Mechanism of Cistanche Deserticola sem stuðlar að þarmastarfsemi

Yuan Gao, Chuanjie Zong, Fen Liu, Lei Fang, Runlan Cai, Yue Shi, Xi Chen, Yun Qi

Ágrip

Fenýletanóíðglýkósíð(PhGs), flokkur pólýfenólefnasambanda, eru talin einn af helstu lífvirku innihaldsefnumCistanchedeserticolaYC Ma (CD), sem útdrátturinn er notaður til inntöku í hefðbundinni kínverskri læknisfræði. Þrátt fyrir að fyrri lyfjafræðilegar rannsóknir hafi greint frá því að PhGs hafi margs konar starfsemi, hefur flutningssnið þeirra í þörmum ekki verið skýrt. Í þessari rannsókn könnuðum við þarma gegndræpi PhG-ríks útdráttar (PRE) fráCistancheDeserticolasem samþætt kerfi í Caco-2 frumu einlaga líkaninu sem notar lífgreiningarkerfi. Niðurstöðurnar sýndu að PRE er fyrst og fremst flutt með illa frásoguðum óvirkri dreifingu niður styrkleikahalla án útflæðis, sem gefur lyfjahvarfafræðilegan grunn fyrir klíníska notkun PhGs íCistanche Deserticola. Við ákváðum einnig þarma gegndræpi þriggja helstuPhG[acteoside (AC), isoacteoside (IS) og echinacoside (EC)]frá HLPC. Ennfremur þróuðum við nýja HPLC-flúrljómunargreiningaraðferð til að ákvarða nákvæmlega flæðimagn AC og IS. Eins og búist var við, flutningseiginleikar þeirra þriggjaPhGeru í samræmi við þær í PRE, sem gefur til kynna að núverandi lífgreiningarkerfi sé viðeigandi og áreiðanlegt til að meta flutningseiginleika hópa virkra innihaldsefna (AIG) í PRE. Þar að auki getur þetta kerfi einnig hentað öðrum plöntuþykkni með viðeigandi lífvirkni.

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche deserticola hefur mörg áhrif, smelltu hér til að vita meira

Kynning

Caco-2 frumulínan, sem var unnin úr kirtilkrabbameini í ristli í mönnum, sýnir iðrafrumulíka eiginleika. Við venjulegar aðstæður aðgreina Caco-2 frumur sjálfkrafa frá þroskuðum frumum og mynda ósnortin einlög [1]. Aðliggjandi frumur festast með þéttum mótum sem myndast við apical hlið einlagsins, sem getur greint óvirkt og virkt flutt lyf yfir þekjulagið [2]. Vegna formfræðilegrar og lífefnafræðilegrar líkingar við venjulegar enterocytes, þjóna Caco-2 frumu einlög sem vel viðurkennt in vitro líkan til að rannsaka frásogsgetu og flutningseiginleika lyfja í þörmum [3, 4].

Öfugt við efni eru plöntuþykkni (PE) blöndur þar sem líffræðileg virkni og virku innihaldsefnin eru oft ekki vel þekkt [5]. Þar að auki eru flutningseiginleikar PE í þörmum, öfugt við eiginleika innihaldsefna þess, nátengdir klínískri notkun. Flæðismælingar fyrir prófunarsýni yfir Caco-2 frumu einlag fela venjulega í sér efnafræðilegar aðferðir, svo sem HPLC, LC/MS, o.s.frv. Þó að þessar aðferðir séu öflug verkfæri eru þær flóknar, tímafrekar, dýrar og stundum þurfa háþróaðan búnað. Meira um vert, hvorki einn né minnihlutaþáttur getur endurspeglað PE í heild. Því þarf að koma á nýrri nálgun sem er óháð ákvörðun innihaldsefna til að bera kennsl á og meta flutningseiginleika PE.

CistanchedeserticolaYC Ma (CD), holoparasitic planta, er algengt hefðbundið kínverskt lyf sem aðallega er notað til að meðhöndla nýrnaskort, líkamsveikleika og hægðatregðu, og þessi notkun hefur verið skráð opinberlega í kínversku lyfjaskránni [6]. Fenýletanóíð glýkósíð (PhGs), þar á meðal echinacoside (EC), acteoside (AC), ísóacteoside (IS), o.s.frv., eru flokkur polyphenolic efnasambanda [7]. Þau eru talin ein af helstu lífvirku innihaldsefnumCistanchetegundir [8]. Lyfjafræðilegar rannsóknir hafa sýnt að lífvirkniPhGer fjölbreytt og inniheldur andoxunarlyf [9], þreytueyðandi [10], lifrarverndandi [11], ónæmisbælandi [12], bólgueyðandi [7, 13] og taugaverndandi áhrif [14]. Hins vegar eru þarmaflutningareiginleikarPhGhafa ekki verið rannsökuð. Í þessari rannsókn könnuðum við þarma gegndræpi PhG-ríks útdráttar (PRE) úr CD sem samþættu kerfi og gegndræpi þriggja helstu PhGs (AC, IS og EC) í aðgreindum Caco-2 frumum. Niðurstöður okkar benda til þess að PRE sé fyrst og fremst flutt með illa frásoguðum óvirkri dreifingu niður styrkleikahalla án útflæðis, sem gefur lyfjahvarfafræðilegan grunn fyrir klíníska notkun PhGs í CD.

Efni og aðferðir

Efni

The human intestinal Caco-2 cell line was obtained from the American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD, USA). AC, IS and EC (>98 prósent) voru keypt frá Must Biotechnology Co. (Chengdu, Kína). Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM), fóstursermi (FBS) og ónauðsynlegar amínósýrur (NEAA) voru framleiddar af Gibco BRL (Grand Island, NY, Bandaríkjunum). 6-brunn TranswellTM plötur (innskotshimnuvaxtarsvæði 4,67 cm2) voru fengnar frá Corning (Costar) Inc. (Tewksbury, MA, Bandaríkjunum). Rottuhala kollagen var fengið frá Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Bandaríkjunum). Öll hvarfefni og efni fyrir HPLC greiningu voru af greiningargráðu.

Undirbúningur PRE frá Cistanche deserticola

Loftþurrkað CD efni var duftformað og dregið út með 70% etanóli. PhG-ríkur hluti var útbúinn eins og áður hefur verið lýst [10] og dreginn út með vatnsmettuðu n-bútýlalkóhóli. Útdráttarvökvinn var þéttur og þurrkaður við lækkaðan þrýsting. Macroporous resin-UV litrófsmæling [15] mældi PhG innihald 78,4 prósent. Lokasýnið táknaði 1,75 prósent afrakstur af hráefni miðað við þurrþyngd. Sýnið sem fékkst var geymt við -20 gráður þar til frekari notkun.

Ákvörðun AC, IS og EC með HPLC

Shimadzu HPLC kerfi búið LC lausnarhugbúnaðinum var notað til að mæla innihald AC, IS og EC í PRE. Notuð var öfugfasa Intersil C18 súla (4,6 mm × 250 mm, 5 μm) og henni haldið við stofuhita. Hreyfanlegu fasarnir voru asetónítríl og vatn sem innihélt 0,1 prósent fosfórsýru (v/v) með hallaskolun (tafla 1) með flæðihraða 1,0 ml/mín. UV litrófsmælirinn var stilltur á 334 nm. Til að ákvarða flæði AC og IS nákvæmlega, þróuðum við nýja HPLC-flúrljómunarskynjun (HPLC-FLD) aðferð. Eftir byggingargreiningu og flúrljómunarbylgjulengdarskönnun (gögn ekki sýnd) fengum við bestu flúrljómunarskynjunarskilyrði fyrir AC (Td: 338 nm, Em: 448 nm) og IS (Td: 320 nm, Em: 434 nm)

HPLC greiningaraðferðin var fullgilt með því að nota eftirfarandi frammistöðueiginleika: stöðugleika, línuleika, næmi, nákvæmni (breytileiki innan og milli daga) og nákvæmni. Greiniefnin í flutningsbuffinu voru geymd við 25 gráður í myrkri í 24 klst og stöðugleiki þeirra mældur. Greiningarefnin voru mjög stöðug í nærveru C-vítamíns (0,4 prósent) vegna þess að hlutfallslegt staðalfrávik (RSD) gildi á toppsvæðunum voru < 3,5="" prósent.="" línuleg="" aðhvarfsjöfnan,="" fylgnistuðullinn,="" línulegt="" svið,="" lod="" og="" loq="" fyrir="" ac,="" is="" og="" ec="" eru="" sýnd="" í="" töflu="" 2.="" lods="" (18–30="" nm)="" og="" loqs="" (60–100="" nm)="" gildin="" sýna="" að="" hplc-fld="" og="" hplc-uv="" aðferðirnar="" eru="" mjög="" viðkvæmar.="" rsd="" gildin="" sem="" tjá="" nákvæmni="" aðferðarinnar="" voru="" öll="">< 2="" prósent="" fyrir="" breytileika="" innan="" og="" milli="" daga,="" sem="" gefur="" til="" kynna="" góða="" nákvæmni.="" til="" endurheimtarmats="" var="" ac,="" is="" og="" ec="" bætt="" við="" flutningsbuffið="" til="" að="" gefa="" þrjú="" (há,="" miðlungs="" og="" lág)="" styrkleikastig.="" endurheimtargildi="" aðferðarinnar="" fyrir="" greiningarefnin="" eru="" tekin="" saman="" í="" töflu="" 3.="" meðalendurheimtan="" var="" á="" bilinu="" 90,0="" prósent="" til="" 96,4="" prósent,="" sem="" gefur="" til="" kynna="" góða="" nákvæmni.="" að="" lokum="" eru="" þekktar="" hplc="" aðferðir="" fullnægjandi="" með="" tilliti="" til="" línuleika,="" næmni,="" nákvæmni="" og="" nákvæmni="" fyrir="" magngreiningu="" á="" ac,="" is="" og="" ec="" í="">

Ákvörðun PRE með lífgreiningarkerfi

Lífgreiningin (heildarandoxunargeta) var byggð á FRAP (járnafoxandi/andoxunarafli) prófinu sem við lýstum áður [16] og var staðfest með tilliti til línuleika og nákvæmni (breytileika innan og milli daga). Línulegleiki lífgreiningaraðferðarinnar var ákvarðaður út frá kvörðunarferlunum. Styrkur línuleikans var 0.0625 − 40 ug/ml (y=0.0258x plús 0.0968, R2=0.996). Nákvæmni hinnar þekktu lífgreiningaraðferðar var ákvörðuð með tilliti til breytileika innan og milli daga fyrir greiningu á PRE (10,0 ug/ml). Endurtekningarhæfni aðferðarinnar innan sólarhrings var ákvörðuð út frá fimm samfelldum ákvörðunum á sama degi. Endurtekningarnákvæmni milli daga var mæld á grundvelli fimm ákvarðana í röð á þremur mismunandi dögum. RSD gildin fyrir nákvæmni aðferðarinnar voru 1,014 prósent og 4,72 prósent fyrir breytileika innan og milli daga, í sömu röð, sem gefur til kynna góða nákvæmni. Þannig er hin þekkta lífgreiningaraðferð fullnægjandi með tilliti til línuleika, nákvæmni og nákvæmni fyrir magngreiningu á PRE í flutningsbuffi.

Frumuræktun

Caco{{0}} frumur voru ræktaðar við 37 gráður og 95 prósent hlutfallslegan raka í andrúmslofti sem innihélt 5 prósent CO2 og miðli sem samanstendur af DMEM, 10 prósent FBS, 1 prósent NEAA, 1 prósent L-glútamíni, penicillíni ( 100 einingar/ml) og streptómýsín (100 ug/ml). Skipt var um miðil annan hvern dag við frumuvöxt og sérhæfingu. Frumurnar voru ræktaðar í 75-cm2 plastflöskum og safnað á 3–5 daga fresti með 0,05% EDTA-trypsíni. Fyrir flutningstilraunirnar voru frumurnar sáð í þéttleikanum 1×105 frumur/cm2 á Transwell innskotum húðuðum með kollageni. Um það bil 21 dögum eftir sáningu voru einlögin notuð í flutningstilraunirnar. Heilleiki þeirra var ákvörðuð með því að mæla rafviðnám þekjuvefsins (TEER) yfir einlögin með EVOM búin ENDOHM-SNAP (World Precision Instruments, Inc., Bandaríkjunum). TEER gildi einlagsins Caco-2 frumu þurfa að fara yfir 500 O∙cm2.

Flutningstilraunir

Einlagið var þvegið með flutningsjafna (P-buffa sem innihélt 10 mM HEPES, 1 mM natríumpýrúvat, 10 mM glúkósa, 3 mM CaCl2 og 145 mM NaCl, pH 7,4) og síðan forræktað í 20 mínútur við kl. 37 gráður. Eftir að flutningsbuffið var fjarlægt var ferskum flutningsbuffi sem innihélt prófunarsýni bætt við apical (AP) hólfið (1,5 ml) í AP til basolateral (BL) stefnurannsókna eða BL hólfið (2,5 ml) í BL til AP stefnurannsóknum. Fyrir AC, IS og EC mælingar með því að nota HPLC, var skammtur (300 ul) fjarlægður úr hverju móttökuhólfinu með mismunandi millibili (30, 60, 90 og 120 mín). Viðtökuhólfið var fyllt með sama rúmmáli af ferskum forhitaðri (37 gráður) flutningsbuffi eftir hverja sýnatöku. Söfnuðu sýnin voru geymd við -20 gráður til frekari notkunar. Til PRE-ákvörðunar með lífgreiningu voru aðeins sýnin tekin eftir 120 mín. Vegna óstöðugleika PRE, AC, IS og EC var 0,4 prósent (w/v) C-vítamín bætt við til að koma á stöðugleika í sýnunum til að ákvarða AC, IS og EC innihald með HPLC, og sýnin fyrir PRE lífgreiningar voru greindar strax eftir sýni. Sýnilega gegndræpisstuðullinn (Papp eða 'Papp) gildi hvers sýnis var reiknað út.

Gagnagreining

Papp gildin í AP BL eða BLAP áttum AC, IS og EC voru reiknuð út út frá eftirfarandi jöfnu: Papp {{0}} (4Q/4t)/(AC0), þar sem Papp er sýnilegur gegndræpisstuðullinn (cm/s) ákvarðaður með HPLC. (4Q/4t) er útlitshraði prófunarefnasambandsins (AC, IS, eða EC) á móttakarahliðinni (μmól/s); A er yfirborðsflatarmál innleggsins (cm2); C0 er upphafsstyrkur prófunarefnasambandsins á gjafahliðinni (μmól/ml). Nánar tiltekið var massaeiningin „ug“ notuð í stað „μmól“ þegar „Papp gildin voru reiknuð út. Gögnin eru gefin upp sem meðaltal ± SD.

Niðurstöður

Samsetning Acteoside, Isoacteoside og Echinacoside í PRE frá Cistanche Deserticola

Vegna þess að AC, IS og EC eru talin helstu lífvirku PhGs Cistanche tegunda [8], greindum við innihald þeirra í PRE með HPLC-UV. Dæmigerð litskiljun er sýnd á mynd 1. Auðkenning þessara innihaldsefna byggðist á því að bera saman varðveislutíma og UV litróf við þá sem eru á ekta stöðlum við bylgjulengd 334 nm. Innihald AC, IS og EC í PRE var 26,60 prósent, 1,84 prósent og 32,83 prósent, í sömu röð. Þannig standa þessi þrjú efnasambönd fyrir 61,27 prósent af PRE; ennfremur benda ofangreindar niðurstöður til þess að PhG innihald í PRE sé 78,4 prósent. Þess vegna eru AC, IS og EC um það bil 80 prósent af PhG í PRE.

Heildar andoxunargeta PRE, AC, IS og EC

Greint hefur verið frá rannsóknum á andoxunarvirkni PhGs frá CD [9], og AC, IS og EC eru um það bil 80 prósent af PhGs í PRE. Þannig var heildar andoxunargeta PRE, AC, IS og EC mæld og er gefin upp með FRAP gildunum (× 10–6 mmól). Eins og sést á mynd 2, þegar FRAP gildið var 8 × 10–6 mmól, var lokastyrkur PRE, AC, IS og EC 6,20 ug/ml, 3,14 ug/ml, 22,92 ug/ml og 4,89 ug/ ml, í sömu röð, sem gefur til kynna að heildar andoxunargeta þessara fjögurra sýna var sem hér segir: AC > EC > PRE > IS. Lífvirkni PRE er rakin til hópa virkra efna (AIG). Fyrir um það bil 60 prósent af PRE sýndu AC og EC sterkari heildar andoxunarvirkni en PRE og IS. Vegna þess að IS (1,84 prósent) er mjög lítið brot af PRE, eru aðrir þættir, eins og veikt andoxunarefni IS, einnig greinilega virk í PRE. Það kemur á óvart að heildar andoxunarvirkni var næstum 7-föld frá AC og hverfu IS þess, sem gefur ekki aðeins til kynna fjölda fenólhýdroxýlhópa [9] heldur einnig staðsetning fenólhýdroxýlhópa í sameindinni sem hafði áhrif á andstæðinginn. -oxunaráhrif.

Staðfesting á Caco-2 einlögum

Til að sannreyna Caco-2 frumu einlaga kerfið, Papp gildi fyrir própranólól (vel flutt merki) og Lucifer gult (illa flutt merki) frá AP til BL yfir Caco-2 einlögin voru ákvörðuð sem 1,51 × 10-5 cm/s og 2,8 × 10-7 cm/s, í sömu röð, og þessi gildi voru í samræmi við þau sem birt voru í fyrri skýrslum [17, 18]. Alkalísk fosfatasavirkniprófun staðfesti einnig að Caco-2 frumu einlögin voru eigindlega sambærileg við þekjuvef smáþarma [19]

Gegndræpi Acteoside, Isoacteoside og Echinacoside

In general, the Papp values of well-absorbed drugs were high (>1.0 × 10–5 cm/s), en lyf sem frásogast illa voru lág (< 1.0="" ×="" 10–6="" cm/s)="" [3].="" as="" shown="" in="" table="" 4,="" the="" papp="" values="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" was="" nearly="" on="" the="" order="" of="" 10–7="" cm/s,="" indicating="" that="" these="" compounds="" were="" poorly="" permeable.="" furthermore,="" efflux="" or="" active="" transport="" were="" not="" observed="" because="" the="" ratios="" of="" papp="" bl="" to="" ap="" papp="" ap="" to="" bl="" for="" ac,="" is="" and="" ec="" was="" between="" 0.90="" ~="" 1.55,="" and="" the="" criterion="" of="" net="" efflux="" proposed="" by="" the="" fda="" guidance="" is="" a="" ratio="" less="" than="" 2="" [20].="" based="" on="" the="" kinetic="" curves="" presented="" in="" fig.="" 3,="" the="" bidirectional="" transport="" percentages="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" at="" 200="" μm="" increased="" linearly="" with="" time.="" the="" transport="" rate="" (tr)="" values="" of="" the="" three="" compounds="" increased="" linearly="" in="" both="" directions="" between="" approximately="" 100="" and="" 300="" μm="" (fig.="" 4).="" these="" results="" indicate="" that="" the="" main="" transport="" mechanism="" of="" ac,="" is="" and="" ec="" is="" also="" passive="">

Gegndræpi PRE

Ofangreindar niðurstöður benda til þess að heildar andoxunargeta PRE sé að minnsta kosti vegna 61,27 prósenta af AIG frá PRE. Þannig metum við TR á PRE út frá styrk-áhrifferil þess heildar andoxunargetu og reiknuðum 'Papp gildin til að endurspegla flutningseiginleika PRE. 'Papp gildi PRE fyrir AP!BL og BL!AP voru (2,16 ± 0},26) × 10–7 cm/s og (3,13 ± 0,29) × 10–7 cm/ s, í sömu röð, sem gefur til kynna að þetta efnasamband væri illa gegndræpt. Ennfremur var útflæði eða virkur flutningur ekki áberandi vegna þess að hlutfall 'Papp BL til AP / 'Papp AP og BL fyrir PRE var 1,45 [20]. Þar að auki jókst tvíátta TR PRE línulega á milli um það bil 300 og 900 ug/ml (mynd 5). Skortur á stefnubundnu vali á niðurstöðunum bendir til þess að óvirk dreifing sé aðal flutningsmáti PRE.

Umræða

Í samanburði við mjög hreinsaðar lyfjavörur er PE almennt blanda sem samanstendur af hundruðum innihaldsefna með mjög mismunandi eðlisefnafræðilega eiginleika. Þess vegna beitir PE kerfisbundinni, fjölmarka og fjölrása samverkandi aðgerð vegna flókins AIG þeirra [21], sem hindrar greiningu á flutningseiginleikum PE. Til að meta flutningseiginleika PE meira vísindalega, hafa sumir vísindamenn greint marga hluti, frekar en einn þátt, í PE [22-24]. Engu að síður getur takmarkaður fjöldi efnisþátta ekki endurspeglað PE í heild sinni. Hins vegar er ómögulegt að ákvarða alla íhluti í PE. Þar að auki, ef fjölbreyttir þættir í PE sýna gjörólíka flutningseiginleika, verður erfitt að bera kennsl á heildræna flutningseiginleika PE.

Á tíunda áratugnum voru lífgreiningarkerfi notuð til að meta TR sýklalyfja [25]. Árið 2005 höfðu Eguchi og samstarfsmenn hans [26] metið andoxunarvirkni gulrótarþykkni með því að nota BL miðil frá aðgreindum Caco-2 frumum; þessi nálgun er hentugri til að endurspegla aðstæður í lífi.

Byggt á fyrri skýrslu um virkni PhGs [9] og niðurstöðum okkar (mynd 2), er hægt að meta TR á AIG í PRE með því að ákvarða heildar andoxunargetu miðilsins í móttökuhólfinu. Eftir flutningstilraunirnar komumst við að því að TR á PRE var svipað í báðar áttir og þessi flutningur var ómettaður og illa frásogaður ('Papp < ​​1.0="" ×="" 10–6="" cm/s)="" [3],="" og="" það="" benti="" ekki="" til="" útflæðis,="" sem="" bendir="" til="" þess="" að="" óvirk="" dreifing="" niður="" styrkleikahalla="" sé="" aðal="" flutningsbúnaður="" pre="" (mynd="" 5).="" ennfremur="" eru="" flutningseiginleikar="" pre="" í="" samræmi="" við="" eiginleika="" ac,="" is="" og="" ec,="" áhrifaríku="" þættina="" sem="" sýna="" andoxunarvirkni="" í="" pre="" (mynd="" 4="" og="" tafla="" 4).="" búist="" var="" við="" þessari="" niðurstöðu="" og="" gaf="" til="" kynna="" að="" núverandi="" lífgreiningarkerfi="" sé="" viðeigandi="" og="" áreiðanlegt="" til="" að="" meta="" flutningseiginleika="" aig="" í="" pre="" í="" aðgreindum="" caco-2="">

Öfugt við kanóníska Papp-gildið, sem er almennt notað til að endurspegla flutning eins efnasambands, getur 'Papp-gildið sem fæst úr TR byggt á styrkleika-áhrifferlunni ekki aðeins endurspeglað þá íhluti sem komast í gegnum einlög með ósnortinni byggingu heldur fela einnig í sér aðra þætti sem tengjast markvirkninni, eins og umbrotsefni efnisþáttanna, efnafræðilega niðurbrotna afurðir og jafnvel sum frumudrep sem seytt er út úr Caco-2 frumum sem svar við örvun sem getur haft áhrif á lífvirkni markhópsins. Þannig ákvarðar fjölþátturinn sem nefndur er hér að ofan, frekar en aðeins fluttir ósnortnir íhlutir, 'Papp gildið. Þess vegna gæti 'Papp átt sterkari fylgni innan Vivo aðstæður en hið kanóníska Papp gildi [26]. Í þessari rannsókn skýrðum við aðgerðalaust dreifð og illa frásogað eðli PRE út frá 'Papp gildi þess, og þetta eðli gæti tengst háum skömmtum og löngum klínísku meðferðartímabili CD [27]. Engu að síður munu þessar niðurstöður veita læknisfræðingum kerfisbundnari leiðbeiningar við beitingu CD þegar aðeins hefur verið greint frá flutningseiginleikum flestra AIG í CD, ekki aðeins PhGs.

Hins vegar verður valinn lífvirknihlutur að vera nægilega næmur til að greina hann í miðli viðtökuhólfsins, sem er áskorun við að koma á lífgreiningarkerfi til að meta flutningseiginleika PE. Ennfremur ætti lífvirknin einnig að vera háð eins mörgum íhlutum og mögulegt er. Í rannsókn okkar var heildargreining á andoxunargetu viðeigandi en nokkrar aðrar aðferðir (S1 mynd.). En þrátt fyrir það getur greining okkar aðeins greint TR á PRE eftir 120 mín.

Sameiginlega kom þessi rannsókn á nýju lífgreiningarkerfi til að meta gegndræpi PRE í þörmum í aðgreindum Caco-2 frumum. Niðurstöðurnar sem fengust sýndu að illa frásoguð óvirk dreifing niður styrkleikahalla án útflæðis er aðal flutningsmáti PRE (mynd 5), sem gefur lyfjahvarfafræðilegan grunn fyrir klíníska notkun PhGs í CD. Notkun nýs lífgreiningarkerfis til að meta TR og reikna þar með 'Papp gildin til að meta þarmaflutningseiginleika AIG í PEs er greinilega framkvæmanlegt. Þessi aðferð gæti einnig hentað öðrum PE með viðeigandi lífvirkni

Stuðningsupplýsingar

S1 mynd. Áhrif PRE á (A) súperoxíð anjón, (B) hýdroxýlrót, (C) lípíðperoxunarafurð og (D) DPPH stakeind. Greiningaraðferðirnar voru gerðar samkvæmt fyrri skýrslum [1, 2] án þess að nota flutningsbuff. IC50 (50 prósenta hömlunarstyrkur) og SC50 (50 prósent hreinsunarstyrkur) gildin voru reiknuð út á grundvelli staðlaðra þéttni-svörunarferla. (DOCX)

Framlög höfunda

Hugsaði og hannaði tilraunirnar: YG XC YQ. Framkvæmdi tilraunirnar: YG CZ FL LF RC YS. Greindu gögnin: CZ YG YQ. Hvarfefni/efni/greiningartæki sem lögðu til: RC. Skrifaði blaðið: YG YQ

Deild rannsóknarmiðstöðvar fyrir lyfjafræði og eiturefnafræði, Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Peking, PR China,

Heilongjiang University of Chinese Medicine, Harbin, Heilongjiang, PR Kína