Innihaldsákvörðun fimm efnasambanda í Semen Rehmanniae og stofnun HPLC fingrafars þess

Tafla 3 Niðurstöður endurheimtarprófs (n=6)

2.4 Ákvörðun sýnis

Sex loturnar af Rehmannia sem safnað var voru útbúnar samkvæmt aðferðinni undir "2.2.2" og tekin sýni og ákvörðuð í samræmi við skiljunaraðstæður undir "2.1". Niðurstöður innihaldsákvörðunar eru sýndar í töflu 4. Niðurstöðurnar sýna að meðal þáttanna fimm er innihald rehmannia glýkósíðs D hæst, á bilinu 0.460% til {{1 0}}.730%; innihald leonuri glýkósíðs er í öðru sæti, á bilinu 0,100% til 0,270%, og innihald þessara tveggja þátta í sýnum frá mismunandi framleiðslusvæðum er ekki marktækt ólíkt. Í sýni SX1, fyrir utan echinacoside, er innihald hinna fjögurra þáttanna marktækt hærra en í öðrum lotum sýna; innihald echinacoside, cistancheside A og verbascoside í Rehmannia glutinosa frá mismunandi framleiðslusvæðum er nokkuð mismunandi og óreglulegt.

CISTANCHE JURT MEÐGÓÐ GÆÐA SAMKVÆÐI

2.5 Stofnun og líkt mat á HPLC fingrafar Rehmannia glutinosa

Litskiljunin og gögnin um fjölþátta innihaldsákvörðunina í Rehmannia glutinosa voru flutt inn í "Chinese Herbal Medicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation System (2012 Edition)" hugbúnaðinn og litskiljun SX1 prófunarsýnisins var valið. sem viðmiðunarróf. Breidd tímagluggans var stillt á 0.10 mín og miðgildisaðferðin var notuð til að búa til ofangreind litróf og viðmiðunarróf. Alls greindust 23 algengir toppar (sjá mynd 3). Líkindin milli fingraföra Rehmannia glutinosa sýnisins og tilvísunarinnar var 0,904~0,950, sem gefur til kynna að sýnin af Rehmannia glutinosa frá mismunandi framleiðslusvæðum og milli hrár Rehmannia glutinosa og soðnar Rehmannia glutinosa voru svipuð og höfðu góða samkvæmni.

Tafla 4 Niðurstöður innihaldsákvörðunar 5 þátta í Semen Rehmanniae/%

13. rehmannioside D; 17. leónúríð; 19. Echinacoside; 20. kastanósíð A; 21. akteósíð

Mynd 3 Yfirlögð HPLC litskiljun af 6 lotum af Semen Rehmanniae (SX1-SX4, HN1, HN2) og tilvísun (R)

3 Umræður

3.1 Val á litskiljunarskilyrðum

Fjögur hreyfanlegur fasakerfi, asetónítríl-vatn, asetónítríl-0.1% maurasýrulausn, metanól-vatn og metanól-0.1% maurasýrulausn, voru rannsökuð í þessari rannsókn. Niðurstöðurnar sýndu að þættirnir fimm höfðu góð aðskilnaðaráhrif í asetónítrílkerfinu; samanborið við asetónítríl-vatns hreyfanlegur fasakerfið, voru toppar rehmannia glutinosa og móðurjurtar glýkósíða í hreyfanlegum fasa asetónítríls -0.1% maurasýrulausnar þrengri og höfðu góða toppsamhverfu. Á sama tíma, vegna mismunandi útfjólubláa frásogs þessara fimm þátta, er innihald íhlutanna mjög mismunandi. Til að ákvarða nákvæmari innihald hvers efnisþáttar og tryggja að frásogsstyrkur efnisþáttanna fimm dreifist jafnt í sama litskiljun, skal útfjólubláa frásogrehmannia glýkósíð D, móðurjurt glýkósíð, echinacoside, cistancheside A og verbascoside voru greind og breytileg bylgjulengdarákvörðun var valin, það er 0-24 mín., fyrsta aðskilda rehmannia glýkósíðið var ákvarðað við 203 nm, og 24-40 mín, aðskilin echinacoside, cistancheside A og verbascoside voru ákvörðuð við 330 nm. Að auki rannsakaði þessi rannsókn einnig útdráttaráhrif metanóls, 70% metanóllausnar, 50% metanóllausnar og 50% asetónítríllausnar sem útdráttarleysis. Niðurstöðurnar sýndu að 70% metanóllausn sem útdráttarleysir getur betur leyst upp efnisþættina sem á að prófa og útdregin sýnið hefur færri óhreinindi. Þess vegna valdi þessi rannsókn 70% metanól sem útdráttarleysi, asetónítríl-0.1% maurasýrulausn sem farsímafasakerfið og notaði breytilega bylgjulengd til að ákvarða innihald efnisþáttanna fimm í Rehmannia.

3.2 Greining á niðurstöðum úrtaksákvörðunar

Af niðurstöðum ákvörðunar má sjá að eftir gufu, að undanskildum örlítilli aukningu á innihaldi echinacosides, minnkaði innihald hinna fjögurra efnisþáttanna verulega, sérstaklega innihald leonuriside og cistancheside A; innihald rehmannia glýkósíðs D og cistanchesíðs A í Rehmannia glutinosa frá sama framleiðslusvæði var örlítið frábrugðið og innihald leonuriside, echinacoside og verbascoside var marktækt mismunandi; innihald echinacosides í Rehmannia glutinosa frá Henan framleiðslusvæðinu var marktækt hærra en í sýnunum frá Shanxi framleiðslusvæðinu og innihald hinna fjögurra íhlutanna var aðeins öðruvísi. Á sama tíma, samkvæmt HPLC fingrafarinu sem komið var fram í þessari rannsókn, var líkindin milli 6 lotanna af Rehmannia sýnum og samanburðarfingrafarsins 0.904~0.950, sem gefur til kynna að aðalefnið þættir í 6 lotunum af Rehmannia sýnum fyrir og eftir vinnslu voru mjög samkvæmar.

Í stuttu máli eru innihaldsákvörðunaraðferðin og HPLC fingrafarið sem komið var á í þessari rannsókn nákvæm, áreiðanleg og hafa góða sérstöðu. Þeir geta verið notaðir til að einkenna breytingar á íhlutum og vinnslustigi Rehmannia glutinosa fyrir og eftir vinnslu og veita tæknilega aðstoð við gæðaeftirlit Rehmannia glutinosa. Hins vegar hefur þessi rannsókn ókosti við litlar sýnalotur og ófullnægjandi umfang framleiðslusvæða, sem krefst frekari greiningar og sannprófunar.

Heimildir

[1] Kínversk lyfjaskrárnefnd. Lyfjaskrá Alþýðulýðveldisins Kína: 1. bindi [S]. Peking: China Medical Science and Technology Press, 2020: 129-130.

[2] Xu Jun, Fu Zhetong. Rannsóknir á sögulegri þróun nafna á unnum Rehmannia glutinosa og rannsóknum á virkni þess [J]. Kínversk einkaleyfislækning, 2017, 39 (9): 1913-1916.

[3] Zhu Jue, Zhu Xiangmei, Shi Yuhe, o.fl. Rannsóknarframfarir á Rehmannia glutinosa og spágreiningu á gæðamerkjum þess [J]. Chinese Patent Medicine, 2022, 45 (2): 1273-1281.

[4] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi, o.fl. Rannsóknarframfarir á efnasamsetningu og lyfjafræðilegum áhrifum Rehmannia glutinosa [J]. Kínversk jurtalækning, 2022, 52 (6): 1772-1784.

[5] Li Hongwei, Meng Xiangle. Rannsóknarframfarir á efnaþáttum og lyfjafræðilegum áhrifum Rehmannia glutinosa［J］.

Drug Evaluation Research, 2015, 38(2): 218-228.

[6] Zhang Boyong, Jiang Zhenzuo, Wang Yuefei, o.fl. Greining á efnaþáttum ferskrar Rehmannia glutinosa, hrár Rehmannia glutinosa og soðinnar Rehmannia glutinosa með UPLC/ESI-Q-TOF MS［J］. Kínversk einkaleyfislækning, 2016, 38(5): 1104-1108.

[7] Zhang Lixian, Wei Yue, Li Feifei, o.fl. Greining fingrafaramynsturs og margþátta innihaldsákvörðun á mismunandi unnum Rehmannia glutinosa vörum［J］. Hubei Agricultural Sciences, 2023, 62(9): 135-141.

[8] Chen Jinpeng, Zhang Kexia, Liu Yi, o.fl. Rannsóknarframfarir á efnaþáttum og lyfjafræðilegum áhrifum Rehmannia glutinosa［J］. Kínversk jurtalækning, 2021, 52(6): 1772-1784.

[9] Tao Yi, Jiang Yanhui, Tang Kejian, o.fl. Samanburðarrannsókn á efnaþáttum Rehmannia glutinosa fyrir og eftir vinnslu með UHPLC-Q-TOF/MS［J］. New Chinese Medicines and Clinical Pharmacology, 2016, 27(1): 102-106.

［10］ Xu Zhuo, Dai Xinxin, Su Shulan, o.fl. Kvik uppsöfnun núkleósíða og amínósýruþátta í Rehmannia glutinosa byggt á UPLC-TQ-MS［J］. Kínversk jurtalækning, 2021, 52(23): 7323-7330.

［11］ Li Yujiao. Rannsókn á vinnslutækni og vélbúnaði „níu gufu og níu útsetningar“ á Rehmannia glutinosa［D］. Jinan: Shandong háskólinn, 2023.

［12］ Wang Yue, Zhou Qiao, Zhang Xuelan, o.fl. HPLC Samtímisákvörðun á innihaldi átta íhluta í Rehmannia glutinosa og mismunandi unnum vörum þess með UPLC fingrafaragreiningu og margvísisákvörðun innihaldsþátta [J]. Chinese Medicinal Materials, 2021, 44 (7): 64-68.

[13] Guo Xiaokai, Xue Shujuan, Chen Suiqing. Gæðamat á Rehmannia glutinosa byggt á UPLC fingrafara og innihaldsákvörðun fjölvísitöluþátta [J]. Chinese Medicinal Materials, 2021, 44 (4): 917-923.