Notkun á vefjum Common Rejection Module Score í nýrnaígræðslu sem hlutlægur mælikvarði á bólgu í samígræðslu

Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Arya Zarinsefat 1*, Jose M. Arreola Guerra2, Tara Sigdel 1, Izabella Damm1, Reuben Sarwal 1, Chitranon Chan-on1, Gyula Szabo3, Jorge L. Aguilar-Frasco4, Xicohtencatl Ixtlapale-Carmona4,

Carlos Salinas-Ramos 4, Leonardo Ramirez-Martinez 4, Claudio Ramirez 4, Mario Vilatoba4, Luis E. Morales Buenrostro4, Josefifina M. Alberu5 og Minnie M. Sarwal 1

Skurðlækningadeild, Kaliforníuháskóli, San Francisco, CA, Bandaríkin,

2 Innri læknadeild, Centenario Hospital Miguel Hidalgo, Aguascalientes, Mexíkó,

3 meinafræðideild, University of California, San Francisco, CA, Bandaríkin,

4 Instituto Nacional de Ciencias Medicas y Nutricio´n Salvador Zubira´n, Mexíkóborg, Mexíkó,

5 Department of Medicine, Tecnologico de Monterrey, Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud, Mexíkóborg, Mexíkó

Langtíma nýrnaígræðslaÁrangur (KT) ósamgena ígræðslu hefur ekki batnað eins og búist var við þrátt fyrir betri skilning á höfnun og bættri ónæmisbælingu. Fyrri vinna hafði staðfest reiknað höfnunarstig, vefja höfnunareininguna (tCRM), mæld með mögnunarbundnu mati á 11 genum úr formalínföstu paraffíni-innfelldum (FFPE) vefjasýnisýnum, sem gerir ráð fyrir magnbundnu, hlutlausu mati á ónæmiskerfinu. meiðsli. Við beittum tCRM í tilvonandi rannsókn á 124 KT viðtakendum og mældum saman mat með tCRM og vefjafræði frá 2 óháðum meinafræðingum um siðareglur og valda vefjasýni eftir ígræðslu. Fjórir 10- mm rakningar úr FFPE vefjasýnissýni voru notaðir fyrir RNA útdrátt og mögnun með qPCR á 11 tCRM genum, sem tCRM stig var reiknað út frá. Greining vefjasýnis, annaðhvort bráða höfnun (AR) eða landamærahöfnun (BL) var talin hafa bólgu til staðar, en stöðugar vefjasýni höfðu enga bólgu. Af 77 vefjasýnum sem báðir meinafræðingarnir lásu voru alls 40 ósamræmi í greiningunni til staðar. Miðgildi tCRM stiga fyrir AR, BL og stöðugar greiningar voru 4,87, 1,85 og 1,27, í sömu röð, með almennt marktækan mun meðal allra vefjahópa (Kruskal-Wallis, p < 0.0{="" {34}}01).="" marktækur="" munur="" var="" á="" tcrm="" stigum="" á="" milli="" meinafræðinga="" sem="" bæði="" fundu="" bólgu="" á="" móti="" ósamkomulagi="" (p="0.003)," og="" báðir="" fundu="" bólgu="" á="" móti="" báðir="" fundu="" enga="" bólgu="" (p="">< 0,001),="" ásamt="" heildarmerkingu="" allra="" stiga="" (="" kruskal-wallis,="" p="">< 0,001).="" logistic="" aðhvarfslíkan="" sem="" spáði="" fyrir="" um="" bólgu="" í="" ígræðslu="" með="" því="" að="" nota="" ýmsar="" klínískar="" forspárbreytur="" og="" tcrm="" leiddi="" í="" ljós="" tcrm="" skorið="" sem="" eina="" marktæka="" forspá="" um="" bólgu="" í="" ígræðslu="" (or:="" 1,90,="" 95="" prósent="" ci:="" 1,40–2,68,="" p=""><0,0001). nákvæmt,="" megindlegt="" og="" hlutlaust="" mat="" á="" höfnun="" klínísku="" sýnisins="" er="" mikilvægt.="" með="" hliðsjón="" af="" mismunandi="" greiningum="" milli="" meinafræðinga="" á="" sömu="" sýnum="" gætu="" einstaklingar="" notað="" tcrm="" stigið="" sem="" jafntefli="" í="" óljósum="" aðstæðum.="" við="" leggjum="" til="" að="" tcrm="" magnskorið="" geti="" veitt="" óhlutdræga="" magngreiningu="" á="" ígræðslubólgu="" og="" hraðmat="" þess="" með="" pcr="" á="" ffpe-rakstur="" getur="" orðið="" mikilvæg="" viðbót="" til="" að="" hjálpa="" til="" við="" að="" knýja="" fram="" klíníska="" ákvarðanatöku="" og="">

Leitarorð:nýrnaígræðsla, bráð höfnun, lífmerki, umritunarfræði, formalínbundið paraffíninnfellt (FFPE), ígræðslubólga

Cistanche tubulosa kemur í veg fyrir nýrnasjúkdóm, smelltu hér til að fá sýnishornið

KYNNING

Nýrnaígræðsla(KT) er enn ákjósanleg meðferð fyrir sjúklinga með nýrnasjúkdóm á lokastigi, með minni dánartíðni samanborið við sjúklinga á biðlista og bættri lifun hjá ýmsum lýðfræðilegum hópum (1-3). Þrátt fyrir verulegar endurbætur á einu árinýrulifun ósamgena ígræðslu (4), er hlutfall langvarandi ígræðslutaps eftir fyrsta árið eftir ígræðslu enn umtalsvert. Þetta hefur komið fram þrátt fyrir betri skilning á höfnun ósamgena ígræðslu ásamt tilkomu bættrar ónæmisbælingar. Núverandi flokkunaraðferðir við vefjafræðilega höfnun þjást af skekkju í sýnatöku og vanhæfni til að mæla nákvæmlega bólguálagið í ósamgena ígræðslu, sem er mikilvægur forspárþáttur um langtímavirkni og lifun ígræðslu (5-9). Mikilvægt er að fyrri rannsóknir hafa sýnt að fylgni meinafræðinga við Banff-flokkaða nýrnaígræðslu meinafræði hefur efnislegt misræmi milli túlkunar vefjasýnis (10, 11).

Fyrri vinna í rannsóknarstofunni okkar við að greina örfylkisgögn úr heilgetu frá 1.030nýru, hjarta-, lungna- og lifrarfrumusýni sem greindust aalgengt ónæmie response module (CRM) af 11 genum sem skilgreina bráða höfnun (AR) yfir mismunandi ósamgena ígræðslu (12–14) og var síðan staðfest ánýruóbyggða vefjasýni (15, 16). Þó að þessi gögn hafi sýnt fram á hugsanlega gagnsemi þess að nota hlutlægan mælikvarða eins og CRM-stigið til að aðstoða við greiningu vefjasýnis, þá voru þetta afturskyggnar greiningar á vefjum sem áður hafa verið innifalin. Þar að auki var enginn samanburður gerður á milli margra blindaðra meinafræðilestra á sama vefjasýni, eða hugsanlegrar getu CRM-stigsins til að nota sem hlutlægt jafnteflisbrot eða aukagögn til að hjálpa til við að komast að traustari greiningu.

Í þessari greiningu skoðuðum við serialnýruvefjasýni sem fengust sem hluti af klínískri rannsókn í KT. Við notuðum samskiptareglur okkar sem mælir genatjáningu 11 CRM gena úr RNA einangrað úr fjórum 10-míkron rakningum af formalínbundinni parafín-innfelldri (FFPE) blokk með vefjafræðilega staðfestum svipgerðum AR, landamærahöfnun (BL), og stöðugar greiningar. Við vísum til þessa stigs sem vefja-CRM (tCRM) miðað við beitingu CRM-stigsins á vefjasýnisvef (15, 16). Við bárum síðan saman greiningar frá 2 blinduðum meinafræðingum og bárum þær saman við tCRM stig fyrir hverja vefjasýni. Við gerðum þá tilgátu að hægt væri að nota tCRM skorið sem gagnapunkt til að aðstoða við greiningu vefjasýnis og hugsanlega sem hlutlægt jafntefli þegar ágreiningur er meðal meinafræðinga.

cistanche ávinningur: bólgueyðandi

AÐFERÐIR

Skráning sjúklinga og námshönnun

Sjúklingum og sýnum var safnað sem hluti af TITRATE (Testing Immunosuppression Threshold in Renal Allografts To Extend eGFR) klínískri rannsókn. Hægt er að skoða aðferðafræði þess á vefgáttinni ClinicalTrials.gov (auðkenni: NCT02581436). Í stuttu máli er þetta tilvonandi, blinduð, stýrð klínísk rannsókn á 124 KT viðtakendum sem voru úthlutað tvenns konar hreyfingum til að meta virkni og öryggi hvað varðar tímanlega greiningu á AR, gauklasíunarhraða (GFR) og bandvefsvísitölum í vefjasýni 12 mánuðum eftir KT. Eftirlit með nýrnastarfsemi var byggt á GFR og vefjasýni úr vefjagræðslu sem gerð var samkvæmt áætlun 3 og 12 mánuðum eftir KT og af orsökinni. Örvunarónæmisbæling (IS) var úthlutað á grundvelli ónæmisfræðilegrar áhættu með Basiliximab (lítil áhættu), and-tymocyte globulin (hááhætta), eða án örvunarmeðferðar hjá sjúklingum sem deildu tveimur haplotypes. Viðhalds-IS var byggt á takrólímus, mýcófenólati og prednisóni.

Núverandi rannsókn var aukagreining á tCRM genunum (15) í öllum tiltækum KT vefjasýnum. Fyrir rannsókn okkar, eftir að hafa útilokað lífsýni á dag núll, voru alls 136 vefjasýni tiltækar með samsvarandi vefjasýni, sem allt var túlkað af meinafræðingi við National Institute of Medical Sciences í Mexíkó. Af þessum 136 vefjasýnum voru 77 einnig sendar til UCSF til að hafa blindað lesefni til frekari mats á fylgni meinafræðings. Vefsýni voru túlkuð út frá nýjustu Banff-viðmiðunum á þeim tíma sem rannsóknin var gerð (17). Hvers konar ígræðslu AR (bráð frumu eða mótefnamiðluð) var sameinuð í einn AR flokk. Fyrir UCSF-lesin vefjasýni voru tiltækari upplýsingar um kornóttar vefjameinafræðilegar greiningar, þar með talið mótefnamiðlaða höfnun (ABMR) gerð og T-frumumiðlaða höfnun (TCMR).

Heildar RNA útdráttur

Við fylgdum áður birtri siðareglum um útdrátt RNA úr FFPE vefjum (18). Byggt á fyrri reynslu okkar notuðum við 4 × 10 mm þykka hluta til að draga heildar-RNA úr FFPE sýnum með PureLink FFPE Total RNA-einangruninni (Thermo Fisher Scientific, Foster City, CA). Gæði RNA gagna voru metin með 260/280 frásogsmerkjahlutfalli og RIN númerinu.

cDNA nýmyndun og genatjáning magngreining með qPCR

Alls 50 ng RNA var öfugt umritað í viðbót DNA (cDNA) með SuperScript VILO (Invitrogen, Thermo Fisher Scientific, Foster City, CA) og síðan magnað í marksértæku mögnunarþrepi fyrir öll 11 genin með TaqMan PreAmp Master Mix og TaqMan Primers and Probes (Thermo Fisher Scientific, Foster City, CA) fyrir samtals 18 mögnunarlotur. qPCR viðbrögð voru framkvæmd í Fluidigm BioMark FD kerfinu (Fluidigm, South San Francisco, CA) með því að nota 18S gena stofugen og Human XpressRef Universal Total RNA (Qiagen, Valencia, CA) sem viðmiðunar RNA í 40 lotur. Flögugögnin sem fengust voru upphaflega greind til gæðaeftirlits með því að nota BioMark Analysis Software Version 2.0 (Fluidigm, South San Francisco, CA) og Ct gildi voru flutt út í töflureikni. Stöðlun gagna var gerð í tveimur skrefum. Ct gildi einstakra gena voru staðlað á móti Ct gildi upp á 18S fyrir hvert gen til að fá dCt gildi. dCt gildi hvers sýnis voru staðlað á móti dCt gildi viðmiðunarsýnisins til að fá ddCt gildi sem voru síðan notuð til að reikna út fold change (RQ) gildi fyrir hvert gen í hverju sýni. tCRM skorið var reiknað út með því að taka rúmfræðilegt meðaltal 11 CRM genanna fyrir hvert sýni, eins og áður hefur verið lýst (12).

Tölfræðigreining

Öll gögn voru flutt inn í R útgáfu 3.6.2 (R Foundation, Vín, Austurríki) fyrir síðari greiningar. Lýðfræði sjúklinga (tafla 1) er sýnd út frá tCRM skori sem er hærra en eða lægra en 2,2, áður ákvörðuð mörk okkar með ákjósanlegum AUROC til að spá fyrir um AR (15). Tölfræðileg prófun var gerð með t-prófi nemenda fyrir samfelldar breytur og kí-kvaðratprófi fyrir flokkabreytur. Kúlu- og súlurit af tCRM skori fyrir hvern meinafræðilegan greiningarhóp voru gerðar með því að nota ggplot2 pakkann. Marktækur munur á milli allra meinafræðilegra hópa og paramismunur milli hvers hóps var ákvarðaður með Kruskal-Wallis prófinu. Framkvæmd var stigveldisþyrping án eftirlits með því að nota mismunandi meinafræðilega hópa og tCRM gen, með síðari hitakortum gerð með hitakortapakkanum. Við töldum tCRM stig hærri en 2,2 vera með sameindagreiningu á höfnun. Við skilgreindum vefjasýni sem jákvætt fyrir bólgu ef meinafræðileg greining var annað hvort AR eða BL og neikvæð fyrir bólgu ef greiningin var stöðug. Við bjuggum síðan til samningsbreytu milli meinafræðinga, þar sem báðir sögðu að bólga væri til staðar, báðir sögðu að það væri engin bólga eða þeir voru ósammála ef einhver bólga væri til staðar. Súlurit og hitakort fyrir tCRM stigin meðal samningsbreytunnar voru síðan búnar til eins og lýst er hér að ofan.

Við reiknuðum út skipulagslegt aðhvarfslíkan til að spá fyrir um tvíhliða niðurstöðu bólgu við vefjasýni. Við leggjum inn aldur viðtakanda, líkamsþyngdarstuðul (BMI), seinkun á ígræðslustarfsemi (DGF), kyn, örvunaráætlun, stöðu lifandi gjafa, karlkyns gjafa til kvenkyns viðtakanda, fyrri KT, pre-KT skilun og tCRM stig sem spábreytur í módelið.

Við fengum delta GFR hvers sjúklings, reiknað sem breyting á GFR tíma lífsýnissýni frá loka GFR þeirra tveimur árum eftir KT. Við notuðum Pearson fylgnistuðulinn til að tengja delta GFR við tCRM skor sjúklingsins sem fékkst úr vefjasýninu. Þetta var endurtekið eftir að hafa útilokað tCRM stig undir 2. Við notuðum hæstu gjafasértæka mótefnamagn (DSA) sem voru mæld með samfrumumælingum fyrir hvern sjúkling, táknað sem meðal FL flúrljómunarstyrk (MFI), til að framkvæma fylgni við tCRM stig og reiknaðu tilheyrandi Pearson fylgnistuðul. Þessi fylgni var einnig sett fram í dreifingarmyndaformi. Til greiningar á raðstigum teiknuðum við sjúklinga með raðtölu tCRM stig eftir ígræðsludögum, með áherslu á þá fjóra sjúklinga sem höfðu upphaflega greiningu á AR, voru meðhöndlaðir og var síðan fylgt eftir með vefjasýni í kjölfarið. Tveir sjúklingar til viðbótar sem höfðu hækkuð tCRM stig sem voru lesin með stöðuga greiningu, en fengu síðan nýja greiningu á AR á eftirfylgjandi vefjasýni þeirra voru einnig teiknaðir. Rannsóknarhönnun og síðari greining er frekar tekin saman í myndrænu formi (Mynd 1).

NIÐURSTÖÐUR

Niðurstöður nýrnaígræðslu vefjasýnis frá tveimur óháðum, blinduðum meinafræðingum

Lýðfræði sjúklinga og klínískar breytur af áhuga sýndu engan stóran mun á sjúklingum sem voru með tCRM stig hærra en eða minna en 2,2, nema hærri gjafaaldur hjá sjúklingum með hækkuð tCRM stig á vefjasýni eftir ígræðslu (tafla 1). Alls voru 77 vefjasýni lesnar af báðum stöðvum, þar sem meinafræðingur 1 (Mexíkó) greindi 16 AR, 21 BL og 40 stöðugar vefjasýni, en meinafræðingur 2 (UCSF) greindist 10 AR, 39 BL og 28 stöðug vefjasýni (tafla 2) . Alls voru 40 misjafnar greiningar á milli meinafræðinga, en megnið af þessu misræmi kom frá mismun í BL flokki.

Sameiginleg vefjahöfnunareining sem jafntefli gerir greinarmun á meinafræðilegum greiningum

Við skoðuðum síðan getu tCRM stigsins til að greina á milli meinafræðilegra sjúkdómsgreininga fyrir einn meinafræðing (með því að nota vefjasýni sem voru lesin á UCSF, í ljósi þess að við höfðum ítarlegustu vefjameinafræðilegu gögnin sem til eru). Þegar tCRM stigin voru skoðuð með vefjafræðilegri greiningu sáum við skýran aðskilnað með hærri tCRM stigum hjá sjúklingum með AR samanborið við BL/stöðugt, og með hærra hlutfalli stiga > 2,2 hjá AR sjúklingum (Mynd 2A). Miðgildi tCRM skora og millifjórðungssvið (IQR) fyrir AR, BL og stöðugar greiningar voru 4,87 (IQR: 2,44– 6,99), 1,85 (IQR: 1,21–2,48) og 1,27 (IQR: 0,96– 2.14), í sömu röð. Að auki var almennt marktækur munur meðal allra vefjafræðilegra hópa (p < 0.001),="" ásamt="" marktækum="" mun="" á="" ar="" á="" móti="" bl="" og="" ar="" á="" móti="" stöðugum="" samanburði="" á="" pari="" (mynd="" 2b).="" þetta="" undirstrikar="" fylgni="" tcrm="" stiga="" við="" banff-einkunn="">

Þegar framkvæmt er eftirlitslaus stigveldisþyrping á tCRM genum, sjáum við tiltölulega nákvæma þyrping með meinafræðilegri greiningu (Mynd 2C). Þegar hver vefjasýni er skoðuð náið, jafnvel þar sem þyrping með greiningu sýnir misleitni í þyrpuðu hópunum, hefur samsvarandi tCRM skor (sýnt sem litahalli) tilhneigingu til að tengjast greiningunni. Við sjáum hærra stig með sjúkdómsgreiningum sem endurspegla meira magn bólgu, sem gefur til kynna getu tCRM til að greina og mæla hlutlægt bólgu í óhlutbundinni ígræðslu án hlutdrægni. Þegar við notuðum tCRM skerðingu okkar upp á 2,2 (sameindagreining á bólgu), sjáum við sterka þyrping með sameindagreiningu. Burtséð frá því, þá myndast meirihluti AR og BL ásamt mikilli genatjáningu og háum tCRM stigum, með hið gagnstæða fyrir flestar vefjasýni sem eru stöðugar með vefjafræðilega einkunn.

Sameiginleg vefjahöfnunareining gerir greinarmun á sérstökum gerðum höfnunar ígræðslu

Við skoðuðum síðan getu tCRM-stigsins til að greina á milli mismunandi tegunda höfnunar: C4d-jákvæð (n=9) og neikvæð ABMR (n=4), TCMR (n=3) , BL (n=21), og stöðugar (n=40) vefjasýni. Miðgildi tCRM skora og greindarvísitölu fyrir C4d jákvætt ABMR, C4d neikvætt ABMR, TCMR, BL og stöðugar greiningar voru 4,22 (IQR: 3,80–5,98), 3,47 (IQR: 1,71–6,51), 2.{ {23}} (IQR: 2,58–3.05), 1,91 (IQR: 1,32–2,88) og 1,37 (IQR: 0,99–2.00), í sömu röð. Að auki var almennt marktækur munur meðal allra vefjafræðilegra hópa (p < 0,001),="" ásamt="" marktækum="" mun="" á="" parslegum="" samanburði="" sem="" skoðaði="" c4d-jákvætt="" abmr="" vs.="" tcmr,="" c4d-jákvætt="" abmr="" vs.="" bl,="" c4d-jákvætt="" abmr="" vs.="" ,="" tcmr="" á="" móti="" stöðugum="" og="" bl="" á="" móti="" stöðugum="" hópum="" (mynd="" 3a).="" þetta="" undirstrikar="" enn="" og="" aftur="" fylgni="" tcrm="" stiga="" við="" sérstaka="" banff-einkunn="">

Þegar framkvæmt er eftirlitslaus stigveldisþyrping á tCRM genum, sjáum við svipað mynstur þyrpingar byggt á ígræðslubólgu eins og áður hefur verið lýst (Mynd 3B). Með sértækari greiningarflokkum C4d-jákvæðra og neikvæðra ABMR og TCMR, sjáum við athyglisverðustu einsleitustu þyrpinguna meðal ABMR hópa. Eins og áður, þegar hver vefjasýni er skoðuð náið, jafnvel þar sem þyrping með greiningu sýnir misleitni í hópum hópanna, hefur samsvarandi tCRM skor (sýnt sem litastig) tilhneigingu til að tengjast greiningunni. Við sjáum hærra stig með sjúkdómsgreiningum sem endurspegla meira magn bólgu, sem gefur til kynna getu tCRM til að greina og mæla hlutlægt bólgu í óhlutbundinni ígræðslu án hlutdrægni. Á endanum innihélt fyrsta greinin af þyrpingunni okkar án eftirlits meirihluta sýna sem höfðu hvaða gráðu ígræðslubólgu, sérstaklega hvaða ABMR, TCMR eða BL tilfelli sem er (Mynd 3B).

Algeng höfnunareining fyrir vefjum mismunar eftir samkomulagi/ágreiningi meinafræðings

Við skoðuðum síðan tCRM stig fyrir samkomulag og ágreining meðal meinafræðinga, sem var skilgreint eins og áður hefur verið útskýrt. Af 77 vefjasýnum eftir ígræðslu sem báðir meinafræðingarnir lesið, sögðu báðir að það væri bólga í 33,8 prósentum, engin bólga hjá 22,1 prósentum og ósammála um tilvist bólgu í 44,2 prósentum sýna. Þegar tCRM stigin voru skoðuð tókum við eftir aukningu á stigum eftir því sem samræmisbreytan þróaðist frá engri bólgu, ósamkomulagi og samkomulagi um tilvist bólgu (mynd 4A). Marktækur munur var á tCRM stigum milli meinafræðinga sem bæði fundu bólgu á móti ósamkomulagi (p=0.003), og báðir fundu bólgu á móti báðir fundu enga bólgu (p < 0,001="" ),="" ásamt="" heildarmerkingu="" á="" milli="" allra="" stiga="" (p=""><>

Þegar við gerðum eftirlitslausa stigveldisþyrpingu á tCRM genum sáum við þyrping vefjasýnissýna byggt á samræmisbreytunni (Mynd 4B). Við getum séð að þyrpingar af mikilli genatjáningu samsvara því að báðir meinafræðingarnir séu sammála um tilvist bólgu, á meðan lág genatjáning samsvarar því að báðir meinafræðingarnir séu sammála um enga bólgu eða ósamkomulag á milli þeirra. Að auki sjáum við að samsvarandi tCRM skor fyrir hverja vefjasýni hefur tilhneigingu til að styðja hærri og lægri skor þar sem meinafræðingar voru sammála um bólgu eða enga bólgu, í sömu röð. Þó að þyrpingin sé ekki fullkomin er skýr þróun sýnileg.

Sameiginleg vefjahöfnunareining sem spá fyrir höfnun og ígræðsluvirkni Hér að ofan sýnum við klínískt notagildi tCRM þar sem það tengist því að gera nákvæmar meinafræðilegar greiningar. Þrátt fyrir að notkun þess þar tengist því sem er hefðbundin greining sem hefur sannað lífsýni, vildum við kanna notkun tCRM í líkani til að spá fyrir um höfnun/bólgu. Með því að nota tvöfalda bólgubreytuna okkar (AR og BL vefjasýni), bjuggum við til skipulagslegt aðhvarfslíkan til að spá fyrir um tvöfalda niðurstöðu bólgu við vefjasýni. Áður var lýst þeim klínísku breytum sem notaðar voru (tafla 3). Athyglisvert er að eini marktæki spádómurinn um bólgu sem greindist með meinafræði var tCRM stig (OR: 1,90, 95 prósent CI: 1,40–2,68, p < 0.{{16="" }}01),="" en="" að="" hafa="" karlkyns="" gjafa="" fyrir="" kvenkyns="" viðtakandann="" var="" verndandi="" með="" landamæramörkun="" (or:="" 0,27,="" 95="" prósent="" ci:="" 0,07–0,98,="" p="">

Við skoðuðum síðan getu tCRM til að spá fyrir um langtímabreytingar á GFR. Við tengdum delta GFR (frá GFR við vefjasýni til loka GFR) við tCRM stig sjúklings úr þeirri vefjasýni (Pearson fylgnistuðull=0.21, p=0.{{6} }25). Við endurtókum þetta síðan eftir að hafa útilokað tCRM stig undir 2, þannig að við vorum aðeins að skoða hæstu tCRM gildin til að sjá áhrifin á delta GFR, sem leiddi til hækkunar á fylgnistuðlinum í 0,32 (p=0. 05). Við skoðuðum einnig fylgni á hæsta DSA-stigi hvers sjúklings við tengda tCRM-skor þeirra (viðbótarmynd 1), til að sjá hvort einhver tengsl væru á milli DSA-stigs og tCRM-stigs, sem okkur fannst ekki vera í fylgni (Pearson fylgnistuðull { {11}}, bls=0.99).

Að lokum skoðuðum við sjúklinga sem voru með raðsýni og tCRM stig. Serial tCRM stig voru teiknuð fyrir hvern sjúkling eftir dögum eftir ígræðslu (Mynd 4C). Það voru fjórir sjúklingar sem höfðu upphaflega greiningu á AR og voru meðhöndlaðir, síðan fylgt eftir með síðari vefjasýni (Mynd 4C, rauðar línur). Við tókum fram að allir fjórir sjúklingarnir höfðu upphaflega hækkað tCRM skor og eftir meðferð hafði skorið lækkað, þar sem aðeins einn sjúklingur var greindur með AR í seinni vefjasýninu. Athygli vekur að tveir sjúklingar sem höfðu hækkað tCRM stig sem meinafræðingurinn taldi vera með stöðuga greiningu þróuðu aukningu á tCRM skori og nýja greiningu á AR á eftirfylgjandi vefjasýni (Mynd 4C, bláar línur).

cistanche tubulosa þykkni:bæta nýrnastarfsemi

UMRÆÐA

Við gerðum þá tilgátu að hægt væri að nota tCRM skorið sem gagnapunkt til að aðstoða við greiningu vefjasýnis og hugsanlega sem hlutlægt jafntefli þegar ágreiningur er meðal meinafræðinga. Hér að ofan sýnum við að tCRM skorið getur greint á milli meinafræðilegra greininga. tCRM er fær um að greina á milli samsettra AR vs BL vs stöðugra sýna og er einnig fær um að greina á milli sértækari AR greininga eins og ABMR vs TCMR og ABMR vs BL, eins og við sýndum hér að ofan. Einn af þekktum göllum hins sameinaða huglæga/hlutlæga eðlis Banff viðmiðanna er að misræmi getur verið á milli meinafræðinga sem skoða eins vefjasýnisýni. Við sýndum hér að ofan að ágreiningur milli meinafræðinga um bólgubyrði í nýrnasýnum er algengur. Við sýnum að þegar það er samkomulag meðal meinafræðinga um tilvist eða fjarveru bólgu, þá hefur þetta tilhneigingu til að vera í ystu mörkum tCRM stigsins. Hluti af notagildinu í tCRM skorinu kann að liggja hér, í getu þess til að veita hlutlægan mælikvarða á bólgu, en einnig þjóna sem jafntefli í þeim tilvikum þar sem greiningin er ekki skýr, en tCRM skorið bendir greinilega á einn eða annan veg. Til dæmis gæti meinafræðingur sem les lífsýni sem er ekki viss um að flokka það sem AR eða BL, en með mjög hátt tCRM skor, verið hlutlægari og nákvæmari við að gera greiningu á AR.

Að auki gefur þessi rannsókn til kynna að hægt sé að nota tCRM stig til að spá fyrir um langtíma klínískar niðurstöður. Þrátt fyrir að fylgni milli breytinga á GFR og hærri tCRM stiga sé veik, sýndum við tölfræðilega marktæka jákvæða fylgni þar á milli, með enn meiri fylgni þegar við síuðum eftir tCRM stigum sem eru hærri en 2, sem bendir til þess að hærra stig benda til meiri gráðu ósamþræðingar skaða sem getur spáð fyrir um langvarandi skerta virkni græðlinga (stærra delta GFR). Athyglisvert er að við fundum ekki fylgni milli DSA-stigs sjúklinga og tCRM stiga. Þetta getur að hluta til stafað af því að margir sjúklingar með DSA þurfa ekki endilega að þróa ABMR, ásamt því að vita að mismunandi DSAs geta haft mismunandi áhættu á að fá ABMR í raun. Að auki, með því að fylgjast með sjúklingum með raðvefjasýni og tCRM stig, sýndum við að meirihluti sjúklinga með hækkuð tCRM stig og AR hafði í kjölfarið lækkun á stigum sínum, ásamt bata í græðslubólgu á síðari vefjasýnum (síðari vefjafræði fór úr AR í stöðugt ). Sérstaklega voru 2 tilvik þar sem tCRM stigin voru verulega hækkuð, en meinafræðileg greining var stöðug við vefjasýni. Bæði þessi tilvik leiddu til enn hærra tCRM-stigs á síðari vefjasýni, með samsvarandi meinafræðilegri greiningu á AR. Þetta bendir til þess að annaðhvort sé hægt að greina ranga greiningu vegna huglægs eðlis vefjafræðilegrar flokkunar, eða að aukin tjáning tCRM gena sem tengist bólgu í græðlingum, gæti verið á undan raunverulegum meinafræðilegum niðurstöðum sem myndu leiða til greiningar á AR. Burtséð frá því bendir þetta til gagnsemi hlutlægari tCRM skora til að hjálpa við greiningu á AR.

Mikilvægt er að ákvarða sameindamagn á heildarbólgubyrði í nýrnaígræðslu þegar ífarandi vefjasýni er tekið (5, 6, 9). Aðferð okkar auðveldar notkun á þegar tiltækum vefjasýnisýnum á skilvirkan hátt (heildartilraunatími er 4–6 klst fyrir greinarnar sem sýndar eru). Þótt ekki sé ífarandi próf, eins og frumufrítt DNA (dd-cfDNA), sem er aflað af gjafa (dd-cfDNA), sé lagt til fyrir snemmgreiningu á AR (19–23), er einn galli þessara prófa að þau spyrja ekki beint markvefinn á áhuga, jafnvel þótt dd-cfDNA sé losað úr ósamgena ígræðslunni. Með tCRM er hægt að vinna úr vefjasýnisvef sem þegar er verið að fá með því að nota lágmarksvef úr annaðhvort ferskum vefjasýnum eða geymdum FFPE kubbum, sem varðveitir megnið af móður FFPE blokkinni fyrir frekari vefjafræðilegar greiningar.

Rannsókn okkar er að hluta til takmörkuð af ífarandi eðli tCRM. Vefsýni eru áfram gulls ígildi og eru oft fengnar, sem gerir kleift að mynda sameindasnið með tCRM, en að lokum væri umskipti yfir í ekki ífarandi próf á blóði eða þvagi best fyrir sjúklinga. Rannsóknarstofa okkar vinnur nú að notkun CRM gena í þvagi til að aðstoða við greiningu á höfnun ígræðslu (14). Að auki, á meðan þessi rannsókn var framsýn rannsókn, var notkun tCRM ekki notuð til klínískrar ákvarðanatöku og var þess í stað könnunargreining. Framtíðarvinna okkar myndi njóta góðs af því að íhuga tCRM stigið sem mögulegan endapunkt, eða í raun að taka þátt í stiginu þegar tekin er ákvörðun um endanlega meinafræðilega greiningu fyrir vefjasýnisýni. Að auki, á meðan rannsóknarsýnin okkar innihéldu TCMR greiningar, voru meirihluti tiltækra sýnishorna okkar til greiningar ABMR sýni. Þó að við sýnum að tCRM-stigið sé hækkað óháð því hvaða tegund AR er til staðar, mun framtíðarvinna þurfa að nýta fleiri sýnishorn innan hvers flokks sérstakrar AR tegundar.

Við sýndum fram á að tCRM skorið er fær um að greina á milli meinafræðilegra sjúkdómsgreininga, með því að nota þegar tiltæk FFPE sýni. Mikilvægt er að breytileiki er til staðar meðal mismunandi meinafræðinga, sem kom fram í gögnum okkar sem byggjast á tveimur blinduðum meinafræðingum sem greindu. Sem slík sýnum við fram á að ekki aðeins getur tCRM aðstoðað við meinafræðilega greiningu heldur sérstaklega þegar ágreiningur eða óvissa er fyrir hendi, getur stigið verið notað til að komast að endanlegri, traustari niðurstöðu.

cistanche tubulosa ávinningur: meðhöndla nýrnasjúkdóma

YFIRLÝSING UM AUKA gagna

Hrágögnin sem styðja niðurstöður þessarar greinar verða aðgengilegar af höfundum, án ótilhlýðilegrar fyrirvara.

SIÐFRÆÐISYFIRLÝSING

Rannsóknirnar sem tóku þátt í mönnum voru skoðaðar og samþykktar af UCSF IRB. Sjúklingar/þátttakendur veittu skriflegt upplýst samþykki sitt fyrir þátttöku í þessari rannsókn.

HÖFUNDARFRAMLAG

AZ lagði sitt af mörkum við greiningarhönnun, gagnagreiningu, túlkun, handritagerð og handritagerð. JG lagði sitt af mörkum við hönnun rannsóknarinnar, gagnasöfnun og handritaskoðun. TS lagði sitt af mörkum við gagnagreiningu og ritstjórn handrita. ID lagði sitt af mörkum við úrvinnslu úrtaksins. RS og GS lögðu sitt af mörkum til úrtaksvinnslunnar. CC lagði sitt af mörkum við úrvinnslu og endurskoðun sýna. JF, XC, CSR, LM og CR lögðu sitt af mörkum við sýnishorn og gagnagrunnssöfnun. MV stuðlaði að skráningu sjúklinga og ígræðslu. LB stuðlaði að skráningu sjúklinga. JA lagði sitt af mörkum við hönnun rannsóknarinnar, gagnasöfnun og handritaskoðun. MS lagði sitt af mörkum við hönnun rannsóknarinnar, gagnasöfnun, greiningarhönnun og handritaskoðun. Allir höfundar lögðu sitt af mörkum við greinina og samþykktu innsenda útgáfu.

bæta nýrnastarfsemi cistanche tubulosa

HEIMILDIR

1. Wolfe RA, Ashby VB, Milford EL, Ojo AO, Ettenger RE, Agodoa LY, o.fl. Samanburður á dánartíðni hjá öllum sjúklingum í skilun, sjúklingum í skilun sem bíða ígræðslu og viðtakendum fyrstu ígræðslu.N EnglJ Med(1999) 341(23):1725–30. doi: 10.1056/NEJM 199912023412303

2. Meier-Kriesche HU, Ojo AO, Port FK, Arndorfer JA, Cibik DM, Kaplan B. Lifun bati meðal sjúklinga með nýrnasjúkdóm á lokastigi: þróun með tímanum fyrir ígræðsluþega og sjúklinga á biðlista.J Am Soc Nephrol(2001) 12(6):1293–6. DOI: 10.1111/j.1600-6143.2004.00332.x

3. Oniscu GC, Brown H, Forsythe JLR. Áhrif nýrnaígræðslu með dauða á lifun hjá sjúklingum sem skráðir eru til ígræðslu.J Am Soc Nephrol(2005) 16 (6):1859–65. DOI: 10.1681/ASN.2004121092

4. Hariharan S, Johnson CP, Bresnahan BA, Taranto SE, McIntosh MJ, Stablein D. Bætt lifun græðlinga eftir nýrnaígræðslu í Bandaríkjunum, 1988 til 1996.N EnglJ Med(2000) 342(9):605–12. DOI: 10.1056/NEJM 200003023420901

5. Pineda S, Sigdel TK, Liberto JM, Vincenti F, Sirota M, Sarwal MM. Einkenni hættu á höfnun nýrna fyrir ígræðslu og eftir ígræðslu með B-frumu ónæmisskráröð.Nat Commun(2019) 10(1):1906. DOI: 10.1038/s41467-019-09930-3

6. Halloran PF, Famulski K, Reeve J. Sameindasvipgerðir höfnunar í nýrnaígræðslu vefjasýni.Curr Opin Orgel Ígræðsla (2015) 20(3):359–67. DOI: 10.1097/MOT.00000000000000193

7. Li L, Khatri P, Sigdel TK, Tran T, Ying L, Vitalone MJ, o.fl. Útlæga blóðgreiningarpróf fyrir bráða höfnun við nýrnaígræðslu.Er JÍgræðsla(2012) 12(10):2710–8. DOI: 10.1111/j.1600-6143.2012. 04253.x

8. Roedder S, Sigdel T, Salomonis N, Hsieh S, Dai H, Bastard O, et al. Stutta prófunin til að greina nýrnaígræðslusjúklinga í mikilli hættu á bráðri höfnun: niðurstöður fjölsetra AART rannsóknarinnar.PloS Med(2014) 11(11): e1001759. DOI: 10.1371/journal.pmed.1001759

9. Naesens M, Khatri P, Li L, Sigdel TK, Vitalone MJ, Chen R, et al. Vaxandi vefjaskemmdir í nýrnaígræðslu tengist tjáningu meðfæddra og aðlagandi ónæmisgena.Nýra Int(2011) 80(12):1364–76. DOI: 10.1038/ki.2011.245

10. Furness PN, Taub N, Assmann KJM, Ban G, Cosyns JP, Dorman AM, et al. Alþjóðlegur breytileiki í vefjafræðilegri einkunnagjöf er mikill og viðvarandi endurgjöf bætir ekki endurgerðanleika.Am J Surg Pathol (2003) 27(6):805–10. doi: 10.1097/00000478-200306000-00012

11. Veronese FV, Manfro RC, Roman FR, Edelweiss MI, Rush DN, Dance S, o.fl. Endurtakanleiki Banff flokkunarinnar í undirklínískri höfnun nýrnaígræðslu.ClinÍgræðsla(2005) 19(4):518–21. doi: 10.1111/j.1399- 0012.2005.00377.x

12. Khatri P, Roedder S, Kimura N, De Vusser K, Morgan AA, Gong Y, et al. Sameiginleg höfnunareining (CRM) fyrir bráða höfnun yfir mörg líffæri skilgreinir nýjar meðferðir fyrir líffæraígræðslu.J Exp Med(2013) 210 (11):2205–21. Doi: 10.1084/jem.20122709

13. Sacreas A, Yang JYC, Vanaudenaerde BM, Sigdel TK, Liberto JM, Damm I, o.fl. Algeng höfnunareining í langvarandi höfnun eftir lungnaígræðslu.PloS One(2018) 13(10):e0205107. doi: 10.1371/ journal.pone.0205107

14. Sigdel TK, Yang JYC, Bestard O, Schroeder A, Hsieh SC, Liberto JM, o.fl. Sameiginleg höfnunareining í þvagi (CRM) fyrir eftirlit með nýrnaígræðslu sem ekki er ífarandi.PloS One(2019) 14(7):e0220052. doi: 10.1371/ journal.pone.0220052

15. Sigdel TK, Bestard O, Tran TQ, Hsieh SC, Roedder S, Damm I, et al. Reiknilegt genatjáningarstig til að spá fyrir um ónæmisskaða í nýrnaígræðslu.PloS One(2015) 10(9):e0138133. doi: 10.1371/journal. pone.0138133

16. Sigdel T, Nguyen M, Liberto J, Dobi D, Junger H, Vincenti F, et al. Mat á 19 genum og staðfesting á CRM genapanel fyrir megindlega umritunargreiningu á sameindahöfnun og bólgu í nýrnaígræðsluvefsýnum.Framan Med (2019) 6:213. doi: 10.3389/ feed.2019.00213

17. Haas M, Loupy A, Lefaucheur C, Roufosse C, Glotz D, Seron D, et al. Banff 2017 nýrnafundarskýrslan: Endurskoðuð greiningarviðmið fyrir langvarandi virka T frumu-miðlaða höfnun, mótefnamiðlaða höfnun og horfur á samþættum endapunktum fyrir næstu kynslóðar klínískar rannsóknir.Am J Transplant(2018) 18(2):293–307. doi: 10.1111/ajt.14625

18. Sigdel TK, Nguyen M, Dobi D, Hsieh SC, Liberto JM, Vincenti F, o.fl. Markviss umritunarprófun nýrnaígræðsluvefsýna.NýraAlþjRep(2018) 3(3):722–31. doi: 10.1016/j.ekir.2018.01.014

19. Bloom RD, Bromberg JS, Poggio ED, Bunnapradist S, Langone AJ, Sood P, et al. Frumulaust DNA og virk höfnun í nýrnaígræðslu.J Am Soc Nephrol(2017) 28(7):2221–32. doi: 10.1681/ASN.2016091034

20. Lee H, Park YM, We YM, Han DJ, Seo JW, Moon H, o.fl. Mat á stafrænni PCR sem tækni til að fylgjast með bráðri höfnun í nýrnaígræðslu.ErfðafræðiTilkynna(2017) 15(1):2–10. doi: 10.5808/ GI.2017.15.1.2

21. Adamek M, Opelz G, Klein K, Morath C, Tran TH. Fljótleg og einföld aðferð til að greina og magngreina frumufrítt DNA frá gjafa í sermi líffæraþega í föstu formi sem lífmerki fyrir virkni ígræðslu.Clin Chem Lab Med(2016) 54(7):1147–55. doi: 10.1515/cclm-2015-0622

22. Beck J, Oellerich M, Schulz U, Schauerte V, Reinhard L, Fuchs U, et al. Frumufrítt DNA frá gjafa er nýtt alhliða lífmerki fyrir höfnun ósamgena ígræðslu við líffæraígræðslu.Ígræðsla Proc(2015) 47 (8):2400–3. doi: 10.1016/j.transproceed.2015.08.035

23. Beck J, Bureau S, Balzer S, Andag R, Kanzow P, Schmitz J, et al. Stafræn dropa-PCR fyrir hraða magngreiningu á DNA gjafa í blóðrás ígræðsluþega sem hugsanlegt alhliða lífmerki fyrir ígræðsluskaða.Clin Chem (2013) 59(12):1732–41. doi: 10.1373/clinchem.2013.210328