Nýr fenýletanóíð glýkósíð frá Cistanche Tubulosa (SCHRENK) KRÓKUR. FI

HIROMI KOBAYASHI. HIROKO OGUCHI, NOBUO TAKIZAWA, TOSHIO MIYASE, AKIRA UENO, KHAN USMANGHANI og MANSOOR AHMAD

Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Japan, Shizuoka College of Pharmacy,2-2-1 Oshika, Shizuoka- shi 422, Japan og lyfjafræðideild, lyfjafræðideild, University of Karachi, c Karachi-32, Pakistan

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com

Ágrip

Fjórir nýirfenýletanóíðglýkósíðtúbúlósíð A (II), B (VI), C (VII) og D (VIII), hafa verið einangruð úrCistanchetubulosa(SCHRENK) KRÓKUR. f. (Orobanchaceae), ásamt fjórum þekktumfenýletanóíðglýkósíð, echinakósíð (I), akteósíð (III), akteósíð hverfa (IV), og 2'-asetýlakteósíð (V). Mannvirki II, VI, VII og VIII voru stofnuð á grundvelli efnafræðilegra sönnunargagna og litrófsgagna. Efnasambönd VII og VIII hafa tri-asetýl ramnósýlhluta sem endasykurinn.

Cistanchefenýletanóíð glýkósíðHafa marga heilsubætur

Leitarorð:Cistanchetubulosa; Orobanchaceae; sníkjudýr planta;fenýletanóíð glýkósíð; túbúlósíð A; túbúlósíð B; túbúlósíð C; túbúlósíð D

Í röð okkar rannsókna á efnafræðilegum innihaldsefnum Cistanche spp. (Orobanchaceae), thefenýletanóíðTilkynnt hefur verið um glýkósíð1-3) og iridoid4) úr Cistanche salsa (CA MEY.) G. BECK. Þessi grein fjallar um fenýletanóíð glýkósíð frá Cistanche tubulosa (SCHRENK) HOOK. f. safnað í Pakistan. Cistanche tubulosa (SCHRENK) KRÓKUR. f.5) er sníkjudýr sem vex á rótum Salvadora og Calotropis spp., og kemur víða fyrir í Norður-Afríku, Arabíu, Vestur-Asíu til Pakistan og Indland. Öll plantan er notuð til lækninga í Pakistan sem lækning við niðurgangi og sár.6)

Við viljum nú tilkynna um einangrun fjögurra nýrrafenýletanóíðglýkósíð, nefnd túbúlósíð A (II), B (VI), C (VII) og D (VIII), auk fjögurra þekktra fenýletanóíð glýkósíða, echinacoside (I), acteoside (III), acteoside hverfa (IV) og 2' -asetýlakteósíð (V). Bygging þessara efnasambanda var ákvörðuð á grundvelli efnafræðilegra sönnunargagna og litrófsrannsókna.

FenýletanóíðGlýkósíðinncistanchegetur bólgueyðandi

Etanólútdrætti allrar plöntunnar var dreift í vatni. Þessi sviflausn var dregin út með etýlasetati og síðan með n-bútanóli mettuðu með vatni. n-bútanól leysanlegi hluti var litskiljaður á pólýamíð og kísilgelsúlur og látinn fara í háafkasta vökvaskiljun (HPLC) í röð til að gefa áttafenýletanóíðglýkósíð(I-VIII).

Efnasambönd I, III, IV og V voru einangruð sem formlaust duft, sem sýndu svipað litróf og echinacoside, 1) acteoside, 1) acteoside ísomer7) og 2'-asetýlakteósíð, 2) í sömu röð og voru auðkennd með beinum samanburði við ekta. sýni [þunnlagsskiljun (TLC), innrauð (IR), róteindakjarnasegulómun (1H-NMR) og kolefnis-13 kjarnasegulómun (13C-NMR) litróf].

Túbúlósíð A (II) var einangrað sem myndlaust duft, [ƒ¿]D{{0}}.7•‹ (MeOH), C37H48O21.3/2 H2O. IR litrófið gaf til kynna tilvist hýdroxýlhópa (3440 cm-1), samtengds esters (1705 cm-1), tvítengis (1634 cm-1) og arómatískra hringa (1608, 1522 cm-1), og útfjólubláa (UV) litrófið sýndi frásogshámark við 220, 250 sh, 292 sh og 334 nm. 1H-NMR litróf II sýndi merki um metýlhóp rhamnósa [6 1.07 (3H, d, J= 6 Hz)], metýlmerki asetoxýlhóps [{{27} }.98 (3H, s)], bensýlmetýlenróteindir [6 2.70 (2H, t, J= 7 Hz)], tvær glúkósa-anomerískar róteindir [6 4.32, 4,54 (1H hver, d, J= 8 Hz)], rhamnósa-anomerísk róteind [6 5.11 (1H, br s)], tvær transolefinískar róteindir [6 6.25 , 7,64 (1H hver, d, J= 16 Hz)] og arómatískar róteindir [6 6.5 7 .2 (6H)]. Við asetýleringu gaf II undir asetatið (IIa), sem var eins og dodeca asetatið af echinacoside (I). 13C-NMR litróf II var næstum eins og I, að undanskildum merkjum vegna glúkósa sem er tengdur beint við aglýkónið og asetoxýlhópinn [6 20.9 (CH3), 171.5 (C {{62) }})], sem bendir til þess að asetoxýlhópurinn sé tengdur við glúkósahlutann. Í 13C-NMR litrófinu á II, breytist asýleringin81 [-2.3 (C-1),-0.9 (C-2) og -1 .0 (C-3)] sáust við C-1, C-2 og C-3 í innri glúkósa með nákvæmum samanburði við litróf I, sem gefur til kynna að asetoxýlhópurinn er tengdur C-2 hýdroxýlhópnum í glúkósahlutanum í II. Við metanólýsu á II með asetýlklóríði í metanóli greindust metýlkaffat og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhól með TLC og HPLC. Súr vatnsrof II með 10 prósent brennisteinssýru gaf glúkósa og ramnósa í hlutfallinu 2 til 1.

Byggt á ofangreindum sönnunargögnum var uppbygging túbúlósíðs A ákvarðað vera 2-(3,4-díhýdroxýfenýl)etýl 0-aL-ramnópýranósýl-(1•¨3)- [ƒÀ-D-glúkópýranósýl-(1-6)]-(4-O-kaffioy1)-2-O-asetýl-fl-D-glúkópýranósíð (II).

Túbúlósíð B (VI) var einangrað sem myndlaust duft, [a]D,{{0}}.0•‹ (MeOH), C31 H38016, en 1H-NMR litróf þess sýndi nærveru alifatísks asetoxýlhóps [6 1.98 (3H, s)]. 13C-NMR litróf VI var mjög svipað og akteósíðhverfu (IV) en var örlítið frábrugðið í merkjum vegna glúkósahlutans og nærveru asetoxýlhópsins [6 20.9 (CH3), 171.6 ( C =0)]. Staðsetning asetoxýlhópsins í glúkósahluta VI var ákvörðuð út frá 13C-NMR litrófi hans með nákvæmum samanburði við það í IV.

Merkin C{{0}}, C-2 og C-3 í glúkósahlutanum sýndu asýleringarbreytingar (-2.5 (C-1 ),–0 .6 (C-2) ​​og -1.4 (C-3)], eins og í tilviki II, sem gefur til kynna að asetoxýhópurinn sé tengdur C{ {12}} hýdroxýlhópur glúkósahlutans í VI. Við asetýleringu gaf VI oktasetatið (VIa) sem var eins og óasetatið í IV. Við metanólýsu á VI með asetýlklóríði í metanóli, metýlkaffi og 3,{{ 14}}díhýdroxýfenetýlalkóhól greindist með TLC og HPLC. Súr vatnsrof VI með 10 prósent brennisteinssýru gaf glúkósa og ramnósa í hlutfallinu 1 á móti 1. Þessar niðurstöður leiddu til þess að við komumst að þeirri niðurstöðu að uppbygging túbúlósíðs B sé {{18} }(3,4-díhýdroxýfenýl)etýl 0-aL-ramnópýranósýl-(1-3)-(6-0-kaffioy1)- 2-0-aset143-D -glúkópýranósíð (VI).

Virka efnið íCistancheer meðgegn krabbameiniáhrif

Tubuloside C (VII) var einangrað sem myndlaust duft, [a],-104.8•‹ (MeOH), C43H54024 H20, en 1H-NMR litrófið sýndi nærveru fjögurra alifatískra asetoxýlhópa [{{7} }.80, 1.92, 1.95 og 2.08 (3H hvor, s)]. "C-NMR litróf VII var næstum eins og túbúlósíð A (II), sem býr yfir alifatískum asetoxýl hópi í innri glúkósa, nema merkin vegna rhamnose hlutans. Ennfremur, í 13C NMR litróf VII , asýleringarbreytingar') sáust í merkjum vegna C-2, C-3 og C-4 rhamnose einingarinnar með nákvæmum samanburði við gögnin fyrir II. Þar af leiðandi eru staðsetningarnar af fjórum asetoxýlhópum var ákvarðað að vera C-2 af innri glúkósa og C-2, C-3, C-4 í rhamnose hlutanum í VII. Við asetýleringu, VII gaf oktaasetatið sem var eins og túbúlósíð A undir asetati (IIa). Við metanólýsu á VII með asetýlklóríði í metanóli, greindust metýlkoffíat og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhól með TLC og HPLC. Sýra vatnsrof VII með 10 prósent brennisteinssýru gaf glúkósa og ramnósa í hlutfallinu 2 til 1.

Út frá ofangreindum niðurstöðum var uppbygging túbúlósíðs C ákvarðað vera 2-(3,4- díhýdroxýfenýl)etýl 2,3,4-trí-O-asetýl-aL-tamnópýranósýl- (1 - plús 3)-[/9-D-glúkópyranósýl-(1 - plús 6)]-(4-0-kaffioy1)-2-0-asetýl-fl-D -glúkópýranósíð (VII).

Túbúlósíð D (VIII) var einangrað sem myndlaust duft, [oc], -91.4 gráður (MeOH), C43H54023. H2O, þar sem 1H-NMR litróf sýndi nærveru fjögurra alifatískra asetoxýlhópa [6 1.81, 1.93, 1.96 og 2.09 (3H hver, s)]. Við asetýleringu gaf VIII heptaasetatið (VIIa), en 1H-NMR litróf þess sýndi átta alifatísk [6 1.87, 1.94, 1.96, 1.99, 2.10 (3H hver, s) og 2.02 (9H, s)] og þrjú arómatísk [6 2.27, 2.30 og 2.32 (3H hvert, s)] asetoxýl metýlmerki. 13C-NMR litróf VIII var næstum eins og túbúlósíð C (VII), fyrir utan merkin vegna p-kúmarsýruhlutans. Við metanólýsu á VIII með asetýlklóríði í metanóli greindust metýl p-kúmarat og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhól með TLC og HPLC. Súr vatnsrof VIII með 10 prósent brennisteinssýru gaf glúkósa og rhamnósa í hlutfallinu 2 til 1.

Byggt á þessum niðurstöðum var uppbygging túbúlósíðs D ákvarðað vera 2-(3,4- díhýdroxýfenýl)etýl 2,3,4-trí-O-asetýl-a-Lrhamnópýranósýl- (1•¨3)-[ƒÀ-D-glúkópýranósýki-](1→6)} (4-0-p-kúmar1)-2-0-asetýl-fl-D-glúkópýranósíð (VIII).

Margirfenýletanóíðglýkósíðeins og forsythoside A,' degree ) leucosceptoside A,7 isomar tynosidell) og svo framvegis, þar sem greint hefur verið frá rhamnose hluta sem endanlega sykur. Í þessum tilfellum er rhamnose-hlutinn ekki asetýleraður. Tubulosíð C (VII) og D (VIII) innihalda asetýlerað rhamnose hluta og eru fyrstu náttúrulegu efnasamböndin sem hafa þríasetýl rhamnose hluta sem tilkynnt er um.

Virka efnið íCistanchehefurtaugaverndandiáhrif

Tilraunakennt

Bræðslumark voru ákvörðuð á Mitamura örbræðslumarkstæki og eru óleiðrétt. Ljóssnúningur var mældur með JASCO DIP-140 stafrænum skautamæli. IR litróf voru skráð með Hitachi 270-30 innrauðum litrófsmæli og UV litróf með Hitachi 200-20 litrófsmæli. ' H-NMR og "CN MR litróf voru skráð með JEOL FX-90Q vél (89,55 og 22,5 MHz, í sömu röð). Efnafræðilegar breytingar eru gefnar upp á 6 (ppm) kvarðanum með tetrametýlsílani (TMS) sem innri staðall (s, singlet; d, doublet; t, triplet; br, breitt). Gas-vökvaskiljun (GC) var keyrð á Shimadzu GC-4CM tæki með logajónunarskynjara. HPLC var framkvæmd á a Hitachi 655A-11 vél. Kísilgel (Wako gel C-300, Wako Pure Chemical) var notað við súluskiljun. Kieselgel 60 F254 (Merck) forhúðaðar plötur voru notaðar fyrir TLC og greiningin var framkvæmd með því að úða 10 prósent H2SO4 fylgt eftir með upphitun.

Einangrun

Ferskar heilar plöntur af C. tubulosa (22 kg), sem safnað var í desember 1984, í Karachi, Pakistan, voru dregnar út með EtOH. Etanólútdrátturinn var sviflausn í H2O og dreginn út með EtOAc og síðan með n-BuOH mettuð með H20. n-BuOH útdrátturinn (99,1 g) var frásogaður á Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) súlu og plastefnið var skolað með Me0H eftir að hafa verið þvegið með H20 . Me0H elúatið (15,4g) var litskiljað á pólýamíð C-200 (Wako Pure Chemical) súlu með því að nota H20 og síðan Me0H. Hluturinn sem skolaður var út með Me{{50}}H var þéttur til að gefa leif (fenólhrá glýkósíð) (8,0 g). Eftir endurtekna litskiljun á leifinni á kísilgeli með CHC13—MeOH—H20 (70: 30: 5) og HPLC með H2O—CH3CN eða H2O—MeOH leysikerfi, voru átta glýkósíð (I---VIII) einangruð. I, 230 mg; II, 200 mg; III, 240 mg; IV, 60 mg; V, 210 mg; VI, 100 mg; VII, 60 mg; VIII, 65 mg. Skilyrði fyrir HPLC: súla, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); leysir, I, II (17 prósent CH3CN), III, IV (20 prósent CH3CN), V (22 prósent CH3CN), VI (25 prósent CH3CN), VII (53 prósent MeOH), VIII (55 prósent MeOH); skynjari (UV), 220 nm; rennsli, 6,9 ml/mín.

Echinacoside (I)

Formlaust duft. IR 0,;,Eas,r, cm-1: 3400, 1690, 1625, 1600, 1518. 11-I-NMR (metanól-d4) 6: 1,09 (3H, d , J=6 Hz, CH3 af rhamnósa), 2,79 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4,29, 4,37 (1H hver, d, J{{ 28}} Hz, H-1 af glúkósa), 5,16 (1H, d, J=1 Hz, H-1 af ramnósa), 6,26 (1H, d, J{{38} } Hz, Ar-CH=CH-), 6.4-7.1 (6H, arómatískt H), 7.59 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH{{ 51}}CH-). 13C-NMR: Tafla I.

Tubuloside A (H)

Formlaust duft, [a]{{0}}.7 (c=1.08, Me0H). endaþarm. reiknað fyrir C371-14021 3/2H20: C, 51,93; H, 6,01. Fundið: C, 51,80; H, 5,81. IR vrtr, cm': 3440, 1732, 1705, 1634, 1608, 1522. UV An?" nm (log e): 220 (4,14), 250 sh (3,85), 292 sh (3,95), 334 (334). 1H-NMR (metanól-d4): sjá texta 13C-NMR: Tafla I.

Akteósíð (III)

Formlaust duft. IR v cm-1: 3420, 1696, 1634, 1606, 1520. 1H-NMR (metanól-d4) 5: 1,10 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af rhamnósa), 2,78 ( 2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4,36 (1H, d, J= 8 Hz, H-1 af glúkósa), 5,17 (1H, d, J=1 Hz, H-1 af rhamnósa), 6,25 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.{{ 40}}.1 (6H, arómatískt H), 7,58 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Tafla I.

Acteoside Isomer (IV)

Formlaust duft. IR v cm-1: 3280, 1686, 1624, 1602, 1512. 11-I-NMR (metanól-d4) 6: 1,26 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af rhamnósi), 2,77 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-Cl.2-I.2 4.33 (3H, d, J=8 Hz, H{ {26}} af glúkósa), 5,18 (1H, br s, H-1 af ramnósa), 6,28 (1H, d, 1=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.4-7.1 (6H, arómatískt H), 7.54 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Tafla I.

2'-asetýlakteósíð (V)

Formlaust duft. IR vT cm-1: 3450, 1735, 1705, 1640, 1610, 1535. 1H-NMR (metanól-d4) 6: 1,07 (3H, d, 1= 6 Hz, CH3 af rhamnósa), 1,99 (3H, s, OAc), 2,69 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4,50 (1H, d, J=8 Hz, H{{30 }} af glúkósa), 5,16 (1H, br s, H-1 af ramnósa), 6,25 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 6 .5-7.2 (6H, arómatískt H), 7,59 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Tafla I.

Tubuloside B (VI)

Formlaust duft, [{{0}}.0 gráðu (c= 1.05, Me0H). endaþarm. reiknað fyrir Cm H38016: C, 55,85; H, 5,75. Fundið: C, 55,91; H, 6.00. IR v:,111 cm-1: 3420, 1734, 1696, 1634, 1608, 1522. UV 4ear nm (log e): 220 (4,32), 246 sh (4,09), 292 sh), (4021 sh), (4. (4.31). 1H-NMR (metanól-d4) 6: 1,24 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af ramnósa), 1,98 (3H, s, OAc), 2,69 (2H, t, J= 7 Hz, Ar-CH2-), 4,48 (1H, d, J=8 Hz, H-1 af glúkósa), 6,32 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH - CH-), 6. 5-7.2 (6H, arómatískt H), 7.61 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Tafla I.

Tubuloside C (VII)

Formlaust duft, [a] - iO4.8© (c=1.86, ég0H). endaþarm. reiknað fyrir C43H54024 'H20: C, 53,08; H, 5,80. Fundið: C, 53,28; H, 5,68. IR v cm': 3440, 1748, 1634, 1608, 1522. UV 2" nm (log c): 220 sh (4.06), 250 sh (3.7), 292 sh (3.88), 333 (4.04). 1H-NMR). (metanól-d4) 6: 1,02 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af ramnósa), 1,80, 1,92, 1,95, 2,08 (3H hver, s, OAc), 2,70 (2H, t, J{ {57}} Hz, Ar-CH2-), 4,32, 4,56 (1H hver, d, J=8 Hz, H-1 af glúkósa), 5,02 (1H, br s, H-1 rhamnósa), 6,30 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.5-7.2 (6H, arómatískt H ), 7,66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-).13C-NMR: Tafla I.

Tubuloside D (VIII)

Formlaust duft, [a]P{{0}}.4 gráður (c= 1.85, Me0H). endaþarm. Reiknað fyrir C43H54023 'H20: C, 54.00; H, 5,90. Fundið: C, 54,10; H, 5,75. IR v:,111 cm-1: 3440, 1750, 1634, 1608, 1518. UV 2,',1,2" nm (log a): 228 (4.16), 292 sh (4.21), 302 sh (4,26), 318 (4,35). 11-I-NMR (metanól-d4) 6: 1.00 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af ramnósa), 1,81 , 1,93, 1,96, 2,09 (3H hvert, s, OAc), 2,70 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4,32, 4,53 (1H hvert, d, J{ {68}} Hz, H-1 af glúkósa), 5,03 (1H, br s, H-1 af ramnósa), 6,38 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.52-6.75 (3H, arómatískt H), 6.84 (2H, d, J= 9 Hz, H-3, H{{90 }} af p-kúmarsýru), 7,54 (2H, d, J=9 Hz, H-2, H-6 af p-kúmarsýru), 7,74 (1H, d, J =16 Hz, Ar-CH =CH-). 13C-NMR: Tafla I.

Asetýlering II og VII

Meðhöndlun á II eða VII (30 mg) með Ac20 (1 ml) og pýridíni (1 ml) við stofuhita yfir nótt, fylgt eftir með venjulegri uppvinnslu, gaf óhreint asetat, sem var hreinsað með litskiljun á kísilgeli með bensenasetoni (5:1) til að gefa undir asetatið (IIa) (25 mg) úr II eða oktaasetatið (22 mg) úr VII, sem litlausar nálar úr MeOH, bm 130-131 C. IR v cm ': 1775, 1660, 1523, 1450. 1H-NMR (CDC13) 6: 1,05 (3H, d, J= 6 Hz, CH3 af rhamnósa), 1,89, 1,96, 1,97, 2,01, 32H. s, OAc), 2,03 (9H, s, OAc x 3), 2,29 (3H, s, Ar-OAc), 2,31 (9H, s, Ar-OAc x 3), 2,88 (2H, t, J{{52 }} Hz, Ar-CH2-), 6,35 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH=CH-), 7.0-7,4 ( 6H, arómatískt H), 7,66 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-). Þessar vörur reyndust vera eins og dodecaacetate af echinacoside (I) með beinum samanburði (TLC, blandað mp, IR og 1H-NMR).

Asetýlering VI

Efnasamband VI (40 mg) var asetýlerað á sama hátt og lýst er fyrir II og hvarfafurðin var hreinsuð með litskiljun á kísilgeli með bensenasetoni (9:1) til að gefa oktaasetatið (VIa) (30 mg) sem myndlaust efni. duft. IR v cm': 1742, 1630, 1498. 1H-NMR (CDC13) 6: 1,14 (3H, d, J=6 Hz, CH3 af rhamnósa), 1,95, 2,03, 2,05, 2,09, 31 hver. , s, OAc), 2,27, 2,31 (6H hver, s, Ar-OAc x 2), 2,87 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 6,42 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 6.9-7.5 (6H, arómatískt H), 7.64 (1H, d, J= 16 Hz, Ar CH=CH-). VIa reyndist vera eins og óasetat akteósíðhverfu (IV) með beinum samanburði (TLC, IR og 11-1-NMR.

Asetýlering VIII

Efnasamband VIII (35 mg) var asetýlerað á sama hátt og lýst er fyrir II til að gefa heptaasetatið (VIIIa) (30 mg) sem myndlaust duft. IR v cm': 1760, 1638, 1604, 1510. 1H-NMR (CDC13) 6: 1,03 (3H; d, J= 6 Hz, CH3 af rhamnósa), 1,87, 1,94, 1,96, 1,196, 1,196, 1,199 3H hver, s, OAc), 2,02 (9H, s, OAc x 3), 2,27, 2,30, 2,32 (3H hver, s, Ar-OAc), 2,88 (2H, t, J=7 Hz, Ar -CH2-), 6,36 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 7.0-7.2(3H, arómatískt H) , 7,25 (2H, d, J=9 Hz, H-3, H-5 af p-kúmarsýru), 7,57 (2H, d, J=9 Hz, H -2, H-6 af p-kúmarsýru), 7,72 (1H, d, J= 16 Hz, Ar-CH =CH-).

Metanólýsla á II, VI, VII og VIII

Efnasamband II, VI, VII eða VIII (u.þ.b. 1 mg) var látið flæða með metanólískum 5% CH3COCl (2 ml) í 30 mín., og síðan voru hvarfefnin látin gufa upp. Sýnt var fram á tilvist metýlkaffaats og 3,4- díhýdroxýfenetýlalkóhóls í leifunum af II, VI og VII, og metýl p-kúmarati og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhóli í VIII, með TLC. [CHC13—MeOH (20: 1)] og HPLC [dálkur, TSK GEL LS-410AK (4 x 300 mm); leysir, H20—MeOH (4:6); skynjari (UV), 250 nm; rennsli, 1,0 ml/mín.]. Metýlkaffeat [R•¬ 0,20, tR (mín.) 10,8], metýl p-kúmarat [R•¬ 0,40, tR (mín.) 15,6], 3.4-díhýdroxýfenetýlalkóhól [R•¬ 0,06, tR (mín.) ) 2.8].

Sýra vatnsrof II, VI, VII og VIII

Lausn af glýkósíði (ca. 2 mg) í 10 prósent H2SO4 (1 ml) var hituð í sjóðandi vatnsbaði í 30 mín. Lausnin var látin fara í gegnum Amberlite IR-45 súlu og skolvatnið var þétt til að gefa leif, sem var minnkað með natríumbórhýdríði (u.þ.b. 3 mg) í 1 klst. Hvarfblandan var látin fara í gegnum Amberlite IR-120 súlu og þétt þar til hún varð þurr. Bórsýra var fjarlægð með eimingu með MeOH og leifin var asetýleruð með Ac2O (1 dropi) og pýridíni (1 dropi) við 100•Ž í 1 klst. Hvarfefnin voru gufuð upp. Glucitól asetat og ramnitól asetat greindust í hlutfallinu 2 á móti 1 frá II, VII og VIII, og 1 á móti 1 frá VI með GC. tR (mín): 2,0 (ramnitól asetat), 5,5 (glúsítól asetat). Skilyrði fyrir GC: súla, 1,5 prósent OV-17 (3 mm x 1,5 m); súluhiti, 180•Ž; burðargas, N2 (30 ml/mín).

Viðurkenning

Við erum þakklát prófessor Dr. SI Ali, grasafræðideild háskólans í Karachi, fyrir auðkenningu hans á plöntunni.

Tilvísanir og athugasemdir

1) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull., 32, 3009 (1984).

2) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull., 32, 3880 (1984).

3) a) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull., 33, 1452 (1985); b) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase og S. Fukushima, Yakugaku Zasshi, 106, 562 (1986); c) Idem, ibid., 106, 721 (1986).

4) a) H. Kobayashi og J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm. Bull., 32, 1729 (1984); c) Idem, ibid., 33, 3645 (1985).

5) E. Nasir og SI Ali, "Flora of West Pakistan," Vol. 98, Shamin Printing Press, Karachi, 1976, bls. 4.

6) SR Baquar og M. Tasnif, "Læknaplöntur í Suður-Vestur Pakistan," Vol. 3, Pakistan Council of Scientific and Industrial Research Bulletin/Monograph, Karachi, 1967, bls. 56.

7) T. Miyase, A. Koizumi, A. Ueno, T. Noro, M. Kuroyanagi, S. Fukushima, Y. Akiyama og T. Takemoto, Chem. Pharm. Bull., 30, 2732 (1982).

8) K. Yoshimoto, Y. Itatani og Y. Tsuda, Chem. Pharm. Bull., 28, 2065 (1980).

9) I. Kitagawa, HK Wang, M. Saito, A. Takagi og M. Yoshikawa, Chem. Pharm. Bull., 31, 698 (1983).

10) K. Endo, K. Takahashi, T. Abe og H. Hikino, Heterocycles, 16, 1311 (1981). 11) I. Calis, MF Lahloub, E. Rogenmoser og O. Sticher, Phytochemistry, 23, 2313 (1984).