Genatjáningarsvörun frá sníkjudýrum Physella Acuta sem ekki er markhópur gegn fenoxýkarbi, unghormóna hliðstæðu varnarefni

Varnarefni eru umhverfisvandamál. Leitin að nýjum meindýraeyðingaraðferðum hefur beinst að efnasamböndum sem hafa lítil eða engin eituráhrif í lífverur utan markhóps. Hliðstæður unghormónsins (JH) trufla innkirtlakerfi liðdýra. Skortur á áhrifum á tegundir utan markhóps krefst hins vegar staðfestingar. Þessi grein greinir áhrif Fenoxycarb, hliðstæðu JH, á Physella acuta, vatnasneglur. Í 1 viku voru dýr útsett fyrir 0.01, 1 og 100 ug/L og RNA var einangrað til að greina genatjáninguna með umritun og rauntíma PCR. Fjörutíu gen tengd innkirtlakerfinu, DNA viðgerðaraðferðum, afeitrunaraðferðum, oxunarálagi, streituviðbrögðum, taugakerfinu, súrefnisskorti, orkuefnaskiptum, ónæmiskerfi og frumudauði voru greind. Þrjú genanna, AchE, HSP17.9 og ApA, sýndu svörun við nærveru Fenoxycarb við 1 ug/L, án tölfræðilega marktækra svörunar í restinni af genum og við þann styrk sem eftir var. Af niðurstöðunum má draga þá ályktun að fenoxýkarb sýni veik svörun á sameindastigi í P. acuta á prófuðum tíma og styrk. Hins vegar var Aplysianin-A, gen sem tengist ónæmi, breytt þannig að langtímaáhrifin gætu skipt máli. Þess vegna er þörf á frekari rannsóknum til að staðfesta öryggi fenoxýkarbs í tegundum annarra en liðdýra til lengri tíma litið.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Varnarefnið fenoxýkarb (IUPAC: etýl [{{0}}(4-fenoxý-fenoxý)etýl] karbamat, CAS nr. 72490-01-8) er karbamat sem notað er til að hafa stjórn á ýmsum skordýra meindýrum í ræktun og skrautrækt1. Það stjórnar skordýravexti með því að líkja eftir ungahormóninu, sem kemur í veg fyrir að skordýrið nái þroska2. Hins vegar hefur það einnig sést í öðrum liðdýrum 3–5. Á sameindastigi hefur komið fram að það miðlar hömlun á frumufjölgun og frumudreifingu í skordýrum6 og stjórnar genunum sem taka þátt í nýmyndun hormóna unga í köngulær5. Það er talið ekki skaðlegt hryggdýrum og tegundum utan markhóps, sem hefur áhrif á skordýr og önnur liðdýr5,7–9. Tilkynnt var um það undir greiningarmörkum (0.0004 mg/L) 24 til 48 klst. eftir að hafa borist úr lofti í tilraunatjarnir10. Að auki hefur verið talið að nafnstyrkur 0,20, 0,80, 3,2, 13 og 50 ug/L sviga spáði fyrir um umhverfisgildi11. Ennfremur er fenoxýkarb talið umhverfisvænt vegna hraðrar niðurbrots þess10, með losunartíma 50 (DT50) upp á 4,13 dagar í vatnssúlunni og 15 dagar í seti (PPDB gagnagrunnur: http://sitem.herts.ac.uk/aeru /ppdb/en/Reports/304.htm) 1. Það hefur lágt drif til aðliggjandi landa frá túnum þar sem það er borið á12, þó að það geti endað í yfirborðsvatni vegna úðareks, afrennslis eða framræslu13. Það hefur verið bannað í ESB en er í notkun í Bretlandi, Bandaríkjunum og Ástralíu. Matvælaöryggisstofnun Evrópu taldi það ekki vera áhyggjuefni á sviði eiturefnafræði spendýra og áhættumati neytenda vegna notkunar fenoxýkarbs í epli og perur14. Hins vegar, þó að lítil áhætta hafi verið metin fyrir fugla og spendýr, stór- og örverur í jarðvegi og örverur sem ekki eru markhópur og landplöntur utan marka, var mikil áhætta auðkennd fyrir vatnalífverur með gagnagat í hættu fyrir vatnshryggleysingja miðað við verkunarháttur og viðkvæmustu vaxtarstig14. Þrátt fyrir að það sé talið hafa litla eituráhrif við útsetningu fyrir munn, húð eða innöndun, hefur verið lagt til að það verði flokkað sem efni með takmarkaðar vísbendingar um krabbameinsvaldandi áhrif vegna þess að það getur framleitt lungna- og lifraræxli í músum með því að örva útbreiðslu peroxísóma, verkunarháttar minna viðkvæm hjá mönnum14. Vegna þess er fenoxýkarb merkt sem mjög eitrað lífríki í vatni og grunað um að valda krabbameini. Hjá hryggdýrum sáust engin áhrif á æxlun í sauðfé15, en því hefur verið lýst að í ræktuðum heilaberkitaugafrumum rotta, sem voru útsettar í eina viku, lækkaði fenoxýkarb verulega ATP gildi, hvatberahimnugetu og glúkósaneyslu16. Ennfremur hamlar það asetýlkólínesterasa í rottuheila og nikótínacetýlkólínviðtaka sem tjáir eru í Xenopus laevis eggfrumur17. Á hinn bóginn sýna sumar skýrslur að það getur haft neikvæð áhrif á eggjaframleiðslu og útungunarhraða í collembola Yuukianura szeptyckii18, þó fyrri rannsóknir á Folsomia candida hafi ekki sýnt slík áhrif. Á sama hátt komu fram aukaverkanir eins og hömlun á bráðnun og líkamslengdarvöxt þegar rækjan Neocaridina davidi var útsett í tvær vikur fyrir styrk eins lágum og 10 ug/L3, á meðan krabbinn Rhithropanopeus harrisii fékk seinkun á myndbreytingu við 48 ug/L af Fenoxýkarb20. Þegar þessar niðurstöður eru teknar saman er þörf á frekari rannsóknum til að vita hvaða áhrif þetta varnarefni hefur á vistkerfi. Það vantar upplýsingar um áhrif fenoxýkarbs á ferskvatnshryggleysingja sem ekki eru liðdýr, en búist er við að það sé þeim skaðlaust. Skortur á þekkingu á lífeðlisfræði hryggleysingja, sérstaklega varðandi innkirtlakerfið, krefst hins vegar staðfestingar á þessu öfga. Þessi vinna miðar að því að prófa eiturverkanir fenoxýkarbs á umritunarstigi, í ferskvatnssnælingunni Physella acuta (Draparnaud, 1805) með því að afhjúpa dýrin í 1 viku og greina umritunarsniðið í fylki sem nær yfir mismunandi viðeigandi frumuleiðir. Ferskvatnssnigillinn Physella acuta, einnig þekktur sem Physa acuta, er hermafroditísk og heimsborgartegund. Hann lifir í vötnum og tjörnum og verpir eggjum sínum í eggjamassa sem tekur um tvær vikur að þroskast. Útunguð seiði vaxa í tvo mánuði þar til þau ná fullorðinsstigi, makast og verpa eggjum. Tegundin er auðvelt að rækta á rannsóknarstofu, þannig að hún er notuð í eiturhrifarannsóknum sem fulltrúi sníkjudýranna21,22. Nýlega hönnuðum við fylki til að rannsaka viðbrögð við eiturefnum á genatjáningarstigi í þessari tegund23. Það innihélt 34 gen og 4 viðmiðunargen. Að auki stækkuðum við það í 40 markgen, þar á meðal sum þeirra til að greina breytingar á umritunarvirkni í nokkrum frumuferlum. Röð níu gena er lýst í fyrsta skipti fyrir þessa tegund og eykur fjölda gena sem hægt er að nota sem lífmerki. Röðin kóða fyrir prótein sem tengjast innkirtlakerfinu (galanínviðtaka tegund 2 [GalR2], estrógentengdur viðtaki [ERR], himna prógestínviðtaka-beta [MPR], estradíól 17-beta-dehýdrógenasi 8 [Hsd17b8], og retínósýruviðtaka [RXR]), DNA viðgerð (fjöl-ADP-ríbósa pólýmerasa I [PARP1], DNA viðgerðarprótein XRCC3 [XRCC3], kjarnaþáttur kappa ljós fjölpeptíð genaaukandi í B-frumu hemli, alfa [IkBa]) , og streituviðbrögð (hitastuðsprótein 70 B2-eins og [HSP70 B2]). Á heildina litið gerir fylkið greiningu á breytingum á innkirtlakerfinu, afeitrunaraðferðum, DNA viðgerð, taugakerfinu, frumudauða, oxunarálagi, streitu, epigenetics, ónæmiskerfinu, orkuefnaskiptum og lípíðflutningi. Á þennan hátt sýnir fylkið breytingar á helstu verkfærum sem taka þátt í viðbrögðum við streitu og afeitrun en einnig viðbrögð ferla sem taka þátt í langtímaáhrifum, svo sem epigenetic breytingum og DNA viðgerð, sem myndu virkjast ef einhver erfðaeiturhrif efnasambandsins. Öryggi á umhverfisstigi er áhyggjuefni fyrir allar vörur sem notaðar eru sem varnarefni. Leit að nýjum varnarefnum með minni áhrif á tegundir utan markhóps krefst prófana á þessum tegundum vegna þess að sum þeirra geta haft lítil áhrif. Skortur á þekkingu á lífeðlisfræði hryggleysingja krefst hins vegar tilraunavinnu til að staðfesta það. Það mun einnig veita frekari upplýsingar um lífeðlisfræði hryggleysingjanna, minnka bilið við hryggdýrin og stuðla að notkun hryggleysingja sem aðrar aðferðir sem draga úr notkun hryggdýra í eiturhrifaprófunum.

cistanche viðbót kostir-auka friðhelgi

Niðurstöður

Auðkenning raða.

Níu raðir voru auðkenndar sem kóða fyrir mismunandi prótein sem tengjast innkirtlakerfinu (Hsd17b8, ERR, GalR2, MPR og RXR), streituviðbrögðum (HSP70B2) og DNA viðgerðaraðferðum (XRCC3, IkBa og PARP1). Stærð raðarinnar og stærð ORF er sýnd í töflu 1. Ennfremur er auðkenni og líkindi á amínósýrustigi með tilgreindu próteini sýnd. Gagnagrunnssamanburðurinn sýndi samsvörun við prótein úr öðrum lindýrum, aðallega sníkjudýrum, nema MPR, sem var einsleitt prótein af samlokum uppruna. Sameiningin var mikil nema í tilviki GalR2 og MPR, en ERR og HSP70 B2 sýndu meira en 90% samsvörun. Mynd 1 sýnir kerfi próteina með mismunandi mótífum sem einkenna þau. Öll sýndu þau einkennandi lén sem tengjast þessum próteinum og því má álykta að einangruðu raðirnar samsvari genunum sem kóða þessi prótein.

Genatjáningarsnið sem svar við útsetningu fyrir fenoxýkarbi.

Fullorðnir sniglar voru útsettir fyrir 0.01, 1 og 100 µg/L af fenoxýkarbi í sjö daga til að meta miðtímasvörun genanna sem greind voru (myndir 2, 3, 4, 5 6 , S1 og S2). Fenoxýkarb er hliðstæða ungahormóns sem ekki er búist við að hafi áhrif á aðra en liðdýr. Engin tölfræðilega marktæk svörun var í þeim genum sem tengdust innkirtlakerfinu (Mynd 2), DNA viðgerðaraðferðum (Mynd 3), oxunarálagi (Mynd 4), apoptosis (Mynd 4), fasa I (Mynd S1). ), fasi II (Mynd S2) og Fasi III (Mynd S2) afeitrunar, flest streituprótein (Mynd 5), súrefnisskortur (Mynd 5), Epigenetic reglugerð (Mynd. 6) og orkuefnaskipti (Mynd. . 6). Aðeins þremur genum var breytt við 1 µg/L: asetýlkólínesterasi (AChE) (chi square=- 16.144, p=0.029; mynd 4), hitasjokkprótein 17.9 (HSP 17.9) (chi ferningur=− 15.553, p=0.039; mynd 5), og aplysianin A (ApA) (chi square=− 20.333, p=0.002; mynd . 6). Þess vegna sýndu genin tvö sem greind voru í tengslum við taugakerfið (AChE) og ónæmi (ApA) nokkrar breytingar, sem bendir til þess að nokkur miðtímaáhrif á lífeðlisfræði P. acuta gætu komið fram eins og fóðurleitarhegðun eða næmi fyrir bakteríusýkingum.

Tafla 1. Upplýsingar um raðirnar sem lýst er í fyrsta skipti. DNA og próteinstærð, samsvörun, auðkenni og líkindi eru sýnd. Contig númer eða aðildarnúmer eru tilgreind.

Mynd 1. HYPERLINK "sps:id::fg1||locator::gr1||MediaObject::0"Strúktúr og varðveitt lén Physella acuta próteina kóða með röðunum sem auðkenndar eru. Einkennandi mótíf hvers próteins eru sýnd. Lénin hafa verið skilgreind í samræmi við CCD (Conserved Domains Database) starfræna flokkun próteina. Stærðin er auðkennd með tölunum.

Mynd 2. Umritunargildi innkirtlaskyldra raða (estrógenviðtaka [ER], estrógentengds viðtaka [EER], himna prógestínviðtaka beta [MPR], estradíóls 17-beta-dehýdrógenasa 8 [Hsd17b8], galanínviðtaka 2. [GalR2] og retínósýruviðtaka [RXR]) hjá Physella bráðum fullorðnum eftir in vivo útsetningu fyrir fenoxýkarbi í sjö daga við 19 gráður. Umritunarvirkni var magngreind með RT-PCR með því að nota ríbósómal prótein L10 (rpL10), aktín (Act), 6-fosfófrúktó-2-kínasa/frúktósa-2,6-bífosfatasa 2 (PFKFB2) ), og glýseraldehýð-3-fosfat dehýdrógenasa (GAPDH) sem viðmiðunargen. Samanburðurinn var gerður með viðmiðunum sem voru útsettir fyrir leysi. Skurðarkassar eru sýndir. Hver kassi samsvarar 12 einstaklingum. Lárétt lína innan kassans gefur til kynna miðgildi og 25. og 75. hundraðshluti eru auðkennd með mörkum kassans. Hæstu og lægstu niðurstöðurnar eru táknaðar með hárhöndinni. Litli þríhyrningurinn inni í kassanum gefur til kynna meðaltalið og útlínurnar eru sýndar (hringir). Enginn marktækur munur á eftirliti sást á þessum genum (bls<0.05).

Umræða

Framfarir í eiturefnafræðilegum rannsóknum krefjast þess að eiturhrifapróf verði stækkað í fleiri stig umfram hefðbundna endapunkta eins og lifun, æxlun eða þroska. Nú á dögum er sameindaaðferð við mat á eiturhrifum oft notuð og hún krefst viðbótar hugsanlegra lífmerkja sem meta mótun mismunandi frumuferla og lífeðlisfræðilegra aðferða24–26. Í þessum skilningi, að bæta nýjum genum við rafhlöðu lífmerkja, eykur fjölda ferla sem rannsakaðir eru og svörunarstig, allt eftir brautinni sem er greind. Þess vegna er lýsingin á nýjum genum skref í átt að því að auka gildi P. acuta í eiturefnafræðilegum rannsóknum. Hér höfum við lýst níu nýjum röðum sem kóða fyrir mismunandi hormónaviðtaka, ensím sem tekur þátt í að stjórna styrk virkra estrógena og andrógena (Hsd17b8), einu streitupróteini og þremur próteinum sem taka þátt í DNA viðgerð. Þessi gen geta bætt greiningu á mismunandi ferlum sem tengjast innkirtlaröskun, eiturverkunum á erfðaefni og þroska. Ennfremur geta þau öll hjálpað okkur að skilja viðbrögðin á mismunandi stigum skipulagsheildarinnar, allt frá sameinda til vistfræðilegra, og veita innsýn í aðferðir eiturefnisins og viðbrögð lífveranna til að viðhalda jafnvægi í breytilegu umhverfi. Á hinn bóginn opna þessir meintu lífvísar nýjar leiðir til að meta eiturhrif áður en þær eru skoðaðar á einstaklingsstigi og koma í veg fyrir óafturkræfan skaða sem hefur áhrif á íbúa. Þannig, eins og í klínískri framkvæmd, þarf ný tæki til að bera kennsl á sameindaatburði betur og fá fyrri greiningu sem mun hjálpa til við að greina mengun áður en hún veldur óafturkræfum skaðlegum áhrifum á vistkerfi.

Mynd 3. Umritunarvirkni gena sem tengjast DNA viðgerð. MRNA-gildi pólý(ADP-Ribose) pólýmerasa I (PARP1), NFKB hemla Iκ (IkBa), röntgenviðgerðar krossviðbót 3 (XRCC3), RAD21 Cohesin Complex Complex (RAD21) og RAD50 Double Strand Break Repair Repair Protein (RAD50) hjá Physella bráðum fullorðnum eftir in vivo útsetningu fyrir fenoxýkarbi í sjö daga við 19 gráðu hita eru sýndar. RT-PCR var notað til að mæla magn mRNA og ríbósómal prótein L10 (rpL10), aktín (Act), 6-fosfófrúktó-2-kínasa/frúktósa- 2,6-bífosfatasa 2 (PFKFB2) og glýseraldehýð-3-fosfat dehýdrógenasi (GAPDH) voru notuð sem viðmiðunargen. Samanburðurinn var gerður með viðmiðunum sem voru útsettir fyrir leysi. Skurðarkassar eru sýndir. Hver kassi samsvarar 12 einstaklingum. Miðgildið er gefið til kynna með láréttu línunni innan rammans og 25. og 75. hundraðshluti er gefið til kynna með mörkum kassans. Hæstu og lægstu niðurstöðurnar eru táknaðar með hárhöndinni. Litli þríhyrningurinn inni í kassanum gefur til kynna meðaltalið og útlínurnar eru sýndar (hringir). Enginn marktækur munur sást miðað við samanburðarhópinn (bls<0.05).

Í langan tíma hefur leit að skordýraeitri með ýmist lítil eða engin áhrif á tegundir utan markhóps verið lykilmarkmið landbúnaðarins. Hliðstæður ungahormónsins hafa verið eitt slíkt skordýraeitur þar sem þeir líkja eftir einu sérstöku hormóni liðdýra, sem dregur verulega úr hættu fyrir aðrar tegundir. Það er vitað að fenoxýkarb hefur áhrif á þróun og mismunandi frumuferli í skordýrum, æðardýrum og krabbadýrum8,13,18. Hins vegar, núverandi léleg þekking á lífeðlisfræði hryggleysingja gerir það að verkum að nauðsynlegt er að prófa þá á tegundum sem ekki eru markhópar til að tryggja lítil áhrif þeirra. Fyrsti þátturinn sem þarf að hafa í huga er sú staðreynd að svörun sést við 1 ug/L af fenoxýkarbi, sem er millistyrkurinn sem notaður er. Það er mjög lágt miðað við þær sem hafa áhrif á skordýr og krabbadýr3,20,28. Skortur á svörun við hærri styrk gæti stafað af fyrri svörun, sem endurheimtir eðlilegt ástand fram að greiningunni með virkni afeitrunaraðferða. Við lægri styrkinn gæti skortur á svörun stafað af því að magn eiturefna er undir viðmiðunarstyrk sem þarf til að koma af stað áhrifum. Annar möguleiki gæti verið að meiri tími sé nauðsynlegur til að ná þröskuldsstyrk. Að lokum er ekki hægt að henda hvorki meintu U-laga svari. Viðbótarrannsóknir sem nota mismunandi viðbragðstíma myndu gera kleift að skýra frumuferlana sem verða fyrir áhrifum og einbeitingarháðar afleiðingar.

Mynd 4. Umritunarvirkni gena sem tengjast taugakerfinu (asetýlkólínesterasi [AChE]), oxunarálagi (katalasi [Cat], kopar-sink súperoxíð dismutasi [SOD CuZn], og mangan súperoxíð dismutasa [SOD Mn]), og frumudauða (e. apoptosis) kaspasi 3 [Casp3] og frumufrumuvaldandi þáttur 3 [AIF3]). Sniglar voru útsettir fyrir fenoxýkarbi í sjö daga við 19 gráðu hita. Magngreining með RT-PCR var framkvæmd með því að nota ríbósómal prótein L10 (rpL10), aktín (Act), 6-fosfófrúktó-2-kínasa/frúktósa-2,6-bífosfatasa 2 (PFKFB2) , og glýseraldehýð-3- fosfat dehýdrógenasa (GAPDH) sem viðmiðunargen. Samanburðurinn var gerður með viðmiðunum sem voru útsettir fyrir leysi. Skurðarkassar eru sýndir. Hver kassi samsvarar 12 einstaklingum. Miðgildið er gefið til kynna með láréttu línunni innan rammans og 25. og 75. hundraðshluti er gefið til kynna með mörkum kassans. Hæstu og lægstu niðurstöðurnar eru táknaðar með hárhöndinni. Litli þríhyrningurinn inni í kassanum gefur til kynna meðaltalið og útlínurnar eru sýndar (hringir). Marktækur munur miðað við viðmiðunina (stjörnu) er sýndur (bls<0.05).

Í þessari vinnu höfum við prófað svörun á genatjáningarstigi hliðstæðu unghormónsins, Fenoxycarb, og séð svörun sem, þó veik, krefst viðbótarrannsókna til að tryggja skort á eiturverkunum hjá öðrum en liðdýrum. Eins og búist var við komu engin áhrif fram í genum sem tengdust DNA viðgerðaraðferðum eða streituviðbrögðum. Engin gögn eru til í bókmenntum um rannsóknir á þessum genum, jafnvel í skordýrum. Svipað ástand gerist með orkuefnaskipti, þó að það séu nokkrar skýrslur um áhrif fenoxýkarbs á lípíð og kolvetni krabbadýra3,4,29. Eftir því sem við vitum er engin fyrri skýrsla sem greinir svörun afeitrunaraðferða í nærveru fenoxýkarbs. Í P. acuta er engin breyting á genunum sem greind eru sem taka þátt í fasa I, fasa II og fasa III afeitrunar, sem bendir til þess að önnur prótein frábrugðin þeim sem greind eru hér séu ábyrg fyrir umbreytingu þessa efnis. Öfugt við niðurstöður okkar, án breytinga á genum sem tengjast stjórnun á erfðaefni, hefur því verið lýst að útsetning í þrjá daga við 50 µg/L af fenoxýkarbi geti hækkað histon deasetýlasa í vatninu fea Moina macrocopa4. Þetta gæti endurspeglað mismunanæmi fyrir efnasambandinu en einnig þá staðreynd að sýklafræðilegar breytingar á vatnsfea tengjast því að líkja eftir ungum hormónaáhrifum.

Mynd 5. Umritunarvirkni streitu (lítið hitasjokkprótein 16.6 [sHSP16.6], lítið hitasjokkprótein 17.9 [sHSP17.9], hitasjokkprótein 60 [HSP60], hitasjokksætt 70 4 [HSC70 (4 )], hitalostprótein 70 B2-eins og [HSP70B2], glúkósastýrt prótein 78/bindandi immúnóglóbúlínprótein [Grp78/BiP], og hitalostprótein 83 [HSP83]) og súrefnisskortsþáttur{{23} } alfa [HIF1 ]) gen í fullorðnum sniglum. Dýrin voru útsett í eina viku fyrir fenoxýkarbi við 19 gráður. Umritunarvirkni var magngreind með RT-PCR með því að nota ríbósómal prótein L10 (rpL10), aktín (Act), 6-fosfófrúktó-2-kínasa/frúktósa-2,6-bífosfatasa 2 (PFKFB2) ), og glýseraldehýð-3-fosfat dehýdrógenasa (GAPDH) sem viðmiðunargen. Samanburðurinn var gerður við samanburðarhópa sem voru útsettir fyrir leysi. Skurðarkassar eru sýndir. Hver kassi samsvarar 12 einstaklingum. Miðgildi er gefið til kynna með láréttri línu innan reitsins og 25. og 75. hundraðshluti er gefið til kynna með mörkum reitsins. Hæstu og lægstu niðurstöðurnar eru táknaðar með hárhöndinni. Litli þríhyrningurinn inni í reitnum gefur til kynna meðaltalið og útlínurnar eru sýndar (hringir). Verulegur munur miðað við stýringu (stjörnu) er sýndur (bls<0.05).

Mynd 6. Umritunarvirkni gena sem tengjast epigenetic mótun (DNA methylase I [DNMT1], Lysine Acetyltransferase 6B [KAT6B], og histon deacetylase 1 [Hda1]), ónæmi (aplysia nin-A [ApA]) og orkuefnaskipti ( glýkógen fosfórýlasa L [PYGL] og oxysterol bindandi prótein-líkt 8 [OSBPL8]) hjá Physella bráðum fullorðnum eftir in vivo útsetningu fyrir fenoxýkarbi í sjö daga við 19 gráður. Umritunarvirkni var magngreind með RT-PCR með því að nota ríbósómal prótein L10 (rpL10), aktín (Act), 6-fosfófrúktó-2-kínasa/frúktósa-2,6-bífosfatasa 2 (PFKFB2) ), og glýseraldehýð-3-fosfat dehýdrógenasa (GAPDH) sem viðmiðunargen. Samanburðurinn var gerður með viðmiðunum sem voru útsettir fyrir leysi. Skurðarkassar eru sýndir. Hver kassi samsvarar 12 einstaklingum. Miðgildið er gefið til kynna með láréttu línunni innan rammans og 25. og 75. hundraðshluti er gefið til kynna með mörkum kassans. Hæstu og lægstu niðurstöðurnar eru táknaðar með hárhöndinni. Litli þríhyrningurinn inni í kassanum gefur til kynna meðaltalið og útlínurnar eru sýndar (hringir). Marktækur munur miðað við eftirlit (stjörnu) er sýndur (bls<0.05).

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Smelltu hér til að skoða Cistanche Enhance Immunity vörur

【Biðja um meira】 Netfang:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Áhrifin á AChE benda til nokkurra áhrifa á taugakerfið. Eins og fram kemur í innganginum hefur komið fram hömlun á asetýlkólínesterasavirkni í rottum heila og nikótínviðtaka17, sem bendir til þess að fenoxýkarb geti haft taugaáhrif á lífverur sem ekki eru markhópar. Rannsóknir á nikótínviðtökum sýndu að verkun fenoxýkarbs var ósamkeppnishæf30. Þrátt fyrir að fenoxýkarb hafi verið notað sem hliðstæða unghormóns virðist það einnig hafa einhver áhrif eins og restin af karbamatunum með því að hafa áhrif á taugakerfið. Svörunin sem sést í P. acuta styður taugaáhrif og bendir til þess að þau geti haft áhrif á lífsgetu snigilsins með því að breyta miðtaugakerfinu. Aukningin sem sést á umritun gæti verið að endurspegla tilraun til að bæta upp hömlun á ensímvirkni. Viðbótarrannsóknir myndu hjálpa til við að skýra hugsanleg áhrif á hegðun snigilsins eða getu til að bregðast við aðstæðum sem tengjast taugakerfinu. Hvað sem því líður er það staðreynd að huga að þeim áhrifum sem fenoxýkarb getur haft á tegundir utan markhóps á miðjan og langan tíma. Á hinn bóginn bendir mótun sHSP17.9 til nokkurra áhrifa, en að ákvarða raunveruleg áhrif á frumuna er flókið mál. Lítil hitasjokkprótein eru fjölbreytt prótein sem taka þátt í streituviðbrögðum og tengjast mörgum frumuferlum, þar með talið taugastarfsemi. Í þessum skilningi er freistandi að geta sér til um að sHSP17.9 gæti umritað eitthvað sHSP sem tekur þátt í taugalífeðlisfræði en erfiðleikarnir við að koma á samlíkingunni krefjast varúðar. Viðbótarrannsóknir munu veita frekari upplýsingar og gætu hjálpað til við að skilgreina hlutverk þessa próteins í frumunni. Sem lífmerki gerir sú staðreynd að sHSPs deila alfa-kristalla léninu það auðvelt að bera kennsl á þau. Hins vegar torveldar mikill fjölbreytileiki þeirra á N- og C-endasvæðum auðkenningu á samlíkingu milli tegunda.

Kostir cistanche tubulosa-styrkja ónæmiskerfið

Þar af leiðandi er þörf á dýpri rannsókn á þessari próteinfjölskyldu til að ákvarða hlutverk þeirra í umbrotum frumna og til að koma á hagnýtri samlíkingu á milli þeirra. Í öllu falli bendir breytingin sem sést til þess að fenoxýkarb hafi einhver áhrif á miðlungs tíma í P. acuta, sem eykur möguleika á að það valdi einhverri minnkun á vellíðan snigilsins. Aplysianin-A er prótein sem tekur þátt í ónæmissvöruninni með því að virka sem bakteríudrepandi. Þetta bakteríudrepandi glýkóprótein hindrar bæði gram-jákvæðar og gram-neikvæðar bakteríur í Aplysia kurodai32. Breytingin á umritunarvirkni getur valdið mótun á svörun við bakteríusýkingum, sem gerir P. acuta næmari fyrir þeim. Ofgnótt í svörun eða á ófullnægjandi augnabliki gæti haft áhrif á getu lífverunnar til að bregðast við, valið þær bakteríur sem eru ekki viðkvæmar fyrir ApA, sem gerir dýrið viðkvæmara fyrir sýkingu. Áhrifin sem sjást í P. acuta benda til hugsanlegrar breytinga á ónæmi, sem er í fyrsta skipti sem þessi möguleiki er bent á fyrir fenoxýkarb. Viðbótarrannsóknir sem taka til fleiri ónæmistengdra gena eru nauðsynlegar til að staðfesta það og ákvarða áhrif á langtímalifun íbúa. Núverandi sönnunargögn benda til þess að fenoxýkarb hafi lítil áhrif á umhverfið. Niðurstöðurnar sem sjást í tegundinni P. acuta sem ekki er markhópur krefjast hins vegar víðtækrar greiningar þar sem váhrif geta endurspeglað langtímaáhrif. Þrátt fyrir að gögnin á sameindastigi benda til veikra áhrifa til skamms tíma, munu viðbótargreiningar sem prófa aðrar breytur veita frekari sönnunargögn. Til að tryggja að fenoxýkarbið sé skaðlaust, ætti að greina það í nokkrum tegundum sem ekki eru markhópar sem ná yfir mismunandi hópa hryggleysingja og prófa skammtíma- og langtímaáhrif á sameinda-, frumu- og lífverustig.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Heimildir

1. Sullivan, JJ Efnafræði og umhverfisleg örlög fenoxýkarbs. Séra Umhverfi. Contam. Toxicol. 202, 155–184 (2010).

2. Dhadialla, TS, Carlson, GR & Le, DP Ný skordýraeitur með ecdysteroidal og unglingahormónavirkni. Annu. Séra Entomol. 43, 545–569 (1998).

3. Hu, XL o.fl. Áhrif tveggja unghormóna hliðstæðna skordýraeiturs, fenoxýkarb og metópren, á Neocaridina davidi. Umhverfi. Mengun. 253, 89–99 (2019).

4. Hu, XL, Tang, YY, Kwok, ML, Chan, KM & Chu, KH Áhrif unghormóna hliðstæða skordýraeiturs á vatnið fea Moina macrocopa: Vöxtur, æxlun og kynslóðaskipti. Aquat. Toxicol. 220, 105402 (2020).

5. Yang, Z. o.fl. Reglugerð um unghormóna og ecdysteroid hliðstæður um þróun rándýra kóngulóar, Pardosa pseudoannulata, og stjórnunaraðferðir hennar. Ecotoxicól. Umhverfi. Saf. 242, 113847 (2022).

6. Ayisha Banu, C. & Manogem, EM Andstæðingur-fjölgun og frumudauða-örvandi áhrif unglingahormóna hliðstæðu, fenoxýkarb í Sf21frumulínu. Meindýr. Biochem. Physiol. 187, 105182 (2022).

7. Arambourou, H. o.fl. Notkun Gammarus fossarum (Amphipoda) fósturvísa til eiturhrifaprófa: Tilviksrannsókn með kadmíum. Umhverfi. Toxicol. Chem. https://doi.org/10.1002/etc.3779 (2017).

8. Navis, S., Waterkeyn, A., De Meester, L. & Brendonck, L. Bráð og langvinn áhrif útsetningar fyrir unghormóna hliðstæðu fenoxýkarbi við kynæxlun í Daphnia magna. Ecotoxicology 27, 627–634 (2018).

9. Jindra, M. & Bittova, L. Te ungum hormónaviðtaka sem skotmark ungviða „skordýravaxtarstjórnenda“. Arch. Skordýralífefnafræði. Physiol. 103, e21615 (2020).

10. Schaefer, CH, Wilder, WH, Mulligan, FS & Dupras, EF Virkni fenoxýkarbs gegn moskítóflugum (Diptera: Culicidae) og þrautseigju þess á rannsóknarstofu og sviði. J. Econ. Entomól. 80, 126-130 (1987).

11. Hosmer, AJ, Warren, LW & Ward, TJ Langvarandi eituráhrif púlsskammts fenoxýkarbs á Daphnia magna sem verða fyrir umhverfislega raunhæfum styrk. Umhverfi. Toxicol. Chem. 17, 1860–1866 (1998).

12. Tomas, K. o.fl. Einföld nálgun fyrir mat á váhrifum á jörðu niðri á skordýraeitrinu fenoxýkarbi, byggt á landslagsgreiningu í mikilli upplausn. Meindýr. Stjórn. Sci. 72, 2099–2109 (2016).

13. Jungmann, D. o.fl. Langvarandi eiturverkanir fenoxýkarbs á mýfluguna Chironomus riparius eftir útsetningu fyrir seti af mismunandi samsetningu. J. Soils Sediments 9, 94–102 (2009).

14. ESA, EFS Niðurstaða um ritrýni á áhættumati varnarefna á virka efninu fenoxýkarbi. EFSA J. 8, 1779 (2010).

15. Barr, AC o.fl. Æxlunaráhrif fenoxýkarbs á sauðfé. J . Dýralæknir. Diagn. Fjárfestu. 9, 401–406 (1997).

16. Schmuck, G. & Mihail, F. Áhrif karbamatanna fenoxýkarbs, própamókarbs og própoxúrs á orkuöflun, nýtingu glúkósa og SH-hópa í taugafrumum. Arch. Toxicol. 78, 330–337 (2004).

17. Smulders, CJGM, Bueters, TJH, Van Kleef, RGDM & Vijverberg, HPM Sértæk áhrif karbamat skordýraeiturs á nikótínacetýlkólínviðtaka í rottum taugafrumum og asetýlkólínesterasa í rottuheila. Toxicol. Appl. Pharmacol. 193, 139–146 (2003).

18. Lee, Y.-S. o.fl. Endurskoðun á öryggi fenoxýkarbs (IGR) í jarðvegsumhverfi: Eiturhrif fenoxýkarbs á Yuukianura szeptyckii (Collembola). J. Asia-Pac. Entomól. 23, 214–218 (2020).

19. Campiche, S., Becker-van Slooten, K., Ridreau, C. & Tarradellas, J. Áhrif skordýravaxtarstilla á liðdýrið Folsomia candida (Collembola) sem ekki er markhópur. Ecotoxicól. Umhverfi. Saf. 63, 216–225 (2006).

20. Cripe, GM, McKenney, CL, Hoglund, MD & Harris, PS Áhrif útsetningar fyrir fenoxýkarb á fullkomna lirfuþroska xanthid krabbans, Rhithropanopeus harrisii. Umhverfi. Mengun. 125, 295–299 (2003).

21. Sánchez-Argüello, P., Fernández, C. & Tarazona, JV Mat á áhrifum fuoxetíns á Physa acuta (Gastropoda, Pulmonata) og Chironomus riparius (Insecta, Diptera) með því að nota tveggja tegunda vatnssetpróf. Sci. Heildarumhverfi. 407, 1937–1946 (2009).

22. Sánchez-Argüello, P., Aparicio, N. & Fernández, C. Að tengja eiturverkanir á fósturvísa við erfðaeitursvörun í ferskvatnssniglinum Physa acuta: Einstök útsetning fyrir bensó(a)pýreni, flúoxetíni, bisfenóli A, vínklozólíni og útsetningu fyrir tvílyfjum. blöndur með bensó(a)pýreni. Ecotoxicól. Umhverfi. Saf. 80, 152–160 (2012).

23. Prieto-Amador, M., Caballero, P. & Martínez-Guitarte, J.-L. Greining á áhrifum þriggja þalata á ferskvatnssnegluna Physella acuta á umritunarstigi. Sci. Rep. 11, 11411 (2021).

24. Lee, JW, Won, E.-J., Raisuddin, S. & Lee, J.-S. Mikilvægi skaðlegra útkomuferla í lífmerkjamiðuðu umhverfisáhættumati í vatnalífverum. J. Umhverfi. Sci. 35, 115–127 (2015).

25. Martins, C., Dreij, K. & Costa, PM Nýjustu eiturefnafræði í umhverfinu: Áskoranir og sjónarhorn á „omics“ nálgunum sem beint er að eiturefnablöndur. Alþj. J. Umhverfi. Res. Public Health 16, E4718 (2019).

26. Steiblen, G., van Benthem, J. & Johnson, G. Aðferðir í erfðaeiturefnafræði: Samþykki nýstárlegra vísindalegra aðferða í reglugerðarsamhengi og frá iðnaðarsjónarmiði. Mutat. Res. Genet. Toxicol. Umhverfi. Mutagen 853, 503171 (2020).

27. Wilson, TG Sameindaverkunarstaður unghormóna og unghormóna skordýraeiturs við myndbreytingu: Hvernig þessi efnasambönd drepa skordýr. J. Skordýr. Physiol. 50, 111–121 (2004).

28. Mahmoudvand, M. & Moharramipour, S. Ofdrepandi áhrif fenoxýkarbs á Plutella xylostella (Lepidoptera: Plutellidae). J. Skordýr. Sci. 15, 82 (2015).

29. Arambourou, H. o.fl. Útsetning fyrir fenoxýkarbi raskaði æxlunarárangri amphipod Gammarus fossarum með takmörkuðum áhrifum á lípíðsniðið. PLoS ONE 13, e0196461 (2018).

30. Smulders, CJGM, Van Kleef, RGDM, de Groot, A., Gotti, C. & Vijverberg, HPM Ósamkeppnishæf, raðbundin aðferð til að hindra rotta alfa4beta2 taugafrumu nikótín asetýlkólínviðtaka með karbamat skordýraeitri. Toxicol. Sci. 82, 219–227 (2004).

31. de Los Reyes, T. & Casas-Tintó, S. Taugavirkni lítilla hitaáfallspróteina. Tauga Regen. Res. 17, 512–515 (2022).

32. Kamiya, H., Muramoto, K. & Yamazaki, M. Aplysianin-A, bakteríudrepandi og æxlishemjandi glýkóprótein í albúmkirtli sjávarhara, Aplysia Kuroda. Experientia 42, 1065–1067 (1986).

33. Aquilino, M., Sánchez-Argüello, P., Novo, M. & Martínez-Guitarte, J.-L. Áhrif á genatjáningu tarfsnigls eftir útsetningu fyrir vinclozolin. Ecotoxicól. Umhverfi. Saf. 170, 568–577 (2019).

34. Romiguier, J. o.fl. Samanburðar erfðafræði þýðis í dýrum afhjúpar ákvarðanir um erfðafræðilegan fjölbreytileika. Náttúra 515, 261–263 (2014).

35. Ye, J. o.fl. Primer-BLAST: Tól til að hanna marksértæka primera fyrir pólýmerasa keðjuverkun. BMC Bioinformatics 13, 134 https://doi.org/10.1186/1471-2105-13-134 (2012).

36. Pfaf, MW Nýtt stærðfræðilegt líkan fyrir hlutfallslega magngreiningu í rauntíma RT-PCR. Nucleic Acids Res. 29, e45 (2001).