Serum og sauramínósýruprófíl hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm

Ágrip

Tilgangur rannsóknarinnar var að mæla sermi og saur amínósýrur (AA) hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm (CKD) og bera þær saman við heilbrigða ketti. Þrjátíu og fimm kettir með International Renal Interest Society Stage 1–4 langvinnan nýrnasjúkdóm og 16 heilbrigðir fullorðnir og eldri kettir í eigu eldri viðskiptavina voru teknir með í þessari framsýnu þversniðsrannsókn. Sermi voru greind með tilliti til 25 AA styrks með því að nota jónaskiptaskiljun AA greiningartæki með ninhýdrínafleiðu eftir súlu. Tómuð saursýni voru greind með tilliti til 22 AA styrks með vökvaskiljun með tandem massagreiningu. CKD kettir höfðu lægri sermisþéttni fenýlalaníns (meðalmunur ± staðalvilla meðaltals: 12,7 ± 4,3 µM; p=0.03), þreónín (29,6 ± 9,2 µM; p {{19} }.03), tryptófan (18.4 ± 5.4 µM; p=0}.005), serín (29.8 ± 12.6 µM; p=0}.03) og týrósín (11,6 ± 3,8 µM; p {{ 37}}.01) og hærri sermisþéttni aspartínsýru (4.7 ± 2.0 µM; p=0.01), -alanín (3.4 ± 1.2 µM; p=0.01), sítrúllíni (5,7) ± 1,6 µM; p=0.01) og taurín (109.9 ± 29.6 µM; p=0}.01) miðað við heilbrigða ketti. Ekki var munur á þéttni AA í saur milli heilbrigðra katta og katta með langvarandi nýrnasjúkdóm. 3-Metýlhistidín-til-kreatíníni var ekki munur á heilbrigðum köttum með og án vöðvamissis. Kettir með CKD IRIS stigum 1–4 eru með bilaðan amínósýrupróf í sermi samanborið við heilbrigða ketti.

Leitarorð

kettir; langvarandi nýrnasjúkdómur; amínósýra; tryptófan.

Smelltu hér til að vita hver eru áhrif Cistanche

Kynning

Vöðvatap, með eða án samhliða taps á fitubirgðum, kemur fram hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm (CKD) og getur stuðlað að þyngdartapi [1,2]. Cachexia er tap á fitulausum líkamsmassa í bráðum og langvinnum sjúkdómum og stafar af nýtingu amínósýra (AA) úr vöðvum sem aðalorkugjafa [3]. Cachexia afleidd CKD hefur verið best skilgreind hjá fólki, með framreikningi til dýralækninga. Samkvæmt rannsóknum á líkönum á fólki og rottum er cachexia afleiðing neikvæðrar orkuinntöku og aukinnar próteinsbrots í kjölfar efnaskiptablóðsýringar, almennrar bólgu og insúlínviðnáms [4]. Þar að auki getur langvinnan nýrnasjúkdómur valdið próteini vanheimtu vegna minnkunar á skilvirkni próteinameltunar og minnkaðs frásogs AA í smáþörmum [5,6]. Skert próteinmelting eykur gnægð próteinleysandi baktería og gerjun AAs í forvera þvagefnis eiturefna [4,7,8].

Amínósýrur eru nauðsynlegar til að mynda prótein. Það eru 20 próteinvaldandi AA, þar af 11 nauðsynleg fyrir ketti. Í samanburði við ónauðsynleg AA, er ekki hægt að búa til nauðsynleg AAs af lífverunni og krefjast fæðuinntöku. Áður var greint frá því að menn, hundar og kettir með nýrnasjúkdóm, jafnvel þeir sem voru með snemma sjúkdóm, væru með ruglað snið af AAs í blóðrás [9-14]. Að auki var sýnt fram á að saur AA snið var breytt hjá fólki sem fékk blóðskilun og í CKD líkani af nagdýrum samanborið við heilbrigða samanburðarhópa [6,15]. Hingað til hefur þéttni AA í saur og fylgni milli þéttni AA í sermi og saur í ketti með langvinnan nýrnasjúkdóm ekki verið skráð.

Amínósýra getur gengist undir breytingar eftir þýðingu, svo sem fosfórýleringu eða metýleringu, til að mynda náskyldar lífvirkar sameindir. Ein slík amínósýra er 3- metýlhistidín (3-MH), sem er myndað af beinagrindarvöðvum, losað út í blóðrásina við niðurbrot vöðva og skilst út óbreytt í þvagi [16]. Í fyrri rannsókn var greint frá því að plasmaþéttni 3-MH væri hærri hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm samanborið við þá hjá heilbrigðum viðmiðunarketti, og einnig hjá ketti með langvinn nýrnabilun, sem ekki eru geggjuð, samanborið við þá sem eru með eðlilega matarlyst [9]. Aldur er tengdur við tap á fitulausri líkamsmassa hjá köttum án sjúkdóms (þ.e. sarcofæð), og eldri kettir hafa oftar sarcofæð en ungir kettir [17,18]. Þar sem kreatínín í sermi er staðgengilsmerki um vöðvamassa í beinagrind, hefur staðlað 3-MH í kreatínínstyrk (3-MH/Crea) verið notað sem lífmerki um veltu vöðvapróteina hjá öldruðum [19,20] . Í dýralækningum hefur hugsanlegt samband milli 3-MH styrks í blóðrás og vöðvataps hjá köttum ekki áður verið metið.

Við gerðum þá tilgátu að kettir með langvinnan nýrnasjúkdóm myndu vera með ruglað sermi og saur AA prófíl samanborið við heilbrigða ketti. Sérstaklega gerðum við tilgátu um að kettir með langvarandi nýrnasjúkdóma myndu hafa minnkað sermisþéttni nauðsynlegra AA-efna ásamt auknum saurþéttni þessara AA-efna, sem styður vansöfnun próteina í smáþörmum. Að auki gerðum við tilgátu um að 3-MH/Crea hlutfallið myndi hjálpa til við mat á vöðvatapi hjá heilbrigðum fullorðnum og eldri köttum. Til að prófa þessar tilgátur var aðalmarkmið rannsóknarinnar að mæla þéttni AA í sermi og saur í ketti með langvinnan nýrnasjúkdóm og bera saman við þá í hópi heilbrigðra katta. Aukamarkmiðið var að rannsaka þversniðssamband 3-MH/Crea við vöðvaástandsskor (MCS) hjá heilbrigðum fullorðnum og eldri köttum.

Cistanche tubulosa

Efni og aðferðir

1. Rannsakaðu hönnun og val á köttum

Í þessari framsýnu þversniðsrannsókn voru heilbrigðir fullorðnir og eldri kettir (meira en eða jafnt og 8 ára) og kettir sem greindir voru með langvinnan nýrnasjúkdóm ráðnir frá skjólstæðingum Colorado State University Veterinary Teaching Hospital á árunum 2018 til 2020. Til að vera gjaldgengir fyrir þátttöku , kettir gengust undir ítarlegt mat sem innihélt sögu skjólstæðings og endurskoðun fyrri sjúkraskrár, heildar líkamsskoðun framkvæmd af einum sérfræðingi í innri læknisfræði, CBC, lífefnafræðipróf í sermi, þvaggreining, heildarþéttni týroxíns í sermi, blóðþrýstingur kl. Doppler og þvagprótein-til-kreatínín hlutfall (ef þvagprótein mælistiku Stærra en eða jafnt og 1 plús). Líkamsskoðun innihélt 9-punkta líkamsástandsskor (BCS; Nestle Purina, St. Louis, MO, Bandaríkjunum) og vöðvaástandsskor (MCS) [21,22]. Kettir með langvinnan nýrnasjúkdóm voru sviðsettir samkvæmt leiðbeiningum International Renal Interest Society (IRIS) [23]. Kettir voru settir á svið sem IRIS CKD stigi 1 byggt á kreatíníni í sermi<1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability (urine specific gravity (USG) ≤1.035) and either abnormal renal palpation or renal imaging findings consistent with chronic renal degenerative disease. Cats were diagnosed as IRIS CKD Stage 2–4 based on a serum creatinine >1.6 mg/dL with an inadequate urinary concentrating ability. Cats were considered healthy based on an unremarkable client history, physical examination, and normal laboratory testing including a serum creatinine ≤1.8 mg/dL and urine specific gravity (USG) >1.035. Við skráningu voru eigendur beðnir um að meta matarlyst kattarins síns huglægt með því að nota 5-stigakvarða (0 prósent, 25 prósent, 50 prósent, 75 prósent eða 100 prósent af þeim skammti sem neytt er).

Útilokunarviðmið innihéldu fylgikvilla langvinnrar nýrnasjúkdóms, svo sem bráða teppu í þvagi, þvagfærasýkingu eða nýlegri innlögn á sjúkrahús, og greining á altækum sjúkdómi, þar á meðal sykursýki, ofstarfsemi skjaldkirtils eða þekktum eða grunuðum meltingarfærasjúkdómi (þar með talið fæðusvörun langvarandi garnakvilla).

2. Amínósýrugreining í sermi

Eigendum var bent á að halda eftir mat frá köttum sínum í að minnsta kosti 12 klst. fyrir blóðtöku. Blóði var safnað í dauðhreinsuðum glösum sem ekki voru heparínvædd og eftir myndun tappa skilið í skilvindu (innan 30 mín frá sýnisöfnun) við 5000 snúninga á mínútu í 5 mínútur. Sermi var strax uppskorið og geymt við -80 ◦C í 0–2 vikur áður en það var sent á þurrís til Texas A&M Meltingarfærarannsóknarstofu til greiningar. Við komu voru sýni þíðað við stofuhita og afprótein fjarlægð með jöfnu rúmmáli 5% (w/v) súlfósalicýlsýru með 500 µM L-norleucíni sem innri staðli. Sýnin voru síðan geymd við 4 ◦C í 10 mínútur fyrir skilvindu við 10,000× g í 5 mínútur. Fljótandi vökvinn var fluttur yfir í 0,2 µm PVDF miðflótta síu og skilið í skilvindu við 10.000× g í 5 mínútur við 4 ◦C. Sýni voru síðan greind með tilliti til amínósýruinnihalds með því að nota jónaskiptaskiljun amínósýrugreiningartæki með ninhýdrínafleiðu eftir dálka (Biochrom 30 plus, Biochrom Ltd., Holliston, MA, Bandaríkjunum). Hundrað míkrólítrar af síaða flotinu voru fluttir yfir í hettuglös með sjálfvirkum sýnatöku og geymd við 4 ◦C í að hámarki 48 klst. fyrir sjálfvirka inndælingu 30 µL á greiningarsúluna.

Sermisstyrkur eftirfarandi 25 amínósýra og skyldra efnasambanda var greindur: -alanín, L-alanín, L-arginín, L-asparagín, L-asparagínsýra, L-sítrúllín, L-glútamínsýra, L-glútamín, glýsín, taurín , L-histidín, hýdroxý-L-prólín, L-ísóleucín, L-leucín, L-lýsín, L-metíónín, 3-MH, L-ornitín, L-fenýlalanín, L-prólín, L-serín, L-þreónín, L-tryptófan, L-týrósín og L-valín. R2 staðlaðra ferla á bilinu 2,5 µM til 75 0 µM var hærri en 0,998 fyrir öll efnasambönd. Hámarksflatarmál innri staðals L-norleucíns við 250 µM var innan 2 staðalfrávika frá meðaltali fyrir öll sýni og staðla. Vinnandi staðall kvörðunartæki var útbúinn við 250 µM og var keyrður á 10 inndælingar fresti með breytileika milli styrkleika sem leiddi til sem var minna en 5 prósent. Neðri mörk magngreiningar voru reiknuð út með því að nota lægsta styrkinn á stöðluðu kúrfunni þar sem hlutfallið sem sást til væntanlegs var á milli 80–120 prósent.

Amínósýrustyrkur var reiknaður út með því að nota Biochrom BioSys V.3.0 hugbúnað sem er samþættur EZChrom Elite™ VA04.08 (Agilent Technologies Inc., Santa Clara, CA, Bandaríkjunum) gagnameðferðarhugbúnaði.

Cistanche þykkni

3. Saur amínósýrugreining

Eigendum var bent á að taka tæmt saursýni úr ketti sínum innan 12 klst. frá hægðum og geymt það tímabundið við 4 ◦C í lokuðu íláti þar til sýnið var flutt á sjúkrahúsið á ís innan 24 klst. frá söfnun. Saurdeilingar voru geymdir við -80 ◦C fram að greiningu. Eftir skráningu rannsóknarinnar voru öll saursýni send til utanaðkomandi rannsóknarstofu (Metabolon Inc., Morrisville, NC, Bandaríkjunum) til greiningar með vökvaskiljun með tandem massagreiningu. Saursýnin voru greind fyrir eftirfarandi 22 AA: L-alanín, L-arginín, L-asparagín, L-asparagínsýra, L-sítrúllín, L-glútamínsýra, L-glútamín, glýsín, L-histidín, hýdroxý-L -prólín, L-ísóleucín, L-leucín, L-lýsín, L-metíónín, L-ornitín, L-fenýlalanín, L-prólín, L-serín, L-þreónín, L-tryptófan, L-týrósín og L- valín.

Saursýni voru frostþurrkuð og deilur veginn. Þurrkuðu saurdeilarnir voru síðan dregin út með lífrænum leysi og hluti af flotinu var fluttur yfir á hreina sýnisplötu. Yfirvatnsdeiljanirnar voru fylltar með stöðugum merktum innri stöðlum (tafla S1) og settir fyrir próteinútfellingu með lífrænum leysi. Viðmiðunarefni greiningarefna (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) og samsætumerktir innri staðlar (Sigma-Aldrich, Cambridge Isotope Laboratories, CDN Isotopes) fengust. Eftir skilvindu var skammtur af flotinu þynnt og sprautað inn í Agilent 1290/AB Sciex QTrap 5500 vökvaskiljun-tandem massagreiningarkerfi búið C18 öfugfasa ofurafkastamikilli vökvaskiljunarsúlu. Massagreiningarmælirinn var starfræktur í jákvæðri stillingu með því að nota rafúðajónun.

Toppsvæði einstakra greiniefnis móðurjóna voru mæld á móti toppsvæðum móðurjóna samsvarandi innri staðla í gervi-MRM ham. Magngreining var framkvæmd með því að nota vegið aðhvarfsgreiningu minnstu ferninga sem mynduð var úr styrktum kvörðunarstöðlum sem útbúnir voru rétt fyrir hverja keyrslu. Hrágögnum var safnað og unnið með SCIEX OS-MQ hugbúnaði v1.7. Gagnaminnkun var framkvæmd með því að nota Microsoft Excel fyrir Office 365 v.16.

Fyrir 22 greiniefni amínósýruspjaldsins var ein lota af plasma notuð til að undirbúa gæðaeftirlitssýnin. Sýnagreining var framkvæmd á 96-brunnplötusniði sem innihélt tvo kvörðunarferla og sex gæðaeftirlitssýni (á plötu) til að fylgjast með árangri greiningar. Nákvæmni var metin með því að nota samsvarandi gæðaeftirlitsendurtekningar í hverri sýnatöku. Nákvæmni innan greiningar (prósent CV) var minna en eða jafnt og 20 prósent. Ein lota var útbúin og unnin. Styrkleikagildi voru leiðrétt miðað við þyngd sýnishlutans. Gildin eru gefin upp í µg/g. Neðri magngreiningarmörk (LLOQ) fyrir glútamín voru 2,5 µg/g; fyrir L-alanín, L-arginín, L-lýsín, L-prólín, L-týrósín og L-valín var LLOQ 1.0 ug/g. Fyrir glýsín var LLOQ 0,75 µg/g. Fyrir L-glútamínsýru, L-histidín, L-leucín, L-þreónín og L-tryptófan var LLOQ 0,5 µg/g. Fyrir L-fenýlalanín og L-serín var LLOQ 0,4 µg/g. Fyrir L-asparagín, L-asparagínsýru, L-ísóleucín og L-ornitín var LLOQ 0,25 µg/g. Fyrir L-sítrúllín var LLOQ 0,2 µg/g. Fyrir L-metíónín var LLOQ 0,125 µg/g. Fyrir hýdroxý-L-prólín var LLOQ 0,05 µg/g.

4. Tölfræðigreining

Til tölfræðilegs samanburðar á niðurstöðum á milli IRIS CKD stigum, voru stig 1 og 2 CKD kettir og stig 3 og 4 CKD kettir sameinaðir, enda fáir stig 1 og stig 4 CKD kettir sem voru skráðir í rannsóknina.

Vefjarit og QQ-rit af AA-mælingum hjá heilbrigðum köttum og ketti með nýrnasjúkdóm staðfestu forsendu um áætluð eðlileg. Athugun á kassaritum sýndi að mælingar hjá ketti með nýrnasjúkdóm voru oft breytilegri en hjá heilbrigðum köttum. Þannig var Welch próf notað til að bera saman samfelldar breytur milli óháðu hópanna tveggja (þ.e. heilbrigðir kettir og ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm). Einhliða Welch's ANOVA með Holm-Sidak margfeldissamanburðarprófi var notað til að bera saman breytur á milli þriggja óháðra hópa (þ.e. heilbrigðra katta; CKD stig 1 og 2 kettir; og CKD stig 3 og 4 ketti). Að auki var Spearman fylgnistuðullinn (rho) reiknaður til að meta fylgni á milli styrks AA í sermi og saur og styrk kreatíníns í sermi, milli sermisþéttni kreatíníns og 3-MH, og milli styrks AA í sermi og saur. Aðlögunaraðferð Benjamini, Krieger og Yekutieli [24] var notuð til að stjórna fölskum uppgötvunarhlutfalli, með q-gildi stillt á 5 prósent. Fyrir tölfræðilega greiningu voru öll sýni sem höfðu ekki mælanlegan styrk tilkynnt sem 0. Þegar það var tiltækt var algildið notað fyrir sýni með styrk undir eða yfir magngreiningarmörkum. Með því að nota tilkynnt staðalfrávik á plasmaþéttni AA í heilbrigðum og langvinnum köttum [9] var gerð greining til að ákvarða lágmarksmuninn fyrir hvern AA sem hægt var að greina með úrtaksstærð í rannsókninni okkar (16 fyrir heilbrigða ketti; 26 ketti með langvinnan nýrnasjúkdóm; ). Greiningin fékk lágmarksmismuninn sem hægt var að greina fyrir hvern AA með krafti 80 prósenta og alfa upp á {{20}}.05. Miðað við greininguna er lágmarksmunurinn sem hægt var að greina munur sem nemur einu staðalfráviki. Tölfræðileg greining var gerð með því að nota tölfræðilega hugbúnaðarforrit (GraphPad Prism 9.2.0; GraphPad Software, La Jolla, CA, og SAS 9.4; SAS Institute, Cary, NC, Bandaríkjunum). Leiðrétt p-gildi < 0,05 var talið marktækt.

Cistanche hylki

Umræða

Í þessari rannsókn mældum við styrk AA í sermi og saur til að bera saman snið milli heilbrigðra fullorðinna og eldri katta og katta með langvinnan nýrnasjúkdóm. Í fyrsta lagi komumst við að því að kettir með CKD eru með ruglað AA prófíl í sermi; Sérstaklega höfðu kettir með langvarandi nýrnasjúkdómum lægri sermisþéttni af þremur nauðsynlegum (fenýlalaníni, þreóníni, tryptófan) og tveimur ónauðsynlegum AA (seríni, týrósíni) samanborið við heilbrigða ketti. Breytingar á AA sniði í sermi komu fram hjá köttum með sjúkdóm á byrjunarstigi (IRIS stig 1 og 2) og umfang frávika var meira hjá köttum með seint stigi CKD (IRIS stig 3 og 4) fyrir nokkra AA (asparssýru, - alanín, sítrúllín, leusín, fenýlalanín, serín, taurín, tryptófan, valín). Í öðru lagi, þvert á tilgátu okkar, fundum við ekki marktækan mun á saurþéttni AA milli heilbrigðra katta og nýrnasjúkdóms katta. Þetta bendir til þess að prótein vansamhæfing og tap á AA í hægðum gæti ekki verið stór þáttur í verulega röskuðu AA prófílnum í sermi hjá ketti með nýrnasjúkdóm. Aðrar hugsanlegar orsakir breytinga á AA stöðu í sermi hjá köttum gætu verið ófullnægjandi orkuinntaka og aukin niðurbrot próteina eins og áður hefur verið rakið, auk AA taps í þvagi vegna truflunar á píplum, skert umbrot í nýrum valinna AA og breytt AA umbrot í kjölfar almennrar bólgu. [25,26]. Meirihluti nýrnasjúkdóms katta í þessari rannsókn hafði fullnægjandi matarlyst í samræmi við matarlystarstig sem fengust við skráningu; Hins vegar er þetta stigakerfi huglægt og ekki var hægt að reikna daglega kaloríuinntöku út frá þeim upplýsingum sem veittar voru. Þess vegna er ekki hægt að útiloka ófullnægjandi inntöku sem stuðla að röskuðu AA prófílnum hjá þessum langvinnandi ketti. Að lokum komumst við að því að 3-MH/Crea hlutföllin voru ekki marktækur munur á heilbrigðum fullorðnum fullorðnum og eldri köttum með og án vöðvamissis.

Fyrri rannsókn var metin þéttni AA í plasma fyrir máltíð hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm og sýndi óeðlilegt AA-próf ​​í plasma hjá köttum með langvarandi nýrnasjúkdóm samanborið við heilbrigða ketti [9]. Rannsóknin okkar sýndi nokkra svipaða mun á AA þéttni milli heilbrigðra og langvinnra katta. Báðar rannsóknir sýndu marktækt lægri þéttni tryptófans og týrósíns og hærri þéttni sítrúllíns í ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm samanborið við heilbrigða ketti [9]. Almennt séð er góður endurskapanleiki styrks umbrotsefna bæði í plasma og sermi hjá fólki; þó, sum AA styrkur (þ.e. arginín, serín, fenýlalanín, glýsín) getur verið hærri í sermi [27]. Þess vegna ætti að gæta nokkurrar varúðar þegar borin eru saman niðurstöður milli rannsóknarinnar okkar og fyrri rannsóknarinnar sem mældi AA þéttni í plasma.

Fyrir suma AAs var styrkur í sermi hærri hjá ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm en hjá heilbrigðum köttum, þar á meðal nauðsynleg AA taurín og ónauðsynleg AA asparasýra, sítrullín og -alanín. Styrkur í blóðrás bæði tauríns og sítrullíns er hærri hjá köttum og fólki með skerta nýrnastarfsemi [9,28]. Fyrir sítrúllín er þessi niðurstaða rakin til minni umbreytingar sítrúllíns í arginín í nýrum [29]. Taurín er nauðsynleg amínósýra í köttum, ólíkt fólki og hundum, og því þurfa kettir að neyta fæðu. Hærri sermisþéttni tauríns í ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm gæti verið afleiðing af skertri útskilnaði um nýru [30]. Ástæðan fyrir hærri þéttni -alaníns og aspartínsýru í blóðrásinni í ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm er óþekkt; þetta er hins vegar í samræmi við mynstur AA prófílsins í dreifingu (þ.e. hátt ónauðsynlegt og lítið nauðsynlegt AA) sem skráð er hjá fólki með nýrnasjúkdóm [28,31].

Saurþéttni leusíns, fenýlalaníns, lýsíns, histidíns, metíóníns, týrósíns og tryptófans jókst verulega hjá fólki með nýrnasjúkdóm á lokastigi (ESRD) sem fékk blóðskilun samanborið við heilbrigða viðmiðunarhópa [15]. Þessar ómeltu AA í ristli ESRD sjúklinga geta stuðlað að próteinlýsandi bakteríum sem mynda helstu þvagefnaeiturefnin sem eru afleidd í þörmum, indoxýlsúlfat (IS) og p-kresólsúlfat (PCS) [32]. Fólk, kettir og hundar safna IS, á meðan sumar tegundir safna pCS, í blóðrásinni, og uppsöfnun þessara þvagfæraeiturefna er fyrst og fremst afleiðing af minni útskilnaði í píplum [33-35]. Hins vegar eru sumir þeirrar kenningu að prótein vansamhæfing og aukin AA í ristli geti einnig stuðlað að blóðrásarstyrk með því að hygla próteinlýsandi bakteríum í ristli [6,32]. Þvert á tilgátu okkar sýndi rannsókn okkar ekki marktækan mun á saurþéttni AA milli langvinnrar nýrnasjúkdóms og heilbrigðra katta. Þetta dregur í efa framlag ómeltrar AAs í uppsöfnun á IS og pCS í blóðrás í ketti með CKD. Skortur á mismun á saurþéttni AA gæti stafað af sjúklingahópi okkar. Flestir kettir í rannsókninni okkar voru klínískt stöðugir og rannsóknarhópurinn okkar var með of fáa ketti á 4. stigs langvinnri nýrnasjúkdóms (n=4) til að hægt væri að gera marktækan samanburð. Drastískari munur á saur AA prófílnum gæti verið betur metinn hjá ketti með langvarandi lungnasjúkdóm á lokastigi.

Við mældum 3-MH styrk í sermi í heilbrigðum köttum og nýrnasjúkdómum. Eins og við var að búast komumst við að því að kettir með langvarandi nýrnasjúkdóma höfðu hærri 3-MH styrk í sermi samanborið við heilbrigða viðmiðunarketti og að sermisþéttni 3-MH hafði jákvæða fylgni við sermisþéttni kreatíníns. Þetta er svipað og niðurstöður fyrri rannsókna á köttum, hundum og fólki, sem komust að því að 3-þéttni MH í plasma eða sermi sjúklinga með langvinnan nýrnasjúkdóm var hærri en hjá heilbrigðum samanburðarhópum [9,11,28]. Þessi niðurstaða er rakin til minnkaðs nýrnaútskilnaðar 3-MH hjá sjúklingum með langvinnan nýrnasjúkdóm. Af þessum sökum gerðum við ekki 3-MH/Crea hlutfallið hjá ketti með langvarandi nýrnasjúkdóm með vöðvamissi vegna þess að kreatínín er truflandi þáttur. Til að kanna hvort hægt sé að nota 3-MH/Crea hlutföll sem merki um niðurbrot beinagrindarvöðva hjá heilbrigðum fullorðnum og eldri köttum, voru 3-MH/Crea hlutföll borin saman á milli katta með og þeirra sem eru án vöðvamissis. MCS sem einn dýralæknir fékk var notað til að meta vöðvamassa í þessum hópi katta. Mat á MCS er auðvelt og ekki ífarandi fyrir þjálfaða einstaklinga að framkvæma í heilsugæslustöðvum og reyndist hafa verulegan endurtekningarnákvæmni og miðlungs endurgerðanleika milli áhorfenda [36]. Heilbrigðir kettir með vægt til í meðallagi vöðvatap höfðu huglægt hærra meðaltal 3-MH/Crea hlutfalls en þeir sem voru án vöðvamissis, en þessi niðurstaða var ekki tölfræðilega marktæk, sem var rakin til lítillar sýnishorns og hugsanlega breytilegrar próteinneyslu í þessu námsárgangur [20,37]. Notkun 3-MH sem lífmerki á niðurbroti beinagrindarvöðva hjá köttum gefur tilefni til frekari rannsókna.

Til að berjast gegn lungnabólgu hjá fólki með langvinnan nýrnasjúkdóm, mæla læknar með því að auka líkamlega virkni, meðhöndla efnaskiptablóðsýringu og útrýma leiðréttanlegum bólguþáttum (td þarmasjúkdómum) til að lágmarka niðurbrot próteina. Að auki er hagræðing næringarmeðferðar mikilvæg. Líkt og hjá fólki er minnkun próteinneyslu með því að nota mjög meltanlegan próteingjafa og viðhald á fullnægjandi kaloríuinntöku meginstoð meðferðar fyrir ketti með langvinnan nýrnasjúkdóm [38,39]. Fyrri rannsókn á köttum með IRIS stig 1 og 2 langvinnri lungnateppu sýndi að aukin inntaka nauðsynlegs AA-þreóníns með því að nota próteintakmarkað nýrnameðferðarfæði (6,7 g/100 kcal) í 6 mánuði viðheldur halla líkamsmassa (Hill's Prescription Diet k/d Feline with chicken, Hill's Pet Nutrition, Topeka, KS, Bandaríkjunum) [40]. Amínósýrusnið fyrir og eftir fæðisskipti voru ekki metin hjá þessum köttum. Við komumst að því að þreónín væri lágt í sermi katta með langvinnan nýrnasjúkdóm samanborið við heilbrigða viðmiðunarketti, sem styður enn frekar hugsanlegan ávinning af viðbót við þetta AA hjá köttum með langvinn nýrnasjúkdóm. Hjá fólki í blóðskilun bætti næringarefni til inntöku sem notað var til að útvega kaloríur úr næringarefnum, þar á meðal próteini í formi AA og peptíð, flestar AA styrkleika í sermi [41]. Byggt á þessum rannsóknum gæti nýrnalækningafæði styrkt með nauðsynlegum AA-efnum verið gagnlegt fyrir ketti með langvinnri nýrnasjúkdóm í von um að viðhalda magan líkamsmassa og hugsanlega bæta AA-þéttni í sermi; þó á eftir að skýra hið síðarnefnda.

Cistanche duft

Þessi rannsókn hefur takmarkanir. Varðandi kattastofnana var samanburðarhópurinn ekki aldurssamur við langvinnan nýrnasjúkdóm þar sem ómögulegt var að finna heilbrigða eldri ketti<14 years of age in the referral hospital population. As a result, the healthy control cats were significantly younger than the CKD cats, which may have affected our conclusions. In people, serum AA profiles differ between the young and elderly, and therefore, the deranged serum AA profile in CKD cats in comparison to the healthy controls may be explained in part by age [42,43]. Second, our results reflect only a single time-point and are not representative of dynamic changes that may occur in circulating or fecal AA concentrations. Third, deproteinization of serum was not performed until after freezing and just before analysis within 2 weeks of collection. Deproteinization prevents losing AA by co-precipitation with other serum proteins, therefore this may have impacted our results, especially for sulfur-containing AAs (methionine, taurine) [44]. However, all samples were handled similarly, so any effect should have been standardized across all samples. Lastly, all healthy cats and the majority of CKD cats (21/26) were fasted before blood collection. In cats, there is a mild postprandial rise in plasma AA concentrations, and the magnitude of the postprandial rise varies based on the AA concentration of the diet and feeding regimen [45–47]. Therefore, the fed state of these five CKD could have affected results to an unknown degree.

Ályktanir

Kettir með IRIS stigum 1–4 CKD hafa lægri sermisþéttni sumra nauðsynlegra AA-efna samanborið við heilbrigða fullorðna og eldri ketti, og því geta truflað AA-próf ​​í sermi hjá CKD ketti þjónað sem lækningalegt markmið í fæðustjórnun. Þéttni AA í saur var ekki marktækur frábrugðinn milli nýrnasjúkdóms og heilbrigðra katta, og því er ólíklegt að saurútskilnaður AA-sýkingar stuðli að röskuðu AA sniði í sermi sem skráð er hjá köttum með nýrnasjúkdóm. Þéttni 3-MH í sermi er hærri hjá köttum með nýrnasjúkdóm en hjá heilbrigðum viðmiðunarhópum og þessi niðurstaða er rakin til minnkaðs útskilnaðar um nýru. 3-MH/Crea hlutföllin voru ekki marktækt hærri hjá heilbrigðum köttum með vöðvamissi samanborið við þá með eðlilegan vöðvamassa; þó, í ljósi þess hve lítið úrtak er, er frekara mat réttlætanlegt.

Heimildir

1. Summers, S.; Quimby, JM; Phillips, RK; Stockman, J.; Jesaja, A.; Lidbury, JA; Steiner, JM; Suchodolski, J. Bráðabirgðamat á styrk fitusýru í saur í köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm og fylgni við indoxýlsúlfat og p-kresólsúlfat. J. Vet. Nemandi. Med. 2020, 34, 206–215. [Krossvísun]

2. Freeman, LM; Lachaud, þingmaður; Matthews, S.; Rhodes, L.; Zollers, B. Mat á þyngdartapi með tímanum hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm. J. Vet. Nemandi. Med. 2016, 30, 1661–1666. [Krossvísun]

3. Freeman, LM Cachexia and sarcopenia: Nýkomin heilkenni sem eru mikilvæg hjá hundum og köttum. J. Vet. Nemandi. Med. 2012, 26, 3–17. [Krossvísun]

4. Zha, Y.; Qian, Q. Próteinnæring og vannæring við langvinnan nýrnasjúkdóm og ESRD. Næringarefni 2017, 9, 208. [CrossRef]

5. Bammens, B.; Verbeke, K.; Vanrenterghem, Y.; Evenepoel, P. Vísbendingar um skerta aðlögun próteina við langvarandi nýrnabilun. Nýra Int. 2003, 64, 2196–2203. [Krossvísun]

6. Liu, Y.; Li, J.; Yu, J.; Wang, Y.; Lu, J.; Shang, fyrrverandi; Zhu, Z.; Guo, J.; Duan, J. Truflun á efnaskiptum amínósýra í þörmum meðan á þróun langvinnar nýrnasjúkdóms stendur tengist röskun á örverum í þörmum og breytingum á metagenome. J. Pharm. Biomed. endaþarm. 2018, 149, 425–435. [Krossvísun]

7. Gryp, T.; Huys, GRB; Joossens, M.; Van Biesen, W.; Glorieux, G.; Vaneechoutte, M. Einangrun og magngreining á þvagefnis-eiturforvera-myndandi þarmabakteríum hjá sjúklingum með langvinna nýrnasjúkdóm. Alþj. J. Mol. Sci. 2020, 21, 1986. [Krossvísun]

8. Graboski, AL; Redinbo, MR Próteinbundin þvagefnis eiturefni úr þörmum. Eiturefni 2020, 12, 590. [CrossRef]

9. Goldstein, RE; Marks, SL; Cowgill, LD; Kass, PH; Rogers, QR Plasma amínósýruprófíl hjá köttum með náttúrulega áunna langvinna nýrnabilun. Am. J. Vet. Res. 1999, 60, 109–113.

10. Parker, VJ; Fascetti, AJ; Klamer, BG Amínósýrustaða hjá hundum með próteinmissandi nýrnakvilla. J. Vet. Nemandi. Med. 2019, 33, 680–685. [Krossvísun]

11. Hansen, B.; DiBartola, SP; Tyggja, DJ; Browner, C.; Berrie, HK Amínósýruprófílar hjá hundum með langvinna nýrnabilun sem eru fóðraðir á tveimur fóðrum. Am. J. Vet. Res. 1992, 53, 335–341.

12. Kumar, MA; Bitla, AR; Raju, KV; Monohar, SM; Kumar, VS; Narasimha, S. Branched-chain amínósýrusnið í snemma langvinnum nýrnasjúkdómum. Saudi J. Kidney Dis. Framsfl. 2012, 23, 1202–1207.

13. Zeng, L.; Yu, Y.; Cai, X.; Xie, S.; Chen, J.; Zhong, L.; Zhang, Y. Mismunur á svipgerðum amínósýru í sermi meðal sjúklinga með nýrnakvilla af völdum sykursýki, nýrnakvilla með háþrýstingi og langvinna nýrnabólgu. Med. Sci. Monit. 2019, 25, 7235–7242. [Krossvísun]

14. Laidlaw, SA; Berg, RL; Kopple, JD; Naito, H.; Walker, WG; Walser, M. Mynstur á fastandi amínósýrugildum í plasma við langvinna nýrnabilun: Niðurstöður úr hagkvæmnisfasa breytingu á mataræði í rannsókn á nýrnasjúkdómum. Am. J. Kidney Dis. 1994, 23, 504–513. [Krossvísun]

15. Liu, S.; Liang, S.; Liu, H.; Chen, L.; Sun, L.; Wei, M.; Jiang, H.; Wang, J. Umbrotssnið á saur og sermi hjá blóðskilunarsjúklingum og áhrif lyfjakoltaflna. Nýrnablóðþrýstingur. Res. 2018, 43, 755–767. [Krossvísun]

16. Kochlik, B.; Gerbracht, C.; Grune, T.; Weber, D. Áhrif matarvenja og kjötneyslu á 3-metýlhistidíni í plasma—Mögulegt merki um veltu vöðvapróteina. Mol. Nutr. Food Res. 2018, 62, e1701062. [Krossvísun]

17. Hall, JA; Jackson, MI; Farace, G.; Yerramilli, M.; Jewell, DE Áhrif innihaldsefna í fæðunni á fitumagna líkamshlutfall, styrk þvagefnis eiturefna og nýrnastarfsemi hjá eldri fullorðnum köttum. Umbrotsefni 2019, 9, 238. [CrossRef]

18. Hall, JA; Yerramilli, M.; Obare, E.; Yerramilli, M.; Jewell, DE Samanburður á sermiþéttni samhverfs dímetýlargíníns og kreatíníns sem nýrnamerkja í heilbrigðum öldrunarköttum sem eru fóðraðir með minni próteinfóðri auðgað með lýsi, L-karnitíni og meðalkeðju þríglýseríðum. Dýralæknir. J. 2014, 202, 588–596. [Krossvísun]

19. Patel, SS; Molnar, MZ; Tayek, JA; Ix, JH; Noori, N.; Benner, D.; Heymsfield, S.; Kopple, JD; Kovesdy, CP; Kalantar-Zadeh, K. Serum kreatínín sem merki um vöðvamassa í langvinnum nýrnasjúkdómum: Niðurstöður þversniðsrannsóknar og endurskoðun á bókmenntum. J. Cachexia Sarcopenia Muscle 2013, 4, 19–29. [Krossvísun]

20. Kochlik, B.; Stuetz, W.; Pérès, K.; Feart, C.; Tegner, J.; Rodriguez-Manas, L.; Grune, T.; Weber, D. Samtök plasma 3-metýlhistidíns með veikleika í frönskum árgöngum FRAILOMIC Initiative. J. Clin. Med. 2019, 8, 1010. [Krossvísun]

21. Peterson, ME; Castellano, CA; Rishniw, M. Mat á líkamsþyngd, líkamsástandi og vöðvaástandi hjá köttum með skjaldvakabrest. J. Vet. Nemandi. Med. 2016, 30, 1780–1789. [Krossvísun]

22. Vöðvaástandsstig—Köttur. Aðgengilegt á netinu: https://wsava.org/global-guidelines/global-nutrition-guidelines/ (sótt 18. janúar 2022).

23. IRIS sviðsetning langvinnrar nýrnasjúkdóms. Aðgengilegt á netinu: http://www.iris-kidney.com/guidelines/staging.html (sótt 18. janúar 2022).

24. Benjamini, Y.; Krieger, AM; Yekutieli, D. Aðlagandi línuleg skref-upp aðferðir sem stjórna fölskum uppgötvunartíðni. Biometrika 2006, 93, 491–507. [Krossvísun]

25. van de Poll, MCG; Soeters, PB; Deutz, NEP; Fearon, KCH; Dejong, CHC Umbrot amínósýra í nýrum: Hlutverk þess í amínósýruskiptum milli líffæra. Am. J. Clin. Nutr. 2004, 79, 185–197. [Krossvísun]

26. Suliman, ME; Qureshi, AR; Stenvinkel, P.; Pecoits-Filho, R.; Barany, P.; Heimburger, O.; Anderstam, B.; Ayala, ER; Filho, JCD; Alvestrand, A.; o.fl. Bólga stuðlar að lágum amínósýruþéttni í plasma hjá sjúklingum með langvinnan nýrnasjúkdóm. Am. J. Clin. Nutr. 2005, 82, 342–349. [Krossvísun]

27. Yu, Z.; Kastenmüller, G.; Hæ.; Belcredi, P.; Möller, G.; Prehn, C.; Mendes, J.; Wahl, S.; Roemisch-Margl, W.; Ceglarek, U.; o.fl. Mismunur á blóðvökva manna og umbrotsefni í sermi. PLoS ONE 2011, 6, e21230. [Krossvísun]

28. Ceballos, I.; Chauveau, P.; Guerin, V.; Bardet, J.; Parvy, P.; Kamoun, P.; Jungers, P. Snemma breytingar á lausum amínósýrum í plasma við langvinna nýrnabilun. Clin. Chim. Acta 1990, 188, 101–108. [Krossvísun]

29. Bouby, N.; Hassler, C.; Parvy, P.; Bankir, L. Nýrnamyndun arginíns við langvarandi nýrnabilun: In vivo og in vitro rannsóknir á rottum með 5/6 nýrnabrottnám. Nýra Int. 1993, 44, 676–683. [Krossvísun]

30. Suliman, ME; Bárány, P.; Filho, JC; Lindholm, B.; Bergstrom, J. Uppsöfnun tauríns hjá sjúklingum með nýrnabilun. Nephrol. Hringdu. Framsfl. 2002, 17, 528–529. [Krossvísun]

31. Bergström, J.; Alvestrand, A.; Fürst, P. Plasma og vöðvalausar amínósýrur í viðhaldsblóðskilunarsjúklingum án próteinvannæringar. Nýra Int. 1990, 38, 108–114. [Krossvísun]

32. Wong, J.; Piceno, YM; DeSantis, TZ; Pahl, M.; Andersen, GL; Vaziri, ND Stækkun á ureasa- og uricase-innihaldandi, indól- og p-kresól-myndandi og samdrætti stuttkeðju fitusýruframleiðandi örveru í þörmum í ESRD. Am. J. Nephrol. 2014, 39, 230–237. [Krossvísun]

33. Summers, SC; Quimby, JM; Jesaja, A.; Suchodolski, JS; Lunghofer, PJ; Gustafson, DL Saurörverulífvera og styrkur indoxýlsúlfats og p-kresólsúlfats í sermi hjá köttum með langvinnan nýrnasjúkdóm. J. Vet. Nemandi. Med. 2018, 33, 662–669. [Krossvísun]

34. Cheng, FP; Hsieh, MJ; Chou, CC; Hsu, WL; Lee, YJ Greining á magni indoxýlsúlfats hjá hundum og köttum sem þjást af náttúrulegum nýrnasjúkdómum. Dýralæknir. J. 2015, 205, 399-403. [Krossvísun]

35. Lin, CN; Wu, IW; Huang, YF; Peng, SY; Huang, YC; Ning, HC Mælir sermi heildar og frítt indoxýlsúlfat og p-kresýlsúlfat í langvinnum nýrnasjúkdómum með UPLC-MS/MS. J. Food Drug Anal. 2018, 27, 502–509. [Krossvísun]

36. Freeman, LM; Michel, KE; Zanghi, BM; Boler, BMV; Fages, J. Notagildi vöðvaástandsskora og ómskoðunarmælinga til að meta vöðvamassa hjá köttum með sarkófæð. Am. J. Vet. Res. 2020, 81, 254–259. [Krossvísun]

37. Rebholz, CM; Zheng, Z.; Grams, ME; Appel, LJ; Sarnak, MJ; Inker, LA; Levey, AS; Coresh, J. Umbrotsefni í sermi sem tengjast neyslu próteins í mataræði: Niðurstöður úr slembiraðaðri klínískri rannsókn á mataræði í nýrnasjúkdómum (MDRD). Am. J. Clin. Nutr. 2019, 109, 517–525. [Krossvísun]

38. Neistar, AH; Caney, S.; Chalhoub, S.; Elliott, J.; Finch, N.; Gajanayake, I.; Langston, C.; Lefebvre, HP; White, J.; Quimby, J. ISFM samstöðu leiðbeiningar um greiningu og stjórnun á langvinnum nýrnasjúkdómi katta. J. Feline Med. Surg. 2016, 18, 219–239. [Krossvísun]

39. Mataræði fyrir ketti með langvinnan nýrnasjúkdóm. Fáanlegt á netinu: http://www.iris-kidney.com/education/protein_restriction_ kattardýr_ckd.html#:~{}:text= Miðað við prósent 20 á prósent 20 sönnunarprósent 20 frá prósentum 20 klínískum, lyfjafyrirtæki prósent 20 til prósent 20 stjórna prósentum 20 læknisfræðilegum prósentum 20 aðstæðum (sótt 18. janúar 2022).

40. Hall, JA; Fritsch, DA; Jewell, DE; Burris, PA; Gross, KL Kettir með IRIS stig 1 og 2 langvinnan nýrnasjúkdóm viðhalda líkamsþyngd og vöðvamassa þegar þeir eru fóðraðir með mat sem hefur aukinn kaloríuþéttleika og aukinn styrk karnitíns og nauðsynlegra amínósýra. Dýralæknir. Rec. 2019, 184, 190. [Krossvísun]

41. Małgorzewicz, S.; Gał ˛ezowska, G.; Cieszy ´ska-Semenowicz, M.; Ratajczyk, J.; Wolska, L.; Rutkowski, P.; Jankowska, M.; Rutkowski, B.; Debska-Slizien, A. Amínósýrusnið eftir næringaruppbót til inntöku hjá blóðskilunarsjúklingum með próteinorkusóun. Næring 2019, 57, 231–236. [Krossvísun]

42. Timmerman, KL; Volpi, E. Amínósýruefnaskipti og stjórnunaráhrif í öldrun. Curr. Opin. Clin. Nutr. Metab. Umönnun 2008, 11, 45–49. [Krossvísun]

43. Sarwar, G.; Botting, HG; Collins, M. Samanburður á amínósýruprófílum á fastandi sermi hjá ungum og öldruðum einstaklingum. Sulta. Coll. Nutr. 1991, 10, 668–674. [Krossvísun]

44. Phipps, WS; Jones, forsætisráðherra; Patel, K. Amínó- og lífræn sýrugreining: Nauðsynleg verkfæri við greiningu á meðfæddum efnaskiptavillum. Adv. Clin. Chem. 2019, 92, 59–103.

45. Camara, A.; Verbrugghe, A.; Cargo-Froom, C.; Hogan, K.; DeVries, TJ; Sanchez, A.; Robinson, LE; Shoveller, AK Dagfóðrunartíðnin hefur áhrif á hormón sem stjórna matarlyst, amínósýrur, líkamlega virkni og öndunarhlutfall, en ekki orkueyðslu, hjá fullorðnum köttum sem eru fóðraðir í 21 dag. PLoS ONE 2020, 15, e0238522. [Krossvísun]

46. ​​Pion, PD; Lewis, J.; Greene, K.; Rogers, QR; Morris, JG; Kittleson, MD Áhrif máltíðarfóðrunar og fæðuskorts á þéttni tauríns í blóðvökva og heilblóði hjá köttum. J. Nutr. 1991, 121, S177–S178. [Krossvísun]

47. Heinze, CR; Larsen, JA; Kass, PH; Fascetti, AJ Plasma amínósýrur og heilblóð taurín styrkur hjá köttum sem borða mataræði tilbúið í atvinnuskyni. Am. J. Vet. Res. 2009, 70, 1374–1382. [Krossvísun]

Stacie C. Summers 1, Jessica Quimby 2, Amanda Blake 3, Deborah Keys 4, Joerg M. Steiner 3 og Jan Suchodolski 3

1 Carlson College of Veterinary Medicine, Oregon State University, Corvallis, OR 97331, Bandaríkjunum

2 Department of Veterinary Clinical Sciences, Ohio State University, Columbus, OH 43210, Bandaríkjunum; quimby.19@osu.edu

3 Texas A&M Gastrointestinal Laboratory, Department of Small Animal Clinical Sciences, College Station, TX 77843, Bandaríkjunum; ablake@cvm.tamu.edu (AB); jsteiner@cvm.tamu.edu (JMS); jsuchodolski@cvm.tamu.edu (JS)

4 Kaleidoscope Statistics Veterinary Medical Research Consulting, Aþena, GA 30606, Bandaríkjunum; deborah.a.keys@kaleidoscopestatistics.com