Megindleg próteómísk rannsókn afhjúpar fíbrínógenferil í fjölblöðrulifrarsjúkdómum Ⅲ

4. Umræður

Fjölblöðrusjúkdómur í lifur(PLD) er venjulega einkenni utan nýrna sem tengist sjálfsfrumnaráðandifjölblöðru nýrnasjúkdómur(ADPKD). PLD einkennist af versnandi útvíkkun á gallgöngum og framgangi margra blaðra, sem taka að minnsta kosti helming rúmmáls lifrarinnar. Nokkrar af núverandi meðferðaraðferðum eru byggðar á skurðaðgerðum og lyfjafræðilegum aðferðum til að bæta einkenni sjúkdómsins. Af þessum sökum hefur meðferð við PLD verið árangurslaus hingað til og eini læknandi kosturinn er lifrarígræðsla [45]. Þetta er aðallega vegna þess að lykil innri sameindaverkunarháttur blöðrumyndunar er enn óþekktur. Helstu aðferðirnar beinast að cAMP-boðaleiðinni og sómatóstatínhliðstæðum og nokkrum nýjum markmiðum (td.histón deasetýlasi 6,Cdc25A fosfatasi, PPAR- og matrix málmpróteasar) hafa verið metnir í forklínískum rannsóknum, en þarf að prófa klínískt [8]. Þannig að vaxandi áhugi á að skilja sameindaferla og þróa nýjar meðferðaraðferðir eykst [2,8]. Tilgangur núverandi og nýrrar SWATH-MS vinnu einkenndist af próteinbreytingum í fjölblöðru lifur og að veita nýja innsýn og lækningaleg markmið fyrir PLD.

Smelltu til að cistanche herba fyrir nýrnasjúkdóm

Í fyrri rannsóknum höfum við greint í réttstöðulíkani af ADPKD (Pkd1cond/cond; Tam-Cre) þroskaglugga fyrir blöðrumyndun í nýrum, sem bendir til þess að tímasetning afleiddra atburða geti haft áhrif á alvarleika blöðrunýrnasjúkdóms. Með sömu stefnu könnuðum við hvort þessi gluggi nýrnaþroska samsvaraði í tíma svipaðri lifrarþroskaglugga. Athyglisvert var að við tókum eftir því að svipgerð blöðrulifrar fylgir ekki sömu tímasetningu, sem bendir til þess að nýru og lifur hafi hugsanlega mismunandi aðferðir við að gangast undir blöðrumyndun. Frekari rannsóknir ættu að beinast að því að bera kennsl á algenga og ólíka sjúkdómshætti í báðum líffærum og greina óþekktan lifrarþroskaglugga fyrir blöðrumyndun. Til frekari greiningar notuðum við næstu kynslóðar megindlega próteómíska nálgun SWATH-MS til að framkvæma mismunandi próteingreiningu á blöðruhálskirtli í vægri og alvarlegri PLD svipgerð innan sama nýrnaþroskaglugga. Gögn okkar benda til þess að á langt gengin stigum sjúkdómsframvindu fjölgi þeim leiðum sem losað er um stjórnun, líklega vegna aukaverkana sjúkdómsins. Á sama hátt styrkja þessar niðurstöður hugmyndina um að blöðruvöxtur fari fram með tveimur stórum stigum: blöðrubyrjun og blöðruframvindu [46]. Athyglisvert er að bæði próteómagreiningar frá vægum (p14 hópi) og alvarlegu (p12 hópi) blöðruástandi greindu próteinfléttur fíbrínlýsu sem tengjast beint blöðrusjúkdómi í lifur. Á vægari stigum sjúkdómsins greindum við ANXA2 sem eitt af áhugaverðu próteinum til að staðfesta sem hugsanlegt meðferðarmarkmið fyrir PLD. ANXA2 er kalsíumstýrt himnubindandi prótein sem framleitt er af fjölmörgum frumugerðum, þar á meðal þekju-, dendritic-, trophoblast- og æxlisfrumum, svo og einfrumum og átfrumum. Meginhlutverkið er að viðhalda frumuyfirborði próteingreiningarvirkni, en uppfyllir einnig margs konar innanfrumuaðgerðir, þar á meðal frumufrumu, innfrumumyndun, himnuviðgerð [47] og viðhald á viðloðandi millifrumumótum [48]. Fjölmargar aðgerðir þess stuðla að fibrinolysis, stjórnun á bólgu og virkjun ónæmiskerfis, og vefjaskaða og viðgerð; þar af leiðandi hefur truflun á ANXA2 verið bendluð við marga sjúkdóma í mönnum, til dæmis endurgerð utanfrumufylkis og lifrartrefjun [49,50], sem er algengur þáttur í framvindu sjúkdóms PLD [8]. Athyglisvert er að á alvarlegu stigi lifrarsjúkdóms uppgötvaði próteingreining okkar fjölda mismunandi próteina sem tengjast fíbrínógenkomplexinu. Við vefja- og æðaskaða breytist fíbrínógen ensímfræðilegt með trombíni í fíbrín og við fíbrínlýsu brotnar fíbrín niður af aðalensíminu plasmíni (virka form plasmínógens). Fíbrínógen eru tengd MAPK [51,52] og integrínum [53], tveimur leiðum sem hafa reynst árangursríkar sem hugsanleg meðferð við ADPKD í forklínískum rannsóknum [54,55]. Jafnvel hefur verið sýnt fram á að dýralíkan eins af oftjáðu fíbrínógenunum (FIBA) sé með blöðrusjúkdóm [56]. Þar að auki býður aukin virkni fíbrínógenklasa í PLD nýtt sjónarhorn til að meðhöndla sjúkdóminn í samanburði við núverandi tilraunalyf [57]. Þar af leiðandi gæti lækkunin á þessum klasa stutt nýjan verkunarmáta fyrir lyf þar sem prótein úr fíbrínógenfjölskyldunni yrðu lækningaleg markmið. Stærra dæmi væri blokkun á ERR (estrógen-tengdum viðtaka), munaðarlausan kjarnaviðtaka [58,59], sem stjórnar fíbrínógenmagni í blóðfíbrínógenlækkunarástandi af völdum offitu af völdum mataræðis, sykursýki af tegund 2, lifrarskaða og áfengis. -framkallað oxunarálag [60,61]. Nánar tiltekið myndu öfugir örvar, eins og GSK5182 (CAS: 877387-37-6) [60–66] og DN200434 [67,68], bjóða upp á slíka jákvæða verkun með lækkun á fíbrínógenmagni.

Í stuttu máli greindum við nokkur ný markmið og leiðir sem taka þátt í sjúkrameinafræði PLD með megindlegri próteómískri SWATH-MS tækni. Við lögðum áherslu á hið nýja lækningatækifæri sem fíbrínógen og fíbrínlýsa (og önnur tengd auðkennd prótein) bjóða upp á, aðallega vegna þess að allar staðfestingar með marktækum mismun sem framkvæmdar eru tengjast fíbrínógenfléttunni. Engu að síður er möguleiki á að staðfesta þetta í framtíðar forklínískum rannsóknum sem og virkari rannsóknum til að einkenna nákvæmlega hlutverk markframbjóðenda okkar í PLD. Að lokum hefur þessi vinna skapað nýtt fyrirkomulag og tækifæri fyrir framtíðarrannsóknir í PLD sjúkrameinafræði, sem leiðir til mögulegra nýrra meðferðaraðferða við sjúkdóminn.

5. Samantekt

Við greindum frá nýrri próteómískri megindlegri rannsókn sem byggði á SWATH-MS tækni þar sem borin voru saman próteóm villigerðar og fjölblöðrulifrar. Nokkrar nýjar leiðir og markmið voru auðkennd, stækkuðu þekkinguna um sameindakerfi á PLD sviðinu og lögðu áherslu á fíbrínógen flókið sem mögulegt nýtt meðferðarmarkmið.

Viðbótarefni: Eftirfarandi stuðningsupplýsingar er hægt að hlaða niður á: https: //www.mdpi.com/article/10.3390/biomedicines10020290/s1, mynd S1: Eigindleg DDA massagreiningargreining í mismunandi hópum rannsóknarinnar, mynd S2: TAS (Total Area Sums) normalization plots p14 group, Mynd S3: TAS (Total Area Sums) normalization plots of p12 group, Mynd S4: Heatmap mynd af óeftirlitslausri klasagreiningu á próteinum með marktækum mun samkvæmt SWATH-MS greiningu, mynd S5: Unsupervised hitakortsklasagreining á öllum próteinum sem SWATH-MS greinir, mynd S6: PCA án eftirlits úr SWATH-MS gögnum, mynd S7: GO auðgun og ferlagreining á próteini sem er marktækt stjórnað í blöðrumyndun í lifur samkvæmt String og Reactome, í sömu röð, mynd S8: Full prótein-prótein víxlverkunarkort í samræmi við streng, mynd S9: Box-plots af megindlegum próteómískum SWATH-MS gögnum af völdum skotmörkum til staðfestingar, Tafla S1: Auðkenni Grein sýni, dreifing í hverjum hópi og sýnisöfnun fyrir öflun haglabyssuhlaupa til að byggja upp litrófssafn, tafla S2: Röðlisti grunna notaður fyrir RT-qPCR greiningu, tafla

Framlög höfunda:Hugmyndafræði, MAG-G. og AC; aðferðafræði, AC, MV-G., LN-G., AM-V., MdPC-V. og SBB; formleg greining, AC; auðlindir: MAG-G. og SBB; gagnaöflun, AC; skrif — upphafleg drög að undirbúningi, AC; skrif – yfirferð og ritstjórn, MAG-G., SBB og LN-G.; visualization, MAG-G. og AC; eftirlit, MAG-G.; verkefnastjórn, MAG- G.; fjármögnunaröflun, MAG-G. Allir höfundar hafa lesið og samþykkt útgáfu handritsins.

Fjármögnun: Þessi rannsókn var styrkt af Instituto de Salud Carlos III undir FIS/FEDER sjóðum PI15/01467 og PI18/00378 (til MAG-G.) og af Xunta de Galicia verðlaunum IN607B 2016/020 (til MAG-G.). Launastuðningur var veittur af Xunta de Galicia fordoktorsstyrk 2016 til AC og Xunta de Galicia fordoktorsstyrk 2017 til MV-G.

Heimildir

1. Cnossen, WR; Drenth, JPH Fjölblöðrulifrarsjúkdómur: Yfirlit yfir meingerð, klínískar birtingarmyndir og stjórnun. Orphanet J. Rare Dis. 2014, 9, 1–13. [CrossRef] [PubMed]

2. Santos-Laso, A.; Izquierdo-Sánchez, L.; Lee-Law, PY; Perugorria, MJ; Marzioni, M.; Marin, JJG; Bujanda, L.; Banales, JM Nýjar framfarir í fjölblöðrusjúkdómum í lifur. Semin. Lifur Dis. 2017, 37, 45–55. [CrossRef] [PubMed]

3. Suwabe, T.; Shukoor, S.; Chamberlain, AM; Killian, JM; konungur, BF; Edwards, M.; Senum, SR; Madsen, geisladiskur; Chebib, FT; Hogan, MC; o.fl. Faraldsfræði sjálfhverfs ríkjandi fjölblöðrunýrnasjúkdóms í Olmsted sýslu. Clin. Sulta. Soc. Nephrol. 2020, 15, 69–79. [CrossRef] [PubMed]

4. Cordido, A.; Besada-Cerecedo, L.; García-González, MA Erfða- og frumugrundvöllur sjálfhverfs ríkjandi fjölblöðrunýrnasjúkdóms — grunnur fyrir lækna. Framan. Barnalæknir. 2017, 5, 279. [CrossRef] [PubMed]

5. Bergmann, C.; Guay-Woodford, LM; Harris, PC; Horie, S.; Peters, DJM; Torres, VE Fjölblöðrunýrnasjúkdómur. Nat. Séra Dis. Prim. 2018, 4, 1–24. [Krossvísun]

6. Cordido, A.; Vizoso-Gonzalez, M.; Garcia-Gonzalez, MA sameindameinafræði sjálfvirkrar víkjandi fjölblöðrunýrnasjúkdóms. Alþj. J. Mol. Sci. 2021, 22, 6523. [Krossvísun]

7. Van Aerts, RMM; van de Laarschot, LFM; Banales, JM; Drenth, JPH Klínísk stjórnun fjölblöðrusjúkdóms í lifur. J. Hepatol. 2018, 68, 827–837. [Krossvísun]

8. Perugorria, MJ; Masyuk, sjónvarp; Marin, JJ; Marzioni, M.; Bujanda, L.; Larusso, NF; Banales, JM Fjölblöðrusjúkdómar í lifur: Háþróuð innsýn í sameindakerfin. Nat. Séra Gastroenterol. Lifur. 2014, 11, 750–761. [Krossvísun]

9. Banales, JM; Masyuk, sjónvarp; Gradilone, SA; Masyuk, AI; Medina, JF; LaRusso, NF cAMP áhrifavaldarnir Epac og prótein kínasi a (PKA) taka þátt í lifrarblöðrumyndun dýralíkans af sjálfhverfum víkjandi fjölblöðru nýrnasjúkdómi (ARPKD). Lifralækningar 2009, 49, 160–174. [Krossvísun]

Stuðningsþjónusta Wecistanche - Stærsti útflytjandi cistanche í Kína:

Netfang:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Sími:+86 15292862950

Verslaðu fyrir frekari upplýsingar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

FÁÐU NÁTTÚRLEGT LÍFFRÆNT CISTANCHE ÚTDRÆT MEÐ 25% ECHINACOSIDE OG 9% ACTEOSIDE VEGNA NÝRASÝKINGAR