Promitotic virkni Oenothera Biennis á öldruðum húðtrefjum úr mönnum Part 2

3. Umræður

Í þessari rannsókn könnuðum við áhrif vatnssækins Oenothera biennis frumuþykkni (ObHEx) á frumuöldrun, þar sem það sýndi húð gegn öldrun eiginleika þegar það var prófað í in vitro og ex vivo líkönum [18]. Við notuðum svipað öldrunarlíkan af NHDF sem var undirgefinn SIPS til meðferðar með H2O2 [21,22].

Glýkósíð af cistanche getur einnig aukið virkni SOD í hjarta- og lifrarvef og dregið verulega úr innihaldi lipofuscins og MDA í hverjum vef, hreinsar í raun ýmsar hvarfgjarnar súrefnisradicals (OH-, H₂O₂, osfrv.) og verndar gegn DNA skemmdum af völdum af OH-róttækum. Cistanche phenylethanoid glýkósíð hafa öfluga hreinsunargetu sindurefna, meiri afoxunargetu en C-vítamín, bæta virkni SOD í sæðisviflausn, draga úr innihaldi MDA og hafa ákveðin verndandi áhrif á virkni sæðishimnu. Cistanche fjölsykrur geta aukið virkni SOD og GSH-Px í rauðkornum og lungnavef í tilraunamúsum af völdum D-galaktósa, auk þess að draga úr innihaldi MDA og kollagens í lungum og plasma og auka innihald elastíns, hafa góð hreinsunaráhrif á DPPH, lengja tíma súrefnisskorts í öldruðum músum, bæta virkni SOD í sermi og seinka lífeðlisfræðilegri hrörnun lungna í öldruðum tilraunamúsum. Með frumuformfræðilegri hrörnun hafa tilraunir sýnt að Cistanche hefur góða andoxunargetu og hefur tilhneigingu til að vera lyf til að koma í veg fyrir og meðhöndla öldrunarsjúkdóma í húð. Á sama tíma hefur echinacoside í Cistanche verulega getu til að hreinsa DPPH sindurefna og getu til að hreinsa hvarfgjarnar súrefnistegundir og koma í veg fyrir sindurefna-

olli niðurbroti á kollageni og hefur einnig góð viðgerðaráhrif á anjónskemmdir af týmíni sindurefna.

Smelltu á Hvar get ég keypt Cistanche

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Til að skilja verkunarmáta ObHEx á öldruðum húðtrefjum úr mönnum, með því að birta líffræðilegar ferlar sem breyttar eru með útdrættinum, gerðum við gagnaóháða massarófsmælingu ofurdjúpa próteinfræðilega nálgun. Það gerði okkur kleift að fá fullkomnustu próteingreiningu á öldrunarfrumum til þessa og í fyrsta skipti samtímis magngreiningu fjölmargra öldrunarmerkja.

Fyrst af öllu, til að meta öldrunarörvun með H2O2 meðferð á NHFD frumum, töluðum við þekkt öldrunarmerki. Próteomics gögn okkar staðfestu framkalla öldrunar vegna oxunarálags: reyndar sáum við breytt magn af þegar þekktum öldrunarmerkjum sem tengjast auknu lysosomal innihaldi (GLB1 og FUCA1), DNA skemmdum (ATR, ATM, MACROH2A1 og MACRO2A2) og G2 fasa frumuhringrás handtöku (CDK1NA og MKI67). Þar að auki bendir greining á leiðaauðgun á próteinum sem er mest lækkuð í H2O2 meðhöndluðum á móti stjórnfrumum til mítósu, sem endurspeglar stöðvun öldrunarfjölgunar.

Með því að bera saman prótein SIPS NHDF frumna meðhöndlaðar með ObHEx á móti ómeðhöndluðum, komumst við að því að meðferðin með útdrættinum tókst að hluta til að endurheimta magn próteina og fléttna sem gegna mikilvægu hlutverki á nokkrum stigum mítósu. ObHEx ræktun jók gildi CDK1, lykil mítótískt prótein sem kallar á inngöngu í mítósu með því að mynda flókið með cyclin B [34]. Þar að auki voru allar fimm undireiningar þéttiefnis I flókins uppstýrðar. Þessi flókin er samsett úr tveimur byggingareiningum litninga (SMC), SMC2 og SMC4, og þremur undireiningum sem ekki eru SMC, NCAPD2, NCAPH og NCAPG. Í prómetafasanum er hlutverk þéttingar I fléttunnar að stuðla að gerð þéttingar litninga með því að koma jákvæðum ofurspólum inn í DNA á ATP-háðan hátt [35]. Auk þessa uppstýrði útdrátturinn KNTC1, NUF2 og TRIP13, sem eru þrjú prótein tengd kinetochore, stórt flókið sem, meðan á prómetafasanum stendur, tengir centromeric chromatin við örpíplur frá gagnstæðum spindulskautum til að stuðla að aðskilnaði systurlitninga [ 36,37]. Einnig hefur verið greint að hluta endurheimt magns MCM próteina. Þessi prótein eru kjarninn í afritunar helicasa flókinu sem vindur upp á tvíþátta DNA til að útvega einstrengja sem sniðmát fyrir DNA pólýmerasa. MCM flókið er breytt í virkan helicasa í S fasanum en er þegar hlaðinn á litning í telofasanum [38,39]. Útdrátturinn jók einnig magn IQGAP3, PBK og DHFR. Hið fyrra, IQGAP3, er mikilvægur eftirlitsaðili mítósuframvindu vegna þess að það stuðlar að cdk7 virkni, nauðsynlegt fyrir Cdc2 virkjun [40,41]; PBK er kínasi sem er aðeins virkur í mítósu; þegar það er fosfórýlerað hefur það samskipti við p53, óstöðugleika þess og dregur úr DNA skaðaferlinu [42]; og DHFR er lykilensím í DNA lífmyndun þar sem magn þeirra er verulega veikt í öldruðum trefjakímum úr mönnum [43].

Líf-orthogonal próf sýndu einnig getu ObHEx til að snúa að hluta til við einkenni öldrunar, þ.e. lysosomal virkni og frumuhringsstopp. Reyndar, til að sannreyna hvort endurreisn mítótískrar próteintjáningar með ObHEx þýði endurvirkjun frumuhringsins, gerðum við FACS (Fluorescence Activated Cell Sorting) tilraunir á SIPS NHDF frumum sem voru meðhöndlaðar eða ekki með útdrættinum. Þeir sýndu að ObHEx gat dregið úr hluta frumna sem stíflað var í G2 fasanum og stuðlað að því að þeir kæmu aftur inn í frumuhring öldrunarfrumna.

4. Efni og aðferðir

4.1. Frumumenning

Venjulegir húðtrefjur (NHDF; Promocell) voru ræktaðar í Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM; Gibco) ásamt 10 prósentum af fóstursermi nautgripa (FBS; Gibco) og 500 U/mL af penicillín-streptomycini (Gibco) í 95 prósent lofti , 5 prósent CO2 og rakt andrúmsloft við 37 ◦C.

4.2. Framleiðsla á streitu af völdum ótímabærrar öldrunar (SIPS)

Alls 10 1200 000 NHDF frumum var sáð í hvern 60 mm frumuræktunardiskanna, einum degi fyrir ræktun þeirra með 100 µM H2O2 við 37 ◦C í 2 klst. [21,22]. Í kjölfarið var H2O2 þvegið með fosfatbufferðri saltvatni (PBS; Gibco) til að ljúka meðferðinni og frumurnar voru ræktaðar í venjulegum miðli í 4 daga. Fyrir frumurnar sem ekki eru öldrunarlausar, notaðar sem viðmiðunarefni, var 2240 000 NHDF frumum sáð í hvern af 60 mm frumuræktunardiskunum. Tilraunin var gerð í 5 líffræðilegum endurteknum.

4.3. Oenothera Biennis vatnssækinn þykkni (ObHEx) undirbúningur

Útdrátturinn var gerður á rannsóknarstofum Arterra Bioscience SpA [18]. Frumuræktirnar voru fengnar úr laufum Oenothera biennis plantna (útvegað af GEEL Floricultura ss) með því að örva fjölgun meristemískra frumna á föstum agarplötum þar til kaldan fékkst. Frumurnar voru fluttar yfir í fljótandi vaxtarmiðilinn (Gamborg B5, bætt við 2,4 díklórfenoxýediksýru (1 mg/L), adenín (1 mg/L) og kinetín (0.01 mg/L) )) og ræktuð sem sviflausnarræktun undir hringhristingu. Þegar ræktun um 150 g/L var fengin, var frumunum safnað saman og þær leystar í PBS við pH 7,4 til að búa til vatnsleysanlegt útdrátt. Eftir frostþurrkun var duftið sem fékkst leyst upp í vatni eða frumuræktunarmiðli í viðeigandi styrk til prófunar.

4.4. Oenothera Biennis Hydrophilic Extract (ObHEx) meðferð

NHDF frumur voru ræktaðar í 24 klst með 0.01 prósent (p/v) ObHEx í heilum miðli. Í kjölfarið voru frumurnar þvegnar þrisvar sinnum með PBS og meðhöndlaðar í 24 klst til viðbótar með 0,01 prósent (p/v) ObHEx í sermilausum miðli. Þau voru síðan losuð með trypsínvæðingu, skilin í skilvindu við 500 g í 10 mínútur við 4 ◦C og þvegin tvisvar með PBS. Ómeðhöndlaðar samanburðarfrumur gengust undir sömu ræktun án ObHEx.

4.5. Undirbúningur sýnis fyrir próteingreiningu

Kögglar voru endursviflausnir í 60µL af Radioimmunoprecipitation Assay (RIPA) jafnalausn og leyst með hljóðgjafa. Próteinstyrkur frumulýsa var magngreindur með því að nota DC™ próteingreiningarsett (Biorad; #5000112). S-TrapTM örsnúningur (Protifi, Huntington, CA, USA) melting var framkvæmd á 50 µg af frumulýsum samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Í stuttu máli voru sýnin minnkað með 20 mM tris(2- karboxýetýl)fosfíni (TCEP) og alkýleruð með 50 mM þíóasetamíði (CAA) í 15 mínútur við stofuhita. Vatnskenndri fosfórsýru var síðan bætt við í 2,5 prósenta lokastyrk og síðan bætt við S-Trap bindijafnalausn (90 prósent vatnskennd metanól, 100 mM TEAB, pH 7,1). Blöndunum var síðan hlaðið á S-Trap súlur. Fimm auka þvottaskref voru framkvæmd til að eyða SDS ítarlega. Síðan voru frumulýsötin melt með 2,5 µg af trypsíni (Promega) við 47 ◦C í 1 klst. Eftir skolun voru peptíðin þurrkuð í lofttæmi, endurblönduð í 2 prósent ACN, 0,1 prósent FA og magngreind með Nanodrop.

4.6. nanoLC-MS/MS próteingreining og magngreining

Alls 400 ng af hverju sýni var sprautað á nanóplötu (Bruker Daltonics, Bremen, Þýskaland) hágæða vökvaskiljunarkerfi (HPLC) tengt við timsTOF Pro (Bruker Daltonics, Bremen) , Þýskalandi) massarófsmælir. HPLC aðskilnaður (leysir A: {{30}},1 prósent maurasýra í vatni; leysir B: 0,1 prósent maurasýra í asetónítríl) var framkvæmd við 250 l/mín með því að nota pakkaða losunarsúlu (C18, 25 cm × 75 µm 1,6 µm) (Ion Optics, Fitzroy, Ástralíu) með hallaskolun (2 til 13 prósent leysi B á 41 mínútu; 13 til 20 prósent á 23 mínútum; 20 prósent til 30 prósent á 5 mínútum; 30 prósent til 85 prósent í 5 mínútur og að lokum 85 prósent í 5 mínútur til að þvo súluna). Massagreiningargögn voru aflað með því að nota gagnaóháða greiningu á samhliða uppsöfnun raðbrota (diaPASEF) öflunaraðferð. Stillingar bleiunnar voru: massabil frá 400 til 1200 Da, hreyfanleiki á bilinu 0,60 til 1.43 1/k0, fjöldi hreyfanleikaglugga 1, áætlaður lotutími 1,79 sek., massaskref á hverri lotu 32.

4.7. MS Gagnavinnsla og lífupplýsingagreining

Gagnagreining var framkvæmd með DIA-NN hugbúnaði (útgáfa 1.8) [44]. Leit að mannlegum UniProtKB/Swiss-Prot Homo sapiens gagnagrunni (út í febrúar 2021, 20.408 færslur) var framkvæmd með því að nota bókasafnslaust verkflæði. Í þessu skyni var valmöguleikunum „FASTA samantekt fyrir bókasafnsfrjálsa leit/bókasafnsmyndun“ og „Djúpnámsróf, RTs og IMs spá“ athugað fyrir myndun forverajóna. Að hámarki 2 trypsín sem gleymdist klofnun var leyfð og hámarksbreytubreytingin var stillt á 5. Karbamidómetýlering (Cys) var stillt sem fasta breytingin, en prótein N-enda metíónín brottnám, metíónín oxun og N-enda asetýlering voru stillt sem breytileg breyting breytingar. Lengdarbil peptíðs var stillt á 7–30 amínósýrur, forverahleðslubil 2–4, forvera m/z bil 300–1800 og brotajón m/z bil 200–1800. Til að leita í móðurmassa og brotajónum var nákvæmni ályktað sjálfkrafa af DIA-NN og var stillt á um 13 ppm fyrir hverja greiningu. Falsuppgötvunarhlutfall (FDR) við prótein- og peptíðmagn var stillt á 1 prósent. Leikur á milli hlaupa var leyfður. Fyrir magngreiningarstefnuna var Robust LC (hánákvæmni) notað eins og ráðlagt var í hugbúnaðarskjölunum, en sjálfgefna stillingum var haldið fyrir aðrar reikniritfæribreytur.

Tölfræði- og lífupplýsingagreining var framkvæmd með Perseus hugbúnaði (útgáfa 1.6.15) sem er ókeypis aðgengilegur á vefsíðunni (sótt 22. júní 2.021) [45] og R/R Studio og RStudio útgáfu 20 21.09.1 30 (sótt 12. nóvember 2021). Öll R tölfræðileg greining var gerð með því að nota R stats pakkann. Pg skýrslufylkisúttakið með DIA-NN var notað og styrkleikar voru log2 umbreyttir fyrir tölfræðilega greiningu. Fyrir tölfræðilegan samanburð settum við fjóra hópa, sem hver inniheldur 5 líffræðilegar endurtekningar. Við síuðum síðan gögnin til að halda aðeins próteinum með að minnsta kosti 3 gild gildi í að minnsta kosti einum hópi. Næst voru gögnin reiknuð til að fylla upp gagnapunkta sem vantaði með því að búa til Gauss-dreifingu handahófskenndra talna með 33 prósenta staðalfráviki miðað við staðalfrávik mældra gilda og 1,8 staðalfrávik niðurgírun meðaltalsins til að líkja eftir dreifingu lágs. merkjagildi. T-próf ​​nemenda var framkvæmt á milli SEN og CTRL FDR < 0,05, S0=0.1 til að staðfesta tilvist merkja sem eru sértæk fyrir öldrun. Síðan, til að kanna hvort munurinn á áhrifastærð milli fjarveru eða nærveru meðferðar sé sá sami fyrir frumur þar sem öldrun var framkölluð eða ekki, var samspil beggja þátta (þ.e. örvun og meðferð) könnuð með tvíhliða ANOVA í R. Síðan voru p-gildi sem fengust fyrir víxlverkun beggja þátta leiðrétt fyrir margfeldisprófun með því að nota Benjamini-Hochberg [46] aðferðina til að stjórna False Discovery Rate (FDR). Að lokum var Tukey HSD post hoc greining gerð á próteinum sem sýndu q-gildi < 0,05. Próteinfræðigögn massarófsmælinga hafa verið afhent ProteomeXchange Consortium í gegnum PRIDE [47] samstarfsgeymsluna með gagnagagnaauðkenninu PXD034222.

4.8. Öldrunartengd ß-galaktósidasa litun

Öldrunartengd ß-galaktósíðasa (SA-ß-gal) virkni var metin með frumumerkjatækni litunarbúnaði (#9860). Alls 1250 000 NHDF frumum/holu var sáð í 6-brunnsplötu einum degi fyrir SIPS; en, sem stjórn, 250 000 frumur/brunnur. Eftir 4 daga í venjulegum miðli voru frumurnar ræktaðar eða ekki með 0.01 prósent (p/v) ObHEx í 48 klst. Í kjölfarið voru þau þvegin með PBS og meðhöndluð með festilausninni í 15 mín. Eftir tvo þvotta með PBS voru frumurnar ræktaðar með ß-gal litunarlausninni (loka pH 6,0) sem innihélt 5-bróm-4-klór-3-indólýl- -D-galaktó -pýranósíð (X-Gal) við 37 ◦C í þurrum útungunarvél í 20 klst. Jákvæðar frumur eru bláar. Liturinn er vegna klofnings á X-Gal í galaktósa og 5-bróm-4-klór-3-indoxýl (X) með SA-ß-gal. Indoxýlið er oxað í 5,50 -díbróm-4,40 -díklór-indigó sem myndar sterkt blátt botnfall. Hlutfall jákvæðra frumna í heildarfrumum var metið með því að telja 100–150 frumur í 5 myndum sem voru teknar af handahófi sem teknar voru með smásjá, fyrir hvert ástand. Frumur voru taldar með ImageJ hugbúnaði. Tilraunin var gerð í þríriti.

4.9. Flúrljómunarvirkjað frumuflokkunargreining

Alls {{0}} NHDF frumum/holu var sáð í 6-brunnsplötu einum degi fyrir SIPS; en, sem stjórn, 50 000 frumur/brunnur. Eftir 4 daga í venjulegum miðli voru viðmiðunar- og öldrunarfrumurnar meðhöndlaðar eða ekki með 0,01 prósent (p/v) ObHEx í 72 klst. Síðan voru frumurnar ræktaðar í nærveru 5 µg/mL af Hoechst 33342 í 30 mínútur við 37 ◦C. Eftir trypsínvæðingu og skilvindu við 500 g í 2 mínútur, voru þau blönduð aftur í 200 µL af PBS. Að lokum var flúrljómun frumna mæld með BD LSRFortessa frumugreiningartæki. Gögnin voru greind með FlowJo hugbúnaði v10.8.1. Tilraunin var gerð í þríriti.

5. Ályktanir

Hið djúpa öldrunartengda hnattræna próteómsnið sem fæst hér veitir hundruð próteina sem eru losuð af SIPS sem vísindasamfélagið getur nýtt sér til að skilja öldrun frekar og meta áhrif nýrra hugsanlegra mótara. Þar að auki sannar starf okkar for-mítótísk verkunarmáta ObHEx á öldruðum húðtrefjum úr mönnum: með aukinni tjáningu mítótískra próteina stuðlar það að endurheimt fjölgunar öldrunarfrumna. Þannig, byggt á þessum niðurstöðum, leggjum við til ObHEx sem öflugt hjálparefni gegn öldrun í tengslum við öldrun húðar.

Framlög höfunda:Hugmyndafræði, SC, MCM og ICG; aðferðafræði, SC, KR, IM, CC (Cerina Chhuon) og ICG; hugbúnaður, KR; rannsókn, SC, IM, CC (Cerina Chhuon), KT, SF, ADL, IP og CC (Corinne Cordier); auðlindir, MCM og ICG; skrifun—undirbúningur frumdrög, SC og ICG; skrif – yfirferð og klipping, SC, MCM og ICG Allir höfundar hafa lesið og samþykkt útgáfu handritsins.

Yfirlýsing um framboð gagna:Heildarrófsgreiningargögnin hafa verið afhent ProteomeXchange Consortium í gegnum PRIDE [47] samstarfsgeymsluna með gagnagagnaauðkenninu PXD034222 (upplýsingar umsagnarreiknings: Notandanafn: gagnrýnandi_pxd034222@ebi.ac.uk; Lykilorð: fK9Pjv90) .

Viðurkenningar: Þessi rannsókn var studd af Programma Operativo Complementare Ricerca e Innovazione 2014–2020, Asse I "Capitale Umano", Azione I.1 "Dottorati Innovativi con caratterizzazione Industriale". Við þökkum öðrum meðlimum Proteomics vettvangsins Necker Vincent Jung og Joanna Lipecka fyrir ómetanlegan vísindalegan stuðning og frjóar tillögur.

Heimildir

1. Di Micco, R.; Krizhanovsky, V.; Baker, D.; d'Adda di Fagagna, F. Cellular Senescence in Ageing: From Mechanisms to Therapeutic Opportunities. Nat. Séra Mol. Cell Biol. 2021, 22, 75–95. [CrossRef] [PubMed]

2. González-Gualda, E.; Baker, AG; Fruk, L.; Muñoz-Espín, D. Leiðbeiningar um að meta frumuöldrun in vitro og in vivo. FEBS J. 2021, 288, 56–80. [CrossRef] [PubMed]

3. Sikora, E.; Bielak- ˙Zmijewska, A.; Mosieniak, G. Hvað er og hvað er ekki frumuöldrun. Postepy Biochem. 2018, 64, 110–118. [CrossRef] [PubMed]

4. Choi, E.-J.; Kil, IS; Cho, E.-G. Utanfrumublöðrur fengnar úr öldruðum trefjafrumum draga úr húðáhrifum á aðgreining á keratínfrumum. Alþj. J. Mol. Sci. 2020, 21, 1022. [CrossRef] [PubMed]

5. Krtolica, A.; Parrinello, S.; Lockett, S.; Desprez, PY; Campisi, J. Senescent Fibroblasts stuðla að þekjufrumuvexti og æxlismyndun: tengsl milli krabbameins og öldrunar. Frv. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin 2001, 98, 12072–12077. [Krossvísun]

6. Wlaschek, M.; Maity, P.; Makrantonaki, E.; Scharffetter-Kochanek, K. Bandvefs- og vefjafrumuöldrun við öldrun húðar. J. Fjárfest. Dermatol. 2021, 141, 985–992. [Krossvísun]

7. Paez-Ribes, M.; González-Gualda, E.; Doherty, GJ; Muñoz-Espín, D. Að miða á öldrunarfrumur í þýðingalækningum. EMBO Mol. Med. 2019, 11, e10234. [Krossvísun]

8. Soto-Gamez, A.; Demaria, M. Therapeutic Interventions for Aging: The Case of Cellular Senescence. Drug Discoverv. Í dag 2017, 22, 786–795. [Krossvísun]

9. Latorre, E.; Birar, VC; Sheerin, AN; Jeynes, JCC; Hooper, A.; Dawe, HR; Melzer, D.; Cox, LS; Faragher, RGA; Ostler, EL; o.fl. Lítil sameind mótun á tjáningu splicing factor er tengd við björgun frá frumuöldrun. BMC Cell Biol. 2017, 18., 31. [Krossvísun]

10. Munir, R.; Semmar, N.; Farman, M.; Ahmad, NS Uppfærð umsögn um lyfjafræðilega starfsemi og jurtaefnafræðilega innihaldsefni kvöldvorrósa (ættkvísl Oenothera). Asian Pac. J. Trop. Biomed. 2017, 7, 1046–1054. [Krossvísun]

11. Timoszuk, M.; Bielawska, K.; Skrzydlewska, E. Kvöldvorrósa (Oenothera biennis) Líffræðileg virkni háð efnasamsetningu. Andoxunarefni 2018, 7, 108. [CrossRef]

12. Lee, SY; Kim, CH; Hwang, BS; Choi, K.-M.; Yang, I.-J.; Kim, G.-Y.; Choi, YH; Park, C.; Jeong, J.-W. Verndaráhrif Oenothera Biennis gegn oxunarálagi af völdum vetnisperoxíðs og frumudauða í keratínfrumum í húð. Lífið 2020, 10, 255. [Krossvísun]

13. Granica, S.; Czerwi ´nska, ME; Piwowarski, JP; Ziaja, M.; Kiss, AK Efnasamsetning, andoxunar- og bólgueyðandi virkni útdráttar sem eru unnin úr lofthlutum Oenothera Biennis L. og Oenothera Paradoxa Hudziok sem fengin eru eftir fræræktun. J. Agric. Food Chem. 2013, 61, 801–810. [Krossvísun]

14. Fecker, R.; Búda, V.; Alexa, E.; Avram, S.; Pavel, IZ; Muntean, D.; Cocan, I.; Watz, C.; Minda, D.; Dehelean, CA; o.fl. Plantefnafræðileg og líffræðileg skimun á Oenothera Biennis L. Vatnsalkóhólískum útdrætti. Lífsameindir 2020, 10, 818. [CrossRef]

15. Schäfer, L.; Kragballe, K. Viðbót með kvöldvorrósaolíu við ofnæmishúðbólgu: Áhrif á fitusýrur í daufkyrningum og húðþekju. Lipids 1991, 26, 557-560. [Krossvísun]

16. Barbulova, A.; Apone, F.; Colucci, G. Plant Cell Cultures sem uppspretta virkra snyrtiefna. Snyrtivörur 2014, 1, 94–104. [Krossvísun]

17. Caesar, LK; Cech, NB Samvirkni og mótþrói í útdrætti úr náttúrulegum afurðum: Þegar 1 plús 1 er ekki jafn 2. Nat. Framl. Rep. 2019, 36, 869–888. [Krossvísun]

18. Ceccacci, S.; De Lucia, A.; Tito, A.; Tortora, A.; Falanga, D.; Arciello, S.; Ausanio, G.; Di Cicco, C.; Monti, MC; Apone, F. An Oenothera Biennis frumuræktarþykkni með virkni gegn öldrun húðar bætir vélrænni eiginleika frumna. Umbrotsefni 2021, 11, 527. [CrossRef]

19. Farwick, M.; Köhler, T.; Schild, J.; Mentel, M.; Maczkiewitz, U.; Pagani, V.; Bonfigli, A.; Rigano, L.; Bureik, D.; Gauglitz, GG Pentacyclic Triterpenes frá Terminalia Arjuna Sýna marga kosti á öldruðum og þurrum húðum. Skin Pharmacol. Physiol. 2014, 27, 71–81. [Krossvísun]

20. Bonte, F.; Dumas, M.; Chaudagne, C.; Meybeck, A. Áhrif Asíusýru, Madecassic Acid og Asiaticoside á mannakollagen I myndun. Planta Med. 1994, 60, 133–135. [Krossvísun]

21. Chowdhary, S. Áhrif oxunarálags á að framkalla öldrun í trefjafrumum úr mönnum. J. Suður-Karól. Acad. Sci. 2018, 16, 2.

22. Wang, Z.; Wei, D.; Xiao, H. Aðferðir við frumuöldrun með því að nota oxunarálag. Aðferðir Mol. Biol. 2013, 1048, 135–144. [PubMed]

23. Hildebrand, DG; Lehle, S.; Borst, A.; Haferkamp, ​​S.; Essmann, F.; Schulze-Osthoff, K. -Fucosidase sem skáldsaga þægilegt lífmerki fyrir frumuöldrun. Frumuhringur 2013, 12, 1922–1927. [CrossRef] [PubMed]

24. Lee, BY; Han, JA; ég, JS; Morrone, A.; Johung, K.; Goodwin, EM; Kleijer, WJ; DiMaio, D.; Hwang, ES Öldrunartengdur beta-galaktósíðasi er lysosomal beta-galaktósíðasi. Öldrunarklefa 2006, 5, 187–195. [CrossRef] [PubMed]

25. Gorgoulis, V.; Adams, PD; Alimonti, A.; Bennett, DC; Bischof, O.; biskup, C.; Campisi, J.; Collado, M.; Evangelou, K.; Ferbeyre, G.; o.fl. Cellular Senescence: Skilgreina leið áfram. Cell 2019, 179, 813–827. [Krossvísun]

26. Matsuoka, S.; Ballif, BA; Smogorzewska, A.; McDonald, ER; Hurov, KE; Luo, J.; Bakalarski, CE; Zhao, Z.; Solimini, N.; Lerenthal, Y.; o.fl. ATM og ATR undirlagsgreining sýnir umfangsmikið próteinkerfi sem bregst við DNA skemmdum. Vísindi 2007, 316, 1160–1166. [Krossvísun]

27. Zhang, R.; Chen, W.; Adams, PD Sameindagreining á myndun öldrunartengdra Heterochromatin Foci. Mol. Cell Biol. 2007, 27, 2343–2358. [Krossvísun]

28. LaBaer, ​​J.; Garrett, læknir; Stevenson, LF; Slingerland, JM; Sandhu, C.; Chou, HS; Fattaey, A.; Harlow, E. Ný hagnýt starfsemi fyrir P21 fjölskyldu CDK hemla. Genes Dev. 1997, 11, 847–862. [Krossvísun]

29. Scholzen, T.; Gerdes, J. The Ki-67 prótein: frá hinu þekkta og óþekkta. J. Cell Physiol. 2000, 182, 311–322. [Krossvísun]

30. Passos, JF; von Zglinicki, T. Aðferðir við frumuflokkun á ungum og öldruðum frumum. Aðferðir Mol. Biol. 2007, 371, 33–44.

31. Dai, Y.; Tang, H.; Pang, S. Afgerandi hlutverk fosfólípíða í öldrun og líftíma reglugerð. Framan. Physiol. 2021, 12, 1998. [Krossvísun]

32. Dashty, M. Hedgehog merkjaleið er tengd við aldurstengda sjúkdóma. J. Sykursýki Metab. 2014, 5, 2. [Krossvísun]

33. Wang, D.; Lu, P.; Liu, Y.; Chen, L.; Zhang, R.; Sui, W.; Dumitru, AG; Chen, X.; Wen, F.; Ouyang, H.-W.; o.fl. Einangrun lifandi ótímabærra öldrunarfrumna með FUCCI tækni. Sci. Rep. 2016, 6, 30705. [Krossvísun]

34. Qian, J.; Beullens, M.; Huang, J.; De Munter, S.; Lesage, B.; Bollen, M. Cdk1 pantar mítóískar atburði með samhæfingu á litningatengdum fosfatasa rofi. Nat. Samfélag. 2015, 6, 10215. [Krossvísun]

35. Kong, M.; Cutts, EE; Pan, D.; Beuron, F.; Kaliyappan, T.; Xue, C.; Morris, EP; Musacchio, A.; Vannini, A.; Greene, EC Human Condensin I og II keyra umfangsmikla ATP-háða samþjöppun á kjarnabundnu DNA. Mol. Cell 2020, 79, 99–114.e9. [Krossvísun]

36. Kops, GJPL; Gassmann, R. Crowning the Kinetochore: The Fibrous Corona in Chromosome Segregation. Trends Cell Biol. 2020, 30, 653–667. [Krossvísun]

37. Ma, HT; Poon, RYC TRIP13 Virkar við stofnun eftirlitsstöðvar snældasamsetningar með því að fylla á O-MAD2. Cell Rep. 2018, 22, 1439-1450. [Krossvísun]

38. Kuipers, MA; Stasevich, TJ; Sasaki, T.; Wilson, KA; Hazelwood, KL; McNally, JG; Davidson, MW; Gilbert, DM Mjög stöðug hleðsla á Mcm próteinum á litning í lifandi frumum krefst afritunar til að afferma. J. Cell Biol. 2011, 192, 29–41. [Krossvísun]

39. Meng, Q.; Gao, J.; Zhu, H.; Hann, H.; Lu, Z.; Hong, M.; Zhou, H. The Proteomic rannsókn á raðleiðslum húðtrefjafrumum úr mönnum afhjúpar niðurstýringu á litningaþéttni flóknum próteinum sem taka þátt í endurtekinni öldrun. Biochem. Lífeðlisfræði. Res. Samfélag. 2018, 505, 1112–1120. [Krossvísun]

40. Larochelle, S.; Pandur, J.; Fisher, RP; Salz, HK; Suter, B. Cdk7 er nauðsynlegt fyrir mítósu og fyrir in Vivo Cdk-virkjandi kínasavirkni. Genes Dev. 1998, 12, 370–381. [Krossvísun]

41. Leone, M.; Cazorla-Vázquez, S.; Ferrazzi, F.; Wiederstein, JL; Gründl, M.; Weinstock, G.; Vergarajauregui, S.; Eckstein, M.; Krüger, M.; Gaubatz, S.; o.fl. IQGAP3, YAP-markmið, er nauðsynlegt fyrir rétta framvindu frumuhrings og stöðugleika í erfðamengi. Mol. Cancer Res. 2021, 19, 1712–1726. [CrossRef] [PubMed]

42. Nandi, AK; Ford, T.; Fleksher, D.; Neuman, B.; Rapoport, AP Dempun á DNA skemmdaeftirlitsstöð af PBK, nýr mítótísk kínasa, felur í sér prótein-prótein samskipti við æxlisbæla P53. Biochem. Lífeðlisfræði. Res. Samfélag. 2007, 358, 181–188. [CrossRef] [PubMed]

43. Gott, L.; Dimri, heimilislæknir; Campisi, J.; Chen, KY Reglugerð um díhýdrófólatredúktasa genatjáningu og E2F hluti í tvílitnum trefjafrumum úr mönnum meðan á vexti og öldrun stendur. J. Cell Physiol. 1996, 168, 580–588. [Krossvísun]

44. Demichev, V.; Messner, CB; Vernardis, SI; Lilley, KS; Ralser, M. DIA-NN: Taugakerfi og truflunleiðrétting gera kleift að ná djúpri próteómumfjöllun í miklu afköstum. Nat. Aðferðir 2020, 17, 41–44. [Krossvísun]

45. Tyanova, S.; Temu, T.; Sinitcyn, P.; Carlson, A.; Hein, MÍN; Geiger, T.; Mann, M.; Cox, J. Perseus Computational Platform fyrir alhliða greiningu á (Prote) Omics gögnum. Nat. Aðferðir 2016, 13, 731–740. [Krossvísun]

46. ​​Benjamini, Y.; Hochberg, Y. Controlling the False Discovery Rate: A Practical and Powerful approach to multiple testing. JR Stat. Soc. Ser. B (Metodol.) 1995, 57, 289–300. [Krossvísun]

47. Perez-Riverol, Y.; Bai, J.; Bandla, C.; García-Seisdedos, D.; Hewapathirana, S.; Kamatchinathan, S.; Kundu, DJ; Prakash, A.; Frericks-Rennilás, A.; Eisenacher, M.; o.fl. PRIDE gagnagrunnsauðlindirnar árið 2022: Miðstöð fyrir sönnunargögn sem byggja á fjöldarófsmælingum. Nucleic Acids Res. 2021, 50, D543–D552. [Krossvísun]

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】