Meðfædd og aðlögunarhæf ónæmi meðan á SARS-CoV-2 sýkingu stendur: lífsameindafrumumerki og kerfi

Ágrip

Heimsfaraldur kransæðaveirunnar 2019 (COVID-19) var af völdum jákvæðs skynjunar einþátta RNA (ssRNA) alvarlegs bráðs öndunarfæraheilkennis coronavirus 2 (SARS-CoV-2). Hins vegar eru aðrar kórónavírusar manna (hCoVs) til. Sögulegir heimsfaraldurar fela í sér bólusótt og inflúensu, með áhrifaríkri meðferð sem notuð er til að draga úr heildarsjúkdómsbyrði með því að miða á áhrifaríkan hátt á hæft ónæmiskerfi hýsilsins. Ónæmiskerfið er samsett úr frum-/afleiddum eitilgerðum með upphaflega átta gerðir ónæmisfrumugerða og mörgum öðrum undirtegundum, sem fara yfir frumuhimnur með því að nota frumumerkjafall sem stuðla að úthreinsun sjúkdómsvaldandi próteina. Önnur prótein sem fjallað er um eru meðal annars þyrping aðgreiningar (CD) merkja, helstu vefjasamhæfisfléttur (MHC), pleiotropic interleukins (IL) og chemokines (CXC). Söguleg hugtök um ónæmi hýsils eru meðfædd og aðlögunarhæf ónæmiskerfi. Aðlagandi ónæmiskerfið er táknað með T frumum, B frumum og mótefnum. Meðfædda ónæmiskerfið er táknað með átfrumum, daufkyrningum, dendritic frumum og komplement kerfinu. Aðrar vírusar geta haft áhrif á og stjórnað framvindu frumuhrings, til dæmis í krabbameinum sem innihalda papillomaveiru (HPV: leghálskrabbamein), Epstein-Barr veira (EBV: eitilfrumukrabbamein), lifrarbólgu B og C (HB/HC: lifrarfrumukrabbamein) og mönnum T-frumuhvítblæðisveira-1 (T-frumuhvítblæði). Bakteríusýkingar auka einnig hættuna á að fá krabbamein (td Helicobacter pylori). Veiru- og bakteríuþættir geta valdið bæði sjúkdómum og dánartíðni samhliða því að þeir berast innan klínískra og samfélagslegra aðstæðna með því að hafa áhrif á ónæmissvörun hýsilsins. Þess vegna er rétt að setja framfarir í einfrumu raðgreiningu í samhengi í tengslum við aðra rannsóknarstofutækni sem gerir kleift að fá innsýn í einkenni ónæmisfrumna. Þessi þróun býður upp á aukinn skýrleika og skilning sem skarast við sjálfsofnæmissjúkdóma sem gætu orðið fyrir áhrifum af meðfæddum B-frumum (B1+ eða jaðarsvæðisfrumum) eða aðlagandi T-frumuviðbrögðum við SARS-CoV-2 sýkingu og öðrum meinafræði . Þannig byrjar þessi endurskoðun með kynningu á öndunarfærasýkingu hýsils áður en ómetanleg frumuboðsprótein eru skoðuð og síðan einstök ónæmisfrumumerki.

Leitarorð: COVID-19; B-frumur; daufkyrninga; dendritic frumur; T-frumur; NK-frumur; einfrumur; átfrumur; meðfæddur; aðlögunarhæfni; cýtókín; chemokines; viðloðun sameindir; mótefni; þyrping aðgreiningar; viðtakar; prótein; SARS-CoV-2; sermi

cistanche viðbót kostir-auka friðhelgi

1. Inngangur

1.1. Yfirlit

Orsakaveiran SARS-CoV-2 af COVID-19 heimsfaraldrinum inniheldur meira en fjögur ónæmisvaldandi prótein sem samanstanda af spike (S prótein), núkleókapsíði (N prótein), hjúp (E prótein) og himnu (M) prótein) og tengdar undireiningar með aukapróteinum [1,2]. Núverandi lækningaþróun átti sér stað fyrir/eftir mars 2020 þegar Alþjóðaheilbrigðismálastofnunin (WHO) lýsti yfir heimsfaraldri; Vitað er að SARS-CoV-2 dreifist á milli dýra og kynslóða [3]. Talið er að um 15% af dánartíðni COVID-19 sjúkdóma gæti verið vegna lungnabólgu eða áunninnar öndunarerfiðleikaheilkennis (ARDS) [4]. Núverandi ónæmisvaldar bóluefnis voru að mestu þróuð sem forsamruna S-próteinafleiður með nýrri frambjóðendum sem ganga í gegnum klínískar rannsóknir með það að markmiði að draga úr langvinnri COVID-19 sjúkdómsbyrði innan íbúa eftir því sem rannsóknir halda áfram. SARS-CoV-2 erfðamengi er um það bil 30 kílóbasar sem kóðar 9860 amínósýrur og er skilgreint af opnum lestrarrömmum (ORF) og próteinum sem ekki eru uppbyggjandi (NSP) sem þarf til veirufjölgunar innan allra dýrahýsils [5]. SARS-CoV-2 erfðamengið hýsir 16 ORF sem kóða 29 prótein sem þarf til veirufjölgunar og hömlunar á ónæmissvörun hýsils. Til dæmis, ORF1a og ORF1ab kóða fjölpeptíð sem eru klofin í 16 NSP. Sameindaprófunaraðferðir (td PCR) eru almennt notuð greiningartæki sem gera kleift að greina og greina sérstakar RNA raðir innan sýna. SARS-CoV-2 sýkir frumur með öndunarfærum og lungnafrumum af tegund II (ATII) með því að nota angíótensín-umbreytandi ensím 2 (ACE-2) sem ríkjandi viðtaka fyrir inngöngu [6]. Truflun og sýking á ATII frumum sem tjá ACE2 eiga sér stað í gegnum fosfólípíðhimnur. Aðrir viðtakar sem eru tjáðir á öllum hvítfrumum, blóðflögum og æðaþelsfrumum innihalda mismunandi klasa aðgreiningarmerkja (CD), til dæmis CD3, CD4 og CD19, meðal annarra. Sumir eru einnig tengdir við upphaflega SARS-CoV-2 frumuinngang sem felur í sér tegund II transhimnu próteasa (TMPRSS2), asialoglycoprotein viðtaka-1 (ASGR1) og kringlu sem inniheldur transhimnu prótein 1 (KREMEN1), dipeptidyl peptidasa 4 (DPP4), neuropilin (NRP1), CD147 og vimentin [7-12]. Þess vegna, vegna frumusýkingar, stjórna og þróast ónæmisfrumur innan frumeitla (td beinmerg og hóstarkirtli), en einnig í gegnum net auka eitlalíffæra (td hálskirtla og fleiri) sem nýta eitla (LNs) og frumuhimnur. sem gerir gegndræpi frumna og eitilfrumnaflutninga kleift að vinna úr smitandi sjúkdómsvaldandi próteinum á öllum hindrunum í gegnum tauga-, meltingar-, innkirtla-, öndunar-, blóðrásar-, vöðva- og beinakerfi. Tækniframfarir síðan 2017 hafa einnig leyft meiri svipgerðargreiningu og þess vegna er það skýrara núna að SARS-CoV-2 prótein hafa mismunandi hýsilhlutverk. Greiningar hafa staðfest að M prótein er mikilvægt fyrir samsetningu, S prótein er fyrir frumuviðtakainngang og N og E prótein virðast vera hugsanleg svitamyndandi prótein [13,14]. Einfrumu RNA raðgreining (scRNA-Seq), litrófsflæðisfrumumæling (FACS) og massafrumumæling (CyTOF) geta greint merki sem gera svipgerðagreiningu á öllum ónæmisfrumuhluthópum kleift [15-18]. Það er athyglisvert að mótefnaprótein sem taka þátt í prófun á SARS-CoV-2 sýkingum hafa breytilega þætti og styrk manna mótefna. Þetta eru mæld með ríkjandi einstofna mótefnagreiningum þar sem margir kvarðar eru til sem gangast undir löggildingu óháð framleiðanda. Til dæmis mæla stofnanir styrk í sermi með því að nota nokkrar mælingar sem mæla bindandi mótefni (BAU/ml), aðrar mæla hlutleysandi mótefni (nAb í ae/ml) og aðrar mæla styrk (ng/mL) þegar stöðlun á sér stað til að tryggja samræmi á á heimsvísu (viðbótarefni og gögn S1–S5) [19,20]. Þess vegna, í þessari grein, skoðum við núverandi rannsóknarstofu- og klínískar rannsóknir sem hafa mæld og sýnt fram á tölfræðilega mikilvægi til að sýna breytt umhverfi ónæmisfrumuþroska, til að gera tilgátu um að mörg af bólguáhrifunum sem sjást með SARS-CoV-2 sýkingu geti vera reglubundin aðlögunarhæf ónæmissvörun. Margar bakteríu-, veiru- og sveppasjúkdómar hafa bæði ónæmisfræðilega og erfðafræðilega breytileikaþætti sem hafa áhrif á frumuhringsstjórnun og mótefnavakakynningarþætti. Þetta hefur áhrif á marga meinafræði og áhættan er því fyrir áhrifum af erfðafræðilegum næmisþáttum. Þetta felur í sér gen sem kóða prótein sem eru tjáð á frumuhimnum ónæmiskerfis, eins og hvítfrumnamótefnavaka úr mönnum (HLA), sem vísað er til sem aðal vefjasamhæfisfléttunnar (MHC). Þessir sýna stutt prótein (peptíð) brot til ónæmiskerfisfrumna og staðbundin frumumerki sem hafa áhrif á önnur miðlunarprótein, eins og við ræðum hér að neðan. Ónæmisfrumurnar sem fjallað er um í þessari grein veita heildarsamhengi við frekari frumueinkenni með samspili B-frumna, T-frumna og hverrar hinna fjögurra frumuundirgerða sem fjallað er um hér að neðan, flokkaðar sérstaklega eftir flokki aðgreiningar (CD) próteina sem eru tjáð á frumuyfirborði á cýtókínum og kemókínum sem virka sem ónæmisfrumumerki sem hafa áhrif á utanaðkomandi sýkla.

1.2. Núverandi SARS-CoV-2 bóluefnisónæmissvörun

Kostir cistanche tubulosa-styrkja ónæmiskerfið

Núverandi bóluefnismótefnavakar eða veirumótefnavakar virkja ónæmiskerfið til að þekkja sjúkdómsvaldandi prótein í gegnum epitopes sem geta stökkbreyst og hafa þar með áhrif á ónæmisfrumuþekkingu í gegnum B-frumu- og T-frumuviðtaka (BCR/TCR). Forvarnir gegn langvinnum COVID-19 sjúkdómi til pre-Omicron afbrigða voru metnar í þessum hlutföllum innan núverandi ónæmisvalda bóluefnis, þróað af Pfizer/BioNTech, Astra Zeneca, Sinopharm og Novavax: BNT162b2: 95,3%, AZD1222: 70,4%, BBIBP -CorV: 79%. Þróun ónæmisvaka gefur til kynna að NVX-CoV2373 sé 72% þegar skimað er gegn Omicron BA.1 og BA4/BA5 [21]. Viðbótarminnkun á hættu á COVID-19 sjúkdómi var metin á 86%. Íbúarannsóknir sýna breytileg SARS-CoV-2 prótein mótefnasvörun (76%:24% svörun/svörun). Áætluð framleiðsla starfrænna mótefna gegn S prótein ónæmisvaka spannar nú 6 mánuði til 1,5 ár. SARS-CoV-2 S próteinstökkbreytingar eru nú vel skjalfestar í öðrum rannsóknum til að ganga úr skugga um hugsanlegar epitopur sem hafa áhrif á ónæmissvörun [22]. Hagnýt T-frumuviðbrögð, annað hvort hjálpar (TH) eða frumudrepandi (TC), benda einnig til CD4+: CD8+ virkni í hlutfallinu 96%:54% í COVID{{35} } sjúkdómur [21]. Samanborið við aðrar öndunarfæraveirur eins og inflúensu, er SARS-CoV-2 S próteinið með hærri stökkbreytingartíðni innan topps/ACE2 tengisins, og tilkoma Omicron afbrigða styður þetta, táknað með BA1, BA2, BA2.75, BA4, BA5, BQ1 og XBB [23]. Sem betur fer er til tækni og rannsóknarstofutækni sem auðveldar nákvæma frumugreiningu og gerir samanburð á viðeigandi ónæmisfrumum. Þess vegna, í þessari grein, munum við ræða sýkingarleiðina, ríkjandi frumu- og próteinmerki, og að lokum, einstök frumuviðbrögð ríkjandi ónæmisfrumuætta í röð B-frumna, daufkyrninga, einfruma/átfruma/dendritic frumur (DC), náttúruleg morðingi (NK frumur) og T frumu undirgerðir.

1.3. Öndunarfæri örumhverfi

Líffæri í öndunarfærum sem verða fyrir áhrifum eru nef, háls, barkakýli, barki, berkjur og lungu sem verða fyrir ytri mótefnavaka sem samanstendur af yfirborðsþekjufrumum. Lungnayfirborð fullorðinna manna inniheldur um það bil 700 milljón lungnablöðrur, með yfirborðsflatarmál 70 m2 og þvermál á milli 200 µm og 500 µm, þakið háræðum. Innan þessa skilgreinda lungnablöðrulags eru lungnafrumur af tegund I (ATI), svo og lungnafrumur af tegund II (ATII) og lungnablöðru Mφ (AMφ) sem stjórna öndun, seyti yfirborðsvirkra efna og stjórnun ónæmisfrumna, í sömu röð, ásamt bikarfrumum, grunnfrumur og aðrar frumugerðir [24]. Snemma rannsóknir (n=7) á langvinnum sjúkdómum af völdum SARS-CoV-2- sýna bein sýkingu á ATII frumum í gegnum glycocalyx og yfirborðsvirka efnið, og skerða þar með hómóstatískar hindranir og lokustarfsemi með auknum þrýstingi á innönduðu O2 eða útöndun. CO2 innan nanobúla yfir frumuhimnur þar sem CO2 er framleitt í gegnum þríkarboxýlsýru (TCA) hringrásina [25]. Vitað er að glycocalyx lagið inniheldur mikið af próteinum sem hafa áhrif á starfsemi æða (td syndecans) sem geta brotnað niður og haft áhrif á æðakerfið, svo sem matrix metalloproteinasa (MMP), heparanasa og hýalúrónídasa, með verkun cýtókína (IL{ {13}} og aðrir) [26,27]. Þetta öndunarferli er háð himnuþykkt og gasleysni O2, N2 og CO2 nanókúla [28] (sjá mynd 1).

Mynd 1. Yfirlit yfir SARS-CoV-2 ónæmisfrumusamskipti.

1.4. Cýtókín og sermi prótein við SARS-CoV-2 sýkingu

Próteinhækkun í sermi, skjalfest sem „cytókínstormur“ sem er hækkaður eða óvirkur í SARS-CoV-2-framkölluðum langvinnum COVID-19 sjúkdómi, kemur fram í mörgum öðrum meinafræði [32]. Cýtókín eru hópur skammlífra próteina sem losuð eru af ýmsum frumum sem virka sem boðefni milli frumna. Cýtókínmyndun og seytingaraðferðir fela í sér losun frá leysisómum, losun á blöðrum úr plasmahimnum og losun frá plasmahimnum. Margar rannsóknir skjalfesta þetta, sem eru ekki aðalefni þessarar umfjöllunar. Til samanburðar, í inflúensu (ættkvísl Inflúensu A/B/C/D) sýkingu, frumufrumur IL-1, IL-4, IL-5, IL-6, IL{ {9}}, IL-12, IL-13, TNF- og IFN- eiga við um samskipti ónæmisfruma, eins og lýst er hér að neðan á myndum. Meðan á SARS-CoV-2 sýkingarvöldum COVID-19 sjúkdómi hefur verið tekin til greina hefur önnur prótein verið tekin til greina, þar á meðal umbreytandi og æðaþelsfrumuvaxtarþættir (TGF- /VEGF) ásamt sérstökum MMPs (MMP2, MMP3) , MMP9) [33–36]. Þetta tákna vefja endurgerð prótein með sérstökum efnafræðilegum þáttum sem einnig þarf til að beina krabbameinslyfjum hvítfrumna á milli kímstöðvar eitlakerfis (GC) og um allan líkamann [34-36]. Viðeigandi efnafræði sem talin eru hér að neðan eru CXCL10 (IP-10), CCL2 (MCP-1), CCL3 (MIP1-) og CCL11 [33–37]. Hins vegar, fyrir 2020 heimsfaraldurinn, í tengdum kransæðaveiru (MERS-CoV) sem veldur öndunarfæraheilkenni í Miðausturlöndum (MERS), voru frumufrumupróteinin IL-1, IL-6 og IL-8 dregin fram sem lykill að svörun hýsils, en í sýkingu eru CXCL10 og önnur pleiotropic chemokines rannsökuð frekar sem nýta CXCR3 tjáð á Mφ, T frumum, DCs og báðum NK/B frumum [38-40]. Ofangreind cýtókín og chemokín eru því öll meðfædd/aðlögunarstýriefni sem stuðla að sýkingastjórnun og stjórnun í blóðsermi. Rannsóknir benda til þess að COVID-19-tengd storkusjúkdómur (CAC) sé orsakaþáttur í langvinnum sjúkdómum með fléttur sem myndast á milli meðfæddra ónæmisfrumna sem hafa áhrif á storknun og fíbrínlýsandi ferli með óþekktum aðferðum. Flokkun á COVID-19 hefur því átt sér stað í truflun á starfsemi æðaþelsfrumna, ofurbólgusvörun og ofstorknun, sem skráir þennan þátt SARS-CoV-2 framkallaðrar meinafræði sem leiddi til hækkunar á plasmaþéttni D -dimer, C-hvarfandi prótein, P-selektín og fíbrínógen [41]. Nýlega, í forprentun sem á enn eftir að fara yfir, voru 7315 prótein rannsökuð sérstaklega í langvinnum COVID-19 sjúkdómi, í tengslum við komplementprótein sem lykilatriði í storknunarferlum; viðbót C1q undireiningar undireiningar A, B og C (C1QA, C1QB og C1QC) voru aðallega auðguð í lungum og LNs [42]. Viðbótarþættir C3, C5, C7 og C9 voru aftur á móti almennt uppstýrðir í LNs og ósæðar/æðaveggjum með niðurstýrðu SP-C í ATII frumum [42]. Rannsóknir benda til tveggja annarra próteina, viðtakans fyrir háþróaða glycation end-products (RAGE/AGER) og klóríð innanfrumu rás (CLIC5), sem einnig tengist ATI frumum, en að SP-C tengt próteini var minnkað sérstaklega fyrir ATII frumur, eins og hér að ofan [42]. Athyglisvert er að höfundar tóku eftir marktækri minnkun á IL-12 framleiðslu í LN sem getur haft áhrif á DC þroska, eins og fjallað er um hér að neðan. Mæld voru mörg frumuhringsstýrandi prótein, svo sem sýklínháður kínasa (CDK2), en einnig upprunaafritunarkomplex (ORC) og núkleópórín (NUC), sem sást hafa uppstýrt í LNs. Ennfremur komu fram margar próteinbreytingar sem samsvara frumubreytingum í vefjum í blóðsykri. Í sambærilegri samanburðarrannsókn sem skoðaði lífmerki hjá sermisjákvæðum einstaklingum (n=400), urðu einnig marktækar breytingar á E-selectin (CD62) og cathepsin B og þrálát einkenni geta tengst samhliða járn-brennisteinsþyrpingum. chaperone prótein (HSCB), hitasjokkprótein HSP 90-beta (HSP90AB1), amyloid-beta forveraprótein (APP), fosfólípasa D fjölskyldumeðlimur 3 (PLD3), cystatin-C (CST3) og calprotectin (S{ {93}}A9) [43].

1.5. For-2022 rannsóknarsamhengi

Frá árinu 2015 hafa rannsóknarrannsóknir skýrt að SP gæti mótað ónæmissvörun hýsils við lungnabólgu og gæti því verið lækningalegt skotmark meðan á aukinni vanreglu sést í langvinnum COVID-19 sjúkdómi [44]. Það er misræmi í bókmenntum og það gæti hafa verið gleymt í inflúensufaraldrinum 2009 H1N1 [44]. Eins og fjölmargar skýrslur (n=10) skýra, með SARS-CoV-2 sýkingu, er umfangsmikil lungnablöðruskemmd með æðaþelsskaða á frumuhimnum, segamyndun í æðum, lokun lungnaháræða, bjúg með æðavöxtum, og eitilfrumuflutningur [44]. Afleiðingarnar sem myndast sem stjórna cýtókínstjórnun eiga sér stað á milli allra hvítfrumna með spurningum um ónæmisfrumur og viðkomandi interleukín (IL), vaxtarþætti (GF), chemokines (CXC) og viðkomandi viðtaka eða bindla (td CXCR3 og/eða CXCR4) sem krefjast frekari skýringar hér að neðan [45]. SARS-CoV-2 meingerð hefst með truflun á himnujafnvægi með samrunamyndun í kjölfarið, frumusamruna og fjölkjarna frumur samfara röskun á ónæmiskerfi [46-48]. Þessi myndun syncytia gæti komið af stað með transhimnupróteinum (td TMEM16) sem stjórna fosfólípíðríkum frumuhimnum þar á meðal fosfatidýlseríni (PS) [49-51]. Braga o.fl. notaði frumusamrunahömlunarpróf (CFIA) og mælingar á staðnum á veiru RNA prófum (n=41) á sýktum einstaklingum til að skýra að SARS-CoV-2 sýktir einstaklingar hefðu sameinað frumusyncytia ríkjandi sem innihélt servíettu, sem vinnur SP-B sem er sameiginlegt ATII frumum [50]. Þeir tóku fram að með því að stjórna jónarás sem er háð kalsíum og einu scramblasa ensími sem stjórnar PS, virðist S próteinið greinilega virkja transhimnuprótein (TMEM) á yfirborði frumuhimnunnar eða innan frumuhimnunnar [49]. Til dæmis er einn af þessum TMEM16 hluti af próteinfjölskyldu sem samanstendur af kalsíumháðum jónagöngum sem bera ábyrgð á PS-stjórnun í venjulegu kalsíum- og arginínríku lagi [49]. Samhliða því er nú vitað að SARS-CoV-2 ORF3a getur haft áhrif á kalsíumstýrða jónagöng, TMEM16F, sem stjórnað er af PS, sem getur aukið virkni procoagulant í gegnum tenasa og prótrombínasa fléttur, sem eru lykilstýringar á storknunarferlinu. [50–52]. Þess vegna leiða slíkar staðbundnar breytingar á leið SARS-CoV-2 inn í þekjusmáumhverfið. Reyndar inniheldur kolvetnaríka glycocalyx lagið sem þekur slímhúðarþekjufrumur einnig blöndu af mucin (MUC) glýkópróteinum, glýkósamínóglýkönum og öðrum glýkópróteinum, sem teygja út og umlykja cilia og virka venjulega til að hreinsa stærri bakteríur. Umfangsmiklar rannsóknir leiddu nýlega í ljós að starfsemi cilia, microvilli og slím er lykilatriði fyrir SARS-CoV-2 viðloðun og viðtakamiðlaða innkomu í þekjufrumur, sem virðast virka sem lím. MUC prótein eru prótein með mikla sameindaþyngd sem mynda slímþyrpinga. Í COVID-19 sjúkdómnum voru upphaflega (n=16) tvær tegundir slímslímna rannsakaðar ítarlega, þar af himnubundið MUC1 og hlaupmyndandi MUC5AC birtust í marktækt hækkuðu magni. Þess vegna gæti eðlileg sjúkdómsvaldandi úthreinsun með músínpróteinum raskast, sem auðveldar innkomu SARS-CoV-2 til að leyfa veiruþrúgun [53-56]. Mikilvægt er að aðrar rannsóknir benda til þess að, auk ORF3a, geta önnur SARS-CoV-2 prótein, þar á meðal E og ORF8, virkað til að setja saman og mynda eitruð jónagöng [57,58].

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

Smelltu hér til að skoða Cistanche Enhance Immunity vörur

【Biðja um meira】 Netfang:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

1.6. Hlutverk toll-like viðtaka (TLR) eða TLR-framkallað IFN vanstjórnun

Til þess að koma á veirueyðandi svörun er venjulega IFN af tegund I framleitt [59]. Núverandi rannsóknir stangast á við þetta, þar sem framleiðsla IFN af tegund I kemur fram sem gagnleg og skaðleg í COVID-19 sjúkdómi; þó, rannsóknir sem rannsaka Mið-Austurlönd öndunarfæraheilkenni (MERS) og öndunarfæraveiru (RSV) benda til þess að tímasetning IFN framleiðslu af tegund I hafi áhrif á frumusvörun [59,60]. Viðbótarupplýsingar eru yfirborðs- og umfrymismynsturviðtakar (PRRs) sem koma af stað niðurstreymismerkisfalli með því að nota NF-kB, tegund I IFN og bólguferli [43-46,61]. Þar á meðal eru skaðatengd sameindaprótein (DAMP) sem ná yfir mýgrút af próteinum umhverfis og innan kjarna- og utanfrumurýmis sem innihalda tíu varðveitta Toll-like viðtaka (TLR), retínósýru-framkallanlegt gen-I-(RIG-I)-líkt. viðtaka, Nod-like viðtaka (NLR), AIM2-líkir viðtakar og innanfrumu DNA og RNA skynjara, sem leiða til framleiðslu bólgueyðandi eða veirueyðandi frumuefna sem eru nauðsynleg fyrir mótefnavaka-sértæk aðlögunarsvörun [61,62 ]. Til dæmis er IL-1RA DAMP viðtaki, sem, þegar hann er losaður innan frumu, binst og kemur IL-1 losun af stað, sem er studd af tilviksrannsóknum (n=71) sem sýndu þetta var tilfellið í langvinnum COVID-19 sjúkdómi samhliða IL-10, sem er að mestu ónæmisbælandi [63,64]. Það er vitað að SARS-CoV-2 prótein þekkjast af frumuskynjurum og því eru hlutverk TLR3/4/7 áhugaverð með tilliti til þess hvaða ónæmisfrumur tjá þetta. TLR3 er algengara í NK frumum en TLR4 er algengara í Mφ. Toll-like receptors (TLRs) flytja merki um MyD88 og TRIF. Flestir TLRs nota MyD88 til að koma af stað bólgumyndun cýtókína; TLR3 er undantekningin og gefur eingöngu merki í gegnum TRIF, á meðan TLR4 er einstakt að því leyti að það getur tengst og gefið merki í gegnum annað hvort MyD88 eða TRIF við kjarnaumritunarþætti. Fyrri in vitro rannsóknir benda til þess að TLR3/7 geti tengst IL-1, IL-1, IL-4 og IL-6 losun [65]. Þess vegna rannsökuðu aðrar rannsóknir eðli TLR7 sem áhættuþáttar í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi [66]. Hlutverk TLRs í ónæmisfrumuboðum er að mestu óljóst og mun án efa þurfa frekari rannsókna, en tengist T-frumuboðum [67]. TLR4 kemur fram á mónocytum, Mφ og DCs, og í sumum ónæmisfrumum, eins og æðaþelsfrumum, og hefur hlutverk í bæði LPS-örvuðum Gram-neikvæðum CD14 ónæmisfrumum í bakteríu, og, athyglisvert, getur það stjórnað ROR t + stjórnandi T-frumuviðbrögð við ristilbólgu [68-70]. Klínískar rannsóknir varðandi nýrri meðferð sem hafa áhrif á TLR eru í gangi (NCT05089110, NCT04526977 og NCT05293236) bæði á COVID og HIV meinafræði sem munu skýra þetta frekar (sjá viðbótarefni). Hlutverk SP-A, eins og fjallað er um hér að ofan, er í rannsóknum og það er líklegt að TLR4 tjáning hafi mismunandi áhrif innan valinna líffærakerfa eftir virkjun, eins og sést hjá nýburum, þar sem sýnt var fram á að TLR2/4 virkjun örvaði utanfrumumerki. stjórnað kínasa (ERK) og prótein kínasa B (AKT) með IL-6 ferlum óbreyttum milli barna og fullorðinna [71]. Tjáning á bæði blóðflögum og Mφ í lungnablöðrum gæti haft áhrif á segamyndun og ónæmisferli samtímis minni tjáningu á ATII frumum og staðfestingu í dýrarannsóknum, sem nýlega hefur verið sýnt fram á að tengja TLR4 við tjáningu frumudrepna í þörmum [72-74]. TLR4 hefur greinilega áhrif á blóðflögur með samloðun og P-selektín tjáningu, og myndun blandaðra efna milli blóðflagna og daufkyrninga, og í örverum með LPS kallar fram nýmyndun og/eða seytingu von Willebrand þáttar (vWF), blóðflagnaþáttar 4 (CXCR4) ), og thromboxaneA2 (TXA2), ásamt NETosis með CD11b uppstjórnun og öðrum viðloðunsameindum (viðbótargögn S1) [75,76]. Upphaflega auðkennd árið 1957 af Isaacs og Lindemann, IFNs fundust í seytingu til að hindra veiru- og æxlisvöxt. Þau eru nú flokkuð í þrjá hópa og einstakar undirgerðir: Tegund I, II og III. Tegund I IFNs samanstanda af IFN- og IFN- (einnig IFN-δ, IFN-ε, IFN-κ, IFN-τ, IFN-ω og IFN-ζ) en einnig innan Tegundar II er IFN-, en tegund III IFNs nær yfir IFN-λ [77]. Hvað varðar SARS-CoV-2 næmi fyrir IFN, benda snemma klínískar tilviksrannsóknir til SARS-CoV-2 næmi fyrir IFN- og IFN- in vitro, hins vegar benda nýrri vefjarannsóknir til þess að IFN- og IFN - svörun gæti þversagnakennt auðveldað útbreiðslu veirunnar frá öndunarþekju til æðakerfisins með beinni æðaþelsfrumusýkingu [78,79]. Nýlega hefur tegund III IFN-λ verið rannsökuð og er í klínískum rannsóknum í kjölfar fyrri rannsókna (n=257) sem skjalfesta minnkaði IFN-λ2 við langvarandi COVID-19 sjúkdóm [80]. Uppspretta SARS-CoV-2 sýkingar af völdum IFN framleiðslu er að mestu óþekkt eins og er, þar sem IFN viðtakar eru staðsettir í B frumum, einfrumu, Mφ, T eitilfrumum, glial frumum, taugafrumum og plasmacytoid dendritic frumum (pDCs) , meðal annarra [60,61]. Athyglisvert er að in vitro rannsóknir á þekjusvörun sýna að IFN- getur stuðlað að SARS-CoV-2 sýkingu í frumurækt til að auka frumuaðgreiningu innan enterocytes in vitro [81]. IFN-λ hefur verið virkjað af bakteríum, þar á meðal Staphylococcus aureus [82]. Það er athyglisvert að tegund II IFN og tegund III IFN geta verið seytt af NK og T frumum, og fáar rannsóknir staðfesta hvort tegund III IFN hafi áhrif á mótefnaflokka norn. Þess vegna, sem lykilmiðlari andveiruviðbragða í öndunarfærum, er nú að sjá að IFNA2 og IFNG genatjáning í öndunarvegi fylgir aukning á IFNB1, og einnig með minni snemma IFNA2, en að þessari IFN svörun. virðist eiga sér stað í sermi frekar en vefjum [83-85].

2. Meðfædd ónæmiskerfi og SARS-CoV-2 rannsóknir

2.1. B frumuþroska háð T-frumuvirkjun

B eitilfrumur tákna 10% hvítra blóðkorna (hvítfrumna). Miðað við meðfædda ónæmissvörun sem sýklaskynjara, þróast þau í kímstöðvum (GC) og dreifast síðan um sogæðakerfið með seytingu immúnóglóbúlína (Ig), sem ákvarðar greiningu og hlutleysingu mótefnavaka í gegnum frumuþroskaferli [86 ]. B frumur bregðast við mótefnavökum sem ekki eru hýsingarefni sem eru háðir viðtökum sem innihalda mótefni sem losna frá frumuyfirborði (td IgM, CD79a og CD79b) (sjá mynd 2).

Mynd 2. Samskipti B frumu og T frumu

Þróun B frumna úr blóðmyndandi forverafrumum (HPSC) á sér stað í áföngum frá pro-B frumum, pre-B frumum, óþroskuðum B frumum og vaxa í þroskaðar B frumur í fósturlifur og síðan í beinmerg. B-frumuviðbrögð eru skilgreind með CD-merkjum sem þróast yfir í þroskaða B-frumu undirhópa, eins og B-1, B-2 og reglubundnar B frumur [87,88]. Rannsóknir á nýrri undirgerðum B frumna sem skilgreindar eru af öðrum svipgerðar CD merkjum með einfrumu raðgreiningu hafa átt sér stað síðan 2017. Merkilegt nokk mynda B eitilfrumur allt að 1011 mótefni, eða B-frumuviðtaka (BCR), innan hýsils sem gangast undir klónaval og líkamsstökkbreytingu (SHM) sem leiðir til sérhæfðar mótefnavakaeitrópróteinaþekkingar. BCR samanstendur af þverhimnuhluta sem nær í gegnum umfrymið með próteinröðum sem eru háðar samvirkni eða örvun frá öðrum próteinum til að virkja B frumur. Aðrar CD sameindir skilgreina B frumuþróun eða ætterni (td CD19, CD21). Þetta skipta máli fyrir staðsetningar frumna, þroskastig, þroska og virkjunarástand. CD10 tjáning á sér stað á fyrsta stigs B frumu ættarfrumum (td pro-B, pre-B frumu og GC) og getur breyst í gegnum þroska með öðrum sýndum (sjá mynd 3) [89]. Þar að auki er CD27 eingöngu í minni B plasmafrumum, á meðan CD5 einkennir B-1 frumur og DCs (sjá mynd 3). B-frumuviðtaka (BCR) fléttur með öðrum T-frumumerkjum (TCR) sem hafa áhrif á þroska og framsetningu mótefnavaka leiða til for-GC minni B-frumna (pre-GC MBCs) og skammlífra plasmafrumna (SLPCs) sem framleiða snemma mótefni með litla sækni . Aðrar B frumur ná til GC, þar sem mótefnasækni og -val geta átt sér stað með klónalvali/SHM, breytir próteinbyggingu með flokksskipta endurröðun (CSR), sem leiðir til langlífra plasmafrumna (LLPC) og minni B frumna (MBC) með sértækar mótefnasamsætur, en einnig plasmablastar (PB) sem framleiða Ig af þeim fimm helstu samsætum sem koma fram sem margliða prótein (IgM, IgG, IgA, IgE og IgD) í venjulegum hýsilsértækum ónæmissvörum. Þetta er gefið til kynna innan þessara marka í sermi IgG: 80%, IgA:15%, IgM:5% og IgD:0,2%, með snefilmagni af IgE (sjá töflu 1) [90].

Mynd 3. Svipgerðir B frumna við þroska.

Tafla 1. Styrkur mótefnasamsæta í sermi og hæfni til að virkja komplement [83].

2.3. Hlutverk B frumumerkja í núverandi rannsóknum

CD19 hefur lengi verið notað sem B frumu lífmerki [104]. Á undanförnum árum hefur þetta breyst út í að lýsa B-frumum, eins og hér að neðan, með viðtökum sem eru tjáðir á mismunandi þroskastigum í B-frumuættum, sem innihalda barnalegar B-frumur, óskipta B-minnisfrumur, skiptar B-minnisfrumur og tvíneikvæðar (DN). ) B frumur, en einnig, samhliða þessu, chemokine viðtakar sem bera ábyrgð á almennri sogæðastefnu. Sumar rannsóknir benda til þess að ekki sé samstaða um DN B frumur; Hins vegar eru þessi nýlega einkenndu frumumerki DN B frumu skýrari (sjá mynd 3 eða viðbótargögn S2). Frekari DN B frumugreining á CD11c hefur betrumbætt þetta í undirhópa sem tjá CXCR5 sem tilgátu komi fram úr barnalegri B frumuvirkjun utan GC [105]. Vísindamenn útvíkkuðu þetta nýlega í tvær aðrar undirgerðir, DN3 og DN4 B frumur (sjá mynd 3). Rætt hefur verið um að auðgun innan ákveðinna DN B frumna undirhópa gegni lykilhlutverki í öðrum tiltölulega vel einkenndum sjálfsofnæmissjúkdómum (multiple sclerosis (MS), rauða úlfa (SLE), vöðvabólgu (MG) og iktsýki (RA) [ 105–107]. Til dæmis hefur verið stungið upp á að CD27+ IgD+ hafi skert genaboð í iktsýki í gegnum VH3-23D til VH1-8, sem hefur áhrif á framleiðslu eða, réttara sagt, minnkað fjölbreytileika BCR við val [108]. Þannig hafa nýlegar undirgerðir skoðað DN CD11c B frumu svipgerð (n=18) til að sýna þessa í sjálfsofnæmissjúkdómum samanborið við heilbrigða viðmiðunarhópa (SLE, Sjøgrens heilkenni). Ennfremur, B frumur (CD19) tjá CD11c+ ásamt hækkuðu magni af CD69, Ki-67, CD45RO og CD45RA, sem efnaskiptamerki og B-frumu minni svipgerðamerki, ásamt skorti á DN frumumerkjum CD21, gæti vel sloppið við eðlilega ónæmisfrumustjórnun [109,110 Þess vegna hefur eyðing B-frumna undirhópa einnig verið skoðuð í aldri, nefnd aldurstengdar B frumur (ABC), með tilliti til áhrifa á framleiðslu sjálfsmótefna [111-118].

2.4. B frumu mótefnasvörun við öndunarfærasýkingar

IgG1 og IgG3 tengdust upphaflega alvarlegum sjúkdómi hjá eldri fullorðnum með COVID-19 (n=123) sjúkdóm og meðfylgjandi óreglu í hlutleysandi mótefnum (nAbs), efnafræðilegum og T-frumuviðbrögðum, sem er frávik þar sem IgG3 var áður talið veita aukna sýklasvörun [91,119,120]. Hins vegar hefur sést að IgG skortur tengist aukinni dánartíðni hjá sjúklingum með langvinna lungnateppu (n=489) ​​í þessum hlutföllum: 56% IgG1: 27%: IgG2: 24% IgG3: 31% IgG4 [120]. Fyrri rannsókn (n=105) sem bar saman sermisfræði hCoV-229E, hCoV-OC43, hCoV-NL63 og hCoV-HKU1 leiddi í ljós að þátttakendur sýndu í öðrum hCoV mótefnasvörun með tilliti til IgG sem voru 99 %:100%:98%:91%, með IgA í nefþvottasýnum, greindist á milli 8% og 31% þátttakenda [121]. Lægri sjúkdómsvaldandi hCoVs tákna 15-30% algengra kvefsýkinga í öndunarvegi í mönnum á hverju ári, einnig með sermisjákvæðni metin á 90% hjá fullorðnum, sem gefur til kynna að hlutverk T-frumna þurfi frekari skýringar [122]. Samanburður á mótefnavaka án kórónuveiru væri því inflúensuveiran sem tjáir hemagglútínín (HA) og neuramínidasa (NA) prótein sem koma fram árstíðabundið. Í þessum tilfellum benda rannsóknir til hækkunar á IgM-sértækum HA mótefnum í sermi í H1N1 heimsfaraldrinum 2009 í þessum hlutföllum: IgM (86–94%), IgG (100%) og IgA (76 til 96%) [ 123.124].

2.5. B frumur og mótefnasvörun við SARS-CoV-2 sýkingu

Seint á árinu 2020, Plume o.fl. framkvæmt einstaka rannsókn (í stuttu máli, sjá töflu 2) þar sem SARS-CoV-2 próteinmótefnavakabrot voru skoðuð, greind þau gegn mótefnasamsætum gegn flestum veirumótefnavaka, og þær gáfu til kynna að sermisbreyting á degi 20 gæti valdið vandamálum, þar sem 97,3% brugðust gegn völdum epitopum SARS-CoV-2, en E prótein var ekki rannsakað í þessari rannsókn [125-127]. Heildartíðni einstakra mótefnasvarenda innan einstaklinga (n=103) í þessari rannsókn, sem var gerð á tímabilinu apríl 2020 til janúar 2021, er tilgreind (sjá töflu 2). Mismunandi fjölstofna mótefnasvörun myndi venjulega eiga sér stað þegar ónæmisfrumur þroskast gegn mismunandi veiru prótein mótefnavaka. Þess vegna var könnuð tíðni einstaklinga sem mynduðu fjölstofna mótefni gegn undirtegundum SARS-CoV-2 S próteins (S1, S2), M próteins og N próteins mótefnavaka í sýnum fyrir janúar 2021. Þetta var á bilinu með IgG ríkjandi gegn RBD, S1 og M prótein lénum í 100% sýna þeirra í miðlungs til alvarlegum sjúkdómum (sjá viðbótargögn S3). Tíðni IgA svarenda var 24,7–35,6%, hvarfast gegn öllu S prótein léninu, RBD, S1, S2, M og N prótein léninu, þar sem hið síðarnefnda var ekki ríkjandi í alvarleika. Það er athyglisvert að þessi rannsókn viðurkenndi takmarkanir á næmi IgE prófunar á þeim tímamótum og væri þess virði að rannsaka frekar í sambærilegum rannsóknum [126,127].

Tafla 2. Tíðni einstakra sermisfræðilegra svörunar við SARS-CoV-2 sýkingu (%) [127]. Höfundarréttarleyfi vísar til tilvitnana og/eða viðbótargagna.

Minni B-frumna og framleiðsla á S-prótein-sértæku Ig hefur verið mæld og nú má sjá að hugsanlegt hlutverk óþekktrar B frumu undirtegunda, eins og DN2 B frumur sem lækka CXCR5, eða aðra stefnusértæka viðtaka eins og CD62L ( L selectin) sem venjulega er tjáð, gæti haft áhrif á ónæmissvörun [125]. CD19+ CD24+ CD27+ CD38+ B frumur gefa til kynna að mótefnasvörun við SARS-CoV-2 S próteinsértækum B frumum fari vaxandi, þó enn frekar Hægt er að fylgjast með smáatriðum varðandi tvær aðrar viðeigandi bráðabirgða-B frumur (sjá viðbótargögn S2) [107,126]. Öfugt við aðrar rannsóknir kom í ljós að 32 amínósýrur peptíð (V551-L582) í núverandi kortlagða RBD léni gæti verið ónæmisvaldandi B frumu eðli, sem jafngildir 58,7% af IgG sýnum sem voru prófuð [127]. Hins vegar voru E-próteinmælingar gerðar í samhliða rannsóknum sem virtust ekki, í sögulegri greiningu, hafa svipaða veiruhlutleysandi eiginleika fyrir 2020, sem gefur til kynna að fyrri útsetning gæti ekki hafa átt sér stað þar sem epitopur eru mismunandi í veirumótefnavaka. Upphafleg plaque hlutleysandi mælingar benda til þess að nægilegur styrkur nAbs geti komið fram í S1, RBD og hugsanlega í N prótein SARS-CoV-2 lénum með aðallega IgG svörun. Eins og hér að ofan geta barnalegar B-frumur sem tjá IgD+CD19+CD27− (sjá mynd 3, töflu 3 og viðbótargögn S2) verið einu spár um mótefnatítrun samanborið við samanburðarhópa með mikla þýðingu (p {{33} }.009) [128].

Tafla 3. B frumu svipgerðir (aðlöguð frá Li o.fl.) [107]. Höfundarréttarleyfi vísar til tilvitnana og/eða viðbótargagna S2, sjá einnig mynd 3.

Engu að síður er sýnt fram á að sjúklingar með langvarandi COVID-19 sjúkdóm sem sýna DN (IgD− CD27−) B frumur upplifa verri alvarleika sjúkdómsins og fylgikvilla. DN1 undirmengið er athyglisvert fyrir að geyma möguleika á snemma virkjaðum minnisfrumum, en DN2 frumurnar ná yfir mótefni PB-PB-seytandi frumur sem hafa verið grunnaðar áður; Hins vegar er enn óvíst hvaða áhrif hver DN B frumu undirgerð og vélrænni eiginleiki hefur á lausn sjúkdómsins [129]. Athyglisvert er að fyrr í heimsfaraldrinum var eðli mótefnasvörunar SARS-CoV-2 S2 lénsins vísbending um að það væri tiltölulega ónæmisvaldandi og örvaði bæði IgA og IgG. Tölfræðilega sáust áttatíu og sex prósent (86%) einstaklinga hafa mótefni gegn þessu varðveitta S2 léni, með meiri styrk mótefna framleitt gegn S2 léninu en RBD léninu [130]. SARS-CoV-2 getur talist nýstárlegt með því að kalla ekki fram hærra magn seytandi IgA, eins og bæði inflúensu og lægri sjúkdómsvaldandi hCoVs. Reyndar örvaði langvarandi COVID-19 sjúkdómur hækkað magn fimm mótefnategunda í sermi af IgM, IgG1, IgA1, IgG2 og IgG3 [131–133]. Sýnt var fram á í langvinnum COVID-19 sjúkdómi að marktækt hærra IgG1, IgG2 og IgG3 kom fram á 3. degi samhliða tímabundinni hækkun á IgA1, hverfa á 7. degi; áhrifin af þessu eru óljós, sem og frumukerfin sem hafa áhrif á þetta, en rannsóknir eru í gangi. Samhliða rannsókn staðfesti einnig að IgM–IgA1, IgM–IgG1 og IgM–IgG2 voru auðguð á bráðri SARS-CoV-2 sýkingu, sem sýnir upphaflega öflugt ónæmissvörun [84]. Þess vegna var IgA breytileiki rannsakaður í sermi til að ákvarða frumu svipgerðir, þar á meðal FACS greiningu (n=135) á PB B frumum til að sýna í bráðri sýkingu að IgM og IgG voru seytt á milli 10 og 15 dögum eftir sýkingu , í þessum hlutföllum: IgM: 10,5% (bil 4,2–54,1), IgG: 27,9% (bil 7,4–64,8). Þess vegna voru B plasmafrumur (PBs) sem framleiða IgA magngreindar frekar með tjáningu fjölgunarmerkja og B frumumerkja Ki67+CD19loCD27hiCD38hi til að framleiða IgA: 61,4% (bil 18,1–87,6) sem koma fyrir í þessum mótefnaundirgerðum, IgA1: 66% (bil 26,8–88,5), samanborið við IgA2: 31,6% (bil 3,7–70,8), sem eru í samræmi við ofangreind heildarónæmissvörun slímhúðar [134]. Hins vegar sáust einstaklingar með ríkjandi IgA svörun hafa tengda hættu á dánartíðni í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi, eins og hér að neðan, sem upplifðu óreglulegan mergmyndun. Hátt IgA til lágt IgG títrun getur valdið sjúklegum afleiðingum í hýsilnum, sem felur í sér minnkaða sjúkdómsvaldandi átfrumnafjölgun, aukna frumudauða og aukna NETósu, eins og greint er frá í banvænum COVID-19 sjúkdómi á seint stigi. Einstaklingar sem eru með hátt IgG á móti IgA hlutfalli upplifa aukna bólgudeyfingu með ónæmissvörun, sem leiðir til betri spár og sjúkdómsleysi snemma og seint. Takmörkuð gögn eru til til að sýna hvers vegna SARS-CoV-2-framkallaður COVID-19 sjúkdómur sýnir svo nýja mótefnasnið varðandi IgG1/IgA1 svörun. Talið er að breytingar á Ig uppbyggingu geti valdið fylgikvillum, annaðhvort auknum sýkingum eða myndun ónæmisfléttna og í öðrum meinafræðilegum sjúkdómum eins og dengue antibody-dependent enhancement (ADE), var uppbygging IgG mótefna skoðuð. Þessar breytingar fela í sér glýkósýleringu (glýkan eða kolvetni aðliggjandi hýdroxýl eða öðrum virkum hópum) og fúkósýleringu (flutningur á sykurfúkósa úr GDP-fúkósi yfir í önnur prótein eða glýkan), og því gæti þetta haft áhrif á útflæði hvítkorna og selektínmiðlaða bindingu í gegnum frumu. himnur, sem er viðurkennt sem hugsanlegur þáttur í krabbameinsmeðferð [135,136]. Þess vegna könnuðu rannsóknir á heimsfaraldrinum (n=33) þetta í langvinnum COVID-19 sjúkdómi til að staðfesta að IgG, gegn SARS-CoV-2 RBD próteininu, gæti hugsanlega haft áhrif á Mφ losun IL -1, IL-6, IL-8 og TNF [137]. Hins vegar er ályktað að IgG3 og IgM séu ábyrg fyrir 80% af hlutleysingu SARS-CoV-2, með ábendingum um að IgG3 glýkósýlering hafi áhrif á SARS-CoV-2 bindisérhæfni við S próteinið [132,138]. Eins og fyrr segir getur glýkósýlering átt sér stað þar sem N-N-tengdur glýkan myndast innan IgG-Fc svæðisins. Í samræmi við athugun á IgG undirtegundum, kannaði nýleg rannsókn frá Brasilíu áhugi IgG (n=47) á SARS-CoV-2 prótein til að sýna aukningu á IgG1 og IgG3 gildum á 8. degi, og Þéttni IgG4 var minna greinanleg á rannsóknartímabilinu. Dánartíðni eftir 8-21 dag sýndi hærra and-RBD IgG4 gildi í samanburði við endurheimt, sem stangast á við aðrar rannsóknir og er tiltölulega óþekkt með tilliti til IgG4 meinafræðirannsókna [139]. Upphafsskimunir á N/S/E SARS-CoV-2 próteinum í smærri árgöngum (n=320) bentu til þess að and-N IgG og and-N IgA væru framleidd sem svar við SARS-CoV{{121 }} og IgG mótefni voru framleidd gegn S1 og E próteinum, en einnig að and-E prótein mótefnin sem framkölluð voru voru ekki marktækt hærri, sem er vísbending um núverandi ónæmisvalda í klínískum rannsóknum og þeim sem notuð eru í hliðarflæðisprófun [140]. Eins og er, in vitro, hefur verið ákvarðað að sérstakar minni B frumur séu framleiddar í allt að 6 mánuði, samanborið við S prótein, með IgG mæld við 66% og IgM við 100%, sem væri í samræmi við annað hvort náttúrulega sýkingu eða bólusetningu [ 126].

Kostir cistanche viðbót - hvernig á að styrkja ónæmiskerfið

2.6. Hlutverk B frumumerkja við SARS-CoV-2 sýkingu og aðrar aðstæður

Mótefnasvörun við SARS-CoV-2 ónæmisvaka er hægt að ná hjá einstaklingum á and-CD20 meðferð með því að hefja endurfjölgun B frumna [150]. Í fjarveru B-frumna myndast engu að síður sterk T-frumuviðbrögð, sem getur hjálpað til við að vernda gegn langvinnum SARS-CoV-2-völdum COVID-19 sjúkdómi í þessum áhættuhópi [150]. Þess vegna er nauðsynlegt að skilja eðli þessa svars. Vísindamenn árið 2020 komust að því, fyrr í heimsfaraldri, að innan langvinns COVID-19 sjúkdóms (n=52) breyttist heildarmagn B-frumna einstaklinga ekki marktækt. Hins vegar, samanborið við heilbrigða einstaklinga, minnka DN1 B frumur marktækt með alvarleika, með aukningu á DN2 B frumum sem sést á milli miðlungs til langvinns sjúkdóms, en taka eftir marktækri aukningu hjá sjúklingum á meðan sjúkdómurinn er alvarleiki DN3 frumna, en án samhliða breytinga á DN4 B frumur. Önnur undirhópur B-frumna voru því rannsökuð til að uppgötva nýjan undirmengi B-frumna sem kallast „blandabundin B-frumur eða TR“ sem gætu tengst klínískri niðurstöðu eins og hún er mæld með B-frumum sem tjá meira CD24 en CD21 [129]. Þetta var áhugaverð niðurstaða vegna þess að CD24 tjáning er þekkt fyrir að hafa áhrif á frumuflutning, innrás og fjölgun, á meðan tjáning eða skortur á CD21 tengist B frumuskiptum og minni með komplementpróteinum. CD21 er einnig tjáð á eggbús dendritic frumum og vitað er að það tengist sem flókið við komplementprótein (C3dg, C3d og óvirkt C3b) á yfirborði mótefnavaka, ásamt CD19/CD81 [115,129,151]. Athyglisvert er að auknar TR frumur tengdust COVID-19 sjúkdómi sem notuð voru reglulega í blóðpróteinmerkjum sem fundust, þar á meðal hlutfall daufkyrninga/eitilfrumna, bráðafasaprótein, ferritínmagn, D-dímer og fleira. Nákvæmt eðli DN B frumna krefst frekari skýringar, þar sem undirmengi eru tengd við SLE [152]. Eins og áður fylgdi B frumu DN1 lækkun/DN2 aukningu á langvarandi COVID-19 mikið magn af CD69 og CD89 í DN2 frumum, ásamt því sem virðist vera DN2 val á IgG, en bendir einnig til þess að DN3 frumur geti framleitt VH4-34 IgG sjálfvirk mótefni, sum þeirra gætu verið verndandi [118]. Það voru fyrstu vísbendingar um að kímlínu Ig breytileg þungkeðja VH4-34 sýndi lækkaða SHM tíðni, sem hefði áhrif á þroska B frumu Ig í gegnum SHM ferlið [153]. Óbreyttar B-minnisfrumur (CD27+ IgD+ ), sögulega séð, eru hluti af eðlilegum og meinafræðilegum ónæmissvörun með minni heildar B-frumum sem seyta IgM. Til dæmis, í iktsýki, er talið að óbreyttar B frumur eigi sér stað vegna endursamsetningar gena, sem stuðlar að mótefnavali með VH3-23D til VH1-8 [108]. Athyglisvert er að BCR efnisskrá þessara frumna var breytt í iktsýki, sem sýndi nokkur af sömu merkjum og DN2 frumur, svo sem CD11c, FcRL5 og umritunarþátt (T-bet) [154,155]. Þó að mótefni sem myndast af B-frumum séu sögulega vel einkennd, er óljóst hvers vegna SARS-CoV-2 myndar há mótefnasvörun í langvarandi alvarleika en ekki við bráða sýkingu. Tímasetning mótefnasvörunar er mikilvæg í meðferð sem byggir á mótefnum, þar sem lyfjanotkun hefur áhrif á niðurstöður sjúklinga [156,157]. Naive B frumur eru virkjaðar með aðstoð T-frumna í eggbúum (TFH) [158]. Þess vegna kom í ljós að þessi nýja mótefnatjáning af völdum SARS-CoV-2-sýkingar af völdum langvinns COVID-19 sjúkdóms var af þremur mótefnaflokkum og ísógerðum, þar á meðal IgM, IgG1, IgA1, IgG2 og IgG3, sem þarfnast frekari greiningar. Nýleg greining á SARS-CoV-2 S prótein ónæmisvaka bendir til þess að Ig tjáning með toppsértækum B frumum eftir sex mánuði hafi verið framleidd á þessum bilum: IgG: 61,33–77,46%, með samhliða IgA: 3,04–7,37% og IgM : 12,30–24,97%, til að taka eftir marktækri lækkun á IgG/IgA með marktækri aukningu á B frumusértæku IgM eftir sex mánuði [159.160]. Eins og áður hefur verið rætt um þróast B frumur í GCs og í gegnum litla hóprannsókn (n=15) var hlutverk TFH frumna í blóðrás útskýrt til að sýna S–prótein-sértækar B frumur þróast í gegnum SHM. Eftir fimm mánuði höfðu 66% af þessum hópi B minnisfrumur til að bólusetja ónæmisvalda, og þessar rannsóknir bentu til þess að það væri lítilsháttar aukning á nAb [160-163]. Samhliða öðrum rannsóknum kom ekki á óvart að minniháttar munur á minnisskipta frumum sem aðalþýði var fulltrúi (miðgildi: 59,92%) [163]. Greining þeirra skoðaði SARS-CoV-2-sértæk B frumumerki, CD27 og CD38, sem fylgdu marktækri aukningu á CD27hiCD38hi PBs. Þetta kom fram hjá einstaklingum sem náðu sér samanborið við ósýkta einstaklinga eftir sex mánuði, með IgD+CD27+ og IgD− CD27+ B frumum sem minnkaði verulega í langvinnri SARS-CoV-2 sýkingu [161.163 ]. Auka eggbússvörunin er enn í rannsókn og Woodruff o.fl., í hóprannsókn, bentu til þess að DN2/DN1 B frumuhlutfallið gæti staðið undir sumum sermisfræðilegum frávikum í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi með CXCR5 lækkað og CXCR3 uppstillt. CXCR5 er chemokine sem er samsett tjáð á sérstaklega B frumum og TFH frumum sem bera ábyrgð á að beina B frumum að GCs, en CXCR3 hefur marga bindla, þar á meðal CXCL8/9/10, en er helst tjáð á TH1 frumum og meirihluta T frumu íbúanna, DCs og minni B frumur. Vísbendingar eru að koma fram um að uppstjórnun eða breytingar á þessum og öðrum krabbameinslyfjum (CXCR3, CXCR5, CCR7) í bráðri sýkingu og niðurstjórnun í alvarleika væri frekari vísbending sem skiptir máli fyrir þroska DCs [162,163]. Tölfræðileg þýðing var áberandi á milli stækkunar mótefnaseytandi frumna (ASC) með miklu magni CD21-B frumna óháð lengd sýkingar [164,165]. B frumur stjórna mótefnaseytingu og skýrslur benda til þess að IL-10 og IL-21 séu ábyrgir fyrir B-frumuflokkaskipti yfir í IgG1, IFN-flokkaskipti yfir í IgG2 og TGF-skipti úr IgA1 í IgA2 svör [133]. Rannsóknir sýna að IgG1 og IgG3 (n=123) hafa fylgni í langvarandi SARS-CoV-2 alvarleika og frumu IL-1 svörun [119]. Talið er að IgG2 skipti meira máli fyrir viðbrögð baktería við hylkjafjölsykru mótefnavaka. Samhliða in vitro rannsóknir benda einnig til þess að SARS-CoV-2 IgA1 og IgG3 geti haft verndandi hlutleysandi áhrif við SARS-CoV-2 sýkingu [164,165]. Frekari rannsókna þyrfti til að skýra þessa fullyrðingu. Aðrar rannsóknir (n=82) staðfesta að við langvarandi SARS-CoV-2 sýkingu, innan sjö daga, er mótefnasvörun í sermi 60% IgA, 53,3% IgM og 46,7% IgG, þar sem IgG nær 100 % eftir 2. dag [166.167]. Þess vegna sýnir einfrumugreiningarrannsókn á alvarlegum COVID-19 sjúkdómi í smáatriðum að DN1 frumur tjá IgA2 gen og geta því hugsanlega seytt IgA2, á meðan DN3 B frumur sáust tjá IgM gen sem voru ekki til í DN2 frumum, með DN4 frumum sem hafa IgE gen og samsvarandi Fc viðtaka gen (sjá mynd 3) [118]. Athyglisvert er að þetta vekur möguleikann á því að það séu mismunandi T-frumuóháðar og T-frumuháðar leiðir í B-frumum meðan á COVID-19 sjúkdómnum stendur, sem nú er lagt til í öðrum samhliða rannsóknum. IgE getur því verið framleitt af DN4 B frumum, en sermi frá COVID-19 sjúklingum var ekki talið eiga tölfræðilega þýðingu fyrir þennan frumuundirhóp [118.129.168.169]. Vitað er að IgE veldur kyrningi í mastfrumum fyrir tilstilli FcεRI viðtaka með meiri sækni og næmi prófunar krefst staðfestingar og þróunar fyrir þetta mótefni sem venjulega sést í ofnæmissvörun þar sem IgG svörun er ríkjandi við sýkingu. Það er athyglisvert að H2 viðtakinn, sem er til staðar í magaslímhúð, heila og mastfrumum, var miðuð við að nota mótlyf famótidín í rannsóknum, og sást hafa nokkur áhrif á að stilla SARS-CoV-2-sýkingareinkenni með samvirkni við átfrumna TH2 frumuboðefni [170-172].

3. Bólgufrumur og átfrumur

3.1. Kynning á daufkyrningum

Polymorphonuclear daufkyrninga (PMN) eru kornótt og þrífleygð, sem er algengasta hvítkorna í blóðrásinni, sem táknar á milli 40% og 80% hvítkorna hjá venjulegum fullorðnum. Íferð daufkyrninga í öndunarvef er einkennandi fyrir marga bólgusjúkdóma [173]. Daufkyrningar eru kornóttar, verka gegn mótefnavaka með því að dreifa azurophilic umfrymiskornum með því að nota verkun próteinleysandi ensíma (td myeloperoxidasa, elastasa og próteinasa-3) en einnig laktótransferríns, lýsósíms eða hvarfefna súrefnistegunda (ROS), sem eru einnig örverueyðandi. , til að hreinsa sýkla [174,175]. Sjúkdómsvaldandi áreiti kallar á losun kalsíums í frumum um endoplasmic reticulum (ER), sem leiðir til virkjunar á próteinkínasa C (PKC) og samsetningu NADPH oxidasa flóksins sem myndar ROS. Daufkyrningafrumur mynda blóðmyndandi stofnfrumur (HPSC) í beinmerg og eru skammlífar, á milli 1 og 7 daga, og fara yfir frumuhimnur með selektínháðri fanga og integrin-miðlaðri viðloðun (sjá viðbótargögn S1), eftir það flæði til vefja eiga sér stað, og þeir lifa í 1–2 daga á meðan þeir eru í blóðrás og hreinsa með átfrumnun Mφ. Þróun daufkyrninga á sér stað í beinmerg frá forvera daufkyrningum og má í stórum dráttum flokka samkvæmt CD merkjum sem CD81+CD43+CD15+CD63+CD66b+, sem aðgreinast í óþroskaður daufkyrninga sem tjá CD11b+CD66b+CD101+/−CD10−CD16+/− áður en þeir þroskast í beinmerg til að tjá CD11b+CD66b+CD101+CD10+CD16 [ 176]. CD16 er samtjáð á öðrum frumum þar á meðal NK frumum, einfrumur, Mφ og ákveðnum T frumum [176]. CD16 (Fc RIII) hefur undirgerðir þar á meðal CD16a og CD16b (Fc RIIIa/Fc RIIIb), á meðan CD11 og, sérstaklega, CD11b eru flokkuð sem mikilvægari fyrir fólksflutninga og lungnabólgu [177-179]. Það er athyglisvert að CXCR2 og CXCR4 virðast vera lykilstýringar innan þessa frumuundirhóps sem tengjast lungnatrefjun, en þeir móta einnig frumu hvatberavirkni, flutning daufkyrninga og daufkyrningaheimsókn með því að nota viðloðun viðtaka sem innihalda CD62L [180-184]. Hins vegar, nýlega, er nú talið að CD11b og CD18, sem eru alls staðar tjáð, þurfi CD47 við þekjuflutning [185,186]. Athyglisvert er að Alberca o.fl. skoðaði ný frumuundirgerð, skilgreind sem mergfrumubæli (MDSC) frumur, innan rannsóknartilvikarannsókna: CD33+CD11b+HLA–DR–CD14–CD66b+ og CD33+CD11b+HLA– DR– CD14+CD66b-frumur. Í útlægum blóðmerkjum langvinns COVID-19 sjúkdóms sást þetta tengja mögulega M–MDSC og polymorphonuclear P–MDSC, sem hafa verið tengd við langvarandi bólgu [186]. Þessum MDSC-skilgreindu frumum hefur í upphafi verið lýst í krabbameini, HCV og HIV til að hafa áhrif á útbreiðslu T-frumna. Nýlegar skýringar á hugsanlegum svipgerðum sem koma fram sem M–MDSC (CD11bloD14+CD15–HLA–DR–) og P–MDSC sem CD11bloCD14–CD15+ HLA–DR– hefur verið bent á að hafa áhrif á TREGS eins og hér að neðan í gegnum TGF- sem hefur áhrif á heildarjafnvægi bæði TREGS og sjálfsþolandi DCs [187].

Kostir cistanche viðbót - hvernig á að styrkja ónæmiskerfið

3.2. Daufkyrningafrumumerki eftir hýsils SARS-CoV-2 sýkingu við COVID-19 sjúkdóm

Meðan á langvinnum COVID-19 sjúkdómi stendur er talið að daufkyrningar myndi daufkyrninga utanfrumugildrur (NET), eins og við ræddum hér að ofan, þar sem frumuboðin innan eru trufluð, sem veldur virkri degranulation eða „NETosis/neutrophil apoptosis“ [188]. Nákvæm aðferð NETosis framlags er enn óþekkt [189]. Þess vegna beindust nýlegar tilviksrannsóknir (n=64) að því að bera kennsl á frumumerki daufkyrninga frekar. Meðan á COVID-19 sjúkdómnum stendur, virðast sumir bæla örvun á IFN-framleiðslu með óþekktum frumuhluthópum sem örva T-frumufjölgun en tekst ekki að virkja T-frumur [190]. Nokkrir höfundar benda til þess að hýsildrifið ónæmissvörun sé orsakavaldur vegna skorts á framleiðslu á interferónum af tegund I og III í tengslum við hækkuð chemokines og IL -6 er orsakaþáttur í meinafræði kransæðaveiru [191,192]. Þó að IL-6 gæti verið ríkjandi frumueyðandi eftirlitsaðili NETosis, eru önnur próteinmerki skýrari, þau eru utanfrumu DNA (cDNA), virkni daufkyrninga elastasa (NE) eða myeloperoxidasa-DNA (MPO-DNA), og þau tengjast með alvarleika sjúkdómsins, mælt í daufkyrningum með merkjum CD33loCD16+CD11b+ [193]. Vísindamenn fundu nýlega (n=155) að NE, histón-DNA, MPO-DNA og frítt tvíþátta DNA (dsDNA) jukust með samhliða DNasa minnkun og versnun daufkyrningaörvunar sem átti sér stað með IL-8 , CXCR2 og DAMPs með skert niðurbrot á NET með DNase 1 og DNase 11L3, sem er lagt til að virki sem eftirlitsaðilar fyrir daufkyrninga DNA umbrot [194]. Nýlegar útdrættir gefa einnig til kynna fylgni milli þessara og annaðhvort himnubundið eða leysanlegt CD13 [195]. Yfirgripsmikil daufkyrningagreining (n=384) sem notar einfrumugreiningu flokkaði sex frumuástand skilgreind með bólgugenum (IGS) til að gefa til kynna að samhljóða IgA1:IgG1 hlutföll séu hækkuð í dánartíðni kransæðasjúkdóms, þar sem IgG gefur til kynna mótefnaháð daufkyrningaátfrumna og IgA2 sem örvar frumudauða [133]. Athyglisvert er að daufkyrninga tjáði marktækt aukið magn við þroska CD32 (Fc RII), CD16b (Fc RIIIb) og CD89 (Fc R), helstu Ig viðtaka sem hafa viðkomandi bindla á B frumum, hér að ofan. Engar þekktar rannsóknir eru til sem tengja IFN af gerð III við þessa samsætuskipti. Svipuð rannsókn á IgA2 (n=97) staðfesti að anti-SARS-CoV-2 IgA2 í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi tengdist cDNA [131]. Syncytia myndun og NETosis eru líklega í myndun ónæmisfléttna sem ójafnvægi vegna eða af völdum storkukvilla og ónæmissega [131,193]. Innþelsfrumur í rannsóknum bæði á dýrum og mönnum leiddu í ljós að æðaþelsfrumur gætu verið sýktar beint; Hins vegar sýna rannsóknir samtengingu með CD31 innan trufluðs bólgna æðaþelslags, eins og sést greinilega af uppstjórnun margra viðloðunarsameinda (td P-selektín) og losun efnafræðilegrar þáttar CXCL10 samhliða IL-6 (sjá viðbótargögn S4) [ 196.197]. Viðbótarþættir sem taka þátt í blóðflögustorknun eru vWF, með aukinni P-selectin og E-selectin uppstjórnun, sem sést hjá sjúklingum með langvarandi COVID-19 sjúkdóm, sem allir tengjast vanstarfsemi æðaþels [76,198]. Við að kanna þetta frekar, Kuchroo o.fl. gerði einfrumugreiningarrannsókn (n=168) á sýktum SARS-CoV-2 sjúklingum sem gerðu greinarmun á daufkyrningum og einfrumuþýðum með einfrumumerkjum (CD16hiCD66b/CD14−CD16hiHLA–DRlo) til að finna T hjálpar 17 (TH17) frumusvörun myndaði IFN- og gransím B [199]. Í þessari lykilniðurstöðu auðguðust CD14−CD16hi einfrumur í alvarlegri sýkingu og það var staðfest að HLA-DR uppstjórnun tengdist alvarleika. Árið 2020 var sýnt fram á hjá sjúklingum með langvinna COVID-19 sjúkdóm að IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF- og IFN - með C-viðbragðsprótein (CRP) sem tengist IL-10 [34]. IL-1 er lykilsýtókín sem tengist daufkyrningavirkjun, sem deilir samlíkingu og svipuðum aðgerðum með áðurnefndum TLR fjölskyldum [64.200]. IL-1 og IL-1 hafa verið tengdir við COVID-19 sjúkdóminn í öðrum rannsóknum. Þess vegna voru nákvæmar aðferðir stjórnunarensímsins glýkósýltransferasa, -1,6-fúkósýltransferasa (FUT8) skoðaðar, aðeins til að finna litla fylgni við sjúkdómshorfur, en í ljós kom að tjáning viðtaka var uppstýrð innan annarra mergfruma einfrumuhólf sem tjá CD16a (Fc RIIIa), þar á meðal klassísk (CD14hi/+, CD16−−) og millistig (CD14hi/+, CD16lo/+), og óklassísk (CD14−−/lo, CD{{108} } ) merki sem innihalda einnig CD11c DC sem einnig eru HLA-DR+ mergfrumur [146,201–204]. Klínískar rannsóknir eru enn í gangi til að skýra frekar frumudrep IL-1, IL-6, IL-8, TNF-, TGF-, IFN-, IL-17, IL{{122} }, IL-22, IL-23 og IL-10 og ROS framleiðsla í COVID-lungnabólgu, með niðurstöðum í bið (viðbótargögn) (NCT04930757, NCT04434157 og NCT05520918). Eins og hér að ofan, munu daufkyrningaprótein sem eru rofin við NETosis náttúrulega hafa áhrif á utanfrumujónir og sérstaklega kalsíumjafnvægi sem krafist er af öðrum frumubeinagrindapróteinum með innanfrumuensímum, sem eru ekki endilega niðurbrotin, sem innihalda MPO, histón og aðra próteasa innan þessa frumu- og ónæmisfrumuumhverfis [205 ].

3.3. Einfrumufrumuþróun

Síðan FACS kom til sögunnar og Ehrlich og Metchnikoff fundu einfruma, eru nú auðkennd einfruma undirmengi í stórum dráttum skilgreind með klassískum (CD14hi/+, CD16−), millistigum (CD14hi/+, CD16lo/+) og óklassískum (CD14). −/lo, CD16+ ) merki [203,206,207]. Einfrumur eru um það bil 10% af hvítkornastofninum og þær eru skammlífar (1–2 dagar) á meðan þær eru í blóði, beinmerg og milta (sjá mynd 4).

Mynd 4. Hlutverk frumna sem sýna mótefnavaka í SARS-CoV-2 sýkingu

3.4. Einfrumumerki við SARS-CoV-2 hýsilsýkingu

Í COVID-19 sjúkdómnum var gefið í skyn að klassísk CD16−− monocytes væru uppspretta uppstýrðs chemokine CCR2, ásamt daufkyrningum krabbameinslyfja IL-8 (CXCL8) og TNF- með uppstýrt genatjáning og nýmyndun IL-1 og IL-18 með færri staðfestum CD14+CD16++ einfrumum. Ennfremur sást að niðurstjórnun HLA-DR hjá alvarlegum sjúklingum (n=12) hafði áhrif á heildarmynd veirumótefnavaka [201,211,212]. Þessir frumuhópar einkennast enn frekar af CD195 (CCR5), sem og TNF- viðtaka CD120a/CD120b (TNFR1/2). Báðir þessir viðtakar fundust í blóðsermi og uppstýrðu ásamt ADAM17, sem vitað er að hefur áhrif á losun L-selektíns (CD62), með ADAM17, TNF-convertasa, sem einnig var stjórnað í bólgusjúkdómum (IBD) [213,214]. Önnur leysanleg ónæmisfrumuúthellingarmerki voru mæld í sermi (sCD14 og sCD163), og þótt ótengd alvarleika sjúkdómsins, voru þau í fylgni við staðlað blóðseruprótein (bráðfasa prótein, ferritín, LDH, CRP og prókalsítónín) [215]. Auk þess sýndu CCR5 hömlunarrannsóknir, meðan á langvarandi SARS-CoV-2 sýkingu og sjúkdómi stóð, að breytingar á CD14/CD16 undirhópum eiga sér stað sem hafa áhrif á bólgueyðandi frumufrumur samhliða CD4+/CD8+ T frumu minnkun. Þessir vísindamenn sýndu að IL-2, IL-4, CCL3, IL-6, IL-10, IFN- og VEGF hækkuðu og að auki lækkuðu TREG frumur samhliða GM-CSF minnkun, sem hefur áhrif á þróun einfruma [216]. FACS greining var notuð fyrir NK frumugreiningu og til að aðgreina CD14hi/+, CD16−−einfrumur með CD16 merki til að finna tilvik með bólgueyðandi virkjun (NLRP3) sem sést af kaspasa-1 virkni í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi. Þetta var í samræmi við vanstjórnun hvatbera ofuroxíðs og lípíðperoxunarmerkja um oxunarálag. Þessar niðurstöður voru síðar staðfestar í gasdermin D klofningsrannsóknum [217]. Gasdermin D (GSDMD) er þekkt sem svitamyndandi prótein sem er marktækt virkjað af SARS-CoV-2 sýkingu daufkyrninga, mæld með kaspasa 1/3 virkjun sem hugsanlegan NETosis og pyroptosis örvun [218,219]. Að auki reyndust 6% SARS-CoV-2 sýktra einfruma hafa önnur gjóskumerki við mælingar á GSDMD, IL-1, IL-1RA, IL-18 og LDH, auk þriggja lykilefna: CCL7, CXCL9 og CXCL10 (sjá mynd 5) [220]. In vitro rannsóknir sýndu að þetta gæti verið orsakasamband í seytingu IL-1 með SARS-CoV-2-útsettum einfruma [221]. Nánar tiltekið var fjöldi klassískra einstofna í blóðrás (CD14hi/+, CD16−) auðgaður með niðurstýringu CCR2 og HLA-DR, en fjöldi millistigs (CD14hi/+, CD16lo/+) og óklassískra (CD14−/lo) , CD16+) einfrumum fjölgaði [222]. Önnur umritagreining staðfesti að CD14hi/+CD16lo/+ millistig var með tímabundið interferon-örvað genamerki (ISG) í bráðri SARS-CoV-2 sýkingu (IRF7, IFI44L, IFIT1 og IFIT3). Greiningin sýndi líka, ótrúlegt, að IL-8 (CXCL8) og IL-1 ásamt CCL3 voru verulega uppstýrt án þess að framkalla bólgueyðandi frumufrumugena eins og TNF, IL-6, IL -1, CCL3, CCL4 eða CXCL2 í frumunum sem höfðu minnkaða HLA-DR tjáningu og minni getu til að sýna mótefnavaka [223]. Á hinn bóginn, nýlega, í SARS-CoV-2 tilvikssamanburðarrannsókn (n=37), hefur verið skýrt að það var upphaflega aukning á klassískum einfrumur (CD14hi/+, CD16) −−) með lækkun á millistigsfjölda (CD14hi/+, CD16lo/+) og hægfara eðlilegri eðlilegri einfruma (CD14−/lo, CD16+) 6–7 mánuðum eftir eftirfylgni, með breytingum við aðrar frumuundirgerðir fyrir neðan [203,204,207,224].

3.5. Átfrumur Umbrot og virkni

Á árunum 1950–1970 voru efnaskiptahringar átfrumna (Mφ) skoðaðar náið í því sem þá var kallað Warburg áhrif, þar sem Mφ í æxlum sást breyta efnaskiptasniði. Reyndar sýna nýlegar rannsóknir að virkjun Mφ eða DCs með ýmsum áreiti (LPS, TLR3 bindill fjöl (I: C), tegund I IFN) framkallar efnaskiptaskipti. Efnaskiptasnið breytast þannig frá oxandi fosfórun (OXPHOS) í glýkólýsu með tilheyrandi lækkun á TCA hringrásinni, á meðan laktatframleiðsla knýr Mφ umbrot og flæðir upp í gegnum pentósa fosfatferilinn [225]. Mφ er algengasta ónæmisfrumugerðin í lungum, flokkuð sem alveolar φ (AMφ) eða millivefsfruma (iMφ). Átfrumur (Mφ) eru upprunnar úr blóðeinfrumum sem flytjast á milli æðavefja með formgerð sem þekkir TLR, sýklatengd sameindamynstur (PAMP) og sjúkdómsvaldandi mótefnavaka. Erfitt er að draga ályktanir með vísan til Mφ víxlverkana við B/T frumur, eins og útskýrt er hér að neðan (sjá mynd 6).

Mynd 5. Svipgerð einfrumufrumu.

3.6. Stórfrumuflokkun

Minni gögn hafa skilgreint millivefsátfrumur (iMφ), samanborið við alveolar macrophagar (AMφ) sem eru vel skilgreindir sem eftirlitsaðilar fyrir lungna-lungnaónæmisviðbrögð. AMφ og iMφ eru báðar vefjabúnar átfrumufrumur sem innihalda einnig heila örverur, Kupffer frumur í lifur og fleiri. Þess vegna eru AMφ aðgreindar í getu sinni til að framkalla og hamla bólgusvörun við útsetningu fyrir sýkla og breyta frumuyfirborðsmerkjum með því að nota complement-opsonization viðtaka og aðrar mynsturþekkingarsameindir, eins og hér að ofan, sem auðvelda átfrumumyndun annaðhvort frumurusl eða sýkla [226]. Mφ lýsing gerir síðan lauslega greinarmun á mismunandi bólgusvipgerðum, almennt nefndar M0 (óvirkjað), M1 (bólgueyðandi) og M2 (bólgueyðandi) með skautun og frumuskilum sem er seytt en eru ekki skilgreind eins og er. eftir geisladiskanafnakerfi [227.228]. Þar sem M-CSF og GM-CSF örva aðgreiningu var lagt til að Mφ skiptist í M1φ seytandi frumufrumur IL1-, IL-6, IL-12 og TNF-, með M{ {18}}eins og að seyta TGF-, IL-10, IL-4 og IL-13 (sjá mynd 7) [229].

Mynd 6. Átfrumuferli og hlutverk í sýkingu.

Mynd 7. Svipgerðir átfrumna við skautun.

3.7. Hlutverk átfrumuefnaskipta við skautun og SARS-CoV-2 sýkingu

Macrophage polarization er ferlið þar sem Mφ þróast í gegnum þroska og tileinkar sér mismunandi virkni- og seytingaráætlanir til að bregðast við merkjum frá örumhverfinu þar sem þau eru staðsett á tilteknum tímapunkti. Þessi tvíþætta meðfædda og aðlögunargeta tengist mörgum hlutverkum í öllum lífverum þar sem áhrifafrumur taka þátt í miðju flestra líffræðilegra ferla. Nánar tiltekið taka þeir þátt í brotthvarfi frumurusa, sýkla, fósturþroska og vefjaviðgerða með því að nýta fjölda ónæmiskerfisfrumna sem innihalda B eitilfrumur, DCs, TH1, TH2, NK frumur og fleiri, hér að neðan (sjá myndir 1 –12) [232]. Það er athyglisvert að talið er að IFN- skauta M1φ, sem veldur uppstýringu á bólgusýtókínum við veirusýkingu á sama tíma og það hindrar vöxt og eykur frumudauða lungnafrumna in vitro [233]. Því þarf að huga að truflun á AMφ skautun í samhengi við aðrar in vitro eða in vivo rannsóknir á öndunarfærum þar sem bæði bandvefsbólga og bólga geta komið fram (td silicosis) [234]. M1φ og M2φ, ásamt genapróteinmerkjum innan berkjualveolar lavage fluid (BALF), eru ein leið til að ganga úr skugga um breytingar á skautunarástandi sem tengjast sjúkdómnum. Einnig er hægt að nota frumulitunaraðferðir eins og hematoxylin/eosin og trichrome litun á lungnavef. M1φ/M2φ svipgerðir virðast gangast undir mismunandi svipgerðabreytingar sem hafa áhrif á T-frumur og Ig-flokkaskipti sem af þessu leiðir, sem og mismunadrif mótefnavakakynningu samhliða kemókín- og cýtókínlosun í bæði öndunar- og slímhúðahólfum, sem verða fyrir áhrifum af þáttunum hér að neðan. M1φ getur framleitt nituroxíðsyntasa (iNOS), sem notar L-arginín til að framleiða nituroxíð (NO) á meðan M2φ notar arginasa 1 (ARG1), sem vatnsrýrir L-arginín í L-ornitín fyrir kollagenmyndun. Þess vegna, meðan á sýkingu og/eða átfrumumyndun Mφ stendur, gætu breytingar á umbrotsefnum utan frumu átt sér stað, sem hafa áhrif á skautun og breytt oxunarfosfórunarjafnvægi sem er háð neyslu amínósýru. Ennfremur er mögulegt að M1φ sem umbrotnar utanfrumu arginín í NO og L-sítrullín með aukinni glýkólýsu, fitusýrumyndun og ATP umbrotum gæti breytt magni umbrotsefna. Til samanburðar sýnir M2φ aukið OXPHOS og glútamín umbrot sem táknar því efnaskiptafrumubreytingu sem gæti átt sér stað á svipaðan hátt [235-237]. Rannsóknir eru tiltölulega óljósar um hvort M2φ virkjun sé háð glýkólýsu. Þess vegna er umbrot hjá COVID-19-sýktum einstaklingum í meginatriðum viðeigandi fyrir starfsemi ónæmisfrumna þar sem minnkað tryptófan sjúklinga sást með hækkun á L-kýúreníni, sem eykst venjulega með aldrinum [238]. Tryptófan er nauðsynleg amínósýra stjórnað af ensímum indólamín 2,3-díoxýgenasa-1 (IDO-1) eða indólamín 2,3-díoxýgenasa-2 (IDO-2), að lokum sem leiðir til framleiðslu kynureníns. Rannsakendur skýrðu IDO-2 í hóprannsókn (n=21) með svipaða meinafræði til að staðfesta að bæði IDO-1 og IDO-2 hafi komið fram í ríkum mæli innan og utan AT1, AT2 frumur, millivefs- og æðaþelsfrumur, þar sem IDO-2 er að mestu leyti staðsett í lungum frekar en vefjum. Valdar ónæmisfrumur (Mφ, DCs og daufkyrninga) flytjast inn í öndunarhólfið í SARS-CoV-2-sýkingu af völdum COVID-19 sjúkdóms [238,239]. Þess vegna bendir þessi augljósa staðfesting á því að IDO hafi verið tjáð í sjúkdómnum, ásamt takmörkuðu framboði annarra rannsókna, til þess að þekkt valin M2φ merki IL-10/CXCR4 geti aukist, en T-frumuviðtakarnir CCR7 og IL{{56 }}A (IL-12p35) hefur verið þekkt fyrir að minnka í öðrum trefjasjúkdómum [240]. M1φ og M2φ svipgerðir eru skýrari með útsetningu fyrir öðrum in vivo bakteríum og veirum [241,242]. Bandvefsmyndun á sér stað í kringum æðahólf og innan æðaþelslaga og er skiljanlega tengt COVID-19 sjúkdómi og langvarandi afleiðingum þar sem vefur stífnar, samhliða minnkaðri súrefnisgjöf og truflun á lungum. Til dæmis er Galectin-3, sem kolvetnabindandi prótein, framleitt í lungum af AMφ og þekjufrumum. M2φ seyting TGF- eða IL-10 getur því annað hvort örvað seytingu vefjalíkanapróteina eða stjórnað TREG frumum í bráðum lungnaskaða. TGF- er talið virka samverkandi við -AMφ við seytingu sjónhimnu dehýdrógenasa (RALDH), ensíms sem hvatar umbreytingu sjónhimnu yfir í retínósýru innan frumunnar, sem er mikilvægt fyrir umritunarþáttinn retínósýrutengda munaðarlausa viðtaka gamma t ( ROR t) [235,243,244]. Nýlegar heimildir benda til þess að M2φ sé háð meiri orkuframleiðslu [235,236,244]. Þess vegna, eins og lýst er hér að ofan, eru einu aðrar viðeigandi ónæmiskerfisfrumur, mastfrumur, basófílar og eósínófílar, ræddar annars staðar en þær voru rannsakaðar árið 2021.

Mynd 8. Starfsfjölbreytileiki tannfruma í þroska

Mynd 9. Svipgerðir tannfruma

Mynd 10. Náttúruleg drápsfrumu svipgerð fjölbreytni og þroska

 Mynd 11. Fjölbreytileiki T-frumu svipgerða og þroskafrumumerki

Mynd 12. T frumu svipgerð fjölbreytileika og þroska frumumerki

3.8. Svipgerðir, frumufrumur og efnafræðilegar stórfrumur við SARS-CoV-2 sýkingu

SARS-CoV-2-sýkt Mφ in vitro sást sambyggðast við frumuhimnur æðaþels, tjá CD31 (PECAM-1) samhliða innþekjufrumur og sýna einnig virkjunarmerki fyrir exósóm sem tjá mRNA fyrir IL{{4} } , kaspasi 1 og NLRP3 frá sýktum einstaklingum [249]. Það er athyglisvert að viðtakar til mótefnismyndunar innihalda CR1/CR2, en einnig exósóm CR3 og CR4 (2 integrin), sem og CD11b/CD18 (M 2) tjáð á daufkyrningum sem geta bundið iC3b sem er duglegur átfrumuviðtaki, þó margar integrin undireiningar eru einnig uppstillt (sjá viðbótargögn S1). Þess vegna kom í ljós að HLA-DR (kóðuð á litningi 6p21.31), sýndi S prótein mótefnavaka og samsettar peptíðeiningar af S1/S2/RBD, þannig að þetta táknaði lykilniðurstöðu þess að mótefnavakakynning átti sér stað [233]. Athyglisvert er að bæði Mφ og MDSC tjá CD68 og CD163, sem voru rannsökuð árið 2018 í tengslum við blóðflagnafæð (ITP) til að reyna að skýra svipgerðir MDSCs frekar. Fyrstu vísbendingar um að chemokine viðtakar og bindlar stýrðu flutningi hvítkorna voru augljósar með CCL2/CCL3 og eotaxíni. Einnig var gefið til kynna að IL-1 gæti stækkað báðar þessar frumugerðir innan ITP sjúklinga áður [250]. Ennfremur skýrði einfrumu raðgreining á SARS-CoV-2 innan annarra bólgusjúkdóma (RA/CD/UC) að í BALF sýnum meðan á COVID-19 sjúkdómnum stendur, á sér stað forgangstjáning CXCL10, CXCL9, CCL2 , CCL3 og IL-1 (einnig GBP1, STAT1 genprótein). Þetta var einnig framkallað af IFN- og TNF- og því skýrt að M1φ eru bólgueyðandi í COVID-19 sjúkdómi. Hins vegar einkennast Mφ undirhópar enn frekar af HLA-DR, CD195 (CCR5) og TNFR1/TNFR2 tjáningu, sem er einnig hærra á millistigs einfrumum, fylgt eftir af klassískum og síðan óklassískum einstofnum auk Mφ [251]. Nýleg forprentun bendir til þess að við bráða SARS-CoV-2 sýkingu breyti einfrumur IGS úr meðfæddri ónæmisstarfsemi þar sem CD14+ einfrumur þróast yfir í segamyndun, sem sýnir mismunaða uppstjórnun MHC II samhliða MHC I niðurstjórnun ( HLA-DR/HLA-ABC), með tilheyrandi genamerkjum sem hafa áhrif á IFN framleiðslu (td IFNA1, IFNA2), en einnig TLR7 og AIM2, sem hafa áhrif á aukna tjáningu ferla sem taka þátt í blóðmyndun og ónæmisfrumum [207]. Aftur á móti er TNFR2 tjáð í miklu magni í óklassískum einstofnum, fylgt eftir með millifrumum, og þá var lægsta tjáningin í klassískum einstofnum [252]. Stækkaðar einfrumur með M2φ eiginleika seyta einnig IL-6, IL-10 og TNF- og tjá yfirborðsviðtaka CD11b+, CD14+, CD16+, CD{{77} } , CD80+, CD163+ og CD206+/CD14hi/+ . CD14hiCD16− Mφ sýndi bólgueyðandi virkjun, eins og sést af myndun caspase-1/ASC-flekk í alvarlegum COVID-19 sjúkdómi samanborið við væga eða heilbrigða viðmiðunarhópa [221]. Það er staðfest að M2φ eru TH2-lík og geta framleitt ofnæmissýtókín, sem tengjast endurgerð vefja og meinafræði sem felur í sér IL-4/IL-13. Hins vegar deila histamín H1 Mφ viðtaki og eósínófíl H4 einnig þessu hlutverki [171,253]. CD68 og CD163 aukast í alvarleika samhliða CD163 og TREGS. Hugsanlegt er að M2φ, ásamt bælandi TREGS, stuðli að þessu ónæmisbælandi umhverfi. Hins vegar er athyglisvert að aðrar rannsóknir komust að því að báðar M1φ/M2φ svipgerðin gætu verulega uppstýrt CD38+ CD23+ í sjúkdómi, sem getur ræst DCs og barnalegar T-frumur [254]. Ennfremur var skýrt með genapróteingreiningu að hægt væri að framkalla mismunandi M1φ eða M2φ skautun in vitro með M1φ sem tjáir IL-6, TLR4, CXCL9, CXCL10 og CXCL11, en M2φ tjáði CD206, CCL17 og CCL22 (með genamerki STAT6, IRF4) [233,255]. Þetta var áhugaverð niðurstaða, þar sem TLR4 er sögulega virkjað af bakteríumótefnavaka, á meðan CCL17 og CCL22 virðast eiga við sem DC og Mφ chemokines. Þess vegna virðist, á Mφ, að fyrir utan M1φ sem seytir IL-1, IL-8 og IL-18, eru fleiri efnafræðilegir kemókínir tjáðir, eins og CXCL16 ásamt CCL2, en bólgueyðandi M2φ tjáir transglútamínasa 2 (TGM2), apólípóprótein E (APOE), 2-makróglóbúlín (A2M), CCL13 og CCL26. Athyglisvert er að hlutverk kveikjandi viðtaka sem tjáð er á mergfrumu 2 (TREM2) próteini í hugsanlegri eituráhrifum M1φ frumna sem hafa sækni í CXCR3 viðtaka virðist skýrari en áður. Sýnt hefur verið fram á að TREM2 sé tjáð á nýaðgreindum Mφ, sem virkar sem skynjari og virkja T-frumuviðbrögð við SARS-CoV-2 sýkingu. Nýlegar athyglisverðar forprentanir staðfesta hlutverk TREM2 og iMφ við skipulagningu öndunarfærabólgu [256-258].

4. Dendritic frumur

4.1. Yfirlit yfir tannfrumu

Dendritic frumur voru formlega auðkenndar árið 1873 (Langerhans frumur) og af Steinman og Cohn árið 1973 in vivo í milta, byggt á einstakri formgerð, með takmarkaðan líftíma upp á daga, aðgreina þær frá Mφ, og þær eru endurnýjaðar með blóðmyndun frá forvera. HPSCs [265]. Upphaflega reyndust vera öflugir örvandi örvar blönduð eitilfrumuviðbragða, þetta skýrði hlutverk þeirra sem miðlæga mótefnavakakynningu með tjáningu á miklu magni MHC flokks II sameinda og integrins CD11c [202]. Þess vegna, ásamt flutningsgetu milli líffæra sem ekki eru eitilfrumur og eitilfrumulíffæri, hafa þau lykil með yfirburði til að hafa áhrif á þróun og virkni T-frumna. Hægt er að skilgreina DCs með flutningi til annars stigs eitilvefs og frumunar TN frumur (níver) ásamt Mφ í frumeitlalíffærum. Árið 1994 kom lykilþróun í rannsóknum sem lýsa in vitro frumuræktunaraðferðum til að þróa DC-líkar frumur úr einfrumum með því að nota GM-CSF og IL -4 [266,267]. Í samanburði við aðrar APC frumur, eins og Mφ og B frumur, eru þær taldar skilvirkustu APC frumur sem frumur T frumur með bæði MHC flokki I/II sameindum og skila mótefnavaka til CD4+ og CD8+ T frumum. DCs þróuðust frá barnlausum til þroskaðra úr sameinuðu monocyte/DC safni sem talið var að væri CD103+ DCs sem gætu unnið úr inflúensuveiru í LN netkerfum með víxlkynningu og voru öflugir örvar CD8+ T-frumna [268]. DC eru mynduð úr ólíkum hópi beinmergsframleiddra frumna sem flokkast sem plasmacytoid DC (pDCs), tegund 1 hefðbundin DCs (cDC1), gerð 2 (cDC2), mergfrumu DCs (mDCs) og Langerhans frumur, en einnig einfrumu DCs. (MoDC) með CD14 undirtegundum fyrir ofan sem þróast úr blóðmyndandi stofnfrumum (HPSC) (sjá töflu 4).

5. Umræður

SARS-CoV-2 og aðrar vírusar þróuðust sem dýrasýkingar sem geta farið yfir dýrahindranir. Nauðsynlegt er að hafa í huga að, óháð uppruna SARS-CoV-2, var erfðafræðileg samsvörun upp á 96,5% með Homophilus affinis og frumuendurröðunaratburðir eru nauðsynlegir fyrir bæði ónæmissvörun og áframhaldandi veirufjölgun innan dýra gestgjafar. Eins og er, fela í sér eftirlitsgögn afbrigði af SARS-CoV-2 afbrigðum í öðrum dýrum vöktun í mismunandi dýrastofnum eins og minkum (1320) og leðurblöku (8), með tiltölulega minna eftirliti með gæludýrum og dýradýrum (sjá viðbótargögn) . Skrár benda til þess að aðeins tveimur sýklum hafi að mestu verið útrýmt í mönnum og dýrum, sem eru bólusótt (Orthopoxviridae variola) og nautapest (Paramyxoviridae morbillivirus), í sömu röð [421]. Þess vegna á sér stað frekari athugun á núverandi eftirliti innan og á milli dýrastofna til að fylgjast með öðrum hugsanlegum sjúkdómsvaldandi kórónuveirum (td smitandi berkjubólgu í fuglum, svínum delta kórónuveirunni og kórónuveiru katta) til að koma í veg fyrir að slíkar dýrasýkingar endurtaki sig í framtíðinni. Tilraunarannsóknir á 16. og 18. öld um allan heim, sem Edward Jenner hóf seint á 17. aldar á kúabólu, leiddu að lokum til nútímatúlkunar og notkunar á orðinu „bóluefni“, sem vísar til efnið sem er dregið af vaccinia (kúabólu). ). Bólusóttarfaraldurinn af völdum variola veirunnar var að lokum lýstur útrýmt árið 1980 af Alþjóðaheilbrigðismálastofnuninni, með rannsóknaþróun sem notar það sem sumir myndu telja brautryðjandi bóluefni ónæmisvalda sem staðlar eru mældir eftir. Mörg önnur ónæmisvaldandi bóluefni eru nú til, þar sem umbætur á rannsóknaþróun eru teknar saman hér sem sýna markmið og rannsóknir þúsunda manna um allan heim. Áætlanir um heildarónæmi gegn bólusótt eru um 50 ár, að mestu leyti vegna brautryðjenda á þessu sviði, sem einnig eru Ehrlich, Medawar og Edelman, og margir aðrir, þar sem rannsóknir á sárasótt, virkt þol og uppbyggingu mótefnasameinda lögðu grunninn að Kohler. og uppgötvun Milsteins á því hvernig á að framleiða einstofna mótefni.

cistanche tubulosa-bæta ónæmiskerfið

6. Ályktanir

Eftir víðtækar rannsóknir höfum við magnmælt og útlistað eðli núverandi sértækra viðtaka og próteina sem skipta máli fyrir klínískar rannsóknarstofur og læknisfræðilegar rannsóknir með því að skrá bæði meðfæddar og aðlagandi ónæmiskerfisfrumur innan núverandi gagna um ónæmisfræði kransæðavíruss og annarra meinafræði hingað til. B-frumumyndun mótefna, fylgt eftir af daufkyrningum í meinalífeðlisfræði, losar frumsýtókín og fylgni sem eru háð frumum sem sýna mótefnavaka af einfrumu-, átfrumna- og dendritic frumuættum. Hins vegar tengist hvert af þessu skilgreindum T-frumuættum. Það eru sönnur aukningar á ekki aðeins S prótein ónæmissvörun heldur einnig á N og M próteinum. Í þessari grein skoðuðum við frumumerki samkvæmt núverandi ónæmisfræðilegum bókmenntum og fyrirmælum frá sérfræðingum á þessu sviði. Margir háttsettir vísindamenn á tímabilinu apríl til september 2020 skrifuðu bréf í þessu sambandi (sjá viðbótarefni) sem sýndu fram á heildar jákvæðni sýkingamótefna upp á 23% (NY), 18% (London) og 11% (Madrid) eru háð hinum 10 eða fleiri T frumu undirgerðir sem framkvæma allar stjórnunaraðgerðir ónæmiskerfisins, sem eru að öllum líkindum mikilvægari í öllum meinafræði [427-445].