Plantefnafræðileg skimun og estrógenvirkni heildarglýkósíða af Cistanche Deserticola

Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Ágrip

Í gegnum áratugina hefur stöðugt verið unnið að því að auka lífsgæði mannsins. Eftir tíðahvörf er alvarlegt áhyggjuefni fyrir heilsu kvenna. Hormónameðferð er sem stendur uppistaðan í meðferð við þessu ástandi. Hins vegar gæti þessi meðferð leitt til estrógenmisnotkunar, sem leiðir til aukaverkana og aukaverkana. Þar af leiðandi hefur hormónameðferð ekki borið árangur til að bæta úr heilkenni eftir tíðahvörf.Cistanche deserticolaer klassísk styrkjandi jurt í hefðbundinni kínverskri læknisfræði. Það sýnir verulega estrógenvirkni. Helstu virku efnasamböndin í þessari jurt eru glýkósíð. Í fyrri tilraun voru þrír mikilvægir þættir sem stuðla að heildar glýkósíðuppskeru, akteósíðuppskeru og estrógenvirkni auðkennd, þ.e. styrkur skolefnis, pH og rúmmál skolefnis. Í þessari tilraun var ákjósanlegt hreinsunarferli ákvarðað með því að nota miðlæga samsetta hönnun-svörun yfirborðsaðferð til að fá glýkósíð úr þessari jurt. Styrkur skolefnis (etanóls) upp á 85 prósent og rúmmál 25 BV við pH 11 reyndust vera ákjósanlegur. Tuttugu og eitt virk efnasambönd voru auðkennd með hágæða vökvaskiljun/fjórpóla tíma-flugmassagreiningu. Þessi rannsókn veitir dýrmæta innsýn fyrir frekari ítarlegar rannsóknir sem meta estrógenvirkni heildarglýkósíða afCistanche deserticola.

Lykilorð: Miðsamsett hönnun; Cistanche deserticola heildarglýkósíð; LC/Q-TOF-MS; hreinsunartækni; vaxtarpróf í legi.

Kynning

Cistanche deserticolaer æt, klassísk tonic jurt. Það var fyrst nefnt í Shen Nong's jurtaklassíkinni og var skráð í efsta bekk. Það er hlý jurt og sæt. Það hefur fjölmarga lækningaeiginleika, svo sem næringu á lifur og nýrum, styrkingu vöðva og beina og bætta ónæmisstjórnun ásamt öldrun og æxlisvirkni [1-4]. Sum náttúruleg efnasambönd hafa verið einangruð og auðkennd úr útdrætti þessarar jurtar, þau helstu eru fenýletanóíð glýkósíð, lignanoids, iridoids, fjölsykrur og alkalóíðar [5-8].

Lyfin sem fengin eru úr lækningajurtum innihalda ýmis virk efnasambönd, sem eru fyrst og fremst ábyrg fyrir lækningaverkun þeirra. Virkni sama lyfs sem fæst úr mismunandi plöntuuppsprettum getur verið mismunandi vegna mismunandi gerða og magns virkra efna sem eru í því. Því er mikilvægt að bera kennsl á og magngreina öll virku efnasamböndin sem eru til staðar í lyfjunum sem fást úr lækningajurtum. Sama á við um C. deserticola. Svaryfirborðsaðferðafræði er tilraunaaðferð til að kanna samspil mismunandi þátta samtímis [9-10]. Það er hægt að nota til að hagræða útdráttarbreytur fyrir plöntulyf og magnmat á virkum efnasamböndum í lyfjum. Miðsamsett hönnun (CCD) er ein af tilraunahönnunum sem nýtast í aðferðafræði viðbragðsyfirborðs. Í samanburði við hornrétta og samræmda hönnun hefur CCD meiri nákvæmni og betri fyrirsjáanleika [11].

Eftir tíðahvörf getur dregið verulega úr lífsgæðum kvenna. Venjulega er estrógen notað til að meðhöndla þetta ástand. Hins vegar getur langvarandi notkun estrógens leitt til misnotkunar og þar með valdið ýmsum aukaverkunum og aukaverkunum. Þess vegna er brýnt að velja aðra meðferð, helst náttúrulyf sem inniheldur estrógen sem virkt innihaldsefni til að meðhöndla heilkenni eftir tíðahvörf [12-13].

Í bráðabirgðatilraun voru byggingar ýmissa náttúrulegra efnasambanda sem fengust úr C. deserticola auðkennd með massagreiningu (MS) [14]. Það var staðfest að glýkósíð eru helstu virku efnasamböndin sem hafa verulega estrógenvirkni [14-15]. Til að þróa öruggt og áhrifaríkt estrógenvirkt efni í nýju lyfi er þörf á ítarlegri rannsókn á TGCD eftir hreinsun. Í þessari rannsókn var CCD fyrst notað til að hámarka hreinsun á heildarglýkósíðum C. deserticola (TGCD). Í kjölfarið var legvaxtarprófið notað til að meta estrógenvirkni sama glýkósíðs. Hágæða vökvaskiljun/fjórpól tíma-flugmassagreining (HPLC/Q-TOF-MS) var notuð til eigindlegrar greiningar á efnasamböndum TGCD eftir hreinsun. Þessu ferli var beitt til að sýna skýrt fram á tilvist ýmissa virkra efnasambanda með estrógenvirkni í TGCD. Þetta getur samtímis verið grunnurinn að klínískri notkun þess við tíðahvörf sem kemur í stað estrógen.

Tilraunaaðferð

Hljóðfæri

Agilent 1290 HPLC kerfi (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, Bandaríkin), Agilent 6530 röð fjórpóla flugtíma LC/MS (Q-TOF) kerfi (Agilent Technologies, Palo Alto, CA, Bandaríkin), og Chemical HPLC{ {5}}D vinnustöðvar voru notaðar sem litskiljunartæki fyrir gagnavinnslu. Milli-Q ofurhreint vatn var notað fyrir alla rannsóknina. AR1140 rafræn greiningarvog (Ohaus International Ltd.); 680 örplötulesari (Bio-Rad Corporation); og 64R háhraða skilvinda (Beckman Coulter Allegra) voru notuð til undirbúnings sýna.

Lyf og efni

C. deserticola var keypt af lyfjamarkaði og auðkennd af prófessor Zhang Delian (Harbin University of Commerce, Kína). Staðlað díetýlstilbestrol (99 prósent hreint, vörunúmer 60518) var keypt frá Dr. Ehrenstorfer (Þýskalandi). Aðrir staðlar akteósíð (111530-200505) og echinakósíð (111670-200503) voru fengin frá National Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products, Peking, Kína. Hreinleiki hvers staðals var > 98 prósent. Asetónítríl (ACN), metanól og maurasýru (MS-flokkur) voru keyptir frá Thermo Scientific Pierce (Rockford, IL, Bandaríkjunum). Ofurhreint vatn var fengið frá Hangzhou Wahaha Group Co., Ltd. (Hangzhou, Kína). Öll hvarfefni sem voru fáanleg í verslun voru af greiningargráðu.

Tilreiðsla heildarglýkósíða af C. deserticola hreinsunarlausn

Eftir að hafa verið sökkt í 75 prósent etanól í 12 klst, var hráa duftið af C. deserticola (100 g) dregið út með 800 ml af 75 prósent (v/v) etanóli við 80 gráður í 150 mínútur undir bakflæði. Það var síðan síað í gegnum tvöfalda síu og síðan dregið út með 800 ml af 75 prósent etanóli tvisvar í 150 mínútur til viðbótar. Í kjölfarið voru síuvökvanir sameinaðar og þéttar í lofttæmi við 45 gráður. Útdrátturinn var fenginn með því að fjarlægja leysirinn. Ákveðnu magni af eimuðu vatni var bætt við útdráttinn til að fá styrk upp á 0,5 g/mL, sem var notað til að skima hreinsunarferlið.

Fyrir aðsog með AB-8 stórporu plastefni var pH prófunarsýnislausnarinnar stillt á 11. Fyrst var 2 BV eimað vatn notað til að skola burt óhreinindin. Síðan var skolefnið í styrkleikanum 25 BV 85 prósent etanól skolað og safnað. Að lokum var safnað hreinsað skolefni sameinað. Ákveðnu magni af eimuðu vatni var bætt við útdráttinn til að fá styrk upp á 1,5 g/mL, sem var notað til inngjafar í maga. Fyrir jákvæða viðmiðun var diethylstilbestrol lausn (20 ug/ml) útbúin með diethylstilbestrol dufti.

Samkvæmt hlutfalli hreinsunar ({{0}}.6), var ákveðið magn af útdrættinum (sem jafngildir 1 g af C. deserticola) flutt í 10 ml mæliflösku, leyst upp í 50 prósent (v/v) metanóllausn í úthljóðbaði í 5 mínútur og þynnt í 10 ml. Lyfjalausnin var fengin eftir síun á flotinu í gegnum 0,45 μm síuhimnu. Acteoside og echinacoside (1 mg hvor) var blandað saman og leyst upp að fullu í 10 ml 50 prósenta (v/v) metanóllausn. Að lokum var staðallausnin síuð í gegnum 0,45 μm Millipore síu fyrir greiningu.

LC-MS aðstæður

Litskiljunaraðskilnaður var framkvæmdur í HPLC kerfi (Agilent 129{{10}}), búið fjórkenndu leysigjafakerfi, lofttæmi afgasunartæki og ljósdíóða fylkisskynjara. MS/MS greining var gerð í tæki Agilent-1290 HPLC/6530 Q-TOF-MS kerfi, búið rafúðajónunargjafa í bæði jákvæðri og neikvæðri jónaham. Waters Symmetry shield RP C18 súla (4,6 × 250 mm, 5 μm) (Waters Corporation, Milford, MA, USA) var notuð til aðskilnaðar. Hreyfanlegur fasi samanstóð af 0,2 prósent maurasýru vatnslausn (v/v) (A) og ACN (B), og honum var dælt með 0,5 ml/mín. Inndælingarrúmmál hvers sýnis var 10 μL. Gradient eluation program var sem hér segir: 5-23 prósent B í 0-35 mínútur, 23-25 ​​prósent B í 35-65 mínútur og 25-5 prósent B í 65-70 mínútur. Súluhitanum var haldið við 30 gráður. Fylgst var með litskiljunum og skráð við 330 nm. Atómgasþrýstingurinn var stilltur á 30 Psi og háræðaspennan var 3,5 kV. Rennsli þurrgass var 8 l/mín við 30 gráðu hita. Hitastig slíðurgassins var stillt á 400 gráður við flæðihraða 12 l/mín. Árekstursorkan var stillt á 10–20 eV fyrir lágorkuskannanir og 30–50 eV fyrir háorkuskannanir. Massarófsgögnin voru skráð á skannasviðinu 50–1000 Da í jákvæðum og neikvæðum jónaskönnunarstillingum. Í þessari rannsókn var hraður og skilvirkur samanburður á milli TGCD og staðlanna framkvæmdur við sama LC-MS ástand.

Legvaxtarpróf

Þetta var gert í ströngu samræmi við ráðleggingar í leiðbeiningum um umhirðu og notkun tilraunadýra frá Heilbrigðisstofnuninni. Allar tilraunaaðferðir voru skoðaðar og samþykktar af dýrasiðanefnd Harbin háskólans í Kína.

Óþroskaðir kvenkyns Kunming mýs (um það bil 21 sólarhring fæðingar, afrenndar) sem vógu 12 ± 2 g, voru keyptar frá Changchun National Biological Industry Base Laboratory Animal Center (Changchun, Kína). Mýsnar voru geymdar í hitastýrðu herbergi (22 ± 2 gráður) með mat og vatni að vild. Dýratilraunir voru hafnar eftir fimm daga aðlögun. Mýsnar föstuðu yfir nótt með vatni að vild áður en próflausnin var gefin í maga.

Músunum var skipt af handahófi í 22 hópa, með 10 dýrum í hverjum hópi. Þeim var gefin tilraunalyf af sama magni tvisvar á dag (morgun og kvöld) í fjóra daga sem hér segir:

Hópur 1: Heildarglýkósíð í maga af C. deserticola hreinsunarlausn (20 ml/kg), (rúmmál lausnar/músarþyngd),

Hópur II: Eimað vatn í maga (neikvæður samanburðarhópur), og

Hópur III: Diethylstilbestrol í maga (20 ug/ml) (jákvæður samanburðarhópur).

Á fimmta degi var öllum músunum fórnað. Legin voru strax fjarlægð og vigtuð og legstuðlarnir reiknaðir út.

tölfræðigreining

T-próf ​​með tvíhliða pöruðu sýni var notað til að bera kennsl á tölfræðilega marktækan mun á hinum ýmsu breytum í mismunandi tilraunahópum. Greiningin var gerð með SPSS tölfræðihugbúnaði (SPSS fyrir Windows v21.0, SPSS Inc., Bandaríkjunum). Munurinn var talinn tölfræðilega marktækur við 95 prósenta öryggi (p <>

Niðurstöður og umræður

Línulegt samband og fylgni akteósíðs og heildarglýkósíða

Línuleg aðhvarfsjafna akteósíðs afraksturs var y {{0}}x – 14,75 (þar sem x er styrkur akteósíðs og y er samsvarandi toppflatarmál þess) með fylgnistuðlinum r=1 á styrkleikabilinu 0.12−{{10}},72 mg/ml. Þetta gaf til kynna línulegan kvörðunarferil. Línuleg aðhvarfsjafna heildarafraksturs glýkósíða var y=26.074x plús 0,0866 (þar sem x er styrkur heildarglýkósíða, og y er samsvarandi toppflatarmál þess) með fylgnistuðlinum r { {12}}.9982 á styrkleikabilinu 0,013–0,065 mg/ml. Þetta gaf einnig til kynna línulegan kvörðunarferil.

Aðferðafræðileg rannsókn

Nákvæmni, endurgerðanleiki, stöðugleiki og endurheimtur sýnanna voru rannsökuð í aðferðafræðilegri rannsókn. Í nákvæmnistilrauninni var hlutfallslegt staðalfrávik (RSD) akteósíðs og heildarglýkósíða 1,43 prósent og 0.05 prósent í sömu röð. Í endurgerðanleikatilrauninni var RSD akteósíðs og heildarglýkósíða 0,10 prósent og 1,44 prósent í sömu röð. Í 24 klst stöðugleikatilrauninni var RSD akteósíðs og heildarglýkósíða 0,14 prósent og 0,90 prósent í sömu röð. Í batatilrauninni var endurheimt akteósíðs 100,50 prósent með RSD upp á 2,08 prósent, en endurheimt heildarglýkósíða var 99,12 prósent með RSD upp á 1,65 prósent. Öll RSD gildin voru undir 3 prósentum. Þessar niðurstöður sýndu góða nákvæmni og endurgerðanleika. Að auki var sýnið stöðugt í 24 klst. Niðurstöður bata eru einnig innan leyfilegra marka (95-105 prósent). Þess vegna er hægt að nota þessa aðferð til að ákvarða akteósíð og heildarávöxtun glýkósíða eftir hreinsun.

Einþátta rannsókn á TGCD

Hreinsun TGCD með því að nota stórgopótt plastefni getur verið fyrir áhrifum af mörgum þáttum, svo sem plastefnisgerð, kyrrstöðu aðsogsþáttum (aðsogstími, lekastyrkur og pH sýnislausnarinnar) og skolunaraðstæðum (rennslishraði, rúmmál og styrkur). Með því að nota aðsogsgetu og hraða afsogs og skolunar TGCD sem vísitölur var tilraunaástandið ákvarðað út frá niðurstöðum einþáttatilrauna. Með því að nota AB-8 tegund stórporous aðsogsresin voru eftirfarandi kjöraðstæður ákvarðaðar: 0,5 mg/mL sýnislausn, pH 10, kyrrstöðuaðsogstími 8 klst., 2 BV eimað vatn til að þvo óhreinindi, 20 BV 80 prósent etanól sem skolefni og flæðihraði 0,5 BV/mín. Sértækar niðurstöður eru sýndar á myndum 1−7.

CCD til hagræðingar á TGCD hreinsunartækni

Byggt á niðurstöðum einþáttarannsóknarinnar voru þrír þættir sem hafa marktæk áhrif á hreinsunaraðferðina valdir sem vísitölur, það er pH sýnislausnarinnar (x1), styrkur skolefnis (x2) og rúmmáls skolvatns (x3). Samkvæmt meginreglunni um CCD hefur hver þáttur fimm stig. Hámarks- og lágmarksgildi þessara mismunandi þátta voru sett í samræmi við niðurstöður fortilraunarinnar. Þættirnir eru sýndir í töflu 1 og niðurstöður tilrauna eru sýndar í töflu 2.

Heildarávöxtun glýkósíða og akteósíðs var ákvörðuð til að hámarka hreinsunaraðferðina fyrir TGCD. Í fyrsta lagi voru heildarmagn glýkósíða og akteósíðs stillt á töluleg skilyrði um æskileika (d) á milli {{0}}-1. Síðan var heildaræskini (OD) [OD=(d1, d2, d3,....,dn)1/n, þar sem n er vísitalan] reiknuð út. SPSS21.{{10}} hugbúnaður og hugbúnaður frá hönnunarsérfræðingum var notaður til margfaldrar línulegrar aðhvarfs og tvílínuaðlögunar óháðra breyta og OD, með p < 0.05="" var="" talið="" tölfræðilega="" marktækur="" staðall="" jöfnunnar.="" jafnan="" með="" stærra="" r-gildi="" (margföldunarstuðull)="" var="" valin="" sem="" besta="" líkanið.="" fjölbreytu="" línulega="" jafnan="" er="" sýnd="" sem="" y="–" 1.02="" –="" 0.131x1="" plús="" 0.034x2="" plús="" 0,012x3="" (r="" {{="" 25}}.55,="" bls="0.004)." tvínajafnan="" er="" y="–" 21,92173="" –="" 0,74079x1="" plús="" 0,62914x2="" plús="" 0,041161x3="" plús="" 0,014972x1x2="" plús="" 2,06050*10-4x1x52}x{9,52}x{9,52}x{9,52}x{9,52}x{9,52}x{9,52}x2="" {56}}.78730="" ×="" 10-3x22="" -="" 2.89446="" ×="" 10-3x32="" (r="0.91," p="0}.012)." af="" ofangreindum="" jöfnum="" má="" sjá="" að="" fylgnistuðull="" margbreytu="" línulegrar="" aðhvarfsjöfnunnar="" er="" lægri.="" fylgni="" milli="" óháðu="" og="" háðu="" breytanna="" er="" mjög="" lítil="" og="" þótti="" óhagstætt="" að="" nota="" í="" línulega="">

En fylgnistuðull tvínafnajöfnunnar var hár og það skilaði sér í góðu samræmi. Þess vegna var tvínefnalíkanið valið. Byggt á yfirgripsmikilli greiningu á yfirborðsmynd og útlínukorti ásamt tilraunagögnum (OD gildi nálægt {{0}}.6), fékkst ákjósanlegur svið hreinsunaraðferðarinnar. Á mynd 8 má sjá að hámarks OD-gildi myndaðist þegar pH sýnislausnarinnar (A) var á bilinu 9-10 og styrkur skolefnis (B) var á bilinu 79-85 prósent. . Mynd 9 sýnir að hámarks OD-gildi fékkst þegar pH-gildi sýnislausnar (A) var á bilinu 9-10 og rúmmál skolefnis (C) var á bilinu 20-25 BV. Mynd 10 sýnir að hámarks OD-gildi var fengið þegar styrkur skolefnis (B) var á bilinu 80–85 prósent og rúmmál skolefnis (C) var á bilinu 20–25 BV. Út frá yfirgripsmikilli greiningu á þessum gögnum var ákvarðað pH sýnislausnarinnar, styrkur skolefnis og rúmmál skolefnis á bilinu 9-10, 80-85 prósent og 20-25 BV í sömu röð. Byggt á fjölþátta tvíliðajöfnunni fyrir niðurstöður breytilegra afleiða og ákjósanlegu kerfi, reyndist besta TGCD hreinsunaraðferðin vera við 85 prósenta styrkleika (etanóls) leysiefnis (etanóls) og rúmmál 25 BV við pH 11. Samsvarandi OD gildi var 0,8332 og heildarávöxtun glýkósíða var 73,0339 prósent. Sjónræn birting frá myndum 8-10 gefur til kynna að besta aðferðin sé sú þar sem víxlverkun milli þáttanna tveggja var tekin til greina, þó að besta aðferðin sem dregin er út úr formúlunni viðurkenni þá aðferð þar sem víxlverkanir þáttanna þriggja voru teknar með. Niðurstöðurnar tvær voru ólíkar og ákjósanlegasta hreinsunaraðferðin var talin vera með 85 prósenta styrkleika skolefnis (etanóls) og rúmmáli 25 BV við pH 11.

Legvaxtarmæling

Legstuðull hvers hóps er sýndur í töflu 3. Í samanburði við neikvæða samanburðarhópinn voru niðurstöður hinna hópanna marktækt ólíkar. Það kom í ljós að TGCD sem fæst með 20 mismunandi hreinsunaraðferðum hafði allar estrógenvirkni.

Staðfestingartilraun

Alhliða niðurstöður CCD og legvaxtarprófsins sýndu að ákjósanlegasta hreinsunaraðferðin var talin vera með 85 prósenta styrkleika (etanóls) leysiefnis og rúmmáli 25 BV við pH 11.

staðfestingarferli, meðalávöxtun heildarglýkósíða var 70,9150 prósent. Meðalfrávik milli spáðra og raungilda var 2,1180 prósent. Því má benda á að fyrirsjáanleiki og tilraunatrúverðugleiki þessa líkans sé góður.

Auðkenning TGCD eftir hreinsun

Byggt á varðveislutíma og MS gögnum var getgátur um 21 náttúruleg innihaldsefni, þar á meðal campneoside 1, 2′-acetylacteoside, cistanoside A, cistanoside B, syringalide A 3'- - L-rhamnopyranoside, tubuloside A, tubuloside B, salidroside, cistanoside G, teniposide sýra, decaffeoylacteoside, 8-epiloganic acid, echinacoside, cistanoside F, cistantubuloside B1, isoacteoside, acteoside, cis-acteoside, kankanoside E, osmanthuside B, og cistanoside C. The retention time, MS og cistanoside C. MS upplýsingar, formúlur og getgátur efnasambönd eru sýnd í töflu 4.

Q-TOF-MS er sérstaklega hentugur til að bera kennsl á uppbyggingu flókinna sameindaþátta lyfja og matvæla vegna þess að það getur veitt mögulega frumefnasamsetningu með nákvæmum sameindamassa og byggingareiginleikum brotajónanna. Til að koma á kerfisbundinni byggingalýsingu voru Q-TOF-MS, MS gögn, gagnagrunnsleit og birt tilvísunarrit einnig notuð til auðkenningar. Sameindaformúla hvers markþáttar var dregin úr móðurjóninni og hún var samsvörun við þekkt efnasambönd. Þessa formúlu væri hægt að ákvarða frekar út frá tengdum brotajónum hennar. Til dæmis sýndi toppur 5 ríkjandi afprótónaðri jón við m/z 654 (C30H38O16), sem var eins og frumefnasamsetning campneoside 1. Tap á kaffóýli myndaðist úr brotajón við m/z 493, og tap á rha hluti var myndaður úr brotajóni við m/z 347.

Niðurstaða

Með því að nota LC-Q-TOF-MS tækni hefur einföld og öflug eigindleg greiningaraðferð fyrir TGCD verið þróuð og fullgilt. Löggildingargögn fyrir skimun og auðkenningu á náttúrulegum efnasamböndum frá TGCD voru fullnægjandi. Tuttugu og eitt lífvirk efnasambönd frá TGCD voru velt upp sem hér segir: salídrósíð, cistanosíð G, genipósíðsýra, decaffeoylacteoside, campneoside 1, 8-epiloganic acid, 2'-acetylacteoside, cistanoside A, cistanoside B, syringalide{9' }}L-rhamnopyranoside, echinacoside, cistanoside F, cistantubuloside B1, isoacteoside, acteoside, tubuloside A, cis-acteoside, kankanoside E, osmanthuside B, cistanoside C, og tubuloside B. gæðaeftirlit þeirra og frekari klíníska notkun vegna estrógenvirkni þeirra. Þetta getur boðið upp á nýjan og bættan meðferðarmöguleika til að meðhöndla heilkenni eftir tíðahvörf og forðast þannig aukaverkanir og aukaverkanir estrógenmeðferðar.

Skammstafanir

TGCDCistanche deserticolaheildarglýkósíð LC/Q-TOF-MS vökvaskiljun/fjórpóla flugtímamassagreiningu

RSM svörun yfirborðsaðferðafræði

CCD miðlæg samsett hönnun

MS massagreiningu HPLC/Q-TOF-MS hágæða vökvaskiljun/fjórpóla flugtíma massagreiningu

ACN asetónítríl

BV rúmmál

OD almennt æskilegt

LC-MS vökvaskiljun-massagreiningar

Q-TOF-MS fjórpóla massagreiningu á flugtíma

TCM hefðbundin kínversk lyf

RSD hlutfallslegt staðalfrávik

Viðurkenningar

Þetta verkefni var stutt af National Natural Science Foundation of China (nr. 81073015), Nature Scientific Foundation of Heilongjiang Province (ZD2017014), þjálfunaráætlun fyrir unga nýsköpunarhæfileika háskólans í Heilongjiang héraði (UNPYSCT- 2017209). Höfundar lýsa því yfir að ekki sé um hagsmunaárekstra að ræða varðandi útgáfu þessa blaðs.

Hagsmunaárekstur

Höfundar segja enga hagsmunaárekstra.

Heimildir

[1] Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y., Tu PF, Phenylethanoid glýkósíð með bólgueyðandi virkni frá stönglum Cistanche deserticola ræktuð í Tarim eyðimörk, Fitoterapia, 2013, 89, {{4} }.

[2] Guo Y., Cao L., Zhao Q., Zhang L., Chen J., Liu B., Zhao B., Bráðabirgðalýsingar, andoxunar- og lifrarverndandi virkni fjölsykru frá Cistanche deserticola, International Journal of Biological Macromolecules , 2016, 293, 678-685.

[3] Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y., Tu PF, bólgueyðandi iridoids frá stönglum Cistanche deserticola ræktaðir í Tarim Desert, Chinese Journal of Natural Medicines, 2016, 14, 61-65.

[4] Peng F., Chen J., Wang X., Xu C., Liu T., Xu R., Breytingar á magni fenýletanóíð glýkósíða, andoxunarvirkni og önnur gæðaeiginleika í Cistanche deserticola sneiðar með gufuvinnslu, efnafræði og Pharmaceutical Bulletin (Tókýó), 2016, 64, 1024-1030.

[5] Wang T., Zhang X., Xie W., Cistanche deserticola YC Ma, "Desert Ginseng": umsögn, The American Journal of Chinese Medicine, 2012, 40, 1123-1141.

[6] Song Y., Song Q., Li J., Zhang N., Zhao Y., Liu X., Jiang Y., Tu P., Samþætt stefna til að greina magn kamillu á milli kamilleCistanche deserticolaog C. tubulosa með því að nota hágæða vökvaskiljun-hybrid þrefalda fjórpóla línulega jónagildru massagreiningu, Journal of Chromatography A, 2016, 1429, 238-247.

[7] Li Y., Peng Y., Wang M., Zhou G., Zhang Y., Li X., Hröð skimun og auðkenning á mismun á umbrotsefnum íCistanche deserticolaog C. tubulosa vatnsþykkni í rottum með UPLC-Q-TOF-MS samsettri mynsturgreiningargreiningu, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2016, 131, 364-372.

[8] Li WL, Sun XM, Song H., Ding JX, Bai J., Chen Q., HPLC/Q-TOF-MS-undirstaða auðkenning á frásoguðum innihaldsefnum og umbrotsefnum þeirra í rottasermi og þvagi eftir inntöku Cistanche deserticola Extract, Journal of Food Science, 2015, 80, H2079-2087.

[9] Almasi A., Dargahi A., Mohamadi M., Biglari H., Amirian F., Raei M., Fjarlæging á penicillíni G með blöndu af sónargreiningu og ljóshvatandi (sonó-ljóshvatandi) ferli úr vatnslausn: hagræðingu ferlisins með því að nota RSM (Response Surface Methodology), Electron Physician, 2016, 8,

[10] 2878-2887. Hou W., Zhang W., Chen G., Luo Y., Optimization of Extract Conditions for Maximal Phenolic, Flavonoid and Andoxidant Activity from Melaleuca bract data Leaves Using the Response Surface Methodology, PloS One, 2016, 11,

[11] e0162139. Pooralhossini J., Ghaedi M., Zanjanchi MA, Asfaram A., Val á útdrætti með aðstoð með ómskoðun ásamt litrófsmælingum til að ákvarða gallsýru í vatnssýnum hratt: Samsett miðlæg hönnun til hagræðingar á ferlibreytum, Ultrasonics Sonochemistry, 2017, 34 , 692- 699.

[12] Han L., Boakye-Yiadom M., Liu E., Zhang Y., Li W., Song X., Fu F., Gao X., Byggingareinkenni og auðkenning fenýletanóíð glýkósíða fráCistanches deserticola YC Maeftir UHPLC/ESI-QTOF-MS/MS, Phytochemical Analysis, 2012, 23, 668-676.

[13] Lu D., Zhang J., Yang Z., Liu H., Li S., Wu B., Ma Z., Magngreining á Cistanches Herba með því að nota hágæða vökvaskiljun ásamt díóða fylkisgreiningu og há- upplausnarmassagreiningu ásamt efnafræðilegum aðferðum. Journal of Separation Science, 2013, 36, 1945-1952.

[14] Li WL, Chen Q., Yang B., Gao S., Zhang JJ, Skimun á plöntuestrógenvirkum útdrætti og skammti afCistanche deserticola, Kínversk jurtalyf, 2013, 5, 292-296.

[15] Li YP, Huang FR, Dong J., Xiao C., Xian RY, Ma ZG, Zhao J., hröð auðkenning á Cistanche með flúrljómunarrófsmyndatækni ásamt aðalhlutagreiningu og Fisher-greiningu, Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi, 2015, 35, 689-694.