Spáðu fyrir hlutverk LncRNA í öldrun nýrna byggt á RNA raðgreiningu Ⅱ

Fylgni lncRNA Gm43360 og hugsanlegra mark-mRNA þess

LncRNA Gm43360 var valið til rannsóknar vegna þess að það tengdi tvö lncRNA-mRNA samtjáningarnet. Tjáningarstig Adra1a var í jákvæðri fylgni (rho=0.8650, p=0.026) og Gm43360, Csnk1a1 (kasein kínasi 1A1) var í neikvæðri fylgni (rho{{12 }}.8084, p=0.0084) (mynd 5a). Til að sannreyna frekar fylgni lncRNA Gm43360 og hugsanlegra mark-mRNA þess Adra1a og Csnk1a1, var oftjáningarplasmíð lncRNA Gm43360 hannað í þessari rannsókn. Tjáning Csnk1a1 minnkaði eins og búist var við og Adra1a tjáning minnkaði einnig, en ekki marktækt. Næst slógum við lncRNA Gm43360 niður með siRNA til að greina hvort tjáning á mark-mRNA þess hafði áhrif. Eins og búist var við var Csnk1a1 aukið í lncRNA Gm43360 knockdown frumum miðað við siRNA neikvæða samanburðarhópinn (mynd 5b). Tíu, við fundum hlutverk lncRNA Gm43360 í frumuhringnum. Niðurstöður frumutalningarsettsins-8 (CCK-8) sýndu að lncRNA Gm43360 stuðlaði að lífvænleika frumna (mynd 5c). Niðurstöðurnar sýndu að lncRNA Gm43360 jók hlutfall S fasa frumna og lækkaði hlutfall G1 fasa frumna samanborið við neikvæða samanburðinn (mynd 5d). Te p53 og p21 prótein tóku þátt í stjórnun frumuhringsins og voru því merki um öldrun frumna. Tjáningarmagn p53 og p21 minnkaði marktækt í oftjáningarhópnum miðað við samanburðarhópinn. Tjáningarmagn p53 og p21 jókst marktækt í siRNA hópnum miðað við siRNA samanburðarhópinn (mynd 5e). Oftjáning lncRNA Gm43360 fækkaði SA- -gal-jákvæðum frumum og -gal-jákvæðum frumum fjölgaði í hópi transfected Gm43360 (mynd 5f). Samanlagt bentu þessar niðurstöður til þess að lncRNA Gm43360 hamlaði öldrun nýrnapípla þekjufrumna með því aðhindra tjáningu Csnk1a1.

SMELLTU HÉR TIL AÐ FÁ NÁTTÚRULEGA LÍFFRÆNT CISTANCHE ÚTDRÆT MEÐ 25% ECHINACOSIDE OG 9% ACTEOSIDE FYRIR NÝRAVERKUN

Umræða

Í þessari rannsókn metum við mRNA tjáningargögn frá ungum og gömlum nýrum úr músum og gerðum lífupplýsingagreiningar sem leiddu í ljós virkni afbrigðilega tjáðra mRNA. Við sáum 347 uppstýrt mRNA og 355 niðurstýrt mRNA auk 130 uppstýrt lncRNA og 91 niðurstýrt lncRNA ígömul mús nýru samanborið við ung mús nýru. Að auki var sýnt fram á að þessi mRNA tæki þátt í öldrunartengdum ferlum, svo semoxandi fosfórun, AMPK boðleiðin, Wnt boðleiðin, Rap1 boðleiðin og aldurstengdur sjúkdómur, sem sýndi fram á virkni mismuna tjáðra mRNAs í meingerð nýrnaöldrunar.

Hið langa ókóðaða RNA NEAT1 er verndandi þáttur í framgangi nýrnatrefjunar í nýrnapíplum þekjufrumum [21]. Fyrir tilviljun, í raðgreiningarniðurstöðum okkar, var lncRNA NEAT1 tjáð í lægra magni í nýrum eldri músa en hjá ungum músum, sem er í samræmi við fyrri niðurstöður. LincRNA-Gm4419 flýtir fyrir bólgu og bandvefsmyndun með NF-kB/NLRP3 bólgumiðluðum aðferðum við nýrnakvilla með sykursýki [22]. Í raðgreiningarniðurstöðum okkar komumst við einnig að því að tjáning Gm4419 var meiri í nýrum eldri músa en ungra músa, en það var enginn marktækur munur. LncRNA Gm43360 er staðsett á litningi 5 (Chr5:122494022–122,494,908, 2887 bp). Samkvæmt UCSC Genome Browser er Gm43360 staðsett í innri próteinkóða gensins Atp2a2. Hins vegar hafa engar fregnir borist um þátttöku lncRNA Gm43360 í sjúkdómum hingað til. Í þessari rannsókn ýtti undir öldrun lncRNA Gm43360 nýrnapípluþekjufrumna. Að auki greindum við mörg lncRNA sem tjáð voru á mismunandi hátt í niðurstöðum raðgreiningarinnar og rannsökuðum þær.

LncRNAs voru flokkuð í cis-stjórnun eða trans-reglugerð byggt á lncRNA stjórnunaraðferðum. Cis-virkandi lncRNAs gætu haft áhrif á tjáningu nálægra gena með því að vera háð cis-virkandi þáttum, svo sem hvata, auka og stjórnunarraðir, sem eru fjarlægðir milli lncRNA og mRNA sem eru minni en 100 kb. Trans-virkandi lncRNAs vísa til lncRNAs sem yfirgefa transfection stað og starfa á fjarlægum stöðum (þ.e. fjarlægðin milli lncRNAs og mRNAs er meira en 100 kb) [23]. LncRNA MAAT eykur tjáningu nágrannagensins Mbnl1 í gegnum cis-reglugerðareiningu [24]. LncRNA Pnky gegnir hlutverki sem transvirkandi eftirlitsstofn í heilaberkisþroska [25]. Í þessari rannsókn var tengsl milli lncRNA Gm43360 og Csnk1a1. Csnk1a1 er æxlisbælandi gen [26] sem kóðar prótein sem tekur þátt í frumuhringnum og frumuskiptingarferlinu [27]. Csnk1a1 niðurstýring framkallaröldrunartengd bólgusvörun með vaxtarstoppi í ristli og endaþarmi [26]. Csnk1a1 var sett niður þegar Gm43360 var uppstillt; þannig er líklegt að lncRNA Gm43360 taki þátt íöldrun nýrnaafstjórnar Csnk1a1 tjáningu.

Ályktanir

Rannsókn okkar á lncRNA-mRNA samtjáningarnetinu íöldrun nýrnaleiddi í ljós að lncRNA, lncRNA Gm43360, gæti gegnt verndandi hlutverki við öldrun nýrna og aukið skilning okkar á aðferðum sem taka þátt íöldrun nýrna

efni og aðferðir

Sýni Ungar (3-mánaðargamlar) og gamlar (24-mánaðargamlar) karlkyns C57BL/6J mýs voru keyptar frá tilraunadýramiðstöð Xiamen háskólans og voru alin upp í stöðluðu umhverfi. Allar mýsnar höfðu frjálsan aðgang að mat og vatni. Mýsnar voru aðlagast nýju aðstöðunni í mánuð áður en þeim var fórnað. Mýsnar voru svæfðar með úretani með inndælingu í kviðarhol í 750 mg/kg skammti áður en sýni var tekið. Ungum og gömlum músum var fórnað sama daginn.Afgangs músnýravefur var notaður til raðgreiningar í hverri greiningu. RNA-seq og vefjameinafræði voru framkvæmd áaðskilin nýrufrá sömu músinni. Nýrnavef var safnað úr músum. Annað nýrað var strax sökkt í 10% hlutlaust jafnað formalín fyrir síðari hluta innfellingarinnar og hinu nýrinu var skipt í nokkra vefi og strax sett í fljótandi köfnunarefni og síðan geymt við -80 gráðu. Rannsóknin var studd af siðanefnd fyrsta tengda sjúkrahússins í Xi'an Jiaotong háskólanum (Shaanxi, Kína) (nr. 2018-G-164). Allar aðferðir voru framkvæmdar samkvæmt leiðbeiningum og reglugerðum um siðferði dýra. Þessi rannsókn var gerð í samræmi við leiðbeiningar ARRIVE.

Vefmeinafræði nýrna

Nýrnavefssýni úr ungum og gömlum músum voru fest í 10% paraformaldehýðlausn yfir nótt. Tíu af hlutunum voru þurrkaðir, paraffín-innfelldir og sneiddir í 4-µm þykkt. PAS og Masson's trichromatic litun voru framkvæmd með stöðluðum samskiptareglum. Myndir voru teknar með myndavélinni og litunarjákvæða svæðið var mælt. Svæðið fyrir vefjameinafræðimyndavélarmyndirnar var reiknað út með Image-Pro Plus 6.0.

SA‑ ‑gal litun

SA{0}}gal virkni var greind með því að nota SA- -gal litunarsett (Cell Signaling Technology #9860) í samræmi við samskiptareglur framleiðanda. Svæði jákvæðrar litunar var mælt og SA- -gal-jákvæðar frumur voru reiknaðar með Image-Pro Plus 6.0.

Bygging og raðgreining RNA útdráttarsafns

Samples (each 5 mice in young and old mice) were used for lncRNA and mRNA expression analyses. Young mice were numbered 3M1, 3M2, 3M3, 3M4, and 3M5, and old mice were numbered 24M1, 24M2, 24M3, 24M4, and 24M5. Total RNA was extracted using Trizol reagent (thermofsher, 15,596,018) following the manufacturer's instruction. The total RNA quantity and purity were analyzed of Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent, CA, USA, 5067−1511), and high-quality RNA samples with RIN number>7.0 voru notuð til að búa til raðasafn. Eftir útdrátt á heildar-RNA var mRNA hreinsað úr heildar-RNA (5g) með því að nota Dynabeads Oligo (dT) (Thermo Fisher, CA, USA) með tveimur hreinsunarlotum. Eftir hreinsun var mRNA skipt í stutt brot með því að nota tvígildar katjónir við háan hita (Magnesium RNA Fragmentation Module (NEB, cat. e6150, USA) undir 94 gráður 5-7 mín). Síðan voru klofnu RNA brotin öfug umrituð til að fá cDNA með SuperScript™ II bakriti (Invitrogen, cat. 1,896,649, USA), sem næst var notað til að búa til U-merkt annarsstrengs DNA með E. coli DNA pólýmerasa I ( NEB, cat.m0209, Bandaríkjunum), RNase H (NEB, cat.m0297, Bandaríkjunum) og dUTP lausn (Termo Fisher, cat.R0133, Bandaríkjunum). A-basi var síðan bætt við beittu enda hvers strengs og undirbúið þá fyrir bindingu við verðtryggðu millistykkin. Hver millistykki innihélt T-basa yfirhengi til að tengja millistykkið við A-hala brotna DNA. Tvívísis millistykki voru bundin við brotin og stærðarval var framkvæmt með AMPureXP perlum. Eftir hitaóhæfu UDG ensím (NEB, cat.m0280, USA) meðhöndlun á U-merktu annars strengda DNA, voru bundnu afurðirnar magnaðar upp með PCR með eftirfarandi skilyrðum: upphafsdenaturation við 95 gráður í 3 mínútur; 8 lotur af eðlisbreytingu við 98 gráður í 15 s, glæðingu við 60 gráður í 15 s, og framlengingu við 72 gráður í 30 s; og svo endanleg framlenging við 72 gráður í 5 mín. Meðallengd innskots fyrir loka cDNA söfnin var 300±50 bp. Að lokum framkvæmdum við 2×150 bp pöruð enda raðgreiningu (PE150) á Illumina Novaseq™ 6000 (LC-Bio Technology CO., Ltd., Hangzhou, Kína) samkvæmt samskiptareglum framleiðanda [28].

Lífupplýsingagreining Röð og síun á Clean Reads

cDNA safn smíðað með tækni úr sameinuðu RNA fránýrnasýniaf músum var raðgreint og keyrt með Illumina NovaseqTM 6000 raðpallinum. Með Illumina pöruðum enda RNA-seq nálguninni raðgreindum við umritið og mynduðum samtals milljón 2×150 bp pöruðum enda lestum. Lestur sem fæst úr raðgreiningarvélunum felur í sér óunnið lestur sem inniheldur millistykki eða lággæða grunna sem mun hafa áhrif á eftirfarandi samsetningu og greiningu. Þannig, til að fá hágæða hreinan lestur, var lesið síað frekar af Cutadapt [29] (https://cutadapt.readthedocs.io/en/stable/, version:cutadapt-1.9). Stærðirnar voru sem hér segir:

1) fjarlægja lesefni sem innihalda millistykki;

2) fjarlægja lesefni sem innihalda polyA og poly;

3) að fjarlægja lestur sem inniheldur meira en 5% af óþekktum kirnum (N);

4) fjarlægja lággæða lesefni sem innihalda meira en 20% af lággæða (Q-gildi minna en eða jafnt og 20) basa.

Tíu röð gæði voru staðfest með FastQC [30] (http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/ fastqc/, 0.11.9). þar á meðal Q20, Q30 og GC innihald hreinu gagna. Eftir það voru samtals G bp af hreinsuðum, pöruðum enda aflestri framleidd. Óunnin raðargögn hafa verið send í NCBI Gene Expression Omnibus (GEO) gagnapakka með aðgangsnúmeri GSE154223.

Tilvísunarerfðamengi/skýring var Mus_musculus.GRCm38. Uppruni og útgáfa af genaskýringunni sem notuð var við greiningar var Ensembl_v88.

Afritsþing

Í fyrsta lagi var Cutadapt [29] notað til að fjarlægja lesturinn sem innihélt millistykkismengun, lággæða basa og óákveðna basa. Tíu röð gæði voru mjög fóðruð með FastQC (http://www.bioinformatics.Babra ham.ac.uk/projects/fastqc/). Við notuðum Bowtie2 [31] og Hisat2 [32] til að kortleggja lestur á erfðamengi músa. Kortlögð lestur hvers sýnis var settur saman með StringTie [33]. Tíu, öll afrit fránýrnasýnivoru sameinuð til að endurbyggja yfirgripsmikið umrit með Perl forskriftum. Eftir að síðasta umritið var búið til voru StringTie [33] og edgeR [34] notuð til að áætla tjáningarstig allra umrita.

LncRNA auðkenning

Í fyrsta lagi var afritum sem skarast við þekkt mRNA og afrit styttri en 200 bp hent. Síðan notuðum við CPC [35] og CNCI [36] til að spá fyrir um afrit með kóðunarmöguleika. Öll afrit með CPC stig<-1 and CNCI score<0 were removed. The remaining transcripts were considered as lncRNAs.

Mismunandi tjáð greiningargena (DGEs) greining

StringTie [33] was used to perform expression levels for mRNAs and lncRNAs by calculating FPKM [37]. Genes differential expression analysis was performed by DESeq2 software between two different groups (and by edgeR between two samples) [34, 38]. The genes with the parameter of q value below 0.6 and absolute fold change>2 voru talin með mismunandi tjáningu gen.

Markgenaspá og virknigreining á lncRNA

Til að kanna virkni lncRNAs spáðum við fyrir um cis-markgenin lncRNAs. LncRNA getur gegnt cis hlutverki við að virka á nálægum markgenum. Í þessari rannsókn voru kóðunargen í 100,000 andstreymis og downstream valin með Perl skrift. Síðan sýndum við hagnýta greiningu á markgenunum fyrir lncRNAs með því að nota forskriftirnar BLAST2GO [39]. Tengill skipana í heild sinni á almenningseign var Jie-Li/README.md á main · dandan-li/Jie-Li (github.com).

Genaverufræði (GO) flokkar og Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) greining

Lífupplýsingagreiningin fyrir RNA raðgreiningu var framkvæmd með OmicStudio verkfærum (http://www.omicsudio. cn/tool). Gene Ontology (GO) hagnýtur auðgunargreining og Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) [37-39] auðgunargreining voru notuð til að greina líffræðilega virkni hinna spáðu markgena. GO greining skýrir helstu líffræðilegu ferlana í gegnum þrjá þætti: frumusamsetningu, sameindavirkni og líffræðilega ferla (http://www.geneontology. org/). Greiningin setur fyrst öll mismunandi gena og bakgrunnsgen í GO gagnagrunninn. Hvert atriði er kortlagt, fjöldi gena í hverju atriði er reiknaður og hágeometrisk dreifing er notuð til að framkvæma tilgátuprófun til að fá P gildi auðgunarniðurstöðunnar. Því lægra sem P gildið er, því marktækari er auðgunarniðurstaðan. KEGG er gagnagrunnsúrræði sem greinir mismunandi tjáð mRNA með erfðafræðilegri líffræði til að kanna mikilvægar leiðir sem tengjast markgenum (https://www.genome.jp/kegg/). Niðurstöðurnar eru gefnar upp með p-gildum; því lægra sem p-gildið er, því marktækari verður auðgunarniðurstaðan.

QRT–PCR

GAPDH var notað sem innræn stjórn. Síðan var hlutfallslegt tjáningarstig óþekktra gena reiknað út. Allir primerarnir voru hannaðir og framleiddir sérstaklega fyrir þessa tilraun. Grunnur fyrir GAPDH hefur verið markaðssettur. Sérhæfni Adra1a og Csnk1a1 primers var auðkennd með einum toppi bræðsluferilsins.

Byggja upp mRNA-lncRNA samtjáningarnet

Transregulation byggðist á rannsóknum og síðan var transorkan reiknuð út. Því minni sem transorkan var, því meiri möguleiki á bindingu. Síðan var fylgnistuðull mRNA-lncRNA einnig reiknaður út. mRNA-lncRNA netið var smíðað með því að velja Spearman fylgnistuðul sem fór yfir 0.9. mRNA-lncRNA samtjáningarnetið var smíðað með Cytoscape hugbúnaði (v3.7.1).

Frumuræktun

Mús nýrnapípulaga þekjufrumur (MRPT-EpiCs) voru ræktaðar í þekjufrumumiðli-dýr (EpiCM-a, Cat. #4131) sem innihélt 2% fóstursermi nautgripa (FBS, Cat. #0010) og Epithelial Cell Growth Supplement-dýr (EpiCGS-a, Cat. #4182) án sýklalyfja í rakaðri hitakassa við 37 gráður og 5% CO2. Skipt var um ræktunarmiðil á 2-3 daga fresti. Frumurnar í logaritmískum vaxtarfasa voru undirræktaðar þegar vöxturinn náði 90%. Frumusviflausninni sem var melt með trypsíni var sáð í 6-brunnsplötur með 2*104 -5*104 frumum í hverjum brunni. Frumurnar sem notaðar voru til transfemingar voru allar á milli kynslóðar 2 og 5.

Plasmíðbygging og frumuskipti

LncRNA Gm43360 oftjáningarplasmíðið var smíðað af GeneChem (Shanghai, Kína). Plasmíð burðarásin var GV658 og CMV-hvatinn rak lncRNA tjáningu. Klónaða núkleótíðröðin er til staðar í viðbótarefninu. Fyrir lncRNA Gm43360 niðurrif verða þrjú lncRNA ENS að00000197656-miða siRNA (lncRNA Gm43360- siRNA1, 5'-CCUUCACUCCAGCUGGUAATT-3'; lncRNA Gm43360-siRNA2, 5'CUCA-CCCUGUCA UGAAGUUTT-3'; og lncRNA Gm43360-siRNA3, 5'-GGUCAAAUAACUCAAUGGTT-3') voru hönnuð og mynduð í GenePharma (Shanghai, Kína). Samkvæmt samskiptareglum framleiðandans voru frumur umbreyttar með 2500 ng af plasmíði eða 100 pmol af siRNA með 6 µl af Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent (Invitrogen, Bandaríkjunum) í hverri brunn. Tjáningarstig RNA og próteina greindist 48 klst. eftir flutning og hver tilraun var endurtekin að minnsta kosti þrisvar sinnum. Rauntíma magn PCR var notað til að sannreyna skilvirkni lncRNA Gm43360 oftjáningar og niðurbrots.

Western blot greining

Ræktaðar frumur voru þvegnar með ísköldu PBS, 120 µl af RIPA jafnalausn (Hjarta, Kína) var bætt við og próteasahemli og PMSF (Hjarta, Kína) var bætt við í 30 mínútur á ís. Eftir að frumum var safnað í mismunandi örskilvindurör var próteinstyrkurinn magngreindur. Hleðslubuffi var bætt við hvert sýni og síðan soðið í 7 mín. Þrjátíu míkrógrömm af sýninu voru aðskilin með 12% SDS–PAGE (Beyotime, Kína) og rafflutt í PVDF himnur (Thermo Fisher, Bandaríkjunum). Síðan voru himnurnar stíflaðar með 5% mjólk. Himnurnar voru ræktaðar með sérstökum frummótefnum: and-p21 (1:1000, Abcam, ab109199), and-p53 (1:1000, Proteintech, 10442-1-AP) og and-GAPDH (1:3000, Profintech) , 60004-1-Ig) yfir nótt við 4 gráður . Eftir þvott með TBST voru himnur ræktaðar með öðru mótefni í 1 klst við stofuhita. Próteinbönd sáust með því að nota efnaljómunarbúnað (Millipore, Bandaríkjunum). Tjáning GAPDH var notuð til að staðla próteinmagn.

Frumufjölgunarprófun

Afkastageta frumufjölgunar var ákvörðuð með frumutalningarsettinu-8 (CCK-8) prófinu. Fjörutíu og átta tímum eftir flutning var 90 µl af nýjum miðli og 10 µl af CCK-8 lausn bætt við hvern brunn (Beyotime, C0042). Frumurnar voru ræktaðar í 1–4 klst við 37 gráður í 5% CO2 og mældar við 450 nm með alhliða örplötulesara (Bio-Tek, USA).

Flæðifrumugreining

Frumur voru húðaðar í 6-brunnsplötum daginn fyrir flutning. Fjörutíu og átta tímum eftir transfæðingu voru frumurnar trypsíngerðar og skildar í skilvindu við 1000 rpm í 5 mín. Síðan voru frumurnar festar í 70% etanóli við 4 gráður í að minnsta kosti 4 klst. Eftir skilvindu var RNase A og própídínjoðíð (PI) litunarlausn bætt við frumurnar og frumurnar síðan ræktaðar í 30 mínútur við stofuhita í myrkri. Te-litaðar frumur voru greindar með ACEA NovoCyte (Biosciences, USA).

tölfræðigreining

Mæligögnin með normaldreifingu eru sett fram sem meðaltal±SD. Munurinn á milli tveggja mismunandi hópa var ákvarðaður með því að nota tvíhliða ópörð t-próf ​​nemenda og p-gildi < 0.05 var talið tölfræðilega marktækt. Allir útreikningar voru gerðir með GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc., Bandaríkjunum).

Heimildir

1. Docherty MH, O'Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Frumuöldrun í nýrum. J Am Soc Nephrol. 2019;30(5):726–36.

2. Partridge L, Deelen J, Slagboom PE. Að takast á við alþjóðlegar áskoranir öldrunar. Náttúran. 2018;561(7721):45–56.

3. Pan JX. LncRNA H19 stuðlar að æðakölkun með því að stjórna MAPK og NF-kB boðleiðum. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2017;21(2):322–8.

4. Wasson CW, Abignano G, Hermes H, Malaab M, Ross RL, Jimenez SA, Chang HY, Feghali-Bostwick CA, Del Galdo F. Langt ókóðun RNA HOTAIR knýr EZH2-háð vöðvafíbróblast virkjun í kerfisbundinni sclerosis í gegnum miRNA 34a háða virkjun NOTCH. Ann Rheumatic Dis. 2020;79(4):507–17.

5. Luo J, Wang K, Yeh S, Sun Y, Liang L, Xiao Y, Xu W, Niu Y, Cheng L, Maity SN, o.fl. LncRNA-p21 breytir taugainnkirtlaaðgreiningu í blöðruhálskirtli af völdum andandrógen enzalutamíðs með því að stilla EZH2/STAT3 merkjagjöfina. Nat Commun. 2019;10(1):2571.

6. Wang Y, Yang L, Chen T, Liu X, Guo Y, Zhu Q, Tong X, Yang W, Xu Q, Huang D, o.fl. Nýtt lncRNA MCM3AP-AS1 stuðlar að vexti lifrarfrumukrabbameins með því að miða á miR-194-5p/FOXA1 ás. Mol Krabbamein. 2019;18(1):28.

7. Wu YY, Kuo HC. Virk hlutverk og net RNA sem ekki eru kóðaðar við meingerð taugahrörnunarsjúkdóma. J Biomed Sci. 2020;27(1):49.

8. Li Z, Wang Z. Öldrunarnýru og öldrunartengdur sjúkdómur. Adv Experiment Med Biol. 2018;1086:169–87.

9. Wang X, Vrtiska TJ, Avula RT, Walters LR, Chakkera HA, Kremers WK, Lerman LO, Regla AD. Aldur, nýrnastarfsemi og áhættuþættir tengjast á annan hátt við rúmmál nýrna í heilaberki og merg. Nýra Int. 2014;85(3):677–85.

10. Lin Q, Hou S, Dai Y, Jiang N, Lin Y. LncRNA HOTAIR miðar við miR-126-5p til að stuðla að framgangi Parkinsonsveiki í gegnum RAB3IP. Biol Chem. 2019;400(9):1217–28.

Stuðningsþjónusta Wecistanche - Stærsti útflytjandi cistanche í Kína:

Netfang:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Sími:+86 15292862950

Verslaðu fyrir frekari upplýsingar:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop