Vélræn rannsókn á mongólskum jurtalyfseðli sem byggir á Cistanche við meðferð á bráðum nýrnaskaða: Lyfjafræði á netinu, sameindatengingu og staðfestingaraðferð í lífi

2. Úrslit

2.1 Netlyfjafræðigreining

2.1.1 Skimun á virkum íhlutum og markmiðum á Cistanche-undirstaða mongólska lyfseðils og uppbygging íhluta-markmiðsnets

Samkvæmt skimunarviðmiðunum var alls safnað 75 virkum þáttum, þar af 15 fráPiper longum, 8 fráAreca hneta, 13 fráAlpinia officinarum, 32 fráKanill, 7 fráGranatepli, og 4 fráAmomum villosum. Meðal þeirra,GranatepliogAlpinia officinarumdeildi 3 hlutum, ogAmomum villosumogAlpinia officinarumdeildi 1 íhlut. Samsvarandi markmið innihéldu 97 fyrirPiper longum, 23 fyrirAreca hneta, 188 fyrirAlpinia officinarum, 440 fyrirKanill, 181 fyrirGranatepli, og 78 fyrirAmomum villosum. Eftir að tvítekningar voru fjarlægðar fengust alls 682 einstök skotmörk. Þessir þættir og markmið voru flutt inn í Cytoscape til að búa til sjónrænt net (Mynd 1), þar sem stærri hnútar gefa til kynna meiri miðlægni.

 

 

 

2.1.2 Söfnun AKI skotmarka

AKI-tengdum markmiðum var safnað úr eftirfarandi gagnagrunnum:

GeneCards: 11.304 skotmörk

OMIM: 638 skotmörk

TTD: 4 skotmörk

Lyfjabanki: 46 skotmörk

PharmGKB: 91 skotmörk

Eftir að tvítekningar voru fjarlægðar fundust alls 11.792 einstök AKI-tengd skotmörk. Venn skýringarmynd var búin til til að sjá skörunina (mynd 2).

2.1.3 Skimun á kjarnahlutum og markmiðum og uppbygging PPI nets

Frá efnismarkmiðinu í kafla 2.1.1 voru 7 virkir kjarnaþættir af Cistanche-undirstaða mongólska lyfseðilsins auðkennd (sjá töflu 2). Venn skýringarmynd sýndi 613 skotmörk sem sköruðust á milli lyfseðilsskyldra og AKI-tengdra miðanna (Mynd 3). Þetta var sett inn í STRING gagnagrunninn til að búa til PPI net, sem auðkenndi 54 hugsanleg markmið og 6 kjarnamarkmið (Mynd 4).

Cistanche-undirstaða mongólska lyfseðils til að bæta nýrnaheilsu

Hafðu samband núna

 

 

 

 

2.1.4 GO og KEGG auðgunargreining

GO auðgunargreining skilaði 3.943 athugasemdum, þar á meðal 3.454 líffræðilegum ferlum (BP), 194 frumuhlutum (CC) og 295 sameindavirkni (MF). Tíu efstu færslurnar eftir –log10(P-gildi) voru sýndar.

BP: DNA-bindandi umritunarþáttur virkni, sterahormónastjórnun, mergfrumuaðgreining

CC: umritunarstýrikerfi, himnufleki, blöðrur

MF: umritunarþáttabinding, fosfatasabinding, cýtókínbinding (mynd 5)

KEGG ferli greiningar auðkenndu 212 auðgað ferla, með efstu 20 sjónrænt. Þar á meðal voru:

PI3K/Akt merkjaleið

IL-17 merkjaleið

TNF boðleið

HIF-1 merkjaleið (mynd 6)

Samsett-marksjúkdóms-ferlakerfi var smíðað til að sýna fjölmarks-, fjölferlakerfi mongólska læknisfræðinnar sem byggir á Cistanche við meðferð á AKI (Mynd 7).

2.1.5 Niðurstöður sameindatengingar

KjarnaþættirnirQuercetin, T-Muurolol, Hexadecansýra, Alfa-karýófýlen, Línólsýra, Cis-Cinnamaldehýð, ogFenetýl asetatvoru lagðar að bryggju með kjarnamarkmiðunumAKT1 (PDB: 1unq), TNF (PDB: 5uui), IL6 (PDB: 1alu), TP53 (PDB: 3d06), IL1B (PDB: 5r8q), ogEGFR (PDB: 8a27).

Binduorka undir 0 kJ/mól gefur til kynna hugsanlega bindingu en < –7 kJ/mól bendir til sterkrar bindingar. Öll bryggjuorka var undir –7 kJ/mól, sem sýndi sterka bindivíxlverkun. Efstu 6 milliverkanirnar voru sýndar (mynd 9):

IL1B–T-Muurolol

TP53-Cis-Cinnamaldehýð

TP53-Alfa-karýófýlen

IL1B-Alfa-karýófýlen

TNF-T-Muurolol

TP53-T-Muurolol

T-Muurolol og Alpha-Caryophyllene höfðu sterkustu samskiptin við markmið, sem gerir þau að líklegum lykilþáttum í Cistanche-byggðri meðferð við AKI.

2.2 In Vivo tilraunaniðurstöður

2.2.1 Almennt ástand, líkamsþyngd og nýrnavísitala músa

Mýs í líkanahópnum sýndu minni fæðuinntöku og þvagframleiðslu, svefnhöfgi og aukinn öndunar- og hjartsláttartíðni. Þessi einkenni batnaði í meðferðarhópunum. Í samanburði við viðmiðunarhópinn höfðu mýs úr módelhópnum verulega minnkað líkamsþyngd (P < 0,01, F=6.979), á meðan bæði lágskammta og háskammtahópar sýndu verulegan þyngdarbata (P < 0,01, mynd 11). Nýrnastuðull var marktækt hækkaður í líkanahópnum (P < 0,01, F=8.56) og minnkað skammtaháð eftir meðferð (P < 0,05, mynd 12).

2.2.2 Áhrif Cistanche-Based Prescription á BUN, Scr og UA

Mýs í módelhópnum höfðu marktækt hækkuð magn þvagefnis í blóði (BUN), kreatínín í sermi (Scr) og þvagsýru (UA) í samanburði við viðmiðunarhóp (P < 0,01). Báðir meðferðarhóparnir minnkuðu BUN (P < 0,01, F=12.46), og stórskammtahópurinn minnkaði verulega Scr og UA gildi (P < 0,01, F=12.8 og 13,77, í sömu röð). UA var marktækt lægra í hópnum sem fékk stóra skammta en í hópnum sem fékk lágskammta (P < 0,05, mynd 13).

2.2.3 Vefjameinafræðilegar breytingar á nýrnavef (HE-litun)

HE-litun sýndi eðlilega nýrnaformgerð í samanburðarhópnum. Módelhópurinn sýndi losun á þekjufrumum í pípulaga, gifs, gauklabólgu og bólguíferð. Báðir meðferðarhóparnir sýndu veiklað meinafræðilegt tjón (Mynd 14).

2.2.4 Áhrif á TNF-, IL-6 og IL-1

Þessi bólgueyðandi cýtókín eru kjarnamarkmið meðferðar sem byggir á Cistanche. Magn TNF-, IL-6 og IL-1 voru marktækt hækkuð í líkanahópnum (P < 0,01, mynd 15). Báðir meðferðarhóparnir lækkuðu þessi magn marktækt, þar sem háskammtahópurinn sýndi áberandi áhrif.

2.2.5 Áhrif á PI3K/Akt Pathway prótein tjáningu

Samanborið við viðmiðunarmagnið var PI3K og p-Akt/Akt prótein tjáning marktækt lækkað í líkanahópnum (P < 0,05). Meðferðin endurheimti þessi gildi verulega á skammtaháðan hátt (P < 0,01, mynd 16).

3. Umræður

AKI er enn stórt alþjóðlegt heilbrigðisvandamál, með yfir 2 milljónir dauðsfalla árlega. Flókin orsök þess, há tíðni og slæmar horfur leggja þunga byrðar á sjúklinga og heilbrigðiskerfi. Eins og er eru engin áhrifarík lyf fáanleg; meðferð er að mestu leyti stuðnings og dýr.

Samkvæmt hefðbundinni mongólskri læknisfræði er nýrun stjórnað afBadaganmeginreglunni og tilheyrir "vatns" frumefninu, sem stjórnar líkamsvökva. Ofgnótt af Badagan leiðir til innri raka og truflunar á nýrnastarfsemi. TheMongólsk formúla sem byggir á Cistanche, sem samanstendur afCistanche, Granatepli, Kanill, Piper longum, Alpinia officinarum, ogAmomum villosum, er hannað til að hita nýru og endurheimta jafnvægi milli rótanna þriggja (Badagan, Heyi og Shira).

Hver jurt leggur til sérstakar aðgerðir:

Cistanche: styrkir nýra yang, bætir blóðrásina

Piper longum: eyðir kulda, styrkir stjórnskipulag

Alpinia officinarum: hitar magann, dregur úr verkjum

Kanill: hitar nýru yang, eykur orku

Granatepli: svalar þorsta, dregur úr sársauka

Amomum villosum: dregur saman og vermir milta
Saman reka þau út nýrnakulda og koma á jafnvægi og meðhöndla þannig nýrnasjúkdóma.

Þessi rannsókn notaðinetlyfjafræðiað kanna kerfisbundið virku efnasamböndin og verkun mongólskrar læknisfræði sem byggir á Cistanche. Kjarnaþættirnir auðkenndir-Quercetin, T-Muurolol, Hexadecansýra, Alfa-karýófýlen, Línólsýra, Cis-Cinnamaldehýð, ogFenetýl asetat-eru studdir af bókmenntum:

Quercetindregur úr apoptosis og bólgu í AKI

T-Muurolol, úr ilmkjarnaolíum, hefur bólgueyðandi eiginleika

Hexadecansýrahamlar frumufjölgun

Alfa-karýófýlenhefur bólgueyðandi, örverueyðandi og krabbameinsvaldandi áhrif

Línólsýrastillir átfrumumiðlaða bólgu

Cis-Cinnamaldehýðsýnir andoxunar- og bakteríudrepandi virkni

Fenetýl asetatstjórnar taugakerfinu með ilmmeðferð

PPI netgreining leiddi í ljós helstu markmið:AKT1, TNF, IL6, TP53, IL1B, EGFR. Þetta taka þátt í bólgu, frumulifun, frumudauða og ónæmisstjórnun.

GO og KEGG auðgun bentu til flókinna líffræðilegra ferla og lykilferla, sérstaklegaPI3K/Akt, IL-17, TNF, ogHIF-1. PI3K/Akt leiðin var mest auðguð og gegnir mikilvægu hlutverki í efnaskiptum, vexti og bólgu. Að breyta þessari leið getur dregið úr AKI með því að draga úr frumudauða og bólgu.

Sameindatenging staðfesti sterka tengingu milli kjarnaefnasambanda og markmiða, sem styður mikilvægi þeirra í AKI meðferð.

In vivo tilraunirstaðfesti niðurstöður netlyfjafræðinnar:

Bætt líkamsþyngd og nýrnavísitala

Minni BUN, Scr og UA

Léttir vefjameinafræðilegum skemmdum

Lækkað TNF- , IL-6, IL-1 stig

Uppstýrð PI3K og p-Akt/Akt tjáning

Vélrænt,PI3Kbreytir PIP2 í PIP3, sem virkjarAkt, bæla bólgueyðandi cýtókínlosun. Að draga úr bólgu stuðlar að viðgerð á þekjulaga pípulaga og endurheimtir nýrnastarfsemi.

 

Niðurstaða

Þessi rannsókn leiðir það í ljósCistanche-undirstaða mongólsk læknisfræði meðhöndlar AKIí gegnum mörg virk efnasambönd, markmið og leiðir - sérstaklega í gegnumPI3K/Akt merkjaleið, sem dregur úr bólgum og verndar nýrnastarfsemi. Þó að niðurstöður netlyfjafræðinnar hafi verið staðfestar í dýralíkönum, framtíðin vitro og stórum klínískum rannsóknumeru nauðsynlegar til að styðja við klíníska notkun og þróun hefðbundinna mongólskra lyfja fyrir AKI.