Nýtt hlutverk fyrir Interleukin (IL) í trefjabólgu

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Hluti Ⅰ: Nuclear IL-33 hindrar snemmbúna umbreytingu trefjafrumuefna í utanfrumu fylkisseytandi svipgerð

FrancescaGatti, Sobuj Mia, Clara Hammarström og o.fl.

Interleukin(IL)-33 er frumuefni sem virðist miðlabandvefssjúkdómurmeð því að senda boð í gegnum viðtaka ST2 (IL(Interleukin)-33R/ILiRL1). Það er hins vegar líka prótein sem eftir myndun er flokkað í frumukjarna, þar sem það virðist hafa áhrif á krómatínfellingu. Hér lýsum við nýju hlutverki fyrir kjarnorkuvopn(Interleukin)-33 við að stjórna fibroblast svipgerð í músumnýrubandvefssjúkdómurknúin áfram af einhliða þvagrásarstíflu. Umritunarsnið IL(Interleukin)-33-skortur á nýrum 24 klst. eftir bindingu leiddi í ljós aukna tjáningu á trefjamyndandi genum og auðgun genasetta sem taka þátt í myndun utanfrumufylkis og endurgerð. Þessar breytingar treystu á innanfrumuáhrif IL(Interleukin)-33 vegna þess að þau fjölguðust ekki með meðferð með hlutleysandi mótefni gegn L.33 sem kemur í veg fyrir IL(Interleukin)-33R/ST2L viðtaka boð né sást þeirra í nýrum með L-33R/ST2-skort. Til að kanna frekar innanfrumuvirkni lL-33, komumst við á umritunarprófíla trefjafrumna úr mönnum, þar sem við sáum að niðurfelling á IL-33 skekkti umritunarsniðið frá bólgu í átt að myofibroblast svipgerð, sem endurspeglast í hærra magni af COL3Al , COL5A1 og transgelin prótein, auk lægra tjáningarstigs IL6, CXCL8, CLL7 og CCL8. Að lokum benda niðurstöður okkar til þess að kjarnorku IL(Interleukin)-33 í trefjakímfrumum dregur úr upphaflegu þrálátssvörun þar til viðvarandi áreiti, eins og framfylgt er af UUO, getur hnekið þessum verndarbúnaði.

Interleukin-33 (IL-33/IL(Interleukin)1F1l) er meðlimur íinterleukin-1 ofurfjölskylda sem hefur hlotið töluverða athygli sem hugsanlegur miðlaribandvefssjúkdómurþróun. Mikið af þessum áhuga var aukið með því að fylgjast með því að endurteknar inndælingar af IL(Interleukin)-33, sem virkar í gegnum himnuviðtakann ST2(IL(Interleukin)33RJ/IL(Interleukin)1RL1), af völdum húðarbandvefssjúkdómur' og með því að fylgjast með því IL(Interleukin)-33-skortur minnkaði verulega lifur af völdum koltetraklóríðsbandvefssjúkdómur. Reyndar, IL(Interleukin)-33 gæti auglýstbandvefssjúkdómurmeð því að búa til profibrotic IL(Interleukin)-13 frá meðfæddum eitilfrumum af tegund 2 (ILC2) og T hjálpar 2 eitilfrumum'.

Millivefs um nýrubandvefssjúkdómurog parenchymal pípulaga frumumissir eru algengar lokaniðurstöður langvinnra nýrnasjúkdóma og góð spá fyrir framvindu sjúkdómsins. Núverandi gögn sem myndast úr tveimur mismunandi múslíkönum styðja þá tilgátu að IL(Interleukin)-33 stuðlar einnig að meinafræði nýrnabandvefssjúkdómur: í einhliða þvagrásarstíflu (UUO) greindu Chen o.fl. frá minnkaðri parenchymal tapi og aukinni þekjuútbreiðslu í bæði IL(Interleukin)-33- og ST2-vantar mýs', og í nýrnablóðþurrð-endurflæði, Liang o.fl. sýndi að hömlun á IL(Interleukin)-33 merki með gjöf leysanlegs IL(Interleukin)-33 viðtaka (sST2) einnig minnkaðurbandvefssjúkdómur.

Skýrslur sem hafa fjallað um trefjavaldandi eiginleika IL(Interleukin)-33 eru almennt framkvæmdar og túlkaðar með tilliti til kerfis sem IL(Interleukin)-33, losað úr streituóttum eða skemmdum frumum, binst utanfrumusviði viðtaka þess. Aftur á móti, flokkun IL.(Interleukin)-33 til frumukjarnans eftir nýmyndun og hæfni hans til að hafa áhrif á viðtakaóháða litningafellingu bendir til þess að IL-33 geti einnig sinnt umritunarþáttalíkum, viðtakaóháðum virkni, verkunarmáta sem hefur fengið mun minni tilraunaathygli . Þessar hugleiðingar eru þeim mun áhugaverðari í ljósi þess að kjarnorkustaðsetning IL(Interleukin)-33 er lífsnauðsynlegt, eins og kemur í ljós með banvænni bólgu sem ekki leysist þegar staðsetningarmerkið fyrir kjarna er truflað'.

Lykilfrumumiðlaribandvefssjúkdómurer myofibroblast, sem þegar það er virkjað þjónar sem aðal kollagen-framleiðandi og samdráttarfruma vefjaviðgerðar. Myofibroblasts einkennast af tjáningu á a-sléttum vöðvaaktíni (a-SMAACTA2) sem gerir samdráttarvirkni þeirra kleift og stuðlar að eyðileggjandi áhrifumbandvefssjúkdómurþróun, Við höfum áður sýnt fram á að kjarna I-33 er hratt og kröftuglega framkallað í vöðvafíbroblastum við tilrauna sársgræðslu, í magasári og sáraristilbólgu. Reyndar tjáning IL(Interleukin)-33 virðist vera almennur eiginleiki a-SMA-jákvæðra vöðvafíbroblasta, vegna þess að það er einnig að finna í brisibandvefssjúkdómurog í myofibroblast-líkum stjarnafrumum lifrarinnar. Samanlagt gera þessar niðurstöður áhugavert að spyrja hvort IL(Interleukin)-33 gæti haft hlutverk í að stjórna starfsemi og aðgreiningu vöðvafíbróblasta.

Við lýsum hér nýju hlutverki fyrir kjarna-lL-33 við að stjórna myofibroblast svipgerðinni. Með erfðafræðilegri eyðingu eða lyfjafræðilegri hömlun á IL(Interleukin)-33 í UUO líkaninu, auk eyðingar á IL(Interleukin)-33 í virkum frumræktuðum húðtrefjum úr húð, sýnum við að kjarna IL(Interleukin)-33 hindrar snemmbúna umbreytingu í fullkomna myofibroblastic svipgerð og styður bólgusvipgerð. Þurrkun IL(Interleukin)-33 jók tjáningu utanfrumufylkisþátta COL1Al, COL1A2, COL3A1, COL5A1 og transgelíns, en hamlaði tjáningu bólgueyðandi frumuvakans IL(Interleukin)-6 og efnafræði CXCL8 CCL7 og CCL8. Niðurstöður okkar kynna því nýtt sjónarhorn til að skilja hlutverk IL-33 íbandvefssjúkdómurþróun og vefjajafnvægi.

Cistanchetubulosakemur í veg fyrirnýrusjúkdóm, smelltu hér til að fá sýnishornið

Niðurstöður

Myofibroblasts eru ríkjandi IL(Interleukin)-33-tjáir frumur í músa UUO.Nýleg rannsókn Chen og félaga greindi frá aukinni tjáningu IL(Interleukin)-33 og ST2 á 4. degi eftir einhliða þvagrásarstíflu. Við nálguðumst tilraun þeirra með því að safna nýrum 1, 7 og 21 dögum eftir UUO í C57BL/6J músum og sáum stöðuga aukningu á IL(Interleukin)33 mRNA umrit (mynd 1A) og aukinn fjöldi frumna sem tjá kjarna IL(Interleukin)-33(Mynd 1B). Við sáum einnig umritun og próteintjáningu á kollageni af tegund I sem endurspeglaði þróunbandvefssjúkdómur(Mynd IC, D). Við greindum síðan svipgerð IL(Interleukin)-33-tjáandi frumur. Eins og Chen o.fl., tókum við eftir því að IL(Interleukin)-33-Tjáandi frumuundirhópur sem sást á degi 2 samanstóð að mestu af a-SMA-jákvæðum vöðvafíbroblastum, hins vegar fundum við engin merki fyrir IL(Interleukin)-33 í CD31-jákvæðum æðaþelsfrumum né í CD45-jákvæðum hvítfrumum (mynd IE og mynd S1). Við fylgdumst líka með IL(Interleukin)-33 í dreifðum pericytum (rauður örvar á mynd 1A, spjaldið á 21. degi). Pöruð ónæmislitun fyrir PDGFRB, annað merki fyrir myofibroblasts og pericytes, leiddi í ljós víðtæka collocalization (Mynd IE) Ennfremur metum við hvort IL(Interleukin)33 var samsett með þekktum merkjum um virkjun vefjafruma, þar sem komist var að því að tjáning S100A4 (einnig þekkt sem trefjasértækt prótein, FSP-1), var frekar tjáð í æðaþelsfrumum háræða og meðalstórra æða (mynd IE) . Á sama hátt fannst VIM/vimentin einnig aðallega í æðaþelsfrumum, sérstaklega í gaukla og meðalstórum æðum, og engin augljós samtjáning var í IL.(Interleukin).33-jákvæðar frumur (mynd 1E). Nánari greining á IL(Interleukin)Með því að -33-tjáðu vöðvavefjafrumur á 7. degi kom í ljós að þeir voru aðallega staðbundnir í heilaberki og corticomedullary junction. og minna í merg og papillu (mynd 1F).

Mynd 1. Einhliða þvagrásarstífla framkallar IL(Interleukin)-33 tjáning í nýrum músa.

(A,C) Hlutfallsleg tjáning 33 og Collal í nýrum frá heilbrigðum samanburðarmúsum (n=2)eða músum sem hafa verið undirgefin sýndaraðgerð (n=1) eða UUO eftir l,7 eða 21 dag (n=3 á hverjum tímapunkti). Umritunarstig voru magngreind eins og lýst er í efni og aðferðum með qRT-PCR. Gagnapunktar tákna einstakar mýs.(B,DF)Frábærar örmyndir af vefjasneiðum litaðar fyrir IL(Interleukin)-33 [brúnt merki í (B) og(F),brúnt eða blátt merki í(E)], COL1(brúnt merki í spjaldi D),Asma(rautt,E,F),CD31(fjólublátt,E ),PDGFRB(blár,E),vímentín (blátt,E) og S100A4(fjólublátt,E) í nýrum úr heilbrigðum viðmiðunarmúsum eða músum sem hafa fengið UUO2 daga(E),7 daga(B,D,F) eða 21 daga (B,D)áður. Spjaldið （F） sýnir mismunandi svæði nýrna eins og merkt er. Skalastikur=20 μm.

Erfðafræðileg eyðing á I-33 hefur óveruleg áhrif á framvindu bandvefs í UUO en miðlar snemma aukningu á kollagenmyndun.Við metum næst meint hlutverk IL(Interleukin)-33 með því að bera saman svörun við nýrnateppu í IL(Interleukin)-33 og villigerðar mýs. Öfugt við Chen og samstarfsmenn, sem tilkynntu minnkaðbandvefssjúkdómurþróun í IL(Interleukin)-33-mýs með skort á UUO sáum við engan mun á IL(Interleukin)33--og WT'mýs í bandvefsþroska á degi 7 eða 21 eftir UUO með ónæmisvefjaefnafræðilegri greiningu á kollageni af tegund I (Mynd 2A, B). Hins vegar, þegar við krufðum trefjasvörunina á umritunarstigi með því að meta kollagenafrit, sáum við snemma, marktæka uppstýringu í tvöfalt hærra gildi Collal afrita og tilhneigingu til aukinnar Col3al þegar IL var borið saman.(Interleukin)-33-skort og villigerð nýra á degi 1 (mynd 2C, D). Við ákváðum því að endurtaka tilraunahönnun Chen o.fl. með því að greina sýni á 4. degi eftir UUO og innihalda ST2--skort mýs, bera þær saman við IL(Interleukin)-33-vantar og WT mýs. Þessar greiningar leiddu í ljós verulega aukningu á Colla2 í IL(Interleukin).33-skort á nýrum samanborið við villigerð nýra á degi 4 en engin samsvarandi aukning á ST-2-skorti nýrum (mynd 2E). Enginn augljós munur var á styrkum Collar og Col3al umrita milli arfgerða á degi 4, sem gefur til kynna að áhrifin á þessi gen séu skemmri varanleg (gögn ekki sýnd og mynd 2F).

Mynd 2. Kollagen tjáning í IL(Interleukin)-33-/og villigerð nýra meðan á UUO stendur.

(A,B) Lýsingarmyndir af vefjasneiðum lituðum fyrir COL1(brúnan) í nýrum úr I-33--og WT músum 7 og 21 dögum eftir UUO.(C,D)Tímaskeið þar sem mRNA umritun Collal og Col3al er borið saman í IL(Interleukin)-33--og WT mýs, sem sýna heilbrigðar viðmiðunarmýs (n=2), sýndarstýrðar mýs (n=1) og mýs sem hafa fengið UUO1,7, eða 21 dögum áður (n{{ 7}} á hverjum tímapunkti og af hverri arfgerð).(E,F) Samanburður á Collal og Col3al umritun í nýrum frá IL(Interleukin)-33-,ST2-og WT mýs 4 dögum eftir sýndaraðgerð(n=5 fyrir hverja arfgerð) eða UUO(n=10á hverja arfgerð). Umritunarmagn var magnmælt með qRT-PCR mRNA. Gagnapunktar tákna einstakar mýs, súlur sýna meðalgildi.*bls<><><>

IL(Interleukin)-33 dregur úr tjáningu siðlausra gena í upphafi UUO.Aukin tjáning Collar og Col31 á degi 1 (Mynd 1CD) og Colla2 á degi 4 (Mynd 2E) í IL(Interleukin).33-skortur á músum benti til hlutverks IL(Interleukin)-33 í fyrstu viðbrögðum við meiðslum. Við könnuðum þennan möguleika með því að taka fleiri dýr með í stækkaðri tilraun og sjá aukið magn afrita af Collar, Colla2 og Col3al í IL(Interleukin).-33-vantar mýs á degi 1 (mynd 3A-C).

Eftir að hafa athugað að IL(Interleukin)-33 í nýrnavef úr músum sem urðu fyrir UUO staðbundnum við frumukjarna, spurðum við næst hvort breytt genatjáning sem sést í IL(Interleukin)-33-skortur á músum á degi 1 eftir UUO var vegna losunar á áhrifamikilli, kjarna IL-33 virkni eða vegna skorts á utanfrumu IL(Interleukin)-33. Við tókum á seinni kostinn með því að gefa hlutleysandi mótefni sem miðar að IL(Interleukin)-33 til villigerðar músa á undan UUO (mynd 3D). Þessi meðferð endurskapaði ekki trefjamyndandi svipgerð IL(Interleukin)33 stökkbrigði, sem styrkir tilgátuna um að aukningin á þrálátri genatjáningu sem sést í fjarveru IL(Interleukin)-33 var vegna skorts á kjarna frekar en utanfrumu IL(Interleukin)-33.

Mynd 3.IL(Interleukin)-33 dregur úr tjáningu kollagena í upphafi UUO.

(AC) Umritun Collal, Colla2 og Col3al í nýrum frá IL(Interleukin)-33-/og WT mýs l degi eftir sýndaraðgerð (n=5 á hverja arfgerð) eða UUO(n=10á hverja arfgerð). (D) Umritun á Col3al í nýrum frá WT músum sem fengu and-IL(Interleukin)-33, samsætuviðmiðunarmótefni eða burðarefni fyrir UUO. Nýru voru tekin 24 klst. eftir UUO(n=10 fyrir hvern meðferðarhóp) eða sýndaraðgerð(n=5). Umritunarstig voru magngreind með qRT-PCR. Gagnapunktar tákna einstakar mýs, súlur sýna meðalgildi.**bls<><>

Transcriptome greining á IL(Interleukin)-33-skortur á nýrum sýnir upplýsingar um endurskipulagningu utanfrumufylkis og kollagenmyndun.Til að kanna snemma svörun við UUO nánar með umritunarsniði, var RNA dregið úr nýrum af IL(Interleukin)-33-vantar og villigerðar mýs 24 klst. eftir UUO. Pörbundið Fisher's linear discriminant24 var notað til að bera kennsl á efstu 5 prósentin (200 genin) sem tjáðu gena með mismunandi hætti milli WT og IL(Interleukin)-33-skortur á nýrum sýnir skýran aðskilnað milli arfgerða í aðalþáttagreiningu (mynd 4A). Óströng nálgun (bls<0.05,><0.25, and="" fold="" change="">1.3) greindi 134 niðurstýrða og 46 uppstýrða rannsaka í skuggaefninu IL(Interleukin)33−/− (n=5) á móti WT (n=4) (Suppl. Tafla S1), meðal þeirra síðarnefndu, einkum Col1a1, Col1a12 og Col3a1 sem og vöðvafíbróblast-tengd Acta2 (mynd 4B) . Að auki leiddi genaverufræðigreining á mismunandi tjáðum genum með því að nota DAVID skýringarþyrping (tafla S2) í ljós jákvæða auðgun fyrir GO-skilmála sem tengjast kollageni og próteasahemlum, sem og PDGF-bindingu og ECM-viðtaka víxlverkun, og neikvæða auðgun fyrir GO- hugtök sem tengjast oxídóreduktasavirkni og natríumóháðum anjónaflutningsefnum.

Mynd 4. Samantekt á umritunarmun á milli IL(Interleukin)-33-vantar og villigerðar mýs 24 klst. eftir UUO.

(A) 3D dreifingarreiturinn sýnir dreifingu sýna byggt á aðalþáttagreiningu á 200 genum. (B) Hitakort af efstu mismunandi genum.

Eyðing á fibroblast IL.33 stuðlar að genamerki sem er í samræmi við aukna utanfrumu fylkisútfellingu.Til að kanna virkni IL(Interleukin)-33í ríkjandi IL(Interleukin)-33-þar sem við tjáum frumufjölda af stífluðum nýrum, beygðum við ræktuðum trefjafrumum úr mönnum í átt að myofibroblast svipgerð með því að útsetja þá fyrir IFN-y og TGF- í 24 h²eftir siRNA-miðlaða niðurfellingu I-33. Skilvirkt niðurbrot var sannreynt bæði á prótein- og umritsstigi (Mynd 5A) og fylgdi auknu mRNA- og próteinimagni af profibrotic COL3A1, COL5A1 og TAGLN (Mynd 5B-D). Fyrstu greiningar bentu til þátttöku TGF- og leiddu til þess að við umrituðum söfnuð, ræktuð trefjafrumur úr mönnum meðhöndlaðir með siRNA til IL.(Interleukin)-33 og virkjað með IFN-y(til að framkalla IL(Interleukin)-33 tjáningu)eða með samsetningu IFN-y og TGF-B í 24 klst. Þessi greining benti á 64 mismunandi tjáð gen sem tengdust skerðingu á IL(Interleukin)-33(adj. bls<0.05 and="" fold="" change="">1.5, mynd 5E), 35 þeirra voru sameiginlegar fyrir báðar frumulyfsmeðferðirnar (mynd 5E, F). Ennfremur sýndu flest genin svipaða tilhneigingu við báðar aðstæður, jafnvel þótt þau næðu völdum þröskuldi fyrir mismunatjáningu aðeins undir öðru þeirra (mynd 5F), sem styður þá forsendu að áhrif þess að hindra IL(Interleukin)-33 var svipað við bæði skilyrði. Við genagreiningu töldum við því gen sem voru mismunandi tjáð af IL(Interleukin)-33 eyðing við að minnsta kosti eitt skilyrði og framkvæmd skýringaþyrping (tafla S3), í samræmi við niðurstöðu okkar í UUO-útsett, IL(Interleukin)-33-skorti á nýrum, komumst við að hömlun á IL(Interleukin)-33 í trefjakímfrumum leiddi til aukinnar tjáningar gena auðgað fyrir GO-hugtök sem tengjast kollageni og utanfrumufylkisþáttum. Ennfremur voru gen bæld með eyðingu á I-33 auðguð fyrir GO-hugtök sem tengjast svörun við bólguörvun. Saman gefa gögn okkar til kynna að IL(Interleukin)Tjáning -33 í trefjakímfrumum þjónar því hlutverki að draga úr uppstýringu umrita sem tengjast utanfrumufylkiútfellingu og vöðvafíbróblastavirkjun, en bólguafrit eru að einhverju leyti studd af IL(Interleukin)-33.

Mynd 5. Eyðing á fibroblast IL(Interleukin)-33 framfylgir genasigni sem er í samræmi við aukna utanfrumu fylkisútfellingu.

Tjáning IL(Interleukin)33(A), COL5A1(B), FIBL5(C) og TGLN(D) tjáning í trefjakímfrumum úr mönnum meðhöndlaðir með IL(Interleukin)-33-sértækt og spænt siRNA var mælt með gRT-PCR (efri spjöldum) og Western blot (neðsta spjaldið). Súlur sýna meðalgildi 4 óháðra tilrauna,*bls<0.05.(e)venn diagram="" comparing="" differential="" expression="" of="" transcripts="" in="" response="" to="" the="" silencing="" of="">(Interleukin)33 á milli stjórn- og virkjaðra fruma.

(F) Hitakort sem sýnir mismunandi tjáð umrit sem svar við siRNA-þöggun á IL(Interleukin)-33 í stjórn og virkjaðar hólf.

Þurrkun IL(Interleukin)-33 í virkum vefjakímfrumum er hlynntur vöðvavefjafrumum fram yfir bólgusvipgerð.Byggt á athugunum okkar að áhrif I-33 virðast vera viðvarandi og verða meira áberandi með tímanum, jafnvel þó IL(Interleukin)-33 tjáning minnkar (Mynd S2A, B), við spurðum næst hvort aðalkjarnorkuvirkni IL(Interleukin)-33 gæti verið stjórnun á trefjafrumnaaðgreiningu frekar en bein stjórnun á trefjavirkum áhrifum. Við örvun mynda kyrrir trefjafrumur og aðrar mesenchymal frumur bólgu- og/eða samdráttarvirkni. Litrófið á milli bólgueyðandi trefjavefja og samdráttar vöðvavefjafruma er enn illa skilgreint og táknar líklega rennandi umskipti frekar en tvær aðskildar svipgerðir. Hins vegar, nýleg útgáfa Ohlund o.fl.23 bar saman krabbameinstengda trefjafrumur (CAFs) við kyrrstæðar brisstjörnufrumur og auðkenndi bólgusvipgerð sem kallast iCAFs (samræktuð í Transwells með frumu-seytandi æxlislíffærum og tjáir hátt og lágt magn af IL(Interleukin)6 og SMA, í sömu röð [IL(Interleukin).dPa-SMAl]) og samdráttarsvöðvavefja-svifgerð, myCAFs (IL)(Interleukin)6"a-SMA-, ræktað í þéttum einlögum), umritunarsnið og samanburður á iCAFs og mvCAFs auðkenndu einkennandi umritunarsnið. Þó að trefjafrumur með bólgusvipgerð (iCAFs) hafi aukið tjáningu þeirra áinterleukínog chemokines, þau með myofibroblastic svipgerð (myCAFs) einkenndust af aukinni tjáningu TGF-svörunargena og utanfrumu fylkisþátta þar á meðal kollagena3. Við notuðum þetta gagnasett til að búa til undirskriftarlista sem samanstanda af efstu mismunastýrðu genum á milli svipgerða og framkvæmdum auðgunargreiningu á genasettum í GSEA hugbúnaðinum. Niðurstöður bentu til þess að hömlun á I-33 styddi samdráttarsvöðvavefjasvipgerð (myFBL) og hamlaði bólgusvipgerð (iFBL) í trefjafrumum úr mönnum (Mynd 6A, B, Tafla S4), og var því í samræmi við niðurstöður úr genagreiningu okkar. . Á þessum tímapunkti beinum við athygli okkar að IL(Interleukin)6 og CXCL8, cýtókín sem hafa verið lögð til sem merki fyrir iCAFs, komist að því að þó þessi gen uppfylltu ekki skilyrði fyrir mismunatjáningu í umritagreiningu okkar, var hægt að greina lækkun á tjáningarstigi þeirra með qRT-PCR eftir að IL tæmdist(Interleukin)-33(Mynd 6C, D). Meðal bólgumiðla sem reyndust vera niðurstýrðir í umritagreiningu okkar (mynd 5F), staðfestum við einnig minnkun á tjáningu fyrir CCL7 og CCL8 í frumum sem voru meðhöndlaðar með and-IL(Interleukin)-33 siRNA (mynd 6E, F).

Þessar athuganir urðu til þess að við könnuðum hvort hægt væri að þýða niðurstöður okkar yfir á músa UUO líkanið á degi 1. Ónæmisvefjaefnafræðileg greining (Fg.6G) og magngreining (Mynd 6H) leiddi í ljós framkallun IL(Interleukin)6-tjáir frumur í nýrum af villigerð, svipað og athuganir Chen o.fl. á umritunarstigi4. Aftur á móti sáum við marktækt minnkaðan fjölda IL(Interleukin)-6-jákvæðar frumur í IL(Interleukin)-33- mýs, í góðu samræmi við gögn okkar um trefjafrumur úr mönnum í glasi.

Mynd 6. Eyðing á IL(Interleukin)-33 skekkir vefjafrumur í átt að vöðvavefjasvipgerð.

(A,B) Auðgunargreining genasetts sýndi að frumur sem voru meðhöndlaðar með IL(Interleukin)-33-sérstakt siRNA var auðgað jákvætt fyrir vöðvafíbroblast (myFBL) á móti bólgueyðandi trefjafrumu (iFBL) auðgað og neikvætt auðgað fyrir bólgueinkenni versus kyrrláta vefjagigtareinkenni.(CF)Umritun IL(Interleukin)6(C), IL(Interleukin)8(D), CCL7(E) og CCL8(F) í trefjafrumum úr mönnum meðhöndlaðir með IL(Interleukin)33-sértækt eða spænt siRNA var mælt með gRT-PCR. Hver gagnapunktur sýnir meðalgildi tæknilegra þrefalda úr óháðum tilraunum.(G)Tilkynnandi örmyndir af nýrnaskurðum sem teknar voru 4 dögum eftir sýndar- eða UUO skurðaðgerð frá WT og IL(Interleukin)-33-/- mýs og ónæmislitaðar fyrir IL(Interleukin)-6(brúnt merki). Kvarðastikur=100 um.(H)Blind magn af merkjum sem telur upp meðalfjölda jákvæðra frumna á hverju sjónsviði með miklum krafti. Einstakir gagnapunktar sýna meðalfjölda jákvæðra frumna í einni mús, telja 3 aflsvið á svæðum með mesta þéttleika. *bls<>

SMELLTU HÉR TIL AÐ HLUTA Ⅱ