Rannsókn á taugainnkirtlaónæmisvirkni Cistanche Deserticola og hrísgrjónavínsgufuafurðum í rottalíkani af völdum sykurstera-Ⅱ

3.2.4. Ónæmisvefjaefnafræði

Taugafæð er stjórnað af mörgum apoptotic og antiapoptotic genum, aðallega apoptosis-stuðla geninu Bax og antiapoptotic genum Bcl-2 genafjölskyldunnar. Bcl-2 er staðbundið í hvarfgjörnum súrefnisframleiðandi frumum eins og hvatberum, endoplasmic reticulum og kjarnahimnum. Bcl-2 hefur lítil áhrif á sindurefna súrefni en geturkoma í veg fyrir oxunarskemmdir í frumum. Bax flytur frá umfrymi til hvatberahimnunnar, breytir uppbyggingu hvatberahimnunnar og stuðlar að losun cýtókróms c og framkalla frumudauða.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Það var tjáning í umfrymi nýrnahettna á Bax og Bcl-2 próteini. Litunin sýndi allar gular agnir. Í samanburði við BC hópinn jókst meðalljósþéttleiki Bax próteins í MC hópnum verulega (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the average optical density in the CD-LD and WCD-LD groups decreased significantly (P < 0.01) (Figure 5(a)).

Mynd 5(b) sýnir að miðað við BC hópinn minnkaði meðalljósþéttleiki Bcl-2 próteins í MC hópnum verulega (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and CD-HD groups increased significantly (P < 0.01), while those of the WCD-MD and CD-MD groups increased (P < 0.05).

Caspasa-3 próteinið er staðsett aðallega í umfrymi í upprunalegri mynd í eðlilegum vefjum og hefur litla tjáningu. Jákvæð merki eru fölgul eða brúngul. Í samanburði við BC hópinn jókst tjáning kaspasa-3 í MC hópnum verulega (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the expression of caspase-3 in the WCD-HD and WCD-MD groups increased (P < 0.05) (Figure 5(c)).

Í venjulegum vefjum minnkaði tjáning Fas gensins og jákvæða merkið fyrir blending á staðnum var brúngult. Eins og sýnt er á mynd 5(d), samanborið við BC hópinn, jókst meðalljósþéttleiki Fas próteins í MC hópnum (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density in the WCD-HD and WCD-LD groups improved (P < 0.05) (Figure 5(d)).

FasL próteinið er aðallega staðsett í frumuhimnu eða umfrymi og jákvæð merki þess eru brún. Í samanburði við BC hópinn jókst meðalljósþéttleiki FasL gensins í MC hópnum verulega (P< 0.05). Compared to that of the MC group, the average optical density of the FasL gene in the WCD-HD, WCD-MD, CDHD, and CD-MD groups increased significantly (P < 0.01) (Figure 5(e)).

Niðurstöðurnar sýndu að CD og WCD gætuframkalla apoptosis í bólgufrumumog draga úr nýrnahettuskemmdum með því að stuðla að tjáningu FasL próteins og bindast við Fas próteinið, virkja caspasa-3 prótein og koma af stað caspase cascade. Áhrif WCD-HD hópsins voru best.

3.3. Ákvörðun ónæmisvirkni

3.3.1. Vísitala ónæmislíffæra

Samanborið við BC hópinn minnkuðu hóstarstuðullinn og miltavísitalan í MC hópnum verulega (P< 0.01). Compared to the MC group, the WCD-MD group had the greatest difference (P < 0.05). The thymus coefficient was almost back to the normal level. For the spleen index, the WCDMD, WCD-LD, and CD-MD groups showed significant differences compared with that of the MC group (P < 0.01) (see Figure 6). Therefore, WCD and CD treatment could protect the immune organs, and the effects of WCD were better. 

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.3.2. Greining á undirhópum T eitilfrumna í útlægu blóði

Hlutfall CD4+ frumna í efri vinstri fjórðungi og CD8+ frumna í hægri neðri fjórðungi í BC og hver lyfjahópur var hærra en í MC hópnum. Í samanburði við BC hópinn lækkaði hlutfall CD4+ThCD8+ verulega í MC hópnum (P< 0.01). Compared to that of the MC group, the ratio of CD4+ThCD8+ increased significantly in the PC group, the WCD group, and the CD-HD group (P < 0.01) (Figure 7).

3.3.3. Ákvörðun á magni IL-10, IL-6, IL-2, TNF-Α og IFN-C í sermi

Mynd 8 sýnir að miðað við BC hópinn jókst magn IL-6, TNF- og IFN-c verulega (P< 0.01). The level of IL-10 and IL-2 decreased in the MC group. Compared to that of the MC group, the level of IL-6, TNF-α, and IFN-c decreased and IL-10 and IL-2 increased in serum in each of the drug groups. The effect of WCD was better than the effect of CD, especially in the WCD-MD group, in which the effect was close to that of the PC group.

3.3.4. Niðurstöður úr Lymus vefjasmásjá athugunartilraun

Mynd 9 sýnir að í BC hópnum var mikill fjöldi eitilfrumna til staðar. Eitilfrumum og netfrumum var raðað lauslega í miðjuna með dreifðum kringlóttum eða sporöskjulaga thymocytum. Það var ekkert drep, engin bólgufrumuíferð og engar óeðlilegar breytingar.

MC hópurinn sýndi mikið magn af eitilfrumudrepvef, með óreglulegri röðun eitilfrumna og netfrumna í miðjunni. Kringlóttar eða sporöskjulaga skjaldkirtilsfrumur hurfu, mikil hrörnun eða drep var greinileg og bólgufrumuíferð með óeðlilegum meinafræðilegum breytingum.

Í CD hópunum voru formfræðileg einkenni eitilfrumna komin í eðlilegt horf og uppröðun miðlægra eitilfrumna og netfrumna nánast eðlileg. Kringlóttar eða sporöskjulaga skjaldkirtilsfrumur höfðu jafnað sig, en lítið magn af hrörnunar- eða drepi eitilfrumum og íferðar bólgufrumum var eftir.

Í WCD hópunum og PC hópnum voru formfræðilegir eiginleikar eitilfrumna betur lagaðir. Eitilfrumurnar og netfrumurnar í miðjunni voru vel samræmdar, kringlóttu eða sporöskjulaga skjaldkirtilsfrumurnar voru nánast eðlilegar, en eftir var lítill fjöldi íferðar og hrörnunar eitilfrumna.

3.4. CaM prótein genatjáning

RQ gildi (CaM mRNA -actin mRNA) var talið skoða tjáningu CaM mRNA. RQ BC hópsins var 1. Tjáning CaM mRNA í undirstúku í MC hópnum jókst verulega (P< 0.01), while the value decreased in the WCD-HD, WCD-MD, WCDLD, and CD-HD groups (P < 0.05) (Figure 10). The expression of CaM mRNA in the hypophysis in the MC group was lower than that in the BC group (P < 0.01). The expression in the WCD-HD, WCD-MD, WCD-LD, CD-HD, and CD-LD groups increased (P < 0.05), and the effect in the WCD groups was better than the effect in the CD groups.

4. Umræður

Í kínversku lyfjaskránni [2] er skráð að hægt sé að nota geisladisk og WCD á heilsugæslustöðinni sem helstu tegund af afkokti. Eftir að hafa verið gufusoðaður með hrísgrjónavíni, ergegn öldrun og styrkjandi nýru-yang áhrifvoru endurbætt. Í gegnum UPLC-QqQ-MS fundum við magnbreytingar á efnafræðilegum grunni við gufuferli hrísgrjónavíns. Iridoid glýkósíð voru óstöðug og innihald þessara glýkósíða minnkaði, jafnvel varð ógreinanlegt. Innihald fenýletanól glýkósíða breyttist einnig, sem gæti valdið breytingum á lyfhrifum og klínískum áhrifum.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Klassíska nýrna-yang skortslíkanið var endurtekið með inndælingu kortikósteróns undir húð [19]. Ofskömmtun kortikósteróns gæti hamlað leyndarmáli CRH í undirstúku. Á sama tíma var leyndarmál ACTH einnig hamlað. Magn nýrnahettubarkarhormóns minnkaði og þar með minnkaði virkni HPA ássins. Vanvirkni á HPA ás er algeng einkenni nýrna-yang skorts [20]. Þá sýna rotturnar „depletion“ fyrirbæri og einkennin eru í samræmi við nýrna-yang skort á heilsugæslustöðinni.

Í MC hópnum minnkaði magn CRH, ACTH, T og CORT í rottu sermi marktækt (P< 0.01). After being treated by CD and WCD, the content of CRH, ACTH, T, CORT, and cortisol all increased to some degree, and the effect of WCD-MD was the best, almost equal to that in the PC group. These results indicated that the relative hormone balance in the HPA axis had been destroyed in the MC group, CD and WCD could improve the functional recovery of abnormal adrenal axis hormone levels, but the effect of WCD was better.

Að breyta hlutfalli Bcl-2 fjölskyldumeðlima er einn af kjarnaaðferðunum þar sem FasThFasL miðlar dauðaviðtakaleiðinni og Bcl-2 fjölskyldan stjórnar hvatberaleiðinni [21]. Bcl-2 sem hamlar frumufrumuhamlandi þættir og þættir sem hvetja til frumudæðar, eins og Bax, tilheyra allir Bcl-2 fjölskyldunni [22]. Frumufrumumyndun getur verið ákvörðuð af hlutfallslegu hlutfalli frumudauða-hamlandi þátta og frumudauða-örvandi þátta [23]. Hvatberar hafa það hlutverk að vera miðlægar eftirlitsstöðvar fyrir margs konar frumudauða [24]. Núverandi rannsókn sýndi að CD-MD og WCDs gætu ályktað um tjáningu Bax og aukið Bcl-2 íbæta nýrna-yang skortinn. Fas er helsti dauðaviðtakinn sem framkallar frumudauða með bindingu við Fas bindilinn (FasL) [25]. Tjáning Fas og FasL í MC hópnum jókst á meðan þessi tjáning jókst verulega í WCD-MD hópnum (P< 0.01) compared with the MC group. Both FasThFasL and BaxThBcl-2 systems transduce apoptotic signals to the caspase family [26]. Caspase-3 is one of the pivotal proteinases that initiate cell apoptosis. The activation of caspase-3 indicates that apoptosis enters an irreversible stage [27]. The expression of caspase-3 in the MC group increased and increased significantly in the WCD-HD and WCD-MD groups (P < 0.05).

Skortur á ónæmisstarfsemi er ein mikilvægasta birtingarmynd nýrna-yang skorts [28]. Í þessari rannsókn komumst við að því að vísitala milta og hóstarkirtils WCD-MD hópsins batnaði verulega (P< 0.01, P < 0.05). The immune response of the immune system is regulated mainly by the Th subgroups [29]. IL-2 is the growth factor for T cells, secreted by T cells and macrophages, participates in inflammatory regulation, regulates immunity, and increases infection resistance [30]. The level of IL-2 in the MC group decreased (P < 0.01), and after treatment with CD and WCD, the level of IL-2 recovered. IL-6 and TNF-α are proinflammatory cytokines. Increased levels of IL-6 and TNF-α cytokines cause cytokine imbalances and exacerbate inflammation. The levels of IL-6 and TNF-α increased in the MC group, while after treatment, the levels of IL-6 and TNF-α decreased. T cells are divided into CD4 cells and CD8 cells, and the CD4+ThCD8+ ratio can be used as an important index of immune regulation [31]. CD4+ThCD8+ in the MC group decreased (P < 0.01), while in the WCD and CDHD groups increased (P < 0.01).

HPA ásinn er mikilvægasta eftirlitskerfið vegna þess að það stjórnar seytingu sykurstera og innkirtlakerfið til að viðhalda seytingarstarfsemi nýrnahettuberkins [32]. Oftjáning á CaM mRNA í undirstúkuvef tengdist skorti á nýrna-yang. CD og WCD gætu lokað kalsíumgöngunum, hamlað CaM mRNA tjáningu í undirstúku og dregið úr kalsíuminnstreymi og þannig minnkað Ca2+·CaM flókið virkni.

Myndun nýrna-yang skorts er langvarandi sjúkdómsþróunarferli. Nýra er ekki lengur eingöngu líffærafræðilegt hugtak, og það er almennt hugtak fyrir taugainnkirtla-ónæmi og kynfærakerfi. Neuroendocrine-immune (NEI) net er mikilvægt samþætt eftirlitskerfi [33]. CD og WCD geta stjórnað virkni HPAT ássins og bætt endurheimt nýrna-yang skorts. Þessi niðurstaða veitir tilraunagrundvöll fyrir klínískar forvarnir og meðferð á nýrna-yang skorti.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12%