Verndaráhrif Wogonins á bólgu af völdum fitufjölsykru og frumudauða lungnaþekjufrumna og hugsanlega verkunarháttum þess

Hafðu sambandtina.xiang@wecistanche.com

Ágrip

Bakgrunnur: Wogonin (5,7-díhýdroxý-8-metoxýflavon) er náttúrulegt tvíhýdroxýlflavonóíð sem unnið er úr rót Scutellaria baicalensis Georgi. Þessari grein var ætlað að kanna verkunarmáta wogonins til að linabólgaogapoptosisí bráðum lungnaskaða (ALI).

efni og aðferðir: Lipopolysaccharide (LPS) var notað til að koma á in vitro líkaninu af ALl. Eftir wogonin meðferð var frumulífvænleiki og frumudreifing A549 frumna af völdum LPS mæld með CCK-8, TUNELassays og acridine appelsínu/etídíumbrómíð tvílitun, en innihald bólgusýtókína ogoxunarálagmerki voru metin með RT-qPCR, ELISA prófi, Western blot greiningu og viðskiptasettum. Western blot var einnig gert til að meta tjáningu próteina sem taka þátt. Í kjölfarið voru áhrif wogonins á sirtuin 1 (SIRT1) miðlaða hópkassa 1 prótein (HMGB1) afasetýleringu sem miðlaði háhreyfanleika könnuð. SIRT1 hemill EX527 var notaður til að meta stjórnunaráhrif wogonins á SIRT1-miðlaða HMGB1 afasetýleringu í A549 frumum undir LPS örvun.

Niðurstöður: LPS framkallaði bólgu, oxunarálag og frumudauða A549 frumna, sem var afnumið með wogonin. Það kom einnig í ljós að wogonin stuðlaði að HMGB1 afasetýleringu, ásamt uppstýrðri SIRT1 tjáningu. Hins vegar sneri SIRT1 hemill EX527 að hluta til við verndandi áhrifum wogonins á bólgu og frumudauða A549 frumna af völdum LPS.

Niðurstaða: Wogonin létti bólgu og frumudauða í LPS-framkölluðum A549 frumum með SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu, sem gæti táknað auðkenningu á nýju kerfi þar sem wogonin hefur verndandi áhrif á ALI og gefur hugmyndir um notkun wogonin á Öll meðferð.

Leitarorð: Bráð lungnaskaðar, Wogonin, Bólga, SIRT1, HMGB1 afasetýlering

Smelltu hér til að fá frekari upplýsingar

Bakgrunnur

Bráð lungnaskaða (AL) er klínískt skjalfest sem afleiðing af meinafræðilegu ástandi þar á meðal blóðsýkingu, lungnabólgu, áverka og bráðri brisbólgu [1]. Það sést oft hjá sjúklingum sem eru lagðir inn á gjörgæsludeildir og sýnir háa dánartíðni [2]. Þeir sem lifa af ALI standa venjulega frammi fyrir óæðri lífsgæðum [3]. Þrátt fyrir að árangur hafi náðst í skilningi á meinalífeðlisfræði AL, er meðferðarvirkni núverandi meðferða enn takmörkuð, sem getur ekki uppfyllt væntingar sjúklinganna og aðstandenda þeirra [4]. Það er því mjög brýnt að finna nýjar meðferðir eða markmið til að meðhöndla ALL. Wogonin(5,7-díhýdroxý-8-metoxýflavon), uppbygging þess er sýnd á mynd 1A, er náttúrulegt díhýdroxýl flavonoid sem er dregið úr rót Scutellaria baicalensis Georgi [5]. Mikilvægar bólgueyðandi eiginleikar þess og notkun þess við meðhöndlun á bólgusjúkdómum hefur víða verið greint frá í miklum fjölda rannsókna. Til dæmis bætti wogonin hugsanlega lungnabjúg í músum og verndaði þá fyrir lípópólýsykru (LPS)-framkölluðum ALI með því að hindra p38 mítógenvirkjaðan próteinkínasa (MAPK) og c-Jun NH(2)-endakínasa (INK fosfórun [6 ]. Wogonin minnkaði einnig LPS-framkallaða daufkyrningaíferð, framleiðslu á bólgueyðandi frumudrepum, tjáningu viðloðunsameinda og bældi LPS-framkallað AL í músum [7]. Núverandi vísbendingar bentu til þess að hægt væri að draga úr bólgusvörun og ALI framkallað af LPS sem afleiðing af wogonin meðferð með peroxisome proliferator-activated NF-KB feril [8]. Rannsóknin sem kom fram sýndi að wogonin minnkaði cecal bindingu og stungu (CLP)-framkallað high-mobility group box 1 prótein (HMGB1) framleiðslu og HMGB1-háð bólgu, og minnkaði blóðsýkingartengda sjúkdóma og hættu á lungnaskaða [9]. Í LPS-framkölluðu in vitro og in vivo ALI líkaninu sýndi önnur skýrsla fram á að hömlun á HMGB1 og aðrir bólgumiðlarar með ulinastatíni léttu greinilega einkenni ALI [10]. Og fyrri rannsóknir staðfestu að LPS-framkallaðar lungnaþekjufrumur úr mönnum (A549) hafa verið mikið notaðar sem in vitro líkan fyrir ALI [11-13]. Sagt hefur verið að Sirtuin 1 (SIRT1), niðurstreymisverkandi adenósínmónófosfatvirkjaðs próteinkínasa (AMPK), gegni mikilvægu hlutverki í stjórnun á losun adiponectins [14]. Wogonin viðbót jók verulega AMPK fosfórun og SIRT1 tjáningu, en hömlun á AMPK eða SIRT1 dró úr áhrifum wogonins á framleiðslu eða losun adiponectins [14]. Áður var greint frá því að SIRT1-mótuð HMGB1 afasetýlering hamlaði bráðum nýrnaskaða af völdum blóðsýkingar [15].

Í þessari rannsókn var stefnt að því að kanna verkunarmáta wogonins til að draga úrbólgaogapoptosisaf LPS-framkölluðum lungnaþekjufrumum úr mönnum, sem gæti veitt ítarlegri innsýn fyrir meðferð á ALI með wogonin.

Niðurstöður

Áhrif wogonins á lífvænleika og frumudauða A549 frumna af völdum LPS

Til að fylgjast með áhrifum wogonins á ALI, veltum við fyrst fyrir okkur hvort lífvænleiki venjulegra A549 frumna gæti skemmst af wogonin. Eins og sýnt er á mynd. 1B, gerði wogonin ekki skaða á A549 frumum án þess að fá neina meðferð, sem bendir til öryggis við wogonin meðferð í A549 frumum við styrkinn O,5,10 og 20 μM. Eftir LPS örvun í 24 klst, var lífvænleiki A549 frumna verulega skemmd, sem var brugðist við með wogonin á styrkleikaháðan hátt (mynd 1C). Ennfremur sýndu niðurstöður úr LDH prófinu að marktæk aukning á LDH virkni í LPS-meðhöndluðum A549 frumum minnkaði eftir að vaxandi skammtar af wogonin voru gefnir (mynd 1D). Næst prófuðum við áhrif wogonins á frumudauða A549 frumna af völdum LPS. Eins og sýnt er á mynd 2A, sýndi TUNEL litun að útsetning fyrir LPS jók verulega apoptosis A549 frumna samanborið við samanburðarhópinn, sem minnkaði með wogonin á skammtaháðan hátt. Að auki sást augljós niðurstjórnun í Bcl-2 tjáningu og uppstjórnun í tjáningu Bax, Cyto-C og klofnum kaspasa 3 í LPS-útsettum hópnum samanborið við samanburðarhópinn, sem var endurheimtur með wogonin meðferð (mynd. 2B). Niðurstöður úr AO/EB tvöföldum flúrljómunarmælingum sem sýndar eru á mynd 3 bentu til þess að LPS leiddi til aukinnar frumudrepunartíðni í samanburði við samanburðarhópinn, en EB-jákvæðu frumurnar minnkuðu sérstaklega eftir wogonin viðbót samanborið við LPS hóp. Þannig endurheimtir wogonin lífvænleikann og dregur úr apoptosis A549 frumna framkallað af LPS.

Áhrif wogonins á bólgu og oxunarálag A549 frumna af völdum LPS

Til að kanna bólgueyðandi og andoxunarhæfni wogonins í ALI, thebólgaogoxunarálagaf LPS-örvuðum A549 frumum sem voru meðhöndlaðar með wogonin greindust í sömu röð. Eins og sést á mynd. 4A-C hækkaði mRNA-magn bólgusýtókína (TNF-, IL-6 og IL-1), mæld með RT-qPCR, í áberandi hátt við LPS-örvun, en wogonin meðferð leiddi til minnkunar á tjáningu þeirra. Samkvæmt niðurstöðum ELISA bentu niðurstöður ELISA til þess að LPS-örvun leiddi til marktækrar aukningar á innihaldi TNF-, IL-6 og IL-1 samanborið við ómeðhöndlaða hópinn, sem minnkaði skammtaháð eftir wogonin meðferð (mynd 4D-F). Mikilvægt er að sýklóoxýgenasi-2(Cox-2) og fosfónkjarnaþáttur (NF)-KB p65 (p-NF-KB p65), sem eru bólgutengd merki, var stjórnað niður af LPS á meðan uppstýrt af wogonin (Mynd 4G). Að auki leiddi LPS til minnkaðrar virkni SOD og GSH-Px og aukins innihalds MDA og ROS, sem var snúið við með wogonin (Mynd 4H-K). Samanlagt dregur wogonin úr bólgu og oxunarálagi A549 frumna af völdum LPS.

Reglugerð um wogonin í SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu

Til að staðfesta vangaveltur okkar um að wogonin hefði verndandi áhrif á LPS-framkallaða A549 frumuskaða með SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu, gerðum við Western blot til að greina próteinmagn þátta sem taka þátt. Augljóslega bældi LPS tjáningu SIRT1 og stuðlaði að flutningi HMGB1 frá kjarna til umfrymis, ásamt HMGB1 asetýleringu. Hins vegar var þessari þróun snúið við með vágóníni útsetningu fyrir LPS-framkölluðum A549 frumum (Mynd 5). Þannig stjórnar wogonin meðferð SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu í A549 frumum af völdum LPS.

Stjórnun SIRT1 hemils EX527 á frumuhegðun A549 frumna af völdum LPS sem eru meðhöndlaðir með wogonin

Til að sannreyna hlutverk SIRT1 í undirliggjandi verkunarháttum sem wogonin hafði áhrif á bólgu og frumudauða A549 frumna af völdum LPS, notuðum við EX527, SIRT1 hemla, til að meðhöndla LPS framkallaðar A549 frumur í 24 klst. Eins og sýnt er á mynd 6A minnkaði viðbót EX527 SIRT1 tjáningu, hindraði kjarna-frumfrymisflutning HMGB1 og örvaði HMGB1 afasetýleringu, samanborið við LPS plús Wogonin hópinn. Frekari CCK-8 og LDH mælingar sýndu að EX527 skemmdi endurnýjandi áhrif wogonins á lífvænleika A549 frumna af völdum LPS (Mynd 6B). Að auki voru áhrif wogonins á tjáningu Bcl-2, Bax, Cyto-C og klofinn caspasa 3 tjáningu að hluta til létt með EX527 í LPS-framkölluðum A549 frumum (mynd 6C). Að lokum, breytileiki bólguþátta (TNF-, IL-6 og IL-1), bólgutengdra próteina (Cox-2 og p-NF-kB p65), og oxunarálagsmerki (SOD, GSH-Px og MDA) í LPS-völdum A549 frumum sem voru meðhöndlaðir með wogonin og EX527 sýndu fram á að EX527 skemmdi hamlandi áhrif wogonins á bólgu og oxunarálag í LPS-völdum A549 frumum (mynd. 7A-K). Þess vegna snýr SIRT1 hemill EX527 við verndandi áhrifum wogonins á illkynja svipgerðir A549 frumna af völdum LPS.

Umræða

Eins og er, hafa margir sérfræðingar viðurkennt wogonin sem öflugt efni til að meðhöndla bólgusjúkdóma. Virkni þess til að draga úr bólgusvörun var að sögn rakin til bælingar á NF-kB og virkjun kjarnaþáttar rauðkorns 2-tengdra þáttar 2(Nrf2) boðleiða[16]. Athyglisvert er að fyrri skýrslur tengdu bólgueyðandi áhrifin við miðlun iNOS og Cox-2 tjáningar eða virkjun hvarfgjarnra súrefnistegunda (ROS)/ERK/Nrf2 boðleiða [5,17]. Í samræmi við fyrri niðurstöður sem sýndu engin áhrif wogonins á lífvænleika chondrocyte, fundum við nánast engin marktæk frumudrepandi áhrif wogonin á eðlilegar A549 frumur, sem styður frekari könnun okkar á undirliggjandi vélbúnaði sem wogonin hafði áhrif á in vitro ALI frumulíkan [17]. Oxunarálag og bólga eru tvö helstu einkenni í meingerð AL, og þannig fundum við breytingar á oxunarálagsvísum og bólgusýtókínum við wogonin meðferð [18]. Það er athyglisvert að bólgu og oxunarálag var bæði létt af útsetningu fyrir wogoníni í LPS-meðhöndluðu A549 frumulíkani, eins og sést af hindrun á losun bólgueyðandi þátta og aukinni framleiðslu á SOD og GSH-Px, sem og minni framleiðslu á MDA eftir wogonin meðferð HMGB1 kemur fram sem mjög varðveitt prótein sem fyrst var greint til að móta blóðsýkingu í músalíkani [19]. Að miða á HMGB1 var talinn hugsanlegur meðferðarkostur til meðferðar á blóðsýkingu vegna þess að sjúklingar sem komu fram sem langvarandi bólgusvörun sýndu oft áframhaldandi há HMGB1 gildi [10]. Nýlegar skýrslur og umsagnir hafa lagt mikla áherslu á lækningaáhrif HMGB1 á bólgusjúkdóma, ekki takmarkað við blóðsýkingu. Til dæmis var áður sýnt fram á að hömlun á HMGB1 með ulinastatíni bætti LPS-framkallaða ALI áverka í músum [10,20]. Eftir að HMGB1 var losað úr virkum einfrumu/átfrumum þjónaði HMGB1 sem bólgueyðandi þáttur með ýmsum örvandi efnum [20]. Bólgumerki eins og LPS gætu leitt til asetýleringartengdrar flutnings HMGB1 frá kjarnanum í umfrymið [21]. Hér, sú niðurstaða að flutning HMGB1 frá kjarnanum í umfrymið við LPS örvun var brugðist við með wogonin meðferð óbeint útskýrt að bólga í A549 frumum af stað af LPS var hindrað mjög af wogonin.

SIRT1 hefur verið lagt til að gegna mikilvægu hlutverki í ýmsum líffræðilegum ferlum [22]. Það fer eftir afasetýleringarmarkmiðum þess, að breytingar á virkni SIRT1 hafi væntanlega áhyggjur af oxunarálagi og bólgu [23]. HMGB1 var nýlega viðurkennt sem afasetýleringarmarkmið SIRT1 [20]. Umtalsverðar vísbendingar bentu til SIRT1-mótaðrar afasetýleringar á HMGB1 létti á bólgu, endurheimti nýrnastarfsemi og lengdi lifunartíma músa með bráða nýrnaskaða tengda blóðsýkingu [15]. Í tilraunarannsókn á heilaáverka, lét Omega-3 fjölómettað fitusýra bólguna með því að stilla skautun örvera með SIRT1-stýrðri afasetýleringu á HMGB1/NF-KB ferlinu [24]. Ennfremur kom óleanólsýra í veg fyrir að rottulíkanið fengi blæðingu undir skjaldkirtli með SIRT1-mótuðum HMGB1 afasetýleringu [25]. Hömlun á NLRP3 / NF-kB með Aloin með virkjun SIRT1 dró úr LPS-áskorun ALI í músum [26]. Með því að stjórna SIRT1/HMGB1/NF-KB merkjum, bætti kaempferol lungnaskaða af völdum blóðþurrðar-endurflæðis með bólgueyðandi og andoxunarálagi 27I. Sem mikilvæg sameind niðurstreymis HMGB1 er NF-kB mikilvæg boðleið sem tekur þátt í stjórnun bólgumiðla með því að virkja gena af völdum bólguþátta og losa fjölda bólguþátta, þar á meðal TNF- , IL-6 og TNF -a[28,29]. Að auki tekur NF-KBcan einnig þátt í oxunarálagsferlinu með því að stjórna framleiðslu á ROS og hafa áhrif á magn SOD, MDA og GSH-Px [30]. Í þessari rannsókn, minnkuð p-NF-kB p65 tjáning sást eftir wogonin viðbót, sem var endurheimt með SIRT1 hemli, EX527. Að auki komumst við að því að afasetýlerað HMGB1 með wogonin fylgdi virkjaðri SIRT1 tjáningu, sem leiddi til vangaveltna okkar um að wogonin gæti haft verndandi áhrif á LPS-framkallaða bólgu í A549 frumum með SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu. Notkun EX527 í eftirfarandi tilraunum sýndi ennfremur fram á að hömlun á SIRTl sneri við verndandi áhrifum wogonins á bólgu í LPS-framkölluðum A549 frumum.

Niðurstaða

Að lokum sýndum við fram á að wogonin dregur úr bólgu, oxunarálagi og frumudauða LPS-framkallaða ALI frumu líkansins. Þessi verkunarmáti virtist vera vegna stjórnunar á SIRT1-miðlaðri HMGB1 afasetýleringu af völdum wogoníns. Þessar niðurstöður gætu bent á nýjan aðferð þar sem wogonin hefur verndandi áhrif á ALI og verið tilraunagrundvöllur fyrir notkun wogonin við klíníska meðferð á ALI.

efni og aðferðir

Frumuræktun og lyf

Human lung epithelial cells(A549) were purchased from the Cell Bank of Shanghai Institute of Biochemistry and Cell Biology at the Chinese Academy of Sciences (Shanghai, China) and cultured in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM; Gibco, Paisley, UK) containing 10% heat-inactivated fetal bovine serum(Gibco, Paisley, UK), 100 U/ml penicillin, and 100 g/ml streptomycin at 37 ℃ with 5% CO. The cells were collected after 10 μg/mL LPS（Sigma Chemical Co., St Louis, MO）stimulation for 24 h. Wogonin (purity>99 prósent), einangrað frá Scutellaria baicalensis Georgi, var keypt frá Biotic Chemical (Taipei, Taívan). Það var leyst upp í dímetýlsúlfoxíði (DMSO), geymt við -20 gráðu C og þynnt með DMEM. SIRT1 hemill EX527（10 μM; MedChemExpress, Shanghai, Kína) var notað til að meðhöndla frumur í 24 klst fyrir lyfjagjöf samkvæmt fyrri rannsókn [31].

Frumutalningarsett-8 (CCK-8) prófun

Eftir örvun LPS í 24 klst. og mismunandi styrk vágóníns útsetningar í 4 klst til viðbótar, var frumum sáð í 96-brunnplötu og frumulífvænleikagreining var framkvæmd með því að bæta við 10μL af CCK-8 hvarfefni (Dojindo) , Kumamoto, Japan） í hvern brunn við 37 gráður í 4 klst. Fylgst var með gleypni við 450 nm með því að nota örplötulesara (Bio-Rad Laboratories, Inc.).

Laktat dehýdrógenasa (LDH) losunarpróf

Frumafljótið sem var meðhöndlað með wogonin var sáð í 96-brunn ræktunarplötur og ræktað í 24 klst við 37 gráður með 5 prósent CO, áður en 100 μL af frumueiturefnagreiningarsettinu LDH lausn (Roche Diagnostics, Frakklandi) var bætt við hverja vel. 15 mínútum síðar var frumufljótandi vökvi þynnt, með ljósþéttnigildi fylgst með við 450 nm.

Endanleg deoxýnukleótídýl transferasa-miðluð nick end merking (TUNEL) litun TUNEL prófun var framkvæmd til að meta frumumyndun A549 frumna af völdum LPS með eða án wogonin meðferð með Colorimetric TUNEL apoptosis Assay Kit (Beyotime, Shanghai, Kína) byggt á aðgerðinni leiðbeiningar. Eftir fosfatbuffer saltvatn (PBS) þvott tvisvar og festingu með 4 prósent paraformaldehýði í 0.5 klst., 0,3 prósent vetnisperoxíð í PBS var notað til að rækta frumur í aðrar 20 mínútur við stofuhita. Frumur voru síðan meðhöndlaðar með díamínóbenseni (DAB) í 10 mínútur og mótlitaðar með hematoxýlíni (Solarbio, Peking, Kína) í 30 sek. Mælt var með apoptotic-jákvæðu frumunum með flúrljómunarsmásjá (Olympus Corporation) og apoptotic hlutfall var hæft með Image-J hugbúnaði (NIH, Bethesda, MD, USA).

Acridine appelsínu/ethidium brómíð tvílitun

Akridín appelsínugult/etídíumbrómíð(AO/EB) tvöföld flúrljómunarpróf voru gerðar til að meta breytingu á frumufrumu. Í stuttu máli, A549 frumur voru ræktaðar á glerlokum í 24-brunnplötum. Frumurnar voru forræktaðar í 24 klst með sermilausum miðli og síðan ræktaðar með LPS og ýmsum styrkjum af wogonin við 37C. Frumurnar voru þvegnar með PBS og útvegaðar með 5μL AO/EB blandaðri lausn (100 ug/ml af AO og 100 ug/ml af EB blandað í PBS, Aladdin, Kína) innan 3 mín. Frumurnar voru skoðaðar og teknar mynd við 510 nm örvunarbylgjulengd undir flúrljómunarsmásjá (Olympus Corporation).

Western blot greining

Prótein voru dregin út úr A549 frumum með því að nota RIPA lysisbuffer (Beyotime, Shanghai, Kína) og styrkur próteina mældur með bicinchoninic acid(BCA)Protein Assay Kit (Thermo Fisher Scientific, USA). Í kjölfarið var 10 prósent natríumdódecýlsúlfat-pólýakrýlamíð hlaup rafdráttur (SDS-PAGE) rafdrætt framkvæmd til að aðskilja 40 ug prótein og próteinin voru síðan flutt yfir á pólývínýlíden tvíflúoríð (PVDF) himnur. Þessar himnur voru síðan lokaðar af fitulausri mjólk og síðan ræktaðar við 4 gráður C yfir nótt með frummótefnum. Síðan var HRP-tengd aukamótefni notað til að rækta himnurnar í 1,5 klst við stofuhita. Að lokum voru hljómsveitir sýndar með auknu efnaljómun (ECL) setti (Amersham Biosciences, Buckinghamshire, Bretlandi), en styrkleiki bandsins var fylgst með með Image-J hugbúnaði (NIH, Bethesda, MD, Bandaríkjunum). GAPDH var litið á sem innri tilvísun.

Reverse-umscription-quantitative PCR (RT-gPCR)

A549 frumur voru leystar í 1 ml af TRIzol-hvarfefni (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) til að draga út heildar-RNA. Eftir söfnun á heildar-RNA var öfug umritun framkvæmd til að mynda viðbótar DNA (cDNA) með PrimeScript RT hvarfefnasetti (Takara Bio, Inc.). Skilyrðin voru eftirfarandi: 50 gráður C í 15 mínútur, 85 gráður C í 5 sekúndur, og varðveisla við 4 gráður .SYBR Premix Ex Taq TM (TaKaRa, Japan) var notað til að stilla PCR hvarfskilyrði og hvarfkerfi byggt á tillögum framleiðanda. ABI 7500 tæki (AB-4351107; Applied Biosystems; Thermo Fisher Scientific, Inc.) var notað fyrir qPCR. Eftirfarandi hitahringrásarskilyrði voru notuð: upphafsdenaturation við 95 gráður í 10 mínútur; fylgt eftir með 40 lotum af eðlisbreytingu við 95 gráður C í 15 s og glæðingu við 60 gráður í 1 mín. og endanleg framlenging upp á 10 mínútur við 72 gráður C. GAPDH var samþykkt sem eðlileg stjórn á hlutfallslegri genatjáningu. Útreikningur á hlutfallslegri genatjáningu var gerður með 2-AAct aðferðinni.

Ensímtengd ónæmissogandi prófun (ELISA)

Frumumagn interleukíns-6(IL-6), IL-1 og æxlisdrepsþáttar- (TNF- ) í frumufrumvökvanum voru mæld með IL-6 ELISA Kit , IL-1 ELISA Kit og TNF-ELISA Kit byggt á tillögum framleiðanda (Shanghai Xi Tang líftækni, Shanghai, Kína).

Greining á oxunarálagi

Til að greina oxunarálag, greindist virkni oxunarálagsmerkja, þar á meðal malondialdehýð (MDA), hvarfgjarnar súrefnistegundir (ROS), glútaþíon peroxidasa (GSH-Px) og súperoxíð dismútasa (SOD) í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda (Nanjing Jiancheng líftækni) Institute, Kína).

tölfræðigreining

Öll gögn voru sýnd sem meðaltal±staðalfrávik (SD) að minnsta kosti þriggja sjálfstæðra tilrauna. Til samanburðar á milli margra hópa var gerð einhliða dreifnigreining (ANOVA) með Tukey's post hoc prófi, en þær á milli tveggja hópa voru framkvæmdar með t-prófi nemenda. P<0.05 was="" deemed="" as="" statistically="">

Skammstafanir

AL: Bráð lungnaskaði; LPS: Lipopolysaccharide; HMGB1: Hópbox 1 prótein með mikla hreyfigetu; PPARy. Peroxisome proliferator-virkjaður viðtaka-gamma; MAPK: Mítógen-virkjaður próteinkínasi; JNK: C-Jun NH(2)-enda kínasi; CLP: Cecal binding og gata; DMEM: Dulbecco er breytt Eagle miðill; DMSO: Dímetýlsúlfoxíð; CCK-8:Frumtalningarsett-8; LDH: Laktat dehýdrógenasi; TUNEL: Endanleg deoxýnukleótidýl transferasa-miðluð nick-end merking; PBS: Fosfatbuffer saltvatn; DAB: Díamínóbensen; AO/EB: Akridín appelsína/etídíumbrómíð; BCA: Bicínkónínsýra; SDS-SÍÐA: Natríumdódecýlsúlfat-pólýakrýlamíð hlaup rafdráttur; PVDF: Pólývínýlíden tvíflúoríð; ECL: Aukið efnaljómun; cDNA: Viðbótar DNA; ELSA: Ensímtengd ónæmissogandi prófun; IL: Interleukin; TNF-a: Æxlisdrep þáttur-a; MDA: Malondialdehýð; GSH-Px glútaþíon peroxidasi; SOD: Súperoxíð dismutasi; SD: Staðalfrávik; ANOVA: Dreifnigreining; Cox-2:Sýklóoxýgenasi-2; Nrf2: Nuclear factor erythroid 2-tengdur þáttur 2; ROS: Hvarfgjarnar súrefnistegundir.

Heimildir

1. Mokra D, Kosutova P. Biomarkers í bráðum lungnaskaða. Respir Physiol Neurobiol. 2015;209:52–8.

2. Hayes M, Curley G, Ansari B, Laffey JG. Klínísk endurskoðun: Stofnfrumumeðferðir við bráðum lungnaskaða/brátt öndunarerfiðleikaheilkenni - von eða efla? Crit Care. 2012;16(2):205.

3. Angus DC, Clermont G, Linde-Zwirble WT, Musthafa AA, Dremsizov TT, Lidicker J, o.fl. Heilbrigðiskostnaður og langtímaárangur eftir bráða öndunarerfiðleikaheilkenni: III. stigs rannsókn á nituroxíði til innöndunar. Crit Care Med. 2006;34(12):2883–90.

4. Hu JT, Lai J, Zhou W, Chen XF, Zhang C, Pan YP, o.fl. Ofkæling létti á bráðum lungnaskaða af völdum LPS í rottumódelum í gegnum TLR2/MyD88 ferli. Exp Lung Res. 2018;44(8–9):397–404.

5. Chi YS, Lim H, Park H, Kim HP. Áhrif wogonin, plöntuflavons frá Scutellaria radix, á húðbólgu: in vivo stjórnun á bólgutengdri genatjáningu. Biochem Pharmacol. 2003;66(7):1271–8.

6. Wei CY, Sun HL, Yang ML, Yang CP, Chen LY, Li YC, o.fl. Verndandi áhrif wogonins á bráða lungnaskaða af völdum endotoxíns með því að draga úr p38 MAPK og JNK fosfórun. Umhverfis eiturefni. 2017;32(2):397–403.

7. Yeh YC, Yang CP, Lee SS, Horng CT, Chen HY, Cho TH, o.fl. Bráðum lungnaskaða af völdum lípópólýsykru er hamlað af wogonin í músum með því að draga úr Akt fosfórýleringu og RhoA virkjun. J Pharm Pharmacol.2016;68(2):257–63.