Connexin 43: Markmið til að meðhöndla bólgu í afleiddum fylgikvillum nýrna og augna í sykursýki Ⅱ

2. Að miða á bólgu í örvandi fylgikvillum sykursýki

Stungið hefur verið upp á markvissri bólgueyðandi meðferð til að koma í veg fyrir og meðhöndla sykursýki og hafa verið ítarlega endurskoðuð [54-56]. Þekkt fyrir að styðja við framgang sjúkdóms í mörgum aldurstengdum sjúkdómum, td sykursýki [55], offitu [25] og aldurstengdri macular hrörnun [57], hefur nýleg athygli beinst að hönnun lyfjafræðilegra efnasambanda sem hindra helstu bólgueyðandi sjúkdóma, svo sem nod-like receptor protein 3 (NLRP3) inflammasome (td MCC950) [58], breytingar á svipgerð frumna (td, senolytics) [59] eða frumustarfsemi (td natríum-glúkósa samflutnings-2 hemlar: SGLT2i) [60–62].

NÝ JURTABÚNAÐUR FYRIRBólgueyðandi meðferð

NLRP3 inflammasome hefur verið vísað til sem „hryggur gamli bólgumaðurinn“ [63] og er tengt ýmsum bólgusjúkdómum, þar á meðal æðakölkun [64], Alzheimerssjúkdómi [27], bólgusjúkdómi [65] og ekki- áfengisheilkennisbólga [66]. Það er uppstýrt í ónæmis- og þekjufrumum yfir mismunandi vefjagerðir, þar sem virkjun nær hámarki með seytingu bólgueyðandi miðla, interleukin-1 (IL1) og interleukin-18 (IL18). Aftur á móti virkja þetta æxlisdrep-alfa (TNF ) og interleukin-6 (IL6), sem bæði sýna aukið sermisþéttni með aldri og sjúkdómum og miðla bólgu/trefjun í mörgum fylgikvillum sykursýki [67–71 ]. Þar sem langvarandi bólgusjúkdómar eru magnaðar og viðhaldið af bólguferlinu, kemur það ekki á óvart að hindrun NLRP3 bólgusjúkdómsins beint (td MCC950) dregur úr bólgu á milli margra aldurstengdra sjúkdóma [60,68,72].

Þrátt fyrir þessar uppörvandi athuganir hefur teppu blokkun á flóknum óaðskiljanlegum hluta meðfædds ónæmissvörunar verið mætt með áhyggjum. Virkjað af bæði skaðatengdum sameindamynstri (DAMPs) og sýklatengdum sameindamynstri (PAMPs), miðlar NLRP3 inflammasome bæði dauðhreinsuð og ósæfð bólgu [73]. Þar af leiðandi, á meðan hömlun á NLRP3 inflammasome getur verndað gegn dauðhreinsuðum bólgu af völdum innrænna skaðlegra áreita, gæti þetta gert einstaklinga næmir fyrir meiðslum þar sem PAMP-tengd örverusýking nær ekki fram svörun [74,75]. Engu að síður, þar sem NLRP3 hefur verið skilgreint sem lykilmiðlari bólgu í yfir 80 mismunandi gerðum af meiðslum [76–80], kemur það ekki á óvart að ýmis efnasambönd hafi farið í klínískar rannsóknir, td Inzomelid (NCT04015076), IFM{{12 }} (DFV890) (NCT04382053) og Dapansutrile (OLT1177) (NCT04540120) [81]. Þrátt fyrir þetta er lyf sem miðar á NLRP3 með góðum árangri enn að ná aðalendapunkti sínu, athugun sem bætist við skortur okkar á þekkingu á uppbyggingu þess og hugsanlegum bindistaði [82]. Þar af leiðandi hafa inngrip til að miða á miðla sem miða á eftir straumi, td IL1 og TNF , fengið töluverða athygli. Canakinumab (ACZ885, Ilaris) er raðbrigða einstofna mótefni úr mönnum sem hamlar sértækt IL1 viðtakabindingu og sýndi fram á jákvæðar aðalárangur í Canakinumab bólgueyðandi segamyndunarútkomurannsókninni (CANTOS) [83]. Í kjölfarið fékk það leyfi til meðferðar á sjaldgæfum bólgusjúkdómum, þar með talið ungliðagigt [84]. Hins vegar reyndust virkni þess valda vonbrigðum við meðhöndlun á bólgu í sjónukvilla af völdum sykursýki (NCT01589029), sykursýki af tegund I (T1DM) (NCT00947427, [85]) og æðakölkun (NCT00900146, [86]), áhrif hugsanlega tengd. til aukinnar sýkingartíðni og blóðsýkingar [87]. Svipaðar tilraunir til að miða við TNF eru efnasambönd sem innihalda annað hvort viðtakasamrunaprótein (etanercept) [88], sem bæla lífeðlisfræðilega svörun við TNF, eða einstofna mótefni (golimumab, infliximab, adalimumab og certolizumab pegol), sem öll hafa náð misjöfnum árangri [ 89].

Þó augljóst sé að það sé margt að læra í leit okkar að því að þróa nýjar inngrip sem með góðum árangri (a) miða á dauðhreinsaðar bólgur og (b) gera það án alvarlegra aukaverkana, hefur nýleg FDA samþykki á SGLT2 hemlum kannski verið mikilvægasta skrefið áfram í að stjórna og bæta árangur hjá sjúklingum með nýrnakvilla [90] og hjarta- og æðasjúkdóma [91]. Með því að hindra samflutning natríumglúkósa og lækka blóðsykursgildi sýnir SGLT2i fram á bættan nýrna- og hjarta- og æðasjúkdóm hjá sjúklingum með T2DM og nýrnakvilla af völdum sykursýki [92-94]. Þótt upphafsvörn sé talin stafa af minnkun á gauklaofsíun, sýna nokkrar rannsóknir að SGLT2i veitir vernd með bælingu á bólgu og bandvefsmyndun, þó enn eigi eftir að skýra útbreidda aðferðirnar að fullu [95-97]. Hins vegar, með lyfseðilsskyldum einstaklingum með T2DM öfugt við T1DM og hugsanlegar aukaverkanir sem fela í sér ketónblóðsýringu [98], aukinni hættu á aflimun [99] og aukinni kynfærasýkingu [100], SGLT2i er ekki ein stærð sem hentar öllum. Sem önnur nálgun eru Cx43 hemichannel blokkar flokkur lyfja sem innihalda Gap19 [101] og Tonabersat [102,103]. Þau bindast og loka hálfrásum til að koma í veg fyrir losun fjölda DAMPs, þar á meðal ATP (til að fá nánari úttekt á því hvernig þessi peptíð virka, vísum við lesandanum til King o.fl. eins og birt er í þessu sérstaka hefti) [104]. Í nærveru DAMPs er NLRP3 flókið virkjuð og framkallar óviðeigandi bólgusvörun, örvar og virkjar með staðbundinni paracrine-miðluðum merkjasendingum, bæði síast inn ónæmisfrumur og staðbundnar trefjafrumur [50,78,105,106]. Á þessum grundvelli einum og sér er ekki erfitt að skilja hvers vegna connexin hemichannel blokkar eru í auknum mæli borin undir áhrifaríka lækningaaðferð til að hindra dauðhreinsaða bólgu í sjúkdómum.

3. Cx43 Hemichannel blokkar og meðferð á bólgu í sykursýki og fylgikvillum hennar

Með vísbendingum um að Cx43 hálfrásarmiðluð samskipti stuðli að meingerð og framgangi vefjaskemmda í afleiddum fylgikvillum sykursýki [49.107.108], hafa lyf sem miða að Cx43 hálfrásum verið auðkennd sem hugsanleg bólgueyðandi meðferð [109.110]. Efnasambönd sem vekja áhuga eru meðal annars peptíð 5, sem vitað er að bindast annarri utanfrumulykkju Cx43 [111]; Gap26, sem líkir eftir fyrstu utanfrumu lykkju Cx43 [112]; og CT1, Cx43-undirstaða peptíð [113]. Verkunarmáti þeirra ásamt líkönum þar sem þau hafa verið prófuð eru tekin saman í töflu 1. Þessi efnasambönd hamla sérstaklega Cx43 hálfrásaropnun [114] og hafa sýnt fram á virkni við að koma í veg fyrir losun vefjaskemmda sem valda merkjum og draga þannig úr bólgu og bandvefsmyndun. í afleiddum fylgikvillum sykursýki [105], þar með talið nýrnakvilla af völdum sykursýki [108].

Tafla 1. Cx43 hemichannel blokkar, verkunarmáti og líkön þar sem þeir hafa verið prófaðir til þessa.

4. Cx43 Hemichannels og meðferð við bólgu í nýrnasjúkdómum með sykursýki

Sykursýkisnýrnakvilli er almennt álitinn gauklasjúkdómur, þar sem próteinmigu er ríkjandi snemma klíníska merkið [140]. Einkenni gauklaskaða eru meðal annars skemmdir á frumufrumu og útrýmingu [141,142], hálfmánamyndun [143], þykknun grunnhimnu [144], íferð átfrumna [145] og bólga [146]. Fyrstu rannsóknir sem meta tengsl milli connexins og gauklaskemmda sáu fram á aukna tjáningu Cx43 í bæði vefjasýni úr slösuðum gauklahnoðrum úr mönnum og í nýrnaeitrandi gauklabólgu (NTS-GN) músalíkani aflangvinnan nýrnasjúkdóm[147]. NTS-GN líkanin sýna svipaða framsetningu og streptósótósín (STZ) músarlíkan af T1DM, með vefjafræðilegum og hagnýtum rannsóknum sem segja að þessar mýs fái glomerulosclerosis, bólgu, bandvefsmyndun og albúmínmigu [148]. Hjá NTS-GN músum á sér stað uppstjórnun á Cx43 með aukinni bindingu virkjaðs próteins-1 (AP-1) ​​umritunarþátta, fosfórýleraðs (p)- frumu (c) JUN, p-merki transducer, og virkja umritunar-1 (STAT1) til Cx43 verkefnisins [147]. Ennfremur, í músum sem fengu meðferð með Cx43 sértæku andsense oligodeoxynucleotide eða í misleitri Cx43+/− mús af völdum NTS-GN, minnkar magn próteinmigu, þvagefnis köfnunarefnis í blóði (BUN) og kreatíníns í sermi [148]. Svipaðar athuganir voru einnig tilkynntar í rottum af völdum STZ þegar þær voru meðhöndlaðar með Cx43 lítilli truflandi ríbónkjarnasýru (siRNA) [149]. Þessi vernd getur stafað af skertri sjálfsát, innanfrumu niðurbrotskerfi sem fjarlægir/endurvinnir óvirka eða óþarfa frumuhluta til að tryggja skilvirka heilsu og virkni frumunnar [149]. Miðlað með virkjun spendýramarkmiðs rapamýsíns (mTOR) merkja, háglúkósameðhöndlaðra músarfrumnafrumur (MPC5) þar sem Cx43 tjáning var minnkað með tímabundinni transfektion með siRNA, sýna minnkaða mTOR virkjun, skert sjálfsátflæði og minnkuð áverka á fræfrumum [149]. Paracrine miðlað purinergic boðefni hefur einnig verið tengt við Cx43 framkallaðan podocyte skaða, þar sem umbreytandi vaxtarþáttur beta 1 (TGF 1) meðhöndlaðar E.11 fræfrumur, samræktaðar með Cx43 sértæku blokkandi peptíðinu Gap26 og purinergic viðtakablokka suramined, sýndi frumuskemmu endurskipulagða frumuskemmu. , bætt formgerð og minnkun á frumudauða samanborið við TGF 1 eitt sér [147].

Þrátt fyrir að vera gauklasjúkdómur að uppruna, einkennast háþróuð stig nýrnakvilla af alvarlegri millivefsbólgu í píplum og bandvefsbólgu [150]. Vinna á rannsóknarstofum okkar tengir breytta tjáningu Cx43 við pípluskaða í bæði in vitro [108,135,151,152] og in vivo [108] líkönum af sjúkdómi [153]. Fyrstu athuganir bentu á um það bil 5-föld aukningu á Cx43 tjáningu í vefjasýnisefni frá einstaklingum með nýrnakvilla af völdum sykursýki samanborið við heilbrigða stjórn [151], á meðan pöruð raflífeðlisfræði og ATP lífskynjun bentu til þess að þessi aukna tjáning væri samhliða minnkaðri bili- junction intercellular coupling (GJIC) og aukin hemichannel-miðluð ATP losun [151]. Þar sem millifrumuviðloðun er forsenda fyrir myndun bilsmóta, ákvað AFM-einfrumukraftur litrófsgreining [154] að þetta tap á beinni frumutengingu samhliða minnkun á E-Cadherin miðluðu frumuviðloðun [155], áhrif verulega deyfð af sam- ræktun með P2X7 viðtaka (P2X7R) mótlyfjum Suramin, A438079 eða A804598 [108,156]. Fyrri rannsóknir tengja P2X7R virkjun við átfrumna og útfellingu utanfrumu fylkis í báðum in vitro líkönum afnýrnasjúkdómur með sykursýki[108.157] og í STZ-völdum sykursýkismúsum [157], á meðan við sáum nýlega aukna P2X7R tjáningu í nýrnasýni frá fólki með nýrnakvilla af völdum sykursýki og í einhliða þvagrásarteppu (UUO) músalíkani [108]. UUO er líkan af háþróaðri millivefsbólgu og bandvefsbólgu sem endurspeglar seint stig skaða sem sést ísykursýkis nýra, óháð upphafsáreitinu [158]. Það er mikið notað fyrir vélrænar rannsóknir í hvers kyns háþróaðri langvinnri lungnaskemmdum [158]. Þrátt fyrir þekkingu okkar á hlutverki P2X7R virkjunar í meingerð sjúkdóma hafa tilraunir til að miða P2X7 verið tiltölulega misheppnaðar, hugsanlega vegna erfðabreytileika P2X7 viðtaka manna sem getur leitt til breyttra lyfjafræðilegra viðbragða [159,160]. Þar af leiðandi, eftir að hafa greint að skert gap junction tenging er samhliða aukinni hálfgöng miðlaðri ATP losun [151], ásamt vísbendingum um að hækkað ATP og viðvarandi P2X7R tengist upphaf og framvindu bólgu og bandvefs í mörgum vefjagerðum, metum við hlutverk fyrir bæði Cx43 og P2X7R virkjun við sundurliðun á adherens og tight junction complex í báðum TGF 1 meðhöndluðum frumpíplufrumum úr mönnum sem ræktaðar voru með P2X7R hemlum A438079 og A804598 og í Cx43+/− UUO músamódelinu [108]. Með því að blokka P2X7R slökkti verulega á TGF 1 framkallaða breytingu á adherens (E-Cadherin, N-Cadherin) og tight junction próteinum (Claudin-2 og Zona Occludins (ZO-1)), en endurheimti bæði frumuviðloðun og paracellular gegndræpi [107]. Það kemur ekki á óvart að þessi TGF 1-framkölluðu áhrif minnkuðu verulega þegar frumur voru ræktaðar samhliða Apyrasa, ATP-dífosfóhýdrólasa sem hvatar raðvatnsrof ATP í ADP, síðan AMP og adenósíns, sem bendir til þess að ATP hafi hlutverki niðurstreymis í miðla aðgerðum TGF 1. Uppruni þessa merkis er enn frekar studdur af nýlegum rannsóknum okkar á Cx43+/− UUO músinni þar sem festingarnar eru teknar í sundur (td E-cadherin) og þéttar (td ZO{ {38}}) tengifléttur voru marktækt deyfðar samanborið við villigerðarviðmið [108]. Þó að þessar rannsóknir í sameiningu styðji hlutverk Cx43 og niðurstreymis purinergic boðefna í pípluskaða, þá er mikilvægt að skilja hvernig þessi vernd er veitt ef menn vilja miða við þessi samskipti með lyfjafræðilegri inngrip.

Öfugt við athuganir hér að ofan, Sun o.fl. lagði nýlega til að Cx43 tjáning sé niðurstýrð ínýrnasjúkdómur með sykursýkiog að oftjáning á Cx43 með því að nota stutt hárnála RNA dregur úr nýrnatrefjun og dregur úr þekju-til-mesenchymal umbreytingu (EMT) á carboxyl-terminal merkjaflutningsháðan hátt í leptínviðtaka-skorti sykursýkismúsum af tegund 2 (db/db) og í rottum nýra NRK-52E frumur meðhöndlaðar með háum (30 mM) glúkósa [161]. Þeir töldu þessi órásaháðu áhrif til stjórnun sirtuin-1 súrefnisskortsframkallanlegs þáttar-1alfa (SIRT1-HIF-1A) merkjaleiðarinnar og hafa nýlega lagt til að verndandi áhrif Cx43 eru tengd ubiquitin-sértækum próteasa 9X (USP9X/FAM) miðlaðri de-ubiquitination [161]. Þó að enn sé eftir að tilkynna um áhrif þessarar breyttu Cx43 tjáningar fyrir frumusamskipti í þessum líkönum, benda sameinuð vísbendingar frá öðrum rannsóknum til þess að blokkun Cx43 hálfrása í gegnum hermipeptíð geti verið ný nálgun við að miða á bólgu og bandvef í mörgum vefjagerðum [108,113,162,163]. Peptíð 5 er connexin peptidomimetic sem líkir eftir hluta af 2. utanfrumu lykkju Cx43 [111] og hefur reynst árangursríkt við að hindra Cx43 hemichannels og koma í veg fyrir losun ATP í mörgum meiðslum þegar það er gefið í augn [126], í heila- og mænuvökva [164] og kerfisbundið [165]. Rannsóknir staðfesta notagildi og sérhæfni markmiða og gefa svipaðan og marktækan ávinning í mismunandi meiðslumódelum [108,126,164-166]. Nýlegar niðurstöður okkar ákváðu að hækkuð magn af TGF 1 eykur Cx43 hálfrásarmiðlaða ATP losun [151], áhrif sem knýja áfram P2X7R miðlaðar svipgerðarbreytingar sem tengjast upphaf hluta EMT á nærsvæði nýrna [108,164]. Samhliða ræktun á TGF 1 meðhöndluðum nærpíplum þekjufrumum úr mönnum (hPTECs) með peptíð 5, hindraði með góðum árangri upptöku carboxyfluorescein litarefnis sem miðlað er af hálfrásum og ATP losun í rauntíma, en áhrif þeirra komu fram með endurreisn tjáningar viðloðna og tight junction próteina slasaðra. frumur [108].

Verkfæri við viðloðun frumna og viðhald pólunar, sundurliðun frumumóta fléttna er tengt hluta EMT, atburðum sem valda bólgu og bandvefsmyndun [167], hið síðarnefnda er stuðlað að utanfrumufylki (ECM) útfellingu [152]. Með kollageni I jókst í millivef UUO músa, áhrif minnkuðu í Cx43+/− líkaninu [168], gerðum við tilgátu um að breytt örumhverfi gæti framkallað svipgerðarbreytingar með aukinni Cx43 miðlaðri hálfrás ATP losun. Þar af leiðandi sáum við að TGF 1 meðhöndlaðar nýrnafrumur úr mönnum tengjast með aukinni sækni í kollagen I með integrin ísóformi 2 1, víxlverkun sem færði svipgerð frumunnar yfir í aukna tjáningu á integrin tengdum kínasa, N-cadherin, fibronectin og kollagen IV samanborið við óhúðaða stjórn á frumum. Athyglisvert er að samræktun á TGF 1 meðhöndluðum frumum með peptíð 5 hindraði marktækt aukningu á upptöku litarefnis sem miðlað er af hálfgöngum og endurheimti að lokum tjáningu merkja um pípulaga skaða í magn sem er dæmigert fyrir viðmiðunarfrumur ræktaðar á plasti. Þar að auki hindraði peptíð 5 TGF 1 framkallaða seytingu kollagens I [168], sem staðfestir in vivo gögn í Cx43+/− músinni [168] og undirstrikar tilvist hugsanlegrar endurgjafarlykkja þar sem afbrigðileg Cx43 hálfrás miðlaði ATP losun eykur seytingu og útfellingu kollagen I, en hið síðarnefnda viðheldur pípulaga skaða í gegnum Cx43 hálfrásarmiðlaðan búnað.

Byggt á birtum athugunum okkar með peptíð 5, metum við nýlega virkni Danegaptides til að veita vernd í in vitro líkani af pípluskaða. Cx43 gap junction modifier [133,134], við greindum frá því að Danegaptide gæti einnig hindrað upptöku litarefnis sem miðlað er af hálfgöngum, losun ATP og þar af leiðandi TGF 1 framkallaði breytingar á merkjum pípulaga skaða td E-Cadherin og N-Cadherin og bandvefsmyndun td kollagenI , kollagen-IV og fíbrónektín í aðalpíplum þekjufrumum manna (hPTECs) [135]. Ennfremur, byggt á vísbendingum um að Cx43+/− UUO músin sýnir minnkaða vefjafrumuvirkjun og minnkaða átfrumnaíferð samanborið við villigerð UUO stjórn [168], notuðum við próteómsniðsfylki til að skima fyrir tjáningarprófílnum af 125 bólgusýtókínum í TGF 1 meðhöndluðum aðal nærpíplafrumum úr mönnum í nærveru/fjarveru Danegaptides [135]. Leysanleg efnafræði, viðloðun sameindir og vaxtarþættir fá og virkja íferðarónæmisfrumur og staðbundna trefjafrumur til að miðla bólgu og bandvefsmyndun ísykursýkis nýra[135]. Hins vegar er lítið vitað um rofann sem kveikir á losun þessara efnafræðilegu merkja eða hvort að hindra þennan rofa hafi þýðingu fyrir gagnkvæm frumusamskipti. Þó að við eigum enn eftir að skilja hlutverk Cx43 hálfrásarvirkni í þessum paracrine miðluðum atburðum, sáum við að Danegaptide hindraði marktækt Cx43-miðlaða ATP losun í pípulaga þekjufrumum til að afnema seytingu margra bólgumiðla, þar á meðal chemokines, monocyte efnadrepandi prótein (MCP1), stjórnað við virkjun, eðlilegar T frumur tjáðar og væntanlega seyttar (RANTES; þátt í átfrumuíferð [169.170]), bólgueyðandi interleukín (IL6 og IL1) og adipokín adiponectin (tengd átfrumum-til-vöðvafjaðri mismunun [171 mismunandi ]). Til stuðnings in vitro gögnum okkar og Cx43+/− UUO mús [108], verk eftir Abed o.fl. sýndi fram á að fjöldi frumeinfrumna sem loðast við virkjað æðaþelsfrumna einlags músa minnkar í æðaþelsfrumum sem eru ræktaðar með Gap26 [168]. Niðurstöðurnar undirstrika þann spennandi meðferðarmöguleika sem felst í því að miða á Cx43 hemichannel virkni við nýrnakvilla af völdum sykursýki og annars konar nýrnasjúkdóms. Það á eftir að leysa hvernig blokkun Cx43 veitir vernd in vivo, á meðan frekari rannsóknir eru nauðsynlegar til að meta virkni Cx43 hermir peptíða í klínísku umhverfi

5. Meðferðarmöguleikar þess að hindra Cx43 við sjónhimnukvilla með sykursýki

Sjónukvilli af völdum sykursýki hefur áhrif á um það bil þriðjung fólks með sykursýki og er helsti þátturinn í blindu hjá fólki á vinnualdri [172], sem oft leiðir til sjónskerðingar vegna sjónabjúgs, blæðinga eða sjónhimnulosunar af völdum sykursýkis [173]. Þetta stafar af aukinni frumudapósu, gegndræpi í æðum og truflun á samvægi sjónhimnu [173]. Sykursýkissjónukvilli er flokkað í tvö klínísk stig sjúkdóms og kemur upphaflega fram sem ófjölgandi form, sem einkennist af bólgu, stækkun, bjúg, niðurbroti háræða, blóðþurrð og tap á heilleika æðaþels sem leiðir til óeðlilegs gegndræpis blóðs og sjónhimnu (BRB). 9]. Eftirfarandi minnkun á blóðflæði og næringarefnaframboði knýr framgang á fjölgunarstigið þar sem aukin æðamyndun leiðir til blæðinga og örvefsmyndunar [9]. Þessar meinafræði getur valdið losun á sjónhimnu sem leiðir til alvarlegrar eða algjörrar blindu [9].

Sjóntap í sjónhimnukvilla tengist niðurbroti á litarefnisþekju í sjónhimnu (RPE), þar sem tímabil viðvarandi blóðsykurshækkunar knýja fram bólgu og frumudauða með aukinni seytingu lykilbólgumiðla, vaxtarþátta og súrefnisskorts-framkallandi þátta [174]. Talið er að þessi bólga stuðli virkan þátt í tengdum skemmdum á æðum sjónhimnu með hæfni sinni til að koma af stað frumuddreifingu RPE frumna og stuðla að nýæðamyndun í sjónhimnu. Af helstu skaðavaldandi sameindunum sem vitað er að virkni þeirra og tjáning er uppstýrt í auga sykursýki, er það aukin seyting æðaþelsvaxtarþáttar (VEGF) sem kallar fram nýæðamyndun og upphaf fjölgunarstigs sjónukvilla af völdum sykursýki [175]. Samhliða niðurbroti á þéttum tengingum milli frumna í RPE, gerir truflun á litarefnisþekju í sjónhimnu kleift að þessar nýþróuðu og viðkvæmu æðar þrýstist í gegnum og leki inn í macula. Augnbjúgur sem myndast er einn stærsti þátturinn í sjónskerðingu í sjónukvilla af völdum sykursýki [176]. Þó að leysimeðferðir [177] og and-VEGF inndælingar [178] komi stöðugleika í æðar og koma í veg fyrir frekari nýæðamyndun, í sömu röð, er miðun fyrir framan þessa RPE niðurbrot og bólgu í aðalhlutverki á þessu sviði. Að takast á við ástandið á fyrstu stigum þess og koma þannig í veg fyrir umskipti á stigi án fjölgunar yfir í fjölgun, mun ekki aðeins bæta afkomu sjúklinga heldur draga úr félagshagfræðilegri byrði þessa sjúkdóms.

Til að miða við þennan skaða er mikilvægt að skilja hvernig það birtist. Athyglisvert er að röð atburða sem knýja áfram fjölgun sykursýkis sjónukvilla er af svipuðum orsökum og við sjáum ínýrnasjúkdómur með sykursýki á seinstigi[23]. Eins og með upphaf og framgang tubulointerstitial fibrosis [167], er niðurbrot á litarefnisþekju sjónhimnunnar tengt sundurliðun á tengipróteinum, nefnilega ZO-1, E-cadherin, -catenin og occludin og að lokum örvun EMT [179 ]. Reyndar er EMT af RPE frumum talinn upphafs kveikja í tapi á þekjuheilleika og er knúin áfram af glúkósavakaðri breytingum á TGF [180]. Þar að auki, nýleg rannsókn Lyon o.fl. benti á að bólga ásamt blóðsykursskemmdum miðlar EMT á RPE með afbrigðilegri Cx43 miðlaðri heilarásarvirkni [50], á meðan peptíð 5 hindraði tap á ZO-1 tjáningu og endurheimtir RPE gegndræpi eins og mælt er með þekjumótstöðu [125]. Þessar rannsóknir styðja enn frekar við umfangsmikið starf á sviði connexin líffræði og augnlækninga, sem á undanförnum árum hefur bent á lykilsjúklega hlutverk connexin hemichannels í augnsjúkdómum [47].

Bæði in vitro [105] og in vivo [181] líkön af sjónukvilla af völdum sykursýki hafa verið notuð til að meta hlutverk Cx43 miðlaðra samskipta þegar þau eru meðhöndluð með IL1ß og TNF í nærveru hás glúkósa. Með því að nota einræktar litarefnisþekjufrumur úr sjónu (ARPE-19) og NOD mýs, Mugisho o.fl. sýnt fram á að þessar frumur sýna aukna tjáningu á Cx43, áhrifum sem versna í nærveru bæði glúkósa og bólgu. Þessi aukna tjáning Cx43 var samhliða aukinni seytingu bólgueyðandi frumuefna (interleukin-6, interleukin-18, monocyte chemoattractant prótein-1 og millifrumu viðloðunsameind 1), æðavaldandi stuðla að VEGF [181 ] og downstream extracellular matrix prótein kollagen-IV [125]. Ennfremur, með sönnunargögnum um að þessar frumur gefa frá sér hækkuð magn af ATP, ákváðu höfundarnir í kjölfarið að þessi áhrif væru sljóvuð í nærveru Cx43 hemichannel blocker Peptide 5, á meðan utanaðkomandi notkun ATP og endurheimt svörunar staðfesti enn frekar hlutverk Cx43 í akstri. þessar in vitro athuganir [105,125]. In vivo Cx43 tjáning jókst bæði í Akimba (þó ekki Akita) músinni, á meðan aukin tjáning sást einnig í sjónhimnu gjafa með staðfesta sjónhimnukvilla af völdum sykursýki samanborið við aldurssamsvörun viðmiðunarhópa [182]. Að auki, og byggir á in vitro athugunum sínum, þróaði teymið in vivo líkan af sjónukvilla af völdum sykursýki þar sem bólgueyðandi frumudrepum, IL1 og TNF, var sprautað í glerung NOD músa. Niðurstöður sýndu að inndæling í glerhlaupssýtókínum í þessar mýs olli fjölda þátta sem skaðleg voru vefjastarfsemi, þar á meðal alvarlega ofendurspeglunarbrennisteina í gleri, útvíkkun æða, uppstýringu bjúgsmíkrógljáa [183]. Með fyrri vísbendingum um að peptíð 5 hafi getað komið í veg fyrir Cx43 miðlaðan æðaleka og ganglion frumudauða í sjónhimnu eftir blóðþurrðarskaða í sjónhimnu hjá rottum [159], var peptíð 5 gefið þessum NOD músum og byggingar- og virknibreytur skráðar. Inndæling peptíðs 5 bætti marktækt útvíkkun og perlumyndun í æðum, minnkaði vökvasöfnun undir sjónhimnu, minnkaði innrennsli smáglíunnar inn í ytra kjarnalagið og minnkaði tjáningu á bæði NLRP3 og aðlögunarpróteininu ASC, en hið síðarnefnda bendir til tengsla milli Cx43 hálfrása og virkjun bólguferlisins [182].

Þar sem NLRP3 inflammasome er óaðskiljanlegur miðill fyrir meðfædda ónæmissvörun okkar, var tengslin á milli afbrigðilegrar Cx43 hemichannel miðlaðrar ATP losunar og virkjunar NLRP3 inflammasomes könnuð frekar in vitro, þar sem NLRP3 flókið samsetning, caspase 1 virkjun og IL1 seytingu var læst í meðhöndlun. ARPE-19 frumur ræktaðar með peptíð 5 [105]. Að sama skapi verndaði Cx43 hemichannel blocker, Tonabersat (Xiflam) einnig gegn sjónhimnuskaða með því að hindra Cx43 miðlaða ATP losun, NLRP3 bólgueyðandi virkjun og losun bólgueyðandi miðla, td IL1 , IL6 og VEGF, í bæði hámeðhöndluðum ARPE{{16} } frumur [50] og í lífrænum sjónhimnuútgræðslu úr mönnum [184]. Blokkun á NLRP3 inflammasome auk þeirra atburða sem lýst er hér að ofan dró úr ónæmissvörun, minnkaði þróun slagæðagúlps og endurheimti frumuvirkni. Í ljósskemmdu albínórottulíkani af sjónukvilla af völdum sykursýki, þegar það var meðhöndlað með annaðhvort Peptide 5 [126] eða Tonabersat [185] fylgdu breytingarnar á ljósviðtakavirkni og gegndræpi í æðum minni hraða sjúkdómsframvindu [185].

Þótt óumdeilt sé að vísbendingar um hlutverk Cx43 hemichannels við að knýja fram meinafræði sjónukvilla af völdum sykursýki, hefur einnig verið greint frá tapi á starfsemi vefja sem svar við breyttu GJIC. Við aðstæður blóðsykursskaða minnkar Cx43 gap junction tenging í háræðum í sjónhimnu frá fólki með sykursýki [185,186], örvascular æðaþelsfrumum rotta [187] og í pericytes [188]. Afleiðingar þessara breytinga tengdust frumudauði æðaþelsfrumna [187], dauða pericyta [186,188] og myndun frumuháræða [187]. Með vísbendingum um að Danegaptide veitir vernd í in vitro líkönum af sykursýkisnýrnakvilla og sjónukvilla af völdum sykursýki [135,188], hefur tvípeptíðið sérstaklega verið sýnt fram á að viðhalda gap junction tengingu milli æðaþelsfrumna þrátt fyrir mikla glúkósaálag, eins og metið er með því að nota skrapálagslitaflutning. Í aðal æðaþelsfrumum í sjónhimnu rotta, mótaði Danegaptide háa glúkósaframkallaða aukningu á frumudauða og gegndræpi frumna [188], og undirstrikaði þannig enn frekar efnileg áhrif við að stjórna Cx43 miðluðum samskiptum með mótun á virkni þeirra með hermipeptíðum.

Stuðningsþjónusta Wecistanche-Stærsti cistanche útflytjandi í Kína:

Netfang:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Sími:+86 15292862950

Verslaðu fyrir frekari upplýsingar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-búð

SMELLTU HÉR TIL AÐ FÁ NÁTTÚRULEGA LÍFFRÆNT CISTANCHE ÚTDRÆT MEÐ 25% ECHINACOSIDE OG 9% ACTEOSIDE FYRIR NÝRAVERKUN