Part2: Krabbameinsvirkni náttúrulegra og tilbúinna kalkóna

Smelltu á hlekkinn til að fá hluta 1:https://www.xjcistanche.com/news/part1-anticancer-activity-of-natural-and-synt-54977104.html

Fyrir frekari upplýsingar, hafðu sambandtina.xiang@wecistanche.com

3. Krabbameinsvirkni

Chalconeafleiður virka á ýmis markmið, svo sem arómatasa, ATP bindandi snælda undirfjölskyldu G meðlim 2(ABCG2), brjóstakrabbameinsþolið prótein (BCRP), virkjaður kjarna B frumuvaxtarþáttur (NF-kB), æðaþelsvaxtarþáttur (VEGF) og týrósín kínasa viðtaka (EGFR) og mesenchymal-epithelial transition factor (MET), sem sýna mikilvæga virkni in vitro og in vivo í næmum og meðferðarónæmum krabbameinum [161,162]. af túbúlíni og truflun þessara efnasambanda við samsetningu örpípla, frumefni sem eru nauðsynleg til að viðhalda lögun og starfsemi frumna í ferli mítósu og frumuafritunar. Kalkónar hindra frumuhringinn og örvaapoptosis. Tilvist trímetoxýfenýlleifar í kalkonsameindum er hagstæð fyrir óafturkræf andmitótísk virkni þessara efnasambanda, sem hafa getu til að hafa samskipti við cystein leifar í túbúlíni með Michael-gerð viðbótarviðbragði [163]. Að auki er það að skipta út trímetoxýfenýlleifum í kalkónum fyrir kínólín eða kínasólín hagstæð fyrir and-túbúlínvirkni. Þessar heteróhringlaga kalkónar mynda vetnistengi við restina af Cys241 og bindast mjög kolkísín bindisstaðnum (svipað og combretastatin A-4, mynd 7) [164,165].

3.1. Náttúrulegar kalkúnar með krabbameinseiginleika 3.1.1. Licochalcones (AD)

Rætur og rhizomes sumra tegunda Glycyrrhiza eru notaðar í hefðbundinni læknisfræði til að meðhöndla magasár, astma og bólgu. Meira en 600 efnasambönd úr lakkrís hafa verið einangruð, helstu líffræðilega virku innihaldsefnin eru sapónín ogflavonoids. Meðal flavonoids var greind röð af retrochalcones, licochalcones A, B, C, D, E og G, og schematized. Það eru fjölmargar rannsóknir á líffræðilegum áhrifum lakkrísvirkra efnasambanda, þar sem mikilvægast erbólgueyðandi, örverueyðandi, andoxunarefni, sársvörn, frumuverndandi og frumudrepandi eiginleika [166,167].

3.1.2. Licochalcone A

Licochalcone A (LA, töflur S1 og S2, efnasamband 1) er flavonoid einangrað úr Glycyrrhiza urakensis, G.glabra og G.inflata (Fabaceae). Það hefuræxlishemjandi, bólgueyðandi, örverueyðandi, sníkjueyðandi, offitu, andoxunarefni og beinþynningareyðandi eiginleika,KrabbameinslyfSýnt hefur verið fram á áhrif LA á mismunandi tegundir krabbameinsfrumna, þar á meðal magakrabbameinsfrumur BCG-823, HepG2, OVCAR-3 og SK-OV-3 (krabbameinsfrumur í eggjastokkum) MCF{{ 5}} og A549 [168-171]. Rannsóknir sýna að LA framkallar frumufrumur U87 glioma frumur, nefkokskrabbameinsfrumur, þekjukrabbameinsfrumur í eggjastokkum og þvagblöðrukrabbameinsfrumum. Chalcone hefur einnig getu til að auka sjálfsát og hindra frumuhringinn í brjóstakrabbameinsfrumum. Að auki framkallar það frumudauða með því að bæla sérstakt prótein 1 í brjóstakrabbameini [172]. LA hefur litla frumueiturhrif á lungnatrefjafrumur í fósturvísum. Að auki hefur það getu til að hindra æxlisvöxt og draga úr eiturverkunum af völdum cis-platínu [173]. Aðferðir þar sem flavonoids virka sem krabbameinslyf eru meðal annars hömlun á Akt-virkni með því að bæla hexókínasa-2-miðlaða æxlisglýkólýsu í magakrabbameini, lækka stjórnun á málmpróteinasa 2 tjáningu og framkalla apoptosis í munnkrabbameinsfrumum, aukin getu miR{{16} }p til að framkalla streitu í endoplasmic reticulum og framkalla apoptosis í lungnafrumum manna, minnkað PI3K/Akt/mTor virkjun og minnkuð sjálfsát í brjóstakrabbameini, hindra G2/M fasa frumuhringsins, bæla frumuinnrás með MEK/ERKand ADAM9 merkjaleiðir í glioma frumum úr mönnum og framkalla kaspasaháða frumudauða í lifrarfrumum manna [174]. Annar aðferð sem LA sýnir sterk frumudrepandi áhrif er ROS-framkölluð frumudauði. Til dæmis, chalcone framkallar oxunarálag og þar af leiðandi frumudauða T24 frumna (frumulínur unnar úr þvagblöðrukrabbameini í mönnum) í gegnum hvatberaháðar leiðir og með því að örva oxunarferli í endoplasmic reticulum [175]. Önnur rannsókn á frumueiturhrifum og erfðaeiturhrifum LA var þróuð af Bortolotto o.fl. LA var borið saman við trans-chalcone (töflur S1 og S2, efnasamband 2). Frumueiturhrif náttúrulegra kalkóna (LA og trans-kalkóna) á MCF-7 og 3T3 (fósturtrefjafrumulínur úr fósturvísum) voru ákvarðaðar eftir 24 og 48 klst. Niðurstöður benda til merkrar frumudrepandi virkni eftir 48 klst. meðferð. MTT(3-[4,5-dímetýlþíasól-2-ýl]-2,5-dífenýltetrasólíumbrómíð próf á frumueiturhrifum sýndi skammtaháða svörun á MCF{ {45}} frumur meðhöndlaðar með trans-chalcone og LA. Fyrir efnasambönd sem voru greind, reyndust erfðaeiturhrif vera betri á MCF-7 frumum samanborið við 3T3 frumur. DNA röskun veldurónæmiskerfiað virkja til að útrýma eyðilögðum frumum. Hins vegar, að virkja ónæmiskerfið til að draga úr niðurbrotnum DNA frumum stuðlar að langvarandi bólguferli. Að auki er hægt að leiðrétta frumusvörun við niðurbrotið DNA með því að framkalla innri apoptótísk ferli. G1 fasi er ástand sem er á undan DNA eftirmyndun, þar sem þættir eins og frumuaðstæður (efnaskipti, boð og frumustærð) hafa áhrif á framvindu frumuhringsins, sem veldur því að DNA endurbyggist í frumum eða kemur af stað frumudauðaferli.IC50 af LA er 60,46 uM. Trans-chalcone framkallar frumuhringsblokkun í G1 fasanum og eykur frumudauða. Það hefur verið lagt til að meðferð með LA og trans-chalcone valdi frumudauða í gegnum hvatbera leiðina, með hliðsjón af því að framkalla mikilvægra gena þessarar ferils á sér stað eftir 24 klst, svo sem próteasavirkjaþátt 1 í próteini apoptosis og prótein X sem tengist Bcl{{ 9}}. Þó vitað sé að MCF-7 frumulínur séu með kaspasa 3 skort sýndi rannsókn að meðferð með þessum kalkónum veldur klofningu á pólý (ADP-ríbósa) pólýmerasa (PARP), pólýmerasa sem klofnar í tvö brot er vísbending. af apoptosis. Kúgun

af Bcl-2 geninu með LA og trans-chalcone í tilrauna PCR greiningu sýndi, á próteinstigi, skammtaháða gjöf til MCF-7 frumna og innri miðlunarferil. Cyclin D1 er annað prótein sem er bælt á MCF-7 frumulínum í nærveru kalkóna. Þetta prótein er mikilvægt fyrir framgang frá G1 í S fasa og er mikilvægt lífmerki fyrir sum krabbamein, þar á meðal brjóstakrabbamein. Af þessum ástæðum er niðurbrot sýklín D1 aðlaðandi markmið fyrir auðkenningu nýrra æxlislyfja og er í tengslum við frumuhringsblokkun [176].

Qui o.fl. skoðaði einnig áhrif LA á lungnakrabbameinsfrumur in vitro. Flavonoid meðferð minnkaði marktækt lífvænleika A549 og H460 frumna (mannlegt lungnakrabbamein sem ekki er smáfrumukrabbamein), þessi breyting er undir sterkum áhrifum af skömmtum. Samtals 40 μM af licochalcone bælir vöxt lungnakrabbameinsfrumna um 45-80 prósent eftir 24 eða 48 klst. meðferð. Að auki sýnir efnasambandið litla frumueiturhrif á eðlilegar lungnaþekjufrumur úr mönnum. Til að draga fram hvort einn af leiðunum til að hindra vöxt lungnakrabbameinsfrumna af völdum LA sé frumuhringsblokkun, voru frumulínur meðhöndlaðar með mismunandi styrkur efnasambandsins í 16 klst og síðan var frumuhringurinn greindur með frumuflæðismælingu. Niðurstöður sýna að, háð skammti, blokkar kalkóninn G2/M fasa á A549 og H460 frumum. Í kjölfarið var hlutverk LAin sem veldur frumudauða metið með því að nota annexín /própídíumjoðíð litamælingaraðferð. Niðurstöður sýna að það er uppsöfnun apoptótískra frumna í hópnum sem er meðhöndluð með LA, sem er háð styrkleikanum sem notaður er. Auk þess er magn próteina samkv. voru greind með apoptosis voru skoðuð með Western blot aðferð. Styrkur klofnaðs PARP og klofnaðs kaspasa 3 er hækkað og for-kaspasa 3 andapoptótísk prótein, PARP, Bcl-xL og Bcl-2 minnkað 20 klst. eftir meðferð með kalkóna. Þessar niðurstöður benda til þess að frumudauði af völdum LA tengist PARP/Bcl-2 ferli[177]. Sameindalíkön sýndu að LA var fest í ATP bindandi vasa EGFR, þar með talið exon 19 eyðingarstökkbreyting, L858R stökkbreyting á einum stað, L858R/T790M tvöföld stökkbreyting og villigerð. Í L858R/790M stökkbreytingum hefur LA getu til að hafa samskipti við Lys745 með katjón-II víxlverkun. Vetnistengi myndast á milli WT EGFR og licochalcone á Met793, Lvs745 og Asp 855. Exon 19 eyðing hefur getu til að breyta lögun vasans þar sem víxlverkun við licochalcone er talin eiga sér stað, myndar vetnistengi við Met793, Thr790 og Glu762 . Gögn sem fengin eru með kísilgreiningum á LA eru mikilvægur punktur til að bera kennsl á nýja, sértæka EGFR hemla á mismunandi gerðum stökkbreytinga [178].

Smelltu til að fá frekari upplýsingar. um friðhelgi

3.1.3. Licochalcone B

KrabbameinslyfSýnt var fram á áhrif licochalcone B (LB, töflur S1 og S2, efnasamband 3) með greiningu á mismunandi frumulínum, þar á meðal mannafrumum úr þvagblöðrukrabbameini T24 og EJ, munnkrabbameinsfrumum HN22 og HSC4, MCF-7, A375 (frumulína sortuæxla úr mönnum) og A431 (flöguþekjukrabbamein). Rannsóknir hafa sýnt að LB hefur áhrif á vöxt krabbameinsfrumna, hindrar myndun meinvarpa, hindrar frumuhringinn og framkallar frumudauða [161]. Kang o.fl. rannsökuðu sameindaaðferðina sem LB framkallar frumudauða í sortuæxlum í mönnum og frumum í flöguþekjukrabbameini. Sýnt hefur verið fram á að Licochalcone framkallar frumudauða A375 og A431 frumna með bæði innri og ytri leiðum. Þegar um var að ræða prófun á andfjölgunaráhrifum chalcone með trypan bláum litun, kom í ljós að LB veldur marktækri minnkun á lífvænleika frumna, þessi lækkun tengist þéttni Eftir að LB var bætt við komu fram marktækar breytingar á frumueiginleikum, þ.m.t. frumusamdráttur, rof á frumuhimnum og aukning á hlutfalli sundraðra kjarnafrumna. Aukið hlutfall for-G1-fasa frumna og apoptótískra fruma kom einnig fram [38]. Önnur rannsókn sýndi að LB hindrar frumuhringinn marktækt í G2/M fasanum þegar um er að ræða krabbameinsfrumulínur af HepG2-gerð, og þegar um er að ræða blöðru- og brjóstaæxlisfrumur, blokka efnasambönd S fasa [179]. Song o.fl. bentu á bælandi áhrif LB á vöxt flöguþekjufrumna af JAK2-gerð vélindakrabbameins. Rannsóknir á tengikví voru gerðar með Autodock Vina hugbúnaði, sem var notaður til að spá fyrir um bindingarham. Uppbygging JAK2 viðtakans með hamlandi möguleika er fáanleg í próteingagnabanka (PDB færsla 2B7A, leifar 840-1.132). IAK2 gegnir mikilvægu hlutverki, er innanfrumumiðlari cýtókínboða og er týrósínkínasa prótein af JAK fjölskyldunni. ATP binst sterklega við

magnesíumjónir í hvatasviði týrósínkínasa. Í tengibreytunni inniheldur stærð rannsakaðs rýmis ATP bindisæti sem einkennist af leifum 855-863 og 822, þar sem ATP var reiknað með ýmsum hugsanlegum JAK2 hemlum. Í spám sem gerðar voru var LB bindillinn gerður með Marvin Sketch hugbúnaði. Eftir bryggju var safnað saman þremur bestu mögulegu bindiafbrigðum, sem hafa svipaða skyldleika. Ályktanir um spár voru hagstæðar varðandi samspil LB við ATP bindandi vasa við JAK2 [180,181].

3.1.4.Licochalcone C

Vitað er að Licochalcone C(LC, töflur S1 og S2, efnasamband 4) dregur úr bólgusvörun á einfrumu frumulínum. Þetta er vegna minnkunar á iNOS tjáningu og endurheimt andoxunarnetvirkni superoxíð dismutasa, katalasa og glútaþíon peroxíðasa. Kwak o.fl. framkvæmt rannsókn til að lýsa sambandi ROS, c-Jun NH2 enda kínasa (INK) og p38mitogen-virkjaðs próteinkínasa (MAPK) og staðfesti áhrif LC til að framkalla frumudauða á KYSE 30 og KYSE450 krabbameinsfrumulínur í vélinda. Fyrri rannsóknir hafa ákvarðað IC50 gildi fyrir LC meðferð (45 ug/ml) eftir 24 klst. til að hindra fjölgun A549, MCF-7 og T24 frumulína. Hömlun upp á 40,47 og 68 prósent fengust fyrir þrjár frumulínur. Kwak o.fl. fékk skammta- og tímaháða in vitro hömlun á útbreiðslu krabbameinsfrumna í vélinda. Af þeim fimm frumutegundum sem greindar voru, höfðu KYSE30 og KYSE450, sem hafa sameiginlegan erfðafræðilegan stuðning, svipaða svörun við LC meðferð. Í greiningu á festingaróháðum vexti í mjúkum agar, benda niðurstöður til marktækrar minnkunar á getu KYSE30 og KYSE450 frumna til að mynda nýlendur. Það fer eftir styrknum, chalcones framkallaði frumufrumu í báðum frumulínum. Efnasambandið framkallaði einnig stjórnun upp á p24 og p27 (neikvæðir umbreytingarstýringar í G1 og S fasa frumuhringsins) og stjórnaði downstream cyclin D. LC jók einnig ROS myndun í KYSE30 og KYSE450 frumum. ROS virkjar mítógenvirkjaðan próteinkínasa (MAPK) ferilinn og örvarfrumudapósu. Að auki jók efnasambandið magn JNK, c-Jun og p38 fosfórunar og virkjaði apoptotic ferla [182]. Svipað og við bryggjurannsókn Song o.fl. fyrir LB[180], Oh et al. lögðu áherslu á bindandi samskipti milli LC og JAK2 frumna úr mönnum. Eftirlíking af bryggju var gerð með Autodock Vina. Til að hefja hleðslurannsóknina var uppbygging JAK2 viðtakans, sem var leyst upp með röntgengeislatilraun, fengin úr próteingagnabankanum (PDB færsla 2B7A). Uppbygging LC bindilsins var mótuð af Marvin Sketch hugbúnaði og fínstillt með Chimera hugbúnaði. Hvatasvæði JAK2 var tengt við lömsvæði (leifar 929-935), DFGloop (leifar 994-996) og Ploop (leifar 858-865). Lykkjulaga lömsvæðið er nauðsynlegt til að þekkja ATP og myndar vetnistengi við efni. DFGloop inniheldur þrjár amínósýrur (aspartínsýra, fenýlalanín og glýsín) og tengist bindingu málms sem þarf til hvatandi fosfórunar. Ploop er gagnlegt til að koma á stöðugleika og mynda samskipti við bindla. Eins og sjá má var spáð um hugsanlega bindingu gert á þremur virkum stöðum. Rannsókn Docking sýndi að LC hefur samskipti við ATP bindistað við JAK2 og gaf til kynna að JAK2 væri beint skotmark þess. Chalcone bældi einnig JAK2 sjálffosfórun með því að bindast ATP vasa p-JAK2 [183,184].

3.1.5. Licochalcone D

Licochalcone D(LD, töflur S1 og S2, efnasamband 5) er virkt flavonoid einangrað úr Glycyrrhiza inflata. Rannsókn var gerð til að meta getu LD til að hamla frumufjölgun með tveimur markmiðum fyrir lungnakrabbameinsfrumur (EGFR og MET) með því að nota viðkvæmar og gefitinib-ónæmar frumur úr mönnum. Til að skilja beina bindingu chalcone við EGFR og MET voru gefitinib-næmar frumulínur (HCC827) og gefitinib-ónæmar frumulínur (HCC827GR) notaðar. Niðurstöður mats sýna að flavonoid binst tveimur viðtökum og bælir virkni EGFR og MET kínasa sem samkeppnishemill ATP. Í EGFR-samstæðunni hefur kalkón tvö vetnistengi sem myndast af Met793 sem aðalpunkt og hliðarhorn Asp855 í DFG lykkjunni.4-Hýdroxý-3-(3-metýl en{{13} }enýl)fenýl hópur og 3,4-díhýdroxý-2-metoxýfenýl hópur eru festir á sama plani og lokaðir á milli vatnsfælna leifa Leu718, Val726 og Ala743 af P lykkju og Leu 844. Í Met flókinni, ketoið

hópur kalkónsins myndar vetnistengi við Met1160. Tyr1159 sem aðalatriðið og le1084, Vall092, Ala1108 og Lys1110 af Ploop voru þakin á sama hátt með hettu. Luis er einnig sterklega studdur af hliðarvatnsfælnum keðjum aðalatriði Met1160 og Leu1140, Met1211 og Ala1221 í neðri ATP vasa. EGFR bindistaða líkist mjög MET bindistöðu, myndar vetnistengi og vatnsfælin samskipti. Chalcone er staðsett á sama hátt á bindisvæðinu fyrir viðtakana tvo. Hægt er að auka stöðugleika flókins með vatnsfælinum samskiptum. Fyrirhugaðar niðurstöður voru bornar saman við tilraunagögn, sem sýndu að flavonoid hamlar samkeppnishæfni viðtakana [185].

3.1.6. Xanthohumol

Prenyl chalcones, vegna byggingar fjölbreytileika þeirra, hafa mismunandi líffræðilega eiginleika, þar á meðal bólgueyðandi, krabbameinslyf og stökkbreytingarvaldandi virkni [186]. Rannsóknir hafa sýnt að náttúrulegar kalkónar með prenýlhópum geta truflað p53. Til dæmis, meðhöndlun á A549 frumum með prenýl kalkón xanthohumol (XN, töflur S1 og S2, efnasamband 6) framkallar apoptotic frumudauða og hindrar frumuhringinn í G1 fasanum. Þessi starfsemi er vegna uppstýringar á p53 og p21 úr frumuhringnum og niðurstýringu á cyclin D1. Apoptosis er framkallað af virkjun kaspasa 3 [187].

XN((3'-(3,3-dímetýlallyl)-2',A',4-tríhýdroxý-6'metoxýkalkon) er algengasta prenýleraða flavonoidið ({{7 }}.1-1 prósent miðað við þurrþyngd) af kvenkyns humlablómum (Humulus lupulus)[180]. XN er einnig hluti af bjór, helsta fæðuuppspretta prenýleraðsflavonoids, þar sem það er til staðar í styrk yfir 0.96 mg/L. Vegna einstakrar líffræðilegrar virkni þess og hagstæðra heilsuáhrifa hefur prenýlkalkon verið mikið rannsakað nýlega [188]. Efnasambandið hefur lækningalegt öryggi og ýmsa lífvirkni, þar á meðal krabbameinslyf, sykursýkislyf, bólgueyðandi, andoxunarefni og bakteríudrepandi eiginleika. Á undanförnum árum hefur aukinn fjöldi rannsókna sýnt fram á breitt svið krabbameinsvirkni XN í lungnakrabbameini, lifrarfrumukrabbameini, brjóstakrabbameini, hvítblæði, krabbameini í blöðruhálskirtli, briskrabbameini, ristilkrabbameini, briskrabbameini og krabbameini í glioblastoma. Útsetning krabbameinsfrumna fyrir XN hindrar útbreiðslu þeirra, flæði og innrás og stjórnar sjálfsát. Chalcone hefur einnig getu til að framkalla frumudauða og hindra frumuhringinn [189-193]. Að auki veldur chalcone frumudauða sem er háð og óháð virkni kaspasa og hindrar innrás krabbameinsfrumna og æðamyndun [194]. Bólgueyðandi, andoxunarefni og krabbameinslyfjaeiginleikar þess eru í tengslum við efnaforvarnir efnasambandsins [195]. Prenylchalcone er einnig umbrotið í 8-prenylnaringenin, öflugasta plöntuestrógenið sem vitað er um til þessa [196].

Akt (einnig kallað prótein kínasi B eða PKB) er sérstakur serín/þreónín-prótein kínasi og mikilvægur punktur í frumuboðaleiðum. Akt virkni er breytt í mörgum tegundum krabbameina og tekur þátt í ýmsum líffræðilegum ferlum, þar á meðal frumufjölgun, frumudauða, umritun, fólksflutninga og innrás. Til að staðfesta getu XN til að bindast Akt var gerð kvíarrannsókn með Schrodinger Suite 2015 hugbúnaði. Vatnssameindir voru fjarlægðar og sýrustig vetnisatóma sem tekin voru til skoðunar var 7. ATP-bindingarstaður var myndaður fyrir tengikönnunina. XN var undirbúið fyrir tengikví án breytu með því að nota LigPrep forritið. Eftir það fylgdu tengingarrannsóknir á XN með Aktl og Akt2 fjarverandi breytur með því að nota aðferðina til að auka nákvæmni með Glide forritinu til að fá bestu framsetningarmyndirnar. Niðurstöður kvíarrannsóknarinnar sýna að XN myndar vetnistengi við Ala230, Glu228, Glu234 og Lys158 af Akt1 og með Glu236, Thr213 og Lvs181 af Akt2. Xenograft (PDX) líkön voru auðkennd til að þýða grunnrannsóknir yfir í klíníska notkun. Í auknum mæli eru líffræðilegir og erfðafræðilegir eiginleikar gjafasjúklinga taldir varðveittir með PDX líkönum, sem er helsti kosturinn fram yfir frumulínutengd líkön. PDX líkön voru notuð til að greina lífmerki og spá fyrir um svörun við XN meðferð í klínískum rannsóknum. Efnafyrirbyggjandi áhrif prenýlkalkons voru borin saman á grundvelli Akt magns. Niðurstöður sýna að æxlislíkön sem tjá mikið magn af Akt hafa marktæka lækkun á æxlisrúmmáli og þyngd þegar þau eru meðhöndluð með XN [197]. Guo o.fl. rannsakað in vitro og in vivo áhrif XN á magakrabbameini, sem sýndi að prenýlkalkon framkallar frumudauða með því að virkja kaspasa, stjórna Bcl-2 og hafa áhrif á PI3K/Akt/mTOR kínasa. XN hindrar lífvænleika magakrabbameinsfrumna á styrkleikaháðan hátt. Á frumulínum hefur flavonoid best áhrif á lífvænleika SGC-7901 frumna og hefur ekki áhrif á þessa breytu á GES-1 frumur við 6, 8 og 10 ug/mL af chalcone. Frá frumuflæðisgreiningu kom fram að prenýlkalón eykur verulega fjölda apoptótískra frumna í magakrabbameini. Áhrif XN á pro- og and-apoptotic prótein voru lögð áhersla á með Western blot greiningu. Bcl-2 og Bcl-XL próteinmagn lækkuðu eftir flavonoid gjöf, þessi lækkun er í tengslum við gefinn styrk. XN jók einnig Bax og Bid próteinmagn, þar sem besta virknin sást fyrir 10 uM/mL af chalcone. Að auki jókst magn klofins kaspasa 3 og klofins PARP próteins verulega í nærveru kalkóns. Af þessum ástæðum má fullyrða að flavonoids hafi jákvæð og marktæk áhrif á magn pro- og and-apoptotic próteina. Samtals 10 uM/mL af XN framkallar marktæka frumufrumu SGC-7901 frumna. Alls 8 og 6 uM/mL af chalcone framkallar frumudauða 34±3 prósent frumna og 23±2 prósent frumna, í sömu röð. Að auki breytir flavonoid verulega fosfórun á PI3K, Akt og mTOR eykur magn p-PTEM og lækkar magn p-Akt (Thr308), p-Akt (Ser473) og m-Tor (Ser2448). Gögnin sem fást benda til þess að prenýlkalkon hafi ekki marktæk áhrif á Akt, PTEN, GSK-3 og mTOR gildi. Ákvarðanir í SGC7901xenograft músum sýndu að XN meðferð minnkaði æxlisrúmmál á tiltölulega þéttniháðan hátt. Til að staðfesta bælingu PI3K/Akt boðefna in vivo, var fosfórýleruð Akt og mTOR tjáning á xenographic æxlum metin. Meinafræðileg skoðun á hematoxýlíni og eósínhlutum leiddi í ljós marktæk formfræðileg frávik. Hins vegar dregur XN úr styrkleikaháðum fosfórýleruðum Akt og mTOR stigum. Prenylchalcone meðferð minnkaði marktækt frumufjölgun og jók æxlisfrumna apoptosis samanborið við samanburðarfrumur [198].

XN, í styrk sem er hærri en 10 umól/L, hindrar útbreiðslu krabbameinsfrumna í brisi in vitro. Í þéttni sem er lægri en 5 umól/L hamlar chalcone NF-kB-háða æðavirkni í briskrabbameinsfrumum. Við þennan styrk sáust engin frumueiturhrif á brisfrumum með WST-1 aðferð. Hins vegar var niðurstaða rannsóknarinnar sú að XN hefur áhrif á æðamyndun af völdum briskrabbameins með því að minnka framleiðslu á VEGF og IL-8 (interleukin), sem er sértækt og miðlað af NF-kB óvirkjun [194]. meta krabbameinsvirkni XN, HepG2 frumulínur voru gerðar MTT greiningu til að ákvarða frumufjölgun. Prenylchalcone minnkaði frumufjölgun eftir styrk og tíma. Zhao o.fl. kom fram að það að útsetja frumulínur fyrir 200 μM af XN í einn dag er minna árangursríkt samanborið við að meðhöndla þær með 100-200 μM af chalcone í 2-3 daga. Við 50 uM af chalcone sást marktæk hömlun á HepG2 frumufjölgun eftir 3 daga. Í sömu rannsókn var sýnt fram á að prenýlkalkón veldur marktækri aukningu á virkni kaspasa 3. Að auki, með Western blot greiningu, var sýnt fram á að 100-150 uM af XN hamlaði marktækt tjáningu NF-kBpróteins á frumulínum. Með þessari greiningu kom einnig fram að prenýlkalkon hefur getu til að auka tjáningu p53 próteins og 20 uM af XN ákvarðaði aukningu á Bax merkjasendingum, þetta er í tengslum við tímann [199]. Rannsóknir á öryggissniði XN sýna að 1000 mg/kg af efnasambandinu breytir ekki starfsemi lífsnauðsynlegra líffæra og jafnvægi í músum. Prenylchalcone hefur getu til að auka IL-2 framleiðslu í T frumum, sem sýnir getu þess til að stuðla að The-miðlaðri ónæmissvörun. XN hindrar einnig -12. sem framleiðir óbeint sérhæfingu á frumunum í ónæmiskerfinu með því að virkja umritunarsameindir. Frumueitrandi eitilfrumur eru tegund frumuáhrifa sem eru mikilvæg fyrir frumuónæmi og gegna mikilvægu hlutverki í æxlisónæmisfræði. CD8 plús T frumudrepandi eitilfrumur eru til sem CTL-P, óvirkur frumuforveri in vivo. Þessi forveri er virkjaður af mótefnavaka í nærveru Th1 frumuefna og þróast síðan í þroskaðar frumudrepandi T eitilfrumur. Sýnt var fram á marktæka aukningu á CD8 plús /CD25 plús, fylgt eftir með umskipti á Th2 í Th1 í örloftslagi æxlis. CD8 plús /CD25* hlutfall T frumna eykst mikið þegar frumudrepandi T eitilfrumur eru virkjaðar af CoCl2 á 4T1 frumulínum. Virkni Th1 og Th2 frumna er háð seytingu ýmissa frumuefna. Til að kanna áhrif XN á Th1 og Th2 cýtókín, Zhang o.fl. ákvarðað sermisþéttni Th1l og Th2-tengdra cýtókína með því að nota ELISA sett. Sýnt hefur verið fram á að prenýlafleiða eykur marktækt Th1 frumtjáningu (þar á meðal IL-2 og IFN-y) og lækkar Th2 cýtókínmagn (þar á meðal IL-4 og IL-10). Þessi niðurstaða skýrist af því að Th1 og Th2 eru gagnkvæmir hemlar. Að auki var Th1/Th2 hlutfallið ákvarðað með frumuflæðismælingu, sem sýnir að það er verulega aukið með XN. Svipaðar rannsóknir hafa greint frá þessari niðurstöðu fyrir ýmis æxli. Sjúklingar með langt gengið flöguþekjukrabbamein í hálsi og höfði hafa lítið magn af Th1 cýtókínum samanborið við sjúklinga sem eru minna alvarlegir og hafa mikið magn af Th2 cýtókínum. Samsett meðferð framleiðir umskipti á Th2 í Th1 frumuboðefni í æxlisumhverfinu. Niðurstöður rannsókna benda til röskunar á Th1/Th2 frumufrumuhlutfalli, þessi breyting sést fyrir nokkrar tegundir æxla, oftast á lokastigi krabbameins. Til að staðfesta hugsanlegan gangverk XN á Thl/'Th2 frumufrumuhlutfallinu, var tjáning lykilþátta í ferli Th1 og Th2 aðgreiningar ákvörðuð. Lífeðlisfræðilega eru Th0 frumur hlutfallslega aðgreindar í Thl og Th2 frumur. Að auki gegnir virkjun umritunarsameinda 4 og 6 mikilvægu hlutverki við að aðgreina Th0 í Th1 og Th2 frumur. T-veðmál og GATA-3 gegna einnig tveimur lykilhlutverkum. CpG-ODN(cýtósín-fosfórþíóat-gúanín sem inniheldur oligodeoxýnukleótíð), öflugt Th1 hjálparefni, dregur úr GATA-3 tjáningu og virkjun umritunarsameindar 6 með því að virkja T-bet og umritunarsameindir 1 og 4 í lungnakrabbameinslíkönum. XN eykur T-bet tjáningu og dregur úr GATA-3 tjáningu. Virkjun á umritunarsameind 4 eykst í nærveru XN, en hún hefur ekki áhrif á virkjun umritunarsameindar 6. Af þessum sökum má fullyrða að virkjun umritunarsameindar 4 gegnir jákvæðu hlutverki við að stjórna Th1/Th2 frumuvakanum hlutfall með XN [200].

Notch boðleiðin gegnir mikilvægu hlutverki í brjóstakrabbameini, sem er lækningalegt markmið fyrir meðferð þess. Það tekur þátt í upphafi og framvindu brjóstakrabbameins, afbrigðileg virkni þessa ferils tengist þessari meinafræði. Hömlun á Notch boðleiðum með gamma-secretasa hemlum og anti-delta-líku einstofna mótefni 4 er hagstæð til meðferðar á bráðu eitilfrumuhvítblæði og föstum æxlum. Verkfæri þessara efna eru meðal annars frumuhringsblokkun eða frumudauði og truflun á æðamyndun. Sun o.fl. rannsakað lækningamöguleika XN á brjóstakrabbameinsfrumulínum og benti á getu þess til að hamla frumufjölgun, loka frumuhringnum og framkalla frumudauða in vitro. Lækkun á æxlisvexti in vivo var einnig ákvörðuð. Að auki hefur möguleiki prenýlkalkons til að hindra vöxt brjóstakrabbameinsfrumna úr mönnum með Notch-boðaleiðinni verið kannaður. Til að ákvarða hvort XN miðar á Notch boðferilinn var notast við hagnýt Notch 1 aðferð, með gamma-secretasa hemli (DAPT) sem viðmiðunaraðferð. Markmið rannsóknarinnar var að meta möguleikann á því að prenýlkalkón dragi úr bindivirkni Notch1 við CBF1 transgen. Sýnt hefur verið fram á að XN hamlar útbreiðslu og framkallar frumudauða með því að hindra Notch 1 ferlið. Að auki, með MTT aðferðinni og ljóssmásjárskoðun, var sýnt fram á að prenýlkalkón hamlar frumufjölgun á brjóstakrabbameinsfrumulínum. Fyrri rannsóknir hafa sýnt að Notch pathway hemlar eru einnig hemlar á EGFR tjáningu, annar sakfellandi þáttur í brjóstakrabbameini. Að auki verkar XN á prótein sem tengjast meinvörpum í æxlum og hamlar frumuflutningi með því að auka tjáningu þessara próteina. Rannsókn sýndi fram á blokkun frumuhringsins í G0/G1 fasa og framkalla frumudauða fyrir MCF-7 og MDA-MB-231 frumur af XN [201].

3.1.7.Panduretin A

Krabbameinslyfvirkni pandúrats A (PA, töflur S1 og S2, efnasamband 7), sýklóhexanýlkalkon sem er einangrað úr Boesenbergia pandurate, hefur verið rannsökuð. Álverið inniheldur prenýl kalkóna og önnur flavonoids sem helstu lífvirkar sameindir, sem lýst er í bókmenntum að hafi ívilnandi frumudrepandi eiginleika á brisfrumulínu PANC-1 úr mönnum. [202,203] PA er virkt við sortuæxlum, kirtilkrabbameini í ristli og krabbameini í blöðruhálskirtli. Próteomic greiningar sýna að PA hefur frumueiturhrif á sortuæxlisfrumum sem er háð afeitrun oxunar fosfórunarferlis hvatbera, þar sem virkni seytingarferils og frumudauða er framkölluð af oxunarferlum. Í þessu sambandi hefur verið sýnt fram á að oxunarálag getur verið afleiðing af örvandi sjálfsát sem aukasvörun við hækkuðu ROS [204]. Bókmenntir benda til þess að styrkur upp á 9 ug/mL af PA hamli algjörlega vöxt MCF-7 frumna og HT-29 frumna (mannleg ristilkrabbameinsfrumulína)[205]. Kalkóninn hefur krabbameinseiginleika á ýmsum frumugerðum, þar á meðal sortuæxlum, kirtilkrabbameini í ristli og krabbameini í blöðruhálskirtli [204]. Liu o.fl. benti á frumudrepandi áhrif kalkónsins á MCF-7, T47D (brjóstakrabbamein í mönnum) og MCF-10A (non-tumor breast cells) frumulínur. IC50 gildi PA á MCF-7 frumum voru 15 uM eftir 24 klst. og 11,5 μM eftir 48 klst.. Í tilviki T47D frumna var IC50 17,5 míkrómurinn eftir 24 klst. og 14,5 míkróm eftir 48 klst. PA hefur ekki áhrif á útbreiðslu MCF-10A frumna. Til að bera kennsl á aðferðir þar sem chalcone framkallar frumuhringsblokkun í MCF-7 frumum í GO/G1 fasa, var Western blot greining notuð, sem miðar að því að meta mótun stjórnpróteina í frumuhringnum. Niðurstöður sýna að PA meðferð framkallar lækkun á cyclin D1 og CDK4 tjáningu og eykur p21Cip1 og p27 tjáningu og útskýrir þannig blokkunina í G0/Gl fasanum. Einangrað PA frá Kaempferia pandurate veldur frumuhringsblokkun í andrógenóháðum PC-3 (kirtilkrabbameini í blöðruhálskirtli) frumum og í DU145 (frumukrabbameinsfrumulínu úr mönnum) úr mönnum. DNA sundrun innan kjarna er merki um frumufrumu. Vegna þess að DNA-bútar með litla sameindaþyngd eru dregin út með því að lita frumur í vatnslausnum, er hægt að bera kennsl á apoptótískar frumur með tíðnissúlurritum á DNA-innihaldi í formi frumna með brotnu DNA-innihaldi. Undir-G1 fasa MCF-7 frumuþýði var greindur. G1 fasainnihald frumna var 1,17 ± 0,11 og í frumum sem fengu PA (10,15 og 20 μM) var það 1,84±0,18, 2,62±0,21 og 4,52±0,28, í sömu röð. Aukningin á chalcone meðferðinni var vegna aukinnar DNA sundrungar á MCF -7 línum, staðreynd sem er staðfest af undir-G1 fasa frumuþýðinu [206].

Meðal lykilpróteina innrásar krabbameinsfrumna og meinvörpum er framkalla fylki málmpróteinasar. Þeir brjóta niður þætti utanfrumu fylkisins og auðvelda innrás og flutning frumna. Að auki getur oftjáning á málmpróteinasa valdið þekju-mesenchymal umskiptum. PA bælir seytingu og virkjun málmpróteinasa 2, sem veldur hömlun á flutningi æðaþelsfrumna, innrás og formgerð á æðaþelsfrumum úr mönnum (HUVEC). Að auki duga undireitrunarskammtar af chalcones til að minnka málmpróteinasa 2 í lungnakrabbameinsfrumum [207].

3.1.8. Kardamónín

Cardamon (CD, töflur S1 og S2, efnasamband 8), kalkón úr Campomanesia adamantium (Myrtaceae), eykur DNA sundrun og dregur úr NF-kB virkni í PC-3 frumum. Þessar niðurstöður gefa til kynna meðferðarmöguleika chalcone við meðferð á krabbameini í blöðruhálskirtli [20]. CD er talið eitt virkasta æxlishemjandi efnasambandið þar sem virkjun Epstein-Barr veirunnar á þátt í [208]. Krabbameinseyðandi áhrif CD eru í tengslum við örvun frumudauða, hömlun á frumufjölgun og flæði og áhrifum á frumuhringinn. Kalkóninn hefur einnig getu til að draga úr viðnám krabbameinsfrumna fyrir meðferð. Samhliða 5-flúorúracíli eða cis-platínu fæst aukin virkni gegn æxli. Til dæmis hefur geisladiskurinn getu til að hamla marktækt þol gegn krabbameinslyfjameðferð krabbameinsfrumna í ristli, framkallar frumudauða, virkjar kaspasa 3 og 9, auðveldar tjáningu Bax próteina, hamlar verulega c-myc og ber sértækt 50 og NF-kB [209] ]. Hou o.fl. rannsakað lækningamöguleika og sameindakerfi CD á 5-flúoróúrasíl-ónæmum magakrabbameinsfrumum. Næmni BGC-823/5-flúorúrasíls fyrir 5-flúorúracíli var staðfest með því að auka frumudauða og loka frumuhringnum í nærveru CD. Kalkónið eykur næmi krabbameinsfrumna fyrir 5-flúorúrasíli með því að bæla Wnt/ -catenin boðferilinn (sem gegnir mikilvægu hlutverki í æxlismyndun), og virkjaðar stökkbreytingar í Wnt/ -catenin genum tengjast ónæmi gegn krabbameinsmeðferð . Það hamlar tjáningu P-glýkópróteins, -catenins og TCF-4. Auk þess hindrar CD sérstaklega myndun -catenin/TCF-4 flóksins og veldur því afbrigðilegum Wnt/ -catenin merkjum [210]. Svefnherbergi o.fl. rannsakað andfjölgunar- og apoptotic áhrif CD á HepG2 frumur. Hindrandi virkni

Chalcone á HepG2 frumufjölgun var marktæk eftir 72 klst, frumueiturhrifin voru svipuð og 5-flúorúracíls. Gildi ákvörðuð fyrir önnur krabbameinslyf sem notuð voru sem staðlar (td sorafenib) voru mun lægri. Að auki eru frumudrepandi áhrif efnasambandsins sértæk á æxlisfrumur og hafa ekki neikvæð áhrif á eðlilegar frumur, sem er kostur CD samanborið við 5-flúorúracíl. Uppsöfnun CD í G1 fasa frumuhringsins sást eftir 72 klst og bendir til hömlunar á HepG2 frumuvexti með því að koma í veg fyrir frumuskiptingu [211].

Samanburðarrannsóknir á tengikví á geisladiski og5-flúorúrasíli og samspili þess við BaxBH3 sýna að 5-flúorúrasíl hefur meiri bindingarorku en geisladiskur. Kalkóninn myndar þrjú vetnistengi (Phe30, Val50 og Gln52). Samspil CD og Bcl er náð með þremur vetnistengjum (Asp15, Gln18 og Ser28), og þegar um er að ræða 5-flúorúrasíl næst með fjórum tengjum. Að auki, þegar um þessa víxlverkun er að ræða, er bindingarorka CD lægri en í tilviki 5-flúorúracíls. Þetta má rekja til arómatískra leifa í uppbyggingu kalkónsins, sem taka þátt í II tengjum, sem hafa getu til að koma á stöðugleika í virka vasanum og valda lækkun á bindiorku. Niðurstöður úr kísilrannsóknum sýna að 5-flúorúrasíl hefur meiri bindiorku en kaspasi 3 samanborið við CD. CD sýnir tvö vetnistengi í samspili við kaspasa 3(Cys163 og Arg64). Kalkóninn hefur einnig II-II tengi við TYR204. Frjáls bindiorka 5-flúorúrasíls er betri en CD, sem skýrist af stöðugleika virka vasans með tveimur arómatískum leifum í uppbyggingu kalkónsins [212].

3.1.9. Lonchocarpin

Lonchocarpin (töflur S1 og S2, efnasamband 9) er náttúrulegt kalkóna sem er unnið úr Lonchiocarpus sericeus. Frumueitrandi áhrifum þessa kalkóns hefur verið lýst á taugafrumukrabbamein og hvítblæðisfrumulínur. Vitað er að 24 klst eftir meðferð með 50 uM lonchocarpin á SK-N-SH taugafrumukrabbameinslínum á sér stað framkalla AMPK fosfórunar sem eykur frásog glúkósa og hindrar nýmyndun próteina. Kalkóninn hefur einnig getu til að minnka lífvænleika frumna. Á ristilkrabbameinsfrumulínum HCT116, SW480 og DLD dregur lonchocarpin úr lífvænleika frumna um 20μM. Rannsóknir sýna að lonchocarpin hefur getu til að hamla H292 lungnakrabbameinsfrumum in vitro með kaspasa-3-framkallaðri frumudauða sem er á undan apoptosis. Að auki hefur sést að lonchocarpin hindrar Wnt/-catenin boð in vivo í fósturlíkönum af Xenopus laevis. Inndæling chalcone í samsprautað Wnt8-sérstakt viðtakalíkan (SO1234) leiddi til 82 prósenta bælingar á Wnt/-catenin merkjaviðtaka genavirkjun [213].

Í rannsókn Chen o.fl. benda niðurstöður 3D-QSAR greiningarinnar til vatnsfælna C-4, C-5, C-11, C-1/ og C -2 víxlverkun í lonchocarpin. Þessi víxlverkun eykur frumudrepandi getu þessa efnasambands og hefur framlag upp á 23 prósent í líkaninu. Hafnarrannsóknir fyrir lonchocarpin gáfu sömu niðurstöður og vatnsfælna 3D-QSAR líkanið, með vatnsfælna yfirborðið í C-4, C-5, C-11, C-1' , og C-2'svæði loncocarpines sem hafa samskipti við Bcl-2 flókið. Vatnsfælin lykkja Bcl-2 próteinsins myndar flókið með BaxBH3 peptíðinu, sem hægt er að rjúfa með tilbúnum navitoclax eða lonchocarpin efnasamböndum. Þetta sýnir að vatnsfælin lykkja Bcl-2 fjölskyldumeðlima er skotmark fyrir loncocarpine-framkallaða apoptosis á H292 frumum og þar með fyrir virkjun kaspasa 3 [214].

Aðrar náttúrulegar kalkónar með krabbameinseiginleika eru bútein (töflur S1 og S2 efnasamband 10), isoliquiritigenin (töflur S1 og S2, efnasamband 11), flavokawain (töflur S1 og S2, efnasamband 12) og ísóvabachalcon (töflur S1 og S2, efnasamband 13) [155].

Smelltu á hlekkinn til að fá hluta 3:https://www.xjcistanche.com/news/part3-anticancer-activity-of-natural-and-synt-54978140.html