Hvernig á að berjast gegn lifrarkrabbameini á áhrifaríkan hátt? Cistanche Deserticola virkt innihaldsefni fenýletanóíð glýkósíð til að hjálpa til við að leysa vandamálið

Ágrip

Bakgrunnur:Cistanche tubulosa(Schenk) R. Wight er hefðbundið kínverskt lyf sem sníklar rætur Tamarix plöntunnar og hefur verið notað til að meðhöndla getuleysi karla, ófrjósemi, líkamsveikleika og sem tonic. Hins vegar eru æxliseyðandi áhrif þess á lifrarfrumukrabbamein enn fátækleg. Hér könnuðum við æxlishemjandi áhrif C.tubulosafenýletanóíðglýkósíð(CTPG) á H22 lifrarfrumukrabbameinsfrumum bæði in vitro og in vivo og aðferðum þess.

Aðferðir: Formgerð, lífvænleiki, frumudauði, frumuhringur og hvatberahimnugeta (Δψm) H22 frumna voru greind með öfugum smásjárskoðun, MTT greiningu og frumuflæðisgreiningu, í sömu röð. Tjáning og virkjun próteina í apoptosis leiðinni var greind með Western blot. In vivo æxlishemjandi áhrif voru metin í æxlismúsarlíkani sem komið var á með því að nota Kunming karlkyns mús.

Niðurstöður: CTPG meðferð bældi marktækt H22 frumuvöxt á skammta- og tímaháðan hátt, sem var í tengslum við aukna frumudauða og frumuhringsstopp í G0/G1 og G2/M fasum. Ennfremur sást litningaþétting í CTPG-meðhöndluðum H22 frumum. CTPG meðferð jók verulega Bax/Bcl-2 hlutfall, minnkaði Δψm og jók losun cýtókróm c. Magn klofins kaspasa-8 og kaspasa-9 í bæði ytri og innri boðleiðum jókst marktækt sem virkjaði kaspasa-7 og -3 í röð til að kljúfa PARP. Að lokum hamlaði CTPG vöxt H22 frumna í músum og bætti lifun æxlismúsa.

Ályktanir: Þessar niðurstöður bentu til þess að CTPG bæli H22 frumuvöxt í gegnum bæði ytri og innri frumufrumuleiðir.

Leitarorð:Cistanchetubulosa, Fenýletanóíðglýkósíð, Apoptosis, Merkjaleið, Æxlismúsarlíkan

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Cistanche deserticola hefur mörg áhrif, smelltu hér til að vita meira

Bakgrunnur

Lifrarkrabbamein var í sjötta sæti yfir krabbameinstíðni og í fjórða sæti yfir krabbameinsdauðsföll um allan heim. Þar að auki var það í fjórða sæti fyrir krabbameinstíðni og fyrsta fyrir krabbameinsdauða í löndum með lágan þjóðfélagsfræðilegan vísitölu [1]. Í Kína er lifrarkrabbamein þriðja helsta orsök krabbameinstengdrar dauða árið 2015 [2]. Meira en 90 prósent lifrarkrabbameina eru lifrarfrumukrabbamein (HCC) í heiminum [3]. Eins og er er lifrarskurður aðalvalkosturinn fyrir meðferð á HCC. Hins vegar uppfylltu innan við 30 prósent sjúklinga með HCC skilyrði um læknandi lifrarbrottnám og heildarlifunarhlutfall 5-ára er enn eins lágt og 35-50 prósent vegna mikillar endurkomutíðni [4, 5 ]. Framboð á meðferðarúrræðum fyrir sjúklinga með miðlungs til langt genginn HCC er mjög takmarkað. Sorafenib, sameindamiðað lyf, hefur verið samþykkt af FDA sem fyrsta meðferðarúrræði fyrir langt genginn HCC. Hins vegar lengir sorafenib aðeins um 3 mánaða lifun og svarhlutfallið er minna en 4 prósent [6, 7]. Það er brýnt að þróa ný lyf eða aðferðir gegn HCC. Hefðbundin kínversk læknisfræði (TCM) eitt sér eða ásamt öðrum aðferðum hefur verið notuð til að meðhöndla HCC og sýnt fram á klínískan ávinning þar á meðal lengri lifunartíma, bætt lífsgæði, minni aukaverkanir og svo framvegis [8, 9].Cistanche, eins konar TCM, hefur ýmsar líffræðilegar aðgerðir, svo sem andoxun, bólgueyðandi, öldrun og taugavörn [10, 11].Fenýletanóíðglýkósíðhafa verið talin helstu virku þættirnir íCistanche, sem hafa fjölbreytta starfsemi þar á meðal andoxun, bólgueyðandi, lifrarvörn og taugavörn [12-15]. Hópurinn okkar hefur greint frá því að Cistanche tubulosafenýletanóíðglýkósíð(CTPG) gæti framkallað apoptosis í sortuæxli B16-F10 frumum og hindrað vöxt æxla í músum [16]. Í þessari rannsókn mældum við æxlishemjandi áhrif CTPG á HCC H22 frumur bæði in vitro og in vivo og rannsökuðum virkni þess. Við komumst að því að CTPG framkallaði apoptosis í H22 frumum í gegnum bæði ytri og innri boðleiðir og bæli vöxt H22 æxla í músum.

Aðferðir

Frumlína

Mús H22 lifrarfrumukrabbameinsfrumur voru fengnar frá Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, Xinjiang University (Urumqi, Xinjiang, Kína) og ræktaðar í RPMI 1640 miðli (Gibco) bætt við 100 U/ml penicillíni og 100 ug/ml streptómýsín og 10 prósent hitaóvirkjuð nautgripasermi (Gibco) við 37 gráður í rakaðri andrúmslofti með 5 prósent CO2.

MTT próf

CTPG var keypt frá Hetian Dichen Biotech Co., Ltd. (Hetian, Xinjiang, Kína) og helstu efnasambönd CTPG voru hæf og magngreind með hágæða vökvaskiljun [16]. Frumulífvænleiki var metinn með 3- (4, 5-dímetýlþíasól-2-ýl)-2, 5-dífenýltetrasólíumbrómíði (MTT) (Sigma, St. Louis, MO , Bandaríkjunum) prófun. H22 frumur voru sáð inn í 96-brunnsplötur með þéttleikanum 2 × 104 frumur í 100 ul miðli í hverri brunn og ræktaðar við 37 gráður. Eftir 24 klst. voru frumur meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eða 0,3 prósent DMSO (jafnt og í 400 ug/ml CTPG) í 24, 48 og 72 klst. . Eftir skilvindu við 1000 rpm í 7 mínútur var flotinu hent og 100 ul af MTT lausn (5 mg/ml í PBS) var bætt í hvern brunn. Plöturnar voru ræktaðar við 37 gráður í 4 klst og 100 ul DMSO var bætt við til að leysa upp mynduðu formazan kristalla. OD490 gildin voru greind með 96- holu örplötulesara (Bio-Rad Laboratories, CA, Bandaríkjunum). Frumulífvænleiki var reiknaður út samkvæmt formúlunni: Frumulífvænleiki ( prósent )=(ODmeðhöndluð/ODunmeðhöndluð) × 100 prósent .

Uppgötvun apoptosis

H22 frumur voru meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eða 0,3 prósent DMSO í 24 klst. og síðan litaðar með Annexin V FITC/ Propidium iodide (PI) Apoptosis Detection Kit (YEASEN, Kína) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Sýni voru greind með frumuflæðismælingu (BD FACSCalibur, Bandaríkjunum).

Greining á hvatberahimnugetu

H22 frumur voru meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 200 og 400 ug/ml) í 24 klst og síðan litaðar með himnugegndræpa JC-1 litarefninu (Beyotime, Kína) í 20 mín við 37 gráður. Eftir að hafa þvegið tvisvar með JC-1 jafnalausn, voru sýni endurleyst með 300 ul af JC-1 jafnalausn og greind með frumuflæðismælingu (BD FACSCalibur, Bandaríkjunum).

Greining á frumuhringnum

H22 frumur voru sáð í 60 mm ræktunardiskum og meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eða 0,3 prósent DMSO fyrir 24 klst. Öllum frumum var safnað og þvegin tvisvar með PBS. Frumur voru festar í 70 prósent ísköldu etanóli við -20 gráður í 2 klst og þvegnar tvisvar með PBS, síðan aftur sviflausnar í 300 ul própídínjoðíð/RNase litunarbuffi (BD Biosciences). Eftir 10 mínútur við stofuhita var sýnum safnað með frumuflæðismælingu (BD FACSCalibur, USA) og frumuhringsdreifing var greind með ModFit LT 3.0 hugbúnaðinum.

Hoechst 33.258 litun

Formfræðilegar breytingar H22 frumukjarna voru greindar með himnugegndræpi DNA-bindandi litarefni Hoechst 33,258 litun. H22 frumum var sáð í 6-brunnsplötu í styrkleikanum 1 × 105 frumur/brunn í 2 ml miðli. Eftir 60 prósent ~ 70 prósent samruna voru frumurnar meðhöndlaðar með CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) í 24 klst. Frumunum var safnað saman og festar með 4 prósent ísköldu paraformaldehýði við 4 gráður í 10 mín. Eftir þvott með PBS voru frumur litaðar með Hoechst 33,258 (Beyotime, Kína) við 4 gráður í 10 mín. Sýni voru skoðuð með öfugum flúrljómunarsmásjá (Nikon Eclipse Ti-E, Japan).

Western blot

Anti-caspase-3, anti-cloved caspase-3, Anti-Bcl-2 og anti-Bax voru keyptir frá Beyotime Biotech Co., Ltd. (Shanghai, Kína). Anti-kaspasi-7, and-klofinn-kaspasi-7, and-caspase-8, and-klofinn-kaspasi-8, and-caspasi-9, andstæðingur-kaspasi -kljúfur-kaspasi-9, and-PARP, and-klofinn PARP, and-mús IgG-HRP og and-kanínu IgG-HRP voru keyptir frá Cell Signaling Technology. And- -aktín var keypt frá Beijing ComWin Biotech Co., Ltd. (Beijing, Kína).

H22 frumur voru meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) eða 0,3 prósent DMSO í 24 klst. Frumum var safnað saman og þær ljósaðar með frumulýsunarlausninni RIPA (Beijing ComWin Biotech Co., Ltd) í 30 mínútur á ís. Sýnum var snúið niður (12,000 g í 15 mínútur við 4 gráður) til að safna ofanvatninu og próteinstyrkur var mældur með BCA setti (Thermo Fisher Scientific, USA). Jafnt magn af próteini í hverju sýni var einangrað með 12 prósent SDS-PAGE og flutt yfir á PVDF himnur (Biosharp, Kína). Eftir blokkun með TBST jafnalausn sem innihélt 5 prósent fitulausa mjólk, voru himnur ræktaðar með samsvarandi aðal mótefnum og annars konar mótefnum tengdum við piparrótarperoxidasa (HRP), í sömu röð. Eftir þvott með TBST voru markpróteinin greind með ECL prófunarbúnaði (Beyotime, Kína).

Dýra- og siðferðisyfirlýsing

6-8 vikna gamlar karlkyns Kunming mýs voru keyptar frá Animal Laboratory Center, Xinjiang Medical University (Urumqi, Xinjiang, Kína). Mýs voru geymdar í hefðbundinni hitastýrðri, ljóshjólaðri dýraaðstöðu Xinjiang háskólans. Allar dýrarannsóknir voru gerðar samkvæmt leiðbeiningum dýraverndar- og notkunarnefndar Xinjiang háskólans. Bókunin var samþykkt af nefndinni um siðfræði dýratilrauna í Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering (BRGE-AE001), Xinjiang University.

Æxlismús rannsókn

Til að framkalla æxlismúsarlíkan var Kunming karlkyns músum sprautað undir húð með 1 × 106 H22 frumum í 100 ul PBS í hægri hlið. Eftir 3 daga var músum skipt af handahófi í 3 hópa (7 mýs / hópur). Viðmiðunarhópnum var sprautað með 0,1 ml DMSO undir húð í kringum æxlið. CTPG-200 og CTPG- 400 hópum var sprautað undir húð með 200 eða 400 mg/kg CTPG í 0,1 ml DMSO í kringum æxlið. Mýs voru meðhöndluð á 2 daga fresti í allt að 21 dag. Æxlastærðir voru mældar með því að nota kvarða í allt að 25 daga og æxlisrúmmál var reiknað út samkvæmt formúlunni: æxlisrúmmál (mm3)=(lengd×breidd2)/2. Eftir 25 daga var fylgst með lifun æxlismúsa á hverjum degi þar til þessari rannsókn lauk.

tölfræðigreining

Tölfræðileg marktekt var reiknuð út með einhliða dreifnigreiningu meðal meðferðar- og samanburðarhópa. Öll gögn voru gefin upp sem meðaltal ± staðalfrávik (SD). p < 0.05="" var="" talið="" tölfræðilega="">

Niðurstöður

CTPG minnkaði lífvænleika H22 frumna in vitro

Til að kanna æxlishemjandi áhrif CTPG á HCC voru H22 frumur meðhöndlaðar með mismunandi styrkleika CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) in vitro. Eftir 24 klst kom fram formgerð H22 frumna með því að nota öfuga smásjá. Við komumst að því að formgerð H22 frumna var verulega breytt með CTPG meðferð. Með aukinni styrk CTPG urðu frumur litlar og kringlóttar og frumufjöldi minnkaði einnig mikið (mynd 1a). MTT prófun var notuð til að greina lífvænleika H22 frumna eftir CTPG meðferð í 24, 48 og 72 klst. CTPG minnkaði verulega lífvænleika H22 frumna á skammtaháðan og tímaháðan hátt (mynd 1b). CTPG við 300 ug/ml náði besta hamlandi hraða (mynd 1c). Gildi IC50 á CTPG fyrir H22 frumur eru 236 ug/ml eftir 24 klst. og 169,8 ug/ml eftir 48 klst.

CTPG framkallaði apoptosis í H22 frumum

Til að kanna hvort minnkuð lífvænleiki H22 frumna sé miðlað af framköllun apoptosis, voru H22 frumur meðhöndlaðar með mismunandi styrk af CTPG (0, 100, 200, 300 og 400 ug/ml) í 24 klst. og litaðar með PI og viðauka V. Niðurstöður flæðifrumumælinga sýndu að CTPG framkallaði marktækt frumudauða H22 frumna (þar á meðal snemma og seint frumudauða) á skammtaháðan hátt (mynd 2a). Þrátt fyrir að stór skammtur af CTPG hafi einnig aukið drep H22 frumna verulega, gegnir drep lítið hlutverk í hömlun á H22 frumuvexti vegna lægra hlutfalls (8,3 prósent) samanborið við frumudauða (52,6 prósent). Ennfremur voru heildarprótein H22 frumna einangruð eftir CTPG meðferð og tjáning á and-apoptotic B frumu eitilæxli 2 (Bcl-2) og pro-apoptotic BCL-2-tengt X prótein (Bax) greindist með Western blot. Grátónaskönnunargögn sýndu að tjáningarmagn Bax og Bcl-2 var aukið og lækkað, í sömu röð. Bax/Bcl-2 hlutfallið var verulega aukið (mynd 2b). Þessar niðurstöður benda til þess að CTPG valdi frumudauða í H22 frumum.

CTPG framkallar litningaþéttingu og frumuhringsstopp í H22 frumum

Greint hefur verið frá því að DNA skemmdir og frumuhringsstopp af völdum lyfja geta hamlað æxlisfrumuvöxt og valdið frumudauða í æxlisfrumum [17, 18]. Til að greina formgerð kjarna í H22 frumum eftir CTPG meðferð í 24 klst, voru H22 frumur litaðar með Hoechst 33.342 og skoðaðar með öfugum flúrljómunarsmásjá. CTPG-meðhöndlaðar frumur sýndu skammtaháða aukningu á skærþéttum litningi kjarna, en ómeðhöndlaðar frumur sýndu einsleita litaða kjarna (mynd 3a). Frumuhringsdreifing í H22 frumum var greind frekar með PI litun eftir CTPG meðferð í 24 klst. Eins og sést á mynd 3b jók CTPG meðferð marktækt hlutfall G0/G1- og G2/M-fasa frumna og minnkaði marktækt hlutfall S-fasa frumna, sem bendir til þess að CTPG hafi framkallað G 0/G1 og G2/M fasastopp í H22 frumum. Stór skammtur af CTPG jók einnig verulega hlutfall undir G1 frumna.

CTPG minnkaði hvatberahimnugetu og jók losun cýtókróm c

hvatberaháð ferill gegnir mikilvægu hlutverki við framköllun frumudauða [19, 20]. Hægt er að fylgjast með breytingum á hvatberahimnugetu (Δψm) með JC-1 litun vegna þess að JC-1 samsöfnun (rauð flúrljómun) getur sundrast í einliða (græn flúrljómun) með minnkun Δψm [21]. Eftir CTPG meðferð í 24 klst, voru H22 frumur litaðar með JC- 1 litarefni. Gögn flæðifrumumælinga sýndu að rauð flúrljómun í FL-2 rásinni og græn flúrljómun í FL-1 rásinni minnkuðu verulega og jukust við CTPG meðferð. Hlutfall PE-FITC plús frumna var marktækt aukið (mynd 4a), sem bendir til þess að CTPG minnkaði Δψm í H22 frumum. Þetta er í samræmi við aukið Bax/Bcl-2 hlutfall. Þar af leiðandi sáum við að losun cýtókróm c jókst verulega við CTPG meðferð (mynd 4b). Þessar niðurstöður bentu til þess að CTPG gæti að hluta framkallað apoptosis í H22 frumum í gegnum hvatberaháða (innri) leið.

CTPG virkjaði kaspasa ferlið og kom í veg fyrir viðgerðir á DNA

Næst var virkjun kaspasa framkallað af CTPG í gegnum bæði ytri og innri boðleiðir greind. Eftir CTPG meðferð í 24 klst. voru heildarprótein einangruð úr H22 frumum og magn pro- og klofna kaspasa greindist með Western blot. Í samanburði við ómeðhöndlaða eða DMSO-viðmiðunina, hækkaði CTPG meðferð marktækt ekki aðeins magn klofins kaspasa-8 (ytri feril) heldur einnig magn klofins caspasa-9 (innri ferill) (mynd. 5). Virkjaður kaspasi-8 og -9 klofuðu í röð pro-kaspasa-3 og -7 sem sáust á mynd 5. Virkjaður kaspasi-3 klofnaði DNA viðgerðarensím pólý (ADP-ríbósa) pólýmerasa (PARP) til að koma í veg fyrir DNA viðgerð og safna DNA skemmdum eins og sést á mynd 3a.

Þessar niðurstöður bentu til þess að CTPG framkallaði frumudauða í H22 frumum í gegnum bæði ytri og innri boðleiðir.

CTPG bælir vöxt H22 HCC in vivo og bætir lifun æxlismúsa

Að lokum voru æxlishemjandi áhrif CTPG á HCC metin í æxlismúsarlíkani, sem var komið á með inndælingu undir húð á H22 frumum. Eftir 3 daga H22 frumuinndælingu voru æxlismýs meðhöndluð með CTPG 8 sinnum. Fylgst var með líkamsþyngd músa og æxlastærð á tilgreindum tímapunktum. Eins og sýnt er á mynd 6a hefur líkamsþyngd músa í hverjum hópi engan marktækan mun, sem bendir til þess að valdar skammtar af CTPG hafi engar augljósar aukaverkanir. Athyglisvert var að æxlisvöxtur í músum sem fengu bæði 200 mg/kg og 400 mg/kg af CTPG var marktækt hindraður (mynd 6b). Þar að auki bættu tveir skammtar af CTPG meðferð verulega lifun æxlismúsa (3/7, 3/7) samanborið við samanburðarhópinn (0/7) í lok tilraunarinnar (mynd 6b). Við komumst einnig að því að CTPG jók verulega útbreiðslu miltisfrumna sem einangraðir voru frá karlkyns Kunming músum á skammtaháðan hátt (mynd 6c), sem bendir til þess að CTPG hafi ónæmisörvandi áhrif.

Umræða

TCM hefur verið notað til að meðhöndla ýmsa sjúkdóma þar á meðal krabbamein í langa sögu. Greint hefur verið frá því að TCM geti framkallað apoptosis í mismunandi gerðum æxlisfrumna með bæði ytri (dauðaviðtakamiðluðum) og innri (hvatberaháðum) boðleiðum til að hafa æxlishemjandi áhrif [22-25]. Ferliðar tvær geta virkjað caspasa-8 og -9, í sömu röð [24, 26]. Hér komumst við að því að CTPG bældi verulega H22 frumuvöxt með örvun á frumudauða og frumuhringsstopp. Magn klofins kaspasa-8 og -9 var marktækt uppstýrt með CTPG meðferð, sem bendir til þess að bæði ytri og innri boðleiðir hafi átt þátt í framkalli frumudauða. Fyrri rannsókn okkar sýndi að CTPG framkallaði frumudauða í sortuæxli B16-F10 frumum með hvatberaháðri leið sem jók magn klofins caspasa-9 en ekki caspasa-8 [16]. CTPG gæti virkjað mismunandi boðleiðir í mismunandi gerðum æxlisfrumna.

Heilleika hvatberahimnu er þétt stjórnað af meðlimum BCL-2 próteinafjölskyldunnar, þar á meðal Bax og Bcl-2 [27, 28]. Hlutfall Bax og Bcl-2 gegnir mikilvægu hlutverki í hvatberaháðri apoptosis ferli [29]. Í H22 frumum sem voru meðhöndlaðar með CTPG var Bax/Bcl-2 hlutfallið marktækt uppstýrt, sem gæti valdið lækkun á Δψm og losun cýtókróm c sem sést í þessari rannsókn. Þar af leiðandi var pro-caspase-9 klofið og virkjað. Að lokum, frumkvöðlar virks kaspasa-8 og -9 virkjaðu böðul kaspasa-3 til að kljúfa PARP til að koma í veg fyrir viðgerðir á DNA. Samanlagt bentu þessar niðurstöður til þess að CTPG valdi frumudauða í H22 frumum í gegnum bæði ytri og innri boðleiðir.

Í æxlismúsamódelinu bældi CTPG verulega vöxt H22 HCC og bætti til muna lifun æxlismúsa. Athyglisvert er að CTPG studdi skammtaháð útbreiðslu miltisfrumna frá Kunming músum, sem er í samræmi við fyrri rannsókn okkar [16].

Þessar niðurstöður bentu til þess að CTPG gæti bælt vöxt H22 HCC í músum með bæði beinum æxlishemjandi áhrifum og óbeinum ónæmisaukningum.

Ályktanir

CTPG bældi vöxt H22 frumna bæði in vitro og in vivo og framkallaði frumufrumu í H22 frumum með bæði ytri og innri boðleiðum. Þessar upplýsingar bentu til þess að CTPG gæti verið hugsanlegur frambjóðandi til meðferðar á HCC.

Skammstafanir

Bax: BCL-2-tengt X prótein; Bcl-2: B-frumu eitilæxli 2; CTPG: Cistanche tubulosa phenylethanoid glýkósíð; HCC: lifrarfrumukrabbamein; HRP: piparrótarperoxidasi; MTT: 3-(4, 5-dímetýlþíasól-2-ýl)-2, 5- dífenýltetrasólíumbrómíð; PARP: DNA viðgerðarensím pólý (ADP-ríbósa) pólýmerasa; TCM: hefðbundin kínversk læknisfræði; Δψm: hvatbera himnumöguleiki.

Fjármögnun

Þessi vinna var studd af High-Level Talent Introduction Project Xinjiang Uygur sjálfstjórnarsvæðisins til JL, styrki kínverska náttúruvísindasjóðsins (31460241) til JL, og Doctoral Start-up Fund Xinjiang University (BS160261 til XW og BS150236 til YL).

Aðgengi gagna og efnis

Óunnin gögn fyrir þessa rannsókn eru fáanleg ef sanngjarnt er óskað til samsvarandi höfundar.

Framlag höfunda

JL og JL hönnuðu tilraunirnar. PY, JL, AA og YY gerðu tilraunirnar. LX, XW og YL greindu gögnin. PY, JL og JL skrifuðu handritið. Allir höfundar lögðu sitt af mörkum og samþykktu lokahandritið.

Siðfræðisamþykki

Dýrarannsóknin var samþykkt af nefndinni um siðfræði dýratilrauna í Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, Xinjiang University.

Samkeppnishagsmunir

Höfundar lýsa því yfir að þeir hafi engra hagsmuna að gæta.

Athugasemd útgefanda

Springer Nature er hlutlaus með tilliti til lögsögukrafna í birtum kortum og stofnanatengslum.

Upplýsingar um höfund

1 Xinjiang Key Laboratory of Biological Resources and Genetic Engineering, College of Life Science and Technology, Xinjiang University, 666 Shengli Road, Urumqi, Xinjiang 830046, Kína.

2 College of Life Science, Xinjiang Normal University, 102 Xinyi Road, Urumqi 830054, Xinjiang, Kína.

3 Tengd æxlissjúkrahús við Xinjiang Medical University, Urumqi 830011, Kína.