Efnaskipti í þvagi afhjúpa óeðlilegan bata eftir hámarks áreynslu hjá kvenkyns ME/CFS sjúklingum 3. hluti

Hvers vegna verðum við þreytt? Hvernig getum við leyst þreytuvandamálin?

【Hafðu samband】 Netfang: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501

3. Umræður

Þetta er í fyrsta sinn sem þvagefnaskipti ME/CFS-sjúklinga hafa verið einkennist fyrir og eftir áreynsluáskorun þegar ME/CFS-sjúklingar eru með PEM. Mörg þessara umbrotsefna hafa aldrei áður verið mæld hjá ME/CFS-sjúklingum, þar sem fyrri rannsóknir á efnaskiptum í þvagi á ME/CFS hafa verið takmarkaðar við færri en 50 umbrotsefni og núverandi rannsókn mældist 1403. Þar að auki er notkun kyrrsetuheilbrigðra viðmiðunarefna til að gera grein fyrir Líkamleg virkni, sem getur haft áhrif á grunnlínu og umbrotsefnismagn eftir æfingu, er lykilkostur núverandi rannsóknarhönnunar sem hefur ekki verið nýtt í fyrri rannsóknum. Niðurstöður okkar sýndu víðtæka aukningu á magni umbrotsefna í þvagi viðmiðunarhópsins 24 klst. eftir æfingu sem sást ekki hjá ME/CFS sjúklingum, þar sem 110 af þessum efnasamböndum höfðu marktækt samspil milli sjúkdómsástands (ME/CFS eða viðmiðunarreglur). ) og tíma (upphafslína vs. eftir æfingu) (viðbótarmynd S2). Auk fjölmargra greininga á þéttni umbrotsefna í þvagi gaf fylgni umbrotsefna í þvagi og plasma frekari vísbendingar um truflun á efnaskiptum hjá ME/CFS sjúklingum eftir æfingu. Þessi greining gaf frekari vísbendingar um meinalífeðlisfræðilegar breytingar á mörgum undirferlum sem og vísbendingar um mun á viðbótar undirferlum sem ekki var mikill marktækur munur á milli ME/CFS sjúklinganna og viðmiðunarhópa þegar litið var á magn umbrotsefna í þvagi í einangrun.

Cistanche getur virkað sem þreytu- og þreytueyðandi og tilraunarannsóknir hafa sýnt að decoction af Cistanche tubulosa gæti á áhrifaríkan hátt verndað lifrarfrumur og æðaþelsfrumur sem eru skemmdar í þungbærum sundmúsum, aukið tjáningu NOS3 og stuðlað að glýkógeni í lifur. nýmyndun og hefur þannig verkun gegn þreytu. Phenylethanoid glycoside-ríkur Cistanche tubulosa þykkni gæti dregið verulega úr kreatínkínasa í sermi, laktat dehýdrógenasa og laktatmagni og aukið blóðrauða (HB) og glúkósamagn í ICR músum, og þetta gæti gegnt þreytuhlutverki með því að draga úr vöðvaskemmdum. og seinka auðgun mjólkursýru til orkugeymslu í músum. Compound Cistanche Tubulosa töflur lengdu verulega sundtímann sem ber þyngd, jók glýkógenforða í lifur og minnkaði sermismagn þvagefnis eftir æfingar hjá músum, sem sýnir þreytueyðandi áhrif þess. The decoction af Cistanchis getur bætt þrek og flýtt fyrir útrýmingu þreytu hjá músum á æfingu, og getur einnig dregið úr hækkun á kreatínkínasa í sermi eftir álagsæfingu og haldið uppbyggingu beinagrindarvöðva músa eðlilega eftir æfingu, sem gefur til kynna að það hafi áhrif til að auka líkamlegan styrk og gegn þreytu. Cistanchis lengdi einnig verulega lifunartíma músa sem nítríteitruð voru og jók þol gegn súrefnisskorti og þreytu.

Smelltu á að vera alltaf þreyttur

3.1. Samanburður við fyrri rannsóknir á efnaskiptafræði þvags hjá ME/CFS sjúklingum

Á heildina litið eru niðurstöður okkar ekki í samræmi við þær fáu fyrri rannsóknir sem mældu umbrotsefni í þvagi hjá ME/CFS-sjúklingum samanborið við samanburðaraðila sem ekki eru ME/CFS. Til að bera betur saman niðurstöður okkar við fyrri rannsóknir, sem mældu færri umbrotsefni, bárum við niðurstöðurnar saman við upphafsgildi fyrir p < 0.05 í LMM við fyrri rannsóknir. Eina efnasambandið sem reyndist vera marktækt í annarri rannsókn og okkar var alanín, þó fyrri rannsóknin hafi leitt í ljós að alanín væri lægra hjá kvenkyns sjúklingum en viðmiðunarhópum (BH-stilla p-gildi < 0.05) og í í rannsókninni okkar var meðalþéttni staðlaðs hærri hjá ME/CFS sjúklingum en í samanburðarhópi [20]. Hins vegar fundu nokkrar af rannsóknunum mismun við upphafsgildi á efnasamböndum sem við fundum að breyttust á annan hátt hjá ME/CFS sjúklingum og viðmiðunarhópum við endurheimt áreynslu, þar á meðal fenýlalanín (lægra hjá ME/CFS sjúklingum [23,24]) og valín (lægra í ME/CFS sjúklingar [20]). Bæði fenýlalanín og valín hækkuðu einnig marktækt í kyrrsetueftirliti eftir áreynslu í núverandi rannsókn, þannig að það er mögulegt að samanburðarhópar í öðrum rannsóknum hafi verið virkari og þegar haft hærra magn af fenýlalaníni í þvagi. Engar aðrar rannsóknir réðu sérstaklega til kyrrsetu einstaklinga sem ekki voru ME/CFS, þó ein rannsókn hafi reynt að passa við „almennan lífsstíl“ [23]. Armstrong o.fl. skoðaði fylgni Pearsons milli umbrotsefna í þvagi og plasma hjá ME/CFS sjúklingum og viðmiðunarhópa við grunnlínu, og fann mun á asetati, laktati og fenýlalaníni með þröskuldinn |R| > 0,4 ​​í hvorum hópnum [20]. Asetat er of lítið til að hægt sé að greina það í prófun okkar og við fundum ekki mun á plasma- og þvagfylgni í laktati eða fenýlalaníni.

McGregor og félagar rannsökuðu einnig breytingar á umbrotum þvags og plasma hjá ME/CFS sjúklingum sem fengu PEM [19]. Þeir notuðu könnun til að aðgreina ME/CFS-sjúklinga sem upplifa PEM á síðustu sjö dögum og komust að því að átta af hverjum þrjátíu umbrotsefnum í þvagi sem mæld voru höfðu marktækt lægri styrk í ME/CFS hópnum samanborið við viðmiðunarhópinn. Af þeim var einungis marktækur munur á seríni í greiningum okkar; það jókst eftir æfingu í samanburðarhópnum (Supplementary Data File S2—LMM Results). Styrkur tveggja umbrotsefna í þvagi, asetati og metýlhistidíni, var einnig marktækt mismunandi í PEM hópnum á móti þeim sem ekki var PEM [19]. Magn metýlhistidínanna sem voru mæld í þessari rannsókn var ekki marktækt mismunandi í LMM greiningu, en við fundum mun á plasma- og þvagfylgni 1-metýlhistidíns og N-asetýl-3-metýlhistidíns (Mynd 9). McGregor o.fl. fann einnig tengsl sjö daga PEM stiga við nokkur umbrotsefni í plasma og þvagi [19].

3.2. Aukning á magni umbrotsefna í þvagi í kyrrsetueftirliti eftir æfingu er í samræmi við fyrri rannsóknir

Umbrotsefni þvags hjá konum 24 klst. eftir æfingu hefur ekki verið vel lýst. Eftir því sem við best vitum hafa engar rannsóknir mælt umbrotsefni þvags við grunnlínu samanborið við 24 klst. eftir æfingu hjá konum. Ein rannsókn mældi 32 umbrotsefni í þvagi fyrir æfingu og 24 klst eftir æfingu hjá körlum, þar sem níu keppnishjólreiðamenn voru bornir saman við átta heilbrigða en óþjálfaða karla á sama aldri (50-60 ára) [48]. Þó að rannsókn þeirra beindist að því að bera saman íþróttamennina við óþjálfaða einstaklinga, sáu þeir miklar breytingar eftir æfingu (marktækari en tvöfaldar) hjá viðmiðunarþáttunum hvað varðar laktat-, asetat- og hypoxantínmagn. Asetat var ekki mælt í rannsókn okkar og hvorki laktat né hypoxantín voru frábrugðin grunnlínu til eftir æfingu hjá kvenkyns samanburðarhópnum okkar. Mukherjee o.fl. fann marktækan mun á íþróttafólki og samanburðarhópum í átta af mældum umbrotsefnum tengdum ýmsum lífefnafræðilegum ferlum [48]. Þess vegna er styrkleiki núverandi rannsóknarinnar val á kyrrsetuheilbrigðum stjórntækjum öfugt við virkari einstaklinga, sem kunna að hafa breytt þvagefnaskipti vegna reglulegrar hreyfingar.

Þó að það sé skortur á birtum bókmenntum um umbrotsefni þvags 24 klst. eftir æfingu, eru nokkrar rannsóknir sem mæla umbrotsefni í þvagi hjá bæði körlum og konum á fyrri tímapunktum eftir æfingu (skoðað í [49]). Ein af niðurstöðunum sem var í samræmi á milli rannsókna er að styrkur flestra lípíða eykst í lífvökva eftir æfingu, þar með talið í þvagi. Einkum hefur verið sýnt fram á að þéttni acýlkarnitíns aukist í blóði og þvagi sem svar við áreynslu. Þetta er í samræmi við niðurstöður rannsóknar okkar þar sem nokkur acýlkarnitín efnasambönd voru marktæk aukning eftir æfingu í þvagi viðmiðunarhópsins (Mynd 7A).

Stærsta rannsóknin sem náði til kvenna (alls 255 einstaklingar, 107 konur) fann einnig miklar efnaskiptabreytingar í þvagi eftir æfingu, þar sem 37 af 47 mældum umbrotsefnum breyttust verulega eftir FDR leiðréttingu, og 33 þeirra voru aukin eftir æfingu [50] . Þetta er í samræmi við niðurstöðu okkar um stórfelldar efnaskiptabreytingar eftir æfingu í þvagi viðmiðunaraðila, þar sem meirihluti efnasambandanna sem breytt var reyndust hafa aukinn styrk. Þessi rannsókn lauk einnig kynskiptri samanburðargreiningu en fann aðeins tvö umbrotsefni með marktækt mismunandi hlutföll eftir æfingu/upphafslínu hjá konum og körlum.

Í Schranner o.fl. endurskoðun, niðurstöður fyrir amínósýrur eru ekki eins samræmdar og fyrir lípíð, sem almennt auka eftir æfingu [49]. Hins vegar voru nokkrar niðurstöður í þvagi í samræmi í að minnsta kosti tveimur rannsóknum (þó allir tímapunktar eftir æfingu séu sameinaðir), þar á meðal að eftirfarandi efnasambönd hækkuðu í þvagi eftir æfingu: alanín, O-asetýl-hómóserín, 5- hýdroxýindólpýrúvat, xantúrenat, L-metanafrín, N-asetýlvanilalanín og N-(karboxýetýl)arginín. Eftirfarandi efnasambönd reyndust minnka í þvagi eftir æfingu í að minnsta kosti tveimur rannsóknum: glýsín, histidín, trímetýlamín n-oxíð. Þegar þessar niðurstöður voru bornar saman við rannsóknina okkar voru flest umbrotsefnin annað hvort ekki marktækt frábrugðin fyrir og eftir æfingu eða voru ekki mæld í rannsókninni okkar. Hins vegar fundum við einnig verulega aukningu á alanínmagni í samanburðarhópnum, sem er í samræmi við rannsóknirnar sem skoðaðar voru. Í rannsókn okkar var glýsínmagn einnig hækkað eftir æfingu hjá viðmiðunarhópum í stað þess að minnka. Hins vegar hafa Kistner o.fl. rannsókn, sem náði til margra kvenna, leiddi einnig í ljós að magn glýsíns jókst verulega eftir æfingu [50].

3.3. Munur á kyrrsetueftirliti og ME/CFS-sjúklingum í lípíðofurbrautinni

Margar lípíðundirferlar voru marktækt mismunandi í þvagi sjúklinga og viðmiðunarhóps í þessari rannsókn, þar á meðal umbrot acýlkarnitínfitusýru. Umbrotsefni acýlkarnitíns voru aukin eftir æfingu í þvagi hjá heilbrigðum viðmiðunarhópum og breytingarnar sem hreyfðust af völdum voru marktækt mismunandi milli viðmiðunarhóps og ME/CFS sjúklinga (myndir 3, 7 og S4). Að auki, þó að það sé ekki asýlkarnitín, var deoxýkarnitín í fituundirbrautinni fyrir karnitínumbrotum mismunandi milli plasma og þvags hjá ME/CFS sjúklingum samanborið við viðmiðunarhópa (Mynd 9). Asýlkarnitín eru mjög mikilvæg í orkuefnaskiptum þar sem þau eru nauðsynleg til að flytja fitusýrur inn í hvatberana til -oxunar. Langkeðju fitusýru-oxun er aðal aðferð orkuefnaskipta meðan á þolþjálfun stendur. Truflun á efnaskiptum acýlkarnitíns við áreynslu gæti stuðlað að áreynsluóþoli og PEM hjá ME/CFS sjúklingum. Í annarri rannsókn þar sem aðeins var skoðaður einstaklingur við upphafsgildi og sem ekki var sérstaklega ráðinn til kyrrsetueftirlits, kom í ljós að acýlkarnitín undirferillinn var marktækur frábrugðinn ME/CFS sjúklingum en viðmiðunarhópur, þar sem fimm af átta efnasamböndum reyndust hafa lægri styrk hjá sjúklingunum [11]. Þegar aðeins grunnlínu einstaklingar voru greindir, bentu sérstakar mælingar á asýlkarnitíni í sermi til þess að efnasambandið væri lægra hjá ME/CFS sjúklingum en viðmiðunarhópurinn í einni skýrslu [51] en enginn munur á þvagi eða plasmaþéttni sást í annarri rannsókn [52]. Í blóðvökva stærri hópsins, sem viðfangsefni þessarar rannsóknar eru hluti af, var karnitín efnaþyrpingin einnig marktækt breytt í kyrrsetueftirliti kvenna meðan á bata stóð (skilgreint sem munurinn á milli 24 klst. eftir æfingu og 15 mín. eftir æfingu ) þar sem meirihluti efnasambandanna eykst eftir æfingu [25]. Ekki kom í ljós að karnitín efnaþyrpingin breyttist marktækt við endurheimt áreynslu hjá ME/CFS sjúklingum. Þó að þessi þyrping innihaldi meira en bara asýlkarnitín, eru acýlkarnitín meðlimir og stuðla að mikilvægi þess í greiningu á auðgun efnalíkinga í núverandi rannsókn líka (viðbótarmynd S4). Það hefur einnig verið sýnt fram á ex vivo að palmitóýlkarnitín, sem eykst í vöðvum tímabundið eftir æfingu, getur virkað sem áreynslumerki frá vöðva til undirhóps taugafrumna [53].

Asýlglýsín fitusýruumbrotsefni eru einu efnasamböndin sem fundust í þvagi í marktækt mismunandi styrk í ME/CFS samanborið við samanburðarefni á einum tímapunkti (24 klst. eftir æfingu) og annað asýlglýsín efnasamband, 3-hýdroxýbútýróýlglýsín , hafði marktæka neikvæða fylgni hjá ME/CFS sjúklingunum þegar U3/U1 var tengt við P3/P1 (myndir 5 og 9). Að auki var cis-3,4-metýlenheptanóýlglýsín að breytast á annan hátt við endurheimt áreynslu hjá ME/CFS sjúklingum samanborið við viðmiðunarhópa (LMM, viðbótarmynd S2). Þó að umbrot asýlglýsíns sé ekki ein af undirferlunum sem var marktækt aukin eftir æfingu hjá viðmiðunarhópnum einum saman, var það marktækt ólíkt hjá ME/CFS sjúklingum og viðmiðum bæði á 24 klst. eftir æfingu og þegar munurinn var greindur í hlutföllunum eftir æfingu/grunnlínu (mynd 3). Útskilnaður tiltekinna asýlglýsína í þvagi breytist einnig vegna sjúkdóma sem tengjast fitusýruoxun í hvatberum, þar með talið miðlungs keðju asýlkóensím A (CoA) dehýdrógenasa (MCAD) skortur [54]. Hópurinn okkar hefur tekið eftir því að fitusýruoxun er ólík í ónæmisfrumum frá ME/CFS-sjúklingum á móti viðmiðum [55].

3.4. Munur á kyrrsetueftirliti og ME/CFS sjúklingum í amínósýrustýribrautinni

Við fundum einnig mikinn mun á þvagi í amínósýrum hjá ME/CFS-sjúklingum og stjórna eftir æfingu. Tvær af þessum leiðum stóðu upp úr vegna þess að þær höfðu verulegar breytingar á ME/CFS-sjúklingum samanborið við viðmiðunarhópa í öllum greiningum okkar, þar með talið KEGG-ferilsgreiningunni, og er fjallað um þær nánar hér að neðan.

Þvagefnishringurinn í lifur er mikilvægur þáttur í umbrotum áreynslu vegna þess að það er nauðsynlegt til að fjarlægja mikið magn af ammoníaki sem myndast við áreynslu [56,57]. Germain og félagar komust einnig að því að þvagefnishringurinn og ammoníak endurvinnslu SMPDB ferlar voru verulega breyttir í plasma milli ME/CFS kvenkyns sjúklinga og viðmiðunarhópa í ferlagreiningu þegar borinn var saman munur á umbrotsgildum 24 klst. eftir CPET (P3) og 15 mín eftir CPET (P2) [25]. Uppsöfnun ammoníak hefur áður verið tengd taugaeitrun og þreytu af völdum áreynslu [56,57]. Vanstjórnun á þvagefnishringnum í þvagi og umbrotum í plasma eftir áreynslu hjá ME/CFS sjúklingum gæti valdið uppsöfnun ammoníaksins, en 1403 efnasamböndin sem Metabolon® mældu í þvagi innihéldu ekki ammoníak vegna þess að það er rokgjarnt efnasamband og einnig minna en greiningarmörk vettvangs Metabolon®.

Cystein, methionine, SAM og taurine eru mikilvægar amínósýrur þar sem þær eru þær einu sem innihalda brennistein og cystein er einstakt í getu sinni til að mynda tvísúlfíðtengi. Cystein getur einnig breyst í glútaþíon og taurín. Cystein og metíónín gegna fjölmörgum hlutverkum í umbrotum frumna en þau eru einnig lykilbyggingarefni próteina [37]. Vegna tíólhóps síns tekur cystein þátt í að hvetja mörg ensímhvörf og viðhalda redox homeostasis. Breytingar á cysteinefnaskiptum eiga sér stað í mörgum taugahrörnunarsjúkdómum, þar á meðal Alzheimerssjúkdómi, Huntingtonssjúkdómi og Parkinsonsveiki [58]. Þó að umbrot cysteins, metíóníns, SAM og tauríns hafi sýnt mikinn mun á sjúklingum og viðmiðunarhópum í efnaskiptagreiningum okkar í þvagi, sýndu þvag- og plasmafylgni fleiri efnasambönd með marktækum mun á ME/CFS sjúklingum og viðmiðunarhópum, þar á meðal í cysteini, sem er myndast þegar tvö cystein eru oxuð til að mynda tvísúlfíðtengi og cystathionine sem er milliefni í cysteinframleiðslu í metíónínhringnum [37].

3.5. Takmarkanir

Rannsókn okkar hefur nokkrar mikilvægar takmarkanir. Í fyrsta lagi var mataræði einstaklinganna ekki stjórnað og inntaka umbrotsefna í fæðu getur haft áhrif á útskilnað þeirra með þvagi. Í öðru lagi viðurkennum við að skortur á BMI samsvörun er ekki tilvalin og er takmörkun þessarar rannsóknar. Stærri hópur okkar af ME/CFS-sjúklingum og heilbrigðum kyrrsetueftirliti er BMI-samsvörun og því ef þessi tilraunarannsókn verður stækkuð mun þetta ekki verða vandamál í framtíðinni. Í þriðja lagi eru niðurstöður okkar takmarkaðar við kvenkyns ME/CFS sjúklinga. Þó að það sé mjög mikilvægt að rannsaka bæði kynin í ME/CFS og aukinn fjöldi kynjamismuna í meinalífeðlisfræði sé uppgötvaður [25,59,60], völdum við að einbeita frumrannsókn okkar að konum vegna meiri sjúkdómsbyrði ME. /CFS hjá konum (60–65% kvenkyns) [2]. Þar að auki, vegna þess að við fanguðum umbrotsefnið í þvagi aðeins á tveimur tímapunktum, grunnlínu og 24 klst. eftir æfingu, getum við ekki sagt til um hvort ME/CFS-sjúklingarnir hafi breytt útskilnaðarmagni sumra þessara umbrotsefna annað hvort fyrr eða síðar. lið en stýringarnar. Þessi aukning á útskilnaðarefnum gæti átt sér stað hjá sjúklingum en með meiri seinkun, svipað og ME/CFS-sjúklingarnir sýna seinkaðan heildarbata til æfinga. Hins vegar er einnig mögulegt að þessi skortur á breyttum efnaskiptaútskilnaði sé hluti af heildar skorti á heilbrigðum efnaskiptasvörun við hreyfingu.

4. Efni og aðferðir

4.1. Námsgreinar

Átta heilbrigðir kyrrsetuhópar og tíu ME/CFS sjúklingar voru með í þessari rannsókn. ME/CFS sjúklingar voru greindir með Canadian Consensus Criteria [3]. Þeir 18 einstaklingar sem tóku þátt í þessari rannsókn voru hluti af stærri hópi með alls 173 þátttakendum (ClinicalTrials.gov auðkenni: NCT04026425) [61]. Í þessari frumrannsókn voru allir þátttakendur sem tóku þátt konur. Þátttakendur voru ráðnir með eftirfarandi forsendum. Allir þátttakendur verða að vera á aldrinum 18–70 ára. Einstaklingar voru útilokaðir úr öðrum hvorum hópnum ef þeir voru reykir, þungaðir eða með barn á brjósti, voru með sykursýki, neyttu óhóflegs magns áfengis eða höfðu bæklunartakmarkanir sem hindraði þá í að framkvæma CPET. Greiningar á geðklofa, alvarlegu þunglyndi, geðhvarfasýki eða kvíðaröskun voru einnig útilokunarviðmið í báðum hópum. Að auki voru heilbrigð kyrrsetueftirlit útilokuð ef þeir greindust með einhverja sjálfsofnæmissjúkdóma. Nýrnastarfsemi var eðlileg hjá öllum þátttakendum þessarar rannsóknar, eins og hún var metin með eftirfarandi Quest Diagnostics stöðluðum blóðprufum á rannsóknarstofu: kreatínín í sermi, þvagefnisnitur í blóði og áætlaður gauklasíunarhraði (eGFR).

Sautján einstaklingar framkvæmdu áreynsluprófið í Ithaca College í Ithaca, New York, og einn einstaklingur framkvæmdi áreynsluprófið hjá ID Med í Torrance, Kaliforníu. Allir þátttakendur voru beðnir um að hætta fæðubótarefnum þar á meðal probiotics í tvær vikur fyrir æfingarpróf. Þátttakendur voru beðnir um að hætta verkjum og örvandi lyfjum í tvo daga fyrir áreynslupróf. Allir sjúklingar veittu skriflegt upplýst samþykki og allar samskiptareglur voru samþykktar af Ithaca College IRB #1017-12Dx2. Allir þátttakendur svöruðu Bell Disability Scale [26], Short Form-36 heilsukönnun [62] og sérsniðna spurningalista. ME/CFS sjúklingarnir luku að auki fjölvíða þreytuskránni [63].

4.2. Hjarta- og lungnaáreynslupróf og þvagsýni

CPET var framkvæmt á kyrrstæðum lotumæli, með eftirfarandi samskiptareglum: 3 mín hvíld fylgt eftir með samfelldum hjólreiðum þar sem stigvaxandi vinnuálag eykst um 15 vött á mínútu af æfingu þar til viljandi þreytist (u.þ.b. 8–10 mín). Öndunarskiptahlutfallið (RER), sem er hraði koltvísýringsframleiðslu deilt með hraða súrefnisnotkunar, var mælt til að tryggja að þátttakendur væru að framkvæma prófið með nægri áreynslu (RER > 1,1 gefur til kynna hámarksátak).

Öllum þvagsýnum var safnað að morgni: (1) 15–20 mínútum fyrir CPET og (2) 24 klst. síðar. Þvagi var safnað í miðstreymi í dauðhreinsuðum þvagsöfnurum, skipt í skammta, skilið í skilvindu við 10,000× g í 10 mínútur til að fjarlægja frumurusl og geymt við -80 ◦C. Þvagsýni fóru í eina frystingar/þíðingarlotu til frekari skammta og deilurnar voru sendar yfir nótt til Metabolon® á þurrís.

4.3. Metabolomics próf

Umbrotsefni voru mæld með því að nota Precision Metabolomics™ vökvaskiljun-tandem massagreiningu (LC-MS/MS) alþjóðlegan efnaskiptavettvang á Metabolon®. Nákvæmum aðferðum hefur verið lýst áður [64]. Í stuttu máli voru sýni dregin út í metanóli (5:1 metanól: sýni) og síðan gufuð upp. Umbrotsefni fundust í hverju sýni með því að nota fjóra mismunandi LC-MS/MS palla sem voru fínstilltir fyrir vatnssækin og vatnsfælin efnasambönd og með bæði jákvæða og neikvæða jónun. Öll litskiljun notaði Waters Acquity ultra-high performance (UP)LC og 5 µL inndælingarrúmmál (með sýnum sem eru leyst upp í viðeigandi leysiefnum fyrir hvern vettvang). Öll massagreining var gerð með ThermoScientific Q-Exactive háupplausn/nákvæmum massagreiningum með upphituðum rafúðajónunargjafa (HESI-II) og Orbitrap massagreiningartækjum sem voru starfræktir við 35,000 massaupplausn með skannasvið 70–1000 m/ z. Metabolon® sérhugbúnaður var notaður til að passa tilraunasýni við viðmiðunarsafn Tier 1 auðkenningarstaðla eins og skilgreint er af Metabolomics Standards Initiative, og svæðið undir ferlinum var notað fyrir hámarksmælingu. Gildi eru staðlað með tilliti til óunnar svæðisfjölda og öll sýni voru keyrð í einni lotu svo engin lotuleiðrétting var nauðsynleg. Óþekktu efnasamböndin hafa ekki staðal og sameindir að hluta til eru þær sem hafa ekki verið staðfestar opinberlega á grundvelli staðals eða sem staðall er ekki fáanlegur fyrir, en Metabolon® er nokkuð öruggt um auðkenni þess.

4.4. Gagnavinnsla

Hrá gögn voru staðlað með osmólality fyrir hvert sýni og gögnin fyrir hvert umbrotsefni voru miðuð við 1 (hrá gögn þ.mt osmólality eru fáanleg í viðbótarskrá S1). Gildi sem vantaði voru reiknuð með lágmarksgildi, nema fyrir lyf sem voru reiknuð sem 0. Gögn voru log10 umbreytt með dreifni stöðugleika umbreytingu (MetaboanalystR) [65,66]. Alls voru upphaflega mæld 1403 umbrotsefni. Umbrotsefni voru síuð samkvæmt breyttu 80% reglunni: efnasamband var innifalið ef það fannst í að minnsta kosti 80% sýna í öðrum hvorum ME/CFS eða samanburðarhópunum [27]. Alls uppfylltu 1154 umbrotsefni viðmiðin og voru tekin með í síðari greiningar. Eina greiningin sem framkvæmd var án síunar var á fylgni við umbrotsefni í plasma. Hlutföllin eftir æfingu/upphafslínu fyrir hvert umbrotsefni voru reiknuð út í loggrunni 10 sem gildi eftir æfingu að frádregnum grunngildi fyrir hvern einstakling. Til að teikna upp eldfjallauppdrætti var meðaltal log fold breytingar (ME/CFS sjúklingar á móti viðmiðum) breytt í log basa 2 með því að nota breytingu á grunnformúlu.

4.5. Gagnagreining og tölfræði

Einþátta tölfræðileg greining fyrir hvert umbrotsefni var gerð með því að nota línulegt blandað líkan með föstum áhrifum á sjúkdómsstöðu, tímapunkti, aldri og BMI og tilviljunarkenndum áhrifum einstaklingsins (snjallustu [67] og þýðir [68] R pakkningar). Benjamini–Hochberg (BH) aðferðin var notuð til að leiðrétta fyrir rangri uppgötvunartíðni, þar sem q < 0.1 var notað sem þröskuldur fyrir marktekt. EnhancedVolcano R pakkinn var notaður fyrir eldfjallalóðir [69].

ChemRICH í R var notað til að framkvæma greiningu á leiðum sem ekki skarast með Metabolon® skilgreindum undirferlum og leiðaröðinni [29]. ChemRICH veftólið var notað til að framkvæma efnafræðilega líkt klasagreiningu [30]. Fyrir þá greiningu var aðeins hægt að taka með efnasambönd sem höfðu þekktan SMILES kóða, samtals 516 efnasambönd. Fyrir báðar ChemRICH greiningarnar voru auðgunartölfræðin gerðar með því að nota Kolmogorov–Smirnov prófið, sem notar ekki p-gildi marktektarmörk heldur ber líkindadreifinguna saman við núlltilgátu líkindadreifingu [70]. Fyrir Metabolon® undirleiðirnar var q < 0.05 valið sem marktektarmörk og q < 0.15 valið fyrir efnaþyrpinga (BH FDR leiðrétting). Fyrir báða höfðu allir klasar undir þeim q þröskuldum sem voru valdir einnig p < 0,05.

Auðgun brauta og gróðurfræðigreining voru framkvæmd með því að nota Metaboanalyst 5.0 veftólið [65], fyrir bæði KEGG og SMPDB viðmiðunarefnaskipti manna með eftirfarandi færibreytum valin: alþjóðlegt próf fyrir tölfræðiprófið og hlutfallslegt miðlægni milli staða sem hnút mikilvægi mælikvarði. Efnasambönd voru með í þessari greiningu ef HMDB auðkennið sem Metabolon® gaf upp passaði við HMDB auðkennið í Metaboanalyst. Fyrir tvítekin efnasambönd fyrir eitt HMDB auðkenni var aðeins það fyrsta innifalið. Þetta leiddi til 453 meðfylgjandi efnasambönd.

Þyngd einstaklinganna með því að nota efnasamböndin fjögur sem voru marktækt frábrugðin sjúklingum og viðmiðunarhópum eftir æfingu var framkvæmd með stigveldisþyrpingu, með Euclidian fjarlægð sem fjarlægðarmælikvarða, og aðferðina "Ward.D2" (hitakort R pakki [71 ]).

Pearson fylgni milli þvags og plasma fyrir 727 umbrotsefni mæld í báðum lífvökvum voru gerðar í R (hmisc pakki). p-gildi voru reiknuð út fyrir hverja fylgni með því að nota t-próf ​​með núlltilgátunni að fylgnistuðullinn væri jafngildur 0, fylgt eftir með BH FDR leiðréttingu með q < 0.15 sem marktektarmörk. Fyrir mynd 8 voru efnasambönd skimuð til að fjarlægja þau sem höfðu öfgakenndar frávik með breyttu z-stigaaðferðinni, sem reiknar út z-stig með því að nota miðgildi og miðgildi algert frávik (útvikur R pakki, z þröskuldur=6).

Nema annað sé tekið fram voru allar gagnamyndanir framkvæmdar með því að nota ggplot2 R pakkann. BH FDR leiðrétting var valin fyrir allar greiningar í stað strangari Benjamini og Yekutieli FDR leiðréttingar vegna þess að afar lítill fjöldi efnasambanda reyndist vera línuleg (0.75% marka höfðu algildi Pearson fylgnistuðull > { {3}}.7).

5. Ályktanir

Á heildina litið var marktækur munur á umbrotum þvags hjá heilbrigðum kyrrsetueftirlitshópum og ME/CFS-sjúklingum sem svar við CPET-áskorun í fjölmörgum ofur- og undirferlum efnaskipta, sem spanna amínósýrur, lípíð, kolvetni, núkleótíð, útlendingalyf og óþekkt. Þessar leiðir taka þátt í fjölda lífeðlisfræðilegra aðgerða, þar á meðal en ekki takmarkað við orkuefnaskipti. Þetta bendir til þess að ME/CFS sjúklingar séu með almenna efnaskiptavanda sem er hluti af áreynsluóþoli þeirra og PEM þar sem breyttur efnaskiptaútskilnaður er áhrifavaldur. Gögn okkar benda til þess að efnaskipti kyrrsetu einstaklinga sem ekki eru með ME/CFS geri miklar breytingar sem gera þeim kleift að jafna sig eftir áreynslu á meðan ME/CFS sjúklingar ná ekki svipuðum aðlögunarsvörun. Framtíðarvinna mun fela í sér að stækka þessa rannsókn til mun stærri hóps sem inniheldur bæði kynin til að sannreyna þessar niðurstöður, kanna kynjamun á umbrotum þvags og kanna hvort lúmskari munur sé á umbrotsefnum í þvagi hjá ME/CFS sjúklingum í upphafi sem gæti hugsanlega mögulega stuðla að greiningarprófi fyrir sjúkdóminn í framtíðinni.

Framlög höfunda:Hugmyndagerð, AG, KAG og MRH; aðferðafræði, AG, KAG, YVH og MRH; formleg greining, KAG, AG og YVH; rannsókn, KAG, AG og YVH; ritun—upprunaleg drög að undirbúningi, KAG, AG og MRH; skrif - yfirferð og ritstjórn, allir höfundar; visualization, KAG og AG; verkefnastjórn, MRH; fjármögnunaröflun, MRH Allir höfundar hafa lesið og samþykkt útgefna útgáfu handritsins.

Fjármögnun:Þessi rannsókn var studd af National Institute of Neurological Disorders and Stroke (NINDS), NIH (U54NS105541) og Amar Foundation. National Center for Advancing Translational Sciences of the NIH veitti fjármögnun fyrir Weill Cornell Medicine Clinical and Translational Science Center (CTSC) til að viðhalda REDCap gagnagrunninum í gegnum UL1 TR 002384.

Yfirlýsing endurskoðunarnefndar stofnana:Rannsóknin var gerð samkvæmt leiðbeiningum Helsinki-yfirlýsingarinnar og samþykkt af Ithaca College Institutional Review Board, Ithaca, New York, Bandaríkjunum (bókun 1017-12Dx2), og Weill Cornell Medical College Institutional Review Board ( bókun 1708018518).

Yfirlýsing um upplýst samþykki:Upplýst samþykki var fengið frá öllum einstaklingum sem tóku þátt í rannsókninni.

Yfirlýsing um framboð gagna:Öll umbrotsefnisgögn fyrir hvert efni eru fáanleg í viðbótargagnaskrám.

Viðurkenningar:Carl Franconi stjórnaði gagnagrunninum og lífsýnasafninu við Cornell háskólann. Blóðsýni voru brotin af David Wang hjá EVMED Research með stuðningi frá Workwell Foundation og af Ivan Falsztyn, Carl Franconi, Ludovic Giloteaux, Madeline McCanne, Jineet Patel, Adam O'Neal, Alexandra Mandarano, Jessica Maya, Shannon Appelquist við Cornell University. Við þökkum eftirfarandi einstaklingum sem tóku þátt í að skima þátttakendur, framkvæma áreynslupróf og/eða safna blóði og þvagi: Betsy Keller, John Chia, Jared Stevens, Tiffany Ong og Maria Russell.

Hagsmunaárekstrar:Höfundar lýsa ekki yfir hagsmunaárekstrum. Fjármögnunaraðilar höfðu ekkert hlutverk í hönnun rannsóknarinnar; við söfnun, greiningu eða túlkun gagna; við ritun handritsins; eða í ákvörðun um að birta niðurstöðurnar.

Heimildir

1. Jason, LA; Mirin, AA Uppfærsla National Academy of Medicine ME/CFS algengi og efnahagsleg áhrif tölur til að gera grein fyrir fólksfjölgun og verðbólgu. Þreyta Biomed. Heilsuhegðun. 2021, 9, 9–13. [Krossvísun]

2. Valdez, AR; Hancock, EE; Adebayo, S.; Kiernicki, DJ; Proskauer, D.; Attewell, JR; Bateman, L.; DeMaria, A., Jr.; Lapp, CW; Rowe, PC; o.fl. Mat á algengi, lýðfræði og kostnaði vegna ME/CFS með því að nota stórfelld lækniskröfur og vélanám. Framan. Barnalæknir. 2018, 6, 412. [CrossRef] [PubMed]

3. Carruthers, BM; Jain, AK; De Meirleir, KL; Peterson, DL; Klimas, NG; Lerner, AM; Bested, AC; Flor-Henry, P.; Joshi, P.; Powles, AP; o.fl. Vöðvabólguheilabólga/langvarandi þreytuheilkenni: skilgreining klínískra tilfella, greiningar- og meðferðarreglur. J. Krónísk þreytuheilkenni. 2003, 11, 7–115. [Krossvísun]

4. Chu, L.; Valencia, IJ; Garvert, DW; Montoya, JG Að afbyggja vanlíðan eftir áreynslu í vöðvaheilabólgu / langvarandi þreytuheilkenni: sjúklingamiðuð þversniðskönnun. PLoS ONE 2018, 13, e0197811. [Krossvísun]

5. Stussman, B.; Williams, A.; Snow, J.; Gavin, A.; Scott, R.; Nath, A.; Walitt, B. Einkenni lasleika eftir áreynslu hjá sjúklingum með vöðvabólguheilkenni/langvarandi þreytuheilkenni. Framan. Neurol. 2020, 11, 1025. [Krossvísun]

6. Stevens, S.; Snell, C.; Stevens, J.; Keller, B.; VanNess, JM Hjarta- og lungnaprófunaraðferðir til að meta áreynsluóþol í vöðvaheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni. Framan. Barnalæknir. 2018, 6, 242. [Krossvísun]

7. Vanness, JM; Snell, CR; Stevens, SR Minnkaði hjarta- og lungnagetu við vanlíðan eftir áreynslu. J. Krónísk þreytuheilkenni. 2007, 14, 77–85. [Krossvísun]

8. Keller, BA; Pryor, JL; Giloteaux, L. Vanhæfni sjúklinga með vöðvabólguheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni til að endurskapa VO(2) topp bendir til skerðingar á starfsemi. J. Þýðing. Med. 2014, 12, 104. [Krossvísun]

9. Missailidis, D.; Annesley, SJ; Fisher, PR meinafræðilegir verkir sem liggja að baki vöðvaheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni. Greining 2019, 9, 80. [CrossRef]

10. Huth, TK; Eaton-Fitch, N.; Staines, D.; Marshall-Gradisnik, S. Kerfisbundin endurskoðun á efnaskiptaröskun í langvarandi þreytuheilkenni/vöðvaheilabólgu/kerfisbundinni áreynsluóþolssjúkdómi (CFS/ME/SEID). J. Þýðing. Med. 2020, 18, 198. [Krossvísun]

11. Germain, A.; Barupal, DK; Levine, SM; Hanson, MR Alhliða blóðrásarefnafræði í ME/CFS sýnir truflað umbrot asýllípíða og stera. Umbrotsefni 2020, 10, 34. [CrossRef]

12. Germain, A.; Ruppert, D.; Levine, SM; Hanson, MR Efnaskiptagreining á vöðvabólguheilabólgu/langvinnri þreytuheilkenni uppgötvunarhópi sýnir truflanir á fitusýru- og fituefnaskiptum. Mol. Biosyst. 2017, 13, 371–379. [Krossvísun]

13. Germain, A.; Ruppert, D.; Levine, SM; Hanson, MR Tilvonandi lífmerki frá plasmametabolomics of myalgic encephalomyelitis/langvarandi þreytuheilkenni hafa áhrif á Redox ójafnvægi í sjúkdómseinkennum. Umbrotsefni 2018, 8, 90. [CrossRef]

14. Yamano, E.; Sugimoto, M.; Hirayama, A.; Kume, S.; Yamato, M.; Jin, G.; Tajima, S.; Goda, N.; Iwai, K.; Fukuda, S.; o.fl. Vísitölumerki um langvarandi þreytuheilkenni með truflun á TCA og þvagefnislotum. Sci. Rep. 2016, 6, 34990. [Krossvísun]

15. Armstrong, CW; McGregor, NR; Sheedy, JR; Buttfield, I.; Rassinn, HL; Gooley, PR NMR efnaskiptasnið á sermi greinir amínósýrutruflanir í langvarandi þreytuheilkenni. Clin. Chim. Acta 2012, 413, 1525–1531. [Krossvísun]

16. Armstrong, CW; McGregor, NR; Lewis, DP; Rassinn, HL; Gooley, PR Samband saurörveru og saur-, blóðsermis- og þvagumbrotsefna við vöðvabólguheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni. Metabolomics 2016, 13, 8. [CrossRef]

17. Hoel, F.; Hoel, A.; Pettersen, IK; Rekeland, IG; Risa, K.; Alme, K.; Sörland, K.; Fossa, A.; Lien, K.; Herder, I.; o.fl. Kort af efnaskiptasvipgerðum hjá sjúklingum með vöðvabólguheilkenni/langvarandi þreytuheilkenni. JCI Insight 2021, 6, e149217. [Krossvísun]

18. Nagy-Szakal, D.; Barupal, DK; Lee, B.; Che, X.; Williams, BL; Kahn, EJR; Ukaigwe, JE; Bateman, L.; Klimas, NG; Komaroff, AL; o.fl. Innsýn í vöðvaheilabólgu / langvarandi þreytuheilkenni svipgerð í gegnum alhliða efnaskiptafræði. Sci. Rep. 2018, 8, 10056. [CrossRef]

19. McGregor, NR; Armstrong, CW; Lewis, DP; Gooley, PR Vanlíðan eftir áreynslu tengist ofumbrotum, vanasetýleringu og hömlun á púrínumbrotum í ME/CFS tilfellum. Greining 2019, 9, 70. [CrossRef]

20. Armstrong, CW; McGregor, NR; Lewis, DP; Rassinn, HL; Gooley, PR Efnaskiptasnið sýnir afbrigðileg orkuefnaskipti og oxunarálagsferli hjá sjúklingum með langvarandi þreytuheilkenni. Efnaskipti 2015, 11, 1626–1639. [Krossvísun]

21. Fluge, O.; Mella, O.; Bruland, O.; Risa, K.; Dyrstad, SE; Alme, K.; Rekeland, IG; Sapkota, D.; Rosland, GV; Fossa, A.; o.fl. Efnaskiptaprófun gefur til kynna skerta virkni pýrúvat dehýdrógenasa við vöðvaheilakvilla/langvarandi þreytuheilkenni. JCI Insight 2016, 1, e89376. [CrossRef] [PubMed]

22. Naviaux, RK; Naviaux, JC; Li, K.; Björt, AT; Alaynick, WA; Wang, L.; Baxter, A.; Nathan, N.; Anderson, W.; Gordon, E. Efnaskiptaeinkenni langvinnrar þreytuheilkennis. Frv. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin 2016, 113, E5472–E5480. [CrossRef] [PubMed]

23. Jones, MG; Cooper, E.; Amjad, S.; Goodwin, CS; Barron, JL; Chalmers, RA Lífrænar sýrur í þvagi og plasma og amínósýrur við langvarandi þreytuheilkenni. Clin. Chim. Acta 2005, 361, 150–158. [CrossRef] [PubMed]

24. Niblett, SH; konungur, KE; Dunstan, RH; Clifton-Bligh, P.; Hoskin, LA; Roberts, TK; Fulcher, GR; McGregor, NR; Dunsmore, JC; Rassinn, HL; o.fl. Blóðfræðileg frávik og útskilnaður í þvagi hjá sjúklingum með langvarandi þreytuheilkenni. Exp. Biol. Med. 2007, 232, 1041–1049. [CrossRef] [PubMed]

25. Germain, A.; Giloteaux, L.; Moore, GE; Levine, SM; Chia, JK; Keller, BA; Stevens, J.; Franconi, CJ; Maó, X.; Shungu, DC; o.fl. Efnaskipti í blóðvökva sýna truflun á svörun og bata eftir hámarksæfingu við vöðvabólguheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni. JCI Insight 2022, 7, e157621. [Krossvísun]

26. Bell, DS The Doctor's Guide to Chronic Fatigue Syndrome. Að skilja, meðhöndla og lifa með CFIDS; Addison-Wesley Publishing Company: Reading, MA, Bandaríkjunum, 1994.

27. Yang, J.; Zhao, X.; Lu, X.; Lin, X.; Xu, G. Gagnaforvinnsluaðferð fyrir efnaskiptafræði til að draga úr grímuáhrifum í gagnagreiningu. Framan. Mol. Biosci. 2015, 2, 4. [Krossvísun]

28. Benjamini, Y.; Hochberg, Y. Controlling the False Discovery Rate: A Practical and Powerful approach to multiple testing. JR Stat. Soc. Ser. B 1995, 57, 289–300. [Krossvísun]

29. Barupal, DK; Fan, S.; Fiehn, O. Samþætting lífupplýsingaaðferða fyrir alhliða túlkun á gagnasettum um efnaskiptafræði. Curr. Opin. Líftækni. 2018, 54, 1–9. [Krossvísun]

30. Barupal, DK; Fiehn, O. Chemical Similarity Enrichment Analysis (ChemRICH) sem valkostur við kortlagningu lífefnaferla fyrir umbrotsgagnasöfn. Sci. Rep. 2017, 7, 14567. [Krossvísun]

31. Goeman, JJ; van de Geer, SA; de Kort, F.; van Houwelingen, HC Alþjóðlegt próf fyrir hópa gena: Prófunarsamband með klínískri niðurstöðu. Lífupplýsingafræði 2004, 20, 93–99. [Krossvísun]

32. Rosato, A.; Tenori, L.; Cascante, M.; De Atauri Carulla, PR; Martins Dos Santos, VAP; Saccenti, E. Frá fylgni til orsakasambands: Greining á efnaskiptagögnum með því að nota kerfislíffræðiaðferðir. Metabolomics 2018, 14, 37. [CrossRef]

33. Cardounel, AJ; Cui, H.; Samouilov, A.; Johnson, W.; Kearns, P.; Tsai, AL; Berka, V.; Zweier, JL Vísbendingar fyrir meinalífeðlisfræðilegu hlutverki innrænna metýlarginína við stjórnun á NO framleiðslu og æðavirkni. J. Biol. Chem. 2007, 282, 879–887. [Krossvísun]

34. Chandrasekharan, UM; Wang, Z.; Wu, Y.; Wilson Tang, WH; Hazen, SL; Wang, S.; Elaine Husni, M. Hækkuð þéttni samhverfs dímetýlarginíns í plasma og aukin virkni arginasa sem hugsanlegar vísbendingar um hjarta- og æðasjúkdóma í iktsýki. Arthritis Res. Þr. 2018, 20, 123. [Krossvísun]

35. Siroen, þingmaður; Teerlink, T.; Nijveldt, RJ; Prins, HA; Richir, MC; van Leeuwen, PA Klínísk þýðing ósamhverfs dímetýlarginíns. Annu. Séra Nutr. 2006, 26, 203–228. [Krossvísun]

36. Bertinat, R.; Villalobos-Labra, R.; Hofmann, L.; Blauensteiner, J.; Sepulveda, N.; Westermeier, F. Minnkuð NO framleiðslu í æðaþelsfrumum sem verða fyrir plasma frá ME/CFS sjúklingum. Vasc. Pharmacol. 2022, 143, 106953. [Krossvísun]

37. Brosnan, JT; Brosnan, ME Amínósýrurnar sem innihalda brennistein: Yfirlit. J. Nutr. 2006, 136, 1636S–1640S. [Krossvísun]

38. Fernandez-García, JC; Martinez-Sánchez, MA; Bernal-López, MR; Muñoz-Garach, A.; Martinez-González, MA; Fitó, M.; Salas-Salvadó, J.; Tinahones, FJ; Ramos-Molina, B. Áhrif lífsstílsíhlutunaráætlunar með orkutakmörkuðu Miðjarðarhafsmataræði og hreyfingu á pólýamín umbrot í sermi hjá einstaklingum með mikla áhættu á hjarta- og æðasjúkdómum: Slembiraðað klínísk rannsókn. Am. J. Clin. Nutr. 2020, 111, 975–982. [Krossvísun]

39. Wang, W.; Zhang, H.; Xue, G.; Zhang, L.; Zhang, W.; Wang, L.; Lu, F.; Li, H.; Bai, S.; Lin, Y.; o.fl. Æfingaþjálfun varðveitir blóðþurrðarforsendur í öldruðum rottuhjörtum með því að endurheimta pólýamínsafn í hjartavöðva. Oxíð. Med. Cell. Longev. 2014, 2014, 457429. [Krossvísun]

40. Blómstrand, E.; Elíasson, J.; Karlsson, HK; Kohnke, R. Branched-chain amínósýrur virkja lykilensím í próteinmyndun eftir líkamsrækt. J. Nutr. 2006, 136, 269S–273S. [Krossvísun]

41. Newsholme, P.; Stenson, L.; Sulvucci, M.; Sumayao, R.; Krause, M. 1.02-Amínósýruefnaskipti. In Comprehensive Biotechnology, 2. útg.; Moo-Young, M., Ed.; Academic Press: Burlington, ON, Kanada, 2011; bls. 3–14. [Krossvísun]

42. Li, S.; Gao, D.; Jiang, Y. Virkni, uppgötvun og breyting á umbrotum acýlkarnitíns í lifrarfrumukrabbameini. Umbrotsefni 2019, 9, 36. [CrossRef]

43. Braun, TP; Marks, DL Stjórnun vöðvamassa með innrænum sykursterum. Framan. Physiol. 2015, 6, 12. [CrossRef] [PubMed]

44. Furman, BL Mineralocorticoids. Í xPharm: The Comprehensive Pharmacology Reference; Enna, SJ, Bylund, DB, ritstj.; Elsevier: New York, NY, Bandaríkin, 2007; bls. 1. [Krossvísun]

45. Kavyani, B.; Lidbury, BA; Schloeffel, R.; Fisher, PR; Missailidis, D.; Annesley, SJ; Dehhaghi, M.; Heng, B.; Guillemin, GJ Gæti kynurenine leiðin verið lykilhlutinn sem vantar í vöðvaheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni (ME/CFS) flókna þraut? Cell. Mol. Lífvísindi. 2022, 79, 412. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Kossman, DA; Williams, NI; Domchek, SM; Kurzer, MS; Stopfer, JE; Schmitz, KH Æfing lækkar estrógen- og prógesterónmagn hjá konum fyrir tíðahvörf í mikilli hættu á brjóstakrabbameini. J. Appl. Physiol. 2011, 111, 1687–1693. [CrossRef] [PubMed]

47. De Souza, MJ; Van Heest, J.; Demers, LM; Lasley, BL Luteal Phase Deficiency í tómstundahlaupurum: sönnunargögn fyrir efnaskiptaástandi. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2003, 88, 337–346. [Krossvísun]

48. Mukherjee, K.; Edgett, BA; Burrows, HW; Castro, C.; Griffin, JL; Schwertani, AG; Gurd, BJ; Funk, CD Umritunarfræði heilblóðs og efnaskiptafræði í þvagi til að skilgreina lífefnafræðilegar aðlögunarferlar á mikilli hreyfingu hjá 50–60- ára meistaraíþróttamönnum. PLoS ONE 2014, 9, e92031. [Krossvísun]

49. Schranner, D.; Kastenmuller, G.; Schonfelder, M.; Romisch-Margl, W.; Wackerhage, H. Breytingar á efnaskiptastyrk hjá mönnum eftir æfingar: Kerfisbundin endurskoðun á rannsóknum á efnaskiptafræði áreynslu. Sports Med. Opið 2020, 6, 11. [CrossRef]

50. Kistner, S.; Rist, MJ; Doring, M.; Dorr, C.; Neumann, R.; Hartel, S.; Bub, A. NMR-undirstaða nálgun til að bera kennsl á umbrotsefni í þvagi sem tengjast bráðri líkamsrækt og hjarta- og öndunarfærni hjá heilbrigðum mönnum-niðurstöður KarMeN rannsóknarinnar. Umbrotsefni 2020, 10, 212. [CrossRef]

51. Kuratsune, H.; Yamaguti, K.; Takahashi, M.; Misaki, H.; Tagawa, S.; Kitani, T. Acylcarnitine skortur í langvarandi þreytuheilkenni. Clin. Smitast. Dis. 1994, 18 (fylgi 1), S62–S67. [Krossvísun]

52. Jones, MG; Goodwin, CS; Amjad, S.; Chalmers, RA Plasma og karnitín í þvagi og asýlkarnitín við langvarandi þreytuheilkenni. Clin. Chim. Acta 2005, 360, 173–177. [Krossvísun]

53. Zhang, J.; Ljós, AR; Hoppel, CL; Campbell, C.; Chandler, CJ; Burnett, DJ; Souza, EB; Casazza, GA; Hughen, RW; Keim, NL; o.fl. Asýlkarnitín sem merki um áreynslutengda eldsneytisskiptingu, xenometabolism og hugsanleg merki til aðlægra taugafrumna vöðva. Exp. Physiol. 2017, 102, 48–69. [Krossvísun]

54. Costa, CG; Guerand, WS; Struys, EA; Holwerda, U.; ten Brink, HJ; Tavares de Almeida, I.; Duran, M.; Jakobs, C. Magngreining á asýlglýsínum í þvagi til að greina beta-oxunargalla með GC-NCI-MS. J. Pharm. Biomed. endaþarm. 2000, 21, 1215–1224. [Krossvísun]

55. Maya, J.; Leddy, SM; Gottschalk, CG; Peterson, DL; Hanson, MR Breytt fitusýruoxun í eitilfrumuhópum vöðvaheilabólgu/langvarandi þreytuheilkennis. Alþj. J. Mol. Sci. 2023, 24, 2010. [Krossvísun]

56. Wilkinson, DJ; Smeeton, NJ; Watt, PW Ammoníak umbrot, heilinn og þreyta; skoða tengilinn aftur. Prog. Neurobiol. 2010, 91, 200–219. [Krossvísun]

57. Chen, S.; Minegishi, Y.; Hasumura, T.; Shimotoyodome, A.; Ota, N. Þátttaka ammoníakefnaskipta í að bæta þolgæði tekatechins í músum. Sci. Rep. 2020, 10, 6065. [Krossvísun]

58. Páll, BD; Sbodio, JI; Snyder, SH Cysteine ​​efnaskipti í taugafoxunarjafnvægi. Trends Pharmacol. Sci. 2018, 39, 513–524. [Krossvísun]

59. Nkiliza, A.; Parks, M.; Cseresznye, A.; Oberlin, S.; Evans, JE; Darcey, T.; Aenlle, K.; Niedospial, D.; Mullan, M.; Crawford, F.; o.fl. Kynsértæk plasmafitusnið ME/CFS sjúklinga og tengsl þeirra við sársauka, þreytu og vitræna einkenni. J. Þýðing. Med. 2021, 19, 370. [Krossvísun]

60. O'Neal, AJ; Gler, KA; Emig, CJ; Vitug, AA; Henry, SJ; Shungu, DC; Maó, X.; Levine, SM; Hanson, MR könnun á mótefnamagni gegn sýkla í vöðvaheilabólgu/langvarandi þreytuheilkenni. Proteomes 2022, 10, 21. [CrossRef]

61. Greining á vanlíðan eftir áreynslu með því að nota tveggja daga CPET hjá fólki með ME/CFS.

62. Ware, JE, Jr.; Sherbourne, CD The MOS 36-item shortform health survey (SF-36). I. Hugmyndaramma og atriðisval. Med. Umönnun 1992, 30, 473–483. [Krossvísun]

63. Smets, EM; Garssen, B.; Bonke, B.; De Haes, JC The Multidimensional Fatigue Inventory (MFI) sálfræðilegir eiginleikar tækis til að meta þreytu. J. Psychosom. Res. 1995, 39, 315–325. [Krossvísun]

64. Ford, L.; Kennedy, AD; Goodman, KD; Pappan, KL; Evans, AM; Miller, LAD; Wulff, JE; Wiggs, BR; Lennon, JJ; Elsea, S.; o.fl. Nákvæmni klínískrar efnaskiptaferils til notkunar við að greina meðfæddar villur í efnaskiptum. J. Appl. Lab. Med. 2020, 5, 342–356. [Krossvísun]

65. Pang, Z.; Chong, J.; Zhou, G.; de Lima Morais, DA; Chang, L.; Barrette, M.; Gauthier, C.; Jacques, PE; Li, S.; Xia, J. MetaboAnalyst 5.0: Að minnka bilið milli hrára litrófs og hagnýtra innsýnar. Nucleic Acids Res. 2021, 49, W388–W396. [CrossRef] [PubMed]

66. Durbin, BP; Hardin, JS; Hawkins, DM; Rocke, DM Afbrigðastöðugandi umbreyting fyrir genatjáningar örfylkisgögn. Lífupplýsingafræði 2002, 18 (Viðauki 1), S105–S110. [CrossRef] [PubMed]

67. Kuznetsova, A.; Brockhoff, PB; Christensen, RHB lmerPrufupakki: Prófanir í línulegum blönduðum áhrifalíkönum. J. Stat. Softw. 2017, 82, 1–26. [Krossvísun]

68. Lenth, R. Emmeans: Áætluð jaðarmeðal, aka Least-Squares Means, 1.8.2; R pakki. 2022.

69. Blighe, K.; Rana, S.; Lewis, M. EnhancedVolcano: Útgáfutilbúin eldfjallalóð með bættum litun og merkingum, útgáfa 1.16.0; R pakki. 2022.

70. Smirnov, NV Um mat á misræmi milli reynsluferla dreifingar fyrir tvö óháð úrtak. Naut. Stærðfræði. Univ. Moskvu 1939, 2, 3–14.

71. Kolde, R. Pheatmap: Pretty Heatmaps, 1.0.12; R pakki. 2019.

Fyrirvari/Athugasemd útgefanda:Yfirlýsingar, skoðanir og gögn sem eru í öllum ritum eru eingöngu frá einstökum höfundum og þátttakendum en ekki MDPI og/eða ritstjóra. MDPI og/eða ritstjóri(r) afsalar sér ábyrgð á hvers kyns meiðslum á fólki eða eignum sem stafa af hugmyndum, aðferðum, leiðbeiningum eða vörum sem vísað er til í innihaldinu.

【Hafðu samband】 Netfang: george.deng@wecistanche.com / WhatsApp:008613632399501/Wechat:13632399501