Cistanche Deserticola fjölsykrur hafa taugaverndandi áhrif

fyrir frekari upplýsingar:Ali.ma@wecistanche.com

Yue Liu, o.fl

Ágrip:

Blóðþurrð heilablóðfall er sjúkdómur með háum sjúkdómum og dánartíðni.Cistanchedeserticolafjölsykrur(CDP) hefur margs konar jákvæð áhrif, þar á meðal lifrarvernd og ónæmisjafnvægi. Svo langt sem við vitum, verndandi áhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)á taugafrumum sem slasast af súrefnis-glúkósaskorti/endurflæði (OGD/RP) hefur ekki verið rannsakað. Í þessari rannsókn meiddi OGD/RP PC12 frumulíkan. Í stuttu máli, CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)({{0}}.05, 0.5 og 5 ug/ml) var gefið fyrir endurflæði. Verndaráhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)var síðan metið á grundvelli lífvænleika frumna, laktat dehýdrógenasa (LDH) leka, [Ca2 plús ] I, hvatberahimnugetu (MMP) og frumudauða, andoxunarstöðu eftir endurflæði var metið með því að greina hvarfgjörn súrefnistegundir (ROS), katalasa ( CAT), glútaþíon peroxidasi (GSH-Px) og heildar andoxunargeta. Byggt á því að Parkinsons-sjúkdómstengd prótein DJ-1 tekur þátt í innrænni andoxun og framkvæmirtaugaverndandiáhrifum eftir blóðþurrðaráfall, könnuðum við samspil CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)og DJ{{0}}. DJ-1 tjáning var greind með ELISA og Western blot greiningu, og flutningur á DJ-1 var metinn með ónæmisflúrljómun. Niðurstöður sýndu að CDP (0.05, 0.5 og 5 ug/ml) dró úr PC12 frumudauða, varðveitti MMP og kalsíumjafnvægi; hamlaði oxunarálagi og minnkaði frumufrumu. Þar að auki örvaði CDP (5 ug/ml) verulega seytingu og tjáningu DJ-1. Á heildina litið bentu niðurstöðurnar til þess að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)beitir ataugaverndandiáhrif gegn OGD/RP-völdum meiðslum með því að hindra oxunarálag og stjórna DJ-1 ferli

Leitarorð:Cistanche deserticola, fjölsykrur, taugavörn, súrefnisskortur/endurflæði glúkósa, oxunarálagDJ-1

Smelltu til að Cistanche UK vörur

1. Inngangur

Heilablóðþurrð er önnur helsta orsök dánartíðni og aðalorsök langvarandi fötlunar á heimsvísu [1]. Búist er við að dauði af völdum heilablóðfalls muni hækka í 7,8 milljónir árið 2030 [2]. Í Kína, 58 til 142 af hverjum 100,000 deyja árlega úr heilablóðfalli. Þannig þarf að þróa árangursríkar aðferðir sem snúa við blóðþurrðar-endurflæðisskaða. Víðtækar vísbendingar styðja að oxunarálag sé stór þáttur sem stuðlar að þróun og framgangi heiladreps við endurflæði [3,4]. Þess vegna uppgötva árangursríkttaugaverndandiefni sem geta dregið úr ROS og bæla niður oxunarálag hefur vakið töluverðan áhuga á rannsóknum. Parkinsons-sjúkdómstengd próteinDJ-1 miðlar taugavernd með því að örva and-apoptótísk og andoxunargenatjáningu [4,5]. DJ-1 er hægt að flytja inn í hvatberana með oxunarálagi og hvatógenörvun og hægt er að seyta hann til utanfrumufylkis við meinafræðilegar aðstæður, svo sem brjóstakrabbamein, sortuæxli og OGD/RP meiðsli [6]. Þar að auki er DJ-1 gagnlegt við meðferðarmiðun fyrir blóðþurrðartaugahrörnun vegna mikilvægs hlutverks í andoxun [4,7]. Undanfarin 10 ár hafa nokkrir hópar staðfest að DJ-1 hafi gert þaðtaugaverndandiáhrif á in vivofocal blóðþurrðarlíkön í heila og in vitro OGD/RP líkön [6–9]. Á sama tíma koma sum lyf, þar á meðal sýklósporín A og natríumfenýlbútýrat, í veg fyrir dauða taugafrumna með DJ-1 uppstýringu blóðþurrðar heilablóðfalls [9,10 ].

Cistanchedeserticola, óaðskiljanlegur þurrkaður planta afCistanchedeserticolaYCMa og Cistanche tubulosa Wight, er aðallega framleitt á eyðimerkursvæðum norður og norðvestur Kína [11]. C. deserticola er ætur og hefur verið heiðrað sem 'Ginseng eyðimerkuranna'. Í lyfseðli á nálastungupunkti er bólgur notað sem meðferð við langvinnum nýrnasjúkdómum, kynferðislegu getuleysi, ófrjósemi kvenna, hvítblæði, blóðþurrð og hægðatregðu öldrunar [12].C. deserticola fjölsykrur, aðal virkur efnisþáttur einangraður úrCistanche deserticola. CDP, mótar ónæmisvirkni og fitujafnvægi og veitir vörn gegn öldrun, oxun og lifrarskemmdum. Þar að auki, CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)kemur í veg fyrir blóðþurrðar-endurflæðisskaða í hjarta og lifur [13,14]. Nýlegar rannsóknir greindu frá því að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)eru óeitruð[12,15,16], og önnur plöntuefna unnin úr C. Deserticola, þar á meðal echinacoside, isoacteoside, acteoside og salidroside, sýnataugaverndandiáhrif [11,12]. Hins vegar hefur ekki verið greint frá hugsanlegri notkun CDP til að bæta skaða á heilablóðþurrð.

Í þessari rannsókn gerum við tilgátu um að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hamlar oxunarálagi fyrir taugavernd. Hugsanleg verndandi áhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)heilablóðfallsskemmdir voru skoðaðar með því að nota OGD/RP slasaðar PC12 frumur. Undirliggjandi samskipti sem tengjast DJ-1 voru síðan könnuð.

2. Aðferðir

2.1. Frumuræktun og OGD/RP líkan

PC12 frumur voru ræktaðar í RPMI 1640 miðli sem innihélt 10 prósent FBS við 37 gráður í normoxic hitakassa sem innihélt 5 prósent CO2. Skipt var um miðil á 48 klst. OGD/RP líkan var útbúið. PC12 frumurnar voru þvegnar og útsettar fyrir Earle's jafnvægissaltlausn. Síðan voru frumurnar fluttar í loftfirrt hólf sem innihélt 5 prósent CO2 og 95 prósent N2 við 37 gráður í 4 klst og síðan leyft að gangast undir endursúrefni. Á þessu skrefi var sama rúmmáli af ræktunarmiðli bætt við frumurnar. Eftir endursýringu voru frumurnar settar á normoxic hitakassa í 24 klst.

2.2. Lyfjagjöf

CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)var keypt frá Yuanye Biological Technology Co., Shanghai, Kína (C23J7Y18405, > 98 prósent hreinleiki). Nimodipin, fyrsta fyrirbyggjandi lyfið við heilablóðþurrð, var notað sem jákvætt viðmiðunarefni [17-19]. Nimodipin inndæling var frá Bayer Company.Frumum var skipt af handahófi í sex hópa, þ.e. samanburðarhópa, vehicle (OGD/RP), Nimo (5 ug/ml), CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)(0.05 ug/ml), CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)(0.5 ug/ml) og CDP (5 ug/ml). Nimodipin og CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)var bætt við fyrir endurflæði. Samanburðarhópurinn var ræktaður í venjulegum miðli og ræktaður við eðlilegt eiturástand.

2.3. Frumulífvænleiki: MTT og NRU próf

PC12 frumum (6 × 103 í hverri brunn) var sáð í 96-brunn ræktunarplötu. Frumurnar voru meðhöndlaðar í samræmi við kröfur hvers hóps. MTT (Solarbio, Kína) var bætt við frumurnar í styrkleikanum 5 mg/ml og ræktað í 4 klst við 37 gráður. Formazan er afoxunarafurð súksínat dehýdrógenasa í lifandi frumum [20]. DMSO var bætt við til að leysa upp myndað blátt formazan. Frásog við bylgjulengd 490 nm var greind með Microplate Reader (Thermo, USA) eftir að frumurnar voru hristar í 10 mínútur við 25 gráður. Niðurstöður frumunnar komu fram sem hlutfall af samanburðarhópnum [21].

Greining á hlutlausri rauðri upptöku (NRU) var gerð samkvæmt áður birtri siðareglum [22]. Þegar endurflæðistímabilum var lokið var hlutlausu rauðu (Solarbio, Kína) bætt við frumurnar í styrkleikanum 50 ug/ml. Blandan var ræktuð í 3 klst. Síðan voru frumurnar þvegnar hratt af með lausn sem innihélt 0,5 prósent formaldehýð og 1 prósent kalsíumklóríð. Frumunum var síðan bætt við blöndu sem innihélt 1 prósent etýlsýru og 50 prósent vatnsfrítt etanól. Plötur voru lesnar við 540 nm gleypni eftir að frumurnar voru hristar í 20 mínútur við 37 gráður. Niðurstöður lífvænleika frumna komu fram sem hlutfall af samanburðarhópnum.

Cistanche deserticola fjölsykrurhafa aTaugaverndandi áhrif

2.4. Mat á frumueitrun

LDH er umfrymisensím sem hvatar oxun laktat topyruvats. LDH losnar hratt út í utanfrumuvökvann þegar frumuhimnan er skemmd. Þess vegna er LDH uppgötvun venjulega framkvæmd til að meta frumudrepandi áhrif. [23]. Tilraunaaðferðin fylgdi leiðbeiningum um verslunarsett frá LDH prófunarbúnaðinum (Jiancheng, Kína). Frásog hvers sýnis var greint við 440 nm með örplötulesara. Hlutfall frumudauða var reiknað út með því að nota eftirfarandi formúlu: Lífvænleiki (prósent)=(OD-meðferð − ODT-meðferð auð)/(OD Max LDH virkni − OD Max LDH virkni auð) × 100 prósent.

2.5. Greining á innanfrumu Ca2 plús styrk

Innanfrumustyrkur Ca2 plús var mældur með Fluo-3/AM [15]. PC12 frumurnar voru þvegnar með PBS þrisvar sinnum og síðan ræktaðar með 2 μM Fluo -3/AM (Beyotime, Kína) í 30 mínútur við 37 gráður í myrkri. Frumurnar voru síðan þvegnar með PBS þrisvar sinnum til að hreinsa utanfrumu litarefni. Flúrljómunarstyrkur Fluo-3/AM var ákvörðuð með leysiskönnun confocal smásjá (Olympus, Japan). Hugbúnaðarpakki Olympus FV10-ASW 4.1 Viewer og ImageJvoru notaðir til að reikna út grákvarðagildi

2.6. Mæling á MMP

JC-1 (5,5',6,6'-tetraklór-1,1',3,3'-tetraethyl-imidacarbocyanine; Beyotime, Kína) er hentugur spennanæmur rannsakandi sem almennt er notaður til litunar frumur og meta MMP [24]. PC12 frumurnar voru þvegnar tvisvar með köldu PBS og síðan ræktaðar með blöndu sem innihélt 50 prósent miðil og 50 prósent vinnuvökva í 15 mínútur við 37 gráður í myrkri. Síðan var blöndunni hent og skipt út fyrir ferskan miðil. Rauðgrænar flúrljómunarmyndir voru teknar með leysiskönnun, samfókus smásjá. Hlutfallslegt hlutfall rauðra og grænna flúrljómunarmerkja var notað fyrir MMP mælingar [25]. HugbúnaðarpakkiOlympus FV10-ASW 4.1 Viewer og ImageJ voru notuð til að reikna út grákvarðagildi.

2.7. Apoptosis uppgötvun próf, Hoechest33342, og frumuflæðisgreining

Hoechst33342, DNA bindandi litarefni, var notað til að kanna frumudreifingu [26]. Eftir endurflæði voru PC12 frumurnar þvegnar með PBS þrisvar sinnum og ræktaðar með Hoechst33342 (Beyotime, Kína) í styrk 5 ug/ml í 15 mínútur við 37 gráður í myrkri. Síðan sáust frumurnar undir leysiskönnun confocal smásjá. Theapoptotic frumur sýndu mikla bláa flúrljómun og kjarnaþéttingu. Fyrir hverja litunartilraun voru þrjú tilviljunarkennd svið tekin og magngreind. Olympus FV10-ASW 4.1 Viewer og ImageJvoru notuð til að reikna út grákvarðagildi. Hlutfall apoptotic frumna var reiknað með eftirfarandi formúlu: apoptotic magn/heildarmagn × 100 prósent [27].

2.8. Mæling á ROS kynslóð

Flúrljómandi rannsakandi 2',7'-díklórflúorljómandi-díasetat (DCFH-DA; Jiancheng, Kína) getur farið í gegnum frumuhimnur og hægt að vatnsrofsa í flúrljómandi DCFH. DCFH er oxað með innanfrumu ROS til flúrljómandi DCF [29]. Eftir endurflæði voru frumurnar þvegnar tvisvar með PBS og síðan ræktaðar með DCFH-DA við lokastyrk 10 μM í 45 mínútur við 37 gráður í myrkri. Flúrljómun sást með flúrljómunarlitrófsmæli með örvunarbylgjulengd 485 nm og losunarbylgjulengd 535 nm.

Cistanche deserticola fjölsykrurhafa aTaugaverndandi áhrif

2.9. Ákvörðun oxunarálagsvísa: CAT, GSH-Px og T-AOC stig

Frumurnar voru skafnar og endursviflausnar í PBS. Frumusvlausnir sem fengust voru hljóðbeittar 45 sinnum á ís og skildar í skilvindu við 1000 r/mín í 10 mínútur við 4 gráður. Vökvanum var haldið eftir og notað til að greina [24]. Heildarpróteininnihald frumufrumvökvans var mælt með BCA próteinprófunarsetti (KeyGEN, Kína). Virkni CAT, GSH-Px og T-AOC stiga var mæld samkvæmt leiðbeiningum framleiðenda (Jiancheng, Kína). Frásog hvers sýnis var greint með örplötulesara.

2.10. Mæling á utanfrumu DJ-1 styrk

PC12 frumum (6 × 103 í hverri brunn) var sáð í 96-brunn ræktunarplötur. Í kjölfar endurflæðis var frumuofnum safnað og greind með DJ-1/PARK-7 ELISA Kit (Raybio, Bandaríkjunum ) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda [9]. Gleypi hvers sýnis var greint með Microplate Reader við tvíbylgjulengd 450 nm eða 540 nm.

2.11. Western blot greining

Frumuprótein voru dregin út með ísköldu lýsisbuffi samkvæmt leiðbeiningum framleiðenda (KeyGEN, Kína). Próteinstyrkur var ákvarðaður með BCA próteinprófunarsetti. Jafnt magn af próteinlýsum (20 ug) úr hverjum hópi var leyst upp í 12 prósent natríumdódecýlsúlfat-pólýakrýlamíð hlaup rafskaut og síðan flutt yfir á nítrósellulósahimnu. Himnan var ræktuð með PBS sem innihélt 5 prósent undanrennu í 2 klst við stofuhita og síðan rannsakað með and-PARK7/DJ-1 mótefnum (ab76008, Abcam; þynning 1:1000) yfir nótt við 4 gráður. Síðan var himnan þvegin þrisvar sinnum með PBST og ræktuð með annars konar geit-anti-kanínu IgG (SA00001-2, Proteintech Group; þynning 1:5000) við stofuhita í 2 klst. Mótefnamótefnið- -Tubulin (10759-1-AP, Proteintech Group; þynning 1:1000) var talið vera viðmiðunarefnið. Próteinbönd voru sýnd með aukinni efnaljómun (ECL) hvarfefnum. Bandþéttleiki var mældur með QuantityOne Analysis hugbúnaði v.4.6.9.

2.12. Ónæmisfrumuefnagreining

PC12 frumurnar voru festar í 4 prósent paraformaldehýði í 15 mínútur við stofuhita eftir endurflæðismeðferðina [9]. Eftir að of mikið paraformaldehýð var fjarlægt voru frumurnar ræktaðar í PBS sem innihélt 0,3 prósent Triton X-100 í 10 mínútur við stofuhita. Síðan voru frumurnar þvegnar með PBS þrisvar sinnum áður en þær voru ræktaðar með 5 prósent venjulegu geitasermi í 1 klst. Frumurnar voru síðan ræktaðar með einstofna and-ATP synthasa-keðju kanínumúsa (MABS1304, EMD Millipore, þynning 1:200) til litunar á hvatberum og síðan ræktaðar með and-PARK7/DJ-1 mótefni (þynning 1: 100) til að rannsaka prótein DJ-1. Frumurnar voru þvegnar og ræktaðar með geita-anti-kanínu IgG-Alexa 488 (grænt; A11034, Invitrogen; þynning 1:1000) og geita-anti-mús IgG-Alexa 594 (rautt; A11032; Invitrogen; þynning 1:1000) fyrir 1:1000 mín. Að lokum voru frumurnar þvegnar þrisvar sinnum með PBS og settar á glerglas með festingarmiðli sem innihélt DAPI. Ónæmisflúrljómandi myndir voru sýndar með því að nota Laser Scanning Confocal Microscope.

Cistanche deserticola fjölsykrurhafa aTaugaverndandi áhrif

2.13. Gögn/tölfræðigreining

Öll gildi voru sýnd sem meðaltal ± SD. Marktekt var ákvörðuð með einstefnugreiningu á dreifni (ANOVA), fylgt eftir með Dunnett's multi-samanburðarprófi. p < .05="" var="" talið="" tölfræðilega="" marktækt.="" tilraunagögn="" voru="" greind="" með="" spss="" 17.0="">

3. Úrslit

3.1. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hindrað OGD/RP-framkallaða frumuskemmdir

PC12 frumurnar sem urðu fyrir OGD/RP sýndu marktæka fækkun í fjölda. Form frumunnar var breytt og frumuhimnan brotnaði. Í MTT prófinu eru frumulífvænleikar í CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópar ({{0}},05, 0,5 og 5 ug/ml) voru 58,91 prósent ± 5,40 prósent, 61,13 prósent ± 3,81 prósent og 68,57 prósent ± 3,24 prósent í sömu röð, p < 0,05="" (mynd="" 1a)="" ,="" og="" það="" með="" ökutæki="" hafði="" 51,68="" prósent="" ±="" 3,89="" prósent.="" þessi="" gildi="" gáfu="" til="" kynna="" að="">(Cistanchedeserticolafjölsykrur)verndaði frumurnar gegn OGD/RP meiðslum og minnkaði frumudauða. Ennfremur var lífvænleiki frumna í Nimo hópnum 77,02 prósent ± 5,22 prósent, sem er næstum því jafnt og í 5 ug/ml CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)meðhöndlaður hópur.

Í NRU prófinu eru frumulífvænleikar í CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópar ({{0}},05, 0,5 og 5 ug/ml) voru 52,03 prósent ± 4,72 prósent, 58,49 prósent ± 2,50 prósent og 69,17 prósent ± 3,91 prósent, í sömu röð, (mynd 1B) og það með ökutæki var með 47,14 prósent ± 2,88 prósent. Gildin gáfu til kynna styrkleikaháð verndaráhrif CDP.

Öfugt við burðarefni (44,73 prósent ± 3,30 prósent) minnkaði LDH losun verulega í CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópa. Í CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópa ({{0}}.05, 0.5 og 5 ug/ml), LDH lekahlutfall var 32.41 prósent ± 3.70 prósent, 27.13 ± 2.79 prósent og 23.13 prósent ± 4.59 prósent í sömu röð, p < .01="" (mynd="" 1c).="" þar="" að="" auki="" var="" ldh="" lekahlutfall="" í="" nimo="" hópnum="" 21,99="" prósent="" ±="" 4,02="" prósent,="" sem="" var="" næstum="" því="" jafnt="" og="" í="" hópnum="" sem="" fékk="" 5="" ug/ml="" cdp="">

3.2. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)veikt OGD/RP-framkallað aukning á [Ca2 plús ]i

Innanfrumu Ca2 plús gildi í PC12 frumum voru aukin í 4146,60 ± 195,97 eftir OGD/RP áverka í mótsögn við samanburðarhópinn (373,62 ± 75,69). CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópar ({{0}}.05, 0.5 og 5 ug/ml) gætu minnkað innanfrumu Ca2 plús magn í 2921.25 ± 222.19, 2015.85 ± 230.53 og 1768.43 ± 426.12 í sömu röð (Fig. ). Þar að auki lækkaði Ca2 plús magn í 5 ug/ml CDP meðhöndluðum hópnum í sambærilegt magn og í Nimo hópnum (1591,19 ± 213,21).

3.3. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)veikt OGD/RP-framkallað losun MMP

Í samanburði við samanburðarhópinn (1,67 ± 0.89), sýndi ökutækjahópurinn (0.48 ± 0.10) meira grænt FL-flúrljómun en rautt FL flúrljómun (mynd 2B og D). Hlutföllin milli rauðs og græns FL flúrljómunar voru lækkuð í 1,11 ± 0,26 og 1,18 ± 0,16 í 0,5 og 5 ug/ml CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)meðhöndlaðir hópar í sömu röð, p < 0,01.="" grænt="" fl="" flúrljómun="" minnkaði="">

3.4. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)kom í veg fyrir frumufrumumyndun af völdum OGD/RP

Frumur sem sýndu þétt litninga eða sundraða kjarna voru skornar sem apoptotic frumur [30]. Hoechst33342 prófunarniðurstöður leiddu í ljós útlit þéttra kjarna eftir OGD/RP (mynd 3A og C). Hár FL flúrljómunarstyrkur sást í kjarna í burðarefnishópnum. FL flúrljómunarstyrkur kjarna veiktist í 5 ug/ml CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)meðhöndlaður hópur. Við greindum apoptotic hlutfall í PC12 frumum með náungi frumugreiningu með því að nota FITC-Annexin V/PI tvöfalda litun (mynd 3B og D). Samanburðarhópurinn var með 4,16 prósent ± 0,24 prósent frumudauða, en burðarefnishópurinn var með 22,98 prósent ± 0,66 prósent. Hjá 5 ug/ml CDP-meðhöndluðum hópnum var frumudrepunartíðni 7,86 prósent ± 1,16 prósent.

3.5. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)veikt OGD/RP framkallað innanfrumu ROS uppsöfnun og varðveitt redox ástand

Áhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)Sýnt var fram á oxunarálag á grundvelli ROS-myndunar, GSH-Px, CAT-virkni og T-AOC stigum. ROS gildi í OGD/RP-slösuðu PC12 frumunum jukust og urðu marktækt hærri en í samanburðarhópnum (p < .01).="" á="" sama="" tíma,="" ros="" stigin="" í="">(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópum ({{0}}.05, 0.5 og 5 ug/ml) fækkaði á skammtaháðan hátt (p <.01; mynd="" 4a).="" ennfremur="" jók="" cdp="" einnig="" verulega="" t-aoc="" (p="">< 0,05;="" mynd="" 4b),="" cat="" (p="">< 0,05;="" mynd="" 4c)="" og="" gsh-px="" (p="">< 0,05;="" mynd="" 4d)="" samanborið="" við="" ökutæki="" hóp.="" virkni="" innrænna="" andoxunarefna="" í="">(Cistanchedeserticolafjölsykrur)hópum fjölgaði.

3.6. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)örvaði seytingu DJ-1 og jók tjáningu DJ-1

DJ-1 styrkleikabreytingar í frumuvökvanum greindust og sýndu möguleg tengsl milli DJ-1 og CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur). DJ-1 losun sást frá OGD/RP-slösuðum PC12 frumum (mynd 5). DJ-1 var talsvert breytt í 5 ug/ml CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)-meðhöndlaður hópur (38,66 ± 8,44 pg/ml) og varð marktæk aukning en í burðarefnishópnum (18,33 ± 3,80 pg/ml, p < 0,01) og samanburðarhópnum (9,67 ± 3,96 pg/ml, p < 0,01) .

Til að kanna áhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)á innanfrumu tjáningu DJ-1, mældum við DJ-1 próteinmagn með Western blotting. DJ-1 próteintjáning jókst marktækt 24 klst. eftir endurflæði. Aftur á móti jók 5 ug/ml CDP eftirmeðferð marktækt oftjáningu DJ-1 samanborið við burðarefnishópinn (p <.01, mynd="">

3.7. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)aukin DJ-1 flutningur yfir í hvatberana

PC12 frumurnar voru litaðar með and-PARK7/DJ-1 og and-ATP synthasa-keðju mótefnum (myndir 7 og 8). And-ATP synthasa - keðja mótefnatenglar við hvatbera flókið I, og bindandi mótefnavakinn var staðbundinn í innri himnu hvatbera. Niðurstöður leiddu í ljós að DJ-1 færðist yfir í innri himnu hvatbera eftir OGD/RP móðgun (mynd 8). Á sama tíma sýndu DJ-1 og tvöföld litun í hvatberum að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)auðveldaði DJ- 1 hvatberaflutning og samstaðsetningu (mynd 8). Þessar niðurstöður gáfu til kynna bein samskipti milli DJ-1 ogtaugaverndandiáhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)(Mynd 9).

4. Umræður

Í þessari rannsókn greindum við frá fyrstu hendi að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)dregur á áhrifaríkan hátt úr OGD/RP-völdum PC12 frumuskemmdum með uppstýringu DJ-1 próteins. CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)bætt lífvænleika frumna, minni frumuhimnuskemmdir, viðhaldið innanfrumu Ca2 plús samvægi, kom í veg fyrir MMP tap, minnkað frumudauða, bæla oxunarálag, stuðlað að tjáningu DJ-1 og aukið DJ-1 flutning inn í hvatberana. DJ-1 hefur nýlega verið bendlaður við reglugerð umtaugaverndandiáhrif og heilleika hvatbera. Þessar niðurstöður gáfu sannfærandi sönnunargögn umtaugaverndandiáhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)gegn blóðþurrð. Ennfremur spilar samspil CDP og DJ-1 ataugaverndandihlutverk í OGD/RP-völdum PC12 frumuskemmdum. Ofangreindar niðurstöður geta þróað skilning okkar á jákvæðum áhrifum CDP og geta veitt gagnlegar upplýsingar fyrir meðferð á heilablóðfalli í framtíðinni.

Blóðþurrð heilablóðfall hefur verið rakið til flókinnar röð lífefna- og sameindaverkunar, þar á meðal örvunareitrun, kalsíumofhleðslu og oxunarálag [31]. OGD/RP er mikið notað sem in vitro líkan af blóðþurrð-endurflæði og er notað til að kanna tauga- og lífefnafræðilegar breytingar. PC12 frumulínan er viðkvæm fyrir OGD/RP meiðslum [2]. Það sýnir fjölda eiginleika og eiginleika sympatískra taugafrumna [32] og eru því mikið notaðar taugafrumulínur til rannsókna sem tengjast aðferðum taugaskemmda vegna heilablóðfalls [33,34]. Fjölmargar rannsóknir hafa gefið til kynna að oxunarálag gegni mikilvægu hlutverki í heilablóðþurrðskemmdum í heila [35-37]. Parkinsonsveiki-tengd prótein DJ-1 getur hamlað blóðþurrðartaugahrörnun og hegðunartruflunum með því að draga úr ROS-miðluðum taugafrumum [7]. Þess vegna notuðum við OGD/RP-skaða PC12 frumulíkanið til að rannsakataugaverndandiáhrif CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur).

Skaðastig í PC12 frumum af völdum OGD/RP var metið með MTT, NRU og LDH losunarprófum. Stjórn CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)({{0}}.05, 0.5 og 5 ug/ml) bætti lifun frumna og minnkaði losun LDH. Gagnleg áhrif CDP meðferðar voru einnig minnkun á kalsíumofhleðslu innanfrumu og varðveislu MMP. Óeðlilegt Ca2 plús styrkur innanfrumu, sérstaklega kalsíumofhleðsla í hvatberum, hefur verið tengt við frumudauða taugafrumu og dauða af völdum blóðþurrðar heilablóðfalls [38]. MMP getur endurspeglað skilvirkni rafeindaflutningakeðjunnar og hefur verið gefið til kynna sem meinafræðilegan sjúkdómsvísitölu þessa kerfis [39]. Bæði hækkun á innanfrumu Ca2 plús styrk og MMP tap getur leitt til óstöðugleika á uppbyggingu taugafrumna og að lokum leitt til frumuskemmda eða frumudauða [21,40]. Í þessari rannsókn sýndu niðurstöður að CDP hamlaði marktækt innanfrumu Ca2 plús ofhleðslu og jók MMP gildi í OGD/RP-meiðsla PC12 frumum. Apoptosis gegnir mikilvægu hlutverki í flókinni lífeðlisfræði blóðþurrðar-endurflæðisskaða í heila. Aukin gögn bentu til þess að frumudauði hafi verið bendluð við truflun á starfsemi hvatbera; losun MMP er snemma atburður sem leiðir til frumudauða [8,39]. Apoptosis er ferli orkuháðs forritaðs frumudauða til að losa sig við óþarfa frumur. Margar taugafrumur í blóðþurrðarslagi munu gangast undir frumudauða [41]. Í þessari rannsókn gerðum við Hoechst33342 og Annexin V-FITC/PI litun til að kanna áhrif CDP á frumudauða [23,28]. Niðurstöðurnar sýndu að CDP viðheldur heilleika kjarnans og dregur úr frumudreifingu. Allar þessar niðurstöður gáfu til kynna að and-apoptotic virkni CDP stuðlaði að jákvæðum áhrifum við taugafrumuskaða í PC12 frumum.

Frumur sem verða fyrir blóðþurrðarskemmdum af völdum of mikillar ROS uppsöfnunar, sem getur leitt til fituperoxunar, frumuhimnuskemmda, kalsíumofhleðslu og truflunar á starfsemi hvatbera, sem að lokum leiðir til frumudauða og dauða [42]. Neysla innrænna andoxunarefna, eins og SOD, CAT og GSH-Px, gaf einnig til kynna tilvikið.(Cistanchedeserticolafjölsykrur)gegn OGD/RP-völdum PC12 frumuskemmdum. Meðferð á CDP bælir oxunarálagi, kemur stöðugleika á Ca2 plús styrk og MMP, eykur DJ-1 tjáningu og staðsetningu í hvatberum. Y. Liu o.fl. Biomedicine & Pharmacotherapy 99 (2018) 671–680 678af oxunarálagi við blóðþurrð-endurflæði. Í þessari rannsókn sýndi OGD/RP hópurinn marktæka aukningu á ROS og lækkun á CAT, GSH-Px og T-AOC samanborið við 5 ug/ml CDP-meðhöndlaða hópinn. Hins vegar sáum við verulega lækkun á tíðni ROS-myndunar og neyslu innrænna andoxunarefna (CAT, GSH-Px og T-AOC) í CDP hópunum. Gagnlegu áhrifin í 5 ug/ml CDP hópnum voru nálægt þeim í Nimo hópnum. Niðurstöðurnar bentu til þess að CDP hamli myndun ROS og endurheimtir ensím andoxunarvörn.

DJ-1 er lykilafoxunarviðbrögðtaugaverndandiprótein sem tengist stjórnun á oxunarálagi í heilablóðfalli. Gagnleg áhrif oftjáningar DJ-1 eru meðal annars lifun frumna vegna blóðþurrðar-endurflæðis og varðveislu starfsemi hvatbera og formgerð, eins og að fella út gegndræpi hvatbera umbreytingarholaopnun [39,43]. Fyrri rannsóknir hafa gefið til kynna að verndandi áhrif DJ-1 í frumum sem verða fyrir OGD/RP tengist andoxunareiginleikum þess og umfærslu hvatbera [43-45]. DJ -1 framkvæmir skilvirka innræna taugavörn til að draga úr hvatberagöllum með flutningi [46]. Nokkrar rannsóknir hafa bent til þess að DJ-1 flutningur gæti haft áhrif á hreyfingu hvatbera, aukið samspil frumna og frumna og stuðlað að öðrum frumum sem stuðla að því að lifa af.

DJ-1 hefur áhrif á nokkra ferla, eins og frumuflutning og viðloðun, krabbameinslyf, fjölgun og frumudauða, bæði í in vitro og in vivo líkönum [6,9,47,48]. Með því að nota OGD/RP slasaða PC12 frumur heilablóðfallslíkan, könnuðum við hugsanlegt samband milli CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)og DJ-1. DJ- 1 oftjáning var auðkennd með ELISA og Western blotting. Samhliða þessari aðgerð sýndi mikilvæg niðurstaða í tilraununum að marktæk oftjáning DJ-1 átti sér stað þegar CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)(5 ug/ml) var gefið fyrir endurflæði. Þetta benti til mögulegstaugaverndandiáhrif í sambandi CDP og DJ-1. Þar að auki höfum við tekið eftir því að DJ-1 staðsettur í hvatberum við aðstæður OGD/RP og mikil tjáning DJ-1 minnkaði næmi frumna fyrir ROS og hamlaði oxunarálagi [45]. Niðurstöðurnar gáfu til kynna að CDP stjórnar og eykur DJ -1, sem virkar sem sameindatengiliður á milli truflunar hvatbera og oxunarálags og veitir framvindu aukafrumudauða sem fylgir heilablóðfalli [5,47,49-51]. Samhliða stöðugleika DJ-1 í hvatberum, CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)meðferð jók lifun frumna, stöðugt Ca2 plús samvægi, bætti MMP losun og kemur í veg fyrir hvatberatengda frumudauða [43]. Á heildina litið bentu niðurstöður okkar til þess að CDP beitir skáldsögutaugaverndandiverkunarháttur við meðhöndlun á heilablóðþurrð.

5. Niðurstaða

Niðurstöður okkar gáfu til kynna að CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)verndar PC12 frumur gegn OGD/RP-völdum meiðslum með andoxunaráhrifum sínum, sem að hluta til má rekja til DJ-1 miðlaðrar brautar. Þessi áhrif fela í sér minnkun á hraða frumuhimnuskemmda, varðveislu [Ca2 plús ] I samvægi, bata á losun MMP, hömlun á frumudapósu, dempun á innanfrumu ROS og mótun á DJ-1 stigum. Niðurstöðurnar bentu einnig til þess að samskipti CDP og DJ-1 magni taugavernd og viðhaldi heilleika hvatbera. Þess vegna er hægt að vernda viðkvæmar taugafrumur með CDP(Cistanchedeserticolafjölsykrur)með því að auka DJ-1 tjáningu meðan á heilablóðþurrð stendur.

Viðurkenningar

Þessi rannsókn var studd af National Natural Science Foundation of China (styrkur 81360649), National Science and Technology Key Program (styrkur 2015BAK45B01) og Ningxia Hui Autonomous Region Science and Technology Support Program (styrkur 2016BZ07).

Cistanche deserticola fjölsykrurhafa a Taugaverndandi áhrif

Heimildir

[1] HD Tsai, JS Wu, MH Kao, JJ Chen, GY Sun, WY Ong, TN Lin, Clinacanthus nutans verndar taugafrumur í heilaberki gegn eiturverkunum af völdum súrefnisskorts með því að minnka HDAC1/6, Neuromol. Med. 18 (2016) 274–282.

[2] J. Zhao, R. Liu, Stroke 1-2-0: hraðsvörunaráætlun við heilablóðfalli í Kína, Lancet Neurol. 16 (2017) 27.–28.

[3] PM George, GK Steinberg, Novel stroke therapeutics: unraveling heilablóðeðlisfræði og áhrif þess á klínískar meðferðir, Neuron 87 (2015) 297-309.

[4] H. Yao, T. Ago, T. Kitazono, T. Nabika, NADPH oxidasatengd meinalífeðlisfræði í tilraunalíkönum heilablóðfalls, Int. J. Mol. Sci. (2017) 18.

[5] J. Cao, M. Ying, N. Xie, G. Lin, R. Dong, J. Zhang, H. Yan, X. Yang, Q. He, B. Yang, Oxunarástand DJ{{ 1}} ráða örlögum frumunnar til að bregðast við oxunarálagi af völdum 4-hpr: autophagy eða apoptosis? Andoxunaroxunarmerki. 21 (2014) 1443–1459.

[6] Y. Kaneko, H. Shojo, J. Burns, M. Staples, N. Tajiri, CV Borlongan, DJ-1 bætir blóðþurrðarfrumudauða in vitro, hugsanlega í gegnum hvatbera, Neurobiol, Dis. 62 (2014) 56–61.

[7] D. Yanagisawa, Y. Kitamura, M. Indian, K. Takata, T. Taniguchi, S. Morikawa, M. Morita, T. Inubushi, I. Tooyama, T. Taira, o.fl., DJ{{ 1}} verndar gegn taugahrörnun af völdum staðbundinnar blóðþurrðar í heila og endurflæði í rottum, J. Cereb. Blóð flæði. Hitti. 28 (2008) 563–578.

[8] Y. Kaneko, N. Tajiri, H. Shojo, CV Borlongan, Súrefnis-glúkósa-svipt aðal taugafrumur rotta sýna DJ-1 umfærslu inn í heilbrigða hvatbera: öflugt heilablóðfallsmeðferðarmarkmið, CNS Neurosci. Þr. 20 (2014) 275–281.

[9] N. Tajiri, CV Borlongan, Y. Kaneko, Cyclosporine A meðferð stöðvar taugafrumudauða af völdum blóðþurrðar með því að varðveita heilleika hvatbera með uppstjórnun á Parkinsonsveiki tengdu próteini DJ -1, CNS Neurosci. Þr. 22 (2016) 602–610.

[10] RX Yang, J. Lei, BD Wang, DY Feng, L. Huang, YQ Li, T. Li, G. Zhu, C. Li, FF Lu, o.fl., Formeðferð með natríum fenýlbútýrati Dregur úr blóðþurrð í heila/ endurflæðisskaðar með því að hækka DJ-1 prótein, að framan. Neurol. 8 (2017) 256.

[11] C. Gu, X. Yang, L. Huang, Cistanches Herba. Taugalyfjafræðileg endurskoðun, Front. Pharmacol. 7 (2016) 289.

[12] Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao, CM Tzeng, Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): Ein af bestu lyfjagjöfum hefðbundinnar kínverskrar læknisfræði, Front. Pharmacol. 7 (2016) 41.

[13] Q. Liu, J. Li, J. Wang, J. Li, JS Janicki, D. Fan, Áhrif og aðferðir kínverskra jurtalækninga til að bæta blóðþurrð í hjartavöðva-endurflæðisskaða, Evid.- Based Compl. Alt. (2013) (2013) 925625.

[14] HS Wong, KM Ko, Herba Cistanches örvar frumu glútaþíon redox hringrás með hvarfgjörnum súrefnistegundum sem myndast úr hvatberaöndun í H9c2 hjartavöðvafrumum, Pharm. Biol. 51 (2013) 64–73.

[15] T. Wang, X. Zhang, W. Xie,Cistanchedeserticola YC Ma, "Desert ginseng": umsögn, Am. J. Chin. Med. 40 (2012) 1123–1141.

[16] L. Gu, WT Xiong, C. Wang, HX Sun, GF Li, X. Liu,Cistanchedeserticoladecoction dregur úr eiturverkunum á eistum af völdum hýdroxýúrea í karlkyns músum, asískum J. Androl. 15 (2013) 838–840.

[17] E. Herzfeld, C. Strauss, S. Simmermacher, K. Bork, R. Horstkorte, F. Dehghani, C. Scheller, Rannsókn átaugaverndandiáhrif nimodipins á Neuro2a frumur með skurðaðgerðarlíku streitulíkani, Int. J. Mol. Sci. 15 (2014) 18453–18465.

[18] G. Vahabzadeh, N. Rahbar-Roshandel, SA Ebrahimi, M. Mahmoudian,Taugaverndandiáhrif noscapins á súrefnis-glúkósaskortsskaða í heila, Pharmacol. 67 (2015) 281–288.

[19] CP Wang, LZ Zhang, GC Li, YW Shi, JL Li, XC Zhang, ZW Wang, F. Ding, XM Liang, Mulberroside A verndar gegn blóðþurrðarskerðingu í frumræktun á taugafrumum í heilaberki rotta eftir að súrefnis-glúkósaskortur fylgdi í kjölfarið by reperfusion, J. Neurosci. Res. 92 (2014) 944–954.

[20] X. Qi, R. Zhou, Y. Liu, J. Wang, WN Zhang, HR Tan, Y. Niu, T. Sun, YX Li, JQ Yu, Trans-cinnamaldehyde vernduðu PC12 frumur gegn súrefnis- og glúkósaskorti /endurflæði (OGD/R) af völdum meiðslum með andstæðingi frumudauða og andoxunarálagi, Mol. Cell Biochem. 421 (2016) 67–74.

[21] R. Chang, R. Zhou, X. Qi, J. Wang, F. Wu, W. Yang, W. Zhang, T. Sun, Y. Li, J. Yu, Verndaráhrif alóíns á súrefni og skaði af völdum glúkósaskorts í PC12 frumum, Brain Res. Naut. 121 (2016) 75–83.

[22] M. Agrawal, V. Kumar, AK Singh, MP Kashyap, VK Khanna, MA Siddiqui, AB Pant, Trans-resveratrol verndar blóðþurrðar PC12 frumur með því að hamla súrefnisskorti tengdum umritunarþáttum og auka magn andoxunarvarnansíma, ACS Chem. Neurosci. 4 (2013) 285–294.

[23] KW Zeng, LX Liao, MB Zhao, FJ Song, Q. Yu, Y. Jiang, PF Tu, Protosappanin B verndar PC12 frumur gegn súrefnis-glúkósasviptingu af völdum taugafrumnadauða með því að viðhalda hvatberajafnvægi með örvun á ubiquitin háðum p53 prótein niðurbrot, Eur. J. Pharmacol. 751 (2015) 13–23.

[24] NT Ma, R. Zhou, RY Chang, YJ Hao, L. Ma, SJ Jin, J. Du, J. Zheng, CJ Zhao, Y. Niu, o.fl., Protective effectfffects of aloperine on neonatal rat primary ræktaðar hippocampal taugafrumur skaddaðar vegna súrefnis-glúkósa skorts og endurflæðis, J. Nat. Med. 69 (2015) 575–583.

[25] Y. Wang, W. Ma, A. Jia, Q. Guo, Parecoxib verndar taugafrumur í heilaberki músa gegn OGD/R af völdum taugaeiturhrifum með því að uppstilla Bcl-2, Neurochem. Res. 40 (2015) 1294–1302.

[26] MP Ponnusamy, P. Seshacharyulu, A. Vaz, P. Dey, SK Batra, MUC4 kemur stöðugleika á HER2 tjáningu og viðheldur stofnfrumustofni krabbameins í krabbameinsfrumum í eggjastokkum, J. Ovarian Res. 4 (2011) 7.

[27] R. Wang, L. Peng, J. Zhao, L. Zhang, C. Guo, W. Zheng, H. Chen, A. Gardenamide, Verndar RGC-5 frumur frá H(2)O( 2) völdum oxunarálagsmóðgunum með því að virkja PI3K/Akt/eNOS boðleið, Int. J. Mol. Sci. 16 (2015) 22350–22367.

[28] LP Sun, X. Xu, HH Hwang, X. Wang, KY Su, YL Chen, Díklórmetan útdrættir af própóli vernda frumuna gegn súrefnis-glúkósasviptingu af völdum oxunarálags Y. Liu o.fl. Biomedicine & Pharmacotherapy 99 (2018) 671–680 679með því að draga úr frumudauða, Food Nutr. Res. 60 (2016) 30081.

[29] L. Wang, Y. Zhang, T. Asakawa, W. Li, S. Han, Q. Li, B. Xiao, H. Namba, C. Lu, Q. Dong,Taugaverndandiáhrif neuroserpin í súrefnis-glúkósasviptingu og endursúrefnismeðhöndluðum stjörnufrumum í rottum in vitro, PLoS One. 10 (2015) e0123932.

[30] Z. Zhiwen, W. Haitao, S. Fu, Z. Lihua, JL Peter, Q. Remi, Z. Wenhua, Litíumjónir draga úr sermisþurrð af völdum frumudauða í PC12 frumum með stjórnun á Akt/FoxO1 merkingum. pathways, Psychopharmacology (Berl) 12 (2015) 625–633.

[31] EJB Dariush Mozaffffarian, S. Alan, o.fl., Samantekt hjartasjúkdóma og heilablóðfallsuppfærslu 2016. Skýrsla frá American Heart Association, Circulation 133 (2016) 447–454.

[32] JE Jumblatt, TA, Reglugerð múskarínbindandi bindisstaða með taugavaxtarþáttum í PC12 phaeochromocytoma frumum, Nature 297 (1982) 152-154.

[33] S. Afrazi, S. Esmaeili-Mahani, V. Sheibani, M. Abbasnejad, Taugastera allopregnanolone dregur úr háglúkósa völdum frumudauða og kemur í veg fyrir tilrauna sykursýki taugaverkjum: in vitro og in vivo rannsóknir, J. Steroid Biochem. Mol. Biol. 139 (2014) 98–103.

[34] X. Liu, X. Zhu, M. Chen, Q. Ge, Y. Shen, S. Pan, Resveratrol verndar PC12 frumur gegn OGD/R-framkallaðri frumufrumu í gegnum hvatbera-miðlaða boðleið, Acta Biochem Biophys Sin . 48 (2016) 342–353.

[35] PW Kleikers, K. Wingler, JJ Hermans, I. Diebold, S. Altenhofer, KA Radermacher, B. Janssen, A. Gorlach, HH Schmidt, NADPH oxidasar sem uppspretta oxunarálags og sameindamarkmiðs í blóðþurrð/endurflæði. meiðsli, J. Mol. Med. (Berl) 90 (2012) 1391–1406.

[36] FC Liu, HI Tsai, HP Yu, Líffæraverndandi áhrif rauðvínsþykkni, resveratrol, við endurflæðisskaða sem miðlað er af oxunarálagi, Oxid. Med. Cell Longev. (2015) 568634.

[37] LK Seidlmayer, VV Juettner, S. Kettlewell, EV Pavlov, LA Blatter, EN Dedkova, Distinct mPTP virkjunarkerfi í blóðþurrð-endurflæði: framlag Ca2 plús plús , ROS, pH, og ólífrænt fjölfosfat, hjarta- og æðakerfi. Res. 106 (2015) 237–248.

[38] F. Su, AC Guo, WW Li, YL Zhao, ZY Qu, YJ Wang, Q. Wang, YL Zhu, Lágskammta etanól formeðferð verndar gegn súrefnis-glúkósasviptingu/ endursúrefnisvakaðri taugafrumuskaða með því að virkja stórleiðni , Ca2 plús plús -virkjað K plús plús rásir In Vitro, Neurosci. Naut. 33 (2017) 28–40.

[39] Y. Li, M. Wang, S. Wang, Áhrif hamla hvatbera sundrun á orkuefnaskipti í hippocampal taugafrumum rotta við blóðþurrð/endurflæðisskaða, Neurol. Res. (2016) 1–8.

[40] C. Rui, L. Yuxiang, H. Yinju, Z. Qingluan, W. Yang, Z. Qipeng, W. Hao, M. Lin, L. Juan, Z. Chengjun, o.fl., Protective effectfffects of Lycium barbarum fjölsykra á nýburarottum frumræktuðum hippocampal taugafrumum skaddað vegna súrefnis-glúkósa skorts og endurflæðis, J. Mol. Histol. 43 (2012) 535–542.

[41] BR Broughton, DC Reutens, CG Sobey, Apoptotic kerfi eftir blóðþurrð í heila, Stroke 40 (2009) e331-339.

[42] Jordan M. Willcox, AJS Summerlee, Relaxin verndar stjarnfrumur gegn súrefnisskorti in vitro, PLoS One. 9 (3) (2014) e90864.

[43] X. Zhang, D. Yuan, Q. Sun, L. Xu, E. Lee, AJ Lewis, BS Zuckerbraun, MR Rosengart, Kalsíum/calmodulin-háður próteinkínasi stjórnar PINK1/Parkin og DJ{{3} } leiðir til hvatvefs við blóðsýkingu, FASEB J. 31 (2017) 4382–4395.

[44] S. Vasseur, S. Afzal, J. Tardivel-Lacombe, DS Park, JL Iovanna, TW Mak, DJ-1/ PARK7 er mikilvægur miðlari frumuviðbragða af völdum súrefnisskorts, Proc. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin 106 (2009) 1111–1116.

[45] Z. Xianghong, Y. Du, S. Qian, X. Li, L. Emma, ​​J. Anthony, Brian Lewis, S. Zuckerbraun, Matthew R. Rosengart, Calcium/calmodulin-dependent prótein kínasi stjórnar PINK1/ Parkin og DJ-1 ferlar hvatvefs við blóðsýkingu, FASEB J. (2017). [

46] MS Choi, T. Nakamura, SJ Cho, X. Han, EA Holland, J. Qu, GA Petsko, JR Yates 3rd, RC Liddington, SA Lipton, Transnitrosylation from DJ-1 to PTEN dregur úr taugafrumudauða í Parkinsons-sjúkdómslíkönum, J. Neurosci. 34 (2014) 15123–15131.

[47] RK Dongworth, UA Mukherjee, AR Hall, R. Astin, SB Ong, Z. Yao, A. Dyson, G. Szabadkai, SM Davidson, DM Yellon, DJ Hausenloy, DJ-1 verndar gegn frumudauða í kjölfar bráðs blóðþurrðar-endurflæðisskaða í hjarta, Cell Death Dis. 5 (2014) e1082.

[48] ​​A. Di Cello, M. Di Sanzo, FM Perrone, G. Santamaria, E. Rania, E. Angotti, R. Venturella, S. Mancuso, F. Zullo, G. Cuda, F. Costanzo, DJ{ {1}} er áreiðanlegt lífmerki í sermi til að greina hættulegt legslímukrabbamein, Tumor Biol. 39 (2017) 1010428317705746.

[49] H. Aleyasin, MW Rousseaux, PC Marcogliese, SJ Hewitt, I. Irrcher, AP Joselin, M. Parsanejad, RH Kim, P. Rizzo, SM Callaghan, o.fl., DJ-1 verndar nigrostriatal ás frá taugaeitrinu MPTP með mótun á AKT ferli, Proc. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin 107 (2010) 3186–3191.

[50] RM Canet-Aviles, MA Wilson, DW Miller, R. Ahmad, C. McLendon, S. Bandyopadhyay, MJ Baptista, D. Ringe, GA Petsko, MR Cookson, Parkinsonsveiki prótein DJ-1 ertaugaverndandivegna cysteins-súlfínsýru-drifna staðsetningar hvatbera, Proc. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin 101 (2004) 9103–9108.

[51] M. Liu, B. Zhou, ZY Xia, B. Zhao, SQ Lei, QJ Yang, R. Xue, Y. Leng, JJ Xu, Z. Xia, hömlun af völdum blóðsykurs á DJ-1 tjáning kom í veg fyrir virkni blóðþurrðarhjartavarna eftir ástandsmeðferð hjá rottum, Oxid. Med. Cell Longev. (2013) (2013) 564902.