Að kanna meðferðaráhrif og verkunarhátt Yishen Tonglong decoction á góðkynja stækkun blöðruhálskirtils hjá rottum um IL-6/STAT3 merkjaleiðina
Dec 17, 2025
Ágrip
Markmið:Til að kanna, í gegnum interleukin (IL)-6/merki transducer og activator of transcription (STAT)3 merkjaleið, bætandi áhrif og verkunarhátt Yiqi Wenshen Tonglong Decoction (skammstafað hér sem Yishen Tonglong Decoction) á góðkynja stækkun blöðruhálskirtils (BPH) hjá rottum.
Aðferðir:Karlkyns Sprague-Dawley (SD) rottur voru geldar og síðan sprautað undir húð með testósterónprópíónati til að koma á BPH líkani. Rottum var úthlutað af handahófi í eftirfarandi hópa (n=12/hópur): líkan; Yishen Tonglong Decoction lág- og háskammtahópar (15 og 30 g/kg); STAT3 virkjunarhópur (Colivelin, 1 mg/kg); og samsettur háskammta Yishen Tonglong Decoction (30 g/kg) + Colivin (1 mg/kg) hópur. 12 karlkyns SD rottur til viðbótar þjónuðu sem sýndarrekinn hópur. Eftir hópsértæka meðferð með Yishen Tonglong Decoction og/eða Colivelin, metum við hlutfall blöðruhálskirtils (PI) og estradíóls (E2)/testósteróns (T); metið vefjagerð blöðruhálskirtils og bandvefsmyndunar með hematoxylin-eosin (HE) og Masson's trichrome litun; mældi Ki-67 tjáningu með ónæmisvefjafræði; magn IL-6 og IL-1 magn í blöðruhálskirtli og sermi með ELISA; og greindi kollagen I/III og IL-6/STAT3 ferli tengd prótein með Western blotting.
Niðurstöður:Í samanburði við sýndarveru sýndi líkanhópurinn áberandi stækkun blöðruhálskirtils og bandvefsmyndun, með marktækri aukningu á PI, Ki-67 sjónþéttleika, vefjum/sermi IL-6 og IL-1 , kollageni I/III, IL-6 próteini og p-STAT3/STAT3, ásamt marktækri lækkun á E2/05 P < 05 P (allt). Á móti líkanahópnum, bæði lágir og stórir skammtar af Yishen Tonglong Decoction léttu ofvöxt og bandvefsmyndun, minnkaði PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 prótein og p-STAT3/STAT3 og jókst E2/T (allt P < 0,05). Háskammtadeyfið gaf meiri umbætur en lágskammturinn (P < 0,05). Colivelin eitt og sér jók aukningu á ofvexti og bandvefsmyndun og jók enn frekar PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 og p-STAT3/STAT3 en minnkaði E2/T (P < 0,05). Samhliða gjöf Colivelin dró úr ávinningi háskammta afsoðsins, og versnaði verulega allar ofangreindar vísitölur samanborið við stórskammta decoction eingöngu (P < 0,05).
Niðurstaða:Yishen Tonglong Decoction dregur úr bólgu og bætir BPH meinafræði í rottum, að minnsta kosti að hluta til með því að bæla virkjun IL-6/STAT3 merkjaleiðarinnar.
Leitarorð:IL-6/STAT3 merki; Yishen Tonglong decoction; góðkynja stækkun blöðruhálskirtils; jurt til að lækna vandamál í blöðruhálskirtli
Herb Cistanche bætiefni
Nánari upplýsingar um nýja tcm jurt fyrir heilsu blöðruhálskirtils
Inngangur
Góðkynja stækkun blöðruhálskirtils (BPH) er algengur teppusjúkdómur í neðri þvagfærum hjá miðaldra og eldri körlum, sem einkennist af þekju- og stromalfjölgun og stækkun blöðruhálskirtils, sem leiðir til þvagláts, tíðni og þvagláts sem skerðir verulega lífsgæði [1,2]. Bólga er lykil drifkraftur BPH meingerðar; það stuðlar að útbreiðslu sléttra vöðva í þekjuvef og vöðvavef og endurgerð bandvefs. Sýkingar- og bólgueyðandi aðferðir eru því árangursríkar til að koma í veg fyrir og meðhöndla BPH [3,4].
IL-6 er pleiotropic proinflammatory cytokine sem er víða tjáð í veffrumum. Það virkjar STAT3 til að kalla fram bólguáætlanir [5]. Að hindra IL-6/STAT3 virkjun dregur úr bólgueyðandi miðlunum í straumnum, truflar bólgufall, dregur úr ónæmisíferð sem tengist stækkun og bandvefsmyndun og hægir að lokum á framvindu BPH [6,7]. Þess vegna er IL-6/STAT3 skynsamlegt meðferðarmarkmið í BPH.
Yishen Tonglong Decoction er klassísk kínversk jurtaformúla með hefðbundnar aðgerðir sem næra Yin og styðja Yang, styrkja Qi og nýru og efla blóðrásina með rakalosun. Klínískt er það notað við dysuria vegna raka-hita og blóðstöðvunar með nýrna-Qi-skorti, og það hefur verið greint frá því að það dragi úr blöðruhálskirtilsbólgu og ofmyndunarbreytingar á BPH [8]. Fyrir utan BPH hamlar það fjölgun krabbameinsfrumna í blöðruhálskirtli í mönnum, stuðlar að frumudauða og bælir innrás og fólksflutninga [9]. Lyfjafræði neta og sameindatengingar benda til þess að lykilmarkmið sem skipta máli fyrir mótun blöðruhálskirtilssjúkdóma eru meðal annars AKT1, IL-6 og VEGFA [10]. Byggt á þessum fræðilegu rökstuðningi og fyrri sönnunargögnum, gerðum við tilgátu um að Yishen Tonglong Decoction bæti BPH með bælingu á IL-6/STAT3 merkjum. Við prófuðum þessa tilgátu í rottu BPH líkani.
Efni og aðferðir
Dýr
SD karlkyns rottur, SPF gráðu, 200–230 g, 6–7 vikna gamlar, voru fengnar frá Daoke Pharmaceutical Technology (Guangdong) Co., Ltd. (SCXK [Yue] 2022-0060). Rottur voru geymdar við minna en eða jafnt og 4 í hvert búr undir 12 klst ljós/myrkri lotum, 50–60% raka og 23–25 gráður.
Hvarfefni og tæki
Yishen Tonglong Decoction hráar jurtir: Anemarrhena asphodeloides (Zhi Mu), Phellodendron chinense (Huang Bai), Cinnamomum cassia (Rou Gui), Rehmannia glutinosa tilbúin rót (Shu Di Huang), Cornus officinalis (Shan Zhu Yu), Dioscorea opposita (Shan Coupea) suffruticosa gelta (Mu Dan Pi), Achyranthes bidentata (Niu Xi), Aconitum carmichaeli unnin hliðarrót (Fu Zi), Sparganium stoloniferum (San Leng), Curcuma zedoaria (E Zhu), Prunus persica fræ (Tao Ren), Vaccaria segetalis fræ (Xing-Aliqua Liicaa planta) (Xing-Aliqua Liicaa planta). Upprunnið frá Beijing Tongrentang (Anguo) Chinese Herbal Slices Co., Ltd.
Colivelin (HY-P1061), MCE (Bandaríkin).
Testósterón própíónat (hreinleiki 98%, T7260); ELISA sett fyrir rottur IL-1 (SEKR-0002), E2 (SEKR-0107), T (SEKSM-0003), Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.
HE litunarsett (ab245880), and-p-STAT3 (ab76315), Masson's kit (ab150669), anti-STAT3 (ab68153), and-collagen I (ab270993), and-Ki-67 (ab16649), and-collagen (ab16649), and-IL-6 (ab259341), HRP asna gegn kanínu aukaefni (ab205722), rotta IL-6 ELISA (ab234570), Abcam (Bandaríkin).
And-aktín (AF5003), Beyotime (Shanghai).
Parafínmíkrótóm HS-2205 (Olabao, Jinan), KP-PH100S smásjá (Shenzhen KEPUS), UMR-9600 örplötulesari (Hangzhou Youmi), PowerPac Basic 1645050 og PROTEAN aflgjafar (Bio-Rad, Bandaríkjunum).
BPH líkan og flokkun
Rottur voru svæfðar með natríumpentóbarbital (45 mg/kg, 3% w/v, í kviðarhol), eistu færð út og fjarlægð með skurðaðgerð. Eftir 3 daga bata fengu rottur daglega inndælingu undir húð af testósterónprópíónati (5 mg/kg í ólífuolíu) í 21 dag. Mikil stækkun og vefjameinafræðileg ofvöxtur staðfesti árangur BPH líkanagerðar [11]. Sham-rottur gengust undir skurð á punginn án orchidectomy og fengu burðarolíu.
Undirbúningur og stjórnun
Ein lyfseðill af Yishen Tonglong Decoction innihélt: Zhi Mu, Huang Bai, Shan Zhu Yu, Shan Yao, Fu Ling, Mu Dan Pi, Wang Bu Liu Xing, Ze Xie (hver 15 g); Niu Xi, Shu Di Huang, Tao Ren (hver 20 g); Fu Zi, San Leng, E Zhu, Rou Gui (hver 10 g). Jurtir voru soðnar tvisvar með vatni, síuvökva sameinuð og þétt í 1,5 eða 3,0 g/ml. Colivelin var leyst upp í saltvatni í 0,1 mg/ml.
Lág- og háskammta decoction hópar: slímgjöf 15 eða 30 g/kg (10 ml/kg við 1,5 eða 3,0 g/mL), auk kviðarvatns (10 ml/kg).
Kólivelínhópur: saltvatnsgjöf (10 ml/kg) auk kólivelíns í kviðarhol 1 mg/kg (10 ml/kg af 0,1 mg/ml).
Stórskammtur + Colivin hópur: slímgjöf 30 g/kg decoction auk Colivelin 1 mg/kg ip
Sýndar- og módelhópar: saltvatnsgjöf og ip saltvatn (10 ml/kg).
Allar meðferðir voru einu sinni á dag í 21 dag.
Blöðruhálskirtilsvísitala og E2/T; Sýnasafn
Tuttugu og fjórum klukkustundum eftir lokameðferð voru rottur svæfðar (eins og að ofan). Líkamsmassi og blautþyngd í blöðruhálskirtli voru skráð til að reikna út PI=blautþyngd í blöðruhálskirtli/líkamsþyngd. Blóði frá kviðarholi var safnað, skilið í skilvindu (2000 rpm, 15 mín) til að fá sermi. E2 og T voru mæld með ELISA og E2/T reiknað; eftirstandandi sermi var geymt við -80 gráður. Um það bil 0,7 g af blöðruhálskirtilsvef var snöggfryst í fljótandi köfnunarefni fyrir próteinmælingar; afgangurinn var festur, þurrkaður, paraffín-innfelldur og sneiddur við ~5 μm.
HANN og Masson's Staining
Afparaffínhreinsun í xýleni og flokkuðu etanólum (100%, 90%, 80%, 75%) var fylgt eftir með vökvun. Hlutar voru litaðir með HE og Masson's pökkum samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda (3 skyggnur hver), síðan þveginn, þurrkaður, hreinsaður og settur upp til smásjárskoðunar.
Ónæmisvefjaefnafræði fyrir frumufjölgun
Eftir afparaffínvæðingu/vökvun voru hlutar meðhöndlaðir með 3% H2O2, lokaðir með geitasermi og ræktaðir yfir nótt með and-Ki-67 (1:150). Uppgötvun notaði SP sett með DAB litningi. Myndir voru teknar og Ki-67 sjónþéttleiki mældur með ImageJ.
ELISA fyrir IL‑6 og IL‑1 í blöðruhálskirtli og sermi
Frosinn blöðruhálskirtilsvefur var hakkaður, einsleitur í RIPA jafnalausn og skilinn í skilvindu (3000 rpm, 20 mín) til að fá heildarpróteinlýsöt. Próteinstyrkur var ákvarðaður með BCA. Skammtar (0,2 ml) af vefjalýsi og þíða sermi voru greindir með tilliti til IL-6 og IL-1 með ELISA.
Western blot fyrir kollagen I/III og IL-6/STAT3 Pathway prótein
Hreinsuð sýni (100 gráður) voru aðskilin með SDS-PAGE og flutt yfir í nítrósellulósa. Himnur voru skiptar eftir mólþunga fyrir kollagen I, kollagen III, -aktín, IL-6, STAT3 og p-STAT3. Eftir 3% BSA-blokkun voru frummótefni sett á og síðan HRP-tengd aukamótefni. Hljómsveitir voru sýndar með efnaljómun og magngreindar með ImageJ.
Tölfræði
Gögnin voru greind með SPSS 26.0 með einstefnu ANOVA og SNK-q post hoc prófum.
Niðurstöður
Árangur BPH líkanagerðar: Í samanburði við sýndarmennsku sýndi líkanhópurinn augljósa aukningu á stærð blöðruhálskirtils og vefjafræðilega ofvöxt og bandvefsmyndun. PI, Ki-67 sjónþéttleiki, IL-6 og IL-1 í blöðruhálskirtli/sermi, kollagen I/III, IL-6 og p-STAT3/STAT3 voru öll marktæk hækkuð á meðan E2/T var lækkað (P < 0,05).
Meðferðaráhrif Yishen Tonglong decoction: Bæði 15 og 30 g/kg skammtar drógu úr stækkun blöðruhálskirtils og bandvefsmyndun. Þessar meðferðir lækkuðu marktækt PI, Ki-67, IL-6, IL-1, kollagen I/III, IL-6 prótein og p-STAT3/STAT3 og juku E2/T (P < 0,05). Stóri skammturinn olli betri áhrifum en lági skammturinn (P < 0,05).
Áhrif STAT3 virkjunar: Colivelin jók stækkun blöðruhálskirtils og bandvefsmyndun og jók enn frekar bólgu- og trefjamerki á sama tíma og E2/T minnkaði samanborið við líkanið (P < 0,05).
Andstæðingur af völdum Colivelin: Samhliða meðferð með Colivelin veikti ávinninginn af háskammta afsoðinu, hækkaði bólgu-/trefjavísitölu og minnkaði E2/T samanborið við stórskammta afkok eingöngu (P <0,05).
Umræða
Vélræn rök: IL-6/STAT3 ásinn er miðlæg bólguferill sem tengist endurgerð blöðruhálskirtilsvefs. IL-6 binding virkjar JAK/STAT3 merkjasendingar, ýtir undir umritun bólgueyðandi gena og gena sem stuðla að útbreiðslu þekjuvefs/stroma, íferð ónæmisfrumna og útfellingu utanfrumufylkis. Niðurstöður okkar - framför með jurtaformúlunni og hrörnun með STAT3 virkjari - styðja orsakafræðilega vélræna tengingu þar sem Yishen Tonglong Decoction dregur úr BPH með því að dempa IL-6/STAT3 virkjun.
Jurtaformúlusjónarmið (jurt til að lækna blöðruhálskirtilsbólguvandamál): Jurtin sem innihalda jurtir veita viðbótarverkun sem skipta máli fyrir BPH og blöðruhálskirtilsbólgulíka bólgu:
Rakahitahreinsun og bólgueyðandi: Zhi Mu (Anemarrhena), Huang Bai (Phellodendron), Mu Dan Pi (Paeonia gelta), Ze Xie (Alisma).
Qi/nýra styrking og innkirtlamótun: Shu Di Huang (Rehmannia), Shan Zhu Yu (Cornus), Shan Yao (Dioscorea), Fu Ling (Poria).
Blóðvirkjun og trefjaeyðandi möguleiki: San Leng (Sparganium), E Zhu (Zedoary), Tao Ren (Peach kjarna), Wang Bu Liu Xing (Vaccaria).
Hitandi Yang og bætir örhringrás: Rou Gui (kanill), Fu Zi (akónít, unnin).
Stuðningur við sin/bein og grindarflæði: Niu Xi (Achyranthes).
Þessi samvirkni getur sameiginlega dregið úr bólgusýtókínum (IL-6, IL-1), fjölgun (Ki-67) og bandvefsmyndun (kollagen I/III), í samræmi við bælingu IL-6/STAT3 merkja sem sést í Western blot. Hækkun á E2/T bendir til þess að jafnvægi komist að hluta til á kynstera umhverfi, sem getur einnig haft áhrif á vöxt blöðruhálskirtils.
Klínísk þýðing og takmarkanir: Þó að þessar forklínísku gögn séu vænleg fyrir BPH og hugsanlega fyrir blöðruhálskirtilsbólgulíka bólgu, þarf að gæta varúðar við framreikning til manna. Skammtabreytingar, gæðaeftirlit með fjöljurtum og milliverkanir jurta og lyfja þarfnast frekari rannsókna. Engu að síður styrkja sönnunargögnin sem miða að leiðarljósi (ávinningur með decoction, skaði við STAT3 virkjun og útlestur ferla) fræðilegan grunn fyrir klíníska könnun á þessari jurtatengdu nálgun til að lækna blöðruhálskirtilsbólguvandamál og BPH.
Niðurstaða
Yishen Tonglong Decoction dregur úr ofvöxt í blöðruhálskirtli og bandvefsmyndun hjá BPH rottum með því að hindra IL-6/STAT3 virkjun og draga úr bólguboðum og vímuefnaboðum, með skammtaháðri verkun. Þessar niðurstöður veita vélrænan stuðning við hefðbundna notkun þess og nútímalegan, ferilbundinn rökstuðning fyrir frekari þróun sem jurtameðferð við BPH og blöðruhálskirtilsbólgutengdum sjúkdómum.
Heimildir
[1–13] Eins og vitnað er í í frumtextanum.
