sex ónæmissíferðarfrumna í útlæga blóði (B), ferskum krabbameinsvef (T) og aðliggjandi krabbameinslausum vefjum (N) og 12 tegundum frumuefnatjáningar hjá GC sjúklingum ( mynd 3A). Við sýndum einnig LKB1 tjáningu byggt á gnægð allra sex ónæmisíferðarfrumna, þar á meðal B frumur, T frumur, daufkyrninga, átfrumur og dendritic frumur (Mynd 3A og viðbótarmynd S3). Við komumst að því að hlutfall T-frumna (CD3+CD8+) var hærra í aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbameinsvaldandi (N), en hlutfall T-frumna (CD3+CD{{ 9}}) var hærra í ferskum krabbameinsvef (T) og aðrar T frumur sýndu takmarkaðan mun á ferskum krabbameinsvef (T) og aðliggjandi vefjum sem ekki voru krabbamein (N; mynd 3B). Ennfremur, T frumur (CD3+CD8+LKB1+, CD3+CD8+CD28+LKB1+, CD 3+CD8+CD28+PD−1+LKB1+) hafði marktækt hærra hlutfall í ferskum aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbamein (N; mynd 3C). LKB1 tjáning í öðrum ónæmisfrumum var svipuð milli ferskra krabbameins (T) og aðliggjandi krabbameinslausra vefja (N), nema daufkyrninga (viðbótarmynd S3). Saman sýndu þessar niðurstöður að LKB1 gæti sérstaklega tengst T (CD3+CD8+, CD3+CD8+CD28+) frumuíferðar örumhverfi hjá GC sjúklingum.

Mynd 2. LKB1 tengist T-frumuvirkjunargeninu og ónæmiseftirlitsstöðvum. (A) T-frumuviðtaka flókið sýndi mestan mun á LKB1 háum og lágum tjáningu undirhópum. (B) CAMOIP gagnagrunnsgreining á mismunatjáningu ónæmisfrumna milli LKB1 há- og lágtjáningar undirhópa. (C) Hitakortið sýnir z-skor staðlað log-cpm gildi fyrir undirskrift ónæmisgena sett byggt á LKB1 tjáningu (n=407). (D) PD-1, PD-L1, CD8A, CD8B, CD28 og GZMM komu mjög fram í LKB1-háum GC sjúklinga undirhópnum. Óparað t-próf, ns: enginn marktækur munur, * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0,001 , **** p < 0,0001.

Mynd 3. LKB1 tengist T-frumuíferð í GC sjúklingum. (A) Hitakortið sýnir hlutfall ónæmisfrumna í útæðablóði (B), ferskum krabbameinsvef (T) og aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbameinsvaldandi (N) og tjáningu frumuefna. (B) Hlutföll mismunandi tegunda T-frumna í ferskum krabbameins (T) og aðliggjandi krabbameinslausum vefjum (N). (C) Mismunandi hlutföll T-frumna sem tjá LKB1 í ferskum krabbameins (T) og aðliggjandi non-krabbameinsvef (N). Pöruð t-próf, * p < 0.05, ** p < 0.01, *** p < 0.001.

3.4. LKB1 er hugsanlega í fylgni við IFN− tjáningu

Við gerðum ráð fyrir að LKB1 tjáð í ónæmisfrumum tengist starfsemi ónæmisfrumna. Byggt á niðurstöðunum greindum við tengsl milli ónæmisíferðarfrumna (LKB1+) hlutfalls og frumuboðunar (Mynd 4A). Fyrri rannsókn sýndi að IFN- framleitt af T frumum (CD3+CD8+) er áhrifarík vísbending til að spá fyrir um klíníska virkni og lifun með blokkun gegn PD-1 hjá GC sjúklingum [23,24] . Við komumst að því að aðeins hlutföll T frumu (CD3+LKB1+) og (CD3+CD8+LKB1+) höfðu smá jákvæða fylgni við IFN− tjáning í ferskum krabbameins (T) og aðliggjandi vefjum sem ekki eru krabbamein (N; mynd 4B). Næst ákváðum við LKB1 og IFN- tjáningu í ofangreindum ferskum krabbameins (T) og aðliggjandi krabbameinslausum vefjum (N) og komumst að því að LKB1 tjáning var marktækt lægri í krabbameinsvef samanborið við IFN-tjáningu (Mynd 4C). Þessar niðurstöður bentu til þess að LKB1 gæti haft jákvæð tengsl við andæxli IFN- tjáningu sem T-frumum seytir (CD3+CD8+, CD3+CD8+CD{{ 23}}).

Mynd 4. LKB1 hafði jákvæða fylgni við IFN- tjáningu. (A) Greining á tengslum milli ónæmisfrumuíferðar (LKB1+) hlutfalls og frumuboðunar. (B) Fylgni T-frumna (CD3+LKB1+) og (CD3+CD8+LKB1+) hlutfalls við IFN- tjáningu í ferskum krabbameinum (T) og aðliggjandi vefi sem ekki er krabbamein (N). (C) Ónæmisvefjaefnafræðilegar greiningar á LKB1 og IFN- tjáningu í ferskum krabbameins (T) og aðliggjandi krabbameinslausum vefjum (N).

3.5. LKB1 spáir góðri svörun við Pembrolizumab í GC

Byggt á niðurstöðunum gæti LKB1 verið hugsanlegt ónæmiseftirlit. Eins og sýnt er á mynd 5A tengdist lítil LKB1 tjáning marktækt styttri heildarlifun miðað við lifun GC sjúklinga frá 2015 til 2019. Í samræmi við þessa niðurstöðu, Kaplan-Meier gagnagrunnurinn (http://kmplot.com/) ( Skoðað 1. janúar 2023) gaf einnig til kynna að LKB1 tjáning hefði marktæk áhrif á horfur GC sjúklinga, með marktækt minni heildarlifun hjá þeim sjúklingum með litla LKB1 tjáningu (Mynd 5B). Næst, til að meta forspárgildi LKB1 fyrir ónæmismeðferð, var ICB hópurinn sem samanstóð af GC sjúklingum sem fengu meðferð með pembrolizumabi greindur (tafla 3). Samanborið við GC sjúklinga með mikla LKB1 tjáningu, hafði lág LKB1 tjáning undirhópurinn lækkað hlutlægt svarhlutfall (ORR; mynd 5C). Ennfremur sýndu GC sjúklingar með litla tjáningu á LKB1 verri PFS og OS (Mynd 5D). Fyrri rannsókn sýndi að tjáning PD-L1 mRNA tengdist virkni pembrolizumab meðferðar [6]. Að auki, byggt á LKB1 og PD-L1 tjáningu, voru GC sjúklingar lagskiptir í LKB1 hátt og lágt innan PD-L1 hár og lág tjáningar undirhópa. Eins og sýnt er á mynd 5E höfðu GC sjúklingar með mikla tjáningu bæði LKB1 og PD-L1 hæsta ORR. Fylgni milli PD−L1/LKB1 tjáningar og sameindabreyta hjá GC sjúklingum var tekin saman í töflu 4. Samanlagt gæti LKB1 verið hugsanlegt ónæmiseftirlit til að spá fyrir um svörun við pembrolizumab hjá GC sjúklingum.

Tafla 3. Hlutlæg svörun magakrabbameinssjúklinga við pembrolizumabi.

Tafla 4. Tengsl milli LKB1/PD−L1 tjáningar og sameindabreyta.

mynd 5. LKB1 tjáning spáir fyrir um svörun við pembrolizumab hjá GC sjúklingum. (A) Mikið magn LKB1 tjáningar tengdist langvarandi lifun hjá GC sjúklingum frá 2015 til 2019. (B) Kaplan-Meier plotter sýndi að mikið magn LKB1 lengdi lifun GC sjúklinga. (C) Staflaða stiku- og fossatöflurnar sýna svörun við pembrolizumab í ICB hópnum (n=43) byggt á LKB1 tjáningu. (Pearson's χ2 próf). (D) Kaplan-Meier ferlar yfir framvindu-frjálsa lifun (PFS) og heildarlifun (OS) í ICB hópnum (n=43) byggt á LKB1 tjáningu. (E) Byggt á LKB1 mRNA tjáningu í undirhópum GC sjúklinga með PD−L1 háa og lága tjáningu, sýndi hitakortið svörun við pembrolizumab og sameindabreytur í ICB hópnum (n=43). GS, erfðafræðilega stöðugt; MSI-H, óstöðugleiki örsatellita-hár; EBV, EBV jákvætt; signethringfruma: innsiglishringfrumukrabbamein í maga; ORR, hlutlægt svarhlutfall; SD, stöðugur sjúkdómur; PR, svörun að hluta; PD, versnandi sjúkdómur; CR, fullkomið svar; M/D kirtilkrabbamein, miðlungs aðgreind kirtilkrabbamein; P/D kirtilkrabbamein, illa aðgreint kirtilkrabbamein; W/D kirtilkrabbamein, vel aðgreind kirtilkrabbamein; Blandað (W/D og P/D), vel aðgreint kirtilkrabbamein og illa aðgreint kirtilkrabbamein.

4. Umræður

GC er algengur illkynja sjúkdómur og er þriðja helsta orsök krabbameinsdauða á heimsvísu [17,18]. Á undanförnum áratugum hafa meðferðar- og greiningaraðferðir fyrir GC batnað verulega [19]. Vegna skorts á áhrifaríkum greiningarmerkjum eru sjúklingar hins vegar oft greindir á langt stigi í upphafi, með 5 ára lifun<20% [25,26]. Therefore, there is an urgent need to explore tumor markers with favorable specificity and sensitivity for GC diagnosis. In this study, we first showed that LKB1 expression was decreased in GC serum. Compared with GC diagnostic biomarkers mainly used in clinical practice, including CEA, CA19−9, and a−1−fetoprotein (AFP), LKB1 showed the best specificity and sensitivity. Furthermore, LKB1 was associated with clinical features of GC patients, such as grade, invasion depth, TNM stage, UICC stage, and vital status. These results suggested that LKB1 serves as a tumor suppressor gene and suppresses GC progression.

cistanche plöntuaukning ónæmiskerfi

Smelltu hér til að skoða Cistanche Enhance Immunity vörur

【Biðja um meira】 Netfang:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

LKB1 var upphaflega auðkennt árið 1997 og er einnig þekkt sem STK11 [27]. LKB1 er mikilvægt æxlisbælandi gen hjá mönnum og hjá sjúklingum með lungnakrabbamein sem ekki eru smáfrumukrabbamein (NSCLC) koma LKB1 stökkbreytingar eða erfðafræðilegt tap oft fram samhliða KRAS breytingum. Þessi samsetning leiðir til mjög árásargjarnrar svipgerðar og minni lifun [28-30]. Flestar skýrslur sem tengjast LKB1 hafa aðallega beinst að lungnakrabbameini, með takmarkaðar skýrslur um hlutverk LKB1 í GC. Fyrri rannsókn sýndi að LKB1 tjáning gæti tengst slæmum horfum hjá GC sjúklingum [31]; Hins vegar hefur ekki verið staðfest hvort LKB1 virki sem hugsanlegt greiningarmerki og ónæmismeðferðarmarkmið. Rannsókn okkar sýndi, í fyrsta skipti, að lítil tjáning LKB1 leiddi til lakari meðferðarsvörunar fyrir pembrolizumab hjá sjúklingum með GC, sem bendir til þess að LKB1 gæti verið hugsanlegt ónæmismeðferðarmarkmið.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Nýlega hefur ónæmismeðferð sýnt mikla kosti í klínískri meðferð á GC [32,33]. PD-1/PD-L1 blokkun hefur komið fram sem ný og efnileg meðferðaraðferð [34], sem leggur áherslu á mikilvægi ónæmis gegn æxli og staðla frumudrepandi T eitilfrumur (CTL, CD8+) truflun á krabbameini [35] . Í fjölmörgum krabbameinum stjórnar CTL íferð æxlishvarfs og er talin jákvæður forspárvísir [36]. Hins vegar hafa rannsóknir bent til þess að truflun á CTL í íferð leiði til undanskots frá ónæmiskerfi og að lokum bilunar í að ráðast á krabbameinsfrumur [37]. Sýnt var fram á að PD-1/PD-L1 blokkun útrýma staðfestum æxlum með óvirku CTL sem endurlífgar æxlisónæmi [38]. Við sýndum að PD-1/PD-L1 var mjög tjáð í LKB1-hátjáandi undirhópum GC-sjúklinga, sem bendir til þess að LKB1 gæti tengst T-frumu ónæmiseftirliti. Ennfremur er IFN- frumuvaka sem hindrar afritun veiru og eykur framsetningu sérstakra mótefnavaka sem gefin eru út af CD8+T-frumum [39]. Að auki komumst við að því að T-frumuvirkjun og mótefnavakakynningargen voru einnig mjög tjáð í undirhópum GC sjúklinga, með LKB1 háa tjáningu og T (CD3+CD8+LKB1+, CD3+CD8+CD28+LKB1+) frumur höfðu jákvæða fylgni við IFN− tjáningu í ferskum vefjum GC sjúklinga. Þannig komumst við að þeirri niðurstöðu að LKB1 gæti hindrað seytingu T-frumna (CD3+CD8+, CD3+CD8+CD28+) og er jákvætt tengt við andstæðingur −æxli IFN− tjáning. Undirliggjandi vélbúnaður sem LKB1 er tengdur við frumudrepandi T-frumuvirkjun gefur tilefni til frekari rannsókna.

Heimildir

1. Luebeck, EG; Curtius, K.; Jeon, J.; Hazelton, WD Áhrif æxlisframvindu á tíðniferlar krabbameins. Cancer Res. 2013, 73, 1086–1096. [CrossRef] [PubMed]

2. Li, Y.; Hann, X.; Fan, L.; Zhang, X.; Xu, Y.; Xu, X. Auðkenning á nýju ónæmisspárlíkani í magakrabbameini. Clin. Þýðing. Oncol. 2021, 23, 846–855. [CrossRef] [PubMed]

3. Lutz, þingmaður; Zalcberg, JR; Ducreux, M.; Ajani, JA; Allum, W.; Aust, D.; Bang, YJ; Cascinu, S.; Holscher, A.; Jankowski, J.; o.fl. Hápunktar EORTC St. Gallen International Expert Consensus um aðalmeðferð við maga-, maga- og vélindakrabbameini - Mismunandi meðferðaraðferðir fyrir undirgerðir snemma krabbameins í meltingarvegi. Eur. J. Cancer 2012, 48, 2941–2953. [CrossRef] [PubMed]

4. Thomassen, I.; van Gestel, YR; van Ramshorst, B.; Luyer, læknir; Bosscha, K.; Nienhuijs, SV; Lemmens, VE; de Hingh, IH Peritoneal carcinomatosis af magauppruna: þýðisrannsókn á nýgengi, lifun og áhættuþáttum. Alþj. J. Krabbamein 2014, 134, 622-628. [Krossvísun]

5. Kahraman, S.; Yalcin, S. Nýlegar framfarir í kerfisbundnum meðferðum fyrir HER-2 jákvætt langt gengið magakrabbamein. OncoTargets Ther. 2021, 14, 4149–4162. [Krossvísun]

6. Kono, K.; Nakajima, S.; Mimura, K. Núverandi staða ónæmiseftirlitshemla fyrir magakrabbamein. Magakrabbamein 2020, 23, 565–578. [Krossvísun]

7. Lordick, F.; Shitara, K.; Janjigian, YY Nýir lyf á sjóndeildarhringnum í magakrabbameini. Ann. Oncol. 2017, 28, 1767–1775. [Krossvísun]

8. Zhang, Y.; Meng, Q.; Sun, Q.; Xu, ZX; Zhou, H.; Wang, Y. LKB1 skortur af völdum efnaskipta endurforritun í æxlismyndun og sjúkdómum sem ekki eru æxlissjúkdómar. Mol. Metab. 2021, 44, 101131. [Krossvísun]

9. Kottakis, F.; Nicolay, BN; Roumane, A.; Karnik, R.; Gu, H.; Nagle, JM; Boukhali, M.; Hayward, MC; Li, YY; Chen, T.; o.fl. LKB1 tap tengir umbrot seríns við DNA metýleringu og æxlismyndun. Náttúra 2016, 539, 390–395. [Krossvísun]

10. Su, KH; Dai, S.; Tang, Z.; Xu, M.; Dai, C. Heat Shock Factor 1 er bein mótlyf AMP-virkjaðs próteinkínasa. Mol. Cell 2019, 76, 546–561.e8. [Krossvísun]

11. Olvedy, M.; Tisserand, JC; Luciani, F.; Boeckx, B.; Wouters, J.; Lopez, S.; Rambow, F.; Aibar, S.; Thienpont, B.; Barra, J.; o.fl. Samanburðargreining á krabbameinsfrumum greinir týrósínkínasa FES sem æxlisbælingu í sortuæxlum. J. Clin. Rannsaka. 2017, 127, 2310–2325. [Krossvísun]

12. Hollstein, PE; Eichner, LJ; Brun, SN; Kamireddy, A.; Svensson, HR; Vera, LI; Ross, DS; Rymoff, TJ; Hutchins, A.; Galvez, HM; o.fl. AMPK-tengdu kínasarnir SIK1 og SIK3 miðla lykil æxlisbælandi áhrifum LKB1 við NSCLC. Krabbamein Uppgötv. 2019, 9, 1606–1627. [Krossvísun]

13. Svensson, HR; Parker, SJ; Eichner, LJ; Kolar, MJ; Wallace, M.; Brun, SN; Lombardo, PS; Van Nostrand, JL; Hutchins, A.; Vera, L.; o.fl. Hömlun á asetýl-CoA karboxýlasa bælir fitusýrumyndun og æxlisvöxt lungnakrabbameins sem ekki er af smáfrumugerð í forklínískum líkönum. Nat. Med. 2016, 22, 1108–1119. [Krossvísun]

14. Zeng, Q.; Chen, J.; Li, Y.; Werle, KD; Zhao, RX; Quan, CS; Wang, YS; Zhai, YX; Wang, JW; Youssef, M.; o.fl. LKB1 hamlar framvindu krabbameins sem tengist HPV með því að miða á frumuefnaskipti. Oncogene 2017, 36, 1245–1255. [Krossvísun]

15. Poffenberger, MC; Metcalfe-Roach, A.; Aguilar, E.; Chen, J.; Hsu, BE; Wong, AH; Johnson, RM; Flynn, B.; Samborska, B.; Ma, EH; o.fl. Skortur á LKB1 í T-frumum stuðlar að þróun fjölpípu í meltingarvegi. Vísindi 2018, 361, 406–411. [Krossvísun]

16. Ollila, S.; Domenech-Moreno, E.; Laajanen, K.; Wong, IP; Tripathi, S.; Pentinmikko, N.; Gao, Y.; Yan, Y.; Niemela, EH; Wang, TC; o.fl. Stromal Lkb1 skortur leiðir til æxlismyndunar í meltingarvegi sem felur í sér IL-11-JAK/STAT3 ferli. J. Clin. Rannsaka. 2018, 128, 402–414. [Krossvísun]

17. Sungið, H.; Ferlay, J.; Siegel, RL; Laversanne, M.; Soerjomataram, I.; Jemal, A.; Bray, F. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN áætlanir um nýgengi og dánartíðni á heimsvísu fyrir 36 krabbamein í 185 löndum. CA Krabbamein J. Clin. 2021, 71, 209–249. [Krossvísun]

18. Pons-Tostivint, E.; Lugat, A.; Fontana, JF; Denis, MG; Bennouna, J. STK11/LKB1 mótun ónæmissvörunar í lungnakrabbameini: Frá líffræði til meðferðaráhrifa. Cells 2021, 10, 3129. [CrossRef]

19. Koyama, S.; Akbay, EA; Li, YY; Aref, AR; Skoulidis, F.; Herter-Sprie, GS; Buczkowski, KA; Liu, Y.; Awad, MM; Denning, WL; o.fl. STK11/LKB1 skortur ýtir undir nýliðun daufkyrninga og bólgueyðandi cýtókínframleiðslu til að bæla virkni T-frumna í örumhverfi lungnaæxla. Cancer Res. 2016, 76, 999–1008. [Krossvísun]

20. Janjigian, YY; Maron, SB; Chatila, WK; Millang, B.; Chavan, SS; Alterman, C.; Chou, JF; Segal, MF; Simmons, MZ; Momtaz, P.; o.fl. Fyrsta lína pembrolizumab og trastuzumab í HER2-jákvæðu krabbameini í vélinda, maga eða meltingarvegi og vélinda: Opin, einarma, 2. stigs rannsókn. Lancet Oncol. 2020, 21, 821–831. [Krossvísun]

21. Picard, E.; Verschoor, CP; Ma, GW; Pawelec, G. Tengsl milli ónæmislandslags, erfðafræðilegra undirtegunda og viðbragða við ónæmismeðferð við ristilkrabbameini. Framan. Immunol. 2020, 11, 369. [CrossRef] [PubMed]

22. Kim, ST; Cristescu, R.; Bassi, AJ; Kim, KM; Odegaard, JI; Kim, K.; Liu, XQ; Sher, X.; Jung, H.; Lee, M.; o.fl. Alhliða sameindagreining klínískra svörunar við PD-1 hömlun í magakrabbameini með meinvörpum. Nat. Med. 2018, 24, 1449–1458. [CrossRef] [PubMed]

23. Savas, P.; Virasamy, B.; Já, C.; Salim, A.; Mintoff, CP; Caramia, F.; Salgado, R.; Byrne, DJ; Teó, ZL; Dushyanthen, S.; o.fl. Einfrumuprófun T-frumna í brjóstakrabbameini leiðir í ljós minnisundirhóp sem býr í vefjum sem tengist bættum horfum. Nat. Med. 2018, 24, 986–993. [CrossRef] [PubMed]

24. Brewitz, A.; Eickhoff, S.; Dahling, S.; Quast, T.; Bedoui, S.; Kroczek, RA; Kurts, C.; Garbi, N.; Barchet, W.; Iannacone, M.; o.fl. CD8(+) T frumur Hljómsveit pDC-XCR1(+) Dendritic Cell rýmis- og virknisamvinnu til að hámarka frumun. Ónæmi 2017, 46, 205–219. [Krossvísun]

25. Kinoshita, J.; Yamaguchi, T.; Moriyama, H.; Fushida, S. Núverandi staða umbreytingaaðgerða fyrir stigi IV magakrabbamein. Surg. Í dag 2021, 51, 1736–1754. [Krossvísun]

26. Du, Y.; Wei, Y. Meðferðarmöguleikar náttúrulegra drápsfrumna í magakrabbameini. Framan. Immunol. 2018, 9, 3095. [Krossvísun]

27. Zhao, RX; Xu, ZX Miðar á LKB1 æxlisbælinguna. Curr. Lyfjamarkmið 2014, 15, 32–52. [Krossvísun]

28. Skoulidis, F.; Goldberg, ME; Greenawalt, DM; Hellmann, læknir; Awad, MM; Gainor, JF; Schrock, AB; Hartmaier, RJ; Trabucco, SE; Gay, L.; o.fl. STK11/LKB1 stökkbreytingar og PD-1 hemlaþol í KRAS-stökkbreytt lungnakirtilkrabbamein. Krabbamein Uppgötv. 2018, 8, 822–835. [Krossvísun]

29. Kim, J.; Lee, HM; Cai, F.; Ko, B.; Yang, C.; Lieu, EL; Múhameð, N.; Rhyne, S.; Li, K.; Haloul, M.; o.fl. Hexósamín lífmyndunarferillinn er markhæf ábyrgð í KRAS/LKB1 stökkbreyttu lungnakrabbameini. Nat. Metab. 2020, 2, 1401–1412. [Krossvísun]

30. Kitajima, S.; Tani, T.; Springer, BF; Campisi, M.; Osaki, T.; Haratani, K.; Chen, M.; Knelson, EH; Mahadevan, NR; Ritter, J.; o.fl. MPS1 hömlun frumur ónæmingargetu KRAS-LKB1 stökkbreytts lungnakrabbameins. Krabbameinsfrumur 2022, 40, 1128–1144e1128. [Krossvísun]

31. Hu, M.; Zhao, T.; Liu, J.; Zou, Z.; Xu, Q.; Gong, P.; Guo, H. Minnkuð tjáning LKB1 tengist þekjuvefja-mesenchymal umskiptum og leiddi til óhagstæðra horfa í magakrabbameini. Humm. Pathol. 2019, 83, 133–139. [Krossvísun]

32. Högner, A.; Moehler, M. Ónæmismeðferð við magakrabbameini. Curr. Oncol. 2022, 29, 1559–1574. [Krossvísun]

33. Kole, C.; Charalampakis, N.; Tsakatikas, S.; Kouris, NI; Papaxoinis, G.; Karamouzis, MV; Koumarianou, A.; Schizas, D. Ónæmismeðferð við magakrabbameini: Uppfærsla 2021. Ónæmismeðferð 2022, 14, 41–64. [Krossvísun]

34. Oliva, S.; Troia, R.; D'Agostino, M.; Boccadoro, M.; Gay, F. Loforð og gildrur í notkun PD-1/PD-L1 hemla við mergæxli. Framan. Immunol. 2018, 9, 2749. [Krossvísun]

35. Farhood, B.; Najafi, M.; Mortezaee, K. CD8(+) frumudrepandi T eitilfrumur í krabbameinsónæmismeðferð: endurskoðun. J. Cell. Physiol. 2019, 234, 8509–8521. [Krossvísun]

36. Kalathil, SG; Thanavala, Y. Natural Killer frumur og T frumur í lifrarfrumukrabbameini og veiru lifrarbólgu: Núverandi staða og sjónarhorn fyrir framtíðar ónæmismeðferðaraðferðir. Cells 2021, 10, 1332. [CrossRef]

37. Zhang, H.; Jiang, R.; Zhou, J.; Wang, J.; Xu, Y.; Zhang, H.; Gu, Y.; Fu, F.; Shen, Y.; Zhang, G.; o.fl. CTL-dempun stjórnað af PS1 í krabbameinstengdum trefjafrumum. Framan. Immunol. 2020, 11, 999. [Krossvísun]

38. Xiao, M.; Xie, L.; Cao, G.; Lei, S.; Wang, P.; Wei, Z.; Luo, Y.; Fang, J.; Yang, X.; Huang, Q.; o.fl. CD4(+) T-frumu epitope-based heterologous prime-boost bólusetning eykur ónæmi gegn æxli og PD-1/PD-L1 ónæmismeðferð. J. Immunother. Krabbamein 2022, 10, e004022. [Krossvísun]

39. Wang, W.; Grænn, M.; Choi, JE; Gijón, M.; Kennedy, PD; Johnson, JK; Liao, P.; Lang, X.; Kryczek, I.; Selja, A.; o.fl. CD8+ T frumur stjórna æxlismyndun meðan á ónæmismeðferð með krabbameini stendur. Náttúra 2019, 569, 270–274. [Krossvísun]