Quercetin sem nýrnavörn eftir hlýja blóðþurrð: vefjafræðilegt mat í nagdýralíkani

Gabriela F. Kaupir Gonçalves¹, Maria Eduarda M. Silva², Francisco JB Sampaio¹, Marco A. Pereira-Sampaio^{1, 3}, Diogo Benchimol de Souza¹

ÁSTANDUR

Tilgangur:Til að meta magnbundið möguleg langtíma verndandi áhrif quercetins meðan á nýrnablóðþurrð stendur.

Efni og aðferðir:Karlkyns rottum var skipt í 4 hópa: sham (S), sham quercetin (SQ), blóðþurrð (I) og blóðþurrð quercetin (IQ). Hóparnir SQ og IQ fengu quercetin (50mg/kg) fyrir og eftir aðgerð. Í hópum I og IQ voru vinstri nýrnaæðar klemmdar í 60 mínútur. Öll dýrin voru aflífuð fjórum vikum eftir aðgerðina og þéttni þvagefnis og kreatíníns í sermi var mæld. Þyngd og rúmmál nýrna, flatarmálshlutfall heilaberki og ekki heilaberki (C-NC), rúmmál corticals (CV), rúmmálsþéttni gaukla (Vv[glom]), rúmmálsvegið gauklarúmmál (VWGV), og fjöldi gaukla pr.nýru(N[glom]) voru metnar með sterafræðilegum aðferðum. Niðurstöður voru taldar tölfræðilega marktækar þegar bls<>

Niðurstöður:Þvagefnisþéttni í sermi í hópi I jókst um 10,4 prósent miðað við hóp S, en enginn munur sást meðal hinna hópanna. C-NC hóps I var lægra en allra annarra hópa og greindarvísitala hóps hafði svipaðar niðurstöður og sýndarhópar. Vv[glom] og N[glom] hóps I voru lægri en hóps S (33,7 prósent og 28,3 prósent, í sömu röð), og greindarvísitala hópsins hafði engan marktækan mun miðað við S hópinn.

Ályktanir:Quercetin var áhrifaríkt sem nýrnavarnarefni til að koma í veg fyrir gauklatapi sem sást þegarnýruvarð fyrir heitri blóðþurrð. Þetta bendir til þess að hægt sé að nota þetta flavonoid fyrirbyggjandi ínýruskurðaðgerð, þegar hlý blóðþurrð er nauðsynleg, svo sem nýrnabrot að hluta.

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com

cistanche karlkyns bætur

KYNNING

Nýrnabrot að hluta hefur verið álitin gulls ígildi meðferðar fyrir staðbundnar litlar nýrnamassar (1, 2) og hefur verið framkvæmd í auknum mæli vegna þróunar á greiningartækni (3). Þrátt fyrir stöðugar rannsóknir og þróun á nýrri skurðaðgerð, sem felur í sér kalt blóðþurrð og núll blóðþurrð (4, 5), er heit blóðþurrð í nýrum enn að mestu notuð til að fá blóðlaust skurðsvæði við hluta nýrnabrottnám (6).

Aftur á móti tengist nýrnablóðþurrð við nýrnasparandi skurðaðgerð við gauklatapi eftir aðgerð og virkni hnignunar á eftirstandandi hálskirtli (7, 8), sem getur leitt til nýrnabilunar. Því lyf sem geta haft verndandi áhrif ánýruá tímabilinu fyrir aðgerð, fyrir aðgerð og eftir aðgerð er ástæða til (9, 10).

Quercetin hefur sýnt jákvæðar niðurstöður við mismunandi tilraunaaðstæður, aðallega rakið til andoxunar- og bólgueyðandi eiginleika þess (11-14). Þetta flavonoid hefur einnig verið sýnt fram á að vera efnilegt þegar það tengist heitri blóðþurrð í mismunandi líffærum og vefjum (15-17) og nánar tiltekið ínýru(18-20). Hins vegar, eftir því sem við best vitum, hefur quercetin ekki enn verið rannsakað til að koma í veg fyrir tap á gaukla eftir heita blóðþurrð.

Tilgáta þessarar rannsóknar er sú að quercetin geti bætt nýrnaskemmdir af völdum blóðþurrðar-endurflæðis. Markmiðið er að meta magnbundið möguleg langtíma verndandi áhrif quercetins við heita blóðþurrð í nýrum í nagdýralíkani.

EFNI OG AÐFERÐIR

Allar tilraunir voru gerðar í samræmi við innlend og alþjóðleg lög um vísindalega notkun dýra og var þetta verkefni formlega samþykkt af siðanefnd stofnana um dýratilraunir (CEUA 040/2017).

Notaðar voru fjörutíu Wistar karlkyns rottur á aldrinum 9 vikna. Dýrunum var skipt af handahófi í 4 hópa: Sham (S) - hópur sem var látinn fara í kviðarholsskurð og krufningu á nýrnarót (n=10); Sham Quercetin (SQ) - hópur meðhöndlaður með quercetin og látinn fara í sömu aðferðir og hópur Sham (n=10); Blóðþurrð (I) - hópur sem hefur fengið heita blóðþurrð í nýrum (n=10); Blóðþurrð Quercetin (IQ) - hópur sem er meðhöndlaður með quercetíni og hefur fengið heita blóðþurrð í nýrum (n=10). Hóparnir SQ og IQ fengu 50mg/kg quercetin (Quercetin, New Roots Herbal, Vaudreuil- -Dorion, Kanada) með magaslöngu 3 dögum fyrir og 3 dögum eftir aðgerð og eina gjöf í kviðarhol 60 mínútum fyrir skurðaðgerðina, á meðan hún var ómeðhöndluð hópar (S og I) fengu saltvatn (í stað quercetins) með sömu samskiptareglum.

Allar rottur voru svæfðar með ketamíni í vöðva (Cetamin, Syntec, Santana de Parnaíba, Brasilía, 100 mg/kg) og xylasíni (Xilazin, Syntec, 20mg/kg). Með smitgát var skurður á miðlínu í kviðnum notaður til að afhjúpa innyflin í kviðarholi, sem færðist til til að afhjúpa vinstra megin.nýru. Vinstri nýrnaslagæðin og bláæðan voru einangruð með bareflum krufningu. Hjá dýrum í hópum I og greindarvísitölu voru nýrnaæðar klemmdar í 60 mínútur, en í hópum S og SQ var pedicle krufið, en engin blóðþurrð var framkallaður. Allir hópar voru svæfðir í 60 mínútur, á meðan var innyflum kviðarhols sett í kviðinn og skurðurinn var þakinn vættri grisju. Í lok þessa tímabils voru æðaklemmur fjarlægðar og endurflæði kom fram (í hópum I og IQ) og kviðarholinu var lokað á hefðbundinn hátt.

Vinstrinýruvar safnað og fest í 4 prósent fosfat-bufferuðu formaldehýði. Nýrun voru vigtuð og nýrnarúmmál mælt með aðferð Scherle (21). Hlutfall heilaberki og ekki heilaberki (C-NC) var reiknað út með Cavalieri aðferð (22-24). Heildarrúmmál (CV) var reiknað út með því að margfalda nýrnarúmmálið með C-NC (24).

Dýrin hafa aflífað 4 vikum eftir aðgerð með ofskömmtun svæfingalyfs (Isoflurane, BioChimico, Rio de Janeiro, Brasilíu). Strax eftir dauðann var blóðsýni tekið með hjartastungu. Þetta sýni var notað til að greina þvagefni og kreatínín í sermi með sjálfvirku ensímaðferðinni. Vinstrinýruvar safnað og fest í 4 prósent fosfat-bufferuðu formaldehýði. Thenýruvoru vigtaðir og nýrnarúmmál mælt með aðferð Scherle (21). Cor-tex-non-cortex area ratio (C-NC) var reiknað út með Cavalieri aðferð (22-24). Heildarrúmmál (CV) var reiknað út með því að margfalda nýrnarúmmálið með C-NC (24).

Söfnuð sýni af handahófi frá öllum vinstrinýruvoru unnar fyrir paraffíninnfellingu, sneiddar í 5µm þykkt og litaðar með hematoxýlíni og eósíni. Vefjagreining var gerð í blindni með því að nota 25 vefjafræðilega svið, fengin úr fimm mismunandi hlutum nýrnaberkins frá hverju nýra. Rúmmálsþéttleiki gaukla (Vv[glom]), sem gefur til kynna hlutfallslegt rúmmál gaukla í heilaberki, var metinn með punktatalningaraðferð (22-24). Rúmmálsvegið gauklarúmmál (VWGV) var metið með því að nota punktsýnishornaaðferð (22-24). Mat á heildarfjölda glomeruli á hvert nýra (N[glom]) var reiknað út með formúlunni: CVxVv[glom]/ VWGV (24).

Niðurstöðurnar voru bornar saman með einstefnu ANOVA við Bonferroni's posthoc próf. Greiningar voru gerðar með því að nota GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, San Diego, Bandaríkjunum). Allar niðurstöður voru taldar marktækar þegar bls<0.05. all="" numerical="" data="" were="" presented="" as="" mean±standard="">

Að auki skoðaði reyndur dýralæknir (óvitandi um meðferðaraðstæður) alla vefjafræðilegu hluta og lýsti vefjameinafræðilegum breytingum. Þá var greint frá þeim breytingum sem sáust í hverjum hópi.

cistanche líkamsbygging

NIÐURSTÖÐUR

Þvagefnismagn í sermi í hópi I var 10,4 prósent hærra en í hópi S. Enginn munur á þvagefnisþéttni í sermi kom fram milli greindarvísitölu hópa og annarra hópa. Einnig kom ekki fram munur á kreatíníngreiningu í sermi á milli allra hópanna.

C-NC hóps I lækkaði um 9,3 prósent samanborið við hóp S. Quercetin meðferð í hópi IQ endurheimti eðlileg gildi fyrir þessa breytu. C-NC í greindarvísitölu hóps var 5,9 prósent hærri en hópur I og hafði svipað gildi og hópar S og SQ.

Vv[glom] hóps I var 32,7 prósentum lægra en hóps S og 34,2 prósent minnkað í samanburði við hóp SQ. Á sama tíma jókst greindarvísitala hópsins um 33,7 prósent í samanburði við I hópinn og lækkun um 12,0 prósent í samanburði við SQ. Meðferð með quercetini hjá dýrum sem fengu blóðþurrð í nýrum (hóp IQ) kom í veg fyrir minnkun Vv[glom] sem sást hjá dýrum sem ekki voru meðhöndluð.

Blóðþurrðinnýru(hópur I) sýndi minnkað N[glom] í samanburði við hópa S og SQ (26.0 prósent og 33.0 prósent, í sömu röð). Meðferð með quercetini í greindarvísitölu hóps kom í veg fyrir þetta tap á glomeruli, þar sem þessi hópur sýndi engan mun á hópum S og SQ, en 28,3 prósent jók N[glom] í samanburði við hóp I.

Enginn munur kom fram ánýruþyngd,nýrurúmmál, barkarrúmmál og VWGV meðal hópanna. Öll gögn eru sýnd í töflu-1 og eru sýnd á myndum 1 og 2.

Vefjameinafræðileg greining leiddi í ljós aðskilda pípu- og mergþéttingu hjá sumum dýrum í hópum S og SQ, en barkarbyggingin var varðveitt. Á hinn bóginn sáust margar áherslur á skemmum í skefjumnýruí hópi I. Þetta innihélt myndlaust efni í pípulaga holrýminu, myndlaust eósínfíknt efni í mergsvæðinu, gauklahrörnun, einkjarna íferð, augljóst tap á gaukla og tap á heilaberki. Þessar meinafræðilegu niðurstöður voru í lágmarki ínýruorðið fyrir blóðþurrð í meðferð með quercetin (hóp IQ).

UMRÆÐA

Þrátt fyrir mikla viðleitni til að koma í veg fyrir hlýja blóðþurrð við hluta nýrnabrottnám, með off-clamp og kalt blóðþurrðartækni (4, 5), er hlý blóðþurrð enn nauðsynleg við flestar nýrnasparandi skurðaðgerðir (1, 2, 6) og skaðlegar og varanlegar afleiðingar þess. fyrir nýrnastarfsemi og formgerð eftirstandandi parenchyma (7, 8) stafar af mikilli framleiðslu hvarfgjarnra súrefnistegunda og þar af leiðandi lípíðperoxun (25, 26). Í ljósi þessa er líklegt að nota andoxunarlyf sem mögulega nýrnavörn (9-11, 18-20) sem og í öðrum líffærum og vefjum (12-17) sem tengjast blóðþurrð/endurflæði (9, 10, 15-20, 26).

Quercetin er flavonoid sem hefur reynst árangursríkt í baráttunni gegn framleiðslu hvarfgjarnra súrefnistegunda og hefur á jákvæðan hátt breytt gildum lífefnafræðilegra merkja um samstöðuvirkni líffæra og vefja (12-17), þ.m.t.nýruvið mismunandi aðstæður (11) eins og heit blóðþurrð (18-20). Megindlegar niðurstöður okkar staðfesta að notkun quercetins er gagnleg við heita nýrnablóðþurrð. Talið er að verndandi niðurstöður sem sáust hjá dýrum sem fengu quercetin hafi verið afleiðing af minni oxunarskemmdum í nýrnavef. Hins vegar hefur oxunarálag ekki verið metið beint í þessari rannsókn, eins og í öðrum (27), og framtíðarrannsóknir ættu að skýra verkunarmáta. Notkun þessa flavonoids var áhrifarík til að koma í veg fyrir tap á gaukla (N[glom]), sem kom aðeins fram hjá dýrum sem fengu nýrnablóðþurrð án quercetinmeðferðar.

Þrátt fyrir að áhersla þessarar rannsóknar hafi verið vefjafræðilegt mat, var einnig greint í sermi þvagefnis og kreatíníns, sem eru algengustu lífefnafræðilegu merki um nýrnastarfsemi (28). Þvagefni í sermi jókst aðeins í blóðþurrðarhópnum, sem styrkir að meðferð með quercetin kom í veg fyrir skerta nýrnastarfsemi eins og þetta merki gefur til kynna. Þetta er í samræmi við fyrri gögn sem greint var frá í fyrri rannsóknum (18-20).

Nephron sparing aðgerð hefur, eins og nafnið gefur til kynna, það markmið að fjarlægja smáttnýrumassa á sama tíma og hámarksfjöldi nýrnana er varðveittur til að viðhalda starfsemi nýrna til lengri tíma litið (1, 2, 6-8). Þess vegna veitir magngreining á algerum fjölda hnoðra, sem er niðurstaða sem nálgast fjölda nýrnahetta sem eru til staðar í parenchyma (10, 22-24), endanlega niðurstöðu sem gefur til kynna hvort hlutanýranámið nái markmiði sínu. Eftir því sem við best vitum er þessi rannsókn sú fyrsta sem greinir frá fyrirbyggjandi áhrifum quercetins á gauklatapi af völdum heitrar nýrnablóðþurrðar.

Nagdýralíkanið er mikið notað í rannsóknum sem beinast að áhrifum blóðþurrðar/endurflæðis í nýrum (9, 18-20, 22), og formfræðilegar breytingar af völdum þessarar aðferðar hafa þegar verið sannaðar (22). Niðurstöður okkar eru í samræmi við fyrri skýrslu um 60-mínútna heitt nýrnablóðþurrð í þessu líkani (22), með minnkun á C-NC, Vv[glom] og N[glom] í blóðþurrðarhópnum samanborið við sýndarhópur.

Sýndardýr sem voru meðhöndluð með quercetin sýndu engar klínískar, lífefnafræðilegar eða formfræðilegar megindlegar breytingar á nýrum, sem sýnir að quercetin hefur engar aukaverkanir ánýru, sem er í samræmi við fyrri rannsóknir (18-20, 26, 29). Meira um vert, niðurstöður okkar staðfesta að þetta flavonoid kemur í veg fyrir tap á gaukla af völdum blóðþurrðar/endurflæðis þar sem gildi Vv[glom] og N[glom] í blóðþurrðarhópnum sem fengu meðferð með quercetin voru svipuð og í sýndarhópnum.

Áður birtar rannsóknir sýndu verndandi áhrif quercetins á stuttum tíma, þar sem greining þessara rannsókna var gerð einum degi eftir nýrnablóðþurrð (18-20). Þessi rannsókn bætti við upplýsingum um þetta efni, greindinýru4 vikum eftir blóðþurrðaráverka, sem sýnir þannig að verndandi áhrif quercetins eru varanleg.

Engu að síður skal tekið fram að rannsóknin sem hér um ræðir hafði nokkrar takmarkanir. Meinalífeðlisfræðileg viðbrögð við blóðþurrðarskaða eru mismunandi eftir tegundum. Þrátt fyrir að rottalíkanið af heitum blóðþurrð í nýrum sé mikið notað, er þetta samt tilraunaaðstaða, með nokkrum mismunandi frá klínískum aðstæðum. Að auki væri mat á nýrnaúthreinsun og öðrum lífmerkjum í nýrnasermi æskilegt fyrir næmari virknigreiningu. Framtíðar klínískar rannsóknir sem rannsaka notkun quercetins sem nýrnavarnarlyfs hjá sjúklingum sem gengust undir nýrnabrot að hluta með heitri blóðþurrð eru réttlætanlegar.

Þannig er komist að þeirri niðurstöðu að quercetin hafi verið áhrifaríkt sem nýrnavarnarefni, dregið úr vefjameinafræðilegum breytingum, komið í veg fyrir tap á gaukla og viðhaldið eðlilegu sermiþéttni þvagefnis eftir heita blóðþurrð. Þessar niðurstöður benda til þess að þetta flavonoid geti bætt- -langtíma nýrnastarfsemi hjá sjúklingum sem gengust undir hluta nýrnabrottnám með heitri blóðþurrð.

Cistanche tubulosa kemur í veg fyrir nýrnasjúkdóm, smelltu hér til að fá sýnishornið

FJÁRMÁLUN

Samhæfing til að bæta eftir-

-Framhaldsnemar - CAPES

Foundation for Research Support of Rio de

Janeiro - FAPERJ

Landsráð um vísinda- og tækniþróun – CNPq

ÁTRYKJA AF ÁHUGI

Engum lýst yfir.

HEIMILDIR

1. Campbell S, Uzzo RG, Allaf ME, Bass EB, Cadeddu JA, Chang A, o.fl. Nýrnamassi og staðbundið nýrnakrabbamein: AUA leiðbeiningar. J Urol. 2017; 198:20-9.

2. Cai Y, Li HZ, Zhang YS. Samanburður á hluta og róttækri kviðsjárskurðaðgerð: Langtímaárangur fyrir klínískt T1b nýrnafrumukrabbamein. Urol J. 2018; 15:16-20.

3. Salameh JP, McInnes MDF, McGrath TA, Salameh G, Schieda N. Greiningarnákvæmni tvíorku CT fyrir mat á nýrnamassa: Kerfisbundin endurskoðun og meta-greining. AJR Am J Roentgenol. 2019; 212:W100-W105.

4. Simone G, Capitanio U, Tuderti G, Presicce F, Leonardo C, Ferriero M, o.fl. On-clamp versus off-clamp partial phrectomy: Tilhneiging skora-samræmd samanburður á langtíma virkni niðurstöður. Int J Urol. 2019; 26:985-91.

5. Bertolo R, Garisto J, Dagenais J, Agudelo J, Armanyous S, Lioudis M, et al. Kalt á móti heitum blóðþurrð Blóðþurrð með vélmennaaðstoð hluta nýrnaskurðar: Samanburður á virkniárangri hjá sjúklingum sem passa við „í áhættu“. J Endourol. 2018; 32:717-23.

6. Hur M, Park SK, Shin J, Choi JY, Yoo S, Kim WH, o.fl. Áhrif fjarlægrar blóðþurrðarformeðferðar á kreatínín í sermi hjá sjúklingum sem gangast undir nýrnabrot að hluta: rannsóknaraðferð fyrir slembiraðaða samanburðarrannsókn. Réttarhöld. 2018; 19:473.

7. Lee H, Song BD, Byun SS, Lee SE, Hong SK. Áhrif heits blóðþurrðartíma á nýrnastarfsemi eftir aðgerð eftir nýrnabrot að hluta fyrir klínískt T1 nýrnafrumukrabbamein: rannsókn sem samsvarar tilhneigingu. BJU Int. 2018; 121:46-52.

8. Zabell JR, Wu J, Suk-Ouichai C, Campbell SC. Blóðþurrð í nýrum og virkni í kjölfar nýrnabrottnáms að hluta. Urol Clin North Am. 2017; 44:243-55.

9. Ozkan TA, Karakoyunlu N, Polat R, Sarıbaş GS, Şener NC, Özdemir S, o.fl. Mat á verndandi áhrifum esomeprazols í tilraunalíkani af nýrnablóðþurrð-endurflæði. Int Urol Nephrol. 2018; 50:217-23.

10. Damasceno-Ferreira JA, Abreu LAS, Bechara GR, Costa WS, Pereira-Sampaio MA, Sampaio FJB, o.fl. Mannitól dregur úr nýrnatapi eftir heita nýrnablóðþurrð í svínalíkani. BMC Urol. 2018; 18:16.

11. Abharzanjani F, Afshar M, Hemmati M, Moussavi M. Skammtíma hár skammtur af Quercetin og Resveratrol breytir öldrunarmerkjum í mönnumNýraFrumur. Int J Fyrri Med. 2017; 8:64.

12. Patra A, Satpathy S, Shenoy AK, Bush JA, Kazi M, Hussain

læknir. Samsetning og mat á blönduðum fjölliða mícellum af quercetin til meðferðar á brjósta-, eggjastokka- og fjöllyfjaónæmum krabbameinum. Int J Nanomedicine. 2018;13:2869-81.

13. Wang D, Lou X, Jiang XM, Yang C, Liu XL, Zhang N. Quercetin verndar gegn bólgu, MMP-2 virkjun og frumuddugunarörvun í rottumódeli fyrir hjarta- og lungnaendurlífgun með því að stilla Bmi{{2} } tjáning. Mol Med Rep. 2018; 18:610-6.

14. Srinivasan P, Vijayakumar S, Kothandaraman S, Palani M. Sykursýkisvirkni quercetins dregin úr Phyllanthus Emblica L. ávöxtum: Í kísil og in vivo aðferðir. J Pharm Anal. 2018;8:109-18.

15. Tóth Š, Jonecová Z, Čurgali K, Maretta M, Šoltés J, Švaňa M, o.fl. Quercetin dregur úr blóðþurrðarendurflæði af völdum COX-2 og MPO tjáningu í slímhúð smáþarma. Biomed Pharmacother. 2017; 95:346-54.

16. Park DJ, Shah FA, Koh PO. Quercetin dregur úr skemmdum á taugafrumum í miðheilaslagæðastíflu dýralíkani. J Vet Med Sci. 2018; 80:676-83.

17. Uyla MU, ahin A, ahintürk V, Alata Ö. Quercetin hefur áhrif á örlög blóðþurrðar í lifur og endurflæðisskaða hjá rottum: tilraunarannsókn. Int J Surg. 2018; 53:117-21.

18. Kahraman A, Erkasap N, Serteser M, Köken T. Verndaráhrif quercetins á nýrnablóðþurrð / endurflæðisskaða hjá rottum. J Nephrol. 2003; 16:219-24.

19. Kinaci MK, Erkasap N, Kucuk A, Koken T, Tosun M. Áhrif quercetins á apoptosis, NF-B og NOS genatjáningu í nýrnablóðþurrð/endurflæðisskaða. Exp Ther Med. 2012; 3:249-54.

20. Chen BL, Wang LT, Huang KH, Wang CC, Chiang CK, Liu SH. Quercetin dregur úr nýrnablóðþurrð/endurflæðisskaða með því að virkja AMP-virkjaða próteinkínasa-stýrða sjálfsátsferlið. J Nutr Biochem. 2014; 25:1226-34