Phloridzin-næmur flutningur á Echinacoside og Acteoside og breyttri frásogsleið í þörmum eftir notkun á Cistanche Tubulosa þykkni

Fyrir frekari upplýsingar:ali.ma@wecistanche.com

Tadatoshi Tanino o.fl

Ágrip Markmið

Markmið þessarar rannsóknar var að fjalla um jákvæð áhrifCistanche tubulosa þykknium að bæta lágt þarma gegndræpi echinacoside (ECH) og acteoside (ACT).

Aðferðir

Frásog ECH og ACT íCistanche tubulosa þykknieinkenndist með því að nota Caco-2 frumu einlög úr þörmum manna með ósnortnum efnasamböndum. Glúkósaflutningaháð frásog ECH og ACT var staðfest með gegnflæðistækni í meltingarvegi.

Helstu niðurstöður

Augljóst gegndræpi (Papp) var ekki marktækur munur á ósnortnu ECH og ósnortnu ACT. Í viðurvist phloridzins var Papp af ECH og ACT í stórum skömmtum lækkað í 20 prósent af viðkomandi ómeðhöndlun en var ekki breytt af phloretin og verapamil.Cistanche tubulosa þykknií litlum og stórum skömmtum jókst Papp af ECH og ACT (bæði um þrefalt), sem leiddi til mikillar þátttöku þeirra í natríumháðu glúkósaflutningsóháðu frásogi. Við lágan styrk voru samhliða ECH og ACT gildi í portalblóði verulega bæld af flóridzíni.

Niðurstaða

Mataræði og lyfCistanche tubulosa þykkniefling frásogs ECH og ACT í þörmum getur þjónað betri stjórn á heilsu manna, þó að draga ætti úr þátttöku phloridzinnæmra flutninga.

Leitarorðakteósíð; Caco-2 frumueinlög;Cistanchetubulosa þykkni; echinacoside;phloridzin-næmur glúkósaflutningsefni

Cistanche tubulosa þykkni

Smelltu til Cistanche tubulosa duft

Kynning

Rætur Cistanche tubulosa hafa jafnan verið notaðar í lyf og mat.Cistanche tubulosa þykknivitað er að það hafi lyfjafræðileg áhrif á ýmsa heilasjúkdóma, gegn öldrun, fituefnaskiptum og hárvexti.[1–4] Nýlega hafa iridoids, monoterpenoids, phenylethanoidglycosides og lignans verið einangraðir úrCistanche tubulosa.[5,6] Fenýletanóíð glýkósíð, flokkur fjölfenólefnasambanda, eru helstu efnafræðilegu innihaldsefnin í Cistanche tegundum, [7] þó að magn þeirra sé mismunandi eftir mismunandi tegundum. Echinacoside (ECH; mynd 1) er eitt af helstu fenýlethanoid glýkósíðum í HerbaCistanchis. Það er vatnsrofið í akteósíð (ACT; einnig kallað verbascoside) með ensímum af bakteríuuppruna í þörmum.[8,9] ECH og ACT hafa jákvæða virkni lifrarverndar[10] og bólgueyðandi[11] hjá nagdýrum. Það kemur á óvart að mjög vatnsleysanlegt ECH bætir hegðunar- og taugaefnafræðilegar niðurstöður í múslíkani af Parkinsonsveiki og hindraði virkjun kaspasa-3 andcaspasa-8 í taugafrumum heilakorna.[9] Það er vel þekkt að blóð-heila þröskuldurinn takmarkar stranglega innkomu og dreifingu útlendingalyfja inn í heilann úr blóði. Wu o.fl.[12] sýndi einnig að vatnsleysanlegt ACT dreifðist hratt í heilavef rotta. Þess vegna getur ECH og ACT verið flutt inn í heila, þörmum og lifur með tilteknu kerfi/kerfi.

Þó að sterkar vísbendingar séu um að neysla áCistanche tubulosa þykknier gagnlegt fyrir heilsu manna, gegndræpi hreins ECH yfir Caco{0}} frumueinlög í apical styrkleika sem er 8,4 ± 1,6 ug/ml er jafn eða lægri og paracellular flutningsmerkimannitóls.[13] Þegar hreint ECH er gefið rottum til inntöku (skammtur, 1{{10}}0 mg/kg), er frásogið mjög hratt (Tmax,15 mín) og hámarksþéttni í sermi er mjög lág. (Cmax, 0,61 ± 0,32 ug/ml).[14] Heildaraðgengi ECH er aðeins 0,83 prósent . Á sama hátt, þegar Caco-2 frumur eru ræktaðar með fenólhluta sem er hreinsað að hluta úr afrennsli úr ólífuverksmiðju, er hrein ACT upptaka hröð með hámarksuppsöfnun á sér stað eftir 30 mínútur og heildaruppsöfnunarvirkni upp á 0,1 prósent, sem gefur innanfrumugildi upp á 130 pmol/mg frumuprótein.[15] Hjá rottum náðist hámarksstyrkur (0,13 ± 0,03 ug/ml) af hreinu ACT innan 30 mínútna eftir inntöku með 100 mg/kg, [12] sem gefur til kynna hröð frásog í þörmum. Aðgengi ACT til inntöku, sem og ECH, er frekar lágt (0,12 ± 0,04 prósent), sem bendir til möguleika á fyrstu umferðaráhrifum í meltingarvegi og lifur. Í galli hjá rottum eru metýlering og glúkúróníðunarsamtengingar ECH helstu umbrotsefni, [16] þó að umfang efnaskipta í lifur sé enn óljóst. Við komumst fyrst að því að ECH og ACT voru nokkuð stöðugar í samruna þarmaslímhúð rotta og gervimagasýru (gögn ekki sýnd). Najar o.fl.[17] sýndi fram á að ACT hamlar P-glýkóprótein (P-gp)-ATPasa virkni á svipaðan hátt og verapamíl (fulltrúi P-gp hemill), sem gefur til kynna P-gp mótara; hins vegar er óvíst hvort ACT sé fáanlegt sem P-gp hvarfefni. Athyglisvert er að nýlegar niðurstöður flavonoid-D-glúkósíða í mataræði sýndu að fjöllyfjaþolsprótein (MRP2) duldi natríumháða glúkósaflutningsmiðla (SGLT)1-miðlaða upptöku quercetin 4'-O- -glúkósa,[18 ,19] sem er ábyrgur fyrir mjög lélegri upptöku. Hins vegar er mjög lítið vitað um næmni pólýfenólglúkósíða fyrir frásogandi flutningsefnum, þar með talið glúkósaflutningsefnum. Upplýsingar um frásogseinkenni quercetin4'-glúkósíðs og hratt blóð-heilaþröskuldar gegndræpi ECH leiddu til þess að við könnuðum flutningsnæma upptöku á díehanglýsýleti. tubulosa.

Í þessari rannsókn könnuðum við glúkósaflutningsmiðlaða frásog ósnortna ECH og ACT með því að nota Caco-2 frumu einlög í þörmum. Samtímis frásogsflutningi ECH og ACT samhliða fæðutegundaCistanche tubulosa þykknieinkenndist af in vitro líkani og in-situ gegnflæðiskerfi í þörmum með portalblood sýnatöku, sem getur auðveldlega greint á milli umfangs frásogs og forðast fyrstu leið í lifur.

Efni og aðferðir

Efni

Intact ECH og ACT voru rausnarlegar gjafir frá EishinTrading Co., Ltd (Osaka, Japan). Phloridzin og phloretin voru keypt frá Tokyo Kasei Co., Ltd. (Tokyo, Japan). Verapamil og p-kúmarsýra, notuð sem innri staðlar fyrir hágæða vökvaskiljun (HPLC) prófun, voru fengin frá Sigma-Aldrich (St Louis, MO) ,BANDARÍKIN). Öll önnur efni sem notuð voru voru af greiningargráðu og fáanleg í viðskiptum.

Plöntuefni og framleiðsla á etanólútdrætti

C. tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) er ævarandi sníkjudýr planta sem vex á rótum Salvadoraor Calotropis tegunda og er dreift í Norður-Afríku, Arabíu og Asíu. Þurrkaðir stilkar af C. tubulosa voru duftformaðir og dregin út þrisvar sinnum með metanóli undir bakflæði í 3 klst. Uppgufun á leysinum undir lækkaðum þrýstingi veitti metanólútdrættinum. Þemaþykkni (viðskiptaeinkunn, lotunúmer 20070130; viðskiptaheiti, Sabaku Ninnjinn Kanka) var rausnarleg gjöf frá Eishin Trading Co., Ltd í gegnum Muraoka og Morikawa (Kinki University, Japan), og grasafræðileg auðkenning var framkvæmd af prófessor Jia Xiaoguang í Xinjiang Institute of Traditional Chinese and Ethnologic Medicines.

Plöntuþykknigreining: litskiljun

Við ákváðum ECH og ACT innihald íCistanche tubulosa þykkni(lotunr. 20070130) með HPLC greiningu sem lýst er hér að neðan. Gögnin sem fengust eru sýnd í töflu 1.

Frumuræktun

Caco{{0}} frumur, keyptar frá American Type CultureCollection (ATCC, Rockville, MD, Bandaríkjunum), voru notaðar í göngum 38–53. Þau voru ræktuð í ræktunarmiðli sem samanstóð af Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM, Nacalai Tesque Co., Kyoto, Japan) ásamt 0.1 mM ónauðsynlegum amínósýrum, 10 prósent hitaóvirkjuð fóstursermi, 100 U/ml penicillín G og 0,1 mg/ml streptomycin súlfat.

Samgöngufræði

Caco-2 frumur voru húðaðar með þéttleikanum 6,4 × 103 frumur/cm2 á pólýkarbónatsíur. Einlög voru notuð til flutningstilrauna 21–25 dögum eftir sáningu. Ósnortinn ECH ogACT sem jafngiltu innihaldi þeirra íCistanche tubulosa þykkni (4.5 and 13.5 mg/ml) were mixed with DMEM medium containing 0.5% dimethylsulfoxide to maintain the integrity of the cell monolayer over the periods of the experiments. Intact ACT equivalent to ECH content in the extract was also dosed in the incubation medium. The extract was suspended in a DMEM medium and was centrifuged to remove insoluble components. Supernatants were loaded to the apical side. At the indicated times, an aliquot of the incubation medium was withdrawn from the basolateral side and was mixed with acetonitrile containing an internal standard for the assay. In separate experiments, phloridzin (final concentration, 1 mM) and verapamil (final concentration, 0.2 mM) was added to the apical side of the monolayer; however, phloretin (final concentration, 0.3 mM) was treated on both sides of the monolayer. The integrity of monolayers was monitored by transepithelial electrical resistance (TEER) using Millicell-ERS (Millipore, Bedford, MA, USA) before and after transport experiments. TEER values of monolayers used were >300 Ω·cm2.

Echinacoside íCistanche tubulosa þykkni

In-situ gegnflæði í þörmum

Wistar karlkyns rottur (230–250 g) voru fengnar frá SLCJapan (Hamamatsu, Japan). Dýr voru geymd í loftkældu herbergi undir 12 klst ljós/myrkri hringrás í 1 viku fyrir notkun. Rottum var gefið venjulegt rannsóknarstofumat (Oriental Yeast Co., Ltd., Tókýó, Japan) með vatni að vild og þeim var fastað yfir nótt fyrir prófunina. Rannsóknin á innrennsli í hringrásinni var gerð samkvæmt breyttri aðferð sem lýst er af Mihara o.fl. [20] Í stuttu máli voru rottur svæfðar með 25 prósenta úretanlausn (1 mg/kg) til að forðast blóðþrýstingslækkun. Gerður var skurður á kviðarholi á miðju kviðarholi og smágirnin afhjúpuð. Gallgangurinn var bundinn til að forðast gallseytingu inn í gegnflæðið. Allur smáþarmurinn sem einn hluti (frá skeifugörn til þvagleggs) var skolaður með venjulegu saltvatni við 37 gráður í 10 mínútur þar til þvotturinn virtist tær. Glerslöngur sem tengdar voru við sílikonslöngur voru síðan settar inn í báða enda smágirnis og festir með saumþræði. Síðan var skipt um smágirni í kviðnum og æðarnar tengdar við peristaltic dælu. Gáttbláæð var holræsi með pólýetýlen slöngu (PE10).Cistanche tubulosa þykknifáanlegt í verslun var dreift í Krebs–Henseleit bíkarbónatbuffi (pH 7,4) til að gefa lokastyrk upp á 4,5 mg/ml og var skilið í skilvindu í 10 mín. við 8000 snúninga á mínútu til að fjarlægja óleysanleg efni. Fljótandi vökvi í fjarveru eða nærveru flóridzíns (1 mM) var safnað í lón, sem var haldið við hitastigið 37 ± 0,5 gráður meðan á tilrauninni stóð. Á tilgreindum tímum var blóð tekið í gegnum portal vene cannula. Eftir skilvindu blóðsýna var blóðvökvinn sem fékkst afpróteinað með asetónítríl sem innihélt innri staðalinn og var skilið í skilvindu við 3000 rpm. Fljótandi vökvar voru látnir gufa upp og leifin var leyst upp með hreyfanlegum fasa sem samanstóð af asetónítríl og 0,5 prósent ediksýru. Blandaða lausnin var sett á HPLC súlu. Rottur voru notaðar í samræmi við siðareglur í samræmi við leiðbeiningar um umönnun og notkun tilraunadýra sem gefin voru út af japönskum stjórnvöldum og Kinki háskólanum.

HPLC greining

HPLC greining var gerð á kerfi með aShimadzu SPD{{0}}A, UV skynjara, Shimadzu LC-10A dælu og Shimadzu C-R4A chromatopac samþættara (Kyoto, Japan). ECH og ACT voru aðskilin með Inertsil ODS-súlu (5 μm, 4,6 × 150 mm, GL Sciences Inc., Osaka, Japan). Hreyfanlegur fasi asetónítríls og 0,5 prósenta ediksýra í hlutfallinu 15:85 (v/v) var notaður við flæðihraða 1,0 ml/mín. Greining var framkvæmd við 334 nm

Hreyfifræðileg greining

Sýnilegir gegndræpisstuðlar (Papp) voru metnir út frá halla línulega hluta tímaferils samsetts flutnings yfir Caco-2 frumu einlög, sem hér segir: P dQ dt AC app=( ) ( )

þar sem dQ/dt er gegndræpishraði, C0 er upphafsstyrkur uppleystra efnisins í gjafahólfinu og A er yfirborðsflatarmál himnunnar (4,7 cm2).

Í rotturannsókninni á þarmaflæðisflæði á staðnum var flatarmálið undir plasmaþéttni-tíma ferlinum (AUC0–90) í portbláæð frá tíma núlls þar til síðast mældist reiknað samkvæmt línulegu trapisureglunni.

Acteoside íCistanche tubulosa þykkni

Eðlisefnafræðilegir eiginleikar

Skautað yfirborð og óskautað yfirborð efnasambanda voru reiknuð út með því að nota forritið SAS (útgáfa 0.8,Olsson, T.; Sherbukhin, V., Synthesis and Structure Administration, 1997–2001, AstraZeneca, Cary , NC, Bandaríkjunum). Tilraunaákvörðuð log P og pKa gildi voru fengin úr bókmenntum.

tölfræðigreining

Gögnin voru greind með einhliða dreifigreiningu og síðan Tukey's post-hoc próf. Líkindagildi undir 5 prósentum voru talin marktæk.

Niðurstöður

Gleypandi flutningur á echinacoside og acteoside gegnum Caco-2 frumueinlög

Hjá músum og rottum eru ósnortin ECH[10,14] og ACT[12,21] gefin um munn í skömmtum 100-1000 mg/kg. TheCistanche tubulosa þykkninotað innihélt um það bil 30 prósent ECH og 15 prósent ACT í hverjum skammti. Þar sem útdrátturinn breytti osmósuþrýstingi og pH í ræktunarmiðlinum var styrkur 4,5 og 13,5 mg/ml ákvarðaður út frá inntökuskammtinum (ósnortinn efnasambönd: 2–20 mg/2{{2{{31} }}} g líkamsþyngdar) í músum. Útdrátturinn í litlum (4,5 mg/ml) og stórum skömmtum (13,5 mg/ml) innihélt 2.0 og 6.1 mg fyrir ECH og 1.0 og 3.0 mg fyrir ACT, í sömu röð. Við notuðum C. tubulosa þykkni magn sem var mun lægra en skammturinn til inntöku af ECH og ACT sem greint var frá hjá mönnum (ráðlagður mataræði af útdrætti: 150 mg sem inniheldur um það bil 45 mg fyrir ECH og 22,5 mg fyrir ACT). Við lága og stóra skammta af ósnortnum efnasamböndum voru frásogssnið (Mynd 2) og Papp ekki marktækt frábrugðin ECH og ACT sem ECH jafngildi (tafla 2). Þegar C. tubulosa þykkni með stórum skammti 13,5 mg/ml var hlaðið í miðilinn, Pappvalues ​​(1,27 ± 0.13 og 0.34 ± 0.03 × 10-6 cm/s, í sömu röð) af ECH og ACT samhliða lyfjum voru þrefalt hærri en (0,38 ± 0,09 og 0,10 ± 0,03 × 10−6 cm/s, í sömu röð) af ósnortnu ECH og ACT (tafla 2). Útdrátturinn, ólíkt ósnortnum efnasamböndum, jók verulega frásogsflutning ECH og ACT.

Hamlandi áhrif phloridzin, phloretin og verapamil

To characterize the intestinal absorption of ECH and ACT, Caco-2 cell monolayers were incubated with representative inhibitors. Apical glucose transporter 1-sensitive phloridzin dramatically reduced the Papp of intact ECH and ACT to 20% of non-treatment at the high dose (Table 2). Basolateral glucose transporter (GLUT) 2-sensitive phloretin did not decrease the transport of intact ECH and ACT (Figure 3). In this study, higher concentrations (>Ekki var hægt að nota 0,3 mM) af flóretíni vegna áberandi eiturverkana á frumum. Að auki hefur P-gp verið skilgreint sem mikilvægur aðili sem ber ábyrgð á milliverkunum á milli náttúrulyfja og klínískt mikilvægra P-gp hvarfefna. Verapamil jók ekki frásogsflutning ósnortinna efnasambanda (mynd 3).

Frásogsflutningur ECH og ACT í útdrættinum (lítill skammtur) var marktækt hamlað af phloridzini (tafla 2 og mynd 4). Útdrátturinn í stórum skömmtum bældi hömlun sem er næm fyrir flóridzíni, þó að flutningur ósnortna ECH og ACT hafi verið næmari fyrir flóridzíni (tafla 2).

Rannsóknin á gegnflæði í þörmum á staðnum

Í rannsókn á staðnum prófuðum við hvort ECH og ACT íCistanche tubulosa þykknivoru fluttar með SGLT1 staðsett á apical hlið smáþarma. Þegar mataræðisþykknið í litlum skömmtum (4,5 mg/ml) var gefið í gegn, komu ECH og ACT fljótt fram í gáttblóði (mynd 5). AUC var ákvarðað sem 2702,8 ± 384,1 μm·mín fyrir ECH og 698,3 ± 197,2 μm·mín fyrir ACT. Eftir að AUC var staðlað með innihaldi fráCistanche tubulosa þykkni, frásogað magn var ekki marktækt frábrugðið ECH og ACT. SGLT1-næmt flóridzín, ólíkt flóretíni, bældi marktækt frásogsflutning ECH (AUC, 649,4 ± 248,2 μm·mín) og ACT (ekki greint).

Umræða

Sum náttúrulyf eru hvarfefni P-gp sem er mjög tjáð í lifur, þörmum, heila og nýrum. P-gp er ákvarðandi þáttur fyrir lífaðgengi, ráðstöfun og dreifingu náttúrulyfja, þar á meðal Jóhannesarjurt, curcumin, echinacea, ginseng, ginkgo og engifer.[22,23]Lífaðgengi genisteins{{5} }glúkósíð, flavonoid afleiða, var einnig takmörkuð af MRP2 flutningsefni í þörmum.[24] Þess vegna var þessi rannsókn hönnuð til að kanna frásogseiginleika ECH og ACT samhliða fæðu og lyfjaCistanche tubulosa þykkni.

Skautuð Caco{{0}} frumueinlög, sem og þörmum,[25], tjá helstu lyfjaútflæðisflytjendur í þörmum, svo sem P-gp, MRP og brjóstakrabbameinsþolsprótein.[26]Flavónóíð í fæðu. Sýnt hefur verið fram á að quercetin[27] og myricetin[28] hamlar P-gp-miðluðu útflæði bæði í frumulínum og dýralíkönum. Verapamil, P-gp hemill, breytti ekki gegndræpi ACT og ECH yfir Caco-2frumumeinlög (Mynd 3), sem gefur til kynna að ósnortið ECH og ACT væru ekki takmörkuð af P-gp útflæðisdælunni. Fyrri rannsóknir okkar sýndu að MRP2 prótein voru ekki tjáð í Caco-2 frumueinlögum.[29] P-gp og MRP2-miðlað útflæði gæti verið útilokað í ECH og ACT flutningi. Sum glýkósíð quercetins með litla fitusækni frásogast á skilvirkari hátt en quercetin sjálft.[30] Það er líka mikilvægt að hafa í huga að ACT með sykurhluta dreifist hratt í heilavef. Athygli okkar hefur beinst að samsettri virkni tveggja glúkósaflutningsefna í innyfrumum: SGLT í bursta-mörkum himnunnar og auðveldað dreifingu glúkósaflutnings (GLUT) í basolateral himnunni. Hægt er að nota Caco-2 frumurækt sem fyrirmynd til að rannsaka flóretínnæm GLUT2, og flóridzínnæm SGLT1 og 2 flutningsefni.[31–34]Glúkósa er flutt frá apikali til basóhliðar Caco-2 einlaga á háum hraða með Pappof 36,8 ± 1,1×10−6 cm/s.[35] Það hefur hærra Pappthan en transfrumuflutningsmerkið própranólól (23,4 ± 2,8 × 10-6 cm/s). Eins og sýnt er í töflu 2, hafði ósnortinn ECHand ACT mun lægra Papp en það sem greint er frá í glúkósa og óvirku própranólóli. Við reiknuðum lógaritma skiptingarstuðulsins (oktanól-vatn), log P, var reiknaður til að vera -2,32 og 0,077 fyrir ECH og ACT, í sömu röð. Talið er að skautuð vatnssækin efnasambönd séu flutt í gegnum parafrumuleið (í gegnum þétt mót). Tveggja fenýletanóíð glýkósíð, eins og mannitól, virðast vera flutt í gegnum parafrumuleið. Hins vegar minnkaði phloridzin verulega frásog gegndræpi ósnortna ECH og ACT (tafla 2), sem bendir til þess að apicalSGLT1 gegni stóru hlutverki í frásogi ósnortna ECH og ACT í þörmum. Við jafngildan skammt var hærra vatnsfælin ACT gegndræpi nálægt ECH gegndræpi (Mynd 2 og Tafla 2). Yoshikawa o.fl.[36] hafa sýnt fram á að auðvelda flutningsefni (GLUT 1 og 2), sem og phloridzin-næmt SGLT1, eru ákaft tjáð í smáþörmum. Þar sem frásogað magn efnasambanda er byggt á massajafnvægi milli upptöku og brotthvarfs, metum við þátttöku GLUT2. Glúkósi fer yfir apical himnur enterocytes með SGLT1 með mikilli sækni og lítilli afkastagetu og fer yfir basolateral himnuna í gegnum GLUT2 með lítilli sækni og mikilli getu. Phloretin (sérstakur hemill GLUT2) afnam ekki flutning á ósnortnum ECH og ACT (mynd 3). Funes o.fl.[37] sýndi fram á að ACT hafði sterk samskipti við fosfathópa fosfólípíðhimna. Þar sem hýdroxýlhópar eru mikið í ACT uppbyggingunni eru vetnistengi á milli þessara hópa og glýserólskauthausa eða fosfathópa fosfólípíða líklegastu milliverkanirnar sem eiga sér stað. Þegar ósnortið ECH og jafngild ACT þess voru ræktuð með Caco-2 einlögum í 11 klst, var uppsöfnun ACT (0,24 ± 0,04 nmól/cm2) í frumum þrefalt meiri en ECH (0,07 ± 0,01 nmól/cm2). Við héldum að SGLT1-næmur ECH og ACT færust hægt frá innyfrumum í blóðrásina, sem gæti leitt til lágs Papps sem sést. Í samanburði við mjög vatnssækið ECH getur lágt gegndræpi ACT stafað af innlimun inn í frumuhimnur.

Cistanche tubulosa þykkni

Pólýfenólsambönd eru neytt í jurtablöndur meðan á klínískri notkun þeirra stendur og eru fáanleg sem fæðubótarefni. Í in vitro rannsókn var sýnt fram á að frásog phenolic epicatechin var ekki fyrir áhrifum af innihaldsefnasamsetningu drykkjarfóðurefna.[38] Aftur á móti, Hypericum perforatumL. afurðafylki hefur áhrif á flutning quercetinglúkósíða (rútíns og ísókresítríns) og ofurósíðs yfir Caco-2 frumur vegna mismunar á fylkisfytókemískum samsetningu og flutningseiginleikum, þ.e. parafrumuflutningi og burðarmiðluðum eða virkum flutningi.[39] Í þessari rannsókn veitti C. tubulosa þrefalt meiri þekjuflutninga en ósnortinn ECH og ACT (Mynd 2 og Tafla 2). Við gerum ráð fyrir að íhlutir íCistanche tubulosa þykknivirkja phloridzin-næma flutningsefnið og/eða flýta fyrir brotthvarfi innanfrumuECH og ACT.Cistanche tubulosa þykknivið stóra skammtinn virtist hylja verulega virkni flóridzínnæma flutnings (tafla 2). Fæðukolvetni[40] og prótein[41]víxlverkun við sum pólýfenól í meltingarvegi.Morikawa et al.[10] sýnt fram á að hægt væri að einangra fimm iridoids, kankanósíður AD og kankanól, mónóterpen glýkósíð, kankanósíð E, tvö fenýletanóíð fáglýkósíð, kankanósíður F og G, og asýlaðan fásykur, kankanósa, úrCistanche tubulosa þykkni

sem nú er notað. Önnur innihaldsefni, þar á meðal prótein íCistanche tubulosa þykkni, enn óljóst. Ásamt ofangreindum vangaveltum erum við hönnuð til að kanna hvort aðrir þættir hafi samskipti við SGLT1 og hamli frásogi ECH og ACT.

In vivo tilraunir geta ekki auðveldlega greint á milli umfangs frásogs og forðast fyrstu umferð um lifur. In-situ gegnflæðislíkanið í þörmum hefur yfirburði fram yfir in vivo og in vitro líkanið vegna auðveldrar stjórnunar á tilraunabreytum og útilokunar á áhrifum annarra líffæra og viðhalds á ósnortnum blóðflæði í þörmum.[22] Þátttaka flóridzínnæma glúkósaflutningsefnisins var metin í gegnflæðiskerfi í þörmum á staðnum. Eins og sýnt er á mynd 5, frásogað magn ECH og ACT samhliða íCistanche tubulosa þykkni (low dose) were greatly abolished by phloridzin, which agrees with our in-vitro data (Figure 4). Using peptides and 20 drugs passively absorbed, a good correlation is obtained between in-vivo drug absorption and the drug permeability of Caco-2 monolayers.[42] Drugs with a Papp of >1 × 10-6 cm/s frásogast að fullu í mönnum á meðan lyf og peptíð frásogast illa (<1% of="" dose)="" have="" papp="" values="" of=""><1 ×="" 10−7="" cm/s.="" surprisingly,="" the="" papp="" of="" the="" ech="" concomitant="" (high="" dose)="" was="">1 × 10−6 cm/s (tafla 2), sem bendir til mikils aðgengis til inntöku hjá dýrum og mönnum. Crespy o.fl.[43] sýndi fram á að útflæði í innflæðisrannsókn á þörmum á staðnum var ekki marktækur munur á flóridzíni og flóretíni. Þeir [44] sýndu einnig að aðgengi flóridzíns til inntöku með mikið næmi fyrir SGLT1 var aðeins 10 prósent hjá rottum. Framtíðarrannsóknir þurfa að meta aðgengi og fyrstu umferðaráhrif á lifur af ECH samhliða eftir inntöku fæðuseyðisins í stórum skömmtum. Niðurstöður á staðnum gefa til kynna að inntaka áCistanche tubulosa þykknigetur bætt lágt frásog ósnorts ECH og ACT um munn.

Niðurstaða

Mataræði og lyfCistanche tubulosa þykkniefling frásogs ECH og ACT í þörmum getur þjónað til betri stjórnun heilsu manna, þó ætti að draga úr þátttöku flóridzínnæma flutninga.

Yfirlýsingar

Hagsmunaárekstrar

Höfundar/höfundar lýsa því yfir að þeir hafi enga hagsmunaárekstra að upplýsa

Fjármögnun

Þessi vinna var að hluta til studd af High-Tech Research Center frá Kinki háskólanum.

Viðurkenningar

Höfundarnir vilja þakka Osamu Muraoka (Kinki University, Osaka, Japan) og Toshio Morikawa (Kinki University, Osaka, Japan) fyrir framboð áCistanche tubulosa þykkniog hreinir efnisþættir. Við erum mjög þakklát Masahiro Iwaki (Kinki University) fyrir námsstuðninginn.

Cistanche tubulosa þykknivörur

Frá: ' Phloridzin-næmur flutningur á echinacoside og acteoside og breytt frásogsleið í þörmum eftir notkun áCistanche tubulosa þykkni' eftirTadatoshi Tanino o.fl

---© 2015 Royal Pharmaceutical Society, Journal of Pharmacy and Pharmacology, 67, bls. 1457–1465,Fenýletanóíð glúkósíð flutt með SGLT1

Heimildir

1. Tanaka J o.fl. Áhrif afCistanche tubulosa þykknium ýmsa heilasjúkdóma. Matarstíll 21 2008; 12:24–26.

2. Tanaka J o.fl. Aðgerðir gegn öldrunCistanche tubulosa þykkni. Matarstíll 21 2008; 12:27–29.
3. Tanaka J o.fl. Fegurð og hárvöxtur aðgerðir afCistanche tubulosa þykkni. Matarstíll 21 2008; 12:29–32.
4. Tanaka J o.fl. Áhrif fituefnaskiptaCistanche tubulosa þykkni. Matarstíll 21 2008; 12:30–33.
5. Yoshizawa F o.fl. Innihaldsefnin í Cistanche tubulosa Schrenk (Hook) f.II. einangrun og uppbyggingu nýs fenýletanóíð glýkósíðs og nýs neolignan glýkósíðs. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930.
6. Yoshikawa M o.fl. Phenylethanoid oligoglycosides og acylated oligosugars með æðaslakandi virkni frá Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475.
7. Tu PF o.fl. Greining á fenýletanóíð glýkósíðum af Herba cistances með RP-HPLC. Yao Xue Xue Bao 1997; 32: 294–300.
8. Lei L o.fl. Umbrotsstjórnun fenýletanóíð glýkósíða frá Herba cistanches í meltingarvegi hunda. Yao Xue Xue Bao 2001; 36: 432–435.
9. Geng X o.fl. Taugaverndandi áhrif echinacosides í MPTP múslíkani af Parkinsonsveiki. Eur J Pharmacol 2007; 564: 66–74.
10. Morikawa T o.fl. Asýleruð fenýletanóíð fáglýkósíð með lifrarverndandi virkni frá eyðimerkurplöntunni Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2010; 18: 1882–1890.
11. Paola RD o.fl. Áhrif verbascoside, líftæknilega hreinsað með syringa Vulgaris plöntufrumuræktun, í nagdýralíkani af tannholdsbólgu. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 707–717.
12. Wu YT o.fl. Ákvörðun akteósíðs í Cistanche deserticola og Boschniakia rossica og lyfjahvörf þess hjá rottum sem hreyfa sig frjálslega með LC-MS/MS. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci 2006; 844: 89–95.
13. Matthías A o.fl. Gegndræpisrannsóknir á alkýlamíðum og koffínsýrusamböndum úr echinacea með því að nota caco-2 frumu einlaga líkan. J Clin Pharm Therapeut 2004; 29:7–13.
14. Jia C o.fl. Ákvörðun á echinacoside í rottusermi með öfugfasa hágæða vökvaskiljun með útfjólubláu greiningu og beitingu þess á lyfjahvörf og aðgengi. J Chromatogr 2006; 844: 308–313.
15. Cardinali A o.fl. Verbascosides úr ólífumyllavatni: mat á aðgengi þeirra og upptöku í þörmum með því að nota in vitro meltingu/kakó-2 líkankerfi. J Food Sci 2011; 176: H48–H54.
16. Jia C o.fl. Umbrot echinacoside, gott andoxunarefni, í rottum: einangrun og auðkenning á umbrotsefnum þess í galli. Drug Metab Dispos 2009; 37: 431–438.
17. Najar IA o.fl. Stöðun P-glýkópróteins ATPasa virkni með sumum plöntuþáttum. Phytother Res 2009; 24: 454–458.
18. Walgren RA o.fl. Útstreymi flavonoid quercetin 4'-beta-glúkósíðs í fæðu yfir þörmum caco-2 frumueinlaga einlög frá apical fjöllyfjaónæmistengdu próteini-2. J Pharmacol Exp Ther 2000a; 294: 830–836.
19. Walgren RA o.fl. Frumuupptaka á flavonoid quercetin 4'-beta-glúkósíðasa í fæðunni af natríumháðum glúkósaflutningsefni SGLT1. J Pharmacol Exp Ther 2000b; 294: 837–843.
20. Mihara K o.fl. Umbrot eperisons í fyrstu umferð í þörmum hjá rottum. Pharm Res 2001; 18: 1131–1137.
21. Isacchi B o.fl. Ofnæmislækkandi virkni verbascosides í tveimur gerðum af taugaverkjum. J Pharm Pharmacol 2011; 63: 594–601.

22. Cook TJ o.fl. Gegndræpi í þörmum klórpýrifos með því að nota einhliða þarmaflæðisaðferð hjá rottum. Eiturefnafræði 2003; 184: 125–133.

23. Kumar YS o.fl. P-glýkóprótein- og cýtókróm P-450-miðluð milliverkun jurtalyfja. Drug Metabol Drug Interact 2010; 25: 3–16.
24. Walle UK o.fl. Flutningur genisteins-7-glúkósíðs með CACO-2 frumum í þörmum: hugsanlegt hlutverk MRP2. Res Commun Mol Pathol Pharmacol 1999; 103: 45–56.
25. Ito K o.fl. Apical/basolateral yfirborðstjáning lyfjaflutninga og hlutverk þess í flutningi lyfja. Pharm Res 2005; 22: 1559–1577.
26. Laitinen L o.fl. Caco-2 frumuræktun við mat á frásogi í þörmum: áhrif sumra lyfja sem gefin eru samhliða og náttúrulegra efnasambanda í líffræðilegum fylkjum. (Helsinkiháskóli, Finnland, 2006) Akademísk ritgerð, bls. 1–66.
27. Scambia G o.fl. Quercetin eykur áhrif adriamycins í fjölónæmri MCF-7 brjóstakrabbameinsfrumulínu í mönnum: P-glýkóprótein sem mögulegt skotmark. Cancer Chemother Pharmacol 1994; 34: 459–464.
28. Choi DH o.fl. Áhrif myricetins, andoxunarefnis, á lyfjahvörf lósartans og virka umbrotsefnis þess, EXP-3174, hjá rottum: hugsanlegt hlutverk cýtókróm P450 3A4, cýtókróm P450 2C9 og P- glýkóprótein hömlun af völdum myricetins. J Pharm Pharmacol 2010; 62: 908–914.
29. Tanino T o.fl. Paclitaxel-2′-etýlkarbónat forlyf getur sniðgengið P-glýkópróteinmiðlaða frumuútflæði til að auka frumueiturhrif lyfja. Pharm Res 2007; 24: 555–565.
30. Hollman PC o.fl. Frásog quercetin glýkósíða og quercetin í fæðu hjá heilbrigðum sjálfboðaliðum í ileostoma. Am J Clin Nutr 1995; 62: 1276–1282.
31. Kellett GL o.fl. Dreifandi hluti glúkósaupptöku í þörmum er miðlað af glúkósa-völdum nýliðun GLUT2 til himnu burstaborðsins. Biochem J 2000; 350: 155–162.
32. Mál K o.fl. Flokkun innrænna plasmahimnupróteina á sér stað frá tveimur stöðum í ræktuðum þekjufrumum úr mönnum (Caco-2). Cell 1990; 60: 429–437.
33. Mahraoui L o.fl. Tilvist og mismunandi tjáning SGLT1, GLUT1, GLUT2, GLUT3 og GLUT5 hexósa flutnings mRNA í Caco-2 frumuklónum í tengslum við frumuvöxt og glúkósaneyslu. Biochem J 1994; 298: 629–633.

34. Mesonero J o.fl. Sykurháð tjáning frúktósaflutningsefnisins GLUT 5 í Cac-2 frumum. Biochem J 1995; 312: 757–762.

35. Walgren RA o.fl. Flutningur quercetins og glúkósíða þess yfir Caco-2 frumur í þekjuþekju manna. Biochem Pharmacol 1998; 55: 1721–1727.
36. Yoshikawa T o.fl. Samanburðartjáning hexósaflutningsefna (SGLT1, GLUT1, GLUT2 og GLUT5) um meltingarveg músa. Histochem Cell Biol 2011; 135: 183–194.
37. Funes L o.fl. Áhrif verbascoside, fenýlprópanóíð glýkósíðs úr sítrónuverbena, á fosfólípíð líkanhimnur. Chem Phys Lipids 2010; 163: 190–199.
38. Neilson AP o.fl. Áhrif súkkulaðifylkissamsetningar á kakóflavan-3-ol aðgengi in vitro og aðgengi hjá mönnum. J Agric Food Chem 2009; 57: 9418–9426.
39. Gao S o.fl. Mjög breytilegt innihald fenóla í jóhannesarjurtarafurðum hefur áhrif á flutning þeirra í Caco-2 frumulíkani manna í þörmum: lyfja- og líflyfjafræðileg rök fyrir vörustöðlun. J Agric Food Chem 2010; 58: 6650–6659.
40. Schramm DD o.fl. Fæðuáhrif á frásog og lyfjahvörf kakóflavanóla. Life Sci 2003; 73: 857–869.
41. Laurent C o.fl. Etanól og pólýfenóllaust vínfylki örvar aðgreiningu Caco-2 frumna í þörmum manna. Áhrif af tengslum þeirra við procyanidin-ríkt vínberafræseyði. J Agric Food Chem 2005; 53: 5541–5548.
42. Artursson P o.fl. Fylgni milli frásogs lyfja til inntöku í mönnum og sýnilegra lyfja gegndræpisstuðla í innri þekjufrumum manna (Caco-2). Biochem Biophys Res Commun 1991; 175: 880–885.
43. Crespy V o.fl. Samanburður á frásogi quercetins, phloretins og glúkósíða þeirra í rottum í þörmum. J Nutr 2001a; 131: 2109–2114.
44. Crespy V o.fl. Aðgengi phloretin og phloridzin hjá rottum. J Nutr 2001b; 131: 3227–3230.