Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Smelltu hér til að hluta 1

Umræða

Í þessari rannsókn, fenýletanóíð glýkósíð fengin úrCistanche tubulosa hafði ekki áhrif á lífvænleika frumna á RBL{{0}}H3 frumum og KU812 frumum við 1.0-10,0 µg/ml meðferðir. En,akteósíðvar frumudrepandi við 100,0 µg/ml meðferðir (Mynd 2B), eins og greint hefur verið frá af Saracoglu o.fl. [30] sem hafa sýnt þaðakteósíðeinangrað fráPhlomic Armeniacaog Scutellaria salviifolia sýndu frumudrepandi áhrif á dRLh-84, S-180, P-388/D1 frumulínur með IC₅₀30-221 µg/ml við mismunandi frumunúmer. Niðurstaða okkar gaf til kynna að hömlunaráhrif afakteósíðá lífvænleika frumna við 100 µg/ml meðferð, getur haft áhrif á apoptotic virkni þess.

Bráða ofnæmisviðbrögðin taka þátt í mörgum ofnæmissjúkdómum eins og astma, ofnæmiskvef og skútabólga. Mastfrumur gegna mikilvægu hlutverki í bólgu- og tafarlausum ofnæmisviðbrögðum. Gögnin okkar sýna að akteósíðið hefur mest hamlandi áhrif á losun -hexosaminidasa frá IgE-næmdum, mótefnavakaörvuðum RBL-2H3 frumum samanborið við önnur fenýletanóíð glýkósíð við 1.0 ug/mL meðferð ( mynd 3). Hindrunaráhrif akteósíðs á losun -hexosaminidasa við 10.0 ug/mL meðferð voru minni en við 1,0 ug/ml meðferð. Eins og Sugisawa o.fl. [31] sýnt, þetta gæti verið stuðlað að H₂O₂örvun við háan styrk akteósíðs_,sem gætu verið stýrð kalsíummerki og afkornun á RBL{0}}H3 frumunum [32], sem hefur áhrif á losun -hexosaminidasa við 10,0 ug/mLakteósíðmeðferð.

Cistanche deserticola hefur mörg áhrif, smelltu hér til að vita meira

Afkornun mastfrumna er náskyld [Ca^{2 plús}]i. Hömlun á Ca^{2 plús}innstreymi ofnæmislyfja gegnir mikilvægu hlutverki við að bæla niður kyrning í mastfrumum. [33-34]. Niðurstöður okkar benda til þess að innanfrumu [Ca^{2 plús}]i magn var lægra í akteósíðmeðhöndluðum, DNP-BSA örvuðum RBL-2H3 frumum (Mynd 4), sem er í samræmi við aðrar skýrslur [34-35], og þessar niðurstöður eru í samræmi við þær á mynd 3. Við lítum út frá þessum athugunum að minnkun á innanfrumu [Ca]^{2 plús}]i tekur þátt í hamlandi áhrifum afakteósíðvið losun -hexosaminidasa. Nituroxíð (NO) og H₂O₂eru tvær helstu hvarfgjörn súrefnistegundir (ROS) sem þekktar eru í stjórnun kalsíumboða og afkornun mastfrumna. ROS eru nauðsynleg fyrir seytingu á -hexosaminidasa og kalsíuminnstreymi, og nikótínamíð adeníndínúkleótíðfosfat (NADPH) oxidasi er aðallega ábyrgur fyrir ROS framleiðslu í IgE-miðluðum RBL-2H3 frumum [29, 32]. Viðvarandi hækkun á umfrymiskalsíum með kalsíuminngangi í verslun var algerlega afnumin þegar ROS-framleiðsla var lokuð. Að auki hefur ROS einhver tengsl við losun ß-hexosaminidasa og histamíns með próteinkínasa C (PKC) virkjun og IgE örvun í RBL-2H3 frumum [34]. Ennfremur, Suzuki o.fl. [36] komst að því að marktæk fylgni var á milli hamlandi áhrifa á histamínlosun og 1, 1-dífenýl-2-sjóræningja-l-hýdroxýl (DPPH) eða súperoxíð anjónaróteindaeyðandi virkni curcumin-tengts andoxunarefnis efnasambönd. Á hinn bóginn,akteósíðhefur sindurefnahreinsandi eiginleika á NO radical og DPPH radicals [9, 37]. Einnig hefur akteósíð sýnt hreinsandi virkni í virkum hvítfrumum úr mönnum [38]. Einn af möguleikunum er að hamlandi áhrif akteósíðs á losun kalsíums í frumu geti verið fyrir áhrifum af NADPH oxidasavirkni þess sem hreinsar sindurefna.

Akteósíð hamlaði skammtaháð losun histamíns á A23187 ásamt PMA-örvaðri KU812 frumu (mynd 4A).Akteósíðhamlaði glutamat-framkallað innanfrumu Ca^{2 plús}innstreymi sem leiðir til offramleiðslu á NO og minni myndun ROS [37]. Bæði PKC og Ca^{2 plús}Merkjaleiðir eru nauðsynlegar fyrir losun histamíns og leukotríena frá mastfrumum sem og nagdýrakerfum [39]. Við settum fram tilgátu um þaðakteósíðgetur haft hamlandi áhrif á losun histamíns í gegnum Ca^{2 plús}innstreymi. Í þessu skyni notuðum við A21387 plús PMA til að örva KU812 frumur og sýndum hindrunaráhrif histamínlosunar meðakteósíð. Þessi niðurstaða studdi tilgátu okkar um að akteósíð gæti dregið úr histamínlosun frá KU812 frumum með hömlun á Ca.^{2 plús}innstreymi eða PKC virkjun.

Talið er án efa að örvun mastfrumna með efnasambandi 48/80 komi af stað virkjun merkjaflutningsferils sem leiðir til losunar histamíns. Senyshyn o.fl. [40] benti á raðbrigða G undireiningu sem sýndi verulega samvirkni fosfólípasa D virkjunar með efnasambandi 48/80 í gegndræpum basófílum frumum. Efnasamband 48/80-framkallað seyting tengist tímabundinni aukningu á frumusýru Ca^{2 plús}. Þessi seyting var lokuð af kalsíumklótanum og PKC hemlinum. Í þessari rannsókn tókum við eftir þvíakteósíðhindraði efnasambandið 48/80-örvaði kyrningalosun úr basófílum frumum. En hindrunaráhrif akteósíðs á histamínlosun við 0.1 ug/mL meðferð voru hærri en 1.0-10.0 ug/mL meðferð (mynd 4B). Eins og Lau o.fl. [41] sýnt fram á, hamlandi áhrifakteósíðá efnasambandi 48/80 getur framkölluð histamínlosun átt þátt í bólgueyðandi áhrifum akteósíðs gegn bjúg sem tengist gegndræpi í æðum. Hugsanlega, theakteósíðgetur haft nokkrar mismunandi leiðir til að hindra losun efnamiðlara frá basófílum frumum, sem bendir til þess hversu flókin virkni þess er. Hins vegar, til að leiða í ljós hvernig histamín losun hindrar þessa lyfseðils, ætti að gera frekari rannsóknir.

Meðal frumuefna sem framleidd eru af basófílum frumum eru TNF-, IL-4, IL-13 og IL-5 lykilsameindirnar. Fækkun bólgueyðandi cýtókína frá mastfrumum eða basófílum frumum er einn af lykilvísbendingum um minnkuð ofnæmiseinkenni [42]. Að því er varðar TNF- er framleiðslan aðallega stjórnað af Ca^{2 plús}innstreymi, en losunarferlið er stjórnað af viðbótaraðferðum sem hugsanlega fela í sér virkjun PKC í KU812 frumum. Hömlun á [Ca^{2 plús}]i innflæði tekur þátt í tjáningu cýtókína í mastfrumum og basófílum frumum [34, 43]. Niðurstaðan okkar sýndi að 1.0 og 10,0 µg/mLakteósíðminnkaði TNF- og IL-4 framleiðslu frá A23187 ásamt PMA örvuðum KU812 frumum eftir meðferð í 16 klst. Acteoside gæti hamlað TNF- og IL-4 framleiðslu með því að minnka [Ca^{2 plús}] I stig í A23187 plús PMA örvuðum KU812 frumum. Þar að auki bentu niðurstöður okkar til þess aðakteósíðhefur ofnæmisáhrif á seinstigi. Staðfesting á áhrifum akteósíðs með því að nota FcεRI tjáandi mastfrumur eða basófílar frumur er nauðsynleg fyrir framtíðina.

Að lokum greinum við frá því í fyrsta skipti að acteoside, echinacoside ogcistanosideA dregið úrCistanche tubulosa getur hindrað losun -hexosaminidasa frá IgE-næmdum BSA-örvuðum RBL-2H3 frumum. Ennfremur getur akteósíð hamlað histamínlosun, TNF- og IL-4 framleiðslu á skammtaháðan hátt á A23187 plús PMA örvuðum KU812 frumum. Þessar niðurstöður benda til þessakteósíðgæti verið góður kandídat til meðferðar við ýmsum ofnæmissjúkdómum. Nákvæmt fyrirkomulag á bak við ofnæmisáhrif akteósíðs er viðfangsefni framtíðarrannsóknar.

Heimildir

1 Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Fenýletanóíð amínóglýkósíð og asýleruð fásykur með æðaslakandi virkni fráCistanche tubulosa. Bioorg Med Chem 2006; 14: 7468–7475

2 Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa N, Miyase T, Ueno A, Usmanghani K, Ahmad M. Ný fenýletanóíð glýkósíð fráCistanche tubulosa (SCHRENK) KRÓKUR. f. I. Chem Pharm Bull 1987; 35: 3309–3314

3 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Áhrif afCistanche tubulosa útdráttur á ýmsum heilasjúkdómum. Matarstíll 21 2008; 12:24–26

4 Tanaka J, Su MH, Shimoda H. Aðgerðir gegn öldrunCistanche tubulosaútdráttur. Matarstíll 21 2008; 12:27–29

5 Tanaka J, Kikuchi M, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Fegurð og hárvaxtarvirkni Cistanche tubulosa þykkni. Matarstíll 21 2008; 12:29–32

6 Tanaka J, Shan SJ, Su MH, Shimoda H. Áhrif fituefnaskiptaCistanche tubulosa útdráttur. Matarstíll 21 2008; 12:30–33

7 Yoshizawa F, Deyama T, Takizawa N, Usmanghani K, Ahmad M. Innihaldsefni Cistanche tubulosaSchrenk (Hook) f. I I. Einangrun og uppbygging nýs fenýletanóíð glýkósíðs og nýs neolignan glýkósíðs. Chem Pharm Bull 1990; 38: 1927–1930

8 Xiong Q, Tezuka Y, Kaneko T, Li H, Tran LQ, Hase K, Namba T, Kadota S. Hindrun á nituroxíði með fenýletanóíðum í virkum átfrumum. Eur J Clin Pharmacol 2000; 14: 137–144

9 Sahpaz S, Garbacki N, Tits M, Bailleul F. Einangrun og lyfjafræðileg virkni fenýlprópanóíð estera frá Marrubium vulgare. J Ethnopharmacol 2002; 79: 389–392

10 Hann WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ,ÞriPF. Echinacoside kallar fram æðaþelsháða slökun í ósæðarhringjum hjá rottum með NO-cGMP ferli. Planta Med 2009; 75: 1400–1404

11 Zhang HQ,WengXJ, Chen LL, Li X. Áhrif Cistanche tubulosa (Schenk) Whight acteoside á telomerasavirkni og ónæmi öldrunar músa. Chinese J Pharmacol Toxicol 2008; 22: 270–273

12 Lee JH, Lee JY, Kang HS, Jeong H, Moon CH, Whang WK, Kim SS, Sim C. Áhrif akteósíðs á losun histamíns og losun arakídonsýru í RBL-2H3 mastfrumum. J Arch Pharm Res 2006; 29: 508–513

13 Diaz AM, Abad MJ, Fernandez L, Silvan AM, Santos JD, Bermejo P. Fenýlprópanóíð glýkósíð frá Scrophularia scorodonia: in vitrobólgueyðandistarfsemi. Life Sci 2004; 74: 2515–2526

14 Beaven MA, Metzger H. Merkjaflutningur með Fc viðtökum: FcεRI tilfellið. Immunol Today 1993; 14: 222–226

15 Srivastava D, Arora N, Singh BP.Núverandi ónæmisfræðilegar aðferðir til að meðhöndla ofnæmiskvef og berkjuastma. Inflamm Res 2009; 58: 523–536

16 Pelletier C, Guerin-Marchand B, Iannascoli F, Marchand B, David AW, Blank U. Sérstakar merkjaleiðir í stjórnun TNF-mRNA nýmyndunar og TNF-seytingar í RBL-2H3 mastfrumum örvuðum í gegnum háa -sækni IgE viðtaka C. Inflamm Res 1998; 47: 493–500

17 Schiwartz LB, Lewis RA, Seldin D, Austen KF. Sýrir hýdrólasar og tryptasi úr seytukyrni dreifðra lungnamastfrumna manna. J Immunol 1981; 126: 1290–1294

18 Cheong H, Choi EJ, Yoo GS, Kim KM, Ryu SY. Desacetylmatricarin, ofnæmislyf fráTaraxacum Platycerium. Planta Med 1998; 64: 577–578

19 Ortega E, Schweitzer-Stenner R, Pecht I. Hugsanlegar stefnumörkun ákvarðar seytingarmerki sem framkallast af samsöfnun IgE viðtaka á mastfrumum. EMBO J 1988; 7: 4101–4109

20 Funaba M, Ikeda T, Abe M. Afkornun í RBL-2H3 frumum: stjórnun með calmodulin ferli. Cell Biol Int 2003; 27: 879–885

21 Ohno Y, Tanno K, Yamauchi K, Takishima T. Genatjáning og framleiðsla æxlisdrepsþáttar af basófílískri hvítblæðisfrumulínu (RBL-2H3) hjá rottum með IgE viðtaka kveiki. Ónæmisfræði 1990; 70: 88–93

22 Butterfield JH, Weiler D, Dewald G, Gleich GJ. Stofnun óþroskaðrar mastfrumulínu frá sjúklingi með mastfrumuhvítblæði. Leuk Res 1988; 12: 345–355

23 Hosoda M,YamayaM, SuzukiT, YamadaN, Kamanaka M, Sekizawa K, Butterfield JH,Watanabe T, Nishimura H, Sasaki H. Áhrif nashyrningsveirusýkingar á histamín- og cýtókínframleiðslu frumulína úr mastfrumum manna og basófíla. J Immunol 2002; 169: 1482–1491

24 Galli SJ, Kalesnikoff J, Grimbaldeston MA, Piliponsky AM, Williams CM, Tsai M.. Mastfrumur sem „stillanlegar“ áhrifa- og ónæmisstýrandi frumur: nýlegar framfarir. Annu Rev Immunol 2005; 23: 749–786

25 Galli SJ, Gordon JR, Wershil BK. Cýtókínframleiðsla með mastfrumum og basófílum. Curr Opin Immunol 1991; 3: 865–872

26 YamadaP, Isoda H, Han J,TaloreteTP,AbeY. Hamlandi áhrif fulvínsýru sem er unnin úr kanadískuSphagnummó við losun efnamiðlara af RBL-2H3 og KU812 frumum. Biosci Biotechnol Biochem 2007; 71: 1294–1305

27 Aase F, Arna, S. Dantrolene kemur í veg fyrir frumueiturhrif á glútamat og Ca^{plús 2}losun frá innanfrumugeymslum í ræktuðum heilaberki taugafrumum. J. Neurochem 1991; 56: 1075–1078

28 Yamada P, Zarrouk M, Kawasaki K, Isoda H, Hindrandi áhrif ýmissa Túnis ólífuolíu á losun efnamiðlara og cýtókínframleiðslu af basófílum frumum. J Ethnopharmacol 2008; 116: 279–287

29 Kim Y, Lee YS, Hahn JH, Choe J, Kwon HJ, Ro JY, Jeoung D.Hýalúrónsýra miðar á CD44 og hindrar FcεRI boð sem felur í sér PKCδ, Rac1, ROS og MAPK til að hafa ofnæmisvaldandi áhrif. Mol Immunol 2008; 45: 2537–2547

30 Saracoglu I, Inoue M, Calis I, Ogiwara Y. Rannsóknir á innihaldsefnum með frumudrepandi og frumueyðandi virkni tveggja tyrkneskra lækningajurtaPhlomis ArmeniacaogScutellaria salviifolia. Biol Pharm Bull 1995; 18: 1396–1400

31 Sugisawa A, Umegaki K. Lífeðlisfræðilegur styrkur (-)-epigallocatechin -3-O-gallat (EGCg) kemur í veg fyrir litningaskemmdir af völdum hvarfgjarnra súrefnistegunda í WIL2-NS frumum. J Nutr 2002; 132: 1836–1839

32 Suzuki Y, Yoshimaru T, Matsui T, Inoue T, Niide O, Nunomura S, Ra C. Fc epsilon RI merkjasending mastfrumna virkjar innanfrumuframleiðslu vetnisperoxíðs: hlutverk í stjórnun kalsíumboða. J Immunol 2003; 171: 6119–6127

33 Oka T, Sato K, Hori M, Ozaki H, Karaki H. FcεRI krosstengingar-framkallað aktínsamsetning miðlar kalsíumboðum í RBL-2H3 mastfrumum. Br J Pharmacol 2002; 136: 837–846 34Tasaka K, Mio M, Okamoto M. Innanfrumu losun kalsíums framkölluð af histamínlosandi lyfjum og hömlun þess með sumum ofnæmislyfjum. Ann Allergy 1986; 56: 464–469

35 Horiuti TM, Zaitsu M, Lambert KC, Grady JJ, Estes DM, Curran EM, Brooks td, WatsonCS, Goldblum RM. Estrógen auka myndun og losun ofnæmismiðla frá mastfrumum með því að auka kalsíum innanfrumu. J Allergy Clin Immunol 2005; 115: 189

36 Suzuki M, NakamuraT, Iyoki S, Fujiwara A,WatanabeY, Mohri K. Isobe K, Ono K,Yano S. Skýring á ofnæmisvirkni curcumintengdra efnasambanda með sérstakri tilvísun til andoxunarvirkni þeirra. Biol Pharm Bull 2005; 28: 1438–1443

37 Koo KA, Kim SH, Oh TH, Kim YC. Akteósíð og aglýkónar þess vernda frumræktun rottubarkarfrumna gegn örvunareitrun af völdum glútamats. Life Sci 2006; 79: 709–716

38 Lin LC,WangYH, Hou YC, Chang S, LiouKT,Chou YC,WangWY,Shen YC. Hamlandi áhrif fenýlprópanóíð glýkósíða og iridoid glúkósíða á framleiðslu sindurefna og tjáningu b2 integríns í hvítfrumum manna. J Pharm Pharmacol 2006; 58: 129–135

39 Kim M, Shichijo M, Miura T, Serizawa I, Inagaki N, Nagai H. ca^{2 plús}og próteinkínasa C boð um losun histamíns og súlfídóleukótríena frá ræktuðum mastfrumum manna. Biochem Biophys Res Commun 1999; 257: 895–900

40 Senyshyn J, Baumgartner RA, Beaven MA. Quercetin gerir RBL-2H3 frumur næmir fyrir fjölbasískum mastfrumuseytingarefnum með aukinni tjáningu á G_iGTP-bindandi prótein tengd fosfólípasa C boðleið. J Immunol 1998; 160: 5136–5144

41 Lau CW, Chen ZY, Wong CM, Yao XQ, He ZD, Xu HX, Huang Y. Vekkt æðaþelsmiðlaða slökun með akteósíði í ósæð hjá rottum: Hlutverk æðaþels [Ca^{2 plús}] I og nituroxíð/hringlaga GMP feril. Life Sci 2004; 75: 1149–1157

42 Paul WE, Seder RA, Plaut M. Lymphokine og cytokine framleiðsla með FcεRI frumum. Adv Immunol 1993; 53:1–29

43 Jeong HJ, Hong SH, Lee DJ, Park JH, Kim KS, Kim HM. Hlutverk Ca^{2 plús}á TNF- og IL-6 seyti frá RBL-2H3 mastfrumum. Cell Signal 2002; 14: 633–639

Cistanche tubulosa þykkni