Hvernig dregur Apelin-13 úr nýrnakvilla sykursýki á áhrifaríkan hátt?

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Apelin-13 dregur úr nýrnakvilla af völdum sykursýki með því að efla framleiðslu nituroxíðs og bæla vefjavef í nýrum

ZHUO GAO, XIN ZHONG, YING-XIA TAN & DONG LIU

Ágrip

Sykursýki er alvarlegur efnaskiptasjúkdómur og nýrnaskemmdir af völdum sykursýki hafa einnig alvarleg áhrif á lifun sjúklinga. Apelin er sameind sem gegnir mikilvægu hlutverki í fituefnaskiptum og nýlegar rannsóknir hafa leitt í ljós aðapelin-13, sem er undirtegund apelins, gegnir mikilvægu hlutverki við að stjórna blóðsykri. Hins vegar er hlutverkapelin-13innsykursýkis nýrnakvillaer enn óljóst. Í þessari rannsókn er rottulíkan afsykursýkinýrnakvillavar smíðað með inndælingu streptósósíns (STZ). Í þessu ferli var sprautað með þessum rottumapelin-13. Magn glúkósa í blóði, prótein í þvagi og insúlínmagn var ákvarðað vikulega. Næst var tjáning angíótensín léns tegund 1 viðtakatengd prótein (APJ), æðaþels köfnunarefnisoxíðsyntasa (eNOS), E-cadherin og a-slétt vöðvaaktín (a-SMA) í nýrnavefjum ákvörðuð með Western blotting. Síðan voru æðaþelsfrumur gauklaæðar ræktaðar með háum glúkósamiðli. Þessar frumur voru meðhöndlaðar meðapelin-13í 24 klst. Að lokum var frumulífvænleiki þessara frumna og tjáning APJ, eNOS.E-cadherin og -SMA í þessum frumum ákvörðuð með Western blotting. Þar af leiðandi meðferð áapelin-13olli lægra magni blóðsykurs og próteins í þvagi. Auk þess er umsókn umapelin-13stuðlaði að framleiðslu insúlíns og létti á insúlínviðnámi. Meðferð meðapelin-13stuðlaði að tjáningu APJ, eNOS og E-cadherin á meðan það bældi tjáningu -SMA í nýrnavef rotta og æðaþelsfrumum gauklaæða. Jafnframt er umsókn umapelin-13stuðlaði einnig að frumulífi þessara frumna. Að lokum,apelin-13léttisykursýkinýrnakvillameð því að stuðla að framleiðslu nituroxíðs (NO) og draga úr bandvef í nýrnavef.

Kynning

Sykursýki er efnaskiptasjúkdómur og glúkósaefnaskiptaröskun er helsta klíníska birtingarmyndin(1). Fyrri rannsóknir hafa gefið til kynna að vegna vinsælda sykur- og fituríkrar fæðutegunda og kyrrsetu lífsstíls einstaklinga er búist við að tíðni sykursýki haldi áfram að aukast á næstu árum(2.,3). Upphafi sykursýki fylgir oft skemmdir á nokkrum líffærum og sjúklingar með langvarandi sykursýki greinast oft með alvarlega nýrnabilun (4,5). Fyrri rannsókn greindi frá því að 30 prósent sjúklinga með sykursýki af tegund 1 og 25 prósent sjúklinga með sykursýki af tegund 2 þróuðustsykursýkinýrnakvilla(6). Ennfremur tilkoma og þróunsykursýkinýrnakvillaleiddi til aukningar á dánartíðni sjúklinga með sykursýki.Sykursýkinýrnakvilla-framkallað nýrnafrumu- og háræðaskemmdir eru aðalþátturinn sem hefur áhrif á lifun sjúklinga(7). Því að þróa meðferð fyrirsykursýkinýrnakvillaskiptir sköpum til að bæta lifun sjúklinga með sykursýki.

Apelin er staðsett á litningasvæðinu Xq25-26.1 og er kóðað af APLN geninu (8) og er innræn bindill G-próteintengt viðtaka angíótensín léns tegund 1 viðtakatengd prótein (APJ), sem er venjulega seytt og framleitt af hvítum fituvef (9). Apelin og APJ viðtakinn þess koma víða fram í ýmsum vefjum, þar á meðal æðaþelsfrumum í heila, hjarta og æðum, sérstaklega í hjarta- og æðakerfinu(10). Apelin var auðkennt sem adipókín sem tengist fituumbrotum í nýlegri rannsókn(11). Hins vegar hefur fyrri rannsókn gefið til kynna að apelin gegni mikilvægu hlutverki við að stjórna orkujafnvægi líkamans, glúkósa- og vatnsefnaskipti auk annarra líffræðilegra aðgerða(12). Apelin tjáning hefur áður verið sýnt fram á að bæta insúlínviðnám, æðakölkun og æðaskemmdir af völdum sykursýki (13). Hins vegar, önnur rannsókn leiddi í ljós að apelin tjáning olli tíðni og þróun sjónukvilla af völdum sykursýki (14). Því er hlutverk apelins í tilviki og þróun sykursýkistengdra fylgikvilla enn óljóst.

Ennfremur er apelin til staðar sem mismunandi undirgerðir (apelin-36, apelin-17 ogapelin-13)í líkamanum í gegnum klippingu endoplasmic reticulum. Það kom í ljós að því styttri sem peptíðkeðja apelins er, því sterkari líffræðileg virkni þess(15). Fyrri rannsókn gaf til kynna að apelin bætti insúlínnæmi og framkallaði lægri blóðsykursgildi með því að draga úr langvinnri bólgu hjá sjúklingum með sykursýki af tegund 2 og eykur þar með glúkósa- og fituefnaskipti (16). Hins vegar áhrif apelins ásykursýkinýrnakvillaer umdeilt um þessar mundir. Fyrri rannsókn hefur greint frá því að magn apelíns/APJ í sermi sjúklinga meðsykursýkinýrnakvillaeru hækkuð, stuðla að tilkomu og þróunsykursýkinýrnakvilla(17). Á hinn bóginn leiddi önnur rannsókn í ljós þaðapelin-13gæti hamlað formfræðilegum breytingum á nýrnapíplum þekjufrumum í háglúkósa umhverfi, þar með hindrað tilkomu og þróun þekju- og mesenchymal umbreytingarferlis (EMT) í gauklafrumum, og að lokum seinkað tilvikisykursýkinýrnakvilla(18). Því eru áhrif apelíns á nýrnakvilla af völdum sykursýki enn óljós.

Í þessari rannsókn er hlutverkapelin-13í vinnslusykursýkinýrnakvillavar rannsakað frekar með því að smíða rottulíkan afsykursýkinýrnakvilla.

Cistanchetubulosakemur í veg fyrirnýrusjúkdómur, smelltu hér til að fá sýnishornið

efni og aðferðir

Dýrapróf. Alls voru 30 Sprague Dawley karlkyns rottur (6-8viknagamlar;200-230g) fengnar frá Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co.Ltd. og hýst í hitastýrðu (25 gráður) og sérstöku sýklafríu herbergi með stöðugum raka (40-50 prósent) í 12-klst ljós/myrkri hringrás og fengið mat og vatn að vild í eina viku . Þessum rottum var síðan skipt jafnt í sex hópa (Control, Model, Ap-E40, Ap-E400, Ap-L40 og Ap-L400). Rotturnar í samanburðarhópnum voru meðhöndlaðar með engu. Rottur hinna hópanna fengu sykur- og fituríkt fæði (Thermo Fisher Scientific, Inc.) og fengu streptozocin í bláæð (STZ; 40 mg/kg; vörunr.S0130; Merck KGaA) á hverjum tíma vika. Eftir 3 vikur voru Ap-E40 og Ap-E400 rotturnar meðhöndlaðar meðapelin-13(40 og 400 pmol/kg, í sömu röð; vörunr.A6469; Merck KGaA). Alls 6 vikum eftir STZ-inndælinguna voru rotturnar úr Ap-L40 og Ap-L400 hópunum meðhöndlaðar meðapelin-13(40 og 400 pmol/kg, í sömu röð). Eftir átta STZ inndælingar voru rotturnar látnar aflífa með natríumpentóbarbital (160 mg/kg, ip). Eftir líknardráp var sermi og líffærum safnað. Þyngd rottanna var greind með rafrænum vogum í hverri viku, frá 1 viku fyrir STZ inndælingu og fram að líknardrápi. Blóðsykursgildi voru greind í hverri viku með því að nota blóðsykursmæli (Thermo Fisher Scientific, Inc.). Próteinmagn í þvagi var einnig greint með því að nota BCA greiningarsett (cat.nr. P0012S; Beyotime Institute of Biotechnology) í hverri viku. Fastandi sermisinsúlínið var einnig greint í hverri viku með því að nota viðskiptasett (cat.nr.RAB0904; Merck KGaA) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Insúlínviðnámsvísitalan var reiknuð út með eftirfarandi formúlu:(Insúlínmagn í blóði x blóðsykursgildi)/22,5. Allar tilraunirnar voru framkvæmdar í samræmi við Guide for the Care and Use of Laboratory Animals 8. útgáfa(19) og samþykktar (samþykki nr.2020-79-PJO1) af siðanefnd flughersins (Peking, Kína) .

Greining á þvagefnis köfnunarefni í blóði (BUN) og kreatíníni í sermi (Ser). Magn BUN(cat.nr.ml076479) og Scr (cat.nr.ml059158) í blóði var ákvarðað með því að nota viðskiptasett (Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd.) eftir 3 og 8 vikna STZ inndælingu, í sömu röð. . Öll skref þessarar greiningar voru framkvæmd samkvæmt leiðbeiningum framleiðenda.

Greining á nituroxíði (NO), angíótensíni II (Ang Il) og endóþelíni-1(ET-1). Magn NO, Ang II og ET -1 í sermi og nýrnavef voru greind með því að nota NO sett (cat.nr. S0021; Beyotime Institute of Biotechnology), Ang II sett (vörunr. RAB0010; Merck KGaA ), og ET-1 setti (cat.nr.E-EL-R1458c;Elabscience Biotechnology, Inc.). Öll skref greininganna voru framkvæmd samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.

Hematoxylin og eosin(H&E) litun. Eftir líknardráp var nýrnavef safnað og þvegið með forkældu fosfatbuffer saltvatni (PBS). Nýrun voru síðan aðskilin og fest með 4 prósent paraformaldehýði yfir nótt við stofuhita. Nýrnavefirnir sem voru innbyggðir í paraffín voru skornir í 5-um hluta. Næst voru þessir hlutar þurrkaðir í 70 og 90 prósent etanóllausn í 10 mínútur hver. Að lokum var H&E litun við stofuhita í 3 mín gerð til að greina meinafræðilegar breytingar. Öll skref þessarar greiningar voru framkvæmd í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda H&E litunarsettsins (cat.nr.C0105S; Beyotime Institute of Biotechnology).

Ónæmisvefjafræði. Ónæmisvefjaefnafræði var framkvæmd með hefðbundinni peroxidasa/DAB aðferð og hematoxylin mótlitun samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Eftir að hafa verið lokað með 5 prósenta sermi albúmíni úr nautgripum (BSA; Beyotime Institute of Biotechnology) í 20 mínútur við stofuhita, voru hlutar ræktaðir með and-APJ aðal mótefni (cat.no.PA5-114830;Thermo Fisher Scientific, Inc. Yfir nótt við 4 gráður. Eftir PBS-þvott voru hlutar ræktaðir með geita-anti-kanínu piparrótarperoxidasa-tengdu aukamótefni (vörukóði ab6721;1:1,000; Abcam) við 4C í 50 mínútur, fylgt eftir með PBS þvottur. Síðan voru hlutar meðhöndlaðir með DAB lausn og mótlitaðir með hematoxýlíni við stofuhita í 5 mín. Að lokum voru myndirnar fengnar með ljóssmásjá (Olympus Corporation).

Frumuræktun og meðferð. Nýra gaukla smáæðaþelsfrumulína (hRGEC) úr mönnum var fengin frá BioVector NTCC, Inc. og ræktuð í RPMI-1640 miðli (Thermo Fisher Scientific, Inc., bætt við 10 prósenta nautgripafóstursermi (FBS) í rakaðri loft við 37 gráður C með 5 prósent CO. Þessum frumum var skipt í samanburðar-, líkan-, Ap-L(Apelin-lágt) og Ap-H(Apelin-hátt) hópa. Líkan, Ap-L og Ap-H hópa. frumur voru ræktaðar í háglúkósa (25 mmól/l: Cytiva) RPMI-1640 miðli og viðmiðunarhópsfrumur voru ræktaðar í RPMI-1640miðli með eðlilegu glúkósainnihaldi (5,5 mmól/l). Næst, Ap-Lgroup frumur voru meðhöndlaðar með lágu magni afapelin-13（0.1 μmól/） og Ap-Hgroup frumur voru meðhöndlaðar með miklu magni afapelin-13(1 μmól/).

Tilraun til að mynda rör. Rökmyndun í hRGEC frumum var ákvörðuð með því að nota auglýsingasett (vörunr.K905-50; AmyJet Scientific, Inc). Allar myndir voru teknar með ljóssmásjá (stækkun, x4; Olympus Corporation). Öll skref þessarar greiningar voru framkvæmd samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.

Frumutalningarsett-8(CCK-8) assay.hRGECfrumur úr ýmsum hópum voru plötur í þrjár 96-brunnsplötur (2,5x104/brunn). Eftir 24,48 og 72 klst. ræktun við 37 gráður .10 ul CCK-8 hvarfefni (Dojindo Molecular Technologies, Inc.) var þynnt með ræktunarmiðlinum og bætt við 96-brunnsplöturnar. Næst voru þessar frumur settar í hitakassa í 1 klst. Loksins. gleypni þessara frumna var greind með litrófsmæli (Thermo Fisher Scientific, Inc.) á bylgjulengd 450nm.

Western blotting. Heildarpróteinum var safnað úr nýrnavef og hRGEC frumum með því að nota RIPA lysisbuff (Santa Cruz Biotechnology, Inc.). Próteinstyrkur var ákvarðaður með BCA prófunarbúnaði. Næst var jafnt magn af próteini (40 ugs) aðskilið með 10 prósent natríumdódecýlsúlfat-pólýakrýlamíð gel rafdrætti (SDS-PAGE) (Beyotime Institute of Biotechnology) og flutt yfir á pólývínýlídenflúoríð (PVDF) himnu (EMD) Millipore). sem var stíflað með 5 prósenta sermi albúmíni (BSA) (Beyotime Institute of Biotechnology) við 37 gráður í 1,5 klst. Himnurnar voru síðan ræktaðar með eftirfarandi frummótefnum við 4 gráður yfir nótt: Ang II tegund 1 viðtaka (AT1R:1:1,000; vörukóði ab124734; Abcam), NO synthasa í æðaþels(eNOS;1:1, 000; vörukóði ab5589;Abcam), APJ(1:1,000;cat.nr.PA5-114830; Thermo Fisher Scientific, Inc), umbreytandi vaxtarþáttaviðtaka (TGBR: 1:1.000;vörukóði ab97459; Abcam), E-cadherin (1:1,000:vörukóði ab212059; Abcam), -sléttvöðvaaktín( -SMA;1:1. 000: vara nr.19245; Cell Signaling Technology, Inc.) og GAPDH(1:2.500; vörukóði ab9485; Abcam). Eftir frummótefnaræktunina voru himnurnar þvegnar með PBS-Tween-20(0,1 prósent) og ræktaðar með HRP-tengdu mótefni (1:2,000; vörukóði ab6721; Abcam) í 2 klst. við stofuhita(7) Að lokum voru ónæmisvirku merki metin með því að nota Pierce ECL Western Blotting Substrate Kit (Thermo Fisher Scientific, Inc.) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Hlutfallslegur styrkur ónæmisblettanna var mældur með Versa Doc MP 5000molecular imager og Quantity One hugbúnaði (útgáfa 4.6) (bæði frá Bio-Rad Laboratories, Inc.).

Tölfræðigreining. Tölfræðileg greining var framkvæmd með því að nota Graph Pad Prism 7.0(GraphPad Software, Inc.). Notuð voru t-próf ​​óparaðra nemenda til að bera saman tvo hópa. Samanburður á milli mismunandi hópa var metinn með einstefnu ANOVA og síðan Tukey's posthoc próf. Öll gögn eru sett fram sem meðaltal ± staðalfrávik (SD) og allar tilraunir voru endurteknar þrisvar sinnum. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Niðurstöður

Apelín-13lækkar þyngd og blóðsykursgildi og eykur insúlínmagn afsykursýkinýrnakvillarottur 8 vikna. Þyngd og blóðsykursgildi rotta greindust vikulega meðan á því stóð að ala þær upp. Niðurstöðurnar (Mynd 1A og B) leiddu í ljós að þyngd og blóðsykursgildi rottanna í Ap-E40 og Ap-E400 hópunum breyttust ekki marktækt eftir inndælinguapelin-13eftir 3 vikur. Sömu breytur í rottum Ap-L40 og Ap-L400 hópanna voru lækkaðar eftirapelin-13inndælingu eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur. Magn insúlíns í blóði var einnig lækkað eftirapelin-13inndælingu eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur (mynd 1C).

Apelín-13meðferð bætir nýrnastarfsemisykursýkinýrnakvillarottur. Hækkuð BUN og Scr gildi bentu til þess að nýrnaskaða komi fyrir og þróast(20). BUN og Scr gildi komu í ljós að voru hærri eftir aðapelin-13inndælingu eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur (mynd 2A). Á sama hátt sýndu próteininnihald í þvagi og umfang meinafræðilegra skaða í nýrnavef sömu þróun (Mynd 2B og C).

Apelín-13léttir ásykursýkinýrnakvillameð því að breyta framleiðslu NO, Angel og ET-1. Tjáning APJ greindist og niðurstöðurnar (Mynd 3A) leiddu í ljós að tjáning APJ í nýrnavef rotta minnkaði eftir aðapelin-13inndælingu eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur. ENGIN framleiðsla gæti létt ásykursýkinýrnakvilla-völdum æðaskemmdum í nýrnavef (21). Þess vegna greindist framleiðsla á NO, Ang II og ET -1 í nýrnavefjum. Niðurstöðurnar leiddu í ljós að magn NO var lækkað eftir inndælingu áapelin-13eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur. Hins vegar hefur styrkur Ang II og ET-1 aukist eftir inndælingu áapelin-13eftir 8 vikur samanborið við það eftir 3 vikur (Mynd 3B og C). Næst var tjáning eNOS og AT1R greind með Western blotting. Eins og fram kemur á mynd 4A var tjáning AT1R bæld eftir inndælingu áapelin-13eftir 3 og 8 vikur samanborið við fyrirmyndarhópinn, í sömu röð. Styrkur eNOS var aukin eftir inndælingu áapelin-13eftir 3 og 8 vikur samanborið við fyrirmyndarhópinn.

Apelín-13léttir ásykursýkinýrnakvillameð því að stilla tjáningu ATIR, endothelial nitric eNOS og nýrnafibrosis tengdum próteinum í APJ ferlinu. Tjáning APJ var aukin og TGBR minnkaði eftir inndælingu áapelin-13eftir 3 og 8 vikur samanborið við fyrirmyndarhópinn. Tjáningarmagn bandvefstengdu próteinanna, E-cadherin og -SMA, greindist og niðurstöðurnar leiddu í ljós að tjáning E-cadherins var aukin og magn a-SMA lækkað eftir inndælingu áapelin-13á 3 og 8 vikum samanborið við líkanahópinn (mynd 4B).

Apelín-13stuðlar að útbreiðslu og slöngumyndun og mótar tjáningu bandvefstengdra próteina í nýrum í APJ ferlinum í skammtíma háglúkósa völdum nýrnaæðaæðaþelsfrumum. hRGEC frumur voru ræktaðar í háglúkósamiðlinum í 24, 48 og 72 klst. Næst var CCK-8greining gerð til að greina lífvænleika frumna. Niðurstöðurnar (Mynd 5A) leiddu í ljós að meðferð meðapelin-13stuðlað að lífvænleika frumna. Umsókn umapelin-13stuðlaði einnig að holrýmismyndun (Mynd 5B). Klukkan 24 klstapelin-13meðferð, kom í ljós að tjáningarmagn APJ, eNOS og E-cadherin var aukið og magn TGBR, ATIR og -SMA lækkaði samanborið við líkanahópinn (mynd 5C).

Apelín-13bælir fjölgun og slöngumyndun og stillir tjáningu á nýrnatrefjunartengdum próteinum í APJ ferlinum í langtíma háglúkósa-örvuðum nýrnaæðaæðaþelsfrumum. Frumur voru meðhöndlaðar með háglúkósamiðli í 72 og 96 klst, og truflun áapelin-13hófst frá 72 klst. Eftir 24 klst. sýndu CCK-8 prófunarniðurstöðurnar að notkun áapelin-13bældi lífvænleika frumna samanborið við líkanahópinn (Mynd 6A). Myndun holrýmis var hindruð í kjölfar meðferðar meðapelin-13(Mynd.6B).Auk þess. meðferð meðapelin-13stuðlaði einnig að tjáningu APJ, eNOS og E-cadherin samanborið við fyrirmyndarhópinn. Umsókn umapelin-13bæla einnig tjáningu TGBR, AT1R og a-SMA (Mynd 6C) samanborið við líkanhópinn á skammtaháðan hátt.

Mynd 1. Apelín-13 dregur úr insúlínviðnámi rotta.(A) Þyngd músa var greind vikulega. (B) Blóðsykursgildi mældust vikulega. "P-<0.001 vs.the="" control="" group.=""><><0.01 and=""><0.001 vs.the="" model="" group.(c)levels="" of="" insulin="" were=""><0.05,"p-0.01><0.001 vs.the="" after="" intervention="" 3w="">

Mynd 2. Meðferð við apelin-13 dregur úr nýrnaskemmdum af völdum sykursýki hjá rottum.(A) Magn þvagefnis köfnunarefnis í blóði og kreatíníns í sermi greindist. (B) Próteininnihald í þvagi var greint vikulega. (C) Áverka á nýrnavef greindist með hematoxylin og eósín litun (stækkun.x200), P<0.01, and="" p-0.001="" ys.the="" after="" intervention="" 3w="" group.bun.blood="" urea="" nitrogen:="" scr,="" serum="">

Mynd 3. Apelin-13 virkjar tjáningu APJ.(A) Tjáning APJ í nýrnavef greindist með ónæmisvefjaefnafræðilegum greiningum (stækkun, x200). (B) Framleiðsla á NO fannst með auglýsingasettunum. (C) Stig Ang Il og ET-I voru ákvörðuð með auglýsingasettum." Bls<0.01><0.001 vs.="" the="" after="" intervention="" 3w="" group.apj,="" angiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" no,="" nitric="" oxide;="" ang="" i,="" angiotensin="" ii;="">

Mynd 4. Notkun apelins-13 stuðlar að tjáningu eNOS.(A) Tjáning ATIR andeNOS greindist með Western blotting. (B) Magn APJ, TGBR, E-cadherin og a-SMA í nýrnavef rotta greindust með Western blotting.'P<><0.01><0.001.enos, endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" at1r,="" ang="" ii="" type="" i="" receptor;="" apj,="" angiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factorβreceptor;="" α-sma,="" α-smooth="" muscle="">

Mynd 5.Apelin-13 dregur úr meiri glúkósaskaða á æðaþelsfrumum gauklaæða.(A) Lífvænleiki frumna greindist með frumutalningarsettinu-8 greiningu. (B) hRGECs greindust með holrýmismyndunartilraunum (stækkun, x4). (C) Tjáning AT1R.eNOS, APJ, TGBR, E-cadherin og a-SMA í þessum frumum var ákvörðuð með Western blotting,' P-0.05."P<0.01><0.001. atir.="" ang,="" i="" type="" 1="" receptor:="" enos,="" endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" apj,="" angiotensin="" domain="" type="" i="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factor="" βreceptor;a-sma,α-smooth="" muscle="">

Mynd 6. Apelin-13 léttir áverka á æðaþelsfrumum gauklaæða með því að bæla bandvef.(A) Frumulífvænleiki æðaþelsfrumna gauklaæða var ákvörðuð með CellCounting Kit-8greiningu.(B) hRGECs fundust með holrýmismyndunartilraunum (stækkun, x4). (C) Magn AT1R,eNOS, APJ, TGBR.E.-cadherin og a-SMAin þessar frumur voru ákvarðaðar með Western blotting."P-<><0.01><0.001.stir. ang="" iitype="" 1receptor;enos,="" endothelial="" nitric="" oxide="" synthase;="" apjangiotensin="" domain="" type="" 1="" receptor-associated="" proteins;="" tgbr,="" transforming="" growth="" factorβreceptor;α-sma,a-smooth="" muscle="">

Umræða

Sykursýki er efnaskiptasjúkdómur og glúkósaefnaskiptaröskun er aðal klínísk birtingarmynd hans. Undanfarin ár hefur tíðni þessa sjúkdóms aukist jafnt og þétt(22). Sykursýki leiðir til skemmda og truflunar á nokkrum líffærum. Nýrnaskemmdir af völdum sykursýki er ein mest áberandi orsök dánartíðni hjá sjúklingum með sykursýki(23). Helstu klínískar einkennisykursýkinýrnakvillahefur verið sýnt fram á að vera próteinmigu og viðvarandi skerðing á nýrnastarfsemi (24). Að auki, tilkoma og þróunsykursýkinýrnakvillahefur verið sýnt fram á að stuðla að þróun hjarta- og æðasjúkdóma (25). Þess vegna þarf að þróa nýja meðferð til að bæla niður skaðann af völdumsykursýkinýrnakvillahjá sjúklingum er brýnt.

Apelin er fituþáttur í fituvef. Nýleg rannsókn greindi frá því að apelin gæti létta klínískar einkenni sjúklinga með sykursýki með því að stjórna blóðsykri (26). Önnur nýleg rannsókn greindi frá því að apelin-36 gæti hamlað insúlínseytingu framkallað af hástyrk glúkósa (16,7 mmól/), en hafði engin áhrif á insúlínseytingu af völdum lágstyrks glúkósa (2,8 mmól/)(27). Í líkama offitu og insúlínþolinna músa gæti apelin létta insúlínviðnám og endurheimt notkun glúkósa í líkamanum (28). Hins vegar á sviðisykursýkinýrnakvilla, í nýlegri rannsókn var greint frá því að magn apelíns og APJ viðtaka þess í sermi sjúklinga meðsykursýkinýrnakvillahækkuðu og hærra magn apelíns og APJ ýtti undir æðamyndun og olli fjölgun gauklaháræða og stuðlaði þar með að tilkomu og þróunsykursýkinýrnakvilla(29). Hins vegar benti önnur rannsókn einnig til þessapelin-13gæti hamlað umbreytingu nýrnapípla þekjufrumna í háglúkósaumhverfi og hindrað þar með tilkomu og þróun EMT ferlisins í gauklafrumum, að lokum seinka tilvikisykursýkinýrnakvilla(30).Í þessari rannsókn var sýnt fram á að notkun áapelin-13minnkaði magn blóðsykurs og létti á insúlínviðnámi hjá þessum rottum. auk þess að minnka próteininnihald í þvagi.Apelín-13Meðferðin létti einnig á umtalsverðum skaða af völdum glúkósa í æðaþelsfrumum gauklaæða. Samanlagt bentu þessar niðurstöður til þess að notkun áapelin-13létti birtingarmyndir afsykursýkinýrnakvilla.

Fyrri rannsókn leiddi í ljós að apelin gæti dregið úr blóðsykursinnihaldi með því að stjórna tjáningu eNOS og virkja Akt-ferilinn (31). Tjáning apelins gæti einnig framleitt NO með því að virkja APJ og létta því klínískar einkennisykursýkinýrnakvilla(32).APJ er viðtakinn fyrirapelin-13, ogapelin-13gæti beitt líffræðilegum áhrifum sínum með því að bindast APJ (33). Í þessari rannsókn greindust einnig framleiðsla á NO og tjáningu eNOS og APJ. Í ljós kom að tjáningarmagn eNOS og APJ var aukið í nýrnavef og æðaþelsfrumum gauklaæða eftir meðferð meðapelin-13. NO framleiðsla var einnig aukin í nýrnavef rotta eftir meðferð meðapelin-13. Þessar niðurstöður bentu til þessapelin-13stuðlað að tjáningu eNOS með því að virkja APJ. Þess vegna jók hærra magn af eNOS NO framleiðslu, sem að lokum stuðlaði að gegndræpi í æðum og nýrnasíun.

Nýlegar rannsóknir hafa bent til þess að bandvefsmyndun í nýrum sé einkenni ásykursýkinýrnakvilla(34,35). Niðurstöður þessarar rannsóknar leiddu í ljós að tjáning E-cadherins var aukin í frumum og nýrnavef eftir meðferð meðapelin-13, en a-SMA var lækkað.Apelín-13meðferð kom einnig í ljós til að léttasykursýkinýrnakvillameð því að bæla bandvef í nýrnavef og æðaþelsfrumum gauklaæða.

Að lokum greindi þessi rannsókn frá áhrifum afapelin-13um þróun ásykursýkinýrnakvilla. Niðurstöður þessarar rannsóknar leiddu í ljós þaðapelin-13léttasykursýkinýrnakvillameð því að stuðla að framleiðslu á NO og létta bandvef í nýrnavef. Hins vegar hefur þessi rannsókn einnig takmörkun. Oxunarálag og bólga gegna mikilvægu hlutverki í þróunsykursýkinýrnakvilla(36-40). Hvortapelin-13bættsykursýkis nýrnakvillameð því að draga úr bólgu og oxunarálagi ábyrgist rannsókn í framtíðarrannsókn okkar.

Heimildir

1. Yu SY, Dong B, Fang ZF, Hu XQ, Tang L og Zhou SH: Brot á lncRNA AK139328 dregur úr blóðþurrð í hjartavöðva/endurflæðisskaða í sykursýkismúsum með því að stilla miR-204-3p og hamla sjálfsát. J Cell Mol Med 22:4886-4898."2018.

2. Rowley WR og Bezold C: Að skapa almenna vitund: ástand 2025 sykursýkisspár.Popul Health Manag 15: 194-200.2012,

3. Rowley WR. Bezold C. Arikan Y, Byrne E og Krohe S: Sykursýki 2030: Innsýn í gær, í dag og framtíðarstefnur. Popul Health Manag 20; 6-12.2017.

4. American Diabetes Association: Standards of medical care in diabetes-2014.Diabetes Care 37(Suppl 1): S5-S13.2014.

5. Ahlqvist E, van Zuydam NR, Groop LC og McCarthy MI: Erfðafræði fylgikvilla sykursýki. Nat Rev Nephrol 11:277-287. 2015.

6. Navarro-Gonzalez JF, Jarque A, Muros M, Mora C og Garcia J: Æxlisdrep þáttur-alfa sem meðferðarmarkmið fyrirsykursýkinýrnakvilla.Cytokine Growth Factor Rev 20; 165-173.2009.

7. Alvarez ML og Distefano JK: Hlutverk RNA sem ekki er kóðað ísykursýkinýrnakvilla: Hugsanleg notkun sem lífmerki fyrir þróun og framvindu sjúkdóma. Diabetes Res Clin Pract 99:1-11,2013.

8.Del Ry S, Cabiati M, Raucci S, Simioniuc A, Caselli C, Prescimone T og Giannessi D: Raðgreining og hjartatjáning Apelin í Sus Scrofa. Pharmacol Res 60: 314-319,2009.

9, Fasshauer M og Bluher M: Adipokines í heilsu og sjúkdómum. Trends Pharmacol Sci 36: 461-470.2015.

10. Lv D, LiH og Chen L: Apelin og APJ, mikilvægur þáttur og meðferðarmarkmið fyrir æðakölkun. Acta Biochim Biophys Sin(Shanghai) 45 527-533.2013.

11. Wysocka MB. Pietraszek-Gremplewicz K og Nowak D: Hlutverk apelins í hjarta- og æðasjúkdómum, offitu og krabbameini. Front Physiol 9: 557.2018.

12. Sentinelli F, Capoccia D., Bertoccini L, Barchetta I, Incani M, Coccia F, Manconi E, Lenzi A, Cossu E. Leonetti F, o.fl. rannsókn í evrópskum greinum, Genet Test Mol Biomarkers 20;98 102,2016.

13. Onalan E, Yakar B, Barim AO og Gursu MF: Apelin- og resistínmagn í sermi hjá sjúklingum með skerta fastandi glúkósa, skerta glúkósaþol, sykursýki af tegund 2 og efnaskiptaheilkenni. Endokrynol Pol 71:319-324,2020.

14. Adki KM og Kulkarni YA: Hugsanleg lífmerki í sjónukvilla af völdum sykursýki. Curr sykursýki Rev 16: 971-983.2020.

15. Wu R, Zhu Zand Zhou D: VEGF, apelin og HO-1 hjá sykursýkissjúklingum með sjónukvilla: fylgnigreining.BMC Ophthalmol 20: 326.2020.

Athugið:ofangreint er ekki fullur tilvísunarlisti