Samverkandi litarefni gegn húð af cistanche fenýletanoid glýkósíðum og glabridini
Jan 14, 2025
Ágrip til að rannsaka samverkandiÁhrif CistancheFenýl etanól hlið (PHG) og glabridin (GLA) gegn litarefni í húð, massahlutfall PHG og GLA var skimað með in vitro tyrosinase hömlunartilraun, 1, {1}} dífenýl -2- trinitrophenylhydrazine (dpph) og 2, 2- diazo-bis (3- etýl-benzothiazole -6- súlfónsýru díamonium katjón (ABTS+) Sá radíkalsrækt. Innihald sem vísitölur.
HiðBólgandiLíkan af HACAT frumum af völdum lípópólýsakkaríðs (LPS) var komið á og bólgueyðandi áhrif lyfsins voru metin með því að hindra losun interleukin -6 (IL -6) og æxlis dreps þáttar- (TNF-). Oxunarálagslíkan HACAT frumna af völdum azodiisobuamidine hýdróklóríðs (AAPH) var enn frekar staðfest og aukin virkni superoxíðs dismutasa (SOD) og katalasa (CAT) var notuð sem vísitölur til að meta andoxunaráhrif lyfsins. Besta massahlutfall PHG og GLA var ákvarðað af ofangreindum þremur frumulíkönum. Niðurstöðurnar sýndu að vatnslausnir PHG/GLA (1∶1), PHG/GLA (5∶1) og PHG/GLA (10∶1) unnin með M (PHG) ∶M (GLA) =1 ∶1, 5∶1, 10∶1 sýndu góða hindrandi og samverkandi áhrif á tyrósínasa virkni og virkni gegn eiturefnum. Hömlunartíðni PHG/GLA (1∶1),
PHG/GLA (5∶1) og PHG/GLA (1 0 ∶1) Vatnslausnir með massaþéttni 0,4 g/l voru 94,37%, 92,93%og 88,06%, í sömu röð. Hreinsunartíðni DPPH sindurefna var 89,44%, 88,72,%og 88,10%, í sömu röð.
Hreinsunartíðni ABTs+ sindurefna var 1 0 0,13%, 100,0,1%og 99,87%, í sömu röð. Þegar massastyrkur PHG/GLA var 25 ug/ml, PHG/GLA (1∶1), PHG/GLA (5∶1) og PHG/GLA (10∶1) sýndu vatnslausnir engin frumueitrunaráhrif á B16F10 og HACAT frumur. Hömlun á virkni týrósínasa í PHG/GLA (1 ∶1) vatnslausn var sterkari (týrósínasa virkni 23,80%) og melaníninnihaldið (30,90%) minnkaði verulega. PHG/GLA (1∶1) Vatnslausn sýndi bestu hömlunaráhrifin á IL -6 og TNF-losun og getu til að auka virkni SOD og CAT. Samsetningin af PHG og GLA sýndi góða samverkandi frammistöðu, yfirburði A til stakt lyf og hærra en PHG/ GLA (5∶1) og PHG/ GLA (10∶1) vatnslausn. Samsetning PHG og GLA gegndi samverkandi hlutverki við að bæta litarefni í húð með því að hindra melanínframleiðslu og bólgueyðandi og andoxunaráhrif.
Lykilorð Cistanche fenýletanoid glýkósíð; glabridin; samverkandi áhrif; Litarefni gegn húð; andoxun; bólgueyðandi; lyfjaefni
Cistanche fenýl etanól hlið fyrir hvítun
Stuðningsþjónusta Wecistanche-stærsti útflutningsaðili Cistanche í Kína:
Netfang: wallence.suen@wecistanche.com
Whatsapp/sími: +86 15292862950
Fyrir frekari upplýsingar um mögulega afslátt, vinsamlegast ekki hika við að hafa samband við þjónustudeild viðskiptavina okkar. Þeir munu vera ánægðir með að aðstoða þig!
Litarefni í húð er húðsjúkdómur af völdum þátta eins og meiðsla, bólgu í húð og útfjólubláum geislun [1-2]. Þessir þættir geta leitt til óeðlilegrar aukningar á melaníni, sem aftur veldur vandamálum eins og chloasma, freknur og bólgueyðandi ofstillingu (PIH) [3-4], sem hefur áhrif á andlegt ástand og lífsgæði fólks. Sem stendur beinist meðferð á litarefni í húð aðallega að því að hindra týrósínasa, lykilensím í myndun melaníns [5-6].
Nýjustu rannsóknirnar [7-8] sýna að litarefni í húð fer eftir náinni tengingu milli keratínfrumna og sortufrumna í húðþekju. Þegar sindurefnin og bólguþættirnir, sem keratínfrumur hafa losað, komast í snertingu við melanocytes, munu þeir framkalla aukningu á virkni týrósínasa, sem leiðir til aukningar á melaníninnihaldi. Þeir munu einnig flýta fyrir flutningi melaníns og valda því að melanín leggur á yfirborð húðarinnar. Þess vegna krefst meðferð á litarefni í húð margvíslegar ráðstafanir eins og að hindra melanínframleiðslu, bólgueyðandi og bólgueyðingu.
Sem stendur, þrátt fyrir að hefðbundin lyfjablöndur, svo sem hýdrókínón og hýdrókínón, hafi ákveðin áhrif á meðhöndlun á litarefni í húð, eru verkunarhættir þeirra tiltölulega stakir og geta valdið aukaverkunum [9-10]. Til samanburðar eru náttúruleg lyf náttúruleg og væg í gildi og eru sífellt viðurkennd og lofuð af neytendum [11-12]. Sérstaklega getur samsetning margra plöntuútdráttar [13-14] ekki aðeins hindrað framleiðslu melaníns heldur hefur einnig mörg áhrif eins og bólgueyðandi og andoxunaráhrif, sem veitir nýjar hugmyndir og aðferðir til meðferðar á litarefni í húð.
Cistanche Deserticola MA hefur einstakt lyf og er þekkt sem „eyðimerkurgaseng“. Rannsóknir hafa komist að því að einkennandi innihaldsefnið fenýletanóíð glýkósíð sem er að finna í cistanche hefur góða andoxunarvirkni [15] og bólgueyðandi áhrif [16] og hefur einnig ákveðin týrósínasa hindrunaráhrif [17]. Glycyrrhizin er flavonoid hluti í Glycyrrhiza Glabra L., sem hefur öflug hvítandi áhrif og er þekkt sem „hvítandi gull“ [18]. Hefðbundin kínversk læknismeðferð við litarefni í húð byrjar venjulega fbystmning milta og nýru, hreinsar burt hita og afeitrun og endurnýjun Qi og blóð [19].
Fenýletanóls glýkósíð af Cistanche Deserticola geta bætt nýrnasjúkdóm og gagnast kjarna og blóði, á meðan glycyrrhiza glabra getur bætt milta og Qi, hreinsað hita frá sér og afeitrað. Þau tvö geta unnið saman til að standast litarefni. Samsetningin offenýletanoidc glýkósíð af cistanche deserticola og glabridin getur staðist litarefni í húð frá mörgum víddum og markmiðum, verndað gegn útfjólubláum geislum í öllu bandinu, hindrar samverkandi týrósínasa virkni og dregið úr melanínframleiðslu og getur einnig dregið úr sindurefnum og flutningi og flutningi og flutningi og flutningi og flutningi og flutningi og flutningum og flutningum. Hins vegar eru fáar skýrslur í fræðiritunum um samverkandi hömlun á litarefni í húð með fenýletanóíð glýkósíðum af cistanche deserticola og glabridin.
Í þessari grein er ætlað að kanna hvort samverkandi áhrif séu á milli pphenylethanoidglycosides af cistanche deserticola (PHG) og glabridin (GLA) í gegnum in vitro lífefnafræðilegar tilraunir og stofnun 3 frumulíkana, fá ND besta efnasambands massahlutfall fyrir samverkandi áhrif. Gert er ráð fyrir að það muni veita fræðilegan stuðning og hagnýtar leiðbeiningar um þróun náttúrulegra plöntuhúðarafurða og hjálpa til við að efla húðvöruiðnaðinn til að þróa í náttúrulegri, heilbrigðari og skilvirkari átt.
Hvar: Viðbrögð eru frásog sýnislausnar, L-týrósínlausn, PBS og týrósínasa lausn; Hvarfastýring er frásog sýnislausnar, L-týrósínlausn, N og PBS lausn; Autt er frásog L-týrósínlausnar, PBS lausnar og týrósínasa lausnar; Auð stjórn er frásog L-týrósíns og PBS lausna.
'
1.3.2 Ákvörðun DPPH frjálsra róttækni
Í fyrsta lagi, vega nákvæmlega {{0}}. 0 197 g (0. 0 5 mmól) af DPPH og leysa það upp í 25 0 ml af anhydrous ethanol til að undirbúa dpph vinnandi lausn með styrk 0. mmol/l. Síðan voru PHG og GLA framleidd í PHG etanóllausn og GLA etanóllausn með massaþéttni 0. 0 01, 0,01, 0,1, 0,4, 0,8, 1,2, 1,6, 2,0 mg/ml í sömu röð með því að nota 50% etanól eftir rúmmáli og VC etanóllausn var útbúin í sömu leið. Síðan var PHGS etanóllausn og GLA etanóllausn blandað jafnt við M (PHGS lausn) ∶ M (GLA lausn)=40 ∶1, 20∶1, 10∶1, 5∶1, 1∶1, 1∶5, 1∶10, 1∶20, 1∶40 til að fá 9 tegundir af phgs/gla etanóllausnum með mismunandi massa ratis, sem skráð voru 9 tegundir PHGS/GLA etanóls lausna með mismunandi massa Ratios, sem voru skráðar sem PHGS/GLA ethanol lausnir með mismunandi massa Ratios, sem voru skráðar sem PHGS/GLA ethanol Solutions með mismunandi massa Ratios, sem voru skráðar “ (40∶1) ~ PHG/GLA (1∶40) etanóllausnir. Að lokum, bætið 100 mL af mismunandi sýnislausnum og 100 μl af DPPH vinnulausn við 96- vel plötuna, blandið vel og haldið frá ljósi við stofuhita í 30 mínútur. Mældu frásogið við 517 nm með ensímmerki. VC var notað sem jákvæða stjórnun og hver tilraun var endurtekin 3 sinnum. Reiknið DPPH sindurefnahraðahraða (%) samkvæmt formúlu (2).
DPPH sindurefni með róttækum hraða/%=(1 −𝐴1 - 𝐴3𝐴2) × 100 (2) þar sem: A1 er frásog sýnislausnar + DPPH vinnandi lausn; A2 er frásog 50% etanóls miðað við rúmmál + DPPH vinnulausn; A3 er frásog sýnislausnar + 50% etanól miðað við rúmmál.
1.3.3 Ákvörðun ABTs+ Hreinsunarhæfni sindurefna
Vigtið fyrst 1 g (1,82 mmól) af ABT og leysir það upp í afjónuðu vatni til að útbúa ABT -vinnulausn með lokastyrk 7,4 mmól/l; vega 0. 5 g af kalíum persúlfat og leysa það upp í afjónuðu vatni til að útbúa kalíumpersúlfat vinnulausn með lokastyrk 2,6 mmól/l; Blandið ABTS vinnulausninni og kalíumpersúlfat vinnulausninni í jafnt rúmmál og bregst við í 12 klukkustundir í myrkrinu til að undirbúa ABTS+ vinnulausnina. Síðan, samkvæmt aðferðinni í kafla 1.3.2, útbúa PHG etanóllausn, GLA etanóllausn, N og VC etanóllausn, svo og PHG/GLA (40∶1) ~ PHG/GLA (1∶40) etanóllausn.
Að lokum, bætið 40 μl af mismunandi sýnislausnum og 160 μl af ABTS+ vinnandi lausn við 96- vel plötuna, blandið vel við stofuhita í myrkrinu í 6 mínútur og mælið frásog lausnarinnar við 734 nm með ELISA lesanda. Reiknið ABTS+ sindurefnahraðahraða (%) samkvæmt formúlu (3).
Hvar: A1 er frásog sýnislausnar + ABTS + vinnandi lausn; A2 er frásog afjónaðs vatns + ABTS + vinnulausn; A3 er frásog sýnislausnar + afjónað vatn.
1.4 Frumutilraun
1.4.1 Frumurækt
Eftir að B16F10 og HACAT frumur eru endurvaknar eru þær sáðar í DMEM hár-glúkósa miðil (sem inniheldur blöndu af 10% fóstur nautgripasermi og 1% penicillín-streptómýsín með massabrot) og ræktað í útungunarvél í 37 gráðu, 5% CO2 rúmmál brot og 70% raki í 24 klst. Frumuvöxtur sést undir smásjá og miðlinum er skipt út eða ræktað í samræmi við stöðu frumna.
1.4.2 Tilraunahópur
B16F10 og HACAT frumur í logaritmískum vaxtarstigi eru sáð í 96- brunnplötum með viðeigandi frumufjölda og ræktaðar í 24 klukkustundir til að leyfa frumunum að fylgja veggnum. Sýnishorn af mismunandi massaþéttni eru framleiddar með því að nota DMEM ræktunarmiðil. Venjulegur hópur, líkanhópur, lágskammtur PHG (125 ug/ml) hópur, miðlungs skammtur PHG (250 ug/ml) hópur, hárskammtur PHG (500 ug/ml) hópur, lágskammtur GLA (6,25 ug/ml) hópur, miðlungsskammtur GLA (12,5 Ug/ml), Háskammt GLA (25 UG/ml) hópinn og phgs/gla) hópinn (25 UG/ml) og phgs/glóhóp (1∶1) Hópur, PHG/GLA (5∶1) hópur og PHG/GLA (10∶1) Miðlenskir hópi voru settir upp.
Í UVB af völdum B16F10 litarefnislíkansins var líkanhópfrumunum bætt við með 30 μl af PBS (pH =7. 4) og settu 3 cm beint undir UVB geislunaraðila í 110 sek; Tilraunahópurinn var formeðhöndlaður með 100 μl af sýnislausnum með mismunandi massaþéttni í 1 klukkustund, síðan bætt við með 30 μl af PBS og setti 3 cm beint undir UVB geislunaraðilann í 110 sek; Venjulegur hópur notaði alltaf háglúkósa DMEM ræktunarmiðil; Tómur hópurinn var ekki sáð með frumum, heldur með jafnt magn ræktunarmiðils í staðinn.
Í LPS af völdum HACAT frumubólgu líkansins var líkanhópurinn ræktaður með PBS lausn af LPS í styrk 20 g/ml í 24 klukkustundir; Tilraunahópurinn var formeðhöndlaður með 100 μl sýni lausnir af mismunandi massaþéttni í 24 klukkustundir og síðan bætt við með 20 g/ml LPS lausn í 24 klukkustundir; Venjulegur hópur notaði alltaf háglúkósa DMEM miðil; Tómur hópurinn var ekki sáð með frumum, heldur með jafnt magn af ræktunarmiðli.
Í AAPH af völdum HACAT frumna oxunarálags líkansins var líkanhópurinn ræktaður með 100 ml Aaph (2,5 mmól) lausn í styrk 25 mmól/L í 24 klukkustundir; Tilraunahópurinn var formeðhöndlaður með 100 μl sýni lausna af mismunandi massaþéttni í 24 klukkustundir og síðan bætt við með Aaph lausn í styrk 25mmól/L í 24 klukkustundir; Venjulegur hópur notaði alltaf háglúkósa DMEM miðil; Tómur hópurinn var ekki sáð með frumum, heldur með jafnt magn af ræktunarmiðli.
Hver hópur var settur upp með 3 endurteknum holum og ræktaðar í útungunarvél með 37 gráðu, 5% CO2 rúmmálsbrot og 70% rakastig.
1.4.3 Frumueyðandi prófun
CCK8 aðferðin var notuð til að ákvarða frumudrepandi áhrif. B16F1 0 og HACAT frumur í lógaritmískum vaxtarstigi voru melt með 0,25% trypsíni í 3 mínútur. Eftir að meltingunni var slitið var ræktunarmiðillinn ítrekað blásinn til að búa til frumusviflausn með þéttleika 1 × 104 frumum/ml. Frumurnar voru sáð jafnt í 96- brunnplötu, 100 μl á hverja holu og PBS var bætt við holurnar umhverfis frumurnar. Eftir að frumurnar voru festar við vegginn var mismunandi massaþéttni sýnislausnar bætt við, 3 endurteknum holum á hvern hóp og ræktað í útungunarstöð við 37 gráðu, 5% CO2 rúmmálshlutfall og 70% rakastig í 24, 48 og 72 klst. Og síðan var felld lausnin. Öllum hópum var bætt við með 100 μl af fullkomnum ræktunarmiðli sem innihélt 10% CCK8 rúmmálshlutfall og ræktað í 60 mín. Uppsog lausnarinnar við 450 nm var mæld með ELISA lesanda. Lífvænleiki frumna (%) var reiknaður samkvæmt formúlu (4).
Hvar: Tilraunahópur er frásog holanna sem innihalda frumur og sýnishorn lausn undir UVB geislun; Venjulegur hópur er frásog holanna sem innihalda frumur og sýnislausn án UVB geislunar; A auður hópur er frásog holanna sem innihalda ræktunarmiðil en engar frumur.
1.4.5 Ákvörðun á melaníninnihaldi
Melaníninnihaldið var ákvarðað með NaOH lýsisaðferðinni. Eftir að hafa meðhöndlað frumurnar í 72 klst. Samkvæmt aðferðinni í kafla 1.4.2 var flotinu fargað og þvegið tvisvar með PBS og 100 mL af NaOH vatnslausn sem innihélt 10% DMSO eftir rúmmáli (styrkur 1 mól/l) var bætt við. Eftir að hafa verið settur í 90 gráðu ofni í 1 klukkustund var frásog lausnarinnar við 490 nm ákvörðuð af ensímmerki. Tilraunin var endurtekin 3 sinnum. Melaníninnihald (%) var reiknað samkvæmt formúlu (5).
1.5 Ákvörðun á bólguþáttarinnihaldi og oxunarálagsvísitölu
Eftir að hafa meðhöndlað frumurnar í 48 klst. Samkvæmt aðferðinni í kafla 1.4.2 var HACAT frumunum í hverjum hópi safnað með frumusköfum, skilvinduðum, og flotinu var safnað. Innihald IL -6 og TNF- var ákvarðað samkvæmt leiðbeiningum ELISA búnaðarins.
Eftir að hafa meðhöndlað frumurnar í 48 klst. Samkvæmt aðferðinni í kafla 1.4.2 var HACAT frumunum í hverjum hópi safnað með frumusköfum og frumurnar voru brotnar með endurteknu frystingu og þíðingu. Frumurnar voru skilvindaðar við 12000 r/mín. Við 4 gráðu í 10 mínútur og flotinu var safnað. SOD virkni og CAT innihald voru ákvörðuð samkvæmt leiðbeiningum ELISA búnaðarins.
1.6 Ákvörðun sameinaðs vísitölu
Sameinaða vísitölu (CI) aðferðin [20] var notuð til að ákvarða hvort PHG og GLA í mismunandi massahlutföllum höfðu samverkandi áhrif til að hindra virkni týrósínasa og andoxunar. Samsetningarvísitalan var reiknuð samkvæmt formúlu (6):
Wherein: D1 and D2 are the mass concentrations (mg/mL) of the two drugs when the activity reaches x% in the combined treatment; DX is the mass concentration (mg/mL) required for the activity to reach x% when the two substances are used alone. Compusyn software was used for calculation. CI>1 gefur til kynna mótlyf áhrif, CI =1 gefur til kynna aukefni og CI<1 indicates a synergistic effect.
1.7 Gagnagreining
Öll gögn eru gefin upp sem „tölur meðaltal ± staðalfrávik (𝑥̅ ± 𝑠)“. Graf Prism 9.5. 0 Hugbúnaður var notaður við tölfræðigreiningu. Einhliða greining á dreifni var notuð til samanburðar meðal margra hópa. P.<0.05 was considered statistically significant.
