Sameindavirki andmelanógenandi geduníns sem er dregið af Neem-tré
Mar 28, 2022
Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com
Hwang-Ju Jeon 1, Kyeongnam Kim 1, Chaeeun Kim 2, Myoung-Jin Kim 1, Tae-Oh Kim 3,4,5,† og Sung-Eun Lee 1,2,*,†
Ágrip:Melanogenese táknar röð ferla sem framleiða melanín, verndandi húðlitarefni (gegn útfjólubláum geislum), og ákvarðar húðlit manna. Efni sem draga úr melanínframleiðslu hafa alltaf verið eftirsótt á snyrtivörumarkaði vegna húðumhirðuáhuga, svo sem hvítunar. Helsti aðferðin við að hamla melanínframleiðslu er hömlun á tyrosinasa (TYR), lykilensími fyrir sortumyndun. Hér metum við ósvikinn (Ged), dæmigerð limonoid, fyrir virkni þess gegn sortumyndun. Melanínframleiðsla in vitro var örvuð af alfa-melanocyte-örvandi hormóni (-MSH) í B16F10 sortuæxlisfrumum músa. Ged minnkaði -MSH-örvaða melanín framleiðslu, hindrar TYR virkni og próteinmagn. Við staðfestum þessa niðurstöðu in vivo í sebrafiskalíkani fyrir sortumyndun. Engin merki voru um eiturverkanir og vansköpun sebrafiskahembryos meðan á þroska stóð í öllum meðhöndluðum styrkjum. Ged minnkaði fjölda framleiddra sebrafiska fósturvísa litarefnispunkta og melaníninnihaldi fósturvísa. Mjög virkur styrkur Ged (100 µM) var mun lægri en jákvæða samanburðurinn, kojínsýra (8 mM). Þess vegna gæti Ged verið heillandi frambjóðandi fyrir hvarfefni gegn sortumyndun.
Lykilorð: MITF; microphthalmia-tengdur umritunarþáttur; TYR; týrósínasi; DQ; dópakínón;TRP-1; týrósínasa-tengt prótein 1; TRP-2; tyrosinasa-tengt prótein 2; MC1R; melanókortín 1 viðtaka; -MSH; -melanocyte-örvandi hormón; ACTH; nýrnahettuhormón; ASP; prótein sem gefur merki; cAMP; hringlaga adenósín mónófosfat; CREB; cAMP svarþáttur
1. Inngangur
Melanín er myndað í sortukorninu, lysosome-líkum frumum sortufrumunnar. Í sortufrumunni er melanín framleitt í tveimur litarefnum, eumelanin og pheomelanin, sem tákna brúnt-svart og rautt-gult, í sömu röð [1]. Nýmyndun þessara melanínlitarefna byrjar frá forvera, L-týrósíni, með oxunarhvarfi L-týrósíns í efnasamband sem kallast dópakínón (DQ) og L-DOPA [2]. Í þessu oxunarþrepi virkar týrósínasi (TYR) sem hraðatakmarkandi ensím á heildarlífmyndun melaníns [2,3]. TRP-1og TRP-2, náskyld sortumyndunarpróteinum, hvetja eumelanin lífmyndunarferlið og koma á stöðugleika og örva TYR-virkni [1]. Ferlið við að framleiða melanínlitarefni (kallað sortumyndun) á sér stað í sortukornum sortufrumna, sem er formleganínmyndun og -geymsla [4]. Í merkjaleiðinni fyrir sortumyndun er melanocortin1 viðtakinn (MC1R) meðlimur G-próteintengdra viðtaka. MCIR er upphafspunktur fyrir boð um sortumyndun og er virkjað af MC1R örvum eins og -melanocyte-örvandi hormóni (-MSH), adrenocorticotropic hormón (ACTH) og agouti merkjaprótein (ASP) [1,2]. Virkjun á -MSH-MC1R boðleiðinni eykur styrk hringlaga adenósínmónófosfats (cAMP) og fosfórýlerar cAMP viðbragðsþáttinn (CREB). Fosfórýleruð CREB örvar próteinmagn microphthalmia-associated transcription factor (MITF), umritunarþáttar sem stjórnar melanín-nýmyndun-tengdum genum, TYR, tyrosinasa-tengt próteini-1 (TRP-1) og tyrosinasa-tengt próteini. -2 (TRP-2) með því að binda M-box þessara gena [1,5,6]. Meðal fimm melanókortínviðtaka hefur MC1R algengustu sortufrumurnar. Það stjórnar fyrst og fremst framleiðslu eumelaníns (svartbrúnt litarefni) með því að virkja MC1R þegar örvar þessa viðtaka, eins og a-MSH og ACTH, er skipt yfir í þennan viðtaka [2,4,7].
Þrátt fyrir að það sé munur á spendýrum og fiskum, hafa sebrafiskar afrit af MC5R og MC3R, sem lundafiskurinn hefur ekki [7] og þessi boðleið er enn til í sebrafiskum og virkar nákvæmlega eins og hún gerir í sortufrumum spendýra [7]. Fjöldi rannsókna á hömlun á litarefnismyndun melaníns hefur aukist vegna rannsóknarkosta þess, svo sem hraðrar þróunar hjá fósturvísum á fyrstu stigum og auðveldrar athugunar [8-11]. Í þessum fyrirbærum hafa margar fyrri rannsóknir leitt í ljós að hömlun á þessari boðleið dregur úr melanínframleiðslu og hefur fundið nokkra hemla, þar á meðal bisabolol-Angelone, 4-hýdroxý-3-metoxý kanelmaldehýð og dífenýl-metýlen-hýdrasín karbótíamín [12 –14].
Gedunin (Ged), vel þekktur hitalost prótein 90 hemill, er limonoid, sem finnst í ættkvíslum Meliaceae plöntunnar. Þessi limonoid er mikið fyrir, fyrst og fremst í eðli ungra indverskra Neem-trés (Azadirachta indica) ávaxta og hefur fjölbreytta líffræðilega virkni, þar á meðal krabbameinslyf, malaríudrepandi, bólgueyðandi, sykursýkislyf, ofnæmislyf, skordýraeyðandi, illgresiseyðandi og sveppaeyðandi [15-18]. Engar skýrslur eru til um verkun gegn sortuvaldandi áhrifum Ged.
Sem lyfja- eða snyrtivöruframbjóðandi til að meðhöndla melanín-tengda sjúkdóma eða húðlitabreytingar gæti Ged haft kosti vegna öruggra, náttúrulegra eiginleika plantna [19]. Svöruvaldandi áhrif Ged voru metin in vitro og in vivo með því að nota B16F10 sortuæxlafrumur úr músum og fósturvísa úr sebrafiskum, í sömu röð, til að finna viðeigandi vítungaefni sem er einn stærsti hluti snyrtivörumarkaðarins í atvinnuskyni. Samtímis, með sebrafiskum, bráð eiturhrif próf var einnig gert til að sýna hvernig Ged hefur mögulega áhrif á dýr.
2. Efniviður og aðferðir
2.1. Efni og hvarfefni
Ged var keypt frá Microsource Discovery Systems, Inc. (Gayloardville, CT, Bandaríkjunum). Melanogenesis örvandi, -MSH, and-melanogenic efnasamband og kojic sýra voru keypt frá Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Bandaríkjunum). Öll önnur hvarfefni voru hærri en sameindalíffræði.
2.2. Frumumenning
Sortuæxli-krabbameinsfrumulína í músum, B16F10, var fengin frá American TypeCulture Collection (ATCC, Manassas, VA, Bandaríkjunum) og ræktuð með 10 prósenta fóstursermi nautgripa (v/v) og penicillíni með Dulbecco-breyttum Eagle's media (GE) Healthcare, Chicago, IL, Bandaríkjunum) í rakaðri andrúmslofti með 5 prósent CO2. Frumur voru ræktaðar þar til samrennsli náði 80 prósentum og þeim skipt þrisvar í viku með skiptingarhlutfallinu 1:8. Frumur voru skoðaðar á 12 klst fresti og formfræðilegar breytingar voru athugaðar. Farafjöldi notaðra frumna var lítill.
2.3. Frumulífvænleikapróf
Til að meta fjölgunaráhrif Ged á B16F10 sortuæxlisfrumulínu í músum var MTS prófun framkvæmd samkvæmt áður greindri aðferð [20] með því að nota CellTiter96 Aqueous One Solution Cell Proliferation Assay Kit (Promega, Madison, WI, USA). Í stuttu máli var 1 × 103 frumur sáð í hvern brunn á 96-brunnsplötunni og þær ræktaðar í 24 klst. Eftir ræktun var Ged meðhöndluð með ýmsum styrkjum: 0, 3,12, 6,25,12.5 25, 50 og 75 µM. Eftir 48 klst. var 20 µL af MTS prófunarlausn bætt við hvern brunn sem innihélt 100-µL miðil með Ged og án Ged. Eftir viðbótar ræktun í 4 klst. var gleypni mæld við 490 nm með Multiskan GO litrófsmæli (ThermoScientific, Waltham, MA, Bandaríkjunum). Gögnin um frásog voru staðlað með viðmiðuninni og sýnd sem prósentuhlutfall hömlunar.
2.4. Ákvörðun á innihaldi melaníns
Innihald melaníns utan og innan frumu var ákvarðað eftir breyttri aðferð sem áður hefur verið greint frá [21]. -MSH (200 nM) formeðhöndlaðar sortuæxlisfrumur voru ræktaðar í 72 klst með og án kojínsýru (200 µM) og Ged (25 og 50 µM). Eftir ræktun var fenólrauður frjálsum ræktunarmiðlum safnað og ræktuðum frumum var safnað með RIPA lýsisbuffi. Uppskornar frumur voru skilgreindar við 4 ◦C, 13, 000 rpm í 15 mínútur og kögglar voru leyst upp í 1 M NaOH, 10 prósent DMSO lausn við 95 ◦C í 2 klst. Frásog safnaðs miðils og uppleysts melaníns var mæld við 470 nm með litrófsmæli. Öll sýni voru eðlileg með próteinstyrk þeirra ákvarðaður eftir BCA aðferð.
2.5. Innanfrumumæling á virkni tyrosínasa
Týrósínasavirkni frumna var ákvörðuð með því að mæla oxunarhraða L-díhýdroxýfenýlalaníns (L-DOPA) eins og áður hefur verið greint frá, með smávægilegum breytingum [22]. B16F10 sortuæxlafrumur úr músum voru formeðhöndlaðar með 200 nM af -MSH í 1 klst. fylgt eftir með µM200 meðferð kojínsýru, með og án Ged (25 og 50 µM), og ræktuð í 72 klst. Eftir ræktun voru frumur safnað með lýsisbuffi sem innihélt próteinasínhemla og sýnið skilið í skilvindu við 13,000× g, 4 ◦C í 15 mínútur. Fljótandi vökvinn var fluttur í nýtt rör. Hvert sýni (20 µL) og 80 µL af 40 mM L-DOPA var blandað í 96-brunnsplötu og ræktað við 37 ◦C í 2 klst. Frásog við 475 nm með oxað L-DOPA var ákvarðað með því að nota örplötulesara. Frásogsgildið var staðlað með próteinstyrk hvers sýnis.
Cistanche þykkni ávinningur: hamlar tjáningu tyrosinasa.
2.6. RNA einangrun og qRT-PCR
Heildar RNA einangrun og qRT-PCR voru gerðar samkvæmt aðferð sem áður var lýst af [18]. Heildar-RNA var dregið stuttlega úr hverju sýni með því að nota Trizol hvarfefni (Ambion, Austin, TX, USA). Útdregin heildar RNA styrkur var ákvarðaður með gleypni við 260 nm og gæði heildar RNA voru skoðuð með gleypnihlutfallinu 260:280 og 260:230 nm með Multiskan GO örplötulesara (Thermo Scientific). TotalRNA (5 µg) var myndað í cDNA með Maxima fyrsta strengs cDNA myndun setti (Thermo Scientific) og tilbúnu cDNA. mRNA tjáningarstig Mitf, Tyr, Trp-1 og Trp-2 var ákvarðað með Luna Universal qPCR Master Mix (New England Biolabs, Ipswich, MA, Bandaríkjunum) og QuantStudio 3 rauntíma PCR tæki ( Applied Biosystems, Foster City, CA, Bandaríkjunum) samkvæmt samskiptareglum kennara. Tjáningarstig gena var eðlilegt með glýseraldehýð 3-fosfat dehýdrógenasa (GAPDH).
2.7. Immunoblot greining
Immunoblot greining var framkvæmd samkvæmt aðferðunum sem áður hefur verið lýst [23]. Próteinum B16f10 frumna var safnað með Ceti lysis buffer (Translab, Daejeon, Kóreu) og styrkurinn var ákvarðaður með Pierce BCA prótein prófunarbúnaði (Thermo Scientific). Jafnt magn af próteinum (30 µg) af hverju sýni var sett á natríumdódecýl súlfat-pólýakrýlamíð hlaup og rafdrætt. Eftir aðskilnað voru prótein flutt yfir í nítrósellulósahimnu og himnan var læst í 10 prósent fitulausri mjólkurlausn í 2 klst. Stíflaðar himnur voru ræktaðar með aðalmótefni yfir nótt við 4 ◦C, fylgt eftir með annarri ræktun með aukamótefni við 26 ◦C í 2 klst. Aðalmótefni og aukamótefni voru þynnt í hlutfallinu 1:1000 og 1:3000, í sömu röð. Að lokum voru flekaðar himnur skráðar með ChemiDoc (Bio-Rad, Hercules, CA, Bandaríkjunum) með ECL hvarfefni (SuperSignal, Thermo Scientific). Aðal- og afleidd mótefni voru keypt frá Santa Cruz Biotechnology (Dallas, TX, Bandaríkjunum).
2.8. Fósturvísapróf sebrafiska
Wild-type zebrafish were thankfully obtained from Professor Tae-Lin Huh, the School of Life Science and Biotechnology, Kyungpook National University, Daegu, Republic of Korea. The strain was kept for more than eight generations in a laboratory condition of 26 ◦C ± 1 ◦C, and a day-to-night ratio of 8:16. General fish care and breeding conditions, as previously described, were followed [24]. Ten groups of zebrafish were mated to obtain embryos with a mating ratio (male: female, 1:2), and among obtained embryos, healthy embryos had >80 prósent frjóvgunarhlutfall og voru valin og notuð í tilraunina. Tólf heilbrigðir fósturvísar í hverjum meðhöndluðum hópi voru staðsettir í hverjum brunni í 96-brunnsplötu með og án Ged (25, 50, 75 og 100 µM) og kojínsýru (8 mM) í E3 miðli á skjaldstiginu. 24 klst. eftir frjóvgun (klst./pf) voru fósturvísar tæmdir og óeðlilegt athugað á hverjum 24 klst. þar til 72 klst./pf. Svipgerð fósturvísanna var mynduð í hliðar- og baksýn til að bera saman mun á hópum með BX53 uppréttri smásjá með DP80CCD (Olympus Life Science Solutions, Waltham, MA, Bandaríkjunum). Eftir myndatöku voru fósturvísar einsleitir með Ceti lysis buffer (TransLab) og ákvarðað melanínstyrk, sem var jöfn B16F10 frumu melaníninnihaldsákvörðun.
2.9. Tölfræðigreining
Allar tölfræðilegar greiningar sem kynntar eru í þessari rannsókn voru gerðar með því að nota GraphPad Prismv.8.0 (GraphPad Software, San Diego, CA, Bandaríkjunum). Einhliða ANOVA með Tukey prófinu var notað fyrir margvíslegan samanburð. Öll gögn eru sýnd sem meðaltal ± staðalfrávik. Marktækur munur var talinn tölfræðilega marktækur við p <>
3. Úrslit
3.1. Frumueyðandi áhrif Piperlongumine í B16F10 frumum
Áður en við könnuðum mótefnavaldandi áhrif Ged, gerðum við lífvænleikapróf í B16F10 frumulínu til að stilla skammtabilið í þessari rannsókn. Í styrkleikabilinu frá 3,12 til 50 µM sýndu frumur engin hamlandi áhrif á vöxt og hlutfallsleg fjölgun þeirra var frá 91,0 prósent til 118,7 prósent (Mynd 1). Aftur á móti, þó að það væri ekki tölfræðileg þýðing, var vöxtur þeirra sem fengu 75 µM lítillega hindrað (89,3 prósent; mynd 1). Þess vegna var hæsti styrkurinn stilltur á 50 µM í frumulínutilraunum sem eftir voru.
Mynd 1. Frumueiturhrif gedunins (Ged) í B16F10 frumum
3.2. Gedunin hamlar melanínframleiðslu og innanfrumu tyrosinasavirkni í B16F10 músmelanómafrumum
Við metum sortueyðandi áhrif Ged í B16F10 sortuæxlisfrumum músa. TheMC1R örvi, -MSH, framkallaði á áhrifaríkan hátt innanfrumu og utanfrumu melanínframleiðslu (Mynd 2a–c). Liturinn á safnaða miðlinum var dökkur með -MSH (Mynd 2a). Liturinn dofnaði með því að bæta við Ged og áhrifin voru skammtaháð (Mynd 2a). Sem afleiðing af heildarmelaníninnihaldi jók -MSH melanínframleiðslu í sortufrumum um það bil sjöfalt hærri en viðmiðunarhópurinn og örvaði melanínminnkun með því að bæta við kojic sýru, vel þekktum jákvæðum samanburði við sortumyndun (Mynd 2d). Ged stytti einnig áreiti sem veldur melanínframleiðslu í sortufrumum í öllum styrkjum sem prófaðar voru í þessari rannsókn (Mynd 2d). Ennfremur, í týrósínasavirkniprófinu, sýndi Ged sterk hamlandi áhrif á hraðatakmarkandi ensímið, tyrosínasa, við sortumyndun (Mynd 2e). Hlutfallsleg virkni týrósínasa í 50 µM Ged-meðhöndluðum hópi minnkaði um 20 prósent og 12,24 prósent samanborið við samanburðarhópinn og a-MSH-örvaða hópinn, í sömu röð.
Mynd 2. And-melanogenic áhrif ósvikins (Ged) á alfa-melanocyte-örvandi hormón (-MSH)-örvað melanín framleiðslu í B16F10 frumum.
3.3. Gedunin dregur úr -MSH induced melanogenesis-tengd genatjáning
-MSH (200nM) framkallaði mRNA stig Mitf; melanogenesis umritunarþáttur; og markgenin Tyr, Trp-1 og Trp-2 (Mynd 3). Meðferð við Ged minnkaði mRNA-gildi allra gena á skammtaháðan hátt við styrkleikann 25 og 50 µM (Mynd 3). Samanborið við jákvæða samanburðinn, kojic sýru (200 µM), var Ged áhrifaríkara við að draga úr mRNA magn sortumyndunartengdra gena í B16F10 frumum. Ennfremur minnkaði magn Mitfand Tyr um 0.10- og 0.26-falt lægra en frumur af völdum -MSH, í sömu röð, í styrkleikanum 50 µM (mynd 3a,b). Niðurstýrt mRNA magn þessara gena lækkaði magn Tyr og minnkaði magn TYR framleiðslu á melaníni minna en samanburðarhópurinn.
Mynd 3. Áhrif minnkunar á gen sem tengjast sortumyndun.
3.4. Gedunin Minnkuð TYR og TYR-1 upphæð
TYR gegnir mikilvægu hlutverki í sortumyndun og próteinmagn þessa ensíms hefur bein áhrif á melanómyndun. Við reyndum að staðfesta breytingu á magni próteins, TYR, af völdum minnkaðs mRNA magns með ónæmisblóðgreiningu. TYR var áberandi minnkað samanborið við samanburðarhóp og -MSH var meðhöndlað skammtaháð (Mynd 4a). Þar að auki var TRP-1, mikilvægur umritunarstuðull TYR, örlítið lækkaður (Mynd 4a). Árangurinn kom betur í ljós þegar band hvers próteins var staðlað með heimilispróteininu, GAPDH (Mynd 4b,c).
Mynd 4. Western blotting á alfa-melanocyte-örvandi hormóni (-MSH) framkölluðum B16F10 frumum með raunverulegri meðferð.
3.5. Eiturhrif Gedunin gegn sebrafiskum á frumstigi þróunar
Eiturefnafræðilegt mat á Ged á sebrafiskum á fyrstu stigum þroska var framkvæmt áður en metið var á and-melanogenic próf á Ged in vivo. Formfræðileg afbrigðileiki sebrafiskafósturvísa kom ekki fram í neinum meðhöndluðum styrk Ged (mynd 5a). Áhuginn styrkur Ged, 25, 50, 75 og 100 µM, lifunarhlutfall Ged-meðhöndlaðra hópa var ekki marktækur munur á 72 klst. af efnameðhöndlaða tímabilinu (Mynd 5b).
Mynd 5. Eiturhrif ósvikinna (Ged) á sebrafiska á frumstigi þroska.
3.6. Gedunin minnkað melaníninnihald í sebrafiskafósturvísum
Vegna þess að Ged hefur engin eiturverkanir á þroska í fósturvísum sebrafiska, skoðuðum við sortueyðandi áhrifin við röð af styrkleikum af Ged, 25, 50, 75 og 100 µM. Í sjónfræðilegri athugun skoðuðum við punktana á litarefni sebrafiska; ofanverð hliðarmynd af fósturvísum sebrafiska er sýnd á mynd 5a. Kojínsýra hefur hamlandi áhrif á litarefnisframleiðslu sebrafiskafósturvísa. Ged-meðhöndlaðir sebrafiskafósturvísar höfðu einnig færri litarpunkta á höfðinu (mynd 6a). Að auki minnkaði heildarmelaníninnihald sem dregið var úr öllum líkama sebrafiskafósturvísa eftir útsetningu fyrir Ged í 72 klst í bæði kojic sýru, jákvæðri samanburðarhópum og Ged-meðhöndluðum hópum (Mynd 6b, c)
Mynd 6. Áhrif ósvikins á melanínframleiðslu in vivo.
4. Umræður
Í þessari rannsókn voru hömlunareiginleikar Ged gegn melanínframleiðslu metnir. Byggt á niðurstöðum okkar var hömlunargeta Ged um það bil 11.98-falt hærri en kojínsýru (mynd 2) og styrkur Ged ( 50 µM) var lægra en kojic sýru (200 µM), jákvæða viðmiðið. Það passaði við veiklaða innanfrumu týrósínasavirkni, ensím sem breytir L-Dopa í DQ, aðalforvera eumelaníns og feómelaníns. Minnkuð Tyr virkni hefur í för með sér að hægja á framleiðsluferli heilmelaníns og skortur á báðum lokaafurðum, eumelanin og pheomelanin [1–3]. Uppskrift og TYR stigum var stjórnað af röð umritunarþátta: Mitf, Trp-1 og Trp-2 [1,2]. Minnkað magn af próteini og mRNA stigi þýðir að virkjað MC1R um -MSH–MC1R–PKA–CREB merkjaás með -MSH var stjórnað niður með meðferð á Ged í styrkleikanum 25 og 50 µM, skammtaháð bæði í magnbundinni PCR og Western blotting. Eins og áður hefur verið lýst, leiðir minnkun á magni MITF til skorts á Tyr, Trp-1 og Trp-2 með minni bindingu við kynningarsvæði þessara gena [25–27]. Að draga úr þessum umritunarþáttum leiðir til lægra stigs TYR og hindrar framleiðslu melanín litarefnis í B16F10 frumum. Að auki sýna núverandi niðurstöður TYR hamlandi áhrif Ged, annar mikilvægur punktur melanínframleiðslu í sortufrumunni. Ged sýndi einnig hamlandi áhrif á litarefnisframleiðslu á frumstigi sebrafiska í in vitro og in vivo líkönum. Niðurstöður okkar sýndu að meðferð með Ged í 72 klst. dró verulega úr fósturmyndun sebrafiska. Heildarmelaníninnihald og mRNA-magn skyldra gena minnkaði með nærveru Ged og tilhneiging þessara niðurstaðna studdi mjög in vitroanti-melanogenesis eiginleika Ged.
Þar að auki var hömlunargeta Ged miklu sterkari en kojínsýra, eitt af þeim algengustu efnasamböndum sem hvítandi hvarfefni í snyrtivöruiðnaðinum [6,28]. Styrkurinn sem Ged virkaði við var tiltölulega lægri en kojínsýra. Þar að auki sýndi fyrri skýrsla að annað algengt hvítunarhvarfefni, arbútín, hafði svipuð andflöguvaldandi áhrif og kojínsýra [2]. Þess vegna ætti að líta á Ged sem hvítandi hvarfefni í stað arbútíns eða kojínsýru sem nú er notað og sem and-melanomadlyf með tilliti til efnilegra eiginleika þess.
Stungið var upp á and-melanógenandi eiginleikum Ged áður [29,30], en þessar rannsóknir beindust ekki að sérstökum verkunarháttum áhrifanna, og þær sáu einfaldlega breytingar á frumudrepandi áhrifum og magni melanínframleiðslu in vitro, en fjölgunarvirkni og hamlandi áhrif á HSP 90 tjáning hefur verið auðkennd [31-33]. Tilkynnt hefur verið um möguleikann á Ged sem lyfi gegn sortuæxli; Hins vegar beindust þessar rannsóknir ekki að sérstökum verkunarháttum áhrifanna, og þær sáu einfaldlega breytingar á frumueitrunaráhrifum og magni melanínframleiðslu in vitro. Við reyndum að ákvarða frumustigið með því að staðfesta mRNA magn og próteinmagn melanínframleiðslutengdra gena. Ásamt fyrri skýrslum sýndi þessi rannsókn nýtt sjónarhorn á Gedas sem er hluti af snyrtivöru innihaldsefnum fyrir tvo kosti, framúrskarandi krabbameinslyf og gegn sortumyndun, sem gæti verið beitt bæði á sortuæxli af völdum UV og uppsöfnun litarefnis, sérstaklega, á sama tíma.
Cistanche þykkni duft: tær sindurefna
5. Ályktanir
Að lokum sýndu allar þessar niðurstöður að hægt væri að nota nýtt efnasamband, Ged, sem litunarhvarfefni fyrir melanín lífmyndun, sem stytti niðurstreymisprótein TYR, TRP-1 og TRP-2 um minna magn samanborið við masterinn reglugerðarprótein,MITF, bæði í in vitro og in vivo kerfum sebrafiskalíkans.
cistanche töflur
