ÁSTANDUR

Markmið:Maclura pomifera (Rafin.) Schneider er útbreidd tegund um allan heim, sem einnig er oft ræktuð til skrauts. Fyrri rannsóknir leiddu í ljós að M. pomifera ávextir eru ríkir af prenýleruðum ísóflavónóíðum, hafa athyglisverða líffræðilega virkni og hafa líklega ávinning, sérstaklega þegar þeir eru notaðir staðbundið. Með hliðsjón af því að fenólsambönd eru nauðsynlegar uppsprettur í þróun snyrtivara gegn öldrun, rannsakaði þessi rannsókn öldrunarmöguleika M. pomifera 80 prósent metanólic þykkni (MPM) með því að meta andoxunarefni og utanfrumu fylkisniðurbrotandi ensím sem hindra virkni.

Glýkósíð af cistanche getur einnig aukið virkni SOD í hjarta- og lifrarvef og dregið verulega úr innihaldi lipofuscins og MDA í hverjum vef, hreinsar í raun ýmsar hvarfgjarnar súrefnisradicals (OH-, H₂O₂, osfrv.) og verndar gegn DNA skemmdum af völdum af OH-róttækum. Cistanche phenylethanoid glýkósíð hafa sterka hreinsunargetu sindurefna, meiri afoxunargetu en C-vítamín, bæta virkni SOD í sæðisviflausn, draga úr innihaldi MDA og hafa ákveðin verndandi áhrif á virkni sæðishimnu. Cistanche fjölsykrur geta aukið virkni SOD og GSH-Px í rauðkornum og lungnavef í tilraunamúsum af völdum D-galaktósa, auk þess að draga úr innihaldi MDA og kollagens í lungum og plasma og auka innihald elastíns, hafa góð hreinsunaráhrif á DPPH, lengja tíma súrefnisskorts í öldruðum músum, bæta virkni SOD í sermi og seinka lífeðlisfræðilegri hrörnun lungna í öldruðum tilraunamúsum. Með frumuformfræðilegri hrörnun hafa tilraunir sýnt að Cistanche hefur góða andoxunargetu og hefur tilhneigingu til að vera lyf til að koma í veg fyrir og meðhöndla öldrunarsjúkdóma í húð. Á sama tíma hefur echinacoside í Cistanche verulega getu til að hreinsa DPPH sindurefna og hefur getu til að hreinsa hvarfgjarnar súrefnistegundir og koma í veg fyrir niðurbrot kollagen af ​​völdum sindurefna, og hefur einnig góð viðgerðaráhrif á anjónskemmdir af týmíni sindurefna.

Smelltu á Cistanche Tubulosa viðbót

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Efni og aðferðir:Fyrir þessa rannsókn var hamlandi möguleiki 80 prósent MPM gegn mismunandi ensímum sem tengjast öldrunarferlinu metin. Í ljósi ótvíræðs hlutverks oxunarálags í öldrun, voru einnig notuð in vitro andoxunarpróf. Ennfremur var osajin ákvarðað sem helsta lífvirka ísóflavóníð sýnisins með hágæða þunnlagsskiljun.

Niðurstöður:Niðurstöður af vélrænu mismunandi andoxunarprófunum sýndu verulegan andoxunarmöguleika útdráttarins. Hömlunarmöguleikar MPM gegn hýalúrónídasa, kollagenasa og elastasa ensímum, sem eru beintengd við hröðun öldrunarferlisins, voru könnuð og niðurstöður leiddu í ljós að MPM hamlaði ensímin hér að ofan gagngert. MPM hafði einstakt phenolic og flavonoid innihald; 113,92 ± 2,26 mg gallínsýrujafngildi/g og 66,41 ± 0,74 mg QE/g, í sömu röð. Þegar heildargreiningar á andoxunargetu voru skoðaðar er hægt að benda á að MPM sé efnilegt öldrunarefni.

Niðurstaða:Þess vegna leiðir þessi rannsókn í ljós að seyði af ávöxtum M. pomifera hefur verulegan möguleika gegn öldrun og má nota í þessum tilgangi.

Leitarorð:Maclura pomifera, öldrun, andoxunarefni, HPTLC, osajin

KYNNING

Sömuleiðis verða öll líffæri, þar með talið húð manna, ýmsar lífeðlisfræðilegar breytingar með hækkandi aldri.1 Tveir flokkar öldrunar eru til: Innri öldrun er stjórnað af erfðafræði og ytri öldrun er náttúruleg afleiðing lífeðlisfræðilegra breytinga vegna skaðlegra áhrifa umhverfisþátta eins og útfjólubláa (UV) ) geislun, efnaeitur og reykingar.1,2 Niðurbrot æða- og kirtilbyggingar, tap á trefjavef og minnkandi endurnýjun frumna eru grundvallarþættir öldrunar,3 sem leiða til aukningar á hrörnun vefja, hrukkum og minnkandi utanfrumufylki (ECM) ).4

Sem stærsta líffæri hefur húðin nokkur hlutverk eins og vernd, stjórnun líkamshita og skynjun.5 Húðin samanstendur af húðþekju, leðurhúð og undirhúð og er fyrsta hindrunin milli mannslíkamans og hins ytra. umhverfi.6,7 ECM er stærsta eining leðurhúðarinnar og styður við vöxt og teygjanleika með því að sýna burðarvirki.8 Kollagen, elastín og fibronectin, sem myndast af húðtrefjum, mynda ECM og sameinast próteóglýkönum.5 Kollagen er grunnprótein sem samanstendur af um það bil 25-35 prósent af öllu próteininnihaldi líkamans og er að finna í utanfrumurými ýmissa tegunda bandvefja dýra.3 Ein helsta orsök öldrunar húðar og hrukkumyndunar er breyting á kollageni. uppbygging.1 Elastín er prótein, sem veitir húðinni einstaka lífeðlisfræðilega mýkt og er til staðar í nokkrum bandvefjum.6 Vökvi húðarinnar, og að halda húðinni sléttri, rakri og smurðri eru mikilvægir þættir sem koma í veg fyrir öldrun húðar, og mikilvægir þættir glýkósamínóglýkan (GAG), hýalúrónsýra, gegnir mikilvægu hlutverki í þessari starfsemi.8 Þessir lykilþættir eru brotnir niður fyrir tilstilli hýalúrónídasa, kollagenasa og elastasasíma, sem leiðir til hröðunar á öldrun húðarinnar. Þar að auki leiðir útsetning fyrir örverum, mengun, jónandi geislun, efnum og eiturefnum til myndunar hvarfgjarnra súrefnistegunda (ROS) og það hefur skaðlegar afleiðingar flýta fyrir öldrun húðar.9 ROS getur komið af stað flóknum sameindaferlum og þar af leiðandi kollagenasa, elastasi. , og hýalúrónídasavirkni getur aukist, sem leiðir til greinanlegs ECM niðurbrots og breytinga á húðáferð.10 ​​Af þeim ástæðum sem nefnd eru geta nýir náttúrulegir efnisþættir, sem draga úr myndun ROS og hamla ECM niðurbrjótandi próteasum, seinkað öldrun húðarinnar.11

Maclura pomifera (Rafin.) Schneider tilheyrir Moraceae eða mórberjafjölskyldunni og er einnig þekkt sem appelsínutréð, ræktað nánast um allan heim.12 M. pomifera hefur nokkra líffræðilega virkni eins og bakteríudrepandi, sveppadrepandi, veirueyðandi, frumudrepandi, æxliseyðandi, estrógena, og malaríulyf13 vegna prenýleraðs ísóflavóna, þ.e. osajins og pomiferins, sem eru talin helstu umbrotsefni ávaxtanna.14 Í framleiðslu á snyrtivörum gegn öldrun eru fenólsambönd mikilvægar náttúrulegar uppsprettur. Þannig er vaxandi áhugi á að rannsaka plöntur sem eru ríkar af fenólsamböndum eins og M. pomifera fyrir slíka starfsemi. Fyrri rannsóknir komust að því að ísóflavón af Maclura auka tjáningarmagn kollagens, elastíns og fibrillins sem er sambærilegt eða umfram samsvarandi styrk retínóls. Þess vegna má gera ráð fyrir að Maclura ísóflavón séu öflug ECM prótein örvandi efni.15 Með hliðsjón af þessum gögnum miðar þessi rannsókn að því að kanna öldrunarmöguleika M. pomifera 80 prósent metanólútdráttar (MPM) með því að kanna möguleika þess á lífvirkni andoxunarefna og hamla. ECM niðurbrotsensím. Auk þess var megindleg greining á helstu lífvirku efnisþáttum útdráttarins, osajin, mæld með hágæða þunnlagsskiljun (HPTLC), og heildarfenólinnihald og heildarflavonoid innihaldsmælingar voru gerðar til að fá nákvæmari skilning á fenólsniðinu. Niðurstöðurnar sýna að M. pomifera gæti verið dýrmæt uppspretta efna gegn öldrun.

EFNI OG AÐFERÐIR

Efni

Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA) útvegaði öll ensím, efni og tilvísanir sem notuð voru í prófunum. Gæði allra efna voru af greiningargráðu.

Plöntuefni

Ávöxtum M. pomifera var safnað frá Uşak, Türkiye, í maí 2020. Dr. Hilal Bardakcı framkvæmdi grasafræðilega auðkenningaraðferð plöntusýnanna. Skírteinissýni af plöntunni var afhent í Acıbadem háskólanum, Herbarium of Pharmacy (ACUPH 00002).

Undirbúningur útdráttar

Ávextirnir voru aðskildir í litla bita og færðir í gegnum blandara. Ávextirnir (6,45 kg) voru fylltir með 3125 ml af 80 prósent metanóli (MeOH) með því að nota hristibúnað í þrjá daga við stofuhita á dimmum stað. Blandan var síuð og þessi aðferð endurtekin tvisvar. Síuvötnunum sem fengust var safnað saman og síðan var metanól látið gufa upp í snúningsuppgufunartæki. Hrá metanólútdrátturinn var frostþurrkaður (afraksturinn var 204,37 g, 3,16 prósent) og geymdur við -20 gráðu (MPM).

Magngreiningaraðferð helstu lífvirku efnasambandanna með HPTLC

Öll efni og hvarfefni sem notuð voru voru af greiningargráðu. Klóróform (CHCl3) og etýlasetat (EtOAc) voru keypt frá Sigma-Aldrich. Staðall af osajin sem er fáanlegur í verslun var keyptur frá Sigma-Aldrich (SMB {{10}}0092). HPTLC greiningar voru gerðar á 20 cm × 10 cm gler HPTLC kísilgel 60 F254 plötum (Merck, Darmstadt, Þýskalandi). Osajin innihald í MPM var ákvarðað með CAMAG HPTLC greiningarkerfi. Hreyfanlegur fasi sem notaður er í núverandi rannsókn var áður lýst af Bozkurt et al.16 við einangrun á virku efni M. pomifera. 10 mg/mL MeOH útdráttur var notaður sem greiningarprófunarlausn. Stöðluð stofnlausn (0,5 mg/ml) af osajin var útbúin með því að nota 2 ml af asetoni. Vinnulausn með 50 µg/mL styrk af stöðluðu efnasambandi var útbúin með þynningu með asetoni úr stofnlausninni. Hvert sýni var síað í gegnum 0,45 µm sprautusíu. 10 μL af útdrættinum ásamt að minnsta kosti fimm mismunandi styrkjum af staðallausninni (3.3-4.7 μL) var borið á í formi 8 mm lengdar bönd á kísilgelgler HPTLC plötum 60 F254 með CAMAG Automatic TLC sýnishorn IV. Þróun var framkvæmd í CAMAG Automatic Developing Chamber-2 (ADC- 2) og farfasinn var CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)]. Hólfið var mettað í 10 mínútur og platan var forstillt í 5 mínútur fyrir þróun. Rakastigi var stjórnað með ADC-2 með því að nota MgCl2 (33 prósent RH) í 10 mínútur. Þéttmælingamatið var framkvæmt með því að nota CAMAG TLC skanna IV í flúrljómun. Raufvíddinni var haldið við 5 × 0,2 mm, ör, og skannahraði var stilltur á 20 mm/s. Staðlað innihald var fengið með því að bera saman flatarmálið undir rekstrareinkennaferli móttakara (AUCs) við kvörðunarferil staðla við 280 nm. Tilvist staðla í útdrættinum var tryggð með því að bera saman bæði varðveisluþætti (Rf) og yfirliggjandi UV litróf hvers útdráttar og staðals. Magn osajins var ákvarðað með samanburði á styrkleika dreifðs endurkasts ljóss frá útdrættinum og hlutunum við staðlaða efnasambandið.

Osajin innihald í hráu plöntuþykkni var mælt með HPTLC-þéttnimælingu. Rf gildi osajin staðalsins reyndist vera 0.556. Tilvik osajin í prófunarsýnum var sannreynt með samanburði á Rf-gildum þeirra og skörun UV litrófs þeirra (Mynd 1). Magngreining var veitt með því að bera saman AUCs sýna við kvörðunarferilinn sem fékkst með því að nota staðlaða efnasambandið osajin. Kvörðunaraðgerðin var y=2.268*10-8x. Fylgnistuðullinn (R) og breytileikastuðull kvörðunarfallsins voru 0.998 prósent og 1.06 prósent, í sömu röð. HPTLC greining sýndi að MPM inniheldur 0,22 prósent (w/w) osajin. Niðurstöður HPTLC rannsóknarinnar eru gefnar upp í töflu 1.

Fenólprófílgreining

Greining á heildarfenólinnihaldi

Greiningin var gerð til að meta heildarfenólinnihald sýnanna með aðferð Folin-Ciocalteu, eins og áður var notuð af Kurt-Celep o.fl. ), og 100 μL FCR (Folin-Ciocalteu hvarfefni) þynnt með H2O (1:9). Eftir ræktun í 30 mínútur við 45 gráður var gleypni blöndunnar lesin litrófsmæling við 765 nm. Niðurstöðurnar voru gefnar upp sem mg gallínsýrujafngildi (GAE) á hvert g af útdrætti.

Heildargreining á flavonoid innihaldi

Mæling á heildarflavonoid innihaldi brotanna var gerð eins og aðferð sem Bardakci o.fl. greindi frá áður. Síðan var 30 mín ræktun á blöndunum framkvæmd við stofuhita og í myrkri. Eftir ræktunarferlið var gleypni reiknuð við 415 nm. Niðurstöðurnar voru staðhæfðar sem mg quercetin ígildi (QE) í 1 g af sýni.

Ákvörðun á in vitro andoxunarvirkni

2,2-Dífenýl-1-píkrýlhýdrasýl (DPPH) radical scavenging virkni próf

Til að ákvarða virkni DPPH róteindahreinsunar var sambland af nýþynntum sýnislausnum (ýmsir styrkir útbúnir úr 1 mg/mL stofnlausn) og metanólískri DPPH lausn (100 mM). Eftir ræktunartímabilið við stofuhita í 45 mínútur var gleypni lesin við 517 nm. Bútýlerað hýdroxýtólúen (BHT) var notað sem viðmiðunarefnasamband til að fá kvörðunarferil. IC50 gildi niðurstaðna voru gefin upp sem µg/ml.19

Járndrepandi andoxunarkraftur (FRAP) próf

Til að fá FRAP hvarfefni, 25 mL af 300 mM asetatbuffer (pH 3,6), 2,5 mL TPTZ [2,4,6-tris (2-pýridýl)-s-tríazín] og 2,5 mL af FeCl3.6H20 (20 mM) var blandað saman. Eftir það var 10 mL af sýninu bætt við 260 mL af FRAP hvarfefni og þynnt í 300 mL með eimuðu vatni í 96 brunna plötu. Eftir ræktun í 30 mínútur við 37 gráður var mæling á gleypni framkvæmd við 593 nm. BHT var notað sem viðmiðunarefnasamband. Járnklóríðlausn (0,252 mM) var notuð til að fá staðlaða feril og niðurstöðurnar voru gefnar upp sem mM FeSO4 í 1 g þurru útdrætti.20

Cupric-afoxandi andoxunargetu (CUPRAC) próf

CUPRAC prófið var metið í samræmi við aðferðina sem Barak o.fl. lýsti áður. Eftir það var 51 mL af eimuðu vatni og 43 mL af sýnislausnum bætt út í blönduna. Eftir ræktun í 20 mínútur var gleypni lesin við 450 nm. Niðurstöðurnar voru gefnar upp sem mg askorbínsýrujafngildi í 1 g af þurru útdrætti.

Ákvörðun á heildar andoxunargetu (TOAC) prófi

Heildarprófun á andoxunargetu var reiknuð út samkvæmt fosfómólýbdenaðferðinni sem Barak o.fl. útskýrði áðan.22 Í fyrsta lagi til að fá TOAC lausn; 28 mM natríumfosfat einbasískt, 4 mM ammóníummólýbdat og 600 mM H2SO4 var blandað saman. Síðan var 300 µL af TOAC lausn blandað saman við 30 µL af sýnislausnum í 96 heilbrigðum disk. Eftir ræktunartímabilið við 95 gráður í 90 mínútur var gleypni lesin við 695 nm. Askorbínsýra var notuð til að fá staðlaða feril og niðurstöðurnar voru reiknaðar sem mg Trolox ígildi í 1 g þurru útdrætti.

Hindrandi virkni á öldrunartengd ensím í húð

And-kollagenasa virkni

Til að mæla and-kollagenasavirkni MPM var útbúin 50 mM tricine jafnalausn (pH: 7,5) (400 mM NaCl og 10 mM CaCl2). Clostridium histolyticum (ChC - EC. 3.4.23.3) var notað sem uppspretta kollagenasa, sem var leyst upp í 50 mM tricine jafnalausninni til að ná upphafsstyrk upp á 0,8 U/mL. 2 mM af N-[3-(2-fúrýl)akrýlóýl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) uppleyst í tricine jafnalausn var notað sem hvarfefni. Útdrættirnir voru ræktaðir með kollagenasa ensími í jafnalausn í 15 mínútur áður en hvarfefninu var bætt við til að hefja hvarfið. Loka hvarfblandan samanstóð af heildarrúmmáli 150 µL; tricine buffer, 0,8 mM FALGPA, 0,1 einingar af ChC og 25 μL MPM. Vatn var notað fyrir núll niðurstöðurnar. Eftir að undirlaginu var bætt við var gleypnimæling gerð strax. Jákvæð viðmið framkvæmd epigallocatechin gallate (EGCG).23

And-elastasa virkni

Mat á MPM fyrir and-elastasa virkni var framkvæmt með því að nota 0.2 mM Tris-HCl jafnalausn (pH: 8.0). Stofnlausn af elastasa (PE, EC 3.4.21.36) fengin úr brisi úr svínum var útbúin með eimuðu vatni í styrkleikanum 3,33 mg/ml. N-Súkkínýl-Ala-Ala-p-nítróanílíð (AAAPVN) sem á að nota sem hvarfefni var leyst upp í jafnalausn (1,6 mM). MPM þykkni var ræktað með 1 µg/mL af PE í 15 mínútur við 37 gráður áður en hvarfefni var bætt við. Í lok 15 mínútna forræktunar var 0,8 mM AAAPVN hvarfefni bætt við ensímblönduna sem innihélt 1 mg/ml plöntuþykkni og ræktun var framkvæmd aftur í 15 mínútur við 37 gráður. Meðan 0,25 mg/ml EGCG er notað sem jákvæð viðmiðun, inniheldur þetta prófunarsýni sama magn af EGCG í stað MPM og prófunaruppsetningin var endurtekin. Eftir ræktunartímann voru mælingar teknar á 4 mismunandi tímapunktum í 5 til 30 mínútur með Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate litrófsmæli við 365 nm örvun og 410 nm losun.24, 25

Virkni gegn hýalúrónídasa

Virkni gegn hýalúrónídasa var framkvæmd með því að breyta aðferðinni sem lýst er af Kolayli et al.26 og Lee et al.3 Í fyrsta lagi var hýalúrónídasa sem keyptur var í verslun (EC 3.2.1.35, Sigma-Aldrich) leystur upp í 0. 02 M fosfatbuffi (pH: 3,5) sem inniheldur NaCl og sermisalbúmín úr nautgripum. Síðan var hýalúrónsýra, viðeigandi hvarfefni ensímsins, útbúin í asetatbuffi (0,1 M, pH: 3,5) og gerð tilbúin til notkunar. Mælingarblandan sem samanstendur af 20 µL af MPM í styrkleikanum 1 mg/ml, 10 µL af hýalúrónídasa og 60 µL af 0,1 M asetatbuffi var forræktuð í 20 mínútur við 37 gráður. Eftir ræktunartímann var 10 µL af hýalúrónsýru bætt við blönduna og ræktuð aftur við 37 gráður í 20 mínútur. Í lok heildarræktunartímans voru mælingar gerðar á mismunandi tímapunktum með Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate litrófsmæli við 600 nm. Eyðihópurinn innihélt ekki ensím í tilraunauppsetningunni en samanburðarhópurinn innihélt ekki útdráttinn. Hlutfall and-hýalúrónídasavirkni var reiknað út með því að nota eftirfarandi jöfnu:

Virkni gegn öldrun ( prósent )= [(Meðviðmið - kvið í sýni)/ kviðarholi] × 100

tölfræðigreining

Tilraunir með virkni and-elastasa, and-kollagenasa og and-hýalúrónídasa, sem teknar voru í þessari rannsókn, voru endurteknar þrisvar sinnum óháð því. Tölfræðilegur munur var greindur með því að nota t-próf ​​GraphPad Prism 8 hugbúnaðarins (p Minna en eða jafnt og 0.05).

NIÐURSTÖÐUR OG UMRÆÐUR

Ákvörðun um möguleika gegn öldrun

Elastín, kollagen og hýalúrónsýra eru þekkt innihald ECM, sem gegna lykilhlutverki í ungu útliti húðarinnar. Elastín er mikilvægt prótein til að viðhalda teygjanlegum eiginleikum húðarinnar, þar af leiðandi leiðir lækkun elastíns í ECM til hröðunar í öldrunarferlinu.27 Fyrri bókmenntir gefa til kynna bein tengsl milli hrukku og öldrunar húðarinnar með minna magni af elastíni.28 Hýalúrónsýra er vatnsfælin GAG sameind, sem er affjölliðuð með hýalúrónídasa. Hýalúrónsýra er mikilvæg til að halda húðinni sléttri og raka stöðugri; þess vegna hefur verið sýnt fram á að óhófleg niðurbrot leiða til þurrkunar og hrukkunar á húðinni.29 Í gegnum öldrunarferlið með tímanum veldur minnkað magn af kollageni þynningu á leðurhúðinni, sem er talin áberandi vísbending við smásjárskoðun.3{{23 }} Það var einmitt gefið til kynna að seinkun á niðurbroti kollagens með kollagenasahemlum dregur þar af leiðandi millibili á hrukkum og öldrun húðbyggingar.5 Með hliðsjón af þessum upplýsingum hafa efni sem hamla elastasa, kollagenasa og hýalúrónídasa athyglisverða möguleika á öldrunarvörnum. Fyrri rannsóknir hafa sýnt að ýmis ísóflavónóíð sýna verulega hamlandi lífvirkni gegn fyrrnefndum ensímum. Addotey et al.31 sýndu að fjórir mismunandi ísóflavónóíðar hamluðu hýalúrónídasa allt að 61,2 prósent. Kim o.fl.32 hafa sýnt fram á að einangrað ísóflavóníð úr Glycyrrhiza uralensis Fisch., licoricidin, hefur verulega elastasahemjandi virkni. IC50 gildi lakkrís var reiknað sem 61,2 ± 4,2 µM en óleanólsýra var reiknað sem 131,4 ± 11,4 sem viðmiðunarefnasamband. Niðurstöður bentu til þess að ísóflavóníð gætu hamlað elastasasímum. Í samræmi við áðurnefnda rannsókn, rannsökuðu Kim et al.33 níu mismunandi prenýleruð ísóflavónóíð, afar skyld mannvirki með osajin, einangruð frá rótum Flemingia philippinensis Merr. & Rolfe. Vísindamenn greindu frá því að fimm af prenýleruðu ísóflavónunum hefðu öfluga hindrunarvirkni gegn daufkyrninga elastasa, IC50 gildin voru mismunandi á milli 1.9-12.0 µM, en IC50 gildi óleanólsýru var 28,4 µM. Í annarri rannsókn, Ergene Öz o.fl. 34 rannsökuð in vitro hamlandi virkni fimm ísóflavónóíða einangruð úr rótum Ononis spinoza L. gegn hýalúrónídasa, kollagenasa og elastasa. Tilkynnt var að hýalúrónídasa hindrandi virkni ísóflavónanna væri á bilinu 22.08-45.58 prósent, en í sama styrk sýndi tannínsýra 88.32 prósenta hömlun. Niðurstöður kollagenasahömlunar voru reiknaðar á milli 20.41- 28.49 prósent og elastasahömlun mældist 20.47-46.88 prósent. EGCG var notað sem viðmiðun fyrir báðar greiningar og hömlunarvirkni við sama styrk mældist 41,18 prósent og 84,64 prósent, í sömu röð. Önnur rannsókn rannsakaði staðbundna meðferð á pomiferini sem var beint einangrað frá M. pomifera. 15 Pomiferin er prenýlerað ísóflavóníð, sem er að finna í M. pomifera ávöxtum og sameindabygging þess líkist mjög osajin. Rannsakendur greindu frá því að pomiferin sýndi öfluga ECM próteinörvunarvirkni með því að auka kollagen og elastín sem er betra eða jafngilt viðmiðunarefnasambandinu, retínóli. Allar nefndar rannsóknir leiddu í ljós að ísóflavón eru miðlungs til öflugir hemlar þessara ensíma og hafa verulega möguleika sem náttúruleg efni gegn öldrun.

Í þessari rannsókn var in vitro hýalúrónídasa, kollagenasa og elastasa hindrandi virkni MPM rannsökuð til að ákvarða möguleika gegn öldrun. Samanburðargreining var gerð fyrir kollagenasahömlunarprófun á tveimur tímapunktum, td 20 og 40 mín, fyrir bæði MPM og viðmiðunarefnasambandið, EGCG. Niðurstöðurnar sýndu að kollagenasahömlunarvirkni jókst með tímanum. 1 mg/ml MPM sýndi 84,55 ± 1,99 prósenta hömlun, en 25{{40}} µg/mL EGCG sýndi 84,66 ± 1,83 prósent eftir 20 mín. Hamlandi lífvirkni var magnað upp með tímanum, eftir 40 mín. MPM og EGCG hamlaði kollagenasa 94,68 ± 2,42 prósent og 94,98 ± 2,81 prósent, í sömu röð. Í samræmi við fræðirit sýndi MPM marktæka hömlun gegn elastasa. Niðurstöður voru mældar fyrir fjóra tímapunkta (5, 10, 20 og 30 mín) og sýndu aukningu með tímanum (mynd 2). EGCG (250 µg/mL) var notað sem viðmiðun og hömlunarvirkni jókst á hverjum tímapunkti (44,07 ± 0,00 prósent, 52,19 ± 0,00 prósent, 64,69 ± 0.{{41 }} prósent og 86.21 ± 0.00 prósent, í sömu röð). Á sama tíma sýndi MPM í 1 mg/ml styrk meiri aukningu og hömlun, sem hækkaði úr 34,70 ± 0,57 prósent í 97,40 ± 1,04 prósent úr 5 mínútum í 30 mínútur. Á sama hátt hamlaði 1 mg/ml MPM hýalúrónídasa ensím marktækt eftir 40 mínútna ræktun. 83,91 ± 2,36 prósent hömlun mældist eftir 40 mínútur, eftir þær 80 mínútur af ræktun magnaðist hömlunin upp í 97,19 ± 0,45 prósent. Þegar heilar ensímhömlunarprófanir voru skoðaðar sýndu niðurstöður áberandi að MPM gæti verið dýrmætt náttúrulegt öldrunarefni og hægt að nota það í innihaldi ýmissa öldrunarvarnarefna; þannig, M. pomifera gæti fengið aukið efnahagslegt mikilvægi.

Ákvörðun andoxunargetu

Fjölmargir utanaðkomandi og innrænir þættir leiða til öldrunar húðar með ýmsum aðferðum. Meirihluti þessara þátta er beint eða óbeint fyrir áhrifum af ROS-myndun í ECM húðarinnar.35 Þar sem húðin hylur ytri hluta líkama okkar, verður hún fyrir verulegu magni af UV geislun í daglegu lífi. Þannig eru meirihluti húðvandamála eins og sólbruna, oflitunar og krabbameinsvaldandi húð upprunninn eða tengjast beinum áhrifum UV geislunar. Sömuleiðis er ljósöldrun viðbótarafleiðing af hættulegum eiginleikum þess.36 Þar að auki myndar UV ljós ROS myndun og þar af leiðandi oxunarálag í húðvef, sem er einn mikilvægasti aðferðin sem leiðir til ljósöldrunar.37 Gert var ráð fyrir að þar sem of mikið ROS myndun veldur ótímabærri öldrun húðar, efni með verulega andoxunargetu geta verið dýrmætt tæki gegn hættulegum áhrifum UV geislunar. Samkvæmt því sýna klínískar rannsóknir að staðbundin notkun andoxunarefna hefur verndandi áhrif á húðina.38

Eftir samtengingu á milli staðbundinnar andoxunarnotkunar og frestun á öldrun húðar, sem er vel staðfest í fyrri bókmenntum, gefur það að skoða in vitro andoxunargetu MPM dýrmætar upplýsingar vegna þess að það er öldrunarmöguleikar þegar það er notað staðbundið. Fyrri bókmenntir sýndu fram á að útdrættir með miklum fjölda ísóflavónóíða gætu verið dýrmæt andoxunarefni. Í fyrri rannsókn dró úr ísóflavónóíðríkt þykkni af F. macrophylla útdrætti húðskemmdum af völdum UVB með því að hreinsa ROS.39 Santos og Silva4{{10}} til kynna að prenýleruð ísóflavóníð hafi mikilvæga andoxunargetu vegna þeirra flavonoid hluti og viðbótaráhrif prenýl hliðarkeðju. Andoxunargeta útdráttar og ísóflavónóíða af M. pomifera var metin í fyrri rannsókn. Niðurstöður sýndu að vatnsalkóhólseyði og hreina osajin sýndu marktæka virkni á DPPH, FRAP og TOAC prófum, jafnvel þó að pomiferin og etýlasetat þættir sýndu meiri virkni.41 Fyrir þessa rannsókn voru DPPH radical scavenging virkni, FRAP, CUPRAC og TOAC próf. framkvæmt fyrir alhliða ákvörðun in vitro andoxunargetu MPM (tafla 2). MPM sýndi marktæka DPPH radical scavenging virkni, þar sem IC50 gildið var mælt árið 1998.86 ± {{20}}.02. FRAP og TOAC greiningar leiddu einnig til merkrar málmminnkandi virkni, 0,191 ± 0,01 mM FeSO4 /DE og 114,43 ± 0,02 AAE/g DE, í sömu röð. Þessar niðurstöður voru í samræmi við fyrri rannsókn sem birt var af Orhan o.fl. Að sama skapi sýndi MPM athyglisverða koparminnkandi virkni í CUPRAC prófinu, þar sem niðurstöður mældust 73,928 ± 0,01 AAE/g DE. Þegar heildargreiningar á andoxunargetu voru skoðaðar er hægt að benda á að MPM sé efnilegt öldrunarefni.

Fenólsnið og HPTLC greining

Ísóflavónóíðar eru fenólefni, sem eru þekkt sem innihaldsefni plantna sem bera ábyrgð á ýmsum athyglisverðum líffræðilegum virkni eins og andoxunarefnum, krabbameinslyfjum og gegn kvensjúkdómum.42 Fyrri rannsóknir sýndu fram á að prenýleruð ísóflavóníð eru helstu fenólefnasambönd í M. pomifera ávöxtum.43 Fjölmargar jin rannsóknir greindu frá. og pomiferin sem aðal innihaldsefni M. pomifera ávaxta, sem eru fyrst og fremst ábyrg fyrir líffræðilegri starfsemi.12 Osajin og pomiferin eru mjög lík prenýleruð ísóflavónóíð sem eru aðeins frábrugðin einum hýdroxýlhópi.44 Fyrri skýrslur sýndu misvísandi niðurstöður fyrir innihald osajin og pomiferíns. af M. pomifera ávöxtum. Kartal et al.45 þróuðu LC-MS aðferð til að ákvarða osajin og pomiferin í M. pomifera, sem var safnað frá Ankara héraði Türkiye. Niðurstöðurnar sýndu að innihald pomiferíns var aðeins hærra en osajin innihald á mismunandi hlutum ávaxtasýnanna. Í annarri rannsókn var M. pomifera ávaxtasýnum safnað frá mismunandi svæðum í Miðvesturríkjum og Suður-Bandaríkjunum og osajin og pomiferin innihald var mælt með nýrri HPLC greiningaraðferð. Niðurstöður sýndu að landfræðilegur munur leiðir til marktækra breytinga á magni ísóflavónóíða í sýnum.46 Tsao et al.47 ákváðu osajin og pomiferin innihald ávaxta sem safnað var frá Kanada og komust að því að pomiferin innihald var aðeins hærra en osajin innihald. Aftur á móti tóku Hwang et al.48 saman nokkrar rannsóknir sem fundu meira magn osajins en magn pomiferins í ýmsum útdrætti. Fullyrða má að osajin og pomiferin innihald M. pomifera ávaxta sé einstaklega breytilegt með landfræðilegum mun og útdráttartækni vegna ákaflega hliðstæðrar efnafræðilegrar uppbyggingar. Fyrir þessa rannsókn var magn MPM mælt með HPTLC greiningu, í fyrsta skipti svo við vitum. Niðurstöður greiningarinnar sýndu að osajin er ríkjandi innihaldsefni MPM sem var safnað frá Uşak héraði, 0.22 prósent af sýninu samanstóð af osajin (tafla 1). Ennfremur, til að ná frekara mati á fenólsniði MPM, voru gerðar mælingar á heildarfenóli og heildarflavonoid innihaldi. Niðurstöður sýndu að MPM hafði athyglisvert fenól og flavonoid innihald sem hér segir; 113,92 ± 2,26 mg GAE/g og 66,41 ± 0,74 mg QE/g, í sömu röð. Niðurstöður úr mati á fenólsniði sýndu að MPM gæti verið áberandi frambjóðandi sem nýtt náttúrulegt öldrunarefni.

NIÐURSTAÐA

Jafnvel þó að rannsóknir sem rannsaka staðbundna útfærslu M. pomifera ávaxta séu tiltölulega nýjar, eykst athygli á þennan hátt með uppörvandi skýrslum. Þess vegna miðar þessi rannsókn að því að lýsa yfirgripsmiklu mati á hugsanlegum öldrunarmöguleikum M. pomifera ávaxtaþykkni. HPTLC greining var notuð fyrir M. pomifera ávexti til að ákvarða ísóflavónóíð innihald í fyrsta skipti svo við vitum, ásamt in vitro rannsóknum til að ákvarða heildar fenólsnið. Niðurstöður sýndu að osajin er aðal innihaldsefnið í sýnunum. Að auki var in vitro andoxunargeta útdráttarins metin með fjórum mismunandi greiningum og niðurstöður sýndu fram á verulegan andoxunarmöguleika MPM. Auk þess var mæld hamlandi virkni gegn ensímunum, sem tengjast öldrunarferlinu, og sást að MPM hafði áberandi ensímhömlun. Að lokum gefur þessi rannsókn upplýsingar sem geta leitt til framleiðslu á nýjum húðvörum.

Siðfræði

Samþykki siðanefndar:Ekki þarf samþykki siðanefndar fyrir námið.

Upplýst samþykki:Óþarfi.

Ritrýni:Ritrýnt að utan.

Höfundarframlög

Hugtak: THB, TBŞ., HB, Hönnun: THB, İ.KC, EC, Gagnasöfnun eða vinnsla: THB, İ.KC, HB, Greining eða túlkun: THB, İ.KC, Bókmenntaleit: THB, TBŞ., Skrif: THB, EC

Hagsmunaárekstur:Engum hagsmunaárekstrum var lýst yfir af höfundum.

Fjárhagsskýring:Þessi rannsókn var studd af Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar háskólanefnd um vísindaverkefni (nr: 2020/02/07).

HEIMILDIR

1. Hwang E, Park SY, Yin CS, Kim HT, Kim YM, Yi TH. Öldrunaráhrif blöndunnar af Panax ginseng og Crataegus pinnatifida í húðtrefjum og heilbrigðri húð manna. J Ginseng Res. 2017;41:69-77.

2. Ganceviciene R, Liakou AI, Theodoridis A, Makrantonaki E, Zouboulis CC. Aðferðir gegn öldrun húðar. Dermatoendocrinol. 2012;4:308-319.

3. Lee H, Hong Y, Tran Q, Cho H, Kim M, Kim C, Kwon SH, Park S, Park J, Park J. Nýtt hlutverk fyrir ginsenoside RG3 í öldrun gegn öldrun með starfsemi hvatbera í útfjólubláum geislum húð manna trefjafrumur. J Ginseng Res. 2019;43:431-441.

4. Rouvrais C, Bacqueville D, Patrick B, Haure MJ, Duprat L, Coutanceau C, Castex-Rizzi N, Duplan H, Mengeaud V, Bessou-Touya S. Mat á öldrunareiginleikum retinaldehýðs, delta-tókóferól glúkósíðs og glýsýlglýsíns. oleamid samsetning. J Invest Dermatol. 2017;137(Viðauki 2):S303.

5. Bravo K, Alzate F, Osorio E. Ávextir af völdum villtum og ræktuðum Andesplöntum sem uppsprettur hugsanlegra efnasambanda með andoxunar- og öldrunarvirkni. Ind Crops Prod. 2016;85:341-352.

6. Yepes A, Ochoa-Bautista D, Murillo-Arango W, Quintero-Saumeth J, Bravo K, Osorio E. Fjólublá ástríðufræ (Passiflora edulis f. edulis Sims) sem efnileg uppspretta öldrunarvarnarefna í húð: ensím , andoxunarefni og fjölþrepa tölvurannsóknir. Arab J Chem. 2021;14:102905.

7. Rittié L, Fisher GJ. Útfjólublá-ljós-völdum merkjafalli og öldrun húðarinnar. Aging Res Rev. 2002;1:705-720.

8. Duque L, Bravo K, Osorio E. Heildræn nálgun gegn öldrun sem notuð er í völdum ræktuðum lækningaplöntum: sýn á ljósvörn húðarinnar með mismunandi aðferðum. Ind Crops Prod. 2017;97:431-439.

9. Manjia NJ, Njayou NF, Joshi A, Upadhyay K, Shirsath K, Devkar VR, Moundipa FP. Möguleiki gegn öldrun lyfjaplantna í KamerúnHarungana madagascariensis Lam. og Psorospermum aurantiacum Engl. koma í veg fyrir in vitro útfjólublátt B ljós af völdum húðskemmda. Eur J Integr Med. 2019;29:100925.

10. Pujimulyani D, Suryani CL, Setyowati A, Handayani RAS, Arumwardana S, Widowati W, Maruf A. Cosmeceutical möguleikar Curcuma mangga Val. þykkni í BJ fibroblasts úr mönnum gegn MMP1, MMP3 og MMP13. Heliyon. 2020;6:e04921.

11. Stavropoulou MI, Stathopoulou K, Cheilari A, Benaki D, Gardikis K, Chinou I, Aligiannis N. NMR efnaskiptasnið á grískum própólissýnum: samanburðarmat á jurtaefnafræðilegum samsetningu þeirra og rannsókn á öldrunar- og andoxunareiginleikum þeirra. J Pharm Biomed Anal. 2021;194:113814.

12. Filip S, Djarmati Z, Lisichkov K, Csanadi J, Jankov RM. Einangrun og lýsing á Maclura (Maclura pomifera) útdrætti sem fæst með útdrætti af yfirkritískum vökva. Ind Crops Prod. 2015;76:995-1000.

13. Saloua F, Eddine NI, Hedi Z. Efnasamsetning og snið einkenni osage appelsínu Maclura pomifera (Rafin.) Schneider fræ og fræ olíu. Ind Crops Prod. 2009;29:1-8.

14. Veselá D, Kubínová R, Muselík J, Zemlicka M, Suchý V. Andoxunar- og EROD starfsemi osajin og pomiferin. Fitoterapia. 2004;75:209-211.

15. Gruber JV, Holtz R, Sikkink SK, Tobin DJ. In vitro og ex vivo skoðun á staðbundnum pomiferin meðferðum. Fitoterapia. 2014;94:164-171.

16. Bozkurt İ, Dilek E, Erol HS, Çakir A, Hamzaoğlu E, Koç M, Keleş ON, Halici MB. Rannsókn á áhrifum pomiferins frá Maclura pomifera á magasár af völdum indómetacíns: tilraunarannsókn á rottum. Med Chem Res. 2017;26:2048-2056.

17. Kurt-Celep İ, Celep E, Akyüz S, İnan Y, Barak TH, Akaydın G, Telci D, Yesilada E. Hypericum Olympic L. endurheimtir DNA skemmdir og kemur í veg fyrir MMP-9 virkjun af völdum UVB í húð manna trefjafrumur. J Ethnopharmacol. 2020;246:112202.

18. Bardakci H, Cevik D, Barak TH, Gozet T, Kan Y, Kirmizibekmez H. Önnur umbrotsefni, jurtaefnafræðileg einkenni og andoxunarvirkni mismunandi útdrátta af Sideritis congesta PH Davis et Hub.- Mor. Biochem System Ecol. 2020;92:104120.

19. Celep E, Seven M, Akyüz S, İnan Y, Yesilada E. Áhrif útdráttaraðferðar á ensímhömlun, fenólsnið og andoxunargetu Sideitis tróverji Bornm. Suður-Afríkumaðurinn J Bot. 2019;121:360–365.

20. Bardakcı H, Barak TH, Özdemir K, Celep E. Áhrif bruggefnis og ýmissa aukefna á pólýfenólsamsetningu og lífvirkni andoxunarefna í auglýsingum Tilia platyphyllos Scop. innrennsli. J Res Pharm. 2020;24:133-141.

21. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yesilada E. Áhrif in vitro meltingar manna á aðgengi fenól innihalds og andoxunarvirkni Viburnum opulus L. (evrópsk trönuberja) ávaxtaþykkni. Ind Crops Prod. 2019;131:62-69.

22. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yeşilada E. In vitro meltingarlíking manna á aðgengi og andoxunarvirkni fenóla úr Sambucus ebulus L. ávaxtaþykkni. Matur Biosci. 2020;37:100711.

23. Ersoy E, Eroglu Ozkan E, Boga M, Yilmaz MA, Mat A. Anti-öldrun möguleiki og and-tyrosinasa virkni þriggja Hypericum tegunda með áherslu á jurtaefnafræðilega samsetningu með LC-MS/MS. Ind Crops Prod. 2019;141:111735.

24. Lee KK, Kim JH, Cho JJ, Choi JD. hamlandi áhrif 150 plöntuútdrátta á elastasavirkni og bólgueyðandi áhrif þeirra. Int J Cosmet Sci. 1999;21:71-82.

25. Itoh S, Yamaguchi M, Shigeyama K, Sakaguchi I. Möguleiki gegn öldrun útdrætti frá Chaenomeles sinensis. Snyrtivörur 2019;6:21.

26. Kolayli S, Can Z, Yildiz O, Sahin H, Karaoglu SA. Samanburðarrannsókn á andhýalúrónídasa, frostlegi, andoxunarefni, örverueyðandi og eðlisefnafræðilegum eiginleikum mismunandi einblóma gráðu kastaníuhnetu (Castanea sativa Mill.) hunangs. J Enzyme Inhib Med Chem. 2016;31(Viðauki 3):96-104.

27. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. Neutrophil elastasi, próteinasa 3 og cathepsin G sem lækningaleg markmið í sjúkdómum manna. Pharmacol Rev. 2010;62:726-759.

28. Akazaki S, Nakagawa H, Kazama H, Osanai O, Kawai M, Takema Y, Imokawa G. Aldurstengdar breytingar á húðhrukkum metnar með nýrri þrívíddargreiningu. Br J Dermatol. 2002;147:689- 695.

29. Barla F, Higashijima H, Funai S, Sugimoto K, Harada N, Yamaji R, Fujita T, Nakano Y, Inui H. Hamlandi áhrif alkýlgallata á hýalúrónídasa og kollagenasa. Biosci Biotechnol Biochem. 2019;73:2335-2337.

30. Chung JH, Kang S, Varani J, Lin J, Fisher GJ, Voorhees JJ. Minnkað utanfrumumerkjastýrt kínasa og aukin streituvirkjað MAP kínasavirkni í öldruðum húð manna in vivo. J Invest Dermatol. 2000;115:177-182.

31. Addotey JN, Lenger's I, Jose J, Gampe N, Béni S, Petereit F, Hensel A. Isoflavonoids með hamlandi áhrif á hýalúrónídasa-1 og norneolignan klitoríenólaktón B úr Ononis spinosa L. rót þykkni. Fitoterapia. 2018;130:169-174.

32. Kim KJ, Xuan SH, Park SN. Licoricidin, ísóflavónóíð einangrað úr Glycyrrhiza uralensis Fisher, kemur í veg fyrir UVA-framkallaða ljósöldrun á húðtrefjum úr mönnum. Int J Cosmet Sci. 2017;39:133-140.

33. Kim JY, Wang Y, Uddin Z, Song YH, Li ZP, Jenis J, Park KH. Samkeppnishæf daufkyrninga-elastasahamlandi ísóflavón frá rótum Flemingia philippinensis. Bioorg Chem. 2018;78:249-257.

34. Ergene Öz B, Saltan İşcan G, Küpeli Akkol E, Süntar İ, Bahadır Acıkara Ö. Ísóflavóníð sem sáragræðandi efni frá Ononidis radix. J Ethnopharmacol. 2018;211:384-393.

35. Azevedo Martins TE, de Oliveira Pinto CAS, de Oliveira AC, Robles Velasco MV, Gorriti Guitiérrez AR, Cosquillo Rafael MF, Huamani Tarazona JP, Retuerto-Figueroa MG. Framlag staðbundinna andoxunarefna til að viðhalda heilbrigðri húð - endurskoðun. Sci Pharm. 2020;88:27.

36. Krutmann J, Schroeder P. Hlutverk hvatbera í ljósöldrun á húð manna: gallaða orkuverslíkanið. J Investig Dermatol Symp Proc. 2009;14:44-49.

37. Dong KK, Damaghi N, Picart SD, Markova NG, Obayashi K, Okano Y, Masaki H, Grether-Beck S, Krutmann J, Smiles KA, Yarosh DB. DNA skemmdir af völdum UV koma af stað losun MMP-1 í húð manna. Exp Dermatol. 2008;17:1037-1044.

38. Oresajo C, Pillai S, Manco M, Yatskayer M, McDaniel D. Andoxunarefni og húðin: skilningur á samsetningu og verkun. Dermatol Ther. 2012;25:252-259.

39. Chiang HM, Chiu HH, Liao ST, Chen YT, Chang HC, Wen KC. Isoflavonoidrich fleming macrophylla þykkni dregur úr UVB-völdum húðskemmdum með því að hreinsa hvarfgjarnar súrefnistegundir og hindra MAP kínasa og MMP tjáningu. Evid Based Supplement Alternat Med. 2013;2013:696879.

40. Santos CMM, Silva AMS. Andoxunarvirkni prenýlflavonoids. Sameindir. 2020;25:696.

41. Orhan IE, Sezer Senol F, Demirci B, Dvorska M, Smejkal K, Zemlicka M. Andoxunarmöguleiki sumra náttúrulegra og hálftilbúna flavonoid afleiða og útdrætti úr Maclura pomifera (Rafin.) Schneider (sósaappelsínu) og nauðsynlegum olíusamsetning. Tyrkneska J Biochem. 2016;41:403-411.

42. Křížová L, Dadáková K, Kašparovská J, Kašparovský T. Isoflavones. Sameindir. 2019;24:1076.

43. Su Z, Wang P, Yuan W, Grant G, Li S. Phenolics frá ávöxtum Maclura pomifera. Nat Prod Commun. 2017;12:1743-1745.

44. Orazbekov Y, Ibrahim MA, Mombekov S, Srivedavyasasri R, Datkhayev U, Makhatov B, Chaurasiya ND, Tekwani BL, Ross SA. Einangrun og líffræðilegt mat á prenýleruðum flavonoidum frá Maclura pomifera. Evid Based Supplement Alternat Med. 2018;2018:1370368.

45. Kartal M, Abu-Asaker M, Dvorska M, Orhan I, Zemlicka M. LC-DAD-MS aðferð til að greina pomiferin og osajin, helstu ísóflavóna í Maclura pomifera (Rafin.) Schneider. Chromatographia 2009;69:325-329.

46. ​​Darji K, Miglis C, Wardlow A, Abourashed EA. HPLC-ákvörðun á ísóflavónmagni í appelsínugulum frá miðvesturlöndum og suðurhluta Bandaríkjanna. J Agric Food Chem. 2013;61:6806-6811.

47. Tsao R, Yang R, Young JC. Andoxunarefni ísóflavónar í appelsínugulum, Maclura pomifera (Raf.) Schneid. J Agric Food Chem. 2003;51:6445-6451.

48. Hwang HS, Winkler-Moser JK, Tisserat B, Harry‐O'kuru RE, Berhow MA, Liun SX. Andoxunarvirkni Osage appelsínuþykkni í sojaolíu og lýsi við geymslu. J Am Oil Chem Soc. 2021;98:73-87.

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】