Cistanche Deserticola þykkni eykur beinmyndun í beinþynningum
Mar 05, 2022
Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com
Te-Mao Lia, Hsin-Chih Huangb, Chen-Ming Suc, Tin-Yun Hoa, Chi-Ming Wua, Wen-Chi Chend, Yi-Chin Fonga,eog Chih-Hsin Tangf,c
Ágrip
Markmið:Við könnuðum áhrif afCistanche deserticola Ma. (CD) um beinmyndun ræktaðra beinþynningar.AðferðirSteinefnafræðilega hnúðamyndunargreiningin var notuð til að kanna in vitro áhrif CD á beinmyndun. Alkalískur fosfatasi (ALP), beinformandi prótein (BMP)-2 og osteopontin (OPN) mRNA tjáning voru greind með magnbundinni rauntíma pólýmerasa keðjuverkun. Verkunarmáti CD útdráttar var rannsakaður með því að nota Western blotting. In vivo and-beinþynningaráhrif CD þykkni voru metin í músum sem höfðu verið teknar úr eggjastokkum.Helstu niðurstöðurCD þykkni hafði engin áhrif á útbreiðslu, flutning eða sárgræðslu ræktaðra beinfrumuefna, en jók ALP, BMP-2 og OPN mRNA og steinefnamyndun beina. Mítógenvirkjaður próteinkínasa (MAPK) eða kjarnaþáttur (NF)-kB hemlar minnkuðu beinmyndun af völdum CD útdráttar og ALP, BMP-2 og OPN tjáningu. Hins vegar hafði CD þykkni ekki áhrif á beinþynningu. Að auki kom CD þykkni í veg fyrir beintap sem orsakast af eggjastokkatöku in vivo.ÁlyktanirCD getur verið nýtt beinmyndunarefni til að meðhöndla beinþynningu.
Kynning
Bein er flókinn vefur sem samanstendur af nokkrum frumugerðum sem gangast undir stöðugt endurnýjunar- og viðgerðarferli sem kallast „beinendurgerð“. Tvær helstu frumugerðir sem bera ábyrgð á endurgerð beina eru beinþynningar, sem gleypa bein, og beinfrumuefni, sem mynda nýtt bein. Endurgerð beina er stjórnað af nokkrum almennum hormónum (td kalkkirtilshormóni, 1, 25-hýdroxývítamín D3, kynhormónum og kalsítóníni) og staðbundnum þáttum (td köfnunarefnisoxíði, prostaglandínum, vaxtarþáttum og cýtókínum).[1]
Beinþynning verður til þegar uppsog og myndun beina er ósamræmd og umfram niðurbrot beina fer yfir beinuppbyggingu.[2] Núverandi meðferðir við beinþynningu fela í sér bisfosfónöt, kalsítónín og estrógen, sem eru beinuppsogshemlar sem viðhalda beinmassa með því að hindra beinþynningarvirkni.[3] Hins vegar eru áhrif þessara lyfja til að auka eða endurheimta beinmassa tiltölulega lítil, örugglega ekki meira en 2 prósent á ári.[3] Það er því þörf fyrir beinuppbyggjandi efni, eins og teriparatid, sem örva nýmyndun beina og leiðrétta þá breytingu á örbylgjubyggingu sem er einkennandi fyrir staðfesta beinþynningu.[4,5] Vegna þess að ný beinmyndun er fyrst og fremst fall af beinþynnurnar, efni sem virka annaðhvort með því að auka útbreiðslu frumna úr beinþynnuættinni eða örva aðgreining beinþynnanna geta aukið beinmyndun.[5,6]
Þrátt fyrir að leiðir beinþynningar séu enn óljósar, eru þær líklega tengdar minni aðgengi eða áhrifum beinvaxtarþátta, svo sem beinformandi próteina (BMP).[7] BMPs, sem eru byggingarlega skyldir ummyndandi vaxtarþáttur-b yfirfjölskyldunni, voru upphaflega auðkennd af getu þeirra til að framkalla utanlegs beinmyndun í nagdýrum.[8] BMPs gegna mikilvægu hlutverki við beinmyndun og aðgreining beinfrumna með því að örva virkni alkalísks fosfatasa (ALP) sem og myndun próteóglýkans, kollagens og osteópontíns (OPN).[9] Nýleg rannsókn fann tengsl milli beinþynningar og sérstakra fjölbreytileika í BMP-2, ALP og OPN genum, sem bendir til þess að þau tengist þróun beinþynningar.[10]
Cistanche deserticola Ma.(Orobanchaceae; skammstafað sem CD) er innfædd jurt í Kína og er mikið notuð í hefðbundinni læknisfræði sem lækningaefni vegna róandi, verkjastillandi og ónæmisörvandi eiginleika.[11] Nútíma lyfjafræðilegar rannsóknir hafa sýnt að CD útdrættir geta örvað ónæmi, [12] hreinsað sindurefna[13] og aukið virkni súperoxíð dismútasa.[14] Bólgueyðandi og andoxunarefni hafa tilhneigingu til að meðhöndla beinþynningu með því að auka beinmyndun og/eða bæla beinupptöku.[15,16] Hins vegar hefur áhrif CD á starfsemi beinfrumna ekki enn verið ákvörðuð. Hér greinum við frá því að CD útdráttur hafði ekki áhrif á útbreiðslu, flæði eða sárgræðsluvirkni ræktaðra beinþynningar, en jók ALP, BMP-2 og OPN tjáningu og beinþéttingu. Að auki sýnum við að mítógenvirkjaður próteinkínasa (MAPK) og kjarnaþáttur (NF)-kB merkjaleiðir geta átt þátt í CD-miðlaðri aukningu á tjáningu gena og steinefnamyndun beina. Aftur á móti bældi CD útdrátturinn ekki beinþekjumyndun in vitro. Sérstaklega kom meðhöndlun á músum með CD útdrætti í veg fyrir beinmissi af völdum eggjastokkanáms in vivo. Gögn okkar benda því til þess að CD geti verið notað til að örva beinmyndun til að meðhöndla beinþynningu.
Cistanche deserticola
Efni og aðferðir
Cistanche deserticola þykkni og efni
CD útdráttur var keyptur frá Chuang Song-Zong Pharmaceutical Company (Kaohsiung, Taívan). Fylgst var með útdrætti og einangrun CD eins og áður hefur verið lýst (á grundvelli litrófsgagna hafa þeir greint efnasamsetninguna þar á meðal beta-sítósteról, daukósteról, súrsteinssýru, tríakontanól, akteósíð, betaín og fjölsykra).[17] Kanínu fjölstofna mótefni sem eru sértæk fyrir p-utanfrumu merkjastýrða kínasa (ERK), ERK, p-p38, p38, pc-Jun N-enda kínasa (JNK), JNK, p-p65 og p65 voru keypt frá Santa Cruz Biotechnology ( Santa Cruz, Bandaríkjunum). Osteocalcin ELISA settið var keypt frá Biosource Technology (Nivelles, Belgíu). C-enda telopeptíðin af tegund I kollagen ELISA settinu voru fengin frá Cross Laps (Herlev, Danmörku). P38 ríkjandi-neikvæða stökkbrigðið var útvegað af Dr. J. Han (South-Western Medical Center, Dallas, Bandaríkjunum). JNK ríkjandi-neikvæða stökkbrigðið var útvegað af Dr. M. Karin (University of California, San Diego, Bandaríkjunum). ERK2 ríkjandi-neikvæða stökkbrigðið var veitt af Dr. M. Cobb (South-Western Medical Center). Öll önnur hvarfefni voru fengin frá Sigma-Aldrich (St Louis, Bandaríkjunum).
Frumuræktun
Murine osteoblast frumulínan MC3T3-E1 var keypt frá American Type Culture Collection (ATCC; Rockville, Bandaríkjunum). Frumur voru ræktaðar í 95 prósent lofti, 5 prósent CO2 með a-MEM sem var bætt við 20 mm HEPES og 10 prósent hitaóvirkjuð fósturkálfasermi, 2 mm-glútamín, penicillín (100 einingar/ml) og streptómýsín (100 mg) /ml).
Mæling á steinefnamyndun hnúta
Myndun steinefnabundinna hnúða var metin eins og lýst er.[18] Í stuttu máli voru beinfrumur ræktaðar í æti sem innihélt C-vítamín (50 mg/ml) og b-glýserófosfat (10 mm) í tvær vikur og skipt var um miðil á þriggja daga fresti. Eftir ræktun með CD þykkni í 12 daga voru frumur þvegnar tvisvar með 20 mm Tris-bufferuðu saltvatni sem innihélt
0.15 m NaCl (pH 7,4), fest í ísköldu 75 prósent (v/v) etanóli í 30 mínútur og loftþurrkað. Kalsíumútfelling var ákvörðuð með því að nota alizarin red-S litun. Í stuttu máli voru etanólfastar frumur og fylki litaðar í 1 klst með 40 mm alizarin red-S (pH 4,2) og skolaðar mikið með vatni. Bundinn blettur var skolaður með 10 prósentum (w/v) cetýlpýridínklóríði og alizarin red-S í sýnunum var magnmælt með því að mæla gleypni við 550 nm og borið saman við staðlaða feril. Eitt mól af alizarin red-S bindur sértækt um það bil tvö mól af kalsíum.
Magnbundin rauntíma pólýmerasa keðjuverkun
Heildar-RNA var dregið úr beinfrumum með TRIzol setti (MDBio Inc., Taipei, Taívan). Öfug umritun var framkvæmd með því að nota 2 mg heildar-RNA og oligo(dT) primer.[19,20] Megindleg rauntíma pólýmerasa keðjuverkun (qPCR) var framkvæmd með TaqMan® eins þrepa PCR Master Mix (Applied Biosystems, Carlsbad, BANDARÍKIN). Heildar cDNA var bætt við (100 ng á 25-ml hvarf) með raðsértækum frumurum og Taqman® rannsaka. Allir markgena frumrar og rannsakar voru keyptir í atvinnuskyni, þar á meðal b-aktín sem innra eftirlit (Applied Biosystems). qPCR greiningar voru framkvæmdar í þríriti á StepOnePlus raðgreiningarkerfi (Applied Biosystems). Hringrásarskilyrðin voru 10-mín. pólýmerasavirkjun við 95 gráður og fylgt eftir af 40 lotum af 95 gráðum í 15 sekúndur og 60 gráður í 60 sekúndur. Þröskuldurinn var settur fyrir ofan samanburðarbakgrunn sem ekki var sniðmát og innan línulegs fasa markgenamögnunar til að reikna út lotunúmerið þar sem afritið greindist (táknað CT).
Western blot greining
Frumulýsi voru útbúin eins og áður hefur verið lýst. [21,22] Prótein voru leyst upp með SDS-PAGE og flutt yfir á Immobilon pólývínýldíflúoríð himnur (Millipore, Billerica, Bandaríkjunum). Blettirnir voru lokaðir með 4 prósenta sermi albúmíni úr nautgripum í 1 klst við stofuhita og síðan rannsakað með kanínum and-manna mótefnum gegn p-65, eða p-p65 (1: 1000) í 1 klst. við stofuhita. Eftir þrjá þvotta voru blettirnir ræktaðir með peroxidasa-tengdu asna-and-kanínu aukamótefni (1: 1000) í 1 klst við stofuhita. Blettirnir voru sýndir með aukinni efnaljómun með því að nota X-OMAT LS filmu (Eastman Kodak, Rochester, Bandaríkjunum).
Beinþynning af völdum eggjastokkanáms
Kvenkyns ICR mýs, fjögurra vikna gamlar, 22~28 g, voru notaðar í þessa rannsókn. Mýs voru teknar úr eggjastokkum tvíhliða undir tríklórasetaldehýð (100 mg/kg) svæfingu og viðmiðunarmýs voru sýndaraðgerðir (Sham) til samanburðar. Beinþéttni og steinefnainnihald í beinum voru mæld eftir inntöku mismunandi styrks af CD útdrætti á tveggja daga fresti í fjórar vikur. Heildarbeinþéttni líkamans og steinefnainnihald bein voru ákvörðuð með tvíorku röntgengleypnimæli (DEXA; XR-26; Norland, Fort Atkinson, Bandaríkjunum) með því að nota stillingu fyrir lítil einstaklinga eins og áður hefur verið lýst.[18, 23] Allar samskiptareglur voru í samræmi við leiðbeiningar stofnana og voru samþykktar af dýraverndarnefnd Kína læknaháskóla.
tölfræðigreining
Tölfræðileg greining var gerð með Prism 4.01hugbúnaði. (GraphPad Software Inc., San Diego, Bandaríkjunum). Gildin sem gefin eru eru meðaltal ± SEM. Tölfræðileg greining á milli tveggja sýna var gerð með t-prófi nemandans. Tölfræðilegur samanburður á fleiri en tveimur hópum var gerður með einhliða dreifigreiningu með Bonfer-Roni's posthoc prófi. Í öllum tilvikum var P < 0,05="" talið="">
Cistanche deserticola þykkni
Niðurstöður
Cistanche deserticola þykkni eykur steinefnamyndun beina af völdum osteoblasts
Viðbót á CD útdrættinum í 24 eða 48 klst. hafði ekki áhrif á fjölgun músabeinfruma MC3T3-E1 frumna í MTT prófun (gögn ekki sýnd). Vegna þess að beinþynningaraðgreining er flókið ferli sem felur í sér frumufjölgun og flæði, prófuðum við einnig flutningsgetu MC3T3-E1 frumna eftir meðferð með CD þykkni. Með því að nota Transwell og sáragræðslupróf komumst við að því að CD þykkni hafði ekki áhrif á beinfrumuflutning (gögn ekki sýnd). Myndun steinefnabundinna hnúða er eitt af vísbendingum um þroska beinþynningar. Alizarin rauð S litun sýndi að steinefnalausir hnúðar mynduðust þegar beinfrumur voru ræktaðir í tvær vikur í æti sem innihélt C-vítamín (50 mg/ml) og b-glýserófosfat (10 mm), og það var aukið á styrkleikaháðan hátt með því að bæta við af geisladiski (mynd 1a). Þess vegna olli CD þykkni myndun beinhnúta af ræktuðum beinþynningum, en ekki fjölgun þeirra eða flæði. Við skoðuðum einnig hlutverk CD útdráttar í RANKL-framkallaðri beinþynningarmyndun en fundum engin áhrif (gögn ekki sýnd).
Cistanche deserticola þykkni eykur basískan fosfatasa, beinformandi prótein-2 og tjáningu osteopontíns í ræktuðum osteoblastum
Aðgreindar beinfrumur sýna aukna ALP virkni, sem tengist miklu magni ensímatjáningar.[18] Við komumst að því að meðferð með CD þykkni í 72 klst. jók marktækt ALP virkni osteoblast (Mynd 1b). Með hliðsjón af mikilvægu hlutverki BMP-2, ALP og OPN í beinþynningaraðgreiningu, prófuðum við hvort CD útdráttur hafi áhrif á beinþynningaraðgreiningu með því að stjórna BMP-2, ALP og OPN tjáningu. Meðferð frumna með CD útdrætti jók mRNA tjáningu ALP, BMP-2 og OPN á styrkleikaháðan hátt (Mynd 1c), sem sýnir fram á að CD útdráttur olli aðgreiningu beinfrumuefna með því að hækka ALP, BMP-2 , og OPN tjáning.
Cistanche deserticola þykkni eykur myndun beinhnúta í gegnum mítógenvirkjaða prótein kínasa feril
Það hefur verið greint frá því að MAPK gegnir mikilvægu hlutverki í beinamyndun [24,25] svo við skoðuðum næst hvort þessi boðleið tengist CD útdrætti af völdum beinsteinefnamyndunar. Formeðferð frumna með ERK hemli U0126, p38 hemli SB203580 eða JNK hemli SP600125 dró úr CD útdrætti aukinni steinefnamyndun í beinum (myndir 2a, 3a og 4a). Ennfremur hindruðu hemlarnir einnig ALP, BMP-2 og OPN tjáningu af völdum CD útdráttar (myndir 2b–4c). Flutningur frumna með ERK2, p38 eða JNK stökkbreyttum dró úr aukningu CD útdráttar á ALP, BMP-2 og OPN mRNA tjáningu (myndir 2c, 3c og 4c). Næst skoðuðum við ERK, p38 og JNK virkjunina beint eftir CD útdráttarmeðferð. Ræktun frumna með CD útdrætti framkallaði ERK, p38 og JNK fosfórun (myndir 2d, 3d og 4d). Þess vegna miðla ERK, p38 og JNK aukinni beinmyndun sem orsakast af CD meðferð á beinþynningum.
Cistanche deserticola þykkni eykur myndun beinhnúta í gegnum kjarnaþátt-kB ferilinn
Eins og áður hefur komið fram er NF-kB virkjun nauðsynleg fyrir beinmyndun.[26,27] Næst meðhöndluðum við beinfrumur með NF-kB hemlum pýrrólidíndíþíókarbamati (PDTC) og N-tósýl-L-fenýlalanín klórmetýl ketón (TPCK) frá Calbiochem (Darmstadt, Þýskalandi) til að ákvarða hvort NF-kB virkjun eigi þátt í geisladisk útdrætti af völdum beinsteinefnamyndunar. Mynd 5a sýnir að formeðferð á beinþynningum með PDTC eða TPCK hamlaði CD útdrætti framkallaða beinhnútamyndun og minnkaði einnig aukningu á ALP, BMP-2 og OPN tjáningu (Mynd 5b og 5c). Fosfórun á NF-kB p65 undireiningunni er vísbending um NF-kB virkjun; [28] í samræmi við þetta komumst við að því að CD þykkni jók p65 fosfórun í beinfrumum (Mynd 5d). Þessar niðurstöður gáfu til kynna að NF-kB virkjun er mikilvæg fyrir CD útdrátt af völdum ALP, BMP-2 og OPN tjáningu og myndun beinhnúta.
Hömlun á beinatapi með Cistanche deserticola þykkni í músum sem hafa verið gerðar með eggjastokkum
Til að kanna áhrif CD þykkni á beinmissi var beinþynning framkölluð í kvenkyns músum með eggjastokkatöku. Eins og búist var við, sýndu mýs sem höfðu verið gerðar með eggjastokkum, minnkaðan heildarbeinþéttni líkamans og beinsteinainnihald (Mynd 6a og 6b). Meðferð með CD þykkni í fjórar vikur hamlaði tapi á beinþéttni og beinþéttni á skammtaháðan hátt (Mynd 6a og 6b). Styrkur ALP í blóði getur endurspeglað beinþynningarvirkni.[29] Eins og sýnt er á mynd 6c, hamlaði CD útdráttur minnkun á ALP virkni í sermi sem framkallað er af eggjastokkatöku. Að auki jók CD þykkni einnig magn osteókalsíns, merki um beinmyndun, og minnkaði magn C-enda telopeptíða af tegund I kollageni, merki um beinupptöku (Mynd 6d og 6e). Þessar niðurstöður styðja þannig virkni og virkni CD þykkni til að koma í veg fyrir beinmissi in vivo.
Umræða
Cistanche deserticolaMa, innfædd jurt í Kína, er mikið notuð í hefðbundinni læknisfræði til ýmissa lækningameðferða vegna róandi, verkjastillandi og ónæmisörvandi virkni.[11–15] Hér sýndum við fram á að CD þykkni olli steinefnamyndun í beinum í ræktuðum beinfrumur, en gerði það þó. ekki hafa áhrif á frumuflutning eða fjölgun þeirra. Að auki komumst við að því að ALP, BMP-2 og OPN eru markprótein af CD útdrætti af völdum boðefna, sem krefst virkjunar á ERK, p38, JNK og NF-kB.
Bein er flókinn vefur sem samanstendur af nokkrum frumugerðum sem eru stöðugt í endurnýjunar- og viðgerðarferli.[30] Þegar uppsog og myndun beina er í ójafnvægi, hnekkir beinbrot beinmyndun og beinþynning leiðir af sér.[30] Við notuðum mýs með eggjastokkum til að kanna beinþynningaráhrif CD þykkni. Mýs sem höfðu verið gerðar með eggjastokkum höfðu minnkað heildarbeinþéttni líkamans og beinsteinainnihald, sem var dregið úr með meðferð með CD þykkni. CD þykkni jók einnig sermisþéttni beinmyndandi merkja ALP og osteókalsíns. Þess vegna er geisladiskurinn beinmyndunarefni sem kemur í veg fyrir beinmissi af völdum eggjastokkanáms in vivo.
Þrátt fyrir að leiðir beinþynningar séu ekki alveg skýrar eru þær líklega tengdar minni aðgengi eða minni áhrifum beinvaxtarþátta, eins og ALP, BMP-2 og OPN. Þessir þrír þættir gegna mikilvægu hlutverki í ferli beinamyndunar og endurmótunar,[31] og það hefur verið vel skjalfest að örvun á sérhæfingu beinfrumuefna einkennist aðallega af aukinni tjáningu ALP, BMP-2 og OPN.[32 ] Í þessari rannsókn komumst við að því að CD útdráttur jók ALP, BMP-2 og OPN tjáningu og jók steinefnamyndun beina. Þess vegna miðlar CD útdráttur beinmyndun að hluta til með því að hækka tjáningu ALP, BMP-2 og OPN.
Greint hefur verið frá því að p38 tekur þátt í stjórnun á ALP tjáningu meðan á sérhæfingu beinfrumuefna stendur;[33] á sama hátt er ERK1/2 mikilvægt fyrir útbreiðslu og sérhæfingu beinþynningar.[34,35] JNK tekur þátt í myndun beinþynninga. .[36] Við sýndum hér að CD þykkni framkallaði ERK, p38 og JNK fosfórýleringu og hemlar þessara ensíma hamluðu CD útdrætti miðlaðri styrkingu á steinefnamyndun í beinum, sem bendir til þess að ERK, p38 og JNK virkjun gegni skylduhlutverki í CD útdrætti framkölluðum beinmyndun með beinþynningar. Að auki drógu ensímhemlar og ríkjandi-neikvæðu stökkbrigði ERK, p38 og JNK úr CD útdrætti aukinni ALP, BMP-2 og OPN tjáningu. Þessar upplýsingar benda til þess að virkjun ERK, p38 og JNK ferla sé nauðsynleg til að auka ALP, BMP-2 og OPN tjáningu og þroska af völdum CD útdráttar í beinþynningar. Tilkynnt hefur verið um að ERK eykur útbreiðslu og aðgreining beinfrumuefna. [34,35] Hins vegar fundum við ekki áhrif CD útdráttar á útbreiðslu beinfrumuefna. Þess vegna gætu aðrar leiðir hafa unnið gegn ERK áhrifum eftir örvun CD þykkni, eða verið nauðsynlegar fyrir útbreiðslu. Í þessu sambandi höfum við komist að því að PI3K og Akt hemlar draga einnig úr beinmyndun af völdum CD útdráttar og ALP, BMP-2 eða OPN mRNA tjáningu (gögn ekki sýnd). Þess vegna gætu þessar leiðir verið nauðsynlegar fyrir beinmyndun af völdum CD útdráttar.
Sýnt hefur verið fram á að NF-kB stjórnar beinþynningastarfsemi í beinum.[37] Niðurstöður þessarar rannsóknar sýna að NF-kB virkjun stuðlar að CD útdrætti af völdum beinsteinefnamyndunar og ALP, BMP-2 og OPN tjáningu í ræktuðum beinfrumum og að hemlar NF-kB háðrar merkjaleiðar (PDTC og TPCK) ) hamlaði CD útdrætti af völdum beinsteinefnamyndunar og ALP, BMP-2 og OPN tjáningu. p65 er fosfórýlerað við Ser536 með ýmsum kínasa í nokkrum boðleiðum, sem eykur möguleika p65 umvirkjunar.[38] Niðurstöður þessarar rannsóknar sýndu að CD þykkni jók fosfórun p65. Samanlagt benda þessar niðurstöður til þess að NF-kB virkjun sé nauðsynleg fyrir beinmyndun af völdum CD útdráttar í ræktuðum beinfrumur. Við komumst einnig að því að ERK, p38 og JNK hemlar sneru við CD útdrætti af völdum NF-kB lúsiferasa virkni (gögn ekki sýnd), í samræmi við að þessi ensím eru andstreymis miðlarar CD útdráttar af völdum NF-kB virkjunar. Þess vegna veldur CD þykkni beinmyndun í gegnum ERK/p38/JNK/ og NF-kB brautirnar.
Ályktanir
Þessi rannsókn sýndi fram á að CD þykkni veldur aðgreiningu og þroska beinhimnu en ekki fjölgun eða fólksflutninga. CD útdráttur jók einnig ALP, BMP-2 og OPN tjáningu og steinefnamyndun beina. Við sýndum að ERK, p38, JNK og NF-kB ferlar taka þátt í CD útdrætti miðlaðri beinmyndun og ALP, BMP-2 og OPN tjáningu. Ennfremur kom CD útdráttur í veg fyrir beintap in vivo af völdum eggjastokkanáms. Þess vegna getur CD verið gagnlegt við að örva beinmyndun við meðferð á beinþynningarsjúkdómum.
