Að sigrast á ónæmisbrest með Allogrooming
Oct 19, 2023
Einföld samantekt:
Við könnuðum hvort tvær náskyldar termítategundir eru ólíkar með tilliti til félagslegrar eða einstaklingsbundins ónæmis gegn tveimur tegundum sjúkdómsvaldandi sveppa, sem öllum var safnað frá sama stað. Niðurstöður okkar benda til þess að gagnkvæm snyrting (allogrooming) sé mjög áhrifarík til að takmarka banvænar sýkingar að því marki að það geti bætt upp fyrir tiltölulega veikar einstakar ónæmisvörn. Eftir að sýkla hefur fundist nota termítar aðra stefnu til að fjarlægja félagslega og takmarka útbreiðslu smitsjúkdóma og koma í staðinn saman til að hreinsa hver annan. Breytileiki í styrk þessa hegðunarviðbragða gefur til kynna blæbrigðarík viðbrögð við ógnunarstigi.
cistanche viðbót kostir-auka friðhelgi
Ágrip:
Allogrooming virðist vera nauðsynleg hjá mörgum félagslegum dýrum til að vernda gegn venjubundinni útsetningu fyrir sníkjudýrum. Hjá félagslegum skordýrum virðist mikilvægt að fjarlægja sjúkdómsvaldandi útbreiðsluefni úr naglaböndunum áður en þau geta hafið smitandi hringrás. Fyrir neðanjarðartermíta nær þetta til sveppagróa sem oft finnast í jarðvegi, eins og Metarhizium conidia, sem geta fljótt spírað og farið í gegnum naglaböndin. Við könnuðum hvort munur sé á því að treysta á félagslegt og meðfædd ónæmi hjá tveimur náskyldum neðanjarðartermítum til verndar gegn banvænum sýkingum af tveimur Metarhizium tegundum sem hafa komið fyrir á staðnum. Niðurstöður okkar benda til þess að tiltölulega veikt meðfædd ónæmi í einni termíttegund sé bætt upp með viðvarandi allogrooming. Þetta felur í sér aukna samsvörun til að bregðast við þéttni keiludýra sem endurspegla venjubundnari mengun á naglaböndum sem og mikilli húðmengun sem kallar fram nettengda neyðarviðbrögð.
Leitarorð:
félagslegt friðhelgi; meðfædd ónæmi; skordýrasjúkdómar; viðvörunarhegðun; endastöð
cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið
Smelltu hér til að skoða Cistanche Enhance Immunity vörur
【Biðja um meira】 Netfang:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
1. Inngangur
Félagsleg varnaraðferðir geta verið mjög áhrifaríkar til að vinna gegn næmi fyrir smitsjúkdómum þrátt fyrir að félagslyndið styðji útbreiðslu hans [1,2]. Hjá termítum og maurum virðist þróun árangursríkra félagslegra aðferða ónæmisvarnar hafa slakað á sértækum þrýstingi á einstaka meðfædda ónæmiskerfi [3-6]. Eftir að sýkla hefur fundist mun hættan á sjúkdómum í félagslegum skordýrum ráðast af virkni meðfæddra framlínuvarna, sem fela í sér líkamlegar hindranir gegn sýkingu. Margir sveppasýklar framleiða ókynhneigð gró (conidia) sem geta farið beint í gegnum skordýrahúðin. Félagslegar ónæmisvarnir sem hjálpa til við að vernda naglaböndin, þar með talið samsöfnun og seytuð sveppalyf, virðast vera sérstaklega mikilvæg hjá termítum til varnar gegn Metarhizium spp [7–9]. Metarhizium conidia eru alls staðar í jarðveginum sem margir termítar fara í gegnum á meðan þeir leita að fæðu og ná styrk sem heldur stöðugri ógn af sýkingu [10]. Termítar sem sækja fæðu, eins og tegundir af ættkvíslinni Reticulitermes, fara í gegnum jarðveginn til að stækka svið nýlenda sinna og fá aðgang að mörgum fæðustöðum, sem venjulega eru viðarauðlindir sem hvíla á yfirborði jarðvegsins [11]. Neðanjarðarnet nýlendna þeirra geta náð yfir tugi metra, innihaldið yfir hundrað þúsund einstaklinga og náð yfir hundrað nýlendum á hektara [12]. Þeir þróuðust frá forföður með nýlendur bundnar við eitt stykki viðar [13,14]. Þessi umskipti hefðu haft í för með sér aukna kynni af rándýrum, sýkla og keppinautum og fallið saman við þróun hollrar sannrar verkamannastéttar sem venjulega sleppir beinni æxlun. Bætt hreinlæti hefur líklega verið mikilvægt fyrir þessi umskipti og síðari geislun og núverandi vistfræðilegan árangur termíta, sem framlag þeirra til rotnunar viðar getur verið meira en niðurbrot örvera [15,16] og virðast vera í stakk búnir til að stækka hratt á heimsvísu þegar hitastig hækkar [17] . Við umskipti yfir í fæðuleit, slökun á sértækum þrýstingi á meðfædda ónæmisgenin féll saman við aukningu þess á tveimur genum sem framleiða seytt sveppaeyðandi prótein [6]. Þessi prótein virðast vera nauðsynleg til að fjarlægja sveppasýpur með allogrooming. Andstæður sértækur þrýstingur á þætti einstakra meðfæddra og félagslegra varnarferla í fortíðinni bendir til þess að áfram sé aðlögunarviðskipti í því að treysta termíta á einstaklingsbundið og félagslegt friðhelgi til verndar gegn sveppasjúkdómum. Þetta er stutt af þeirri athugun að meðfædd ónæmisgenatjáning er lægri í hópum en einstaklingar Reticulitermes-starfsmanna sem hafa verið útsettir fyrir Metarhizium conidia [18]. Allogrooming dregur úr þörfinni á að virkja innra ónæmiskerfi. Í þessari rannsókn könnuðum við mun á félagslegu og meðfæddu ónæmi hjá tveimur tegundum neðanjarðartermíta gegn tveimur staðbundnum tegundum Metarhizium sem hittast á náttúrulegan hátt. Metarhizium tegundirnar voru einangraðar úr jarðvegi undir eða við hliðina á trjábolum sem termítum var safnað í. Termíttegundunum tveimur, Reticulitermes virginicus og Reticulitermes flavipes, var safnað frá sama stað í Maryland. Þrátt fyrir að þeir séu kvíðir, finnast þeir oft leita við hlið hvort annars eða jafnvel stundum í sama stokknum. Intersértæk árásargirni milli starfsmanna leiðir oft til banvænna sára í Petri fat örvandi prófum [19]. Sveppaeyðandi virkni húðþvotta starfsmanna R. virginicus hefur áður reynst áhrifaríkari til að óvirkja Metarhizium conidia en þvotta frá R. flavipes starfsmönnum [20]. Þetta bendir til þess að þrátt fyrir að þessir tveir termítar séu náskyldir og lendi í sömu sýkla, þá gætu þeir verið mismunandi hvað þeir treysta á einstaklingsbundið eða félagslegt friðhelgi. Við notuðum samanburðaraðferð til að kanna hvort það sé munur á því að treysta á og samþætta félagslegt og meðfætt friðhelgi og hvort hugsanlegt skipti á milli þeirra tveggja. Aukið félagslegt friðhelgi getur tengst minna áhrifaríku meðfæddu ónæmiskerfi, sem getur falið í sér virkni seyttra sveppalyfja og öfugt. Veikara einstaklingsbundið friðhelgi getur verið bætt upp með virkara félagslegu friðhelgi. Rannsakað var hvort að verkamenn á seint stigi termíta í hópum af tólf manna, pörum eða einhleypingum lifðu af eftir að þeir höfðu verið smitaðir af sveppum frá annað hvort Metarhizium robertsii eða Metarhizium brunneum. Hópar 12 starfsmanna voru í stutta stund útsett fyrir stórum skammti af sveppnum. Þessi hugsanlega banvæni styrkur veldur svipuðum hegðunarviðbrögðum og sést þegar termítar lenda í grómyndandi líki, sem í sumum tilfellum kallar fram verulega aukningu á viðvörunarsvörun sem leiðir til hraðra sveifluhreyfinga á lengd, LOMs [21-23]. Tíðni LOMs á fyrstu 12 mínútunum eftir að termítar eru útsettir fyrir keilum af mismunandi stofnum og tegundum Metarhizium er jákvæð fylgni við tíðni kvista við samruna. LOM, sem er auðveldara að mæla en allogrooming, er því hægt að nota sem óbeinan mælikvarða á allogrooming stig. Uppgötvun sveppsins virðist seinka þar til yfirborð termíta er mengað af keiludýrum, sem bendir til þess að greiningarviðtakar sem tengjast munnhlutum séu mikilvægir fyrir upphaf hækkaðrar viðvörunar og algrooming. Pör og einburar voru útsettir fyrir litlum skömmtum af sveppnum sem er líklegra til að endurspegla magn váhrifa sem termítar verða fyrir þegar þeir byggja sýningarsal í gegnum jarðveginn, öfugt við bein kynni við grómyndandi lík. Ólíkt stökum termítum eru termítapör næstum alveg ónæm fyrir banvænum sýkingum við þennan skammt á 10 dögum. Til að stríða í sundur félagslegt og meðfædd ónæmi við þennan lága skammt, voru pör af termítum aðskilin á mismunandi tímapunktum stuttu eftir áföll með sveppasýkingum, og eftirlifun þessara para var borin saman við einbura sem höfðu engin tækifæri til félagslegra samskipta eftir sveppaáskoranir. Allogrooming og LOMs sáust fyrir aðskilnaðartímapunkta termítpara. Að auki var sveppaeyðandi virkni óhreinsaðra útdrátta úr heilum termítum prófuð til að meta frekar mun á meðfæddu ónæmi milli termíttegundanna tveggja sem svar við sveppategundunum tveimur.
Kostir cistanche tubulosa-styrkja ónæmiskerfið
2. Aðferðir
2.1. Lærðu lífverur
Termítunum R. flavipes og R. virginicus, og sveppunum M. brunneum og M. Roberts, var safnað úr síðvaxtar laufskógi í Baltimore-sýslu (Pleasant Hills og Monkton), Maryland. Termíttegundir voru auðkenndar með því að nota intra- og interspecific agonism assays [19] og hvatbera rRNA raðir [4]. Metarhizium tegundirnar voru einangraðar úr jarðvegssýnum nálægt söfnunarstöðum termíta (<30 cm) using a baiting technique with Tenebrio molitor larvae [24]. The conidia and mycelia of two clonal lines of the species were used for DNA purification with a QIAGEN DNeasy Blood and Tissue kit. The 50 regions of translation elongation factor 1-alpha were PCR-amplified using PCR primers EF1T and EF2T [25]. These regions were Sanger-sequenced (Psomagen, Rockville, MD) for species identification. Foraging groups of R. flavipes and R. virginicus (>1000) og viðnum sem þau voru að fóðra í var safnað saman og geymt í plastílátum við dimm, rök skilyrði við 25 ◦C. Termítum af sömu tegund var safnað frá stöðum sem voru aðskildir með að minnsta kosti 60 m, sem er venjulega nóg til að tryggja að söfn séu frá mismunandi nýlendum [12]. Þessi aðskildu söfn eru nefnd nýlendur hér að neðan. Termítum var safnað sumarið 2018 og 2019 fyrir tilraunir með 12 manna hópa sem og in vitro tilraunir með termít hráþykkni og 2021 og 2022 fyrir tilraunir með pör og einhleypa. Termítar voru notaðir í tilraunum sínum innan 4 mánaða frá söfnun. Starfsmenn voru fjarlægðir varlega úr viðarbitum og þeim haldið í hópum með 12 55 mm þvermál petrídiskum sem fóðraðir voru með vættum síupappír (Whatman 1) í 24 klst í umhverfisljósi áður en þeir voru notaðir í tilraunir okkar. Þetta gerði þeim kleift að aðlagast ljósi og hreinsa húðflöt þeirra af rusli fyrir sveppa. Við tókum ekki hermenn með þar sem þeir snyrta ekki hreiðurfélaga, eru 1–2% af nýlendunni og finnast ekki stöðugt í fæðuleitarhópum.
2.2. Eftirlifandi og viðvörunarviðbrögð fyrir tólf manna hópa
Hópar 12 starfsmanna R. flavipes eða R. virginicus voru útsettir fyrir stórum skammti af 10 6 conidia mL−1 af 0.05% Tween 80 (MilliporeSigma , Burlington, MA, Bandaríkjunum) eða 0,05% Tween 80 fyrir stýringar. Tween 80 var innifalið til að hjálpa til við að brjóta upp kekki af keiluhúðum við undirbúning sviflausnanna. Daginn fyrir þessar meðferðir voru allir 12 termítarnir merktir með litlum punkti af litaðri enamelmálningu á bakhlið kviðar þeirra svo hægt væri að bera kennsl á þá. Allogrooming fjarlægði málninguna úr nokkrum einstaklingum, en samt var hægt að bera kennsl á þessa einstaklinga við andlátið með því að kanna þá sem lifðu af og með náttúrulegum einstaklingsbreytingum hjá starfsmönnum, svo sem hversu dökkur litur kviðsins var. Termítarnir sem notaðir voru fyrir hverja endurtekningu af 12 smituðum termítum og viðmiðum voru frá mismunandi nýlendum. Fimm nýlendur voru notaðar fyrir bæði R. flavipes og R. virginicus (n=480 starfsmenn). Tilraunir með M. Roberts nýlendum voru endurteknar eftir þrjá mánuði til að prófa hvort samkvæmni lifði af. Alls voru 60 endurtekningar af 12 eða 11 termítum (n=709). Í 11 endurteknum dó termít áður en sveppasýkingin kom í ljós, sem virtist vera vegna meðhöndlunar við málningarmerkingu. Termítar voru útsettir fyrir keiludýrum sem voru unnin úr klónarækt annaðhvort M. Roberts eða M. brunneum. Starfsfólki var bætt í 1,5 ml glös sem innihéldu 500 µL af þynningaþynningum, eða 0,05% Tween 80 fyrir viðmið, með lítilli plasttrekt og hrist varlega í 10 sekúndur til að tryggja algjöra niðurdýfingu. Starfsmennirnir voru síðan settir á síupappír til að gleypa umfram vökva, fluttir yfir í 55 mm þvermál Petri diska sem voru fóðraðir með vættum síupappír (Whatman 1), og myndband tekið upp í 12 mínútur. Fylgst var með dánartíðni daglega í tvær vikur. Dauðir einstaklingar voru fjarlægðir, yfirborðssótthreinsaðir með 70% etanóli og settir á rakan síupappír í Petri diska (55 mm) sem haldið var við 24 ◦C og 100% raka til staðfestingar á Metarhizium sýkingu (grænn múskardínvöxtur eftir 3-4 daga). Heildarfjöldi LOM sem sást í myndböndunum á 12 mínútum var skorinn fyrir hvern termít. LOMs stóðu á milli 2–7 sek. og þurftu að hafa stöðvast og síðan byrjað aftur til að skora sem aðskildar atburðir [23].
2.3. Survivorship og Allogrooming fyrir pör og einhleypa
Lifun termítapöra var borin saman við einbura eftir útsetningu fyrir litlum skammti (104 conidia mL−1 ) af conidia sem olli ekki of mikilli dánartíðni og endurspeglar líklega styrk sem termítar mæta þegar þeir fara í gegnum jarðveg [10] . Pör og einhleypir voru borin saman til að mæla lifun sem félagsleg varnaraðferðir veita. Hópar 12 starfsmanna voru upphaflega ögraðir með eða án sveppa eins og lýst er hér að ofan, að því undanskildu að keiludýrasviflausnir með um það bil 107 mL-1 konídíur voru útbúnar í 0,1% Tween 80 og hrærðar kröftuglega áður en þær voru þynntar með dauðhreinsuðu vatni í 104 mL-1. Tween 80 var ekki innifalið í þynningunum þar sem hægt var að halda sviflausnum einstakra keilnalaga í lágum styrkleika og vegna þess að yfirborðsvirka efnið getur truflað viðloðun keilulaga við naglaböndin. Þessir einstaklingar voru ekki málningarmerktir. Strax eftir meðferðir og áður en termítar fengu tækifæri til að hafa samskipti, var þeim skipt í pör eða eintök í holum 24-brunns plastfrumuræktunarplatna (CELLTREAT Scientific, Pepperell, MA). Hver brunnur var klæddur með vættum síupappír (Whatman 1). Fyrir hverja termíta/sveppasamsetningu (n=4) voru fjögur termítapör aðskilin í staka eftir 15 mín., 2 klst., 5,5 klst., 8 klst. og 27 klst. (n=160), og fyrir hvern termít/sveppasamsetning 12 termítar sem aldrei höfðu tækifæri til að hafa samskipti voru aðgreindir í sveppameðhöndlaða eða samanburðareininga (n=96). Þessum einstöku termítum var einnig skipt í 24-brunnplötur klæddar með síupappír. Í kjölfarið var fylgst með dánartíðni termítanna á tíu dögum og látnir einstaklingar fjarlægðir til staðfestingar á sýkingu af völdum Metarhizium. Ein nýlenda var notuð fyrir bæði R. flavipes meðhöndlaðir með M. robertsii eða M. brunneum og R. virginicus meðhöndlaðir með M. robertsii eða M. brunneum (n=256). Sex ómeðhöndluð pör voru einnig geymd í 24-brunnplötum í 10 daga fyrir hverja tegund. Sértilraun með sömu nýlendum var lögð áhersla á að skrá samvistunartíma fyrir aðskilnaðartíma pöranna eftir 15 mín, 2 klst, 5,5 klst, 8 klst og 27 klst. Sex mismunandi pör af hverri termíttegund voru meðhöndluð með hverjum sveppum eða vatni fyrir viðmiðunarhópa og skorað fyrir allgrooming í 15 mínútur fyrir aðskilnaðartímapunkta (n=180). Allogrooming atburðir voru skornir þegar munn-í-líkam snerting milli tveggja termíta fól í sér hreyfingu munnhluta (þreifingar) og lengd hvers óslitins samrunatilviks var skráð. Allogrooming var skorað af einum áhorfanda sem var blindur fyrir hvaða meðferð termítar höfðu fengið. LOMs voru einnig skorin en voru hverfandi og ekki notuð í greiningunni. Ekki var fylgst með sjálfshirðu.
Kostir cistanche tubulosa-styrkja ónæmiskerfið
2.4. In vitro sveppaeyðandi virkni
Tólf verkamenn frá 5 R. flavipes eða R. virginicus nýlendum voru kaldir óhreyfðir í 1,5 ml Eppendorf glös og 12 0 µL af köldu, dauðhreinsuðu vatni var bætt í hvert rör. Starfsmennirnir af báðum tegundum sem notaðir voru í þessari rannsókn voru um það bil jafnstórir (lengd 4–5 mm). Termítin voru gerð einsleit með plaststöpli og útdrátturinn var skilinn í skilvindu við 16,000 g í 2 mín. Flotvatnið var sótthreinsað með 0,22 µm Ultrafree síum (MilliporeSigma, Burlington, MA, Bandaríkjunum). Tíu µL af síuvökvanum var ræktað í 24 klst. með tíu µL sem innihélt 100 keilur af M. robertsii eða M. brunneum og 20 µL af 100 µg ml-1 ampicillíni til að forðast bakteríumengun enn frekar. Viðmiðunarhlutir innihéldu 10 µL af dauðhreinsuðu vatni í stað óhreinsaðs útdráttar. Tveimur endurteknum fyrir hverja ræktaða blöndu var dreift á kartöfludextrósa agar (PDA) sem bætt var við 50 µg ml-1 ampicillíni (60 mm Petrí diskar) og ræktað við RT í myrkri í 4-5 daga. Sveppaeyðandi virkni var mæld með því að bera saman nýlendumyndandi einingar (CFU) í meðhöndlun á hráþykkni við samanburðarhópa.
2.5. Tölfræði
Kaplan-Meier áætlanir um meðallifunartíma voru notaðar til að bera saman lifunargetu í pörum. Hættuhlutföll dauða (HR) voru reiknuð út með Cox aðhvarfsgreiningu. Við notuðum Cox aðhvarf til að kanna mun á dánartíðni milli einstaklinga sem sýna LOMs eða sýna ekki LOMs á meðan við stjórnuðum fyrir öðrum flokkabreytum (meðhöndlun eða eftirlit með sveppum, tegundum sveppa, tegundum termíta, upprunabyggð). LOMs voru flokkuð sem fjarverandi eða til staðar hjá einstaklingum vegna tíðni útlægra og skorts á eðlilegu ástandi. Í lifunargreiningu með termítapörum og einhleypingum byggðist HR á samanburði á pörum sem fengu keiludýr (aðskilin á mismunandi tímapunktum) og einhleypingum sem fengu keiludýr. Þessar HRs veita því mælikvarða á lifun sem félagslegar varnaraðferðir veita á meðan þær stjórna einstökum varnaraðferðum. Tengsl milli tíma sem varið er sem par og breytinga á HR voru mæld með Pearson fylgni. Dreifing LOMs á mismunandi meðferðir var borin saman við Kruskal-Wallis próf með Bonferroni leiðréttingum fyrir margþættar prófanir til að bera saman pör. Meðaltal CFU eða tímalengd allogrooming atburða var borið saman við ANOVA próf með Bonferroni leiðréttingum til að bera saman pör. Við notuðum IBM SPSS tölfræði (útgáfa 28) fyrir tölfræðiprófin.
3. Úrslit
3.1. Eftirlifandi og viðvörun tólf manna hópa sem eru áskoranir
The Cox regression model of survivorship that included categorical variables for fungal treatment, LOMs, termite species, fungi species, and a colony of origin was significant (Chi-square = 246.29, df = 12, p < 0.001). Challenged termites were 9.28 times more likely to die than untreated termites (Wald = 143.05, p < 0.001) while controlling for the other variables. Termites that displayed LOMs (n = 422) were 1.52 times more likely to survive (Wald = 8.30, p = 0.004) than individuals that did not display LOMs (n = 286). R. virginicus workers were 2.08 times more likely to die than R. flavipes workers (Wald = 6.31, p = 0.012). Fungal species did not contribute significantly to the model (Wald = 0.841, p = 0.359). The colony of origin contributed significantly to the model (Wald = 50.16, p < 0.001), which is consistent with previously reported colony variation in Reticulitermes resistance to Metarhizium infections [24]. Survivorship did not differ between the same colony when the experiment was repeated 3 months later with workers that were exposed to M. Roberts (Breslow pairwise comparison, Chi-square = 0.342, p = 0.559). Most deaths in the challenged termites were attributable to Metarhizium infection (>90% staðfesting). Fyrir smitandi termíta með M. Roberts sáust 129 dauðsföll meðal 237 einstaklinga og meðallifunartími R. virginicus (9,10 dagar) var marktækt lægri en fyrir R. flavipes (10. 98 dagar)(Breslow=10.05, df=1, bls=0.002) (Mynd 1). Fyrir smitandi termíta með M. brunneum sáust 79 dauðsföll meðal 120 einstaklinga og meðallifunartími R. flavipes (9,70 dagar) var lægri en fyrir R. virginicus (10,68 dagar) en ekki marktækt (Breslow=2 .74, df=1, bls=0.098). Dreifing LOMs (Mynd 2) meðal sveppa- og samanburðarmeðferða var marktækt mismunandi (Kruskal–Wallis=176.897, df=5, p < 0.001). Tíðni LOMs var ekki marktækt frábrugðin M. brunneum meðferðum og viðmiðunaraðferðum þeirra fyrir R. flavipes (leiðrétt p=0.097) og R. virginicus (leiðrétt p=1.000 ). Hins vegar var tíðni LOMs marktækt meiri fyrir M. Roberts meðferðir samanborið við viðmið fyrir R. flavipes (leiðrétt p < 0,001) og R. virginicus (leiðrétt p < 0,001) (mynd 2). Fyrir M. Roberts meðferðina var tíðni R. flavipes LOMs marktækt hærri en R. virginicus LOMs (leiðrétt p < 0,001). Hins vegar, fyrir M. brunneum meðferðina, var tíðni R. flavipes LOMs ekki marktækt frábrugðin R. virginicus LOMs (leiðrétt p=1.000). Öfugt við M. brunneum leiddu hópar af 12 termítum sem fengu M. Roberts conidia til marktækrar hegðunarsvörunar.
3.2. Eftirlifandi áskorunarpör og einhleypa
Lifun termítapöra aðskilin á mismunandi tímum stuttu eftir sýklaárás var borin saman við eftirlifun smitaðra einhleypinga með hættuhlutfall dauða (HRs). HR upp á 1 samsvarar jafnri eftirlifun í aðskildum pörum og einhleypingum á tíu dögum. Gildi minna en eitt benda til þess að dánartíðni sé minni í aðskildum pörum samanborið við einbura. Fylgnin milli tíma sem varið er sem pari og minnkunar á HR var aðeins marktæk fyrir R. flavipes sem voru meðhöndlaðir með annað hvort M. Roberts (r=−0.978, p=0.{ {7}}04) eða M. brunneum (r=−0.983, bls=0.003), og ekki fyrir R. virginicus sem er meðhöndlaður með hvoru tveggja M. Roberts (r=-0,643, p=0.242) eða M. brunneum (r=-0,812, p=0.095). Þetta endurspeglast einnig í R2 gildum frá línulegri aðhvarfsmynd sem sýnd er á mynd 3 (tíminn var log-umbreyttur fyrir útreikning á Pearson fylgni og R2 gildum). Ekkert dauðsfall kom fram hjá ómeðhöndluðum pörum (6 pör fyrir hverja termítategund) og eitt dauðsfall af 16 meðhöndluðum pörum (4 pör fyrir hverja termíta/sveppasamsetningu) sem aldrei voru aðskilin á 10 dögum.
Mynd 1. Survivorship fyrir hópa af 12. Rf samsvarar R. flavipes, Rv með R. virginicus, Mr með M. robertsii og Mb með M. brunneum. Marktækur munur á lifun fyrir pörsamanburð var byggður á Breslow prófum (almenn Wilcoxon próf). * Marktækur munur á meðferðum, NS enginn marktækur munur á meðferðum (bls< 0.025 Bonferroni adjusted α). The distribution of LOMs (Figure 2) among fungal and control treatments was significantly different (Kruskal–Wallis = 176.897, df = 5, p < 0.001). The frequency of LOMs was not significantly different between M. brunneum treatments and their respective controls for R. flavipes (adjusted p = 0.097) and R. virginicus (adjusted p = 1.000). However, the frequency of LOMs was significantly greater for M. robertsii treatments compared to their respective controls for R. flavipes (adjusted p < 0.001) and R. virginicus (adjusted p < 0.001) (Figure 2). For the M. robertsii treatment, the frequency of R. flavipes LOMs was significantly greater than R. virginicus LOMs (adjusted p < 0.001). However, for the M. brunneum treatment, the frequency of R. flavipes LOMs was not significantly different from R. virginicus LOMs (adjusted p = 1.000). In contrast to M. brunneum, groups of 12 termites challenged with M. robertsii conidia resulted in a significant behavioral response.
Mynd 1. Survivorship fyrir hópa af 12. Rf samsvarar R. flavipes, Rv með R. virginicus, Mr með M. robertsii og Mb með M. brunneum. Marktækur munur á lifun fyrir pörsamanburð var byggður á Breslow prófum (almenn Wilcoxon próf). * Marktækur munur á meðferðum, NS enginn marktækur munur á meðferðum (bls< 0.025 Bonferroni adjusted α). For the survivorship of pathogen-challenged single termites (Figure 4), 47 deaths were observed among 48 individuals, and the mean survival time for R. flavipes (4.21 days) was significantly lower than for R. virginicus (6.17 days)(Breslow, chi-square = 33.927, df = 1, p < 0.001). This relationship held for both species of fungi: For M. robertsii exposure, the mean survival time for R. flavipes (4.25 days) was significantly lower than for R. virginicus (5.83 days) (chi-square = 16.133, df = 1, p < 0.001); For M. brunneum exposure, the mean survival time for R. flavipes (4.17 days) was significantly lower than for R. virginicus (6.50 days) (chi-square = 20.994, df = 1, p < 0.001). 3.3. Antifungal Activity of Crude Extracts The two species of fungi were analyzed separately (the viability of conidia on PDA differs between the two species). For M. robertsii, mean colony-forming units (CFUs) among fungal and control treatments were significantly different (F = 18.08, df = 2, p < 0.001) (Figure 5a). Crude extracts of R. virginicus but not R. flavipes workers showed significant antifungal activity against M. robertsii compared to the control (adjusted p < 0.001 and p = 1.000, respectively). The antifungal activity of R. virginicus extracts against M. robertsii was significantly greater than the antifungal activity of R. flavipes extracts against M. robertsii (adjusted p < 0.001). For M. brunneum, mean CFUs (Figure 5b) among fungal and control treatments were significantly different (F = 27.26, df = 2, p < 0.001). Crude extracts of R. virginicus but not R. flavipes showed significant antifungal activity against M. brunneum compared to the control (adjusted p < 0.001 and p = 0.072, respectively). The antifungal activity of R. virginicus extracts against M. brunneum was significantly greater than the antifungal activity of R. flavipes against M. brunneum (adjusted p < 0.001).
3.3. Sveppaeyðandi virkni hráþykkni
Sveppategundirnar tvær voru greindar í sitt hvoru lagi (lífvænleiki keiludýra á PDA er mismunandi milli tegundanna tveggja). Fyrir M. robertsii voru meðaltal nýlendumyndandi einingar (CFU) meðal sveppa- og viðmiðunarmeðferða marktækt mismunandi (F=18.08, df=2, p < 0 .001) (Mynd 5a). Hráir útdrættir af R. virginicus en ekki R. flavipes verkamönnum sýndu marktæka sveppaeyðandi virkni gegn M. robertsii samanborið við samanburðarhópinn (leiðrétt p < 0.001 og p=1.{{ 10}}, í sömu röð). Sveppaeyðandi virkni R. virginicus útdráttar gegn M. robertsii var marktækt meiri en sveppaeyðandi virkni R. flavipes útdráttar gegn M. robertsii (leiðrétt p < 0,001). Fyrir M. brunneum voru meðaltal CFUs (Mynd 5b) meðal sveppa- og viðmiðunarmeðferða marktækt mismunandi (F=27.26, df=2, p < 0.001). Hráar útdrættir af R. virginicus en ekki R. flavipes sýndu marktæka sveppaeyðandi virkni gegn M. brunneum samanborið við samanburðarhópinn (leiðrétt p < 0,001 og p=0}.072, í sömu röð). Sveppaeyðandi virkni R. virginicus útdráttar gegn M. brunneum var marktækt meiri en sveppaeyðandi virkni R. flavipes gegn M. brunneum (leiðrétt p < 0,001).
Mynd 2. Viðvörunarviðbrögð við sveppaáskorun. Boxplots tákna dreifingu LOMs (LOMs skoruðu í 709 málningarmerktum einstaklingum). Kassar samsvara fjarlægðinni milli efri og neðri fjórðungs frá miðgildi (IQR). Whiskers samsvara 1,5 × IQR. Hringir og stjörnur sýna útlínur umfram 1,5 × IQR eða 3 × IQR, í sömu röð. Mismunandi bókstafir gefa til kynna verulegan mun á dreifingu fyrir sveppa- og viðmiðunarmeðferðir (Bonferroni leiðrétt). Rf samsvarar R. flavipes, Rv við R. virginicus, Mr við M. robertsii og Mb við M. brunneum.
3.4. Samskipti meðal áskorenda para
Tíðni samsvörunarlota minnkaði verulega með sveppaáskorunum (áskorunarmeðaltal {{0}}.55, eftirlitsmeðaltal=8.80, t=−4.461, p. < {{20}}.001). Hins vegar jókst meðallengd samrunameðferðar marktækt með sveppaáskorunum (áskorunarmeðaltal=19,01 s, samanburðarmeðaltal=5,62 s, t=4.876, p < 0,001). Tímalengd allogrooming lota fyrir hverja víxlverkun milli termítapöra var marktækur mismunandi eftir meðferðum og viðmiðunaraðferðum (F=7.166, df=5, p < 0.001) (Mynd 6). Tímalengd söfnunar fyrir hvern atburð var marktækt hækkuð hjá R. flavipes pörum sem fengu M. robertsii (leiðrétt p < 0,001) eða M. brunneum (leiðrétt p=0.037) miðað við viðmið en ekki hjá R. virginicus pörum sem fengu meðferð með M. robertsii (leiðrétt p=1.000) eða M. brunneum (leiðrétt p=1.000) miðað við stýringar.
Mynd 3. Lifun tveggja termíta á móti einum var borin saman við hættuhlutföll dauða (n=80 pör, 96 einburar). Rf samsvarar R. flavipes, Rv við R. virginicus, Mr við M. robertsii og Mb við M. brunneum. Tími var log umbreytt fyrir útreikning á R2 gildum.
Mynd 4. Lifun stakra termíta eftir sveppaárás (n=96). Rf samsvarar R. flavipes, Rv við R. virginicus, Mr við M. robertsii og Mb við M. brunneum. Sjá texta fyrir upplýsingar um tölfræðilegan mun á meðferðum. Marktækur munur á lifun fyrir pörsamanburð var byggður á Breslow prófum (almenn Wilcoxon próf). * Marktækur munur á milli meðferða (p < 0.025 Bonferroni leiðrétt).
Mynd 5. Hráþykkni sveppaeyðandi virkni gegn M. robertsii (a) og M. brunneum (b). Gildi fyrir ofan súlur tákna meðaltal CFUs (±SD), og mismunandi stafir gefa til kynna verulegan mun (Bonferroni leiðrétt). Rf samsvarar R. flavipes og Rv samsvarar R. virginicus. Við greininguna voru notaðar tvær endurtekningar frá 5 nýlendum úr hverri termíttegund, 6 endurtekningar fyrir Rf-viðmiðunina og 2 endurtekningar fyrir Rv-viðmiðunina.
Mynd 6. Tímalengd allogrooming fyrir hverja samskipti (n=161 allogrooming atburðir). Gildi fyrir ofan súlur tákna meðaltímalengd samskiptasamskipta (±SD) og aðgreindar stafasamsetningar gefa til kynna verulegan mun (Bonferroni leiðrétt). Rf samsvarar R. flavipes, Rv við R. virginicus, Mr við M. robertsii og Mb við M. brunneum.
4. Umræður
R. flavipes byggir á félagslegum varnaraðferðum gegn staðbundnum sveppasýklum í meira mæli en R. virginicus. Hjá R. flavipes-starfsmönnum sem fengu aðra hvora Metarhizium-tegundina, var sterk neikvæð fylgni á milli þess tíma sem tveir termítar eyddu saman og líkum á dauða miðað við smitaða staka termíta. Hættuhlutfall dauðsfalla miðað við smitaða staka termíta var helmingað á um það bil tveimur klukkustundum (mynd 3). Snemma félagsleg samskipti virðast því vera mikilvæg til að lifa af þegar starfsmenn R. flavipes lenda í lágum styrk Metarhizium conidia. Aftur á móti sýndu starfsmenn R. virginicus veika fylgni milli tíma sem tveir termítar eyddu saman og líkinda þeirra á dauða. Einnig, öfugt við R. virginicus, jók verkamannapör R. flavipes marktækt lengd samsöfnunarkasta eftir sveppaárás (Mynd 6). Líklegt er að greining á könglum á naglaböndum hreiðurfélaga hafi leitt til þessarar aukningar. Áhrifaríkari fjarlæging á keiluhúðum af yfirborði húðarinnar með því að lengja lengd samsvörunarlota virðist skýra frá yfirburða félagslegu friðhelgi R. flavipes. Niðurstöður okkar benda einnig til þess að R. virginicus byggir á einstökum meðfæddum varnaraðferðum gegn staðbundnum sveppasýklum í meira mæli en R. flavipes. Dánartíðni einstakra R. flavipes-verkamanna sem fengu aðra hvora Metarhizium-tegundina var marktækt hærri en dánartíðni R. virginicus-starfsmanna (Mynd 4). Áður hefur verið sýnt fram á að sveppaeyðandi virkni R. virginicus-starfsmanns húðþvotta gegn Metarhizium conidia sé verulega sterkari en virkni R. flavipes-starfsmanna [20]. Sveppaeyðandi virkni óhreinsaðra útdrátta úr heilum termítum var einnig sterkari hjá R. virginicus en í R. flavipes (mynd 5). Þessir útdrættir innihalda efnasambönd úr samlífi í þörmum, sem, ásamt termít sveppalyfjum, geta einnig stuðlað að því að útrýma innteknum keðlingum [26]. Breytileiki í hættuhlutföllum dauðsfalla og veik fylgni þeirra við aðskilnaðartíma hjá R. virginicus starfsmönnum er í samræmi við meiri háð meðfæddum ónæmisvarnarháttum sem eru mismunandi milli einstaklinga frekar en félagslegu ónæmiskerfi. R. flavipes sýndi einnig meiri háð félagslegu friðhelgi þegar hópar 12 starfsmanna voru í stutta stund útsett fyrir háum styrk M. robertsii conidia. Strax eftir útsetningu fyrir M. robertsii conidia sýndu báðar termíttegundirnar hækkuð LOM. Þessi viðvörunarvirkni var marktækt meiri hjá R. flavipes en R. virginicus (Mynd 2), og ónæmi gegn banvænum sýkingum var einnig marktækt meira í R. flavipes en R. virginicus (Mynd 1). Aftur á móti var hækkuð en veik viðvörunarsvörun við M. brunneum conidia. Í samræmi við þessa niðurstöðu hefur áður verið sýnt fram á að hækkuð viðvörun í R. flavipes sem svar við keiludýrum ólíkra Metarhizium stofna og tegunda tengist aukinni allogrooming og lifun [23]. Starfsmenn R. flavipes kunna að hafa lægri þröskuld en starfsmenn R. virginicus til að þekkja og bregðast sameiginlega og á áhrifaríkan hátt við húðmengun með M. robertsii conidia. M. robertsii, sem er algengasta Metarhizium tegundin á rannsóknarsvæðinu okkar [24], gæti verið ógn við R. flavipes sem krefst sterkrar félagslegrar ónæmissvörunar vegna þess að þessi termít hefur tiltölulega veika meðfædda ónæmisvörn gegn því. Virkni sveppaeyðandi efnasambanda sem tengjast seytingu munnvatnskirtla er líklega nauðsynleg fyrir einstakar varnir sem fram koma í þessari rannsókn [20]. Þessi efnasambönd eru til staðar á yfirborði starfsmanna fyrir sveppaáskoranir þar sem þau eru sett fram með formúluformi og eru stöðugt dreift með grunnstigi allogrooming, sem því samþættir einstaklings- og félagslegar varnir. Þessi gestalt inniheldur líklega litla defensín-líka sveppaeyðandi peptíð termicín, sem er seytt inn í munnvatnskirtilinn og er afar mikilvægt fyrir vörn gegn banvænum sýkingum af völdum Metarhizium [27]. Rannsókn á R. flavipes og R. virginicus frá sama söfnunarstað í Maryland og notaður var í þessari rannsókn leiddi í ljós að termicín stóðu nýlega frammi fyrir sértæku sópi sem leiddi til minnkunar á núkleótíðfjölbreytni og þessi lækkun var meiri hjá R. flavipes en R. virginicus [28].
cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið
Sópið kann að hafa verið og heldur mögulega áfram að vera alvarlegra fyrir R. flavipes vegna þess að R. virginicus hefur áhrifaríkari meðfædda ónæmiskerfi sem dró úr trausti þess á termicínum til varnar gegn nýlegum sveppafaraldri. Að öðrum kosti gætu aðlögunartakmarkanir á þróun termíta (skortur á erfðabreytileika) hafa skilið R. flavipes með veikari vopn í ljósi nýs sveppafaraldurs. Takmörkun á aðlögunarbreytingum á termicínum undir sterkum sértækum þrýstingi er einnig áberandi í Australian Nasutitermes [29]. Stókastíska ferlið við fjölföldun gena virðist hafa losað þessa þvingun í mismunandi nasut ætternum, sem leiddi til endurtekinnar þróunar tveggja termicína með mismunandi sameindahleðslu. Þetta kann að hafa gagnast sveppavörn vegna þess að tveir skautar með mismunandi hleðslueiginleika takmarka möguleika á þróun sveppaþols gegn þeim. Termítar sem sýna viðvörun (LOMs) eftir útsetningu fyrir stórum skammti af keiludýrum voru ólíklegri til að deyja á tveimur vikum en einstaklingar sem sýndu enga viðvörun. LOMs eru jákvæð fylgni við R. flavipes verkamannasamsöfnun og allogrooming [23], sem bendir til þess að einstaklingar sem sýna viðvörun í þessari rannsókn hafi óskað eftir meiri snyrtingu frá hreiðurbræðrum. Sjaldan er greint frá LOMs í rannsóknum sem rannsaka Metarhizium sýkingar í termítum og hefur verið sleppt því að þau gegni hlutverki við að gefa merki um útsetningu fyrir sýkla [30]. Hins vegar gæti verið saknað þeirra vegna þess að þeir koma ekki fram hjá einangruðum einstaklingum, eru ekki að verulegu leyti framkallaðir af ákveðnum stofnum og tegundum af Metarhizium, taka um það bil 3 mínútur eftir áskorun áður en þeir stigmagnast og hverfa eftir um það bil 30 mínútur [22,23]. Niðurstöður okkar benda til þess að LOMs sendi frá sér neyðarviðvörun eftir útsetningu fyrir stórum skammti af keiludýrum, sem greinast meðan þeir eru í rýmingu. Hins vegar eru LOMs ekki nauðsynlegar fyrir fyrirbyggjandi hegðunarsvörun þar sem lengd allogrooming jókst eftir útsetningu í litlum skömmtum þegar LOMs voru hverfandi.
5. Ályktanir
LOMs virðast vera hluti af neyðarviðbrögðum við mikilli húðmengun sem notar netsamskipti til að auka fljótt fjarlægingu og eyðingu flestra keiludýra áður en þeir hafa möguleika á að festast og spíra, sem tekur um það bil 12 klukkustundir [31]. Líklegt er að þessi neyðarviðbrögð verði orkulega dýr. Aukið félagslegt friðhelgi R. flavipes sem svar við M. robertsii getur verið aðlögunarviðskipti sem R. virginicus þarf ekki að gera í sama mæli vegna þess að það hefur skilvirkari meðfædda ónæmiskerfi. Þegar þeir standa frammi fyrir litlu magni af útsetningu fyrir sýkla sem starfsmenn sem leita að fæðu þurfa reglulega að þola, virðist allogrooming einnig bæta upp fyrir veikt meðfædd ónæmiskerfi.
Heimildir
1. Cremer, S.; Draga, CD; Fuerst, MA Félagslegt friðhelgi: Tilkoma og þróun sjúkdómsverndar á nýlendustigi. Annu. Séra Entomol. 2018, 63, 105–123. [CrossRef] [PubMed] 2. Cremer, S.; Armitage, SA; Schmid-Hempel, P. Félagslegt friðhelgi. Curr. Biol. 2007, 17, R693–R702. [CrossRef] [PubMed]
3. Evans, JD; Aronstein, K.; Chen, YP; Hetru, C.; Imler, JL; Jiang, H.; Kanost, M.; Thompson, GJ; Zou, Z.; Hultmark, D. Ónæmisleiðir og varnaraðferðir í hunangsbýflugum Apis mellifera. Skordýr Mol. Biol. 2006, 15, 645–656. [CrossRef] [PubMed]
4. Harpur, BA; Zayed, A. Hröðun á meðfæddum ónæmispróteinum í félagslegum skordýrum: Aðlögunarhæf þróun eða slaka á þvingun? Mol. Biol. Evol. 2013, 30, 1665–1674. [CrossRef] [PubMed]
5. Hann, S.; Sieksmeyer, T.; Che, Y.; Mora, MAE; Stiblik, P.; Banasiak, R.; Harrison, MC; Šobotník, J.; Wang, Z.; Johnston, PR; o.fl. Vísbendingar um minni fjölbreytileika og virkni ónæmisgena við þróun termíta. Frv. R. Soc. Ser. B 2021, 288, 20203168. [Krossvísun]
6. Bulmer, MS; Stefano, AM Termite eusociality og andstæður sértækur þrýstingur á félagslegt og meðfædd friðhelgi. Hegðu þig. Ecol. Sociobiol. 2022, 76, 1–12. [Krossvísun]
7. Yanagawa, A.; Shimizu, S. Viðnám termítsins, Coptotermes formosanus Shiraki gegn Metarhizium anisopliae vegna snyrtingar. BioControl 2007, 52, 75–85. [Krossvísun]
8. Rosengaus, RB; Traniello, JF; Bulmer, MS Vistfræði, hegðun og þróun sjúkdómsþols í termítum. In Biology of Termites: A Modern Synthesis; Bignell, DE, Roisin, Y., Lo, N., Ritstj.; Springer: London, Bretlandi, 2011; bls. 165–192.
9. Zhukovskaya, M.; Yanagawa, A.; Forschler, BT Snyrtihegðun sem leið til varnar skordýrasjúkdóma. Skordýr 2013, 4, 609–630. [Krossvísun]
10. Milner, RJ Val og lýsing á stofnum Metarhizium anisopliae til að stjórna skordýrum í jarðvegi í Ástralíu. Í líffræðilegri eftirliti með engispretum og engispretum; Lomer, CJ, Prior, C., Ritstj.; CAB International: Wallingford, Bretlandi, 1991; bls. 200–207.
11. Traniello, JF; Leuthold, RH Hegðun og vistfræði fæðuleitar í termítum. Í Termites: Þróun, félagsskapur, samlífi, vistfræði; Abe, T., Bignell, DE, Higashi, M., Higashi, T., Abe, Y., Eds.; Springer: Dordrecht, Hollandi, 2000; bls. 141–168.
12. Vargo, E.; Husseneder, C. Líffræði neðanjarðar termíta: Innsýn úr sameindarannsóknum á Reticulitermes og Coptotermes. Annu. Séra Entomol. 2009, 54, 379–403. [Krossvísun]
13. Abe, T. Þróun lífstegunda í termítum. Í þróun og aðlögun í líffræðilegum samfélögum; Kowana, S., Connell, JH, Hidaka, T., Ritstj.; University of Tokyo Press: Tókýó, Japan, 1987; bls. 128–148.
14. Shellman-Reeve, JS Litróf samfélagshyggju í termítum. Í Þróun félagslegrar hegðunar í skordýrum og arachnids; Choe, JC, Crespi, BJ, Ritstj.; Cambridge University Press: Cambridge, Bretlandi, 1997; bls. 52–93.
15. Griffiths, HM; Eggleton, P.; Hemming-Schroeder, N.; Swinfield, T.; Woon, JS; Allison, SD; Coomes, DA; Ashton, LA; Parr, CL Kolefnisflæði og gangverki skógar: Aukið niðurbrot dauðviðar í skýlum sem falla á trjáfalli í suðrænum regnskógum. Glob. Chang. Biol. 2001, 27, 1601–1613. [Krossvísun]
16. Guo, C.; Tuo, B.; Ci, H.; Yan, ER; Cornelissen, JH Kvik endurgjöf meðal hagnýtra eiginleika trjáa, termítastofna og veltu dauðviðar. J. Ecol. 2021, 109, 578–1590. [Krossvísun]
17. Zanne, AE; Flores-Moreno, H.; Powell, JR; Cornwell, WK; Dalling, JW; Austin, AT; Classen, AT; Eggleton, P.; Okada, KI; Parr, CL; o.fl. Termítnæmi fyrir hitastigi hefur áhrif á hnattræna rotnun viðar. Vísindi 2022, 377, 1440–1444. [CrossRef] [PubMed]
18. Liu, L.; Wang, W.; Liu, Y.; Sun, P.; Lei, C.; Huang, Q. Áhrif allogrooming hegðunar á einstaklingsbundið ónæmi í neðanjarðartermitinu Reticulitermes chinensis (Isoptera: Rhinotermitidae). J. Skordýr Sci. 2019, 19, 6. [CrossRef] [PubMed]
19. Polizzi, JM; Forschler, BT Intra- og interspecific örvandi í Reticulitermes flavipes (Kollar) og R. virginicus (Banks) og áhrif vettvangs og hópstærðar í rannsóknarstofuprófum. Insectes Sociaux 1998, 45, 43–49. [Krossvísun]
20. Hamilton, C.; lá, F.; Bulmer, MS Fyrirbyggjandi seyti fyrir neðanjarðar termít og ytri sveppavarnir. J. Insect Physiol. 2011, 57, 1259–1266. [Krossvísun]
21. Rosengaus, RB; Jórdanía, C.; Lefebvre, ML; Traniello, JFA Sýklaviðvörunarhegðun í termíti: Nýtt form samskipta í félagslegum skordýrum. Sci. Nat. 1999, 86, 544–548. [Krossvísun]
22. Myles, TG Viðvörun, samsöfnun og vörn með Reticulitermes flavipes sem svar við náttúrulega einangrun af Metarhizium anisopliae. Félagslíffræði 2002, 40, 243–256.
23. Bulmer, MS; Franco, BA; Fields, EG Subterranean termite félagsviðvörun og hreinlætisviðbrögð við sveppasýkingum. Skordýr 2019, 10, 240. [CrossRef]
24. Denier, D.; Bulmer, MS Breytileiki í næmni neðanjarðar termíta fyrir banvænum sýkingum af staðbundnum Metarhizium jarðvegi einangruðum. Insectes Sociaux 2015, 62, 219–226. [Krossvísun]
25. Bischoff, JF; Rehner, SA; Humber, RA Multilocus phylogeny af Metarhizium anisopliae ætterni. Mycologia 2018, 101, 512–530. [Krossvísun]
26. Rosengaus, RB; Schultheis, KF; Yalonetskaya, A.; Bulmer, MS; DuComb, WS; Benson, RW; Thottam, JP; Godoy-Carter, V. Symbiont-afleiddur -1, 3-glúkanasar í félagslegu skordýri: Gagnkvæmni umfram næringu. Framan. Örverur. 2014, 5, 607. [CrossRef] [PubMed]
27. Hamilton, C.; Bulmer, MS Sameindasveppavarnir í neðanjarðar termítum: RNA truflun sýnir in vivo hlutverk endastöðvar og GNBP gegn náttúrulegum sýkingum. Dev. Samgr. Immunol. 2012, 36, 372–377. [CrossRef] [PubMed]
28. Bulmer, MS; lá, F.; Hamilton, C. Aðlagandi þróun í neðanjarðar termít sveppaeyðandi peptíðum. Skordýr Mol. Biol. 2010, 19, 669–674. [CrossRef] [PubMed]
29. Bulmer, MS; Crozier, RH Fjölföldun og fjölbreytt úrval meðal sveppaeyðandi termíta peptíða. Mol. Biol. Evol. 2004, 21, 2256–2264. [Krossvísun]
30. Moran, MN; Aguero, CM; Eyer, PA; Vargo, EL Björgunaráætlun í termíti: Starfsmenn sem verða fyrir sveppasýki eru sameinaðir aftur í nýlenduna. Framan. Ecol. Evol. 2022, 10, 840223. [Krossvísun]
31. Davis, HE; Meconcelli, S.; Radek, R.; McMahon, DP Termítar móta sameiginlega hegðunarviðbrögð sín út frá stigi sýkingar. Sci. Rep. 2018, 8, 14433. [Krossvísun]
