Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Ágrip:Vaxandi áhyggjur af almennri heilsu knýr alþjóðlegan markað fyrir náttúruleg innihaldsefni, ekki aðeins í matvælaiðnaði heldur einnig á snyrtivörusviði. Í þessari rannsókn, skimun á hugsanlegri snyrtivörunotkun á vatnskenndum útdrætti úr þremur íslenskumþangs framleidd af pulsed electric fields (PEF) voru framkvæmdar. Útdrættir sem framleiddir voru af PEF úr Ulva lactuca, Alaria esculenta og Palmaria palmata voru bornir saman við hefðbundna heitavatnsútdrátt með tilliti til pólýfenóls, flavonoids og kolvetnainnihalds. Þar að auki,andoxunarefnieiginleikar og ensímhamlandi virkni voru metin með því að nota in vitro próf. PEF sýndi svipaðar niðurstöður og hefðbundna aðferðin, sem sýndi nokkra kosti eins og ekki hitauppstreymi og styttri útdráttartíma. Meðal íslensku tegundanna þriggja sýndi Alaria esculenta hæsta innihald fenóls (meðalgildi 8869,7 µg GAE/g dw) og flavonoid (meðaltal) gildi 12.098,7 µg QE/g dw) efnasambönd, sem einnig sýna hæstuandoxunarefnigetu. Þar að auki sýndu Alaria esculenta útdrættir framúrskarandi and-ensímvirkni (76,9, 72,8, 93.0 og 100 prósent fyrir kollagenasa, elastasa,týrósínasaandhyaluronidase, í sömu röð) til notkunar þeirra í húðhvítunarvörur og öldrunarvörn. Þannig bendir bráðabirgðarannsókn okkar til þess að íslenskar útdrættir úr Alaria esculenta, framleiddir af PEF, gætu verið notaðir sem hugsanlegt innihaldsefni fyrir náttúrulegar snyrtivörur og snyrtivörur.

Leitarorð:stórþörungar; Ulva lactuca; Alaria esculenta; Palmaria palmata; PEF-aðstoðuð útdráttur;lífvirk efnasambönd; grænt útdráttur; náttúruleg innihaldsefni; snyrtivörur

cistanche eru hvítandi náttúruleg innihaldsefni

1. Inngangur

Á undanförnum árum hefur eftirspurn eftir nýjum lífvirkum efnasamböndum með hugsanlegum heilsufarslegum ávinningi aukist verulega. Margir rannsóknarhópar hafa lagt áherslu á rannsóknir á sjávarlífverum, svo sem stórþörungum, til að finna nýjar og sjálfbærar uppsprettur náttúrulegra efnasambanda til notkunar í landbúnaðarmatvælaiðnaði, lyfjafræði, matvælum og nú nýlega á sviði snyrtivöru [1,2] . Stórþörungar eru stór og ólíkur hópur ljóstillífandi lífvera sem einkennist af miklum líffræðilegum fjölbreytileika og flókinni lífefnafræðilegri samsetningu. Samkvæmt efnafræðilegri uppbyggingu þeirra og litarefnisinnihaldi er hægt að skipta stórþörungum í þrjár ættir þar á meðal brúnþörunga (Phaeophyceae), rauðþörunga (Rhodophyta) og grænþörunga (Viridiplantae). Þörungasambönd eru geymd inni í umfrymi frumunnar eða bundin við frumuhimnur; þannig er frumuröskun mikilvæg fyrir nýtingu lífmassa þörunga. Að auki er frumuveggjasamsetningin mjög breytileg milli þörungategunda, allt frá örsmáum himnum til marglaga flókinna mannvirkja, sem gerir endurheimt þörungaafurða erfiða [3]. Almennt séð eru þangir framúrskarandi uppsprettur fjölsykra, próteina, lípíða og margs konar efri umbrotsefna eins og fenólefnasambönd, terpenóíða, karótenóíða, litarefna og niturafleiða [4-6]. Þrátt fyrir að frumumbrotsefni skipti sköpum hafa nýleg gögn sýnt að innihald aukaumbrotsefna ákvarðar líffræðilega virkniþangútdrættir [7].

Vaxandi áhyggjur af almennri heilsu og vellíðan, sem og vitund um skaðleg efni í hversdagsvörum, knýr alþjóðlegan markað náttúrulegra og lífrænna hráefna [8]. Undanfarin ár hefur meðvitund neytenda gagnvart vali náttúrulegra innihaldsefna og vistvænna vara náð frá matvælaiðnaði til snyrtivöru- og persónulegrar umhirðuiðnaðar [9]. Ennfremur, í núverandi samhengi hnattrænnar hlýnunar og vistfræðilegra mála, hefur almenning aukist meðvitund um umhverfismál. Í ljósi þessara núverandi áhyggjur hafa neytendur snúið hagsmunum sínum í átt að grænum, hollum og efnalausum vörum. Þess vegna er snyrtivöruiðnaðurinn nú að skipta út eitruðum efnum og skaðlegum innihaldsefnum fyrir ný og náttúruleg verðmæt efnasambönd til að framleiða „efnafræðilega hreinar“ snyrtivörur [10].

Snyrtivörur hafa jafnan verið skilgreindar sem vörur til að bera á mannslíkamann til að hreinsa, fegra eða stuðla að aðlaðandi án þess að hafa áhrif á líkamsbyggingu. Hins vegar hafa nýjar straumar og nýlegar kröfur neytenda stuðlað að þróun nýrra vara sem veita margvíslegan ávinning með lágmarks fyrirhöfn. Hugtakið snyrtivörur er nú oft notað til að lýsa snyrtivörum með lífvirkum innihaldsefnum sem segjast hafa læknisfræðilega eða lyfjalíka kosti [11]. Snyrtivörur innihalda venjulega hagnýt innihaldsefni eins og vítamín, plöntuefna, ensím,andoxunarefniog/eða ilmkjarnaolíur [12]. Þar sem mikið úrval þessara lífvirku efnasambanda hefur fundist í stórþörungum er rannsókn á nýjumþangs og sjávarþörungar unnar útdrættir hafa reynst efnilegur svæði snyrtivöru- og snyrtivörurannsókna [13,14].

Fjöldi efri umbrotsefna unnin úrþangs eru þekkt fyrir dýrmæt heilsufarsleg áhrif á húðina, svo sem ljósverndandi, rakagefandi,andoxunarefni, bólgueyðandi og endurnýjandi eiginleika [15]. Byggt á þessum jákvæðu áhrifum eru þörungar teknir inn í snyrtivörur eins og sólarvörn, öldrunarvörn, sem og til að koma í veg fyrir oflitarefni, á meðan fjölsykrur eru notaðar til að halda húðinni raka og koma í veg fyrir þurrkun [16]. Meðan á öldrun stendur eru utanfrumu fylkispróteinin næm fyrir of mikilli virkni próteinlýsandi ensíma eins og kollagenasa og astasa, sem leiðir til sýnilegra breytinga á húðinni, svo sem hrukkum eða tapi á teygjanleika húðarinnar. Efnileg aðferð til að koma í veg fyrir ytri öldrun húðar er hömlun á kollagenasa og elastasavirkni með náttúrulegum efnasamböndum. Plöntuþykkni hefur verið mikið rannsakað og reynst hafa and-kollagenasa og and-elastasa virkni [17]. Hins vegar eru litlar upplýsingar um hamlandi ensímvirkni þangseyði.

Algengustu útdráttaraðferðirnar við einangrun lífvirkra efna úr þangi eru byggðar á hefðbundinni tækni. Engu að síður hefur notkun hefðbundinna aðferða nokkra galla, svo sem notkun á miklu magni lífrænna leysiefna, lengri útdráttartíma, hátt hitastig, sértæknivandamál, mikla orkuþörf og samútdrátt ómarkvissra eða truflandi efnasambanda [18]. Þess vegna hafa nýjar útdráttartækni byggðar á grænum efnafræðireglum hugsanlegan áhuga [19].

Púlsað rafmagnssvið (PEF) er ný, óhituð og orkusparandi matvælavinnslutækni [20]. PEF felur í sér beitingu rafsviðspúlsa, venjulega við háspennu (kV svið) og stuttan tíma (míkró eða nanó-sekúndur) á vöru sem er staðsett á milli tveggja rafskauta [21]. Notkun rafpúlsa veldur myndun afturkræfra eða óafturkræfra svitahola í frumuhimnum, skilgreind sem rafporun eða rafgegndræpi, sem þar af leiðandi auðveldar hraða dreifingu leysiefna og aukningu massaflutnings innanfrumuefnasambanda [22]. Nýlegar umsóknir hafa beinst að notkun púls raforku sem útdráttartækni (PEF-aðstoðað útdráttur) úr líf-, matvælum og landbúnaðarafurðum [23]. Með PEF meðferð er mögulegt að fá útdrætti með meiri hreinleika, auka útdráttarhraða lífvirkra efnasambanda eins og pólýfenóla, karótenóíða eða antósýanína og útrýma notkun lífrænna leysiefna og stytta útdráttartímann [24,25]. PEF meðferð hefur verið beitt með góðum árangri til útdráttar á verðmætum efnasamböndum úr mismunandi sjávaruppsprettum, svo sem próteinum [26-28], kolvetnum [29,30], lípíðum [31,32] og litarefnum eins og karótenóíðum, klórófylli eða phycocyanins [22,33] ,34] úr örþörungum og þangi.

Meginmarkmið þessarar rannsóknar var því að meta hugsanlega snyrtivörunotkun PEF útdrætti úr þremur stórþörungategundum sem vaxa á Íslandi: U. lactuca (grænn stórþörungur), A. esculenta (brúnn stórþörungur) og P. palmata (rauður stórþörungur). . Í viðleitni, til að þróa lífræn og náttúruleg innihaldsefni fyrir grænar samsetningar, var PEF-aðstoðað útdráttur lagt til sem umhverfisvænn valkostur við hefðbundna lífræna leysiefni. Eftir útdráttarferlið, vatnslausnþangútdrættir einkenndust með tilliti til pólýfenóls, flavonoids og kolvetnainnihalds. Þar að auki,andoxunarefnieiginleikar og ensímhamlandi virkni voru metin með því að nota in vitro virknipróf. Niðurstöðurnar sem greint er frá hér munu leggja grunninn að því að bæta skilning á brúnum, rauðum og grænum stórþörungum til að framleiða virk efni fyrir nýstárlegar samsetningar í snyrtivörum sem innihalda líffræðilega virk efnasambönd einangruð úr náttúrulegum og sjálfbærum uppruna.

2. Niðurstöður og umræður

2.1. PEF-aðstoðvinnsla til vinnslu á íslenskum sjávarþangi

Niðurstöðurnar sýna að rafleiðni var hæst í sviflausn sem var útbúin úr A. esculenta og síðan P. palmata og U. lactuca (p < {0}}.05)="" (tafla="" 1).="" hins="" vegar="" voru="" áhrif="" meðferðartegundar="" ekki="" greind="" sem="" marktæk="" (p=""> 0,05). Mælingar á rafleiðni hafa verið notaðar með góðum árangri af öðrum höfundum til að meta virkni PEF-meðferðar í líffræðilegum vefjum fyrir losun jónískra efna innan frumu, sem afleiðing af aukinni gegndræpi frumuhimnu [35-37].

Í rannsókn okkar gáfu niðurstöðurnar ekki til kynna sterkari losun þessara efna af völdum PEF, þar sem breytingar á leiðni sem framkallast af útdráttarmeðferðum höfðu tilhneigingu til að vera hæstar í HW sviflausnum. Fyrri rannsóknir hafa komist að þeirri niðurstöðu að upphafsleiðni utanfrumumiðilsins hafi áhrif á rafskautavirkni en það er skortur á samkomulagi um hvort jákvætt eða neikvætt samband sé á milli þessara tveggja þátta [38]. Breytingar á leiðni og eiginleikum efnisins geta gert samanburðinn flókinn. Í rannsókn okkar var mikill munur á leiðni A. esculenta sviflausna og hinna tveggja tegundanna, sem endurspeglaðist ekki í leiðnibreytingum við útdráttarmeðferð. Fram hefur komið að öskuinnihald brúnt þang getur verið meira en 50 prósent af þurrþyngd þess [39], sem samanstendur að mestu af jónum, sem gæti að hluta útskýrt mikla leiðni í sviflausnum A. esculenta samanborið við hinar tvær tegundirnar.

Niðurstöðurnar sýna að pH í U. lactuca sviflausn var lægra en í hinum tegundunum tveimur, en engin skýr áhrif komu fram frá útdráttargerð. Hitastigið var hækkað úr 22 ± 1◦C fyrir meðferð, í 95 ◦C með HW (fyrir allar tegundir), í 36.0 ± 1.0 ◦C, 46,3 ± 0. 6 ◦C og 51.0 ± 1◦C miðað við PEF, í A. esculenta, P. palmata og U. lactucasuspensions. Sama þróun sást fyrir hópana sem voru meðhöndlaðir með PEF, sem síðan voru hitaðir enn frekar af HW. Hækkun hitastigs stafaði af umbreytingu raforku í varmaorku (ómísk upphitun) í sviflausninni meðan á PEF meðferð stendur. Vitað er að magn hitahækkunar er í réttu hlutfalli við beitt straum en í öfugu hlutfalli við leiðni. Þetta gæti skýrt hvers vegna P. palmata andU. lactuca náðu hærra hitastigi meðan á PEF meðferð stóð þó að þeir hafi lægri leiðni en A. esculenta.

2.2. UV-VIS frásogsróf íslenskra þangseyði

Rannsakað þang er mismunandi í litrófssniði (Mynd 1), sem bendir til þess að samsetning og útfjólubláa gleypni sé mismunandi milli tegunda. Hins vegar sýndi tegund útdráttartækni ekki merkileg áhrif á UV frásogsrófið; þangseyði sýndu svipað frásogssnið óháð útdráttaraðferðinni.

UV frásogsróf grænþörunga U. lactuca sýndu áberandi topp á UV-B bilinu (280–320 nm) (Mynd 1a), en útdrættir úr brúnþörungnum A. esculenta sýndu enga skýra myndun frásogssvæðis (Mynd 1c) ). Hins vegar bentu niðurstöður til sterkari gleypni við 220 nm í A. esculenta útdrætti samanborið við U. lactuca og P. palmata sem talið var að stafaði af háu innihaldi fenólefnasambanda í A. esculenta (tafla 2). Frásogshámark innan þessa sviðs hefur verið tengt tengingu milli fenólefnasambanda og algínata. Gert er ráð fyrir að þetta samband varðveiti útfjólubláu frásogsgetu fenólefnasambanda með tímanum [40].

Áhugaverðari niðurstaða var að niðurstöður sem fengust fyrir rauðþörungaútdrættina, P. palmata gleypti hluta UV-A geislunar (320–400 nm). Það er vitað að rauðþörungar safna ljósverndandi efnasamböndum með útfjólubláa geislun frásogshæfileika eins og mýkósporínlíkar amínósýrur (MAA), sem gleypa í þessu sérstaka UV-svæði [41]. P. palmata skara fram úr á útfjólubláu frásogsrófinu með áberandi toppa á milli 320 og 340 nm í samræmi við nærveru MAA sem gleypa á þessu sviði [42], eins og palythinol (hámarks frásog við 332 nm), asterina-330 (frásogshámark). 330 nm), porphyra-334 (hámarksupptaka við 334 nm) og aðrir [43]. Vegna þess að útdráttaraðstæður, eins og tegund leysis, eru þekktar sem hafa áhrif á skilvirkni útdráttar, voru niðurstöður í þessari rannsókn bornar saman við fyrri rannsóknir á útdrætti MAAs með vatni úr P. palmata. Í þessum rannsóknum greindust hámarks frásogstoppar við 325 til 330 nm [44], eins og í þessari rannsókn. Þess vegna er hægt að gera ráð fyrir að topparnir sem sjást á milli 320 og 340 nm geti verið vegna nærveru MAA.

Munur á frásogsrófinu á milli 350 og 700 nm hefur verið skýrður með tilvist mismunandi aukalitarefna í viðkomandi ljóskerfum af grænum, brúnum og rauðum stórþörungum, blaðgrænu-b (450–500 nm), fucoxanthin (400–500 nm) og phycoerythrin. (600–650 nm) í sömu röð [45]. Styrkur vatnsleysanlegra efnasambanda í útdrættinum hafði sterkari áhrif. Þar af leiðandi var mynstur sem endurspeglar muninn á litarefnum milli þörungategunda ekki áberandi í þessari rannsókn.

2.3. Heildarfenól-, flavonoid- og kolvetnainnihald í íslenskum þangseyði

Heildarfenólinnihald íþangs var á bilinu 1592 til 9368 µg GAE/g dw (tafla 2). Brúnþörungurinn A. esculenta sýndi mesta magn (p < {3}}.05)="" af="" fenólisamböndum="" (meðalgildi="" 8869,7="" µg="" gae/g="" dw),="" á="" eftir="" p.="" palmata="" (meðalgildi="" 1806,2="" µg)="" gae/g="" dw)="" og="" u.="" lactuca="" (meðalgildi="" 1750,7="" µg="" gae/g="" dw)="" (enginn="" marktækur="" munur="" var="" á="" p.="" palmata="" og="" u.="" lactuca="" útdrætti)).="" fyrir="" hverja="" þangtegund="" var="" innihald="" pólýfenóla="" ekki="" mismunandi="" eftir="" útdráttaraðferðum="" nema="" fyrir="" u.="" lactuca,="" en="" niðurstöður="" þeirra="" sýndu="" að="" hw="" var="" skilvirkasta="" tæknin="" (p="">< 0,05).="" hins="" vegar="" ætti="" að="" draga="" fram="" kosti="" pef,="" þar="" á="" meðal="" ekki="" hitauppstreymi,="" styttri="" útdráttartíma="" (10="" mín="" á="" móti="" 45="" mín)="" og="" grænt="">

Meðal þörungahópanna þriggja innihalda brúnir stórþörungar meiri fjölda fjölfenóla en rauðir og grænir stórþörungar. Niðurstöður voru í samræmi við fyrstu rannsóknir [46,47] sem greindu frá því að brúnir (td A. esculenta og Saccharina latissma) þörungategundir hefðu hærra fenólinnihald en rauðar (P. palmata) og grænar tegundir (td U. lactuca). Þetta var stutt af öðrum höfundum [48] sem komust að þeirri niðurstöðu að meðalfjölfenólinnihald væri tegundasérhæft (A. esculenta > S. latissma > P. palmata) og fenólinnihaldið væri meira en þrefalt hærra í A. esculenta en í hinum tegundunum ( A. esculenta: 37 mg flóróglúsínóljafngilda (PGE)/g dw; S. latissma: 8 mg PGE/g dw; P. palmata: 5 mgGAE/g dw). Ennfremur, í sömu rannsókn, greindu höfundar frá því að fjölfenólinnihaldið væri breytilegt eftir árstíðum, en staðbundin breyting (þörungar voru tíndir í Noregi, Frakklandi og Íslandi) sýndu jaðaráhrif. Til dæmis, Gager o.fl. (2020) komust að því að það voru marktæk áhrif árstíðabundinna breytinga á pólýfenólinnihaldi A. esculenta, með meira en 300 mg GAE/g DW á haustin samanborið við undir 20 mg GAE/g DW að vori. Flórótannín úr sjö brúnum þörungum sem eru tíndar í atvinnuskyni í Brittany (Frakklandi) greind með 1H NMR og in vitro prófum: tímabundin breyting og möguleiki á valorization í snyrtivörunotkun. Sýnum okkar var safnað í júlí (U. lactuca og A. esculenta) og í nóvember (P. palmata). Í rannsókn Roleda [48] var meðalinnihald A. esculenta frá Þrándheimi, Noregi (ekki safnað á Íslandi) á sumrin 40 mg PGE/g dw og P. palmata frá Íslandi en var 4 mg GAE/g dw á haustin. Hærri gildin sem greint er frá í samanburði við rannsókn okkar má skýra með útdráttarmiðlinum sem notuð eru (80:20 asetón:vatn), sem líklegt er að leiði til hærri útdráttaruppskeru. Hærra pólýfenól innihald fannst einnig fyrir A. esculenta útdrætti með því að nota blöndu af etanóli og vatni (50:50) með ómskoðun [49]. Hins vegar, með því að nota sama útdráttarmiðil og klassíska leysiútdráttinn, var greint frá því að A. esculenta innihélt 44,1 mg GAE/100 g dw vatnslausn útdrætti [50], tiltölulega svipað því sem sést í þessari rannsókn.

Meðal flavonoid innihald var tegundasértækt (A. esculenta > U. lactuca > P. palmata;(p < 0.{{10}}5) (tafla 2). Mesta magn af flavonoids sáust fyrir A. esculenta útdrætti (meðalgildi 12098,7 µg QE/g dw), en lægra innihald fannst fyrir U. lactuca (meðalgildi 4152,4 µg QE/g dw), og lágmarksinnihald var ákvarðað fyrir P. palmata útdrætti ( meðalgildi 905,8 µg QE/g dw). Svipað og hegðun sem fannst fyrir heildarfenólinnihald, hafði tegund útdráttartækni ekki marktæk áhrif á flavonoid innihald (p > 0,05), að undanskildum U. lactuca. Niðurstöður sýndu að HW og samsetning beggja aðferða (PEF plús HW) voru skilvirkustu aðferðirnar við útdrátt flavonoids í U. lactuca (p < 0,05).

Fjölmargar rannsóknir eru til á innihaldi flavonoids í landplöntum, en rannsóknir á flavonoidinnihaldi í þörungum eru af skornum skammti [51] og sérstaklega í þeim tegundum sem rannsakaðar eru í þessu verki. Nefnilega rannsókn Ummat o.fl. [49] greindi frá því að útdráttur með ómskoðun bætti endurheimt flavonoids í öllum 11þangs rannsakað (þar á meðal A. esculenta) samanborið við hefðbundna leysiútdrátt með blöndu af 50 prósent etanóli. Í annarri rannsókn voru flavonoids magngreind í metanólútdrætti fjögurra Ulva tegunda (Ulva clathrata, Ulva linza, Ulva flexuosa og Ulva intestinalis) sem ræktuð voru á mismunandi stöðum á norðurströnd Persaflóa í suður af Íran; flavonoid innihald þörungaþykkni var frá 8 til 33 mg RE/g dw [52]. Hins vegar, fyrri rannsóknir af sama rannsóknarhópi fundu verulegar breytingar á efnafræðilegum innihaldsefnum með breytingum á árstíðum og umhverfisaðstæðum [53]. Þannig er svolítið erfitt að hafa fulla yfirsýn yfir heimildaskrá þessara lífvirku efnasambanda íþangs, vegna skorts á tiltækum birtum rannsóknum, en einnig vegna breytinga á flavonoid innihaldi undir áhrifum af vaxtarskilyrðum og landfræðilegri staðsetningu.

Mean carbohydrate content of produced extracts was also species-specific (P. palmata >U. lactuca > A. esculenta; p < 0.05)="" (tafla="" 2).="" innihald="" var="" á="" bilinu="" 44,8="" til="" 510="" mg="" glue/gdw="" eftir="" þörungategundum.="" þang="" inniheldur="" mikið="" magn="" af="" fjölsykrum="" með="" mikilvæga="" virkni="" fyrir="" stórþörungafrumurnar,="" þar="" á="" meðal="" burðarvirki="" og="" orkugeymslu.="" til="" dæmis="" er="" meginhluti="" rauðra="" og="" brúnra="" þangfrumuveggja="" táknaður="" með="" súlferuðum="" galaktönum,="" sem="" eru="" þekktir="" sem="" agar,="" algínat="" og="" karragenan="" [54].="" reddalgarnir="" p.="" palmata="" sýndu="" hæsta="" magn="" kolvetnainnihalds="" (meðalgildi="" 441="" mgglue/g="" dw).="" niðurstöður="" voru="" í="" samræmi="" við="" fyrri="" rannsóknir="" sem="" greindu="" frá="" hæsta="" styrk="" fjölsykru="" í="" palmaria="" tegundum="" [55].="" þar="" að="" auki,="" mutripah="" o.fl.="" [56]="" lýsti="" heildarkolvetnainnihaldi="" p.="" palmata="" upp="" á="" 469="" mg/g="" af="" þurru="" þangi,="" tiltölulega="" svipað="" því="" sem="" sést="" í="" þessari="">

Græni stórþörungurinn U. lactuca sýndi allt að 249,5 mg GluE/g dw, eftir útdráttartækni sem notuð var (tafla 2). Byggt á bókmenntum, U. lactuca hefur vatnsleysanlegan og óleysanlegan sellulósa sem samsvarar byggingarfjölsykrum með stórum þætti sem kallast ulvan, sem leggur til frá 9 til 36 prósent þurrþyngdar lífmassa [57]. Ulvan er aðallega samsett úr súlferuðum ramnósa, úrónsýrum (glúkúrónsýru og idurónsýru) og xýlósa. Vegna skautaðs eðlis eykst leysni ulvan vatnslausna með útdrætti við háan hita (80–90 ◦C) [58]. Útdráttshitastigið gæti verið ástæðan fyrir því að heildarkolvetnainnihald U. lactucaextracts sem framleitt er með hefðbundnum heitavatnsútdrætti og samsetningu beggja aðferða (PEF plús HW) var hærra (p < 0,05)="" en="" innihaldið="" sem="" náðist="" með="" því="" að="" nota="" eingöngu="">

Á hinn bóginn leggja aðrir höfundar áherslu á mikilvægi árstíðabundinna breytinga á fjölsykruinnihaldi. Til dæmis segja Schiener o.fl. að þeir greina árstíðabundin afbrigði og spá fyrir um besta uppskerutíma fyrir þara. Árstíðabundin samsetningagreining A. esculenta sýndi fram á að hámarksgildi kolvetna féllu saman við minni styrk próteina, ösku, pólýfenóla og raka [39]. Samkvæmt höfundum geta þessi tengsl, sem eru breytileg milli árstíða og tegunda, nýst af atvinnugreinum til að hámarka afrakstur markvissaþangíhlutir.

2.4. Andoxunargeta íslenskra þangseyða

A. esculenta hafði sterkustu DPPH-hreinsunarvirknina meðal hráþykkni þörungategundanna þriggja (p < {0}}.05),="" með="" hreinsiáhrif="" sem="" voru="" hærri="" en="" 90="" prósent="" (tafla="" 3).="" samanborið="" við="" mismunandi="" staðlaðar="" lausnir,="" a.="" esculenta="" sýndi="" sambærilega="" hreinsunarvirkni="" og="" 100="" µg/ml="" af="" askorbínsýru="" (87,9="" prósent),="" gallsýru="" (91,0="" prósent)="" og="" -tókóferóli="" (87,9="" prósent).="" niðurstöður="" okkar="" voru="" í="" samræmi="" við="" nýlegar="" rannsóknir="" [50],="" sem="" einnig="" greindu="" frá="">andoxunarefnivirkni A. esculenta útdráttar. Furðu, enginn marktækur munurandoxunarefnivirkni sást á milli mismunandi útdráttaraðferða sem prófaðar voru (p > 0.05). Búist var við að PEF útdrættir myndu sýna betri andoxunargildi en útdrættir sem eru framleiddir með heitum hefðbundnum útdrætti þar sem aðrar rannsóknir hafa sýnt að grænar aðferðir (eins og örbylgjuaðstoð útdráttur eða ensímútdráttur) gæti í raun komið í veg fyrir niðurbrot lífvirkra efnasambanda og sýnt meiri andoxunarvirkni [59 ,60].

Hæfni afþangútdrættir til að minnka járn (Fe3 plús) í járn (Fe2 plús) jón og hæfni til að hreinsa róttæka ABTS var einnig rannsakað, með FRAP og ABTS aðferð, í sömu röð. Niðurstöður FRAP sýndu svipaða tilhneigingu og DPPH, sem sýndu að A. esculenta hafði sterkasta getu til að minnka járn (Fe3 plús ) í járnjón (Fe2 plús ) meðal hráefnisútdrátta þriggja þörungategunda (p < 0.{{6}="" }5).="" hins="" vegar="" fannst="" önnur="" hegðun="" fyrir="" abts.="" útdrættir="" úr="" alþangi="" sýndu="" svipaðan="" hæfileika="" til="" að="" hreinsa="" róttækið="" abts="" (p=""> 0,05), sem bendir til þess að þessar tegundir innihalda líklega nokkur skilvirk efnasambönd sem bera ábyrgð á hreinsivirkni þess.

Almennt er vitað að brúnþörungar koma fram hærraandoxunarefnimöguleika í samanburði við rauðar og grænar fjölskyldur [61]. Niðurstöður okkar sýndu einnig að vatnskenndir útdrættir úr A. esculenta sýndi áhrifaríka andoxunarvirkni með tilliti til hreinsunar á sindurefnum og draga úr krafti, sem bendir til þess að A. esculenta gæti hugsanlega verið úrræði fyrir náttúruleg andoxunarefni. Hin mikla andoxunarvirkni sem sést fyrir A. esculenta útdrætti gæti tengst háu innihaldi fenólefnasambanda sem ákvarðast í brúnþörungaþykkni. Í mörgum rannsóknum erandoxunarefnivirkni þörungaútdráttar hefur verið kennd við fenólefnasamböndin, sem sýnir jákvæða fylgni á milli fenólinnihalds og hreinsunargetu, aðallega við DPPH [62,63]. Svipaðar fylgniniðurstöður fundust í núverandi rannsókn fyrir A. esculenta útdrætti (sjá betri umfjöllun í kafla 2.6. Fylgni efnasambanda og lífvirkra eiginleika).

2.5. Ensímhemjandi virkni íslensks þangsextrakts

íslenskurþangs útdrættir sýndu jákvæð hamlandi áhrif á öll ensímprófuð (tafla 4), sem opnaði nýjar leiðir til að nýta náttúrulega ensímhemla úr auðlindum þörunga. Eftir því sem við best vitum er þetta í fyrsta sinn sem ensímatínhemjandi virkni á íslenskuþangútdrættir framleiddir af PEF hafa verið prófaðir.

2.5.1. Kollagenasa hindrunarvirkni

A. esculenta útdrættir sýndu jákvæða kollagenasa hömlun á bilinu 68 til 91 prósent, en P. palmaria og U. lactuca útdrættir sýndu óverulega hömlun gegn kollagenasa (tafla 4). A. esculenta heitavatnsútdráttur sýndi 71,1 prósent kollagenasa hömlun, sem var hærri en epigallocatechin-3-gallate (EGCG) staðallausn (63,2 prósent) og sambærileg við jákvæðan staðal sem ensímsettið gefur til kynna (74,9 prósent). Niðurstaðan var sú að A. esculenta útdrættirnir sem framleiddir voru af PEF sýndu akollagenasa hömlun upp á 91 prósent, sem sýndi enn meiri virkni en hemillinn sem verslunarsettið býður upp á. Það skal tekið fram að þessi virkni kom aðeins fram í vatnsútdrættinum sem framleidd er af PEF en ekki með samsetningu PEF og HW. Þessa hegðun má útskýra með þeim möguleika að heitavatnsferlið gæti haft neikvæð áhrif á efnasamböndin sem bera ábyrgð á að hindra kollagenasavirkni. Hins vegar er þörf á frekari rannsóknum til að útskýra þessar niðurstöður vegna þess hversu flókið hráþörungaútdráttur er. Fyrrnefndur rannsóknarhópur vinnur nú að því að bera kennsl á hömlunarsameindirnar í A. esculenta útdrætti til að skilja betur þessi jákvæðu áhrif sem PEF framleiðir.

Niðurstöður varðandi hömlun á kollagenasa með A. esculenta útdrætti eru í samræmi við fyrri gögn, þar sem A. esculenta er notað í útdrætti í atvinnuskyni vegna öldrunaráhrifa þess. Niðurbrot kollagens á sér stað með öldrun vegna kollagenasavirkni, sem leiðir til hrukkum á húðinni. Hömlun kollagenasa með náttúrulegum efnasamböndum er áhugavert tækifæri fyrir vörur gegn öldrun. Sem dæmi má nefna að SEPPIC, birgir innihaldsefna fyrir snyrtivöruiðnaðinn, býður upp á fitusækið þykkni af A. esculenta (Kalpariane® AD) [64].

2.5.2. Elastasa hindrunarvirkni

Aðeins hráar útdrættir af A. esculenta hamluðu elastasa og sýndu meiri virkni en 70 prósent af hömlun (tafla 4). Hins vegar var and-elastasavirkni A. esculenta útdrátta ekki tölfræðilega mismunandi eftir útdráttaraðferðum (p > 0.05). Í samanburði við quercetinsolutions, vel þekktan elastasahemil sem sýndi 100 prósenta hömlun við 1 mM og 58,7 prósent við 0,5 mM, var árangur útdráttar úr A. esculenta mikil.

Elastasi er próteinasa ensím sem getur dregið úr elastíni með því að rjúfa ákveðin peptíðtengi. Þar af leiðandi er hægt að nota hömlun á elastasavirkni í húðlaginu til að viðhalda mýkt í húðinni [65]. Margir plöntuþykkni hafa verið skilgreind sem elastasínhemlar [17]; Hins vegar hafa fáar rannsóknir verið gerðar á elastasahömlun frá auðlindum þörunga. Samkvæmt gögnum í bókmenntum er vitað að pólýfenól sem eru dregin úr plöntum eru sterkir elastasa- og hýalúrónídasahemlar [66]. Í nýlegri rannsókn var greint frá því að flórótanínin, tegund tanníns í brúnþörungum, útdrættir úr sæþörungi Eisenia bicyclis og brúnþörungi Ecklonia cava, gagnast húðinni með því að draga verulega úr elastasavirkni [67]. A. esculenta útdrættirnir sem framleiddir voru í þessari rannsókn sýndu að hæstu TPC og TFC gildi í samanburði við aðrar tegundir sem rannsakaðar voru (tafla 4), þannig að þetta gæti verið ástæðan fyrir því að vatnslausnir útdrættir úr P. palmaria og U. lactuca sýndu ekki and-elastasa virkni. Til að staðfesta þessa tilgátu var gerð Pearson fylgnigreining sem bendir til þess að and-ensímvirkni hafi jákvæða fylgni við innihald fenólefna (sjá nánari umfjöllun í kafla 2.6. Fylgni milli efnasambanda og lífvirkra eiginleika).

2.5.3. Týrósínasa hindrandi virkni

A. esculenta útdrættir sýndu jákvæðatýrósínasahömlun hærri en 90 prósent fyrir allar útdráttaraðferðirnar sem notaðar voru, en P. palmaria og U. lactuca útdrættir höfðu ekki týrósínaseinhindandi áhrif (tafla 4). Hins vegar var and-tyrosinasavirkni A. esculenta útdrátta ekki frábrugðin (p < 0.05)="" með="" útdráttaraðferðum.="" þegar="" áhrif="" a.="" esculenta="" útdráttar="" voru="" borin="" saman="" við="" quercetin="" lausnirnar="" sem="" prófaðar="" voru="" sýndu="" hráþykkni="" brúnþörunganna="" betri="" hamlandi="" virkni="" en="" þessar="" lausnir="" (88="" og="" 75="" prósent="" fyrir="" 0,5="" og="" 1="" mm="" quercetin="" lausnirnar,="" í="" sömu="" röð).="" byggt="" á="" bókmenntum="" hefur="" verið="" greint="" frá="" and-tyrosinasavirkni="" plantna,="" baktería="" og="" sveppa="" af="" nokkrum="" vísindamönnum="" [68].="" hins="" vegar,="" þó="" að="" mismunandi="" rannsóknir="" bendi="" til="" þess="" að="" lífvirk="" efnasambönd="" úr="" sjávarþörungum="" hafi="" góða="" möguleika="" á="" að="" nota="" sem="" húðhvítunarefni="" [13],="" er="" þetta="" enn="" ókannað="" svið="" og="" aðeins="" nokkrar="" rannsóknir="" hafa="" verið="" gerðar.="" flestar="" rannsóknirnar="" sem="" gerðar="" hafa="" verið="" á="" þessu="" sviði="" hafa="" beinst="" að="" brúnþörungum,="" sem="" eru="" í="" samræmi="" við="" niðurstöður="" þessarar="" rannsóknar="" þar="" sem="" a.="" esculentaextracts="" sýndu="" bestu="" and-tyrosinasavirknina.="" til="" dæmis="" hafa="" flóróglúsínólafleiður="" og="" flórótanín,="" algeng="" efri="" umbrotsefni="" sem="" finnast="" í="" brúnþörungum,="" sýnt="" hamlandi="" virkni="" gegn="" týrósínasa="" vegna="" getu="" þeirra="" til="" að="" klóbinda="" kopar="" [69].="" í="" nýlegri="" rannsókn="" hamlaði="" útdráttur="" brúnþörunga="" lessonia="" trabeculate,="" sem="" framleiddur="" er="" með="" örbylgjuaðstoðinni,="" 33,73%="" týrósínasavirkni="" [60].="" í="" annarri="" rannsókn="" sýndi="" útdráttur="" brúnþörunganna="" turbinaria="" conoides="" virkni="" sem="">andoxunarefniogtýrósínasahemill, en í þessu tilfelli var etanól notað sem leysir [70]. Marktæk fylgni á milli hamlandi virkni pólýfenóla sem eru dregin úr plöntum á sveppumtýrósínasahefur verið greint frá í fyrri rannsóknum [68]. Sömuleiðis benda niðurstöður þessarar rannsóknar til þess að hamlandi virkni gagnvart týrósínasa hafi verið jákvæð fylgni við innihald flavonoids og fenóls (sjá kafla 2.6. Fylgni milli efnasambanda og lífvirkra eiginleika).

Týrósínasi gegnir mikilvægu hlutverki í nýmyndun melaníns litarefnis í húðinni. Melanín er ábyrgt fyrir vörn gegn skaðlegri útfjólublári geislun, sem getur valdið nokkrum sjúklegum sjúkdómum [71]. Að auki getur það skapað fagurfræðileg vandamál þegar melanín safnast fyrir sem oflitaða blettir [72]. Þannig getur innlimun týrósínaseinhemla í snyrtivörur verið aðlaðandi vegna hvítunar og/eða léttandi áhrifa.

cistanche getur hamlað tyrosinasa

2.5.4. Hýalúrónídasa hindrandi virkni

Öllþangútdrættir sýndu verulega mikla and-hýalúrónídasavirkni (tafla 4), sem sýndu sambærilegar niðurstöður og tannínsýrulausnirnar (velþekktur hýalúrónídasa hemill). Nánar tiltekið sýndu A. esculenta útdrættir 100 prósent af hömlun fyrir allar þær aðferðir sem prófaðar voru. Þar að auki sýndu U. lactuca útdrættir meiri virkni en 90 prósent af hömlun, þar sem hömlun á útdrættinum sem framleidd er með PEF (96,8 prósent) og samsetningin af PEF plús HW (97,3 prósent) var meiri en hömlunin sem framleidd er með hefðbundinni heitvatnsaðferð 93,4 prósent) (p < 0,05).="" allir="" p.="" palmaria="" útdrættir="" sýndu="" svipaða="" virkni="" (p="">< 0,05),="" hömlun="" á="" útdrætti="" sem="" framleidd="" er="" með="" pef="" var="" (91,9="" prósent)="" og="" samsetningin="" af="" pef="" plús="" hw="" (89,5="" prósent)="" og="" hefðbundinni="" heitavatnsaðferð="" (91,8="">

Aðrir höfundar lýstu einnig and-hýalúrónídasavirkni mismunandiþangs útdrætti,sérstaklega fyrir útdrætti ríkt af flórótannínum úr brúnþörungum [73,74]. Hins vegar, eftir því sem við best vitum, er þetta í fyrsta skipti sem tilkynnt hefur verið um hýalúrónídasa-hemjandi virkni P. palmat og U. lactuca útdrætti sem framleitt er af PEF.

Hýalúrónsýra er stór hluti af húðhúðinni, þar sem hún tekur þátt í viðgerð vefja, brotnar hún niður við öldrun, veldur hrukkum og tapi á stinnleika húðarinnar. Í þessum skilningi auka hýalúrónídasahemlar hýalúrónsýrumagn utanfrumuefnisins í húð til að bæta útlit öldrunar andlitshúðarinnar [13]. Þess vegna gætu niðurstöður þessarar rannsóknar opnað nýjar leiðir til að nýta náttúrulega hýalúrónidaseinhemla úr þörungaauðlindum með hugsanlegri notkun í snyrtivörur.

Í stuttu máli gerðu gögnin sem safnað var okkur kleift að álykta að A. esculenta útdrættir sýndu almennt betri hamlandi virkni en P. palmaria og U. lactuca gagnvart ensímprófuðu. Þar af leiðandi er hún efnilegasta þangtegundin með framúrskarandi and-ensímvirkni og því var hún valin til frekari rannsókna á rannsóknarstofu okkar. Þrátt fyrir að hráefni úr A. esculenta virðist vera góðir möguleikar á in vitro tilraunum, þarf að gera frekari rannsóknir til að skýra auðkenni umbrotsefnanna sem bera ábyrgð á þessum líffræðilegu áhrifum.

cistanche þykkni: andoxun

2.6. Fylgni milli efnasambanda og lífvirkra eiginleika

Niðurstöður úr aðalþáttagreiningu (PCA) sýndu að aðal aðskilnaður hópanna var skilgreindur af PC1 og PC2, sem voru 71,9 prósent af og 14,5 prósent af dreifni í gögnunum, í sömu röð (Mynd 2). A. esculenta útdrættirnir einkenndust af hærra innihaldi flavonoids og fenólefnasambanda, hamlandi áhrifum á ensím (kollagenasa, tyrosinasa og elastasa) og DPPH og FRAP gildum en á hinum tegundunum,P. palmata og U. lactuca. Á hinn bóginn hafði A. esculenta lægra kolvetnainnihald, sérstaklega miðað við P. palmata (sem var staðsett á gagnstæða hlið PC1). Breytingin á gögnum meðfram PC2 tengdist aðallega ABTS og hýalúrónídasa hömlun. Eins og staðsetningin á lóðinni gefur til kynna hafði P. palmata sterkari fylgni við ABTS á meðan U. lactuca var skyldari hömlunaráhrifum hýalúrónídasa, í samanburði á þessum tveimur tegundum.

Mikil og marktæk jákvæð fylgni milli TPC, TFC, DPPH, FRAP og hamlandi áhrifa á kollagenasa, elastasa ogtýrósínasavar sýnt fram á með Pearsonfylgnigreiningu (tafla 5).

Þetta var í samræmi við fyrri rannsóknir, þar sem greint var frá því að fenólsambönd (þar á meðal flavonoids) eru aðal þátttakendur í andoxunarvirkni ýmissaþang[75–77]. Mikil andoxunarvirkni útdráttar úr brúnum stórþörungum hefur verið tengd sérstökum hópi fjölfenóla, flórótaníns og einstakrar sameindabyggingar þeirra. Talið er að phlorotannis úr brúnþörungum hafi allt að átta samtengda fenólhringa sem virka sem rafeindagildrur [78,79]. Búist var við að ABT myndi tengjast TPC,otherandoxunarefnibreytur. Hugsanlegar ástæður gætu verið þær að aðferðirnar byggjast á mismunandi hvarfskilyrðum og að hvarfgirni sé mismunandi bæði með tilliti til tíma og sviðs efnisþátta. Til dæmis bregst ABTS hvarfefnið við breiðari svið afandoxunarefnistaðan DPPH róttæklinginn [80]. Á hinn bóginn er ein af takmörkunum sem nefnd eru fyrir ABTS löng viðbrögð og almennur viðbragðstími getur ekki gert það kleift að ná endapunkti.

Niðurstöðurnar benda til þess að það sé mikil jákvæð fylgni TPC og TFC við hamlandi virkni kollagenasa, elastasa og tyrosinasa ({{0}}.93–0.99), en tengslin við hömlun af hýalúrónídasa var ekki eins sterkt (r=0.42 og 0.54, í sömu röð). Þetta bendir til þess að aðrir þættir gætu hafa stuðlað að hamlandi áhrifum útdrættanna. Aðrar rannsóknir hafa greint frá því að fjölsykrur hafi hýalúrónídasa-hamlandi virkni, til dæmis algínsýra í brúnþörungum [81,82]. Frekari rannsóknir á efnasamsetningu stórþörungategunda fyrir áhrif einangraðra efnasambanda á ensím eru nauðsynlegar til að meta framlag hvers efnaþáttar þar sem í þessari rannsókn var lögð áhersla á hráþykkni.

Niðurstöðurnar voru í samræmi við fyrri rannsóknir, þar sem fram kemur að efnasamsetning og lífvirkni útdrættanna er verulega breytileg á milli ættanna þriggja (rauða, græna og brúna þörunganna) og milli mismunandi tegunda sem tilheyra sömu flokki eru undir áhrifum af aldri og vefjum. tegund. Ennfremur er samsetning og eiginleikar háð mörgum umhverfisþáttum sem hafa áhrif á útbreiðslu og vöxt stórþörunga. Til dæmis ljós (UV-geislun), hitastig, aðgengi að næringarefnum, útsetning fyrir lofti, hreyfingu vatns, ölduáhrif og selta. Hitastiginu hefur verið lýst sem þættinum sem hefur sterkustu áhrifin á litarefnamyndun og næringarefnastyrk, seltu og UV geislun sem þættirnir sem hafa áhrif á styrk TPC [83].

Dreifing mismunandi stórþörungategunda er mismunandi eftir vatnsdýpi. Staðsetning ofar í fjörunni í sjávarfalla- eða strandbeltinu er meira streituvaldandi þar sem tegundirnar sem þar vaxa þurfa að þola margþættar breytingar á ólífrænum þáttum vegna sjávarfallabreytinga. Til dæmis þurrkandi áhrif lofts, mikil sólargeislun (við fjöru), breytingar á seltu og hitastigi og, við lágan lofthita, þar með talið frost. Fyrir neðan lágvatnsmerkið veldur aukið dýpi mjög hröð lækkun ljósstyrks og minni útsetningu fyrir geislun.

Þörungar sem vaxa í sjávarfallasviðinu hafa minna næmi fyrir útfjólubláum geislum og jafna sig hratt eftir sólarálag. Þar sem þörungar sem vaxa á sublitoral svæðinu eru næmari fyrir útfjólubláum geislum og hafa minni bata frá sólarálagi [84]. Á sama tíma veitir vatnssúlan vernd. Í þessari rannsókn var útsetning fyrir sólarljósi væntanlega meiri fyrir P. palmata, samanborið við aðrar tegundir. Aðrar rannsóknir hafa sýnt að myndun MAA er beintengd sólarljósi [85], sem verndar lífverurnar gegn UV-A og UV-B geislun. Ennfremur var sýnt fram á að sértækt magn MAA minnkaði með aukinni söfnunardýpt. Þarar eins og A. esculenta eru þekktir fyrir að vaxa á efra sublitoral svæðinu en ná einnig inn í neðsta sjávarfallið rétt fyrir ofan lágvatnsmerkið. Sem þýðir að vatnssúlan veitti sterkari vernd en fyrir P. palmata. Að auki eru formfræðileg einkenni mismunandi, blöð A. esculenta eru þykkari miðað við hinar tvær tegundirnar. U. lactuca, sem vex aðallega í intertidaland sublittoral, er fær um að ljóstillífa og vaxa við mjög lága geislun. Útsetning fyrir UVB ljósi hefur verið lýst til að flýta fyrir endurheimt ljóstillífunarþátta U. lactuca frá neikvæðum áhrifum UVA ljóss. Hann er minni, einfaldari í uppbyggingu og styttri líftíma (3 mánuðir) en bæði A. esculenta (5–7 ára) og P. palmata sem stækkar á hverju ári.

Í stuttu máli má draga þær forsendur að helsti munur á eiginleikum útdrættanna felist í breytileika í líftíma, formfræðilegum eiginleikum og vaxtarskilyrðum þörungategundanna.

3. Efni og aðferðir

3.1. Efni

íslenskurþangs U. lactuca (grænþörungar), A. esculenta (brúnþörungar) og P. palmata (rauðþörungar) voru veitt af Íslenskum blákræklingi ogÞang, sem veiddi þang í Breiðafirði (Vesturlandi). Eftir uppskeru var þangið þurrkað (í u.þ.b. 90 prósent þurrt efni), malað og afhent lofttæmd. Sýnin voru geymd á þurrum og dimmum stað við stofuhita þar til þau eru notuð.

Týrósínasiúr sveppum, L-3,4-díhýdroxýfenýlalaníni (L-DOPA), elastasa úr brisi úr svínum, askorbínsýra, N-súkkínýl-Ala-Ala-Ala-p-nítróanílíð (AAAPVN), hýalúrónídasa úr eistum nautgripa , quercetin, -tókóferól, tannínsýra, 2,2-dífenýl-1-píkrýlhýdrasýl (DPPH), 2,4,6-trípýridýl-s-tríasín (TPTZ), Trolox, Folin-Ciocalteu hvarfefni, gallsýra og litamælingarsett fyrir kollagenasavirkni (MAK293) voru keypt frá Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, Bandaríkjunum). Hýalúrónsýrunatríumsalt var keypt frá MakingCosmetics (Redmond, WA, Bandaríkjunum). Öll önnur efni og hvarfefni sem notuð voru voru greiningargráðu og fengin frá VWR International, LLC. Afjónað vatn (Elix® Essential,Merck, Darmstadt, Þýskalandi) var notað til útdráttar og undirbúnings vatnslausna.

3.2. Tilraunahönnun

Stuðningshönnun var notuð til að meta áhrif íslenskra þangtegunda (U. lactuca, A. esculenta, P. palmata) og útdráttarmeðferð (heitavatnsvinnsla (HW, 95 ◦C)), PEF-aðstoðarvinnsla (PEF) og samsetning beggja. tækni (PEF plús HW), um samsetningu útdráttar og lífvirkni (tafla 6). Útdrátturinn var gerður í þríriti fyrir hvern hóp og hvert útdráttarafrit var greint í þríriti.

3.3. Vinnsla lífvirkra efna úr íslensku þangi

Nýting á lífmassa stórþörunga á mismunandi stigum hefur hvatt vísindamenn til að kanna umhverfisvænni, skilvirkari og hagkvæmari útdráttaraðferðir, byggðar á grænum útdráttaraðferðum. Í þessari vinnu var útdráttur með aðstoð PEF metinn sem nýsköpunargræn aðferð til að framleiða hagnýt útdrætti, en hefðbundinn heitavatnsútdráttur var notaður til samanburðar. Ennfremur voru áhrif samsetningar beggja aðferða, PEF-meðferð á stórþörungum fylgt eftir með hefðbundnum heitavatnsútdrætti, á lífvirka endurheimt rannsökuð. Vegna væntanlegrar rafskauts sem myndast í frumuhimnum eftir eðlisfræðilega meðhöndlun gæti eftirfarandi útdráttur með heitu vatni auðveldað losun innanfrumuefnisins [86], aukið útdráttarafraksturinn. Tíma eftir meðferð þarf fyrir efnin að dreifast út úr frumunum [87,88] og í þessari tilraun biðu sviflausnirnar yfir nótt þar til vökvinn (útdrátturinn) skildi sig úr deiginu.

Varðandi útdráttarmiðil var eimað vatn notað til að framleiðaþangútdrætti til að sigrast á takmörkunum varðandi notkun eiturefna og lífrænna leysiefna. Vatn reyndist vera góður leysir til útdráttar nokkurra lífvirkra efnasambanda úrþangs [46,89–91] og er umhverfisvæn. Að auki er vatn almennt notað til útdráttar með PEF aðstoð þar sem það er góður leiðari fyrir rafmagn.

3.3.1. Útdráttaraðferðir

Fyrir hverja endurtekningu í hverjum hópi,þangs (15 g) voru lögð í bleyti yfir nótt við stofuhita (22 ◦C) í afjónuðu vatni (300 ml). Síðan var sviflausnin meðhöndluð með PEF (PEF), hituð (HW) eða bæði PEF-meðhöndluð og hituð (PEF plús HW). Sviflausnirnar voru geymdar yfir nótt í kæli og fylgt eftir með síun með grófum (20 µm) síupappír. Síðan voru síuvökvanir (útdrættirnir) geymdir við 4 ◦C þar til þau voru greind.

Útdrátturinn með púls rafsviði var framkvæmdur með því að nota innbyggðan púlsrafall. Hann var með FuGHCK-200-2000 þétta (FuG Elektronik GmbH, Rosenheim, Þýskalandi) og neistabil (18,5 kV OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Wiese Baden, Þýskalandi). PEF búnaðurinn myndaði veldisfallspúlsa með breidd 0.96 µs og amplitude 18 kV. Meðhöndlunarhólf með plexígleri með stærðinni (L × H × B) 20 × 8 × 2,5 cm, þar sem stysta fjarlægðin er á milli plöturafskautanna, var notað til að meðhöndla sviflausnirnar með 8 kV/cm rafsviði við 1,2 Hz í 10 mínútur.

HW-útdrættirnir voru útbúnir með því að hita sviflausnina í bikarglasi í hitastilltu vatnsbaði og haldið við 95 ◦C í 45 mín. Fyrir sameinað púlsað rafsvið og hitameðferð voru sviflausnir PEF-meðhöndlaðar og síðan settar í bikarglas, hitaðar í vatnsbaði og haldið við 95 ◦C í 45 mín.

3.3.2. Mælingar á leiðni, pH og hitastigi

Rafleiðni og pH þangsviflausna voru mæld eftir bleyti og eftir útdráttarmeðferðir, við stofuhita, með því að nota pH-mæli (OrionStar™ A215 pH/Conductivity Benchtop Meter, Thermo Scientific, Waltham, MA, Bandaríkjunum) búinn leiðniskynjara og pH/ARC þríóða samsett rafskaut. Ennfremur voru skráðar hitabreytingar vegna meðferða.

3.4. Litrófssnið af þangseyði

UV-VIS frásogsróf mismunandi þangseyði voru mæld á bilinu 200 til 450 nm með því að nota tvöfaldan geisla Thermo Scientific Evolution 350 UV Vis litrófsmæli (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, Bandaríkjunum) með 1 cm kvarskúvettum. Þrjár skannanir voru gerðar fyrir hvern þangseyði.

3.5. Ákvörðun á heildarfjölfenólinnihaldi

Heildarfenólinnihald (TPC) íþangútdrættir voru ákvarðaðir með því að nota Folin-Ciocalteu hvarfefni eftir örlítið breyttri aðferð sem lýst er af Zhang [92] með því að nota aMultiskan Sky Microplate litrófsmæli (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). Rúmmál 20 µL afþangútdrætti eða staðallausn í röð var blandað saman við 100 µL af Folin-Ciocalteu hvarfefni (10 prósent í eimuðu vatni). Eftir 5 mínútur var 80 µL af 7,5% (v/w) natríumkarbónatlausn bætt við. Hvarfblandan var ræktuð við stofuhita og myrkur í 30 mín. Frásog var mæld við bylgjulengdina 760 nm. Eimað vatn var notað sem tómt. Stöðluð ferill gallsýru var notaður til að ákvarða heildarfenólinnihald og gefið upp sem µg af gallínsýrujafngildum (GAE) á hvert gramm af þurru efni (µg GAE/g dw).

3.6. Ákvörðun á heildarflavonoid innihaldi

Heildarflavonoid innihald (TFC) íþangútdrættir voru ákvarðaðir með aðferðinni sem lýst er af Kamtekar [93] og aðlöguð að 96-brunn örplötum. Í stuttu máli var rúmmáli af 25 µLof þangseyði eða raðstöðluðu lausn blandað saman við 100 µL af natríumnítríti (0,375 prósent w/v). Eftir 5 mínútur var 25 µL af álklóríði (3 prósent w/v) bætt við blönduna og ræktuð í 6 mínútur við stofuhita. Síðan var 100 µL af natríumhýdroxíði (2 prósent w/v) bætt við blönduna og blandað. Strax var gleypni mæld við bylgjulengdina 510 nm. Eimað vatn og etanól voru notaðir sem eyðurnar. Staðlað ferill quercetins (leyst upp í etanóli) var notaður til að ákvarða heildarfenólinnihald og gefið upp sem µg af quercetin jafngildum (QE) á hvert gramm af þurru efni (µg QE/g dw).

3.7. Ákvörðun á kolvetnainnihaldi

Innihald óbundinna sykurs var mælt samkvæmt aðferðinni sem lýst er af [94], með smávægilegum breytingum. 50 µL af fenóllausn (4 prósent) og 250 µL af brennisteinssýru (96 prósent) var bætt við 100 µL af sýni eða staðlaða lausn. Eftir 10 mín af ræktun við stofuhita var gleypni blöndunnar lesin við 490 nm. Staðlað ferill glúkósa var notaður til að ákvarða heildarkolvetnainnihald og gefið upp sem mg af glúkósajafngildum (GluE) á hvert gramm af þurru efni (mg GluE/g dw).

3.8. Andoxunareiginleikar þangseyði

3.8.1. 2,2 Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) Free Radical Scavenging próf

Theandoxunarefnivirkni (DPPH) afþangútdrættir voru ákvarðaðir í samræmi við áður lýst aðferðafræði [94] með nokkrum breytingum. Í stuttu máli var 200 µL af 10,825 × 10-5 M DPPH lausn bætt við 100 µL af sýninu (1:1 í metanóli) í 96-brunnsplötu. Sama rúmmáli DPPH var blandað saman við 50 µL staðal auk 50 µL metanóls. Síðan voru sýnin og staðallinn ræktaður á dimmum stað við stofuhita í 30 mínútur. Gleypið var mælt við bylgjulengdina 517 nm. Eimað vatn var notað sem eyðublað. Hæfni til að hreinsa DPPH róttækan var reiknuð út með því að nota eftirfarandi jöfnu:

Hreinsunaráhrif ( prósent )=(1 − (A sýni − A sýni núll)/(A viðmiðun − Amanól núll)) × 100 (1)

þar sem Acontrol er gleypni samanburðar (DPPH lausn án sýnis), A sýni er gleypni prófunarsýnis (DPPH lausn auk prófunarsýnis), A sýni núll er gleypni sýnis eingöngu (sýni án DPPH lausn) og Amethanol blank er aðeins gleypni metanóls. Auglýsingandoxunarefnis (askorbínsýra, gallsýra og -tókóferól) voru notuð sem jákvæð viðmið.

cistanche eru andoxunarefni

3.8.2. Ferric Ion Reducing Andoxidant Power (FRAP) próf

FRAP virkni var mæld samkvæmt aðferð Benzie og Strain [95]. Í stuttu máli var asetatbuffi (300 mM, pH 3,6), 2,4,6-trípýridýl-s-tríazín (TPTZ) 10 mM í 40 mM HCl, og FeCl3·6H2O (20 mM) blandað í hlutfallinu af 10:1:1 til að fá virka FRAPreagent. Hvarfblandan var ræktuð við 37 ◦C í 10 mín. 50 µL sýni úr hverjum útdrætti var blandað saman við 150 µL af virka FRAP lausn í 8 mínútur við stofuhita. Gleypni litaðrar vöru, Ferrous-TPTZ, var mæld við bylgjulengdina 593 nm. FRAP gildi áþangs útdrættir voru gefnir upp sem µM af trolox jafngildum (TE) á hvert gramm af þurru efni.

3.8.3. 2,2 Azínó-bis(3-etýlbensóþíasólín-6-súlfónsýra) (ABTS) próf

Greiningin var framkvæmd með því að nota ABTS aflitunaraðferðina [76] með nokkrum breytingum. ABTS róttæk katjón (ABTS. plús) var framleidd með því að hvarfa ABTS (66 mg) við 10 mL af kalíumpersúlfatlausn (2,45 mM). Blandan var látin standa í myrkri við stofuhita í 12–16 klst fyrir notkun. ABTS. plús lausnin var þynnt með vatni í gleypni upp á 0,700 við 734 nm. Hvarfblandan (200 µl) var flutt yfir á amíkróplötu, 50 µL af sýninu var bætt við og síðan 150 µL af hvarfefnislausninni. Platan var hrist í 10 s á miðlungshraða og gleypni var mæld við 734 nm eftir 5 mín ræktun við stofuhita. Staðlað ferill var útbúinn með því að plotta hömlun á A734nm af Trolox stöðlum sem fall af styrk þeirra. The Troloxequivalentandoxunarefniafkastagetu (TEAC) gildi sýnanna var reiknað út með því að nota jöfnuna sem fengin var með línulegri aðhvarf staðalferilsins í stað A734nmgilda fyrir hvert sýni:

TEAC (µM)=(sýnishömlun A734nm - skurðpunktur)/halli (2)

Theandoxunarefnivirkni var gefin upp sem TEAC styrkur, µmól/g þurrvigt þörunga.

3.9. And-ensímvirkni þangseyði

3.9.1. Kollagenasa hindrunarpróf

Kollagenasavirkni litamælingasett (MAK293), keypt af Sigma Aldrich, var notað til að ákvarða kollagenasa hömlun áþangútdrætti. Settið mældi kollagenasavirkni með því að nota tilbúið peptíð (FALGPA) sem líkir eftir uppbyggingu kollagensins. Aðferðin var framkvæmd samkvæmt leiðbeiningum settsins.

3.9.2. Elastasa hindrunarpróf

Elastasa hömlun áþangs útdrætti var rannsakað í TRIS jafnalausn með breyttri aðferð eins og lýst var áðan [96]. Í stuttu máli var 100 µL af 0,1 M TRIS jafnalausn (pH 8,0), 25 µL af elastasa (1 U/mL í TRIS jafnalausn) og 25 µL sýnisþykkni blandað saman og ræktað í 15 mínútur kl. 30 C áður en hvarfefnið er bætt við til að hefja hvarfið. Eftir ræktunartíma var 50 µL af 2 mM AAAPVN lausn bætt við. Síðan var gleypni við 420 nm fylgst með í 20 mínútur með því að nota örplötulesara við stöðugt hitastig 30 C. Að lokum var elastasahömlun reiknuð í prósentum með því að nota jöfnuna:

prósenta hömlun=[(∆Abs/mín stjórn − ∆Abs/mín sýni)/∆Abs/mínstýring] × 100 (3)

þar sem Abscontrol er gleypni greiningar sem notar biðminni í stað hemils (sýnis) og Abs sýni er gleypni sýnisútdráttanna. Quercetin var notað sem jákvæð viðmiðun. TRIS biðminni var notaður sem auður.

áhrif afcistanche þykkni:gegn öldrun

3.9.3. Týrósínasa hindrunarpróf

Týrósínasihamlandi prófun var framkvæmd samkvæmt aðferðinni sem áður var lýst af [66] með því að nota L-DOPA sem hvarfefni. 20 µL af sýninu, 10 µL af sveppumtýrósínasalausn (50 U/mL í fosfatbuffi) og 80 µL af fosfatbuffi (pH=6.8) var blandað í örplötu og forræktað við 37 ◦C í 5 mín. Síðan var 90 µL af L-DOPA (2 mg/ml) bætt við. Myndun dópakróms var strax fylgst með í 20 mínútur við 475 nm í örplötulesara við stöðugt hitastig 37 ◦C. Prósentahömlun átýrósínasaensím var reiknað út með jöfnunni:

prósenta hömlun=[(∆Abs/mínstjórn − ∆Abs/mín. sýni)/∆Abs/mínstýring] × 100 (4)

þar sem Abs-stýring er gleypni greiningar sem notar biðminni í stað hemils (sýnis) og Abs-sýni er gleypni sýnisútdráttanna. Quercetin var notað sem jákvæð viðmiðun. Fosfatbuffi var notaður sem auður.

3.9.4. Hýalúrónídasa hindrunarpróf

Hýalúrónídasa hindrandi virkni var mæld eins og áður hefur verið lýst með [66] fáum breytingum. Rúmmál 100 µl af gerð-1-S bovine eistum hýalúrónídasa (2100 U/mL) uppleyst í 0. 1 M asetatbuffi (pH 3,5) var blandað saman við 100 µL af útdrætti og ræktað við 37 ◦C í 20 mínútur. Rúmmáli 200 µL af 6 mM af kalsíumklóríði var bætt við efnablönduna og síðan var blandan ræktuð við 37 ◦C í 20 mínútur. Þessi Ca2 plús virkjaði hýalúrónídasi var meðhöndlaður með 250 µL af natríumhýalúrónati (1,2 mg/ml) uppleyst í 0,1 M asetatbuffi (pH 3,5), og síðan ræktaður í vatnsbaði við 37 ◦C í 40 mínútur. 50 µL af 0,9 M natríumhýdroxíði og 100 µL af 0,2 M natríumbórati var bætt við hvarfblönduna og síðan ræktuð í sjóðandi vatnsbaði í 5 mín. Eftir kælingu í stofuhita var 250 µL af p-dímetýlamínóbensaldehýð (DAMB) lausn bætt við hvarfblönduna. DAMB lausnin var útbúin með því að leysa upp 0,25 g af DAMB í 21,88 ml af 100 prósent ediksýru og 3,12 ml af 10N saltsýru. Samanburðarhópurinn var meðhöndlaður með 100 µL af 5 prósent af vatni í stað útdráttar. Gleypið var mæld við bylgjulengdina 585 nm eftir 45 mín. Prósenta ensímhömlun var reiknuð út með því að nota eftirfarandi jöfnu:

prósenta hömlun=[(frávik − frádráttur)/frávik] × 100 (5)

þar sem Abs-stýring er gleypni greiningar sem notar biðminni í stað hemils (sýnis) og Abs-sýni er gleypni sýnisútdráttanna. Tannínsýra er notuð sem viðmiðunarstaðall.

3.10. Tölfræðigreining

Meðaltal þreföldu greiningar hvers útdráttar var reiknað út og notað til að finna meðalgildi og staðalfrávik fyrir hvern hóp (n {{0}}). Almenn línuleg líkön (GLM) fyrir fasta þætti voru notuð til að meta helstu áhrif og tvíhliða víxlverkun tilraunaþátta (tegunda og útdráttaraðferða) á mældar breytur. Ennfremur var ANOVA og Tukey–Kramer prófið notað til að greina marktækan (p < 0,05)="" mun="" á="" milli="" hópanna.="" pearson="" fylgni="" var="" notuð="" til="" að="" meta="" línuleg="" tengsl="" milli="" breytanna.="" aðalþáttagreining="" (pca)="" var="" notuð="" til="" að="" greina="" uppbyggingu="" í="" tengslum="" milli="" mældra="" breyta="" og="" tilraunaþátta.="" thepca="" dregur="" úr="" fyrirferðarmiklum="" gögnum="" í="" lítið="" safn="" af="" línulegum="" samsetningum="" tengdra="" breyta="" (þ.e.="" þáttum)="" byggðar="" á="" fylgnimynstri="" meðal="" upprunalegu="" breytanna.="" hægt="" er="" að="" nota="" línueiginleikasamsetningarnar="" sem="" myndast="" til="" að="" útskýra="" tiltekna="" vörueiginleika="" út="" frá="" breytunum="" sem="" rannsakaðar="" voru.="" allar="" tölfræðilegar="" greiningar="" voru="" gerðar="" með="" því="" að="" nota="" ncss="" 2020="" statisticalsoftware="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" kaysville,="" ut,="">

cistanche þykkni gegn öldrun

4. Niðurstöður

Niðurstöður þessarar fyrstu skimunartilraunar sýndu möguleika þriggja íslenskraþangtegundir með því að veita áhrifarík jákvæð áhrif í gegnum nokkrar leiðir. Græna aðferðin sem þróuð var með því að nota vatnskenndan púlsað rafmagnssvið sýndi svipaðar niðurstöður og hefðbundin heitavatnsvinnsla, sýndi nokkra kosti eins og ekki hitauppstreymi og styttri útdráttartíma (10 mín á móti 45 mín). Meðal þörungategundanna þriggja sýndi brúnni stórþörungurinn A. esculenta hæsta innihald TPC og TFC og sýndi einnig mestandoxunarefnihæfileikar Þar að auki sýndu A. esculenta vatnsútdrættir betri hamlandi virkni en P. palmaria og U. lactuca gagnvart kollagenasa, elastasi, tyrosinasa og hýalúrónídasa sem lofuðu mest.þangtegundir með framúrskarandi and-ensímvirkni til notkunar í húðhvíttun,gegn öldrunog heilsu húðarinnar. Athyglisvert er að A. esculenta útdrættir framleiddir með PEF aðferð sýndu kollagenasa hömlun upp á 91 prósent, meiri en hömlunarvirkni sem sýnd er með hefðbundnum heitavatnsútdrætti og jafnvel hærri en hemillinn sem verslunarsettið gefur. Að endingu bendir frumathugun okkar til þess að íslenskaþang-undirstaða útdrætti, sérstaklega útdrættir úr brúnþörungum A. esculenta, framleiddir með vatnskenndri útdrætti með rafsviðum sem aðstoða við útdrátt eru hugsanleg virk innihaldsefni sem gætu nýst sem virk efnasambönd fyrir snyrtivörur og snyrtivörur í náinni framtíð.

Heimildir

1. Ariede, MB; Candido, TM; Jacome, ALM; Velasco, MVR; de Carvalho, JCM; Baby, AR Snyrtifræðilegir eiginleikar þörunga—Areview. Algal Res. 2017, 25, 483–487. [Krossvísun]

2. Makkar, HPS; Tran, G.; Heuzé, V.; Giger-Reverdin, S.; Lessire, M.; Lebas, F.; Ankers, P. Seaweeds for livestock diets: A review.Anim. Feed Sci. Tækni. 2016, 212, 1–17. [Krossvísun]

3. O'Connor, J.; Meaney, S.; Williams, GA; Hayes, M. Útdráttur á próteini úr fjórum mismunandi þangi með því að nota þrjár mismunandi líkamlegar formeðferðaraðferðir. Sameindir 2020, 25, 2005. [CrossRef]

4. Máximo, P.; Ferreira, LM; Branco, P.; Lima, P.; Lourenço, A. Secondary Umbrotsefni og líffræðileg virkni ífarandi stórþörunga í Suður-Evrópu. Mar. Drugs 2018, 16, 265. [CrossRef]

5. Barkia, I.; Saari, N.; Manning, SR Örþörungar fyrir hágæða vörur í átt að heilsu manna og næringu. Mar. Drugs 2019,17, 304. [CrossRef]

6. Gomez-Zavaglia, A.; Prieto Lage, MA; Jimenez-Lopez, C.; Mejuto, JC; Simal-Gandara, J. Möguleiki þangs sem uppspretta hagnýtra innihaldsefna af forlíffræðilegum og andoxunarefnum. Andoxunarefni 2019, 8, 406. [CrossRef] [PubMed]

7. Salehi, B.; Sharifi-Rad, J.; Seca, AML; Pinto, DCGA; Michalak, I.; Trincone, A.; Mishra, AP; Nigam, M.; Zam, W.; Martins, N. Núverandi þróun á þangi: Að skoða efnasamsetningu, jurtalyfjafræði og snyrtivörur. Molecules2019, 24, 4182. [CrossRef]

8. Ghazali, E.; Bráðum, PC; Mutum, DS; Nguyen, B. Heilsa og snyrtivörur: Að rannsaka gildi neytenda til að kaupa lífrænar persónulegar umhirðuvörur. J. Smásala. Neyta. Serv. 2017, 39, 154–163. [Krossvísun]

9. Amberg, N.; Fogarassy, ​​C. Græn neytendahegðun á snyrtivörumarkaði. Tilföng 2019, 8, 137. [Krossvísun]

10. Pereira, L. Þang sem uppspretta lífvirkra efna og húðumhirðumeðferð—snyrtivörur, algotherapía og thalassotherapy. Snyrtivörur 2018, 5, 68. [CrossRef]

11. Martins, A.; Vieira, H.; Gaspar, H.; Santos, S. Markaðssettar sjávarnáttúruvörur í lyfja- og snyrtivöruiðnaði: Ábendingar til að ná árangri. Mar Drugs 2014, 12, 1066-1101. [CrossRef] [PubMed]

12. Agatonovic-Kustrin, S.; Morton, D. Cosmeceuticals unnin úr lífvirkum efnum sem finnast í sjávarþörungum. Haffræði 2013,1, 106.

13. Wang, H.-MD; Chen, C.-C.; Huynh, P.; Chang, J.-S. Kanna möguleika þess að nota þörunga í snyrtivörur. Bioresour. Tækni. 2015,184, 355–362. [Krossvísun]

14. Jahan, A.; Ahmad, IZ; Fatima, N.; Ansari, VA; Akhtar, J. Algal lífvirk efnasambönd í snyrtivöruiðnaði: A review.Phycologia 2017, 56, 410–422. [Krossvísun]

15. Morone, J.; Alfeus, A.; Vasconcelos, V.; Martins, R. Afhjúpa möguleika blábaktería í snyrtivörum og snyrtivörum - Ný lífvirk nálgun. Algal Res. 2019, 41, 101541. [Krossvísun]

16. Cikoš, A.-M.; Jerkovi´c, I.; Molnar, M.; Šubari´c, D.; Joki´c, S. Nýjar straumar fyrir notkun stórþörunga á náttúruvörum. Nat. Prod.Res. 2019, 37, 1–12. [Krossvísun]

17. Þringur, TS; Hili, P.; Naughton, DP And-kollagenasa, and-elastasa og andoxunarvirkni útdráttar úr 21 plöntu. BMCComplement. Varamaður. Med. 2009, 9, 27. [Krossvísun]

18. Jacobsen, C.; Sørensen, AM; Holdt, SL; Akoh, CC; Hermund, DB Heimild, útdráttur, einkenni og notkun nýrra andoxunarefna úr þangi. Annu. Séra Food Sci. Tækni. 2019, 10, 541–568. [Krossvísun]

19. Castejón, N.; Señoráns, FJ Samtímis útdráttur og skipting ómega-3 asýlglýseróla og glýkólípíða úr blautum örþörungalífmassa af Nannochloropsis gaditana með því að nota vökva undir þrýstingi. Algal Res. 2019, 37, 74–82. [Krossvísun]

20. Mohamed, MEA; Eissa, AHA Púlsað rafsvið fyrir matvælavinnslutækni. Uppbygging. Virka. Food Eng. 2012, 11, 275–306.

21. Geada, P.; Rodrigues, R.; Loureiro, L.; Pereira, R.; Fernandes, B.; Teixeira, JA; Vasconcelos, V.; Vicente, AA Raftækni sem er beitt við örþörungalíftækni - Notkun, tækni og framtíðarþróun. Endurnýja. Halda uppi. Energy Rev. 2018, 94, 656–668.[CrossRef]

22. Poojary, MM; Barba, FJ; Aliakbarian, B.; Donsì, F.; Pataro, G.; Dias, DA; Juliano, P. Nýstárleg önnur tækni til að vinna karótenóíð úr örþörungum og þörungum. Mar. Drugs 2016, 14, 214. [CrossRef] [PubMed]

23. Vorobiev, E.; Lebovka, N. 2—Útdráttur úr matvælum og lífefnum aukið með púlsdrifinni raforku. Í nýstárlegri matvælavinnslutækni; Knoerzer, K., Juliano, P., Smithers, G., Ritstj.; Woodhead Publishing: Sawston, Bretlandi, 2016; bls. 31–56.

24. Käferböck, A.; Smetana, S.; de Vos, R.; Schwarz, C.; Toepfl, S.; Parniakov, O. Sjálfbær útdráttur á verðmætum íhlutum úr Spirulina með aðstoð rafsviðatækni. Algal Res. 2020, 48, 101914. [Krossvísun]

25. Parniakov, O.; Barba, FJ; Grími, N.; Marchal, L.; Jubeau, S.; Lebovka, N.; Vorobiev, E. Púlsað rafsviðsaðstoð útdráttur á næringarverðmætum efnasamböndum úr örþörungum Nannochloropsis spp. með því að nota tvöfalda blöndu lífrænna leysiefna og vatns.Innov. Matur Sci. Koma fram. Tækni. 2015, 27, 79–85. [Krossvísun]

26. Scherer, D.; Krust, D.; Frey, W.; Mueller, G.; Nick, P.; Gusbeth, C. Pulsed electric field (PEF)-aðstoðað prótein endurheimt frá ChlorellaVulgaris er miðlað af ensímferli eftir frumudauða. Algal Res. 2019, 41, 101536. [Krossvísun]

27. Naseri, A.; Marinho, GS; Holdt, SL; Bartela, JM; Jacobsen, C. Ensímstýrð útdráttur og einkenni próteins úr rauðþangi Palmaria palmitate. Algal Res. 2020, 47, 101849. [Krossvísun]

kross

28. Robin, A.; Kazir, M.; Sack, M.; Ísrael, A.; Frey, W.; Mueller, G.; Livney, YD; Golberg, A. Hagnýt próteinþykkni unnin úr Green Marine Macroalga Ulva sp., með High Voltage Pulsed Electric Fields og Mechanical Press. ACS Sustain. Chem. Eng.2018, 6, 13696–13705. [Krossvísun]

29. Einarsdóttir, R.; Þórarinsdóttir, KA; Aðalbjörnsson, BV; Guðmundsson, M.; Marteinsdóttir, G.; Kristbergsson, K. Áhrif púlsaðs rafsviðsstýrðrar meðferðarbreyta á hrávatnsútdrátt Laminaria digitata. J. Appl. Phycol. 2021, 33.3287–3296. [Krossvísun]

30. Postma, PR; Cerezo-Chinarro, O.; Akkerman, RJ; Olivieri, G.; Wijffels, RH; Brandenburg, WA; Eppink, MHM Lífhreinsunarstöð stórþörunganna Ulva Lactuca: Útdráttur próteina og kolvetna með vægri sundrun. J. Appl. Phycol. 2018, 30, 1281–1293.[CrossRef]

31. Zbinden, MDA; Sturm, BSM; Nord, RD; Carey, WJ; Moore, D.; Shinogle, H.; Stagg-Williams, SM Pulsed electric field (PEF) sem styrkjandi formeðferð fyrir grænni leysiefnislípíðútdrátt úr örþörungum. Líftækni. Bioeng. 2013, 110, 1605–1615.[CrossRef]

32. Silve, A.; Papachristou, I.; Wüstner, R.; Sträßner, R.; Schirmer, M.; Leber, K.; Guo, B.; Interrante, L.; Posten, C.; Frey, W. Útdráttur lípíða úr blautum örþörungum Auxenochlorella protothecoides með því að nota pulsed rafsviðsmeðferð og etanól-hexan blöndur. AlgalRes. 2018, 29, 212–222. [Krossvísun]

33. Chittapun, S.; Jonjaroen, V.; Khumrangsee, K.; Charoenrat, T. C-phycocyanin útdráttur úr tveimur ferskvatns blásýrubakteríum með frystingu-þíðingu og púls rafsviðstækni til að bæta útdráttar skilvirkni og hreinleika. Algal Res. 2020, 46, 101789. [Krossvísun]

34. Aryee, ANA; Agyei, D.; Akanbi, TO Endurheimt og nýting þanglitarefna í matvælavinnslu. Curr. Opin. Food Sci.2018, 19, 113–119. [Krossvísun]

35. Nowacka, M.; Tappi, S.; Wiktor, A.; Rybak, K.; Miszczykowska, A.; Czyzewski, J.; Drozdzal, K.; Witrowa-Rajchert, D.; Tylewicz, U. Áhrif Pulsed Electric Field á útdrátt lífvirkra efnasambanda úr rauðrófum. Matvæli 2019, 8, 244. [CrossRef]

36. Martinez, JM; Delso, C.; Álvarez, I.; Raso, J. Púlsað rafmagnssviðsaðstoð útdráttur á verðmætum efnasamböndum úr örverum. Skilja. Séra Food Sci. Matur Saf. 2020, 19, 530–552. [Krossvísun]

37. Pataro, G.; Goettel, M.; Straessner, R.; Gusbeth, C.; Ferrari, G.; Frey, W. Áhrif PEF meðferðar á útdrátt verðmætra efna úr örþörungum C. vulgaris. Chem. Eng. Trans. 2017, 57, 67–72.

38. Brunton, NP; Luengo, E. Pulsed Electric Fields for Extract of Secondary metabolites from Plants. Í púlsuðum rafsviðum til útdráttar aukaefnaskipta úr plöntum; Miklavcic, D., Ed.; Springer International Publishing: Cham, Sviss, 2017; bls. 1–15.

39. Schiener, P.; Svartur, KD; Stanley, MS; Green, DH Árstíðabundin breytileiki í efnasamsetningu þarategundannaLaminaria digitata, Laminaria hyperborea, Saccharina latissima og Alaria esculenta. J. Appl. Phycol. 2015, 27, 363–373. [Krossvísun]

40. Salgado, LT; Tomazetto, R.; Cinelli, LP; Farina, M.; Filho, GMA Áhrif brúnþörungaalgína á fenólefnasambönd getu frásogs útfjólubláa geislunar in vitro. Braz. J. Oceanogr. 2007, 55, 145–154. [Krossvísun]

41. Orfanoudaki, M.; Hartmann, A.; Karsten, U.; Ganzera, M. Efnafræðileg greining á mýkósporínlíkum amínósýrum í tuttugu og þrennum þörungategundum. J. Phycol. 2019, 55, 393–403. [Krossvísun]

42. Pangestuti, R.; Siahaan, EA; Kim, S.-K. Ljósverndandi efni unnin úr sjávarþörungum. Mar. Drugs 2018, 16, 399.[CrossRef] [PubMed]

43. Schneider, G.; Figueroa, FL; Vega, J.; Chaves, P.; Álvarez-Gómez, F.; Korbee, N.; Bonomi-Barufi, J. Ljósverndareiginleikar ljóstillífandi lífvera sjávar sem ræktaðir eru á svæðum með mikla útfjólubláa útsetningu: Snyrtivörur. Algal Res. 2020,49, 101956. [Krossvísun]

44. Nishida, Y.; Kumagai, Y.; Michiba, S.; Yasui, H.; Kishimura, H. Skilvirk útdráttur og andoxunargeta mýkósporínlíkra amínósýra frá rauðþörungi Dulse Palmaria palmitate í Japan. Mar. Drugs 2020, 18, 502. [CrossRef] [PubMed]

45. Rehm, E.; Dalgleish, F.; Huot, M.; Matteoli, S.; Archambault, P.; Lambert Girard, S.; Piché, M.; Lagunas-Morales, J. Samanburður á flúrljómandi og mismunandi frásog LiDAR tækni til að greina lífmassa þörunga með notkun á undirlagi á norðurslóðum. InOcean Sensing and Monitoring X; International Society for Optics and Photonics: Bellingham, WA, Bandaríkjunum, 2018; Bindi 10631, bls. 106310Z.

46. ​​Wang, T.; Jónsdóttir, R.; Ólafsdóttir, G. Heildarfenólsambönd, róttæk hreinsun og málmklóun útdrætti úr íslenskum þangi. Food Chem. 2009, 116, 240–248. [Krossvísun]

47. Bedoux, G.; Hardouin, K.; Burlot, AS; Bourgougnon, N. Tólfti kafli—lífvirkir þættir úr þangi: snyrtivörur og framtíðarþróun. Framfarir í grasarannsóknum; Bourgougnon, N., Ed.; Academic Press: Cambridge, MA, Bandaríkjunum, 2014; 71. bindi, bls. 345–378.

48. Roleda, MÍN; Marfaing, H.; Desnica, N.; Jónsdóttir, R.; Skjermo, J.; Rebours, C.; Nitschke, U. Afbrigði í innihaldi pólýfenóls og þungmálma í villtum uppskerum og ræktuðum þangsmassa lífmassa: Heilsuáhættumat og afleiðingar fyrir matvælanotkun. Matvælaeftirlit 2019, 95, 121–134. [Krossvísun]

49. Ummat, V.; Tiwari, BK; Jaiswal, AK; Condon, K.; Garcia-Vaquero, M.; O'Doherty, J.; O'Donnell, C.; Rajauria, G. Hagræðing á úthljóðstíðni, útdráttartíma og leysi til að endurheimta pólýfenól, flórótannín og tengd andoxunarvirkni úr brúnum þangi. Mar. Drugs 2020, 18, 250. [CrossRef]

50. Afonso, C.; Matos, J.; Guarda, I.; Gomes-Bispo, A.; Gomes, R.; Cardoso, C.; Gueifão, S.; Delgado, I.; Coelho, I.; Castanheira, I.; et al.Lífvirk og næringarfræðileg möguleiki Alaria esculenta og Saccharina latissima. J. Appl. Phycol. 2021, 33, 501–513. [Krossvísun]

51. Cotas, J.; Leandro, A.; Monteiro, P.; Pacheco, D.; Figueirinha, A.; Gonçalves, AMM; da Silva, GJ; Pereira, L. Þangfenólik: Frá útdrætti til notkunar. Mar. Drugs 2020, 18, 384. [CrossRef]

52. Farasat, M.; Khavari-Nejad, RA; Nabavi, SM; Namjooyan, F. Andoxunarvirkni, heildarfenól og flavonoid innihald sumra æta grænna þanga frá norðurströnd Persaflóa. IJPR 2014, 13, 163–170. [PubMed]

53. Manivannan, K.; Thirumaran, G.; Devi, GK; Anantharaman, P.; Balasubramanian, T. Nálæg samsetning mismunandi þangahópa frá strandvatni Vedalai (Mannarflóa): Suðausturströnd Indlands. Miðausturlönd J. Sci. Res. 2009, 4, 72–77.

54. Mišurcová, L.; Škrovánková, S.; Samek, D.; Ambrožová, J.; Mach ˚u, L. Kafli 3—Heilsuhagur af þörungapólýsykrum í mannlegri næringu. Framfarir í matvæla- og næringarrannsóknum; Henry, J., útg.; Academic Press: Cambridge, MA, Bandaríkjunum, 2012; 66. bindi, bls. 75–145.

55. Lafarga, T.; Acién-Fernández, FG; Garcia-Vaquero, M. Lífvirk peptíð og kolvetni úr þangi til notkunar í matvælum: Náttúrulegt atvik, einangrun, hreinsun og auðkenning. Algal Res. 2020, 48, 101909. [Krossvísun]

56. Mutripah, S.; Meinita, MDN; Kang, J.-Y.; Jeong, G.-T.; Susanto, AB; Prabowo, RE; Hong, Y.-K. Lífetanólframleiðsla úr vatnsrofinu af Palmaria palmata með brennisteinssýru og gerjun með bjórgeri. J. Appl. Phycol. 2014, 26, 687–693.[CrossRef]

57. Dominguez, H.; Loret, EP Ulva lactuca, A Source of Troubles and Potential Riches. Mar. Drugs 2019, 17, 357. [CrossRef]

58. Kidgell, JT; Magnússon, M.; de Nys, R.; Glasson, CRK Ulvan: Kerfisbundið yfirlit yfir útdrátt, samsetningu og virkni.Algal Res. 2019, 39, 101422. [Krossvísun]

59. Habeebullah, SFK; Alagarsamy, S.; Arnous, A.; Jacobsen, C. Ensímútdráttur andoxunarefna úr dönskum þörungum og einkenni virkra efna. Algal Res. 2021, 56, 102292. [Krossvísun]

60. Yuan, Y.; Zhang, J.; Fan, J.; Clark, J.; Shen, P.; Li, Y.; Zhang, C. Örbylgjuaðstoð útdráttur fenólefnasambanda úr fjórum efnahagslegum brúnum stórþörungum og mat á andoxunarvirkni þeirra og hamlandi áhrifum á -amýlasa, -glúkósíðasa, brislípasa og týrósínasa. Alþj. Food Res. J. 2018, 113, 288–297. [Krossvísun]

61. Balboa, EM; Conde, E.; Moure, A.; Falqué, E.; Domínguez, H. In vitro andoxunareiginleikar á hráum útdrætti og efnasamböndum úr brúnþörungum. Food Chem. 2013, 138, 1764–1785. [Krossvísun]

62. Kainama, H.; Fatmawati, S.; Santoso, M.; Papilaya, PM; Ersam, T. The Relationship of Free Radical Scavenging and Total Phenolicand Flavonoid Content of Garcinia lasoar PAM. Pharm. Chem. J. 2020, 53, 1151–1157. [Krossvísun]

63. Dang, TT; Van Vuong, Q.; Schreider, MJ; Bowyer, MC; Van Altena, ÍA; Scarlett, CJ Hagræðing á útdráttarskilyrðum með ómskoðun fyrir fenólinnihald og andoxunarvirkni þörungsins Hormosira banksii með því að nota yfirborðsaðferð við svörun. J. Appl. Phycol. 2017, 29, 3161–3173. [Krossvísun]

64. Couteau, C.; Coiffard, L. Kafli 14—Þanganotkun í snyrtivörum. Í þangi í heilsu og sjúkdómavörnum; Fleurence, J., Levine, I., Ritstj.; Academic Press: San Diego, CA, Bandaríkin, 2016; bls 423–441.

65. Tsukahara, K.; Takema, Y.; Moriwaki, S.; Tsuji, N.; Suzuki, Y.; Fujimura, T.; Imokawa, G. Selective inhibition of Skin FibroblastElastase kallar fram þéttniháða forvarnir gegn útfjólubláum B-framkölluðum hrukkum. J. Rannsókn. Dermatol. 2001,117, 671–677. [Krossvísun]

66. Liyanaarachchi, GD; Samarasekera, JKRR; Mahanama, KRR; Hemalal, KDP týrósínasi, elastasi, hýalúrónídasi, hamlandi og andoxunarvirkni Sri Lanka lækningajurta fyrir ný snyrtivörur. Ind. Crops Prod. 2018, 111, 597–605. [Krossvísun]

67. Gupta, PL; Rajput, M.; Oza, T.; Trivedi, U.; Sanghvi, G. Eminence of Microbial Products in Cosmetic Industry. Nat. Prod.Bioprospect. 2019, 9, 267–278. [CrossRef] [PubMed]

68. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Hassan Khan, MT; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AA Alhliða endurskoðun á týrósínasahemlum. J. Enzyme Inhib. Med. 2019, 34, 279–309. [Krossvísun]

69. Couteau, C.; Coiffard, L. Snyrtivörur og aðrar sjávarsnyrtivörur, sértækar snyrtivörur samsettar með því að nota sjávarauðlindir.Mar. Fíkniefni 2020, 18, 322. [CrossRef]

70. Sari, DM; Anwar, E.; Arifianti, AE Andoxunarefni og týrósínasahemjandi virkni etanólútdráttar úr brúnum þangi (Turbinaria conoides) sem léttiefni. Pharm. J. 2019, 11, 379–382. [Krossvísun]

71. Brenner, M.; Heyrn, VJ Verndarhlutverk melaníns gegn UV skemmdum í húð manna. Photochem. Photobiol. 2008, 84.539–549. [CrossRef] [PubMed]

72. Lee, SY; Baek, N.; Nam, T.-G. Náttúrulegir, hálftilbúnir og tilbúnir týrósínasahemlar. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2016, 31,1–13. [CrossRef] [PubMed]

73. Ferreres, F.; Lopes, G.; Gil-Izquierdo, A.; Andrade, PB; Sousa, C.; Mouga, T.; Valentão, P. Phlorotannin Útdrættir úr Fucales Einkennast af HPLC-DAD-ESI-MSn: Aðferðir við hýalúrónídasa-hemjandi getu og andoxunareiginleika. Mar.Drugs 2012, 10, 2766–2781. [CrossRef] [PubMed]

74. Fayad, S.; Nehmé, R.; Tannoury, M.; Lesellier, E.; Pichon, C.; Morin, P. Macroalga Padina pavonica vatnsþykkni sem fæst með vökvaútdrætti undir þrýstingi og útdráttur með örbylgjuofni hamlar virkni hýalúrónídasa eins og sést með háræðarafmæli.J. Litskiljun. A 2017, 1497, 19–27. [CrossRef] [PubMed]

75. Athukorala, Y.; Kim, K.-N.; Jeon, Y.-J. Andoxunar- og andoxunareiginleikar ensímvatnsrofs úr brúnþörungum, Ecklonia cava. Food Chem. Toxicol. 2006, 44, 1065–1074. [Krossvísun]

76. Jiménez-Escrig, A.; Gómez-Ordóñez, E.; Rupérez, P. Brún og rauð þang sem hugsanleg uppspretta andoxunarefna næringarefna.J. Appl. Phycol. 2012, 24, 1123–1132. [Krossvísun]

77. Karawita, R.; Siriwardhana, N.; Lee, K.-W.; Hæ, M.-S.; Yeo, I.-K.; Lee, Y.-D.; Jeon, Y.-J. Hreinsun hvarfgjarnra súrefnistegunda, málmklóun, minnkandi kraft og lípíðperoxunarhömlunareiginleika mismunandi leysiefnahluta frá Hizikia fusiformis.Eur. Food Res. Tækni. 2005, 220, 363–371. [Krossvísun]

78. Jormalainen, V.; Honkanen, T. Breytileiki í náttúruvali til vaxtar og flóratannín í brúnþörungnum Fucus vesiculosus.J. Evolut. Biol. 2004, 17, 807–820. [CrossRef] [PubMed]

79. Koivikko, R.; Loponen, J.; Pihlaja, K.; Jormalainen, V. Afkastamikil vökvaskiljunargreining á flórótanínum úr brúnþörungnum Fucus vesiculosus. Phytochem. endaþarm. 2007, 18, 326–332. [CrossRef] [PubMed]

80. Mareˇcek, V.; Mikyška, A.; Hampel, D.; Cejka, P.; Neuwirthov ˇ á, J.; Malachová, A.; Cerkal, R. ABTS og DPPH aðferðir sem tæki til að rannsaka andoxunargetu vorbyggs og malts. J. Cereal Sci. 2017, 73, 40–45. [Krossvísun]

81. Asada, M.; Sugie, M.; Inoue, M.; Nakagomi, K.; Hongo, S.; Murata, K.; Irie, S.; Takeuchi, T.; Tomizuka, N.; Oka, S. Hindrandi áhrif algínsýra á hýalúrónídasa og á histamínlosun frá mastfrumum. Biosci. Líftækni. Biochem. 1997, 61, 1030–1032.[CrossRef] [PubMed]

82. Mase, T.; Yamauchi, M.; Kato, Y.; Esaki, H.; Isshiki, S. Hýalúrónídasa-hamlandi súr fjölsykra einangruð úr PorphyridiumPurpureum. Safn rannsóknarritgerða í Suishan Women's Gakuen háskólanum. Nat. Sci. 2013, 44, 105–113,83. Tolpeznikaite, E.; Bartkevics, V.; Ruzauskas, M.; Pilkaityte, R.; Viskelis, P.; Urbonaviciene, D.; Zavistanaviciute, P.; Zokaityte, E.; Ruibys, R.; Bartkiene, E. Einkenni á útdrætti úr fjölþörungum og örþörungum. Foods 2021, 10, 2226. [CrossRef]

84. Gómez, I.; Huovinen, P. Morfó-virk mynstur og svæðisskipan þanga í Suður-Chile: Mikilvægi ljóstillífunar og líf-sjónrænna eiginleika. mars Ecol. Prog. Ser. 2011, 422, 77–91. [Krossvísun]

85. Karsten, U.; Wiencke, C. Þættir sem stjórna myndun UV-gleypandi Mycosporine-líkra amínósýra í Marine RedAlga Palmaria palmitate frá Spitsbergen (Noregi). J. Plant. Physiol. 1999, 155, 407–415. [Krossvísun]

86. Ummat, V.; Sivagnanam, SP; Rajauria, G.; O'Donnell, C.; Tiwari, BK Framfarir í formeðferðartækni og grænni útdráttartækni fyrir lífvirkt úr þangi. Trends Food Sci. Tækni 2021, 110, 90–106. [Krossvísun]

87. Bousetta, N.; Lanoisellé, J.-L.; Bedel-Cloutour, C.; Vorobiev, E. Útdráttur leysanlegs efnis úr vínberjum með háspennuafhleðslu fyrir endurheimt pólýfenóls: Áhrif brennisteinsdíoxíðs og hitameðferðar. J. Food Eng. 2009, 95, 192–198.[CrossRef]

88. Goettel, M.; Eing, C.; Gusbeth, C.; Straessner, R.; Frey, W. Púlsað rafsvið aðstoðað útdrátt innanfrumu verðmæta úr örþörungum. Algal Res. 2013, 2, 401–408. [Krossvísun]

89. Hwang, P.-A.; Wu, C.-H.; Gau, S.-Y.; Chien, S.-Y.; Hwang, D.-F. Andoxunarefni og ónæmisörvandi virkni heitavatnsþykkni úr þangi Sargassum epiphyllum. J. Mar. Sci. Tækni. 2010, 18, 41–46. [Krossvísun]

90. Sabeena Farvin, KH; Jacobsen, C. Fenólsambönd og andoxunarvirkni valinna tegunda þangs frá Danmörku. Food Chem. 2013, 138, 1670–1681. [CrossRef] [PubMed]

91. Godlewska, K.; Michalak, I.; Tuhy, L.; Chojnacka, K. Líförvandi efni fyrir vöxt plantna sem byggjast á mismunandi aðferðum við þangútdrátt með vatni. BioMed Res. Alþj. 2016, 2016, 1–11. [CrossRef] [PubMed]

92. Zhang, Q.; Zhang, J.; Shen, J.; Silva, A.; Dennis, DA; Barrow, CJ Einföld 96-Jæja örplötuaðferð til að meta heildarpólýfenólinnihald í þangi. J. Appl. Phycol. 2006, 18, 445–450. [Krossvísun]

93. Kamtekar, S.; Keer, V.; Patil, V. Mat á fenólinnihaldi, flavonoid innihaldi, andoxunarefni og alfa-amýlasa hamlandi virkni markaðssetts fjöljurtasamsetningar. J. Appl. Pharm. Sci. 2014, 4, 61.

94. Netó, R.; Marçal, C.; Queiros, A.; Abreu, M.; Silva, A.; Cardoso, S. Skimun á Ulva rigida, Gracilaria sp., Fucus vesiculosus og Saccharina latissima sem hagnýt innihaldsefni. Alþj. J. Mol. Sci. 2018, 19, 2987. [Krossvísun]

95. Benzie, EF; Stofn, JJ Járnafoxandi getu plasma (FRAP) sem mælikvarði á "andoxunarkraft": FRAP prófið. Anal.Biochem. 1996, 239, 70–76. [Krossvísun]

96. Eun Lee, K.; Bharadwaj, S.; Yadava, U.; Gu Kang, S. Mat á koffíni sem hemli gegn kollagenasa, elastasa og tyrosinaseusing in silico og in vitro nálgun. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 927–936. [CrossRef] [PubMed]