Part2: Ceramide-1-Fosfat sem hugsanlegur eftirlitsmaður annarrar natríumdælunnar úr nærliggjandi nýrnapíplum með því að kveikja á sérstakri próteinkínasaleið á stigveldislegan hátt

Fyrir frekari upplýsingar. sambandtina.xiang@wecistanche.com

4. Umræður

Flutningur vökva yfir pípulaga þekjuvef er einn af lykilatburðunum í beinni fylgni við meirihluta aðgreindranýrnastarfsemi[49]. Meðal mismunandi uppleystu efna sem meðhöndluð eru ínýru, Nat er sérstaklega mikilvægt. Vegna gnægðs þess í utanfrumuvökvanum er brýnt að skilja hvernig Nat endursogast eða skilst út í þvagi vegna þess að breytingar á millivefs- og æðaþéttni Na plús leiða til breytinga á rúmmáli og gætu valdið truflunum á blóðþrýstingi[50] . Stýring á Nat-gildum í vökvahólfum líkamans er aðallega knúin áfram af frumvirkum flutningsefnum þar sem klassíski Nat plús Kt-ATPasa [51] tekur þátt í massaflutningi, en "annar" Nat-dælan eða Nat-ATPasa tekur þátt í fín- stillt stjórnun á endurupptöku Nat [52,53]Það eru margar skýrslur í fræðiritum um stjórnun á Nat plús K plús -ATPasa með hormónum og sjálfvirkum efnum [50,54] sem og hlutverki reglubundinnar fosfórunar [50,55]. Aftur á móti vitna færri hópar í reglugerðina um Na plús -ATPasa þar sem enn er nokkur ágreiningur um auðkenni hans, jafnvel þó að skýrslur hafi sýnt fúrósemíð-næma Nat-ATPasa virkni frá spendýrum [41,56,57] til frumdýra [58,59] ] sem og klónun dælunnar úr mismunandi lífverum [60-63]. Út frá niðurstöðunum sem kynntar eru hér sýndi hópurinn okkar að ekki aðeins geta hormón og sjálfvirk lyf komið af stað frumuboðaleiðum sem móta Nat-ATPasa, heldur benda áhrif ClP sem er utanaðkomandi bætt við BLM brotin til annað hvort hugsanlegrar víxlverkunar lífvirka lípíðsins. með vatnsfælin lén eftirlitsstofnana, eða dæluna sjálfa; eða, það verður að vera eins konar C1P viðtaka í BLM, sem ekki hefur verið auðkenndur enn [20,22,23]. Mynd 6 sýnir fyrirhugaða áætlun til að draga saman þessar mögulegu ClP leiðir til aðgerða. Greint var frá hæfni ceramíða til að kalla fram kínasa og kalla fram mismunandi lífeðlisfræðileg svörun í lifrarfrumum [24]. Höfundarnir sýndu ekki aðeins hæfni keramíðháðrar mótunar á Nat/K plús -ATPasa og kínasa reglugerðinni, heldur greindu þeir einnig frá tvífasa svörun með hliðsjón af tímaháðri örvun þessara frumulína, sem sýnir að það verður að vera flókið víxltal milli keramíðs. -háð boðkerfi og önnur boðkerfi sem eru til staðar í frumuhimnum. himnur (mynd 2). Þar að auki sýna niðurstöðurnar sem kynntar eru hér ásamt fyrri niðurstöðum úr hópnum okkar greinilega að Cer [33] og ClP mótuðu BLM-tengda PKA og PKC, sem virtust miðla áhrifum sem framkallað var af keramíðum á Nat-ATPasa þegar BLM brotin voru meðhöndluð með 100 nM C1P, var ekki hægt að rekja hömlun á dælunni til PKA (Mynd 4) þar sem forræktun með PKAi hafði ekki áhrif á C1P hamlandi virkni. Á hinn bóginn er marktæk hömlun á Nat-ATPasa virkni við ClP meðferð að fullu komið í veg fyrir með kalfostíni C (Mynd 3). Fyrri skýrslur hafa sýnt að PKA örvar virkni Nat-ATPasa í nýrum á leið sem tengir Gs-tengda viðtaka við dæluvirkni [41]. Merkjakerfin sem eru að finna hér í handritinu okkar - PKA og PKC - hafa verið vel rannsökuð, svo það er nóg af upplýsingum í bókmenntum sem sýna styrkinn fyrir jákvæða viðmiðunarhópa eins og þeir eru notaðir hér (cAMP og phorbol myristat sýru PMA, í sömu röð). Þar sem áherslan okkar var ekki skammta-svörunarrannsókn, hvorki með klassískum virkjum eða hemlum fyrir hin ýmsu merkjakerfi, notuðum við aðeins styrk virkja eða hemla sem þegar voru notaðir á áhrifaríkan hátt í öðrum rannsóknum frá okkar eða öðrum hópum.

Mynd 6. Fyrirhuguð vélbúnaður fyrir ClP virkni á Na plús -ATPasa virkni frá BLM. (1)C1P(rautt lípíð) hamlar PKC í gegnum enn óþekktan G-prótein tengdan viðtaka, sem leiðir til hömlunar á Na plús -ATPasa (blátt prótein). Sama leið gæti virkjað BLM PKA(rauð ör) án áhrifa á dæluna. (2) CIP gæti beinlínis tengst áhrifum sem eru til staðar í BLM, eins og PKC, sem leiðir til hamlandi verkunar á Na plús -ATPasa virkni sem lýst er. Niðurstöður okkar sýndu að þó PKA sé til staðar í BLM og tilbúið til að stilla dæluna með cAMP (grænir hringir og græn ör), þá hafði virkjun þess með CIP ekki áhrif á dæluna (rauð strikuð ör). (3)CIP binst beint við Nat-ATPasa eða er auðgað í fituhimnu örumhverfinu sem umlykur Nat-ATPasa, þannig að það mótar það. Út frá niðurstöðunum sem kynntar eru hér gátum við ekki greint neina mótandi virkni ClP á Nat/K plús -ATPasa (fjólublátt prótein) sem er til staðar í BLM hlutunum.

Smelltu hér til að læra lífslengingar staðlaða cistanche

Stungið var upp á uppgötvun stigveldis í fosfórun á Nat-ATPasa þegar við örvuðum BLM með Cer [33] og við sáum að stífla BLM-PKCZ slökkti á hamlandi virkni Cer á dælunni og leyfði cAMP- virkjaði PKA til að örva það. Þrátt fyrir aukinn fjölda skýrslna sem sýna mismunandi hlutverk fyrir Cer virkjaða kínasa [44,64-66], er þetta fyrsta skýrslan um lífeðlisfræðilega virkni C1P á BLM-búsetta kínasa, sem vissulega gegnir hlutverki í stjórnun á Nat. meðhöndlun í nýrum. Við getum ekki endanlega staðfest að Nat-ATPasið sé beint fosfórýlerað af kínasunum sem rannsakaðir voru, þar sem engin tilraunatæki eru til fyrir þetta, aðallega vegna þess að heildarbygging seinni natríumdælunnar hefur ekki verið auðkennd ennþá. Hins vegar er vel þekkt að Nat-ATPasa er ATPasa af P-gerð og þessi staðreynd gerir okkur kleift að halda því fram að hægt sé að móta hann beint með fosfórýleringu á hugsanlegum stjórnunarstöðum [46,55]Við getum ekki útilokað að virkjun á viðkomandi kínasar myndu leiða til fosfórunar á öðru próteini í þessu eftirlitsneti, sem myndi bera ábyrgð á ATPase hömlun.

Meðal mismunandi lífvirkra sphingólípíða er C1P minna skjalfest í mismunandi lífeðlisfræðilegum kerfum. Aftur á móti er sfingósín-1-fosfat, sem gæti verið mikilvægasta lífvirka lípíðið, mjög vel rannsakað í nýrnalífeðlisfræði og meinafræði [2,6,7,67]. Þar sem S1P og ClP meðlimir eru tegund af fjölskyldu merkjasameinda með sameiginlegum forverum og deila gagnkvæmum umbreytingarskrefum, er hægt að ímynda sér að ClP væri einnig til staðar meðfram öllu nýrnanum. Verk Sugiura o.fl.,2002[11], sem er aðalsmerki á þessu sviði, sýndi að CerK kemur mjög fram í nýrum. Þrátt fyrir traustar upplýsingar í bókmenntum sem sýna hlutverk ClP í fræfrumum og gauklasjúkdómum [68,69], hefur ekki verið verk sem sýnir CerK tjáningu og ClP virkni í neinum af nýrnahlutunum. Annars er líklegt að ClP sé til staðar í öllum nýrnafrumum annað hvort með nærveru sphingomyelins, sem myndi gera björgunarleiðina fyrir ClP myndun, eða vegna þess að hægt er að veita ClP til nýrnavefsins með blóðrásinni. Þetta eru mjög trúverðugar leiðir til að halda að þetta merkjalípíð myndi gegna mismunandi hlutverkum í hinum nefrónuhlutunum, þó við höfum ekki kannað það hér.

Það var verulega sýnt fram á að Cer gildi voru verulega hækkuð á meðannýrnaskaðavegna þegar tilkynnt hefur verið um aukningu á Ca2t-örvuðum sphingomyelinasa virkni eftir að frumu Ca2t homeostasis er truflað [2,4,24,70]. Þessi athugun gerir okkur kleift að halda því fram að kínasamiðluð mótun BLM Nat-ATPasa virkninnar með Cer og C1P gæti verið sérstaklega viðeigandi í skadduðum nýrnavef, sem gæti opnað nýtt hlutverk fyrir ceramíð í stofnun og framgangi nýrnakvilla. Í nærveru C1P voru BLMkinasarnir sem rannsakaðir voru mismunaðir (mynd 5). Þó að ClPin hamlaði PKC, sem leiddi til marktækrar hömlunar á Nat-ATPasa virkni, hafði C1P-háð virkjun PKA ekki áhrif á Nat-ATPasa virkni. Þetta gerir okkur kleift að halda því fram að það sé stigveldi sem felur í sér mismunandi kínasa, sem leiðir til flókins skipta inn/af í Nat-ATPasa. Þessi skipting getur falið í sér mismunandi ísóform af PKC og PKA, eða það verður að vera víxltalning með hugsanlegri umbreytingu C1P í Cer og önnur lífvirk lípíð sem kalla fram aðrar boðleiðir sem eru í BLM, sem þegar hefur verið lýst í lifrarfrumum [24].

Jafnvægið á milli Cer og ClP gæti verið nýtt efnilegt markmið fyrir þróun nýrra lyfjaflokka með skilvirkari aðgerðum til að reyna að stöðva framvindunýrnabilun, eða að minnsta kosti, hækka lífsgæði nýrnasjúklinga.

5. Ályktanir

Út frá niðurstöðunum sem kynntar eru hér er merkjafall sem byrjar með Cer framleiðslu og frekari fosfórun í ClP skilvirk leið til að hindra Nat-ATPasa ífrumur í nýrnapíplumí gegnum BLM-tengda PKA og PKC sem áhrifavalda [17]. Þessar athuganir sýna mikilvægi próteinkínasa við fínstjórn Natflæðis í nýrnahluta þar sem meira en tveir þriðju hlutar gauklasíunar eru endursogaðir, nærpíplarnir. Eftir því sem við best vitum sýnir þessi vinna í fyrsta skipti að ClP getur stillt BLM-Nat-ATPasa frá nærliggjandi píplafrumum nýrna með því að kveikja á himnutengdum kínasa (PKA og PKC). Þannig sýna ofangreindar niðurstöður vísbendingar um þá skoðun að Cer og ClP taki þátt í eftirlitsneti lífvirkra sfingólípíða og glýserólípíða sem eru búsett í þessum nýrnahluta, sem ætti að vera satt fyrir heildar nefrónu. Hægt er að styðja þessa tilgátu með þeirri skoðun að Cer sé lípíð sem er nánast til staðar í öllum nýrnahlutum sem og að Cer aðgengi myndi leyfa myndun C1P.