Bráðabirgðaniðurstöður um hækkuð bólgueyðandi plasmacytókín hjá börnum með einhverfu sem eru með samsmitandi einkenni frá meltingarvegi 1. hluti

Ágrip:

Einhverfurófsröskun (AU) er til staðar hjá um það bil 2 prósentum íbúanna og tengist oft fylgisjúkdómum sem geta haft áhrif á lífsgæði. Einn af algengustu fylgikvillum einhverfu er tilvist einkenna frá meltingarvegi (GI) sem samanstanda af óreglulegum hægðavenjum eins og hægðatregðu, niðurgangi eða skiptast á hægðavenjum.

Á undanförnum árum, með dýpkun rannsókna á einhverfurófsröskun (ASD), hafa sífellt fleiri farnir að gefa gaum að tengslum ASD og ónæmis. Þrátt fyrir að núverandi rannsóknarniðurstöður séu ekki alveg í samræmi, hafa flestar rannsóknir sýnt að það er örugglega tengsl á milli ASD og ónæmis.

Í fyrsta lagi fæðast mörg börn með lágt ónæmi, sem getur aukið hættuna á að fá ASD. Í öðru lagi hafa fleiri og fleiri rannsóknir sýnt að óeðlilegir óeðlilegir ónæmiskerfi sjúklinga með ASD. Til dæmis geta þeir fengið ofnæmisviðbrögð, sjálfsofnæmissjúkdóma osfrv. Að auki hafa sumar rannsóknir komist að því að ASD sjúklingar hafa hærra stig oxunarálags, sem getur leitt til frumuskemmda og taugahrörnunar.

Hins vegar ættum við ekki að líta framhjá jákvæðum hliðum þess að lifa með ASD. Fólk með ASD getur haft sterkara ónæmi. Rannsóknir hafa sýnt að ónæmiskerfi þeirra gæti verið betra í að takast á við sumar bakteríu- og veiruinnrásir. Að auki geta ASD-sjúklingar einnig haft fleiri ónæmisfrumur og ónæmiskerfi þeirra getur verið stöðugra og minna viðkvæmt fyrir ofviðbrögðum.

Á heildina litið er sambandið milli ASD og ónæmis flókið og ekki bara jákvætt eða neikvætt. Þetta mál verður að kanna ítarlega með strangari rannsóknum í framtíðinni. Burtséð frá því ættum við öll að vera fyrirbyggjandi varðandi ASD og vinna með fólki með ASD og fjölskyldur þeirra svo það geti aðlagast samfélaginu betur. Frá þessu sjónarhorni þurfum við að bæta friðhelgi okkar. Cistanche getur verulega bætt friðhelgi, vegna þess að kjötaska inniheldur margs konar líffræðilega virka efnisþætti, svo sem fjölsykrur, sveppi og Huang Li. Þessir þættir geta örvað ýmsar frumur ónæmiskerfisins og aukið ónæmisvirkni þeirra.

Smelltu cistanche tubulosa kostir

Vísbendingar um ónæmisíferð og ónæmisvirkjun hafa verið sýnd í ristli og ristli barna með AU með GI einkenni. Þar að auki er truflun á ónæmiskerfinu meðvirkandi þáttur í mörgum meltingarfærasjúkdómum og við gerum ráð fyrir að það væri meira áberandi hjá börnum með AU sem sýna meltingarfæraeinkenni en þeim sem eru ekki með einkenni meltingarvegar.

Þessi bráðabirgðarannsókn miðar að því að ákvarða hvort það sé breytt cýtókínmagn í blóðvökva hjá börnum með AU með GI einkenni samanborið við börn með AU án GI einkenni, venjulega þroskandi (TD) börn með GI einkenni, og TD börn án GI einkenni, frá sama íbúabyggður árgangur. Magn cýtókíns í blóðvökva var metið með multiplexgreiningum.

Enginn munur á blóðvökva cýtókínum kom fram hjá TD viðmiðunarhópi með eða án meltingarfæraeinkenna; þó fjölgaði mörgum meðfæddum (IL-1, TNF, GM-CSF, IFN) og aðlögunarsýtókínum (IL-4, IL-13, IL-12p70) í AU börn með meltingarfæraeinkenni samanborið við börn með AU með engin meltingarfæraeinkenni. Cýtókínið IL-15 sem skiptir máli slímhúð jókst í AU með meltingarvegi einkennum samanborið við alla hópa.

Aftur á móti minnkaði stjórnun cýtókínið IL-10 í AU með meltingarvegi einkennum og gæti bent til ójafnvægis í bólgueyðandi/stýrandi merkjum. Þessar upplýsingar benda til þess að börn með AU og GI einkenni séu með ójafnvægi í ónæmissvörun sem sést í blóðvökva cýtókíngildum þeirra. Niðurstaða sem gæti bent til hugsanlegra lækninga- og/eða eftirlitsaðferða fyrir meltingarfæravandamál í AU.

Leitarorð:
einhverfa; ASD; ónæmur; bólga; meltingarvegi; fylgikvilla; cýtókín; reglugerð; geðklofi; umburðarlyndi; meðfædd ónæmi; aðlagandi ónæmi; ónæmi slímhúðar.

1. Inngangur

Taugaþroskaraskanir, eins og einhverfurófsröskun (AU), eru ört vaxandi um allan heim. Orsök þeirra er að mestu óþekkt en, í flestum tilfellum, líklega vegna samsetningar erfða- og umhverfisþátta. Greining á AU er eins og er bundin við hegðunareiginleika, þar með talið endurtekna og staðalmynda hegðun og skerðingu í samskiptum og félagslegum samskiptum.

Hins vegar þjást margir einstaklingar með AU einnig af einum eða fleiri læknisfræðilegum fylgisjúkdómum, þar á meðal truflun á meltingarvegi (GI) [1-7] GI einkenni í einhverfu hafa verið tilkynnt í 80 ár [8], þar sem óregluleg einkenni hægðatregða og niðurgangur eru. algengasta [9–11].

Í stóru hóprannsókninni okkar á 1000 þátttakendum voru börn með AU 6-8 sinnum líklegri til að þjást af meltingarfæraeinkennum samanborið við aldurssamsvörun börn sem þroskuðust; auk þess tengdust meltingarvegi einkenni lakari hegðunarmati [12].

Þrátt fyrir tíðar tilkynningar um truflun á meltingarvegi í AU skortir tilvísun til sérhæfðra heilsugæslustöðva eða viðeigandi meðferð á meltingarfæraeinkennum. Skortur á rannsóknum á líffræðilegum undirskriftum í AU fylgisjúkdómum hefur einnig hindrað aðferðir sem gætu hjálpað til við að draga úr meltingarvegi.
Ónæmisfrumur í slímhúð eru um það bil 70 prósent af ónæmisfrumum líkamans og truflun á starfsemi þessara frumna getur haft slæmar afleiðingar fyrir virkni meltingarvegar. Breytt ónæmi í slímhúð getur haft áhrif á starfsemi þekjuþekju hýsilsins, fjölbreytileika commensal baktería í þörmum og garnataugakerfið [3].

Margar skýrslur hafa lýst óeðlilegum óeðlilegum óeðlilegum áhrifum í AU, þar með talið breytingum á ónæmiserfðafræði, skekktri frumumyndun, breyttri starfsemi T-frumna og aukin meðfædd ónæmissvörun [13-16]. Þar að auki hefur verið greint frá ónæmisvirkjun hjá næstum tveimur þriðju hluta barna með AU og tengist það alvarlegri hegðun [13]. Endoscopic greiningar á AU börnum með meltingarvegi einkenni hafa leitt í ljós tilvist lúmskur, dreifður bólgu í þarmavegi (skoðað í [1,4]).

Hins vegar hefur verið deilt um nákvæmlega eðli þessarar bólgu og er ekki ljóst eins og er. Vísbendingar um vefjafræði, ónæmisvefjafræði og frumuflæðismælingar hafa stöðugt sýnt íferð ónæmisfrumna í þörmum eins og eitilfrumum, einfrumum, náttúrulegum drápsfrumum (NK) og eósínófílum inn í veggi meltingarvegar hjá börnum með AU, samanborið við venjulega þroska ( TD) börn með meltingarvegi einkenni [9,17-21].

Þessar skýrslur hafa sýnt að hjá börnum með AU og GI einkenni eru aukin íferð ónæmisfrumna í ristli, ristil, skeifugörn og maga. Ennfremur sýna íferðareitilfrumurnar áberandi bólgueyðandi svipgerð—með aukinni CD3 plús IL-6 plús frumum, CD3 plús TNF plús frumum og skertum stýrandi CD3 plús IL-10 plús frumum hjá börnum með AU og GI einkenni samanborið við viðmið [17,18].

Samanburður á frumu frumu frumumyndun fyrir og eftir ónæmisáskorun í útlægum T frumum leiddi í ljós svipaða snið með aukinni framleiðslu bólgueyðandi frumuefna en minnkað stjórnun hjá börnum með AU sem höfðu GI einkenni samanborið við viðmið [22].

Örvuð cýtókínsvörun sem sást hjá börnum með AU og GI einkenni voru frábrugðin börnum með AU án GI einkenna sem og TD stjórnunarbörnum og benda til þess að cýtókínframleiðsla í kjölfar ónæmisáfalls gæti verið einstök hjá börnum með AU og GI einkenni.

Ónæmissniðin hjá börnum með AU og GI einkenni voru einnig frábrugðin börnum með staðfesta þarmabólgu (IBD), eins og Crohns sjúkdóm, glútenóþol og sáraristilbólgu [9,17-19,21]. Svipaðar niðurstöður um aukna bólgueyðandi cýtókínframleiðslu eftir örvun, IL-1, IL-6 og TNF, hafa verið sýndar hjá börnum sem hafa AU og fæðunæmi samanborið við samanburðarhópa [23,24].

Leit að líffræðilegum merkjum eða lífmerkjum í einhverfu hefur hingað til verið vanrannsakað svæði. Að öllum líkindum mun stærsta gagnsemi líffræðilegra undirskrifta í samhengi við AU ekki vera við að ákvarða kjarnaeinkenni heldur í tengdum fylgisjúkdómum. Þessir fylgisjúkdómar hafa oft mikil áhrif á alvarleika einkenna eða tengda hegðun eins og svefn, pirring, árásargirni eða kvíða [3].

Sum plasma cýtókín eða ónæmismiðlarar hafa verið rannsökuð fyrir möguleika þeirra sem lífmerki, aðallega í samhengi við alvarleika AU [14,25-27]. Plasmamerki sem gætu hjálpað til við að bera kennsl á eða rekja feril meltingarfæraeinkenna í AU vantar. Í þessari rannsókn er leitast við að einkenna frumufrumusnið í plasma hjá börnum með AU með eða án meltingarfæraeinkenna úr slembiúrtaki úr þýðisbundinni tilviksviðmiðunarrannsókn.

2. Efni og aðferðir

Þessi rannsókn náði til 79 þátttakenda sem voru skráðir í CHARGE (Childhood Autism Risk from Genetics and Environment) rannsókn, sem er í gangi þýðisbundin tilvikssamanburðarrannsókn [28]. Í stuttu máli voru þátttakendur í CHARGE rannsókninni valdir úr 2 lögum: einhverfuröskun (AU) og almennt þýði sem þróaði venjulega (TD) viðmið.

Hæf börn voru á aldrinum 24 til 60 mánaða, fædd í Kaliforníu, bjuggu með að minnsta kosti einu kynforeldri sem talaði ensku eða spænsku og bjuggu á upptökusvæðum tilgreinds lista yfir svæðismiðstöðvar í Kaliforníu. Börn með AU voru auðkennd í gegnum svæðismiðstöðvar, veitendur / heilsugæslustöðvar, sjálfstilvísanir og almenna útrás.

TD börn voru auðkennd úr ríkisfæðingarskrám og lagskipt slembiúrtak var myndað með tíðnisamsvörun við áætluð dreifingu AU tilfella á aldri, kyni og upptökusvæði. Börn með meiriháttar hreyfi- og skynjunarskerðingu (td blindu og heyrnarleysi) sem myndi útiloka gilt þroskamat voru útilokuð.

CHARGE rannsóknareglurnar voru samþykktar af endurskoðunarnefndum stofnana við háskólann í Kaliforníu í Davis og nefnd Kaliforníuríkis um verndun manna. Skriflegt upplýst samþykki var fengið fyrir þátttöku.

Fyrir þessa rannsókn voru 40 tilfelli með AU og 40 TD viðmiðunarhópa valdir af handahófi úr hópi þátttakenda í CHARGE rannsókninni sem skráðir voru á milli apríl 2003 og apríl 2008, gáfu blóðsýni, fylltu út spurningalista um GI sögu og höfðu staðfesta AU eða TD greiningu. Tilfelli og viðmiðunarreglur voru pössuð eftir aldri við blóðtöku (með 3-mánaða millibili) og hvort þeir hafi haft tíð meltingarvegseinkenni um óreglulegar hægðir eða ekki (skilgreint sem tíður niðurgangur eða hægðatregða á síðustu 3 mánuðum).

Upphaflegt markmið rannsóknarinnar var að hafa 20 tilfelli og 20 viðmiðunarhópa með tíð meltingarvegseinkenni auk 20 tilfella og 20 viðmiðunarhópa án tíðra meltingarfæraeinkenna. Vegna þess að á þeim tíma sem rannsóknin var gerð, voru aðeins 9 viðmiðunarhópar í allri CHARGE rannsókninni með tíð meltingarfæraeinkenni, tilfelli og samanburðarhópar voru aðeins samsvörun eftir aldri við blóðtöku.

Lokaúrtak 80 barna samanstóð af 20 tilfellum (meðalaldur 41,7 ± 9,6 mánuðir; 16 karlar) og 9 viðmiðunarhópum (meðalaldur 41,6 ± 9,1 mánuðir; 7 karlar) með tíð meltingarfæraeinkenni og 20 tilfellum (meðalaldur 41,9 ± 9,3 mánuðir; 19 karlar) og 31 viðmiðunarhópur (meðalaldur 42,2 ± 9,3 mánuðir; 26 karlar) án tíðra meltingarfæraeinkenna. Þar sem þetta var slembiúrtak útilokuðum við ekki á grundvelli lyfjanotkunar.

Fá börn tóku lyf við blóðtöku: þar á meðal voru sýklalyf eins og acyclovir, ketókónazól (2 tilfelli með meltingarfæraeinkennum og 2 tilfelli og 2 viðmiðunarhópar án meltingarfæraeinkenna), sterar eins og astmainnöndunartæki, Nasonex (2 tilfelli og 1 tilfelli). stjórnun með meltingarvegareinkennum og 1 tilfelli og 1 stjórn án meltingarfæraeinkenna), og meltingarfæratengd lyf eins og Miralax, Nexium, magnesíumjólk (2 tilfelli og 3 viðmið með meltingarfæraeinkennum).

Enginn þátttakenda tók geðrofslyf. Við fundum engin lyfjaáhrif á gögnin þegar þau voru greind saman (meðhöndluð á móti ómeðhöndluð, innan hópa), eða fyrir einstök lyf.

Einhverfugreining var staðfest með því að nota gullstaðall mat: Autism Diagnostic Interview-Revised (ADI-R; [29]) og Autism Diagnostic Observation Schedule (ADOS; [30]). Viðmið var skimað fyrir AU með því að nota spurningalistann um félagsleg samskipti (SCQ; [31]) og enginn fékk hærri einkunn (SCQ Stærri en eða jafnt og 15).
Mullen Scales of Early Learning (MSEL; [32]) og Vineland Adaptive Behaviour Scales (VABS; [33]) voru gefnir á tilvik og stýringar til að ákvarða vitræna og aðlögunarþroska, í sömu röð. Dæmigert þróun hjá viðmiðunarhópum var skilgreindur með samsettum skorum meira en eða jafnt og 70 á báðum matum og engin fyrri greining á þroskahömlun.

Allir læknar við UC Davis MIND (Medical Investigation of Neurodevelopmental Disorders) stofnuninni höfðu náð áreiðanleika rannsókna á þroskamati sem þeir gáfu (ADI-R, ADOS, MSEL og VABS). Tvítyngt rannsóknarstarfsfólk var til staðar til að gefa upplýst samþykki og öll tæki/spurningalistar á spænsku.

2.1. Blóðsöfnun og frumugreining
Jaðarblóði var safnað frá hverjum einstaklingi í sýru-sítratdextrósa Vacutainers (BD Biosciences; San Jose, CA, Bandaríkjunum). Blóð var skilið í skilvindu við 2100 snúninga á mínútu í 10 mínútur, plasma var síðan safnað og geymt við -80 ◦C fyrir greiningu á cýtókínum. Styrkur cýtókíns í blóðvökva þátttakenda var ákvarðaður með margföldunarperlum ónæmisgreiningu (Millipore, Billerica, MA, Bandaríkjunum). Sýni og viðmiðunarstýringar voru keyrðar í samræmi við samskiptareglur framleiðanda.

Í stuttu máli var 25 µL af plasmasýni ræktað með mótefnatengdum flúrperlum, síðan þvegið og ræktað með bíótínýleruðum greiningarmótefnum fylgt eftir með streptavidín-fykóerýtríni. Perlurnar voru síðan greindar með því að nota Luminex™ 100 fjöðrunarkerfi sem byggir á flæði (Bio-Plex 200; BioRad Laboratories, Inc., Hercules, CA, Bandaríkjunum). Staðlaðar ferlar voru búnar til með Bio-plex Manager hugbúnaði til að ákvarða óþekktan sýnistyrk. Öll sýni og viðmiðunarsýtókín voru unnin í samræmi við tilmæli framleiðanda og magn cýtókína og kemókíns var metið með Luminex™ multiplex greiningu.

Gildi sýna eru gefin upp sem pg/ml. Cýtókínin/kemókínin sem greind voru voru interleukin (IL){{0}}, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL{ {5}}, IL-6, IL-7, IL-8, IL-10, IL{{10}} (p4{{48} }), IL-12 (p7{{50}}), IL-13, IL-15, IL-17, kyrninga-átfrumna nýlenduörvandi þáttur (GM-CSF), granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), interferon-gamma (IFN), IFN- 2, æxlisdrepsþáttur-alfa (TNF), TNF, eotaxin, monocyte chemotactic prótein (MCP) )-1, átfrumnabólguprótein (MIP)-1, MIP-1 og 10 kDa interferon-gamma-framkallað prótein (IP-10), lágmarksgreiningarmörk þessara frumuefna/kemókína voru 2,4, 0.3, 1.2, 1.3, 2.2, {{60}}.2, 1.1, 2.4, 0.9, 0.3, 34.9, 0.8, 1.0, 0.8, 0.4, 5.0, 0.9, 0.5, 0.4, 1.5, 0.9, 5., 1.8, 5, 10 ,7 og 3,6 pg/ml, í sömu röð.

Styrkur sem fékkst undir greiningarmörkum (LOD) aðferðarinnar var reiknaður sem hálf greiningarmörk (LOD/2) fyrir tölfræðilegan samanburð. Gildi sem fengust við lestur sýna sem fóru yfir efri mörk næmniaðferðarinnar voru þynnt frekar út og cýtókínstyrkur reiknaður út í samræmi við það.

Afbrigði af cýtókíngildum innan og milli plötum/greininga, með því að nota dæmigerð sýni sem keyrð voru á öllum plötum, voru minni en 5 prósent. Plasma deilingar höfðu ekki gengist undir neina fyrri frystingar/þíðingarlotu. Cýtókíngreinandinn var blindaður á tilfelli eða viðmiðunarstöðu hvers sýnis.

For more information:1950477648nn@gmail.com