Forspármikilvægi nýrnamergstengdrar prótein 8 tjáningar hjá sjúklingum með offitu eða tegund 2 sykursýkistengda nýrnasjúkdóma

Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Takashige Kuwabara¹, Kiyoshi Mori1,^2*, Masato Kasahara^1,3, Hideki Yokoi¹, Hirotaka Imamaki¹, Akira Ishii¹, Kenichi Koga¹, Akira Sugawara⁴, Shinji Yasuno³, Kenji Ueshima³, Takashi Morikawa⁵, Yoshio Konishi⁵, Masahito Imanishi⁵, Akira Nishiyama⁶, Kazuwa Nakao^1,2, Masashi Mukoyama¹

¹Læknadeild og klínísk vísindi, Kyoto University Graduate School of Medicine, Kyoto, Japan,

²Medical Innovation Center, Kyoto University Graduate School of Medicine, Kyoto, Japan,

³Deild EBM Research, Institute for Advancement of Clinical and Translational Science, Kyoto háskólasjúkrahúsið, Kyoto, Japan,

⁴Nýrnalækningadeild, Rauða kross sjúkrahúsinu í Osaka, Osaka, Japan,

5 deild nýrnalækninga og háþrýstings, Osaka City General Hospital, Osaka, Japan,

6 lyfjafræðideild, læknadeild Kagawa háskólans, Kagawa, Japan

Ágrip

Bakgrunnur og markmið: Við höfum greint frá því að toll-like receptor 4 (TLR4) og einn af innrænum bindlum hans, myeloid-tengt prótein 8 (MRP8 eða S100A8), gegna mikilvægu hlutverki í framgangi nýrnakvilla með sykursýki í músum. Markmið þessarar rannsóknar var að meta mikilvægi þessnýruMRP8 tjáning hjá sjúklingum meðoffita- eða sykursýki af tegund 2nýrnasjúkdóma. Aðferðir: Hjá sykursjúkum, offitusjúklingum eða viðmiðunarþegum var MRP8 mRNA og prótein tjáning í nýrnasýnum ákvarðað með rauntíma RT-PCR og ónæmisvefjafræði (n=28 og 65, í sömu röð) og tengsl þeirra við grunnlínu og forspárbreytur voru greindar. Áhrif MRP8 á tjáningu bólgueyðandi gena voru skoðuð með átfrumum. Niðurstöður:NýraMRP8 gena og prótein tjáning var hækkuð í offitusjúklingum eða sykursýkishópum samanborið við samanburðarhópinn. Meðal allra þátttakenda, með einbreytilegri línulegri aðhvarfsgreiningu, höfðu gaukla MRP8-jákvæð frumufjöldi og tubulointerstitial MRP8-jákvætt svæði við upphafsgildi hvort um sig fylgni ekki aðeins við ýmsa þekkta áhættuþætti fyrir nýrnakvilla af völdum sykursýki (ss. eins og slagbilsþrýstingur, próteinmigu og kreatínín í sermi) en einnig með umfangi glomerulosclerosis og tubulointerstitial fibrosis. Óháðir þættir sem spáðu fyrir um próteinmagn í þvagi ári síðar voru skoðaðir með fjölþáttagreiningu og þeir innihéldu gaukla MRP8-jákvæð frumufjölda (b=0.59, P,0.001), próteinmigu (b=0.37, P=0.002) og slagbilsþrýstingur (b=0.21, P=0.04) við grunnlínu, eftir leiðréttingu fyrir þekktri áhættu þættir. MRP8-próteintjáning sást í CD68-jákvæðum átfrumum og rýrnunarpíplum. Í ræktuðum átfrumum músa kveikti MRP8 prótein-framkallað bólgueyðandi frumutjáning einnig sjálfvirka örvun MRP8 á TLR4-háðan hátt.

Ályktanir: Glomerular MRP8 tjáning virðist tengjast framgangi próteinmigu hjá offitusjúklingum eða sykursýki af tegund 2, hugsanlega með því að framkalla bólgubreytingar í átfrumum með TLR4 merkjum.

Áhrif cistanche: meðhöndlun nýrnasjúkdóma

Kynning

Langvinn bólga gegnir mikilvægu hlutverki í meingerð sykursýki eðaoffitaog hjarta- og æðakvilla [1]. Þátttaka meðfæddra ónæmisviðtaka og innrænna bindla í ferli langvinnrar bólgu hefur verið bendluð. Myeloid-tengt prótein 8 (MRP8, einnig þekkt sem S100A8 eða calgranulin A) var upphaflega skilgreint sem umfrymiskalsíumbindandi prótein í daufkyrningum og einfruma [2] og hefur orðið almennt viðurkennt sem öflugur innræn bindill fyrir toll-like viðtaka 4 (TLR4) ) í ýmsum sjúkdómum þar á meðal septískum losti, æða- og sjálfsofnæmissjúkdómum [3,4,5]. Við höfum nýlega lagt til að MRP8/TLR4 merkjasendingar gegni mikilvægu hlutverki í framgangi nýrnakvilla af völdum blóðfituhækkunar [6]. Glomerular átfrumur og safnrásarfrumur eru helstu uppsprettur MRP8 í múslíkönum af sykursýkisnýrnakvilla [6] og nýrnatrefjun [7], í sömu röð. Plasmaþéttni MRP8, sem venjulega myndar heterodimeric complex með bindifélaga MRP14 í blóðrásinni, er aukin hjá offitusjúklingum [8,9]. Hins vegar hafa engar skýrslur verið gerðar um að rannsaka nýrnatjáningu MRP8 hjá sjúklingum með offitu eðategund2 sykursýkiog tengsl þess við nýrnahorfur.

Markmið þessarar rannsóknar var að ákvarða mRNA og prótein tjáningu magn MRP8 ínýrujapanskra sjúklinga með nýrnakvilla með sykursýki (DN),offita-tengd glomerulopathy(ORG), minimal change nephrotic syndrome (MCNS) eða minniháttar glomerular abnormality (MGA), sem öll voru greind með nýrnavefsýni, og til að meta hvort MRP8 nýrnatjáning geti spáð fyrir um nýrnaútkomu.

Cistanche getur bætt nýrnastarfsemi

Efni og aðferðir

Siðferðisyfirlýsing

Rannsóknin á mönnum var framkvæmd í samræmi við meginreglurnar sem settar eru fram í Helsinki-yfirlýsingunni og var samþykkt af siðanefndum um mannrannsóknir við framhaldslæknadeild Kyoto University og Osaka City General Hospital, í sömu röð. Allir þátttakendur gáfu skriflegt upplýst samþykki. Dýrarannsóknarreglurnar voru samþykktar af dýrarannsóknanefnd Kyoto háskólans í læknadeild (leyfisnúmer: Med Kyo 13318). Allar dýraaðgerðir voru gerðar undir natríumpentóbarbital svæfingu og allt reynt til að lágmarka þjáningar.

Námsgreinar

Próteinþvagsjúklingar meðoffitaeða sykursýki af tegund 2 sem gengust undir vefjasýni um nýrna voru skráðir í þessa rannsókn. Sjúklingar með smitsjúkdóm, krabbamein, lifrarsjúkdóm eða kollagensjúkdóm voru útilokaðir. Próteinmiga var skilgreint sem prótein í þvagi sem var meira en 0,5 g/g kreatínín eða albúmín í þvagi sem var meira en 300 mg/g kreatínín í að minnsta kosti tveimur mælingum í röð.Offitavar skilgreindur sem líkamsþyngdarstuðull (BMI) hærri en 25.0 (kg/m²). Sykursýki af tegund 2 var greind í samræmi við viðmið Alþjóðaheilbrigðismálastofnunarinnar. Lífefnafræðilegar mælingar við innlögn í vefjasýni um nýrna voru notaðar sem grunneinkenni fyrir þverskurðargreiningu. Áætlaður gauklasíunarhraði (eGFR) var reiknaður út með því að nota einfaldaða spájöfnu sem japanska nýrnalæknafélagið lagði til: eGFR (ml/mín/1,73 m)²)=1946 [aldur (ár)]20.287 6 [kreatínín í sermi (mg perdl)]21.094 60.739 (fyrir konur), sem er fullgilt staðbundin breyting á MDRD [ 10]. Styrkur kreatíníns í sermi var mældur með ensímaðferð.

Fyrir ónæmisvefjaefnafræði voru 65 japanskir ​​sjúklingar sem gengust undir nýrnavefsýni á læknadeild og klínískum vísindum á Kyoto háskólasjúkrahúsinu á árunum 2000 til 2011 greindir. Sýndargreiningar allra sjúklinga sem hafa sannað lífsýni á þessu tímabili eru taldar upp í töflu S1 í skrá S1. Viðfangsefnin sem voru skoðuð í þessari vinnu voru meðal annars DN (n=19), ORG (n=10) og einstaklingar sem ekki voru of feitir, ekki sykursýkissjúklingar sem voru greindir sem MGA(n=19) eða MCNS (n=17). Sum tilvik í þessum flokkum voru útilokuð vegna þess að afgangssýni sem til voru innihéldu minna en 10 glomeruli. Skilgreining á DN samanstóð af (1) meira en 5 árum eftir upphaf sykursýki, (2) tilvist ör- eða makró-albúmínmíu, (3) samhæfðar vefjameinafræðilegar breytingar við DN eins og þykknun gauklagrunnhimnu, þensla í hnút, sclerosis (Kimmelstiel-Wilson hnúðar) og/eða arteriolar hyalinosis, og (4) útilokun annarra orsaka fyrir nýrnasjúkdómum [11]. ORG var formfræðilega skilgreind sem focal segmental glomerulosclerosis og/eða gauklastækkun hjá einstaklingum með bæðioffitaog próteinmigu, en skilgreiningum þeirra var lýst hér að ofan [12,13].

Fyrir mRNA tjáningargreiningu voru lággæða sýni, þar sem 18S ríbósómal RNA (rRNA) gildi voru lægri en greiningarnæmismörk með rauntíma RT-PCR, útilokuð. Þátttakendur sem voru skráðir samanstóð af 22 sykursýkissjúklingum af tegund 2 sem gengust undir nýrnavefsýni á Osaka City General Hospital á árunum 2000 til 2010, og 6 einstaklingar sem ekki voru með sykursýki, sem voru með vefjasýni sannað MGA.

Töflur 1 og 2 taka saman grunnlínu klíníska eiginleika sjúklinganna sem voru skoðaðir með ónæmisvefjaefnafræðilegri greiningu eða genatjáningargreiningu, í sömu röð. Fyrir ljóssmásjárskoðun voru vefjasýnin unnin samkvæmt stöðluðum aðferðum. Hlutar voru litaðir með hematoxylin-eosin, periodic acid-Schiff, periodic-sýru metenamín silfri eða Masson trichrome (Mynd S1). Hlutföll fjölda glomeruli með alþjóðlegri mænusigg meðal heildar glomeruli og hlutfallslegra svæða tubulointerstitial fibrosis voru metin sjálfstætt af tveimur meinafræðingum sem ekki vissu um greiningu og klínísk gögn.

Áhrif cistanche: meðhöndlun nýrnasjúkdóma

Skilgreining á niðurstöðum nýrna

Eftirfarandi tveir forspárvísar voru skoðaðir með línulegri aðhvarfsgreiningu og logistic aðhvarfsgreiningu, í sömu röð: (1) umfang próteinmigu mæld einu ári eftir vefjasýni og (2) nýrnatilvik skilgreint sem árleg aukning á kreatíníni í sermi um 0,50 prósent frá grunnlínu eða upphaf langvarandi skilunar.

Ónæmisvefjaefnafræði

Ónæmisvefjaefnafræði MRP8 og CD68 var framkvæmd með því að notanýruhlutar (þykkt 4 mm) festir með 4 prósent jafnaðri paraformaldehýði. Eftir mótefnavaka endurheimt með sítratbuffi, voru nýrnasneiðar ræktaðir með 10 prósenta geitasermi, fylgt eftir með MRP8 frá músum (1:100; BMA líflæknisfræði, Augst, Sviss)[14] eða CD68 mótefnum frá músum (1:50). ; DAKO, Ely, Bretlandi), í sömu röð. Aðalmótefni voru sýnd með piparrótarperoxidasa-tengdu aukamótefni og 3,3-díamínóbensidín tetrahýdróklóríði (Dako USA, Carpinteria, CA). Kjarnar voru mótlitaðir með hematoxýlíni. MRP8-jákvæðar frumur voru taldar í meira en 10 glomeruli og MRP8-jákvæð svæði í tubulointerstitium var mæld magnbundið til að fá meðaltal fyrir hvern einstakling með því að nota MetaMorph 7.5 hugbúnaðinn (Molecular Devices, Downingtown, PA, Bandaríkjunum ). Samstaða CD68- og MRP8-jákvæðra frumna var metin með raðköflum. Það var hvorki MRP8 né CD68 merki í neikvæðum viðmiðum lituðum án fyrsta mótefnis (mynd S2). Með forræktun á and-MRP8 mótefni með 20 mólum umframmagni af raðbrigða manna MRP8 próteini (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) við 4uC yfir nótt, litun minnkaði verulega, ef ekki alveg, sem styður enn frekar við sérhæfni mótefnisins (Mynd S3) .

Cistanche til að meðhöndla nýru

Mat á mRNA tjáningu

Frosinnnýruhlutar voru aðskildir í gauklavef og nonglomerulus vefi með leysirfanga ör-skurði (LM200; Olympus, Tokyo, Japan) eins og áður hefur verið lýst [15]. Heildar-RNA var dregið út með RNeasy mini kit (Qiagen, Tókýó, Japan). MRNA tjáningarstig var ákvarðað með TaqMan rauntíma PCR (Applied Biosystems, Foster City, CA, Bandaríkjunum) [16,17]. Tjáningarmagn allra gena var staðlað með 18S rRNA (innri stjórn) stigum. Sjá töflu S2 í skrá S1 fyrir grunn- og rannsakaraðir. Heilkjörnunga 18S rRNA greindist með forþróuðum TaqMan prófunarhvarfefnum (Applied Biosystems).

Tafla 1. Klínísk grunneinkenni sjúklinga í nýrnavefsýni sem voru greindir með tilliti til MRP8 próteintjáningar með ónæmisvefjafræði.

MGA: minniháttar gauklafrávik, MCNS: lágmarksbreyting nýrnaheilkenni, ORG:offita-tengd glomerulopathy, DN: sykursýki nýrnakvilli, BMI: líkamsþyngdarstuðull, BUN: blóðþvagefni köfnunarefni, CRP: C-viðbragðsprótein. Gögn eru þýðir 6 SD. *Heildarmunur á milli MGA, MCNS, ORG og DN hópa var borinn saman af ANOVA.doi:10.1371/journal.pone.0088942.t001

MRP8 meðferð átfrumna

Beinmergsættaðir átfrumur voru búnir til úr villigerð eða TLR4 knockout (KO) músum [18] á C57BL/6J erfðafræðilegum bakgrunni (Oriental BioService, Kyoto, Japan) eins og áður hefur verið lýst [6]. Í stuttu máli, eftir að rauð blóðkorn hafa verið rofin, voru beinmergsfrumur endurblandaðar í æti sem innihélt 20 prósent kálfsfóstursermi og 50 ng/ml raðbrigða átfrumna-nýlendu-örvandi þáttur úr mönnum (Peprotech, Rocky Hill, NJ, USA) og ræktaðar kl. 37uC í 5 prósent CO2 andrúmslofti. Á 7. degi voru átfrumur ræktaðir með raðbrigða mús MRP8 (Abnova, Taipei, Taívan) eða burðarefni í 4 klukkustundir. Polymyxin B (25 mg/ml, NacalaiTesque, Kyoto, Japan) var bætt við hvern brunn til að lágmarka mengun endotoxins eins og áður hefur verið lýst [3,19]. Noendotoxin greindist í hvaða styrk sem er af MRP8 sem var prófaður hér eftir ræktun með 25 mg/ml af polymyxin B með ToxinSensorChromogenic LAL Endotoxin Assay Kit (GenScript, Piscataway, NJ, Bandaríkjunum). Heildar-RNA úr frumum var dregið út með RNeasy MiniKit og mRNA tjáningarmagn interleukin-1 beta (IL-1b), æxlisdrepsþáttar-alfa (TNFa) og MRP8 var ákvarðað með TaqMan í rauntíma RT-PCR. Tjáningarmagn allra gena var staðlað með GAPDH-gildum nagdýra (innri stjórn, fyrirfram þróað TaqMan prófunarhvarfefni). Grunn- og rannsakaraðir fyrir rauntíma PCR eru skráðar í töflu S2 í skrá S1.

tölfræðigreining

Gögnin eru gefin upp sem meðaltal 6 SD, eða þýðir 695 prósent öryggisbil (CI) þegar við á. Til samanburðar á milli fjögurra hópa var notað einhliða eða tvíhliða ANOVA með Bonferroni's post-hoc greiningu og flokkaðar breytur bornar saman með x2 prófi. Notað var óparað t-próf ​​nemandans til samanburðar á milli tveggja hópa eftir því sem við á. Spearman fylgnistuðlar voru metnir til að ákvarða tengsl milli tveggja breyta. Til að kanna áhrif grunnlínu fylgibreyta sem ákvarða umfang gaukla- eða millivefs MRP8 tjáningar eða magn próteina í þvagi einu ári eftir vefjasýni, voru gerðar ein- og fjölbreytu línuleg aðhvarfsgreining. Logistic aðhvarfsgreining var notuð til að greina skýringarbreytur sem spáðu fyrir um nýrnatilvik. Öll gögn voru greind með StatView 5.0 hugbúnaði (SAS InstituteInc., Cary, NC, Bandaríkjunum). P gildi,0.05 voru talin tölfræðilega marktæk.

Áhrif cistanche: meðhöndlun nýrnasjúkdóma

Niðurstöður

Við bárum saman MRP8 prótein tjáningu stig ínýrumeðal DN, ORG, og ekki offitu, ekki sykursýki stjórna (MGA og CNS) hópa. Ónæmisvefjaefnafræðileg greining leiddi í ljós að bæði gaukla MRP8-jákvæð frumufjöldi (Mynd 1A) og tubulointerstitial MRP8-jákvæð svæði (Mynd 1B) í DN voru marktækt stærri en í öðrum hópum, þar á meðal MGA, MCNS, og ORG (bls<0.01). org="" subjects="" also="" showed="" a="" tendency="" of="" elevated="" mrp8expression="" compared="" to="" mga="" and="" mcns="" (fig.="" 1a,="" 1b).="" furthermore,="" glomerular="" mrp8="" mrna="" expression="" levels="" in="" dn="" subjects="" were="" significantly="" higher="" compared="" to="" non-dm="" control="" subjects="" (p,0.01,="" fig.="" 1c).="" in="" non-glomerulus="" tissues,="" mrp8mrna="" expression="" levels="" were="" much="" lower="" than="" those="" in="" glomeruli,="" both="" in="" non-dm="" and="" dm="" groups.="" abundant="" mrp8="" protein="" expression="" in="" the="" tubulointerstitium="" of="" dn="" cases="" was="" not="" clearly="" reflected="" into="" increased="" mrna="" expression,="" which="" may="" be="" partly="" caused="" by="" deposition="" of="" blood-derived="" proteins="" in="" the="" tubulointerstitium="" as="" discussed="" in="" the="" next="" section.="" as="" shown="" in="" representative="" photos="" (fig.="" 1d–g,="" see="" fig.="" s4="" in="" detail),="" renal="" biopsy="" samples="" from="" mga="" and="" mcns="" subjects="" showed="" few="" mrp8-positive="" cells="" in="" glomeruli="" (fig.="" 1d,="" 1e="" and="" fig.="" s4).="" in="" org="" subjects,="" somemrp8-positive="" cells="" appeared="" in="" glomeruli="" and="" tubulointerstitium(fig.="" 1f="" and="" fig.="" s4).="" in="" dn="" subjects,="" a="" marked="" increase="" of="" mrp8-expressing="" cells="" in="" glomeruli="" and="" significant="" expansion="" of="" mrp8-positive="" areas="" in="" the="" tubulointerstitium="" were="" observed="" in="" a="" focal="" manner="" (fig.="" 1g="" and="" fig.="" s4).="" of="" note,="" mrp8-positive="" cells="" were="" absent="" in="" nodular="" sclerosing="" lesions="" of="" diabetic="" glomeruli="" (fig.="" s4:dn="" case="" 2,="" 3)="" as="" described="" previously="" for="" sclerotic="" lesions="" in="" anca-associated="" glomerulonephritis="" [20].="" paired="" immunohistochemistry="" for="" cd68="" and="" mrp8="" in="" serial="" sections="" suggested="" thatmrp8="" signals="" were,="" at="" least="" in="" part,="" observed="" in="" macrophages="" expressing="" cd68="" (fig.="" 2),="" as="" we="" reported="" in="" a="" mouse="" model="" of="" diabetic="" nephropathy="" [6].="" besides,="" focally="" injured="" atrophic="" tubular="" epithelial="" cells="" also="" strongly="" expressed="" mrp8,="" which="" were="" surrounded="" by="" mrp8(+)-,="" cd68(+)-positive="" macrophages="" (fig.="" 2,="" fig="" s4:="" dn="" case="" 3-5).="" in="" the="" cases="" with="" nephrotic="" range="" proteinuria,="" mrp8="" staining="" was="" also="" observed="" along="" brush="" borders="" of="" proximal="" tubules="" both="" in="" mcns="" and="" dn="" cases="" (fig.="" s4).="" since="" the="" sample="" number="" of="" mrna="" expression="" was="" too="" small="" for="" multivariate="" analysis,="" the="" following="" analyses="" were="" performed="" using="" data="" from="" patients="" studied="" by="">

Tafla 2. Klínískir grunneinkenni sjúklinga í nýrnavefsýni sem voru greindir fyrir MRP8 mRNA tjáningu með rauntíma RT-PCR.

Samböndin millinýruMRP8 merki og klínísk grunngildi við nýrnavefsýni voru greind í þversnið (tafla 3). Með einþáttagreiningu var tjáning MRP8 próteins í gaukla og/eða millivefs meltingarvegar marktækt tengd aldri, slagbils- og þanbilsþrýstingi, próteini í þvagi, sermisþéttni kreatíníns, BUN og HDL kólesteróls, eGFR, og umfangi hnattrænnar glomerulosclerosis og tubulointerstitial fibrosis. Þessar breytur voru skoðaðar frekar með fjölþáttagreiningu eftir að þanbilsblóðþrýstingur, eGFR og BUN voru útilokaðir vegna samlínu. Hlutfall tubulointerstitial fibrosis var óháð fylgni við glomerularMRP8 merki (b=0.62, leiðrétt P=0.02) og tubulointerstitialMRP8 merki (b=0.85, leiðrétt P ,0,001), í sömu röð. Að auki voru MRP8 merki milli millivefs og millivefs einnig óháð óháð fylgni við grunnlínu próteinmigu (b=0.20, stillt P=0.01). Dreifðar greiningar á milli MRP8 merkja í gaukla eða millivefja og klínískar breytur bentu til þess að MCNShópur hefði sérstakt dreifingarmynstur frá öðrum hópum, sérstaklega hvað varðar prótein í þvagi og LDL kólesteról í sermi (mynd S5A–D, S6A–D). Útilokun MCNS hóps bætti fylgni milli MRP8 merkja og próteins í þvagi eða LDL-kólesteróls í sermi (mynd S5E–F, S6E–F). Þess vegna gerðum við undirgreiningu þar sem MCNS sjúklingar voru útilokaðir og komumst að því að prótein í þvagi var óháður þáttur í tengslum við gauklaMRP8 merki með fjölþáttagreiningu (tafla 4; b=0.36, leiðrétt P=0.03 ).

Næst gerðum við línulega aðhvarfsgreiningu eða logistic aðhvarfsgreiningar til að bera kennsl á skýringarþætti sem spáðu fyrir um nýrnaárangur sem voru umfang próteinmigu ári síðar og nýrnatilvik innan árs. Þar sem góð tengsl voru á milli gaukla- og millivefsmerkja MRP8 (mynd S7; R=0.67,P,0.001), voru þessar breytur að öðrum kosti skráðar í frekari greiningar . Við metum tengsl milli grunnlínubreyta og próteins í þvagi 1 ári eftir nýrnavefsýni með margfaldri aðhvarfsgreiningu. Eins og sýnt er í töflu 5 var gaukla MRP8 merki (b=0.59, leiðrétt P,0.001) forspárþáttur fyrir umfang próteinmigu ári síðar, sem og grunnlínu slagbilsþrýstings (b {{13} }.21, leiðrétt P=0.04) og grunnlínu próteinmigu (b=0.37, leiðrétt P=0.002) voru. Þessar breytur voru óháðar öðrum þekktum áhættuþáttum nýrnakvilla vegna sykursýki, þar á meðal skerta nýrnastarfsemi (kreatínín í sermi) og umfangi alþjóðlegrar mænusiggs og millivefstrefjunar í tubulointerstitial fibrosis [11,21-24]. Aftur á móti var MRP8 merki (b=0.34, leiðrétt P=0.09) ekki sjálfstæður forspárþáttur fyrir próteinmagn í þvagi ári síðar. Nýrnatilvik komu fram hjá 7 sjúklingum (6 í DN og 1 í ORG tilfellum) innan árs eftir nýrnavefsýni. Með einbreytilegri greiningu voru ekki aðeins umfang gauklakölkun og millivefjatrefja og gaukla- og millivefs MRP8 merki, heldur einnig blóðþrýstingur, skert nýrnastarfsemi og próteinmagn í þvagi við grunnlínu mikilvægir forspárþættir fyrir tilvik nýrnatilvika. Hins vegar, með fjölbreytugreiningu, voru fylgibreytur þeirra felldar niður af hver annarri (tafla S3 í skrá S1), líklega vegna mikillar fylgni meðal þessara breytu.

Að lokum skoðuðum við virkni MRP8 sem innrænan bindil fyrir TLR4 með því að nota ræktaðar átfrumur. Hjá átfrumum úr beinmerg úr villigerðum músum olli MRP8 prótein uppstýring á bólgueyðandi frumudríngenum eins og IL-1b og TNFa og kveikti einnig á sjálfvirkri örvun MRP8, á skammtaháðan hátt á milli 1{{ 15}}–1000 ng/ml. Þessi áhrif MRP8 voru bæld um það bil tvo þriðju hluta í átfrumum sem fengust úr TLR4 KO músum (P, 0,01) (mynd 3).

Mynd 1. Ónæmisvefjaefna- og mRNA greiningar fyrir MRP8 ínýruvefjasýni. Magngreining á gaukla MRP{{0}}jákvæðum frumufjölda (A) og tubulointerstitial MRP8-jákvætt svæði (B). mRNA tjáning MRP8 í gaukla og ekki gauklahlutum (C). Opnar stangir: ekki offitusjúklingar, sem eru ekki með sykursýki, sem eru MGA eða MCNS, lokaðar stangir: ORG eða DN (A–C). Fulltrúar myndir af MGA, MCNS, ORG og DN hópum (D–G). MGA: minniháttar gauklakvilla, MCNS: lágmarksbreyting nýrnaheilkenni, ORG: offitutengdur gauklakvilli, DN: nýrnakvilli af sykursýki. *P,0.01.doi:10.1371/journal.pone.0088942.g001

Umræða

Þessi rannsókn hefur sýnt fram á að MRP8 er ríkulega tjáð í gaukla og tubulointerstitium sjúklinga með DNas samanborið við ORG og ekki offitu, ekki sykursýkisstjórnun (MGAog MCNS). Ennfremur, í ORG einstaklingum, hafði MRP8 tjáningarstig tilhneigingu til að vera hærra en MGA eða MCNS einstaklinga. Í grunnlínu þversniðsrannsókn þar á meðal öllum einstaklingum, með einþátta línulegri aðhvarfsgreiningu, voru gaukla MRP8-jákvæð frumufjöldi og tubulointerstitial MRP8-jákvætt flatarmál, hvort um sig, í sömu röð, í sömu röð, ekki aðeins í tengslum við ýmsa þekkta áhættuþætti fyrir nýrnakvilla af völdum sykursýki (eins og slagbilsþrýstingur, próteinmigu og kreatínín í sermi) en einnig með umfangi glomerulosclerosis og tubulointerstitial fibrosis. Með fjölþáttagreiningu var MRP 8-jákvætt svæði fyrir tubulointerstitial MRP marktæk fylgni við próteinmigu og tubulointerstitial fibrosis. Jákvæð frumufjöldi í glomerular MRP8- var marktæk fylgni við tubulointerstitial fibrosis í frumgreiningunni og við próteinmigu í undirgreiningu sem var útilokaður MCNS hópur. Ónæmisvefjafræði benti til þess að MRP8 væri tjáð, að minnsta kosti að hluta, af átfrumum sem tjá CD68( plús ) og rýrnunarpíplum. Þessar niðurstöður vekja upp þann möguleika aðnýruMRP8 merki í glomeruli eða tubulointerstitium geta þjónað sem ný merki um nýrnakvilla af völdum sykursýki.

Mynd 2. Staðsetning CD68 og MRP8 próteintjáningar í raðhlutum af nýrnakvilla sykursýki. Tjáning á CD68(A, B) og MRP8 tjáningu (C, D) í pöruðum nýrnasýnum (A og C, eðaB og D). Örvar gefa til kynna samsetningu CD68 og MRP8 merkja.doi:10.1371/journal.pone.0088942.g002

Í forspárrannsókninni leiddi fjölþátta greining í ljós að próteinmagn í þvagi ári eftir nýrnasýni voru óháð tengd við 8-jákvæða frumufjölda gaukla MRP, prótein í þvagi og slagbilsþrýstingi við grunnlínu. Athygli vekur að gaukla MRP8 tjáning sýndi sterkasta fylgni við prótein í þvagi ári síðar (b= 0.87), jafnvel sterkari en grunnlínuprótein í þvagi (b=0.78), með einbreytugreiningu. Það er að hluta til vegna þess að tjáning MRP8 í gaukla er ekki að miklu leyti hækkuð í „góðkynja“ próteinmigu eins og þeim sem sést hjá MCNS-sjúklingum, þar sem magn próteinmigu er mjög hátt við greiningu með nýrnavefsýni en gengur venjulega til baka innan árs eftir að ónæmisbælandi meðferð er hafin. Þessar niðurstöður benda til þess að gaukla MRP8 tjáning gæti haft einstakt forspárgildi sem sjúkdómsmerki, sem ekki er hægt að skipta út með grunnlínu próteinmigu eða venjubundinni meinafræðilegri greiningu sem metur altæka gauklakölkun og tubulointerstitial fibrosis. Þar að auki veltum við því fyrir okkur að gaukla MRP8 tjáning sé ekki einfalt merki eða nærstaddur heldur virkur leikmaður í gauklaskaða eins og fjallað er um hér að neðan.

Ákvörðunarstuðullinn (R2) reiknaður með skýringarbreytum sem skráðar voru í margfeldisaðhvarfsgreiningu var 0.52* og 0.74#, í sömu röð. y, ár; BP, blóðþrýstingur; gCr, g kreatínín; T-kól, heildarkólesteról; HDL-Kól, HDL kólesteról; LDL-kól, LDL kólesteról; GS, glomerulosclerosis; TI, tubulointerstitial.doi:10.1371/journal.pone.0088942.t003

Tafla 4. Undirgreining á tengslum milli klínískra frumbreyta og MRP8 merkja, eftir að MCNS hópur hefur verið útilokaður.

Tafla 5. Margfeldi aðhvarfsgreining til að bera kennsl á þætti sem spá fyrir um próteinmagn í þvagi 1 ári eftir nýrnavefsýni

Mynd 3. Áhrif MRP8 á átfrumur sem unnin eru úr beinmerg. Beinmergsafleiddir átfrumur (BMDM) voru örvaðir með raðbrigða MRP8 úr músum í 4 klst. Villustikur gefa til kynna 95 prósent CI og tölfræðilegar greiningar voru gerðar með log-umbreyttum gildum. Tvíhliða ANOVA leiddi í ljós marktæk áhrif arfgerða, MRP8 styrks og víxlverkun þeirra á tjáningu allra 3 gena (P,0.001 fyrir allan samanburð). n=4. WT, villigerð; KO, rothögg; IL-1b, interleukin 1 beta; TNFa, æxlisdrep þáttur-alfa. *P,0,01 meðal mismunandi styrkleika, #P,0,01 meðal arfgerða.doi:10.1371/journal.pone.0088942.g003

Í annarri tilraun langtímarannsóknar tókst ekki að finna út neina óháða spá fyrir nýrnatilvik innan árs. Við veltum því fyrir okkur að þetta sé að hluta til vegna þess að Tjáning milli millivefs og MRP8 í millifrumum og bandvefsbólga í millivefsblöðru voru tveir öflugir spáþættir fyrir nýrnatilvik í einþáttagreiningu en mikilvægi þeirra var hætt við hvort annað í fjölþáttagreiningu. Þessar tvær breytur sýndu sterka fylgni (R=0.68, P,0.001) (Mynd S8), sem bendir til þess að þessar tvær breytur gætu jafngilt því að spá fyrir um nýrnatilvik. Reyndar, millivefs MRP8 tjáning sýndi nokkuð svipað mynstur og millivefs bandvefsvefs sem metin var með Masson þríkróm litun. Magn millivefs MRP8 veltur að miklu leyti á jákvæðum merkjum í rýrnunarpíplum frekar en þeim í átfrumum, en eiginleiki þeirra er ólíkur gaukla MRP8 í punktaðri dreifingu. Ennfremur gæti lítið úrtak, stutt athugunartímabil og fáir einstaklingar sem fengu nýrnatilvik hafa dregið úr greiningargetu. Þar sem MRP8 tjáning í pípulaga þekjufrumum gegnir orsakahlutverki í framvindu bólgu í millifrumum í músum í músalíkani af bandvefsmyndun í nýrum [7], verður frekari greiningar þörf til að skýra hlutverk MRP8 í millifrumum í millifrumum í DN.

Í samræmi við fyrri rannsókn okkar [6], var MRP8 mRNA uppstýrt aðallega í gauklahlutfalli manna DN einstaklinga samanborið við viðmiðunarþega með MGA. Á hinn bóginn sást MRP8 prótein tjáning ekki aðeins í gaukla heldur einnig í tubulointerstitium. Í þessu sambandi skal tekið fram að það voru tvö aðskilin mynstur MRP8-litunar í tubulointerstitium DN. Einn var ákafur og brennisteinslitun í alvarlega rýrnunarpíplum. Hin var væg litun sem dreifðist meðfram burstamörkum nærpípla, sem einnig fannst í ORG og MCNS. Síðarnefndu merkin tákna líklega MRP8 prótein sem er fengið úr blóði og endursogað af nærliggjandi píplum, sem ætti ekki að fylgja aukinniMRP8 mRNA tjáningu. Varðandi önnur prótein en MRP8, höfum við og aðrir nýlega greint frá svipuðum fyrirbærum um uppgötvun ónæmisvirkra próteina í nærpíplum af völdum endurupptöku en ekki nýrnamyndunar [25,26]. Á hinn bóginn, þar sem smá MRP8 litun var eftir í mótefnagleypniprófi, sérstaklega í gauklasvökvaskemmdum og alvarlegum örum, trefjaskemmdum í kringum rýrnunarpípla, er ekki hægt að afneita tilvist ósértækra merkja algjörlega (mynd S3).

Glomerular MRP8 merki sýndu aðallega greindarmynstur í DN einstaklingum (mynd 1, mynd S4). Þar sem bæði CD68 og MRP8 greindust með einstofna mótefnum músa, var staðsetning þessara sameinda metin með raðskurðum, ekki með tvöföldum ónæmislitun. Litunarmynstur MRP8 samrýmdist þeim sem voru í öðrum bólgusjúkdómum í nýrnastarfsemi, þar á meðal IgAnephritis [27], himnufjölgunarheklahnoðrabólgu [14] og ANCA-tengdri glomerulonephritis [20], þar sem átfrumur var stungið upp á sem aðal uppspretta MRP8, eins og við greint frá í nagdýralíkan [6]. Að auki mætti ​​líta á daufkyrninga sem aðra uppsprettu MRP8 sem hefur áhrif á fylgikvilla í æðum [28]. Eins og er erum við að rannsaka sameindakerfið hvers vegna MRP8 er aðallega uppstýrt í mergfrumur sem síast inn í glomeruli. In vitro rannsókn leiddi í ljós að MRP8 framkallaði bólgueyðandi cýtókínatjáningu og efldi einnig tjáningu MRP8 sjálfs í átfrumum á TLR4-háðan hátt. Að auki voru MRP8-jákvæðar frumur fjarverandi í hnúta mænuskemmdum, sem bendir til þess að gaukla MRP8 gæti endurspeglað áframhaldandi gauklaskemmdir [20]. Mikilvægt er að umfangsmikil rannsókn á mönnum greindi frá því að tjáning MRP8 gena í einkjarna blóðfrumum sjúklinga með sykursýki af tegund 1 sé marktækt hækkuð hjá einstaklingum með fylgikvilla sykursýki, þar með talið nýrnakvilla [29].

Þar sem hömlun á renín-angíótensín kerfinu (RAS) er mikilvægur þáttur í niðurstöðum nýrna, skoðuðum við áhrif RAS blokkunar ánýruMRP8 tjáning. Við fundum engan marktækan mun á tjáningu MRP8 mRNA í nýrum milli DN sjúklinga sem voru meðhöndlaðir með eða án RAS blokkun (mynd S9), líklega vegna þess að tilfelli sem voru meðhöndluð með RAS blokkun höfðu tilhneigingu til að vera með alvarlegri háþrýsting og próteinmigu en tilfelli án RAS blokkunar

Hjá offitu mönnum og músum getur aukið plasma MRP8/14complex endurspeglað að vissu markioffitaog eiga uppruna sinn í fitufrumum sem og hvítfrumum [8,9]. ORG tilfellin okkar voru með væga litun á MRP8 í nærliggjandi píplum, sem bendir til aukinnar plasmaþéttni MRP8. Aftur á móti var engin marktæk fylgni á milli tubulointerstitial MRP8 tjáningar og líkamsþyngdarstuðuls (mynd S6G). Þess vegna er staðbundin MRP8 tjáning ínýrugetur þjónað betur sem merki um nýrnaskaða frekar en fyriroffita[8,9].

Cistanche til að bæta nýrnastarfsemi

Rannsókn okkar hefur nokkrar takmarkanir. Úrtaksfjöldi hvers hóps sem rannsakaður var var lítill. Ólíkir einstaklingar voru skráðir í mRNA og ónæmisvefjaefnagreiningar. Þar sem við greindum aðeins sjúklinga sem gengust undir nýrnavefsýni gæti samsetning sjúklinga sem eru rannsökuð hér ekki endurspegla þá sem eru almennir sjúklingar með sykursýki af tegund 2 eða almennt langvinnir.nýrusjúkdóma einstaklinga. Þrátt fyrir að aldur hafi ekki verið haldið sem sjálfstæður þáttur sem tengist MRP8 merkjum í gögnum okkar (tafla 3), er vitað að öldrun tengist langvarandi bólgu [30]. Það er ekki hægt að hunsa áhrif aldurs algjörlega. Þrátt fyrir að flest MRP8 merki töpuðust í mótefnagleypniprófinu, voru nokkur jákvæð merki eftir, sem gætu stafað af ósértækri bindingu fyrsta mótefnisins. Eins og fjallað er um hér að ofan hjálpar rannsókn á nýrna-MRP8-tjáningu með nýrnavefsýni okkur að skilja meinalífeðlisfræði og horfur langvinnra nýrnasjúkdóma, sérstaklega tengdum viðoffitaog sykursýki, en hefur ókosti fyrir venjubundna og endurtekna notkun á göngudeildum

Í stuttu máli bendir þessi rannsókn á að tjáning MRP8 ínýruendurspeglar núverandi meinafræðilega stöðu og spáir einnig fyrir um nýrnaárangur hjá sjúklingum meðoffitaeðasykursýki af tegund 2. Frekari rannsóknir sem rannsaka magn MRP8 í þvagi meðal offitusjúklinga eða sykursýkissjúklinga í stórum stíl kann að vera réttlætanlegt

Stuðningsupplýsingar

Mynd S1 Fullkomnar myndir sem sýna hluta úr nýrnavefsýni af sjúklingi með DN litaðan með (A) periodic acid Schiff, (B) periodic-sýru metenamín silfri eða (C) Masson tríkróm. Hlutfall fjölda glomeruli með alþjóðlegri mænusigg (örvar) meðal heildar glomeruli og hlutfallslegs svæðis tubulointerstitial fibrosis var 33 prósent og 65 prósent, í sömu röð, hjá þessum sjúklingi. (TIFF)

Mynd S2 Ónæmisvefjaefnafræði fyrir MRP8 og CD68 prótein í DN sjúklingum. Myndir í hægri dálki sýna neikvæðar samanburðartilraunir án 1. mótefnis. (TIF)

Mynd S3 Mótefnaupptökupróf fyrir MRP8 litun.PBS: fosfat-buffuð saltvatn, rhMRP8: raðbrigða mannaMRP8.(TIF)

Mynd S4 Fulltrúar myndir af MRP8 tjáningu í MGA, MCNS, ORG og DN hópum.(TIF)

Mynd S5 Fylgni milli gaukla MRP8-jákvæðs frumufjölda og klínískra breytu. Notuð voru log-umbreytt gildi MRP8 merkja. Fylgnin voru greind með því að nota alla 4 hópa (A–D, G) eða 3 hópa að undanskildum MCNS hópnum (E, F). Opnir hringir: minniháttar gauklaafbrigðileiki (MGA), lokaðir hringir: lágmarksbreytingar nýrnaheilkenni (MCNS), opnir þríhyrningar:offita-tengd glomerulopathy (ORG), lokaðir þríhyrningar: sykursýkisnýrnakvilli (DN).(TIF)

Mynd S6 Fylgni milli 8-jákvætt svæðis MRP tubulointerstitial og klínískra breytu. Notuð voru log-umbreytt gildi MRP8 merkja. Þessi fylgni var greind með því að nota alla 4 hópana (A–D, G) eða 3 hópa að undanskildum MCNS hópnum (E, F).(TIF)

Mynd S7 Fylgni milli glomerular og tubulointerstitial MRP8 tjáningar. Log-umbreytt gildi MRP8 merkja voru notuð.(TIF)

Mynd S8 Fylgni milli tubulointerstitial MRP 8-positive area og tubulointerstitial fibrosis. Log-umbreytt gildi MRP8 merkja voru notuð.(TIF)

Mynd S9 Nýrna-mRNA tjáning MRP8 í DN sjúklingum með eða án renín-angíótensín blokkunar.NS: ekki marktæk. n=15 (Já), 6 (Nei). Meðal 22 DN tilfella voru upplýsingar um lyf ekki tiltækar hjá einum sjúklingi.(TIF)

Skrá S1 Stuðningstöflur.

Tafla S1, Meinafræðilegar greiningar allra tilvika sem gengust undir nýrnavefsýni á læknadeild og klínískum vísindadeild, Kyoto háskólasjúkrahúsinu á árunum 2000 til 2011. Tafla S2, grunn- og rannsakaraðir fyrir TaqMan rauntíma RT-PCR. Tafla S3, Logistic aðhvarfsgreining fyrir tilvik nýrnatilviks innan árs. (DOC)Þakkir Við þökkum S. Tanaka fyrir tölfræðiráðgjöf, Y. Ogawa, N.Igarashi og C. Kimura fyrir tæknilega aðstoð og A. Yamamoto og SOgino fyrir aðstoð við ritara. Framlög höfundar Hannaði og hannaði tilraunirnar: TK KM MK HY MI AN KNMM. Framkvæmdi tilraunirnar: TK HI AI KK TM YK MI AN. Greindu gögnin: TK KM MK HY AS SY KU KN MM. Framlögð hvarfefni/efni/greiningartæki: TK KM. Skrifaði blaðið: TK KMMM.

Áhrif cistanche: meðhöndlun nýrnasjúkdóma

Heimildir

1. Donath MY, Shoelson SE (2011) Sykursýki af tegund 2 sem bólgusjúkdómur.Nat Rev Immunol 11: 98–107.

2. Odink K, Cerletti N, Bruggen J, Clerc RG, Tarcsay L, et al. (1987) Tvö kalsíumbindandi prótein í íferð átfrumna í iktsýki. Nature 330: 80-82.

3. Vogl T, Tenbrock K, Ludwig S, Leukert N, Ehrhardt C, et al. (2007) Mrp8 ogMrp14 eru innrænir virkjar Toll-eins viðtaka 4, sem stuðla að banvænu losti af völdum endotoxíns. Nat Med 13: 1042–1049.

4. Croce K, Gao H, Wang Y, Mooroka T, Sakuma M, o.fl. (2009) Myeloid-tengt prótein-8/14 er mikilvægt fyrir líffræðilega svörun við æðaskaða. Circulation 120: 427–436.

5. Loser K, Vogl T, Voskort M, Lueken A, Kupas V, et al. (2010) Toll-eins viðtaka 4 bindlar Mrp8 og Mrp14 eru mikilvægir í þróun sjálfvirkra CD8 plús T frumna. Nat Med 16: 713–717.

6. Kuwabara T, Mori K, Mukoyama M, Kasahara M, Yokoi H, o.fl. (2012) Versnun nýrnakvilla með sykursýki vegna blóðfituhækkunar er miðlað af Toll-like viðtaka 4 í músum. Diabetologia 55: 2256-2266.

7. Fujiu K, Manabe I, Nagai R (2011) Þekjufrumur sem safna nýrnarásum stjórna bólgu í millifrumnaskemmdum í músum. J Clin Invest 121: 3425–3441.

8. Sekimoto R, Kishida K, Nakatsuji H, Nakagawa T, Funahashi T, o.fl. (2012) Mikið magn af S100A8/A9 flóknu (calprotectin) í blóðrás í japönskum karlmönnum með kviðfitu og óreglulega tjáningu á S100A8 og S100A9 í fituvef offitu músa. Biochem Biophys Res Commun 419: 782-789.

9. Mortensen OH, Nielsen AR, Erikstrup C, Plomgaard P, Fischer CP, et al. (2009) Calprotectin - ný merki umoffita. PLoS One 4: e7419.

10. Matsuo S, Imai E, Horio M, Yasuda Y, Tomita K, o.fl. (2009) Endurskoðaðar jöfnur fyrir áætlaðan GFR frá kreatíníni í sermi í Japan. Er JNýraDis53: 982–992.

11. Gross JL, de Azevedo MJ, Silveiro SP, Canani LH, Caramori ML, et al. (2005) Sykursýkisnýrnakvilli: greining, forvarnir og meðferð. Sykursýki Care 28:164–176.

12. Kambham N, Markowitz GS, Valeri AM, Lin J, D'Agati VD (2001)Offita-tengd glomerulopathy: faraldur sem er að koma upp.NýraInt 59: 1498–1509.

13. Praga M, Morales E (2006)Offita, próteinmigu og framgang nýrnabilunar.Curr Opin Nephrol Hypertens 15: 481–486.

14. Kawasaki Y, Hosoya M, Takahashi A, Isome M, Tanji M, o.fl. (2005) Mergbundin prótein 8 tjáning á átfrumum er gagnlegt forspár fyrir skerta nýrnastarfsemi hjá börnum með MPGN tegund 1. Am JNýraDis 45: 510–518.

15. Nishiyama A, Konishi Y, Ohashi N, Morikawa T, Urushihara M, o.fl. (2011) Angiotensinogen í þvagi endurspeglar virkni renín-angíótensínkerfis í nýru hjá sjúklingum með IgA nýrnakvilla. Nephrol Dial Transplant 26: 170–177.

16. Ogawa Y, Mukoyama M, Yokoi H, Kasahara M, Mori K, o.fl. (2012) Natríuretic peptíð viðtakinn gúanýlýl sýklasa-A verndar fræfrumur gegn gauklaskaða af völdum aldósteróns. J Am Soc Nephrol 23: 1198–1209.

17. Yokoi H, Mukoyama M, Mori K, Kasahara M, Suganami T, o.fl. (2008) Oftjáning bandvefsvaxtarþáttar í fræfrumum versnar nýrnakvilla af völdum sykursýki í músum.NýraInt 73: 446–455.

18. Hoshino K, Takeuchi O, Kawai T, Sanjo H, Ogawa T, o.fl. (1999) Framúrskarandi: Toll-eins viðtaka 4 (TLR4)-skort mýs eru ofnæmir fyrir lípópólýsykru: vísbendingar um TLR4 sem Lps genafurð. J Immunol162: 3749-3752.

19. Suganami T, Tanimoto-Koyama K, Nishida J, Itoh M, Yuan X, o.fl. (2007) Hlutverk Toll-eins viðtaka 4/NF-kappaB ferilsins í bólgubreytingum af völdum mettaðra fitusýra í samspili fitufrumna og átfrumna. Arterioscler Thromb Vasc Biol 27: 84–91.

20. Pepper RJ, Hamour S, Chavele KM, Todd SK, Rasmussen N, o.fl. (2013) Tjáning hvítkorna og sermis S100A8/S100A9 endurspeglar sjúkdómsvirkni í ANCA-tengdri æðabólgu og glomerulonephritis.NýraInt 83: 1150–1158.

21. Ravid M, Brosh D, Ravid-Safran D, Levy Z, Rachmani R (1998) Helstu áhættuþættir nýrnakvilla í sykursýki af tegund 2 eru kólesterólgildi í plasma, meðalblóðþrýstingur og blóðsykurshækkun. Arch Intern Med 158: 998–1004.

22. Adler AI, Stratton IM, Neil HA, Yudkin JS, Matthews DR, o.fl. (2000)Tengsl slagbilsþrýstings við stóræða- og öræðavandamál sykursýki af tegund 2 (UKPDS 36): framsækin athugunarrannsókn.BMJ 321: 412-419.

23. Ruggenenti P, Remuzzi G (1998) Nýrnakvilli af tegund -2 sykursýki. J Assoc Nephrol 9: 2157–2169.

24. Taft JL, Nolan CJ, Yeung SP, Hewitson TD, Martin FI (1994) Klínísk og vefjafræðileg fylgni hnignunar á nýrnastarfsemi hjá sykursjúkum með próteinmigu. Sykursýki 43: 1046-1051.

25. Matsusaka T, Niimura F, Shimizu A, Pastan I, Saito A, o.fl. (2012) Liverangiotensinogen er aðal uppspretta nýrnaangíótensíns II. J Am Soc Nephrol23: 1181–1189.

26. Kuwabara T, Mori K, Mukoyama M, Kasahara M, Yokoi H, o.fl. (2009) Þvag daufkyrninga gelatínasa tengd lípokalínmagni endurspeglar skemmdir á gaukla, nærpíplum og fjarlægum nýrum.NýraInt 75: 285–294.

27. Kawasaki Y, Suyama K, Go H, Imamura T, Ushijima Y, o.fl. (2009) Uppsöfnun átfrumna sem tjá myeloid-tengt prótein 8 í tengslum við framvindu mænubreytinga hjá börnum með IgA nýrnakvilla. Tohoku J Exp Med 218: 49-55.

28. Nagareddy PR, Murphy AJ, Stirzaker RA, Hu Y, Yu S, o.fl. (2013) Blóðsykurshækkun stuðlar að mergmyndun og dregur úr úrlausn æðakölkun. Cell Metab 17: 695-708.

29. Jin Y, Sharma A, Carey C, Hopkins D, Wang X, o.fl. (2013) Tjáning bólgugena er uppstillt í útlægu blóði sjúklinga með sykursýki af tegund 1. Umönnun sykursýki.

30. Longo VD, Finch CE (2003) Þróunarlækningar: frá dverglíkönkerfum til heilbrigðra aldarmanna? Vísindi 299: 1342–1346.

Tilvitnun: Kuwabara T, Mori K, Kasahara M, Yokoi H, Imamaki H, o.fl. (2014) ForspárgildiNýraMyeloid-tengd prótein 8 tjáning hjá sjúklingum meðOffita- eða nýrnasjúkdómar sem tengjast sykursýki af tegund 2. PLoS ONE 9(2): e88942. doi:10.1371/journal.pone.0088942

Ritstjóri: Utpal Sen, University of Louisville, Bandaríkin

móttekið 11. september 2013; Samþykkt 14. janúar 2014; Birt 18. febrúar 2014

Höfundarréttur: 2014 Kuwabara o.fl. Þetta er grein með opnum aðgangi sem dreift er samkvæmt skilmálum Creative Commons Attribution License, sem leyfir ótakmarkaða notkun, dreifingu og fjölföldun á hvaða miðli sem er, að því tilskildu að upprunalegi höfundurinn og heimildin séu færð.

Fjármögnun: Þessi vinna var að hluta til styrkt af Grant-in-Aid for sykursýkisnýrnasjúkdómum og nýrnakölkun rannsóknum frá heilbrigðis-, vinnu- og velferðarráðuneyti Japans (til KM), rannsóknarstyrkjum frá japanska mennta-, menningar-, íþrótta-, vísindum , og Tækni (til TK, KM og MM), frá Japan Foundation for Applied Enzymology (til TK) og frá Smoking Research Foundation (til MM). Fjármögnunaraðilar höfðu ekkert hlutverk í hönnun náms, gagnasöfnun og greiningu, ákvörðun um útgáfu eða gerð handritsins.

Samkeppnishagsmunir: Höfundar hafa lýst því yfir að engir samkeppnishagsmunir séu fyrir hendi.

* Netfang: keyem@kuhp.kyoto-u.ac.jp