Verndaráhrif Herba Cistanches á vöðvaeiturhrif af völdum statíns in vitro
Mar 24, 2022
Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com
Elaine Wat a,b,1, Chun Fai Ng a,b,1, Chi Man Koon a,b, Eric Chun Wai Wong a,b, Brian Tomlinson c, Clara Bik San Lau a,b,n
stofnun í kínverskri læknisfræði, Kínverska háskólinn í Hong Kong, Shatin, New Territories, Hong Kong
b State Key Laboratory of Phytochemistry and Plant Resources í Vestur-Kína, Kínverski háskólinn í Hong Kong, Shatin, New Territories, Hong Kong
c Deild klínískrar lyfjafræði, læknadeild og meðferðardeild, Kínverski háskólinn í Hong Kong, Shatin, New Territories, Hong Kong
Ágrip:
Etnólyfjafræðilegt mikilvægi: HerbaCistanches(HC,Cistanchedeserticola, eðaCistanchetubulosa) er kínversk jurt sem venjulega er notuð við vöðvavandamálum. Fyrri rannsóknir sýndu að HC þykkni gæti dregið úr vöðvaskemmdum og bætt ATP geymslu hjá rottum eftir æfingu. Hins vegar hafa áhrif þess á vöðvaeitrun af völdum statíns aldrei verið rannsökuð.
Markmið:Markmið þessarar rannsóknar var að ákvarða hvort vatnskenndur útdráttur af HC (HCE) gæti komið í veg fyrir eiturverkanir af völdum simvastatíns í L6 beinagrindarvöðvafrumum hjá rottum og hvort verbascoside sé aðal lífvirki efnið sem stuðlar að áhrifunum
Efni og aðferðir:MTT var framkvæmt til að ákvarða áhrif HCE ({{0}}–2000 mg/ml) eða verbascoside (0–160 mM) á simvastatín (10 mM) meðhöndlaðar L6 frumur. Annexin V-FITC/PI apoptosis próf og Caspase 3 próf voru framkvæmd til að ákvarða verndandi hlutverk HCE á simvastatín völdum frumudauða, og til að meta hvort HCE beitti verndandi áhrifum sínum í gegnum caspasa ferlið. ATP framleiðsla var mæld til að kanna hvort HCE gæti komið í veg fyrir minnkun á ATP framleiðslu in vitro af völdum simvastatíns.
Niðurstöður:Simvastatín jók marktækt apoptotic frumudauða í L6 frumum. HCE sýndi marktæka skammtaháða lækkun á apoptotic frumum af völdum simvastatíns, hugsanlega með caspase-3 ferli. Simvastatín dró úr ATP framleiðslu í L6 frumum, sem var komið í veg fyrir skammtaháð af HCE. Það var aðeins tilhneiging en ekki marktæk áhrif (nema við stóra skammta) af verbascoside á verndun vöðvaeitrunar af völdum simvastatíns.
Ályktanir:Að lokum sýndum við í fyrsta skipti fram á að HCE gæti haft skammtaháð verndandi áhrif á eiturverkanir af völdum simvastatíns in vitro, sem var ólíklegt vegna nærveru verbaskósíðs. Rannsóknin okkar gaf til kynna hugsanlega notkun HC við aðstæður sem vöðvaeitrun af völdum simvastatíns.
Leitarorð:HerbaCistanches, Statínkólesteról, blóðfituhækkun, eiturverkanir á vöðvum, Verbascoside, Caspase-3
1. Inngangur
HMG-CoA redúktasahemlar (statín), sem eru mest seldi lyfseðilsskylda lyfjaflokkurinn í sögunni, eru vel skjalfestir fyrir að vera gagnlegir sjúklingum af báðum kynjum á mismunandi aldri með miðlungsmikla og mikla áhættu á hjarta- og æðasjúkdómum (Golomb og Evans, 2008). Mismunandi statín voru síðan þróuð og samþykkt klínískt þar á meðal pravastatin, atorvastatin, fluvastatin, lovastatin, pitavastatin, rosuvastatin og simvastatin. Almennt séð virka öll statín með því að hindra lækkun HMG-CoA í mevalónsýru á fyrstu stigum mevalonatferilsins til að draga úr kólesterólframleiðslu (Kromer og Moosmann, 2009; Thompson o.fl., 2003). Þrátt fyrir að statín þolist yfirleitt vel er ein mikilvægasta og þekktasta klíníska aukaverkanin eiturverkanir á beinagrindarvöðva (rákvöðvalýsa) (Kobayashi o.fl., 2008). Frávik í beinagrindarvöðvum geta verið allt frá góðkynja vöðvaverkjum til alvarlegrar vöðvakvilla. Þótt blandað aðferðum sé lagt til og gæti verið ábyrgt fyrir vöðvaskaðaverkunum statíns, er talið að hvatbera kerfi gegni mikilvægu hlutverki (Golomb og Evans, 2008). Mevalonat er ekki aðeins undanfari kólesteróls, heldur einnig fyrir önnur efnasambönd þar á meðal selenóprótein, dolichol og ubiquinone (Kaufmann o.fl., 2006; Vaklavas o.fl., 2009). Hæfni statína til að hamla mevalónati myndi því einnig hamla framleiðslu selenópróteina eins og glútaþíonperoxídasa (GPx), sem eru mikilvæg ensím til að viðhalda andoxunarvörninni (Kromer og Moosmann, 2009). Statín gætu einnig leitt til tæmingar á ubiquinon, sem veldur minni súrefnisnotkun og ATP nýmyndun (Beltowski o.fl., 2009). Ennfremur sýndu auknar rannsóknir in vitro og in vivo fram á að statín gæti einnig virkað beint á hvatbera vefja til að framkalla Ca2þ-háð himnu gegndræpi umskipti (MPT) á skammtaháðan hátt (Beltowski o.fl., 2009; Velho o.fl., 2006 ). Það tengist einnig auknum hvarfgefnum súrefnistegundum (ROS) og oxunarálagi hvatbera, sem leiðir til frumudauða og stuðlar því að lifrar- og vöðvaskaða (Beltowski o.fl., 2009; Velho o.fl., 2006).
HerbaCistanches, allt þurrkað planta af Cistanche deserticola YC Ma, eða Cistanche tubulosa (Schrenk) Wight (Orobanchaceae fjölskyldu), eru sníkjudýr sem vaxa aðallega á eyðimerkursvæðum norður og norðaustur Kína (Siu og Ko, 2010).HerbaCistancheser Yang-styrkjandi kínversk tonic jurt sem er fyrst og fremst notuð til að meðhöndla nýrnaskort með einkennum eins og getuleysi, ófrjósemi, ótímabært sáðlát. Þungt og gróft eðli jurtarinnar rakar einnig þörmum og hjálpar til við að létta hægðatregðu. Það er einnig kínversk jurt sem venjulega er ávísað til sjúklinga vegna verkja í lendar og hné og er jurt sem er almennt notuð í kínverskum lyfjaformum til meðferðar á vöðvavandamálum (Siu og Ko, 2010; Xiong o.fl., 1998). Athyglisvert er að þetta er einnig í samræmi við nútíma vísindarannsóknir sem sýndu fram á þreytuvirkni fjölsykruríks og fenýletanóíðríks útdráttar afHerbaCistancheshjá rottum eftir æfingu með því að minnka vöðvaskemmdir og bæta ATP geymslu (Cai o.fl., 2010). Nýleg vinna sýndi fram á að metanólútdráttur úr Herba Cistanches gæti aukið ATP-myndun í hvatberum (Leung og Ko, 2008). Siu og Ko (2010) sýndu þaðHerbaCistanchesgæti einnig aukið glútaþíonstöðu hvatbera með því að miðla magni glútaþíonmyndunar og GPx, og vernda þannig vefi gegn oxunarálagi í hjörtum rotta. Siu og Ko (2010) sýndu það líkaHerbaCistanchesgæti minnkað Ca2þ innihald hvatbera og þar með minnkað Ca2þ háð MPT. Ennfremur,HerbaCistanchesvar einnig sýnt fram á að vera sterkt andoxunarefni og sindurefnahreinsiefni í ýmsum líffærum, sem dregur úr oxunarálagi og ROS virkni in vivo rannsóknum (Lu o.fl., 1995; Sui o.fl., 2011). Meira áhugavert, í tilraun til að ákvarða virka brotið sem stuðlar að þreytuvirkniHerbaCistanches, kom í ljós að verbaskósíð var aðalþátturinn í virka hlutanum (Cai o.fl., 2010). Einnig hefur verið sýnt fram á að Verbascoside dregur úr vöðvaþreytu í túttum, hugsanlega vegna andoxunarvirkni þess (Liao o.fl., 1999), sem bendir til þess að verbascoside gæti verið lífvirki þátturinn sem stuðlar að jákvæðum áhrifum Herba Cistanches.
Markmið þessarar rannsóknar var að ákvarða hvort notkun á Cistanches vatnsþykkni (HCE) gæti dregið úr vöðvaeitrun sem simvastatín veldur in vitro. Gert var ráð fyrir að notkun HCE gæti leiðrétt fyrir aukaverkunum vöðvaeitrunar af völdum simvastatíns. Einnig var reynt að komast að því hvort jákvæð áhrif afHerbaCistancheseru rakin til nærveru verbascosides.
2. Efniviður og aðferðir
2.1. Sannvottun og undirbúningur jurtaefna
Hrá jurtaefni afHerbaCistanchesvar keypt af þekktum birgi í Guangzhou í Kína.HerbaCistanchesvar efnafræðilega auðkennt með þunnlagsskiljun (TLC) í samræmi við kínverska lyfjaskrá (CP), 2010, með verbascoside og echinacoside sem efnamerki (gögn ekki sýnd). Við efnafræðilega auðkenningu, herbarium skírteini sýnishorn afHerbaCistanchesvar geymt á Museum of the Institute of Chinese Medicine við Kínverska háskólann í Hong Kong (CUHK), með fylgiskjalssýni númer 2014–3434.
Í stuttu máli var 1 kg af hráu jurtinni lagt í bleyti í 1 klst, fylgt eftir með útdrætti tvisvar með upphitun í 1 klst undir bakflæði við 100 gráður með því að nota 10 eimað vatn fyrir hvern útdrátt. Vatnskenndu útdrættirnir (HCE) voru sameinaðir og síaðir. Síuvökvinn var þéttur við lækkaðan þrýsting við 60 gráður. Óblandaða útdrátturinn var frostþurrkaður þar til hann þornaði. Hlutfall afraksturs var 50,1 prósent w/w. Lítið magn var notað til að ákvarða magn af verbascoside og echinacoside með ultra-performance vökvaskiljun (UPLC). Allt útdregið duft var í lofttæmi pakkað og geymt þar til það er notað.
2.2. UPLC greining á vatnskennda útdrættinum
UPLC greiningar voru gerðar með Waters Acquity Ultra Performance LC System (Waters, Bandaríkjunum). Allir leysir sem þarf til UPLC greiningar voru keyptir frá efnafræðideild kínverska háskólans í Hong Kong. Verbascoside og echinacoside voru keypt frá National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Kína. Sýnislausninni var sprautað í Waters Acquity UPLC BEH C18 súlu (10{{20}} 2,1 mm2 id, kornastærð 1,7 mm) með Waters ACQUITY UPLC BEH C18 VanGuard forsúlu ( 5-2.1 mm2 auðkenni, kornastærð 1,7 mm). Allir leysir voru forsíuðir með 0.45 mm Millipore síuskífu (Millipore) og afgasaðir. Gradient skolun var framkvæmd með því að nota eftirfarandi leysikerfi: hreyfanlegur fasi A – asetónítríl; hreyfanlegur fasi B – tvöfalt eimað vatn/maurasýru (99,9/ 0.1; v/v). Skolunin var framkvæmd með hallaaðferð sem hér segir: 0–5 mín, 88 prósent B; 5–10 mín, úr 88 prósentum B í 83 prósent B. Rennslishraði sem notaður var var 0,4 ml/mín og greining var framkvæmd við 331 nm í samræmi við CP (2010). Hvert sýni (5 ul) var sprautað í súluna eftir síun í gegnum 0,2 mm síudisk. Greining á efnamerkjunum var framkvæmd með því að bera saman varðveislutíma og UV-gleypni óþekktu toppanna við staðla. Kvörðunarferill var teiknaður upp með röð styrkleika af verbascoside og echinacoside (40, 20, 10, 5, 2,5 og 1,25 mg/ml) til magngreiningar. Magngreining á verbascoside og echinacoside innan jurtaseyðisins var gerð í þrígangi. Kerfið var fylgst með tölvu með Waters MassLynx hugbúnaðinum til gagnasöfnunar, samþættingar og greiningar.
2.3. Frumuræktun
L6 beinagrindarvöðvafrumulína hjá rottum var keypt frá American Type Culture Collection (ATCC, Manassa, VA, Bandaríkjunum). Frumunum var haldið við samrennandi þéttleika í Dulbecco's Modifified Eagle's Medium (DMEM, ATCC, Manassas, VA, USA) ásamt 10 prósent rúmmáli rúmmáls nautgripasermi (FBS) og 1 prósent penicillín-streptomycin (P/S), og ræktað við 37 gráður í rakaðri andrúmslofti sem inniheldur 5 prósent CO2 og 95 prósent loft.
Til að ákvarða áhrif HCE á vöðvaeitrun af völdum statíns voru L6 frumur meðhöndlaðar með simvastatíni við 1 0 μM í 48 klst. til að framkalla eiturverkanir. HCE (við styrkleika 0, 250, 500, 1000 og 2000 ug/ml) eða verbascoside (við styrkleika 0, 20, 40, 80 og 160 μM) var bætt við sem samhliða meðferð með statíni til að ákvarða hvort jurtaseyði gæti komið í veg fyrir eiturverkanir af völdum statíns í beinagrindarvöðvafrumum og að ef verbascoside gæti haft svipuð verndandi áhrif og jurtavatnsútdrátturinn.
Herba Cistanche þykkni verndandi áhrif á eiturverkanir af völdum simvastatíns in vitro
2.4. In vitro frumueiturhrif
L6 frumur (1x105/brunn) var sáð í {{0}}vel flatbotna ræktunarplötur (Iwaki, Japan) yfir nótt, fylgt eftir með meðferð með 10 μM af simvastatíni, ásamt eða án ýmissa skammta af HCE ( 0–2000 ug/ml) eða verbascoside (0–160 μM), í 48 klst. Venjulegur miðli (DMEM) var bætt við samanburðarholurnar. Jurtaútdrátturinn og efnasambandið voru leyst upp í DMEM.
Eftir 48 klst. meðferð var miðlinum úr öllum frumum hent og 30 ul af 5 mg/ml 3-(4,5-dímetýlþíasól-2-ýl)-2,{{ 8}}dífenýl-tetrasólíumbrómíði (MTT; Sigma, USA) í fosfat-bufferðri saltlausn (PBS) var bætt við hvern brunn og plöturnar voru ræktaðar frekar í 3 klst við 37 gráður. Fljótandi vökvinn var síðan fjarlægður og 100 ul af DMSO var bætt við hvern brunn til að leysa upp fjólubláu formazan kristallana (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO. USA). Frásog hvers sýnis var lesið við 540 nm með því að nota örplötulesara (Biotek μ-Quant, Bandaríkjunum). Niðurstöður voru gefnar upp sem hlutfall af MTT gleypni með tilliti til samanburðarfrumna.
2.5. Annexin-V FITC/PI litunarpróf
L6 frumur (3 x105/brunn) voru meðhöndlaðir með simvastatíni, ásamt eða án ýmissa skammta af HCE eða verbascoside. Frumum var síðan safnað, þvegið og litað með annexin-V FITC setti í samræmi við siðareglur framleiðanda (Trevigen, MD, USA). Í stuttu máli voru frumur þvegnar tvisvar með 1 x bindispúða og settar í teninga í 100 ul merkingarlausn sem innihélt 1 ul annexin-V FITCconjugate og 10 ul PI í myrkri í 15 mínútur við stofuhita. Flúrljómun sýnanna var greind með frumuflæðismælingu (Becton Dickinson FACSCanto II, Bandaríkjunum).
2.6. Caspase 3 virkniprófun
Kaspasa 3 virkni var ákvörðuð með flúorómetískri, ónæmissogandi ensímgreiningu (Sigma) samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Í stuttu máli voru L6 frumur (3 105/brunn) meðhöndlaðar með simvastatíni, ásamt eða án ýmissa skammta af HCE verbascoside, lýsaðar með því að nota lýsisbuffið. Frítt 7-amínó-4-metýlkúmarín (AMC) sem myndast í gegnum próteinklofnun hvarfefnisins með Caspase 3 var mæld og magngreind með flúormetrafræðilega með örvunarbylgjulengdinni við 360 nm og losunarbylgjulengdina við 460 nm með Optima BMG FLUOstar lesandi (BMG LABTECH GmbH, Þýskalandi).
2.7. ATP próf í frumum
L6 frumur (3x105/brunn) voru meðhöndlaðir með simvastatíni, ásamt eða án ýmissa skammta af HCE eða verbascoside. Eftir meðferð var frumum safnað og ATP-innihaldið var mælt með því að nota litmælingasettið sem er fáanlegt í verslun (Abcam, Bretlandi) með mælingu á glýserólfosfatinnihaldi lýsuðu frumanna og lesa við 570 nm með því að nota örplötulesara (Biotek μ-Quant, USA ). Mæling á ATP framleiðslu var gefin upp sem hundraðshluti miðað við samanburðarhóp.
2.8. tölfræðigreining
Gögnin voru sett fram sem mean7SD, Prisma 5 fyrir Window (útgáfa 5.0c, GraphPad Software, Inc., USA) var notuð fyrir tölfræðilega greiningu. Marktækur munur meðal allra hópa var metinn með einhliða ANOVA, fylgt eftir með Bonferroni's MultipleComparison Test. Líkur á po0.05 voru taldar tölfræðilega marktækar.
3. Úrslit
3.1. UPLC greining á Herba Cistanches vatnsþykkni
Mynd S1A sýndi UPLC prófíl staðlaðrar blöndu sem inniheldur echinacoside og verbascoside. Varðveislutímapunktar hvers þessara merkja voru bornir saman við UPLC prófílinn áHerbaCistanchesvatnskenndur útdráttur (mynd S1B). Magn echinacoside og verbascoside innanHerbaCistanchesvatnskenndur útdráttur reyndist vera {{0}},45 prósent w/w og 0,085 prósent w/w, í sömu röð.
3.2. Áhrif HCE og verbascoside á frumudrepandi áhrif simvastatíns í L6 beinagrindarvöðvafrumum in vitro
Eins og sýnt er á mynd 1A, olli simvastatín marktækum frumueiturhrifum á L6 frumur eins og endurspeglast af marktækri minnkun á lífvænleika L6 frumna við 10 mM simvastatín. HCE meðferð var skammtaháð og marktækt í veg fyrir frumueiturverkanir af völdum simvastatíns við 500, 1000 og 2000 mg/ml. Verbascoside hafði tilhneigingu til að bæta lífvænleika L6 frumna sem fengu samhliða meðferð með simvastatíni. Hins vegar hafði enginn styrksins náð tölfræðilegri marktækni (mynd 1B).
Mynd 1. Verndaráhrif (a) HCE; og (b) verbaskósíð á frumueiturhrif af völdum simvastatíns í L6 frumum. Gildi tákna mean7SD (n¼3). Marktækur munur á simvastatínmeðferð eingöngu og samanburðarhópnum sem notar t-próf nemenda: ### po0.{{10}}01. Marktækur munur meðal allra hópa sem fengu simvastatín með eða án HCE verbascoside samhliða meðferð með einstefnu ANOVA: ** po0.01,*** po0.001.
3.3. Áhrif HCE og verbascoside á frumudauða af völdum simvastatíns í L6 beinagrindarvöðvafrumum
Til að kanna hvernig frumudauði er framkallaður af simvastatíni og ákvarða verndarhlutverk HCE eða verbascosides á frumudauða af völdum simvastatíns, var hlutfall apoptótískra frumna greint með própídíumjoðíði (PI) litun. Niðurstöðurnar sýndu að simvastatín olli marktækri aukningu á hlutfalli snemmbúna apoptótískra frumna (Annexin V-FITC jákvæð og PI neikvæð, Q4–2), og seint apoptótísk/dauð fruma (Annexin V-FITC jákvæð og PI-jákvæð, Q2– 2) samanborið við samanburðarhópinn. Samhliða meðferð með HCE dró úr hlutfalli snemmbúna apoptotic og seint apoptotic/dauðra frumna á skammtaháðan hátt allt að 1000 mg/ml (mynd 2A). Þessi verndandi áhrif komu einnig fram hjá verbascoside samhliða meðferðarhópum. Hins vegar hafði enginn styrksins sem var prófaður náð tölfræðilegri marktekt (mynd 2B).
Mynd 2. Áhrif simvastatíns með eða án HCE eða verbascoside samhliða meðferðar á fosfatidýlserín utanaðkomandi í L6 frumum. Frumur voru litaðar með Annexin-V FITC og I og greindar með frumuflæðismælingu
3.4. Áhrif HCE og verbascoside á virkni kaspasa 3 í L6 beinagrindarvöðvafrumum sem meðhöndlaðir eru með simvastatíni
Eins og sýnt er á mynd 3A, 10 mM simvastatín framkallaði marktækt virkni kaspasa 3 í L6 frumum, sem bendir til þess að simvastatín hafi framkallað apoptosis til L6 frumna í gegnum kaspasa hlaupið. Hins vegar, í L6 frumum sem fengu samhliða meðferð með simvastatíni og HCE, minnkaði HCE skammtaháð og marktækt virkni kaspasa 3, sem bendir til getu HCE til að koma í veg fyrir apoptosis af völdum simvastatíns í gegnum kaspasa hlaupið. Á hinn bóginn, þó að verbascoside hafi einnig tilhneigingu til að draga úr aukningu á kaspasa 3 ensímvirkni af völdum simvastatíns, náði aðeins styrkurinn við 160 mM tölfræðilega marktekt (mynd 3B).
Mynd 3. Verndaráhrif (a) HCE; og (b) verbaskósíð á simvastatín-örvaða kaspasa 3 ensímvirkni í L6 frumum. Gildi tákna mean7SD (n¼3–5). Marktækur munur á simvastatínmeðferð eingöngu og samanburðarhópum sem nota t-próf nemenda: ###po0.001. Marktækur munur meðal allra hópa sem fengu simvastatín með eða án HCE eða verbascoside samhliða meðferð með einstefnu ANOVA: *po0.05, **p o0.01, ***po0.001.
3.5. Áhrif HCE á simvastatín-framkallaða minnkun á ATP framleiðslu í L6 beinagrindarvöðvafrumum
Simvastatín (10 mM) minnkaði marktækt ATP framleiðslu í L6 frumum um 60 prósent samanborið við samanburðarhópinn (mynd 4A). HCE samhliða meðferð dró skammtaháð úr lækkun á ATP framleiðslu í frumum sem fengu simvastatín, þar af hafði aðeins styrkurinn við 500, 1000 og 2000 mg/ml náð tölfræðilegri marktekt. Á hinn bóginn, þó að verbascoside hafi haft tilhneigingu til að endurheimta ATP framleiðslu við 50 mg/ml, náði það ekki tölfræðilegri marktekt (mynd 4B).
Mynd 4. Verndaráhrif (a) HCE og (b) verbascoside á simvastatín-völdum minnkun á ATP framleiðslu í L6 frumum. Gildi tákna mean7SD (n¼3–5). Marktækur munur á simvastatínmeðferð eingöngu og samanburðarhópum sem nota t-próf nemenda: ###po0.001. Marktækur munur meðal allra hópa sem fengu simvastatín með eða án HCE eða verbascoside samhliða meðferð með einstefnu ANOVA: *po0.05, **po0.01.
4. Umræður
Með auknu algengi hjarta- og æðasjúkdóma og sjúklinga sem greinast með kólesterólhækkun á heimsvísu hefur notkun statína orðið algengari. Þrátt fyrir að statín þoli almennt mjög vel eru vöðvaskaðar algeng aukaverkun tengd statínnotkun sem getur komið fram bráðum vikum eða mánuðum eftir að lyfið er hafið (Fine, 2003). Einkenni vöðva geta verið breytileg frá vægum vandamálum, til dæmis verkjum, eymslum eða máttleysi með eða án kreatínkínasa (CK) hækkunar, upp í alvarlegasta ástand rákvöðvalýsu (Armitage, 2007; Hu o.fl., 2012). Vegna þess að þessar aukaverkanir koma fram, og vegna þess að engin árangursrík meðferð er til við vöðvaeitrun af völdum statíns, eru statín enn vannotuð. Í víðtækri könnun á 10.409 frönskum einstaklingum, sem gerð var í gegnum símaviðtal, greindu 10 prósent sjúklinganna sem fengu statínmeðferð frá vöðvaeinkennum, sem leiddu til þess að 30 prósent þessara sjúklinga með einkenni leiddu til þess að meðferð var hætt (Rosenbaum o.fl., 2013).
Við höfum í fyrsta sinn sýnt fram á að vatnsþykkni afHerbaCistanches, sem er almennt notuð hefðbundin kínversk jurt, gæti haft verndandi áhrif gegn eiturverkunum af völdum simvastatíns in vitro í L6 beinagrindarvöðvafrumum, sem bendir til þess aðHerbaCistanchesvatnsþykkni (HCE) fyrir verndandi hlutverk þess vöðvaeitrun af völdum statíns, sem er viðurkennd algeng aukaverkun hjá sjúklingum sem taka statín. Öflug hæfni HCE til að vernda gegn vöðvaeitrun af völdum statíns væri því mjög möguleg.
Samkvæmt hefðbundinni kenningu í TCM tengist Yang orkuumbrotum hvatbera í líkamanum og ávísun á Yang-hrífandi jurtum reyndist auka ATP-myndun hvatbera (Ko og Leung, 2007). Athyglisvert var að við sáum minnkun á ATP framleiðslu í simvastatínmeðhöndluðum L6 beinagrindarvöðvafrumum og þessi lækkun á ATP framleiðslu var verulega bætt með HCE samhliða meðferð. Í rannsókn okkar, með því að nota L6 rottu beinagrindarvöðvafrumur, sýndum við minnkun á lífvænleika frumna af völdum simvastatíns. Þessi minnkun á lífvænleika frumna var verulega bætt með samhliða meðferð áHerbaCistanchesá skammtaháðan hátt. Þrátt fyrir að nákvæmur gangur vöðvaeitrunar af völdum statíns hafi ekki verið útskýrður að fullu, var stungið upp á að statín völdum frumudauði heilbrigðra beinagrindarvöðvafrumna væri meðvirkandi þáttur sem veldur vöðvakvilla, algengasta aukaverkunin sem statínnotendur upplifa (Dirks og Jones, 2006). . Í rannsókn okkar sáum við marktæka aukningu á apoptótískum frumum af völdum simvastatíns, sem tengdist marktækt aukinni virkni kaspasa 3. Þessar upplýsingar eru einnig í samræmi við fyrri rannsóknir, sem sýndu fram á að ýmis statín gætu framkallað frumudauða í vöðvafrumum í beinagrind, vöðvapípum og í aðgreindum aðal beinagrindarvöðvafrumum manna með virkjun kaspasa-9 og kaspasa-3 virkni (Dirks og Jones, 2006). HCE okkar gat komið í veg fyrir þessa aukningu af völdum simvastatíns á kaspasa-3 virkjuð frumudauða á skammtaháðan hátt.
HerbaCistanches
Að auki bentu fyrri bókmenntir til þess að verbascoside væri einn af helstu virku innihaldsefnunum innanHerbaCistanches. Verbascoside, einnig þekkt sem akteósíð, tilheyrir meðlim fenýletanóíð glýkósíða, sem er náttúrulega hópur fjölfenólefnasambanda sem er leysanlegt í vatni (Liao o.fl., 1999). Áður hefur verið sýnt fram á að verbascoside er öflugt andoxunarefni sem gæti sýnt sterka ROS-hreinsandi og andoxunarvirkni (Liao o.fl., 1999). Í rannsókn okkar, til að ákvarða hvort verbascoside sé aðalþátturinn í HCE okkar sem stuðlar að þeim jákvæðu áhrifum sem sést, prófuðum við áhrif verbascoside í styrkleikanum 0–160 mM. Þar sem við höfum sýnt fram á að HCE okkar er virkt á styrkleikabilinu 250–2000 mg/ml, byggt á HPLC niðurstöðum okkar sem bentu til þess að HCE okkar innihélt verbascoside í styrkleikanum 0,085% wt. /wt, virkur styrkur verbascosides ætti að vera á bilinu 0,2125–1,7 mg/ml (þ.e. 0,34–2,72 mM), ætti verbascoside að vera virka efnið? Engu að síður tókst okkur ekki að fylgjast með marktækum jákvæðum áhrifum verbascosides á styrkleikasviðinu sem var prófað, þó að við höfum séð skammtaháða þróun fyrir jákvæð áhrif verbascosides á L6 beinagrindarvöðvafrumur. Þessar upplýsingar bentu til þess að ólíklegt er að jákvæð áhrif HCE okkar sem sést í L6 beinagrindfrumum megi rekja til áhrifa verbascosides eingöngu, sem bendir til þess að aðrir þættir en verbascoside gætu verið ábyrgir fyrir þeim jákvæðu áhrifum sem fram komu. Það er líka mögulegt að verbascoside gæti haft samskipti við önnur lífvirk efnasambönd í útdrættinum til að stuðla að jákvæðum áhrifum. Viðbótartilraunir sem nota lífgreiningarstýrða skiptingu munu vera gagnlegar til að veita frekari innsýn í að uppgötva lífvirku efnisþættina sem bera ábyrgð á að stuðla að verndandi áhrifum HCE á vöðvaeitrun af völdum simvastatíns.
Að lokum gefur þessi rannsókn til kynna að HCE gæti haft öflug verndandi áhrif á simvastatín-völdum minnkun á lífvænleika vöðvafrumna in vitro. Þessar niðurstöður veita bráðabirgðavísbendingar sem benda til þess að HC vatnsseyði okkar gæti verið lækningalegt gildi sem hagnýtur matur eða næringarefni fyrir sjúklinga með of háa blóðfitu sem þurfa að hætta meðferð með statínum vegna vöðvaeiturhrifa af völdum statíns.
Viðurkenning Þessi rannsókn var styrkt fjárhagslega af Food and Health Bureau HKSAR, Health, and Medical Research Fund nr. 11120831.
Heimildir
Armitage, J., 2007. Öryggi statína í klínískri starfsemi. Lancet 370, 1781–1790.
Beltowski, J., Wojcicka, G., Jamroz-Wisniewska, A., 2009. Skaðleg áhrif statína – aðferðir og afleiðingar. Curr. Drug Saf. 4, 209–228.
Cai, RL, Yang, MH, Shi, Y., Chen, J., Li, YC, Qi, Y., 2010. Þreytuvirkni phenylethanoid-ríkur þykkni úr Cistanche deserticola. Phytother. Res. 24, 313–315.
Dirks, AJ, Jones, KM, 2006. Statín af völdum apoptosis og beinagrindarvöðvakvilla. Am. J. Physiol. Cell Physiol. 291, C1208–C1212.
Fine, DM, 2003. Statín-tengd vöðvaeitrun. Clin. Pharmacol. 3, 554.
Golomb, BA, Evans, MA, 2008. Skaðleg áhrif statíns: endurskoðun á bókmenntum og vísbendingar um hvatberakerfi. Am. J. Hjarta- og æðakerfi. Fíkniefni 8, 373–418.
Hu, M., Cheung, BM, Tomlinson, B., 2012. Öryggi statína: uppfærsla. Þr. Adv. Drug Saf. 3, 133–144.
Kaufmann, P., Torok, M., Zahno, A., Waldhauser, KM, Brecht, K., Krahenbuhl, S., 2006. Eiturhrif statína á beinagrindarvöðva í rottum hvatberum. Cell. Mol. Lífvísindi. 63, 2415–2425.
Ko, KM, Leung, HY, 2007. Aukning á ATP-myndunargetu, andoxunarvirkni og ónæmisbælandi virkni með kínverskum Yang og Yin tónnandi jurtum. Haka. Med. 2, 3.
Kobayashi, M., Kagawa, T., Narumi, K., Itagaki, S., Hirano, T., Iseki, K., 2008. Bíkarbónatuppbót sem fyrirbyggjandi leið í vöðvaskemmdum af völdum statína. J. Pharm. Pharm. Sci. 11, -8.
Kromer, A., Moosmann, B., 2009. Lifrarskaði af völdum statíns felur í sér víxltalningu milli kólesteróls og selenópróteins lífmyndunarferla. Mol. Pharm. 75, 1421–1429.
Leung, HY, Ko, KM, 2008. Herba Cistanche þykkni eykur ATP myndun hvatbera í rottuhjörtum og H9C2 frumum. Pharm. Biol. 46, 418.
Liao, F., Zheng, RL, Gao, JJ, Jia, ZJ, 1999. Töf á þreytu í beinagrindarvöðvum vegna tveggja fenýlprópanóíða glýkósíða: verbascoside og martensít frá Pedicularis plicata Maxim. Phytother. Res. 13, 621–623.
Lu, KG, Liu, HB, Gu, QQ, 1995. Rannsókn á efnafræðilegum innihaldsefnum Cistanche deserticola Ma. og Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Haka. Hefð. Herb. Fíkniefni 26, 143.
Lyfjaskrárnefnd, 2010. Lyfjaskrá Alþýðulýðveldisins Kína. Chemical Industry Press, Peking.
Rosenbaum, D., Dallongeville, J., Sabouret, P., Bruckert, E., 2013. Stöðvun statínmeðferðar vegna aukaverkana vöðva: könnun í raunveruleikanum. Nutr. Metab. Hjarta- og æðakerfi. Dis. 23, 871-875.
Siu, AH, Ko, KM, 2010. Herba Cistanche þykkni eykur hvatbera glútaþíon stöðu og öndun í rottuhjörtum, með mögulegri framköllun á próteinum að aftengjast. Pharm. Biol. 48, 512–517.
Sui, ZF, Gua, TM, Liu, B., Peng, SW, Zhao, ZL, Li, L., Shi, DF, Yang, RY, 2011. Vatnsleysanlegt kolvetnasamband úr líkamaHerbaCistanches: einangrun og hreinsandi áhrif þess á sindurefna í húðinni. Kolvetni. Polym. 85, 75.
Thompson, PD, Clarkson, P., Karas, RH, 2003. Statín-tengd vöðvakvilla. JAMA 289, 1681–1690.
Vaklavas, C., Chatzizisis, YS, Ziakas, A., Zamboulis, C., Giannoglou, GD, 2009. Sameindagrundvöllur statín-tengdrar vöðvakvilla. Æðakölkun 202, 18–28.
Velho, JA, Okanobo, H., Degasperi, GR, Matsumoto, MY, Alberici, LC, Cosso, RG, Oliveira, HC, Vercesi, AE, 2006. Statín framkalla kalsíumháð gegndræpi hvatbera. Eiturefnafræði 219, 124–132.
Xiong, Q., Hase, K., Tezuka, Y., Tani, T., Namba, T., Kadota, S., 1998. Lifrarverndandi virkni fenýletanóíða frá Cistanche deserticola. Planta Med. 64, 120–125.
