Blóðsykurslækkandi og blóðsykurslækkandi áhrif heildarglýkósíða af Cistanche Tubulosa
Mar 28, 2022
Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
Kuiniu Zhu a,b,1, Zhaoqing Meng a,c,1, Yushan Tian d, Rui Gu a, Zhongkun Xu a, Hui Fang a, Wenjun Liu a, Wenzhe Huang a, Gang Ding a, Wei Xiao a,*
ÁSTANDUR
Etnólyfjafræðilegt mikilvægi:Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) er oft ávísaður hluti í mörgum hefðbundnum jurtalyfseðlum sem eru notuð til að meðhöndla sykursýki í Kína. Í nýlegum rannsóknum hefur sykursýkislækkandi virkni Cistanche tubulosa útdráttar verið staðfest. Hins vegar hefur ekki verið greint frá neinni kerfisbundinni rannsókn á heildarglýkósíðum Cistatnche tubulosa (TGCT).
Markmið rannsóknarinnar:Þessi rannsókn miðar að því að rannsaka blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif TGCT og hugsanlega aðferðir í mataræði/streptozotocin (STZ) völdum sykursýkisrottum, og að efnafræðilega einkenna helstu innihaldsefni TGCT.
Efni og aðferðir:Helstu innihaldsefni TGCT einkenndust af HPLC/Q-TOF-MS og greiningarmagngreiningin var framkvæmd með HPLC-DAD. Rottur með sykursýki af tegund 2 voru framkallaðar með fituríku súkrósafæði (HFSD) og einni inndælingu af STZ (30 mg/kg). TGCT (50 mg/kg, 100 mg/kg og 200 mg/kg) eða metformín (200 mg/kg) var gefið til inntöku í 6 vikur. Fylgst var með líkamsþyngd og kaloríuinntöku í gegnum tilraunina. Fastandi plasma glúkósa (FPG), glúkósaþolpróf til inntöku (OGTT), svæði undir feril glúkósa (AUC-G), glýkósýlerað blóðrauða (HbA1c), fastandi insúlín, C-peptíð í sermi, glýkógeninnihald og insúlínnæmisstuðull voru prófuð . Magn fosfórýleraðs prótein kínasa B og fosfórýleraðs glýkógen syntasa kínasa 3, virkni hexókínasa og pýrúvat kínasa var metin. Á sama tíma voru breytingar á lípíðsniðum í sermi, súperoxíð dismutasa, glútaþíon peroxidasa, malondialdehýð og bólguþættir mældar. Vefjafræðilegt á brisi var einnig metið með hematoxylin-eosin litun.
Niðurstöður:Rannsókn okkar leiddi í ljós tilvist fenýletanóíð glýkósíða (PhGs): echinacoside (500,19 ±11,52 mg/g), akteósíð (19,13 ± 1,44 mg/g) og ísóakteósíð (141,82 ± 5,78 mg/g) Lyfjafræðilegar prófanir gáfu til kynna að TGCT sneri marktækt við STZ-völdum þyngdartapi (11,1 prósent, 200 mg/kg); minnkað FPG (56,4 prósent, 200 mg/kg) og HbA1c (37,4 prósent, 200 mg/kg); bætti OGTT, AUC-G og insúlínnæmi; aukið glýkógeninnihald (40,8 prósent í lifur og 52,6 prósent í vöðvum, 200 mg/kg) og virkni kolvetnaumbrotsensíma; stýrðar breytingar á fitusniði og virkni andoxunarensíma; minnkuð sermismerki um oxunarálag og bólgu á skammtaháðan hátt (p <>
Ályktanir:Þessi rannsókn staðfesti að TGCT var áhrifaríkt næringarefni til að bæta blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun í mataræði/STZ-völdum sykursýkisrottum, sem gæti að mestu rekjað til starfsemi TGCT á hömlum á oxunarálagi og bólgu.
Cistanche eignarhluturtil starfseminnar á hömlum áoxunarálagogbólga.
1. Inngangur
Sykursýki er talinn efnaskiptasjúkdómur, sem einkennist af blóðsykrishækkun sem stafar af skertri insúlínframleiðslu eða/og insúlínviðnámi (IR) (American Diabetes Association, 2019). Langvinn blóðsykurshækkun tengist mörgum alvarlegum fylgikvillum eins og nýrnakvilla, sjónukvilla, taugakvilla og hjartavandamálum (Ekoe, 2019). Fjöldi sykursjúkra á heimsvísu árið 2019 er áætlaður vera 463 milljónir (9,3 prósent), hækka í 578 milljónir (10,2 prósent) árið 2030 og 700 milljónir (10,9 prósent) árið 2045 (Saeedi o.fl., 2019). Nokkur lyf eins og metformín (Met, sem eykur framleiðslu glýkógens í lifur), insúlín (bælir glúkósaframleiðslu og eykur nýtingu glúkósa) og súlfónýlúrealyf (örvar brishólafrumur til að seyta insúlíni) eru áhrifarík við að draga úr blóðsykri. Hins vegar höfðu margar óæskilegar aukaverkanir (þar á meðal þyngdaraukningu, blóðsykursfall, innrennslisæðar og bjúgur) takmarkað notkun þeirra (Moller, 2001). Þess vegna hafa margir vísindamenn verið að leita að líffræðilega virkum efnasamböndum úr hefðbundnum plöntuþykkni til meðhöndlunar á sykursýki undanfarin ár (Kasangana o.fl., 2019; Liu o.fl., 2020).
Cistanche tubulosa (Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) hefur verið mikið notað í hefðbundinni kínverskri læknisfræði, sem er oft ávísað í hefðbundnum formúlum til að meðhöndla nýrnaskort, ófrjósemi kvenna og sykursýki (Li o.fl., 2016; Han o.fl. , 2017; Su et al., 2017). Nýlegar rannsóknir hafa greint frá því að vatnsútdráttur af Cistanche tubulosa sýndi blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif í db/db músum með sykursýki af tegund 2 (T2DM) (Xiong o.fl., 2013), og bætti blóðsykursgildi, IR og lípíðperoxun í streptózótósíni. (STZ)-níkótínamíð af völdum sykursýkisrottna (Kong o.fl., 2018). Fenýletanóíð glýkósíð (PhGs) eru helstu innihaldsefni Cistanche tubulosa (Morikawa o.fl., 2014), sem hefur sýnt ýmsa líffræðilega virkni eins og andoxun (Xue o.fl., 2017) og gegn krabbameini (Fu o.fl., 2019) . Þar að auki hamlaði PhG marktækt aukningu á blóðsykursgildum eftir máltíð í sterkjuhlöðnum músum (Morikawa o.fl., 2014), bældu niður natríumháða glúkósasamflytjanda 1-miðlaða glúkósaupptöku í þekjufrumum þarma (Shimada o.fl., 2017), og hamlaði virkni aldósa redúktasa í rottulinsum (Morikawa o.fl., 2019). Engar fyrri rannsóknir hafa hins vegar rannsakað blóðsykurslækkandi virkni heildarglýkósíða af Cistanche tubulosa (TGCT).
Í þessari rannsókn hafa sykursýkislyfjaeiginleikar TGCT verið metnir í fituríku súkrósafæði (HFSD) og STZ-völdum sykursýkisrottum. Að auki voru andoxunarefni og bólgueyðandi virkni einnig rannsökuð til að skilja ítarlega hugsanlegan gang TGCT.
2. Efniviður og aðferðir
2.1. Efni og hvarfefni
STZ var keypt af Sigma-Aldrich Corp. (Saint Louis, Bandaríkjunum). Met var fengin frá kínverska-ameríska Shanghai Squibb Pharma. ELISA settin af insúlíni, C-peptíð voru útveguð af Elabscience Biotechnology Co., Ltd (Wuhan, Kína). ELISA settin af glúkósa, glýkósýleruðu hemóglóbíni (HbA1c), heildarkólesteróli (TC), tríacýlglýseróli (TG), lágþéttni lípóprótein kólesteról (LDL-C), háþéttni lípóprótein kólesteról (HDL-C), súperoxíð dismutasi (SOD) , glútaþíonperoxidasi (GSH-Px), malondialdehýð (MDA), æxlisdrep- (TNF ), interleukin 1 (IL-1), interleukin 6 (IL-6) voru keyptir frá Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute . ELISA settin af fosfórýleruðum prótein kínasa B (p-PKB) og fosfórýleruðum glýkógen syntasa kínasa 3 (p-GSK3 ) voru keyptir frá Shanghai Enzyme-linked Biotechnology Co., Ltd. Echinacoside (hreinleiki meiri en eða jafnt og 98 prósent) og acteoside (hreinleiki meiri en eða jafnt og 97 prósent) voru keyptir frá National Institute for Food and Drug Control. Ísóakteósíð (hreinleiki meiri en eða jafnt og 98 prósent) var veitt af Chengdu Must Biotechnology Co., Ltd.
Cistanche gagnlegt þykkni duft
2.2. Plöntuauðlindir og undirbúningur TGCT
Þurrkaður safaríkur stilkur af Cistanche tubulosa var keyptur frá Bozhou Yihongtang Pharmaceutical Co., Ltd., (Anhui, Kína) og auðkenndur af Dr. Puyang Gong frá lyfjafræði grasafræðideild Southwest Minzu háskólans. Skírteinissýnishorn (nr. 20161103) var mulið í duft og sett í herbarium Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd. Samkvæmt innlendum lyfjastaðli SFDA "Congrong Zonggan Jiaonang " (YBZ07482005-2011Z), hrályfið (1 kg) var dregið út með vatni þrisvar sinnum eftir bleyti í 1 klst. Eftir síun var síuvökvinn þéttur við lækkaðan þrýsting, bætt alkóhóli við óblandaðu lausnina þar til etanólstyrkurinn náði 60 prósentum. Fljótandi floti var þykkt án alkóhólsbragðs og síðan hreinsað með stórporu plastefni. Í fyrsta lagi var vatnsskolunarefni og 40 prósent etanólskotefni safnað í röð til notkunar síðar. Í öðru lagi var vatnsskolunarefni sprautað aftur í stórporu plastefnið og skolað með vatni. Vatnsrennsli var hent. Í þriðja lagi var skolun með 40 prósent etanóli og skolefninu safnað til síðari notkunar. Að lokum voru 40% etanólskolunarefni sameinuð og þétt með snúningsuppgufunarbúnaði, síðan var lausnin þurrkuð með úðaþurrkun. Um 60 g brúnn kraftur fékkst (þ.e. TGCT). Hreinleiki TGCT var greindur samkvæmt staðlinum (YBZ07482005-2011Z), sem er náð allt að 853 mg/g. TGCT (0,21 mg) og þrír blönduðir staðlar (echinacoside: 131,3 ug, acteoside: 4,2 ug, ísóacteoside: 39,4 ug) voru leyst upp í 1 ml af metanóli: vatni (50/50, v/v), og síðan síuð í gegnum 0,45 μm himna fyrir inndælingu.
2.3. Eigindleg greining á TGCT með HPLC/Q-TOF-MS
HPLC kerfið var tengt við Agilent 6538 Q-TOF-MS (Agilent Corp, USA) búin rafúðajónun. Greiningin var framkvæmd á Zorbax SB-C18 súlunni (15{{10}} mm × 4,6 mm, 5 μm). Hreyfanlegur fasi var samsettur úr metanól-vatni (innihélt 0,1 prósent H3PO4). Rennslishraði var 1,0 ml/mín. Áætlanir um stiglosun voru dregnar saman sem hér segir: 0–20 mín, 18 prósent –28 prósent A; 20–50 mín, 28 prósent –32 prósent A; 50–60 mín., 32 prósent A; 60–70 mín., 32 prósent –50 prósent. TOF-MS var framkvæmt í bæði jákvæðum og neikvæðum jónaham yfir m/z 100–3000 undir eftirfarandi rekstrarbreytum: háræðaspenna 3500 V (ESI-) eða 4000 V (ESI plús ); þurrkunargas, 10,0 L/mín; gashiti, 350 ◦C; þrýstingur á eimgjafa, 35 psi; skúmspenna, 65 V; brotspenna, 135 V; OCTRFV, 750 V. Öllum gögnum var stjórnað af Data Acquisition for TOF/ Q-TOF Ver. B.03.01 og eigindleg greining Ver. B.03.01 (Agilent Technologies, Bandaríkjunum) í sömu röð.
2.4. Magngreining á TGCT með HPLC-DAD
Aðskilnaður var gerður á Zorbax SB-C18 súlunni (150 mm × 4,6 mm, 5 μm) innan 50 mín (1,0 ml/mín). Litskiljunarskilyrði fyrir HPLC-DAD voru þau sömu og eigindleg greining. Inndælingarrúmmál, súluhitastig og UV-bylgjulengd voru stillt á 5 μL, 30 ◦C og 330 nm, í sömu röð.
2.5. Tilraunadýr
SD karlkyns rottur, sem vógu 180 ± 20 g, voru keyptar frá rannsóknardýramiðstöðinni í Nanjing Qinglongshan [vottorð nr. SCXK (SU) 2017-0001] og vistaðar á dýraverndarstöðinni í Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd. (Jiangsu, Kína). Umönnun dýra og tilraunaaðferðir voru samþykktar af dýraumönnunar- og notkunarnefndinni, Huzhou Institute for Food and Drug Control (samþykki nr. 19018), og voru framkvæmdar samkvæmt reglugerðum um dýratilraunir í Kína. Rottum var haldið undir stýrðu hitastigi (24 ± 2 ◦C) og rakastigi (50 ± 10 prósent) með 12 klst ljósum og myrkri hringrás, aðlagaðar við lífsskilyrði í 7 daga með venjulegu rannsóknarstofumati og vatni að vild.
2.6. Örvun sykursýki
Rottur í venjulegum samanburðarhópi (NC, n {{0}}) fengu venjulegt fæði, en tilraunarotturnar fengu HFSD (venjulegt fæði bætt við 20 prósent súkrósa, 10 prósent svínafeiti, 2,5 prósent kólesteról og 1 prósent kólat, 3,95 kcal/g) í 4 vikur. Eftir 12 klst föstu var rottum sprautað í kviðarhol með einum skammti af STZ (30 mg/kg), sem leyst upp í köldu sítratbuffi (0,1 M, pH 4,5) rétt fyrir notkun. Á 8. degi STZ-sprautunar var blóðsýni tekið úr skottendanum með einnota blóðtökunál og fastandi plasmaglúkósa (FPG) var ákvarðaður með flytjanlegum glúkómeter (LifeScan, Inc. UK). Rottur með einkenni fjölþvags, fjöldips og FPG Stærra en eða jafnt og 11,1 mmól/L voru taldar vera sykursýkisrottur og skiptar af handahófi í fimm hópa (n =10).
Hópur I: NC, fóðraður með 0,5 prósent natríumkarboxýlmetýlsellulósa (CMCNa, 10 ml/kg).
Hópur II: sykursýkisstjórnun (DC), fóðraður með 0,5 prósent CMC-Na (10 ml/kg).
Hópur III: TGCT-50, meðhöndluð með TGCT (50 mg/kg).
Hópur Ⅳ: TGCT-100, meðhöndluð með TGCT (100 mg/kg).
Hópur Ⅴ: TGCT-200, meðhöndluð með TGCT (200 mg/kg).
Hópur Ⅵ: Met-200, meðhöndluð með Met (200 mg/kg).
Skammtarnir sem notaðir voru í þessari rannsókn voru valdir út frá kínverskri lyfjaskrá (2015 útgáfa). Allir hópar voru gefnir til inntöku einu sinni á dag og héldu áfram að fá viðkomandi mataræði í aðrar 6 vikur.
Cistanche verndar lifrina.
2.7. Fylgstu með almennu ástandi rotta
Ástand loðdýra, þvagframleiðsla og lifun rotta sáust á hverjum degi. Fylgst var með líkamsþyngd (BW) og kaloríuinntöku í gegnum tilraunina. FPG var metið á 0, 2., 4. og 6. viku eftir meðferð með TGCT.
2.8. Glúkósaþolpróf til inntöku (OGTT)
OGTT var framkvæmt á rottum á næturföstu á lokastigi allrar rannsóknarinnar. Aðeins 60 μL blóðsýnum var safnað með háræðapípettu frá orbital sinus (0 klst), síðan gefin með TGCT (50 mg/kg, 100 mg/kg og 200 mg/kg) eða Met (200 mg/kg) í sömu röð. Blóðsýnum var safnað 0,5 klst., 1 klst., 2 klst. eftir glúkósaálag (2 g/kg). Rotturnar voru svæfðar með ísóflurani í nokkrar mínútur áður en þær voru teknar blóð og ýttu síðan strax á til að stöðva blæðinguna með hemostatic bómull. Allar tilraunir voru gerðar af vandvirkni til að tryggja velferð dýranna. Styrkur glúkósa í plasma var ákvarðaður með glúkósasetti sem byggir á glúkósaoxídasa peroxidasaaðferðinni. Flatarmálið undir feril glúkósa (AUC-G) var reiknað til að vísa til bókmennta (Shao o.fl., 2013).
2.9. Ákvörðun á fastandi insúlíni (FINS) og insúlínnæmisvísitölu (ISI)
1 sólarhring eftir OGTT voru allar rottur við góðar aðstæður án nokkurra einkenna eins og blindu og bólgu. Síðan voru þeir svæfðir með pentobarbital natríum (40 mg/kg, ip) eftir 12 klst. fasta og blóðsýnum var safnað úr ósæð í kviðarholi með og án heparíns til lífefnafræðilegs mats. Sermi var safnað úr blóðsýnum (án heparíns) með skilvindu. FINS var greint með ELISA settinu. FPG var ákvarðað með því að nota viðskiptasett sem byggt var á glúkósaperoxidasaaðferðinni. ISI var reiknað í samræmi við formúluna: ISI=1/[FINS (pmol/L) × FPG (mmól/L)] (Wang o.fl., 2013).
2.10. Mat á glýkógenmyndun í lifur og vöðvum
Lifur og gastrocnemius vöðvar voru skornir út, skolaðir, vigtaðir og geymdir við -70 ◦C. Glýkógen í lifur og vöðvum var mælt með anthrone aðferð eins og áður hefur verið lýst (Ren o.fl., 2015). Innihald glýkógens var gefið upp sem mg/g blautþyngd vefja. Virkni hexókínasa (HK) og pýrúvatkínasa (PK) í lifur var ákvörðuð með settum sem eru fáanlegir í verslun samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda.
2.11. Lífefnafræðileg greining
HbA1c í heilblóði (með heparíni) var mælt með greiningarbúnaði. Sermi C-peptíð, p-PKB, p-GSK3, TC, TG, LDL-C, HDL-C, SOD, GSH-Px, MDA, TNF-, IL-6 og IL-1 voru prófuð með viðskiptasettum í samræmi við leiðbeiningar framleiðanda.
2.12. Vefjafræðilegt mat á brisi
Brisvefur var einnig skorinn út, skolaður og festur í 10 prósent hlutlausu formalíni, síðan þurrkaður í hallandi etanóli (75 prósent, 85 prósent, 95 prósent og 100 prósent) og xýlen (100 prósent). Eftir gegndræpi voru þau sett í paraffín og skorin í 3 μm þykka hluta með snúningsmikrótómi. Vefjaskurðir voru litaðir með hematoxýlín-eósíni (H&E) fyrir ljóssmásjárrannsóknir (Chen o.fl., 2014).
2.13. tölfræðigreining
Tölfræðileg greining var framkvæmd með SPSS útgáfu 16.0 hugbúnaði. Gögnin voru sett fram með meðaltali ± SD. Tölfræðilegur samanburður á milli hópanna var gerður með einstefnu ANOVA og síðan Tukey prófi og gildið p < 0.05="" var="" tekið="" sem="" tölfræðilega="">
3. Úrslit
3.1. Plantefnafræðileg greining á TGCT
Eigindlega greiningin var framkvæmd og kynnt í viðbótarefninu. Heildarjónaskiljun í neikvæðri jónaham var sýnd á mynd S1. MS gögnum var úthlutað með semingi með því að bera saman við gögn í fyrri skýrslu (Li o.fl., 2015) og tekin saman í töflu S1. Greiningaraðferðirnar til að magngreina merkin hafa einnig verið staðfestar og lýst stuttlega í viðbótarefninu. HPLC litskiljunin voru sýnd á mynd 1. Þrjú meginefnisefni (echinacoside, acteoside og isoacteoside) TGCT voru auðkennd samanborið við viðmiðunarefnin. Auðkenning efnasambandanna og styrkur þeirra í TGCT var sýndur í töflu 1.
3.2. Áhrif TGCT á BW og kaloríuinntöku
Eins og sýnt er á mynd 2A sýndu rottur sem fengu HFSD að þyngdin jókst að meðaltali um 41 g samanborið við NC hópinn eftir 4 vikur. Hins vegar minnkaði STZ augljóslega BW hjá rottum samanborið við NC hópinn. Aftur á móti jókst BW í TGCT hópum (100 og 200 mg/kg) smám saman og marktækt (p < 0,05)="" um="" 8,1="" prósent="" og="" 11,1="" prósent="" í="" sömu="" röð="" samanborið="" við="" dc="" hópinn="" í="" lok="" tilraunatímabilsins="" ,="" sem="" benti="" til="" þess="" að="" tgct="" gæti="" komið="" í="" veg="" fyrir="" of="" mikið="" þyngdartap="" við="" meinafræðilegar="" aðstæður.="" kaloríuneysla="" nc="" hópsins="" var="" áberandi="" lægri="" en="" hinna="" hópanna="" og="" enginn="" marktækur="" munur="" var="" á="" kaloríuinntöku="" milli="" hinna="" fimm="" hópanna="" (mynd="">
3.3. Áhrif TGCT á FPG, OGTT og HbA1c
STZ af völdum sykursýkisrottna sýndu ótrúlega aukningu á FPG samanborið við NC hópinn (p < 0.01)="" eins="" og="" sýnt="" er="" á="" mynd="" 3a.="" inntaka="" tgct="" sýndi="" blóðsykurslækkandi="" áhrif="" á="" tíma-="" og="" skammtaháðan="" hátt.="" tgct="" (100="" og="" 200="" mg/kg)="" lækkaði="" marktækt="" magn="" fpg="" á="" 4.="" (22.1="" prósent="" og="" 24.8="" prósent)="" og="" 6.="" (23.2="" prósent="" og="" 56.4="" prósent)="" viku="" samanborið="" við="" dc="" hópinn.="" eins="" og="" sýnt="" er="" á="" mynd="" 3b="" og="" c,="" lækkaði="" tgct="" (100="" mg/kg="" og="" 200="" mg/kg)="" augljóslega="" blóðsykurinn="" um="" 16,1="" prósent="" og="" 22,2="" prósent="" eftir="" 0,5="" klst.="" og="" lækkaði="" um="" 17,2="" prósent="" og="" 26,5="" prósent="" eftir="" 1="" klst.,="" og="" auc="" -g="" af="" tgct="" hópum="" var="" einnig="" lækkað="" um="" 8,1="" prósent,="" 18,5="" prósent="" og="" 25,4="" prósent="" í="" sömu="" röð.="" eins="" og="" sýnt="" er="" á="" mynd="" 3d="" var="" marktæk="" aukning="" á="" hba1c="" (93,3="" prósent)="" samanborið="" við="" nc="" hópinn,="" en="" gjöf="" tgct="" (100="" mg/kg="" og="" 200="" mg/kg)="" til="" inntöku="" hjá="" rottum="" með="" sykursýki="" minnkaði="" ótrúlega="" (p="">< 0,05)="" hba1c="" (26,7="" prósent="" og="" 37,4="" prósent,="" í="" sömu="" röð)="" samanborið="" við="" dc="">
Mynd 1. HPLC litróf TGCT og efnafræðileg uppbygging helstu efnasambanda í TGCT.
3.4. Glýkógeninnihald í lifur og vöðvum
Eins og sýnt er á mynd. 4A og B, lækkaði glýkógenmagn marktækt hjá rottum með sykursýki. Þegar mismunandi styrkur TGCT var gefinn rottum með sykursýki í 6 vikur var glýkógen í lifur í TGCT hópum (100 mg/kg og 200 mg/kg) hærra (25,2 prósent og 40,8 prósent) en þeir sem eru í DC hópnum (p < 0,05,="" mynd="" 4a).="" svipuð="" áhrif="" voru="" sýnd="" í="" vöðvum="" að="" glýkógen="" í="" tgct="" hópum="" (100="" mg/kg="" og="" 200="" mg/kg)="" var="" meiri="" (40,7="" prósent="" og="" 52,6="" prósent)="" en="" í="" dc="" hópnum="" (p="">< 0,05,="" mynd="">
3.5. Áhrif TGCT á sermisinsúlín, C-peptíð og ISI
As shown in Table 2, insulin and C-peptide were obviously (p < 0.01) decreased in diabetic rats compared with the NC group. However, TGCT at all doses caused no significant increase in insulin and C-peptide levels (p >{{0}}.05), jafnvel þótt insúlín og C-peptíð í hópum sem fengu TGCT væru aðeins hærri en í DC hópnum. Á sama tíma reiknuðum við ISI á mynd 4C. Öfugt við insúlínseytingu var ISI hækkað um 32,9 prósent og 37,8 prósent með TGCT (100 mg/kg og 200 mg/kg) samanborið við DC hóp (p <>
Tafla 1 Innihald plöntuefnafræðilegra merkja TGCT.
3.6. Vefjameinafræðileg skoðun á brisi
Til að sannreyna áhrif TGCT á endurnýjun í brishólum var gerð vefjafræðileg greining á brisi. Á mynd 5A sáust eðlileg vefjafræðileg uppbygging og stórir eyjar í NC hópnum. Aftur á móti leiddi STZ-sprautað til að minnka fjölda og þvermál hólma með áberandi örblöðrubreytingum (mynd 5B). Bæði TGCT og Met jók verulega fjölda og stærð hólma með stigagreiningu (mynd 5C-F).
3.7. Áhrif TGCT á p-PKB, p-GSK3, HK og PK
Í töflu 2 reyndust fosfórunarmagn PKB og GSK3 vera marktækt (p < 0.{{10}}5)="" lækkað="" hjá="" rottum="" með="" sykursýki.="" tgct="" (100="" mg/="" kg="" og="" 200="" mg/kg)="" jók="" verulega="" styrk="" p-pkb="" (tgct-100:="" 13,5="" prósent="" ,="" p="">< 0,05="" og="" tgct-200:="" 16,7="" prósent,="" p="">< 0,05)="" og="" p="" gsk3="" (tgct-200:="" 18,3="" prósent,="" p="">< 0,01).="" svipuð="" áhrif="" tgct="" á="" hk="" og="" pk="" komu="" einnig="" fram.="" tgct="" hópar="" juku="" virkni="" hk="" (tgct-100:="" 30,2="" prósent,="" p="">< 0,05="" og="" tgct-200:="" 59,1="" prósent,="" p="">< 0,01)="" og="" pk="" (tgct-200:="" 32,7="" prósent,="" p="">< 0,05)="" en="" í="" dc="">
Mynd 2. Áhrif TGCT á líkamsþyngd (A) og kaloríuinntöku (B) í STZ-völdum sykursýkisrottum.
3.8. Áhrif TGCT á blóðfituhækkun
Eins og sýnt er í töflu 3 bættu rottur sem voru meðhöndlaðar með TGCT (100 mg/kg og 200 mg/kg) áberandi úr lípíðfrávikum. TG lækkaði um 19,8 prósent (p < 0,05)="" og="" 25,9="" prósent="" (p="">< 0,01);="" tc="" lækkuðu="" um="" 28,5="" prósent="" og="" 31,4="" prósent="" (p=""><0,05); ldl-c="" lækkaði="" um="" 20,0="" prósent="">< 0.01)="" compared="" with="" dc="" group.="" however,="" the="" suppressed="" hdl-c="" level="" in="" dc="" group="" was="" significantly="" elevated="" by="" 26.8%="" (p="" <="" 0.05)="" in="" tgct-200="">
3.9. Áhrif TGCT á oxunarálag og bólgu
Í ljósi mikilvægra hlutverka oxunarálags og bólgu í meinalífeðlisfræði sykursýki, metum við getu TGCT á oxunarálagi og bólgu hjá sykursjúkum rottum. TGCT (100 og 200 mg/kg) jókst í raun (14,7 prósent , p < 0,05="" og="" 20,5="" prósent="" ,="">< 0.01)="" the="" activity="" of="" sod,="" remarkably="" elevated="" (16.3%,="" p="" <="" 0.01="" and="" 22.3%,="" p="" <="" 0.01)="" the="" gsh-px="" activity="" and="" significantly="" decreased="" (15.0%,="" p="" <="" 0.05="" and="" 19.7%,="" p="" <="" 0.05)="" the="" mda="" formation="" compared="" with="" dc="" group="" in="" table="" 3.="" similarly,="" tgct="" (200="" mg/kg)="" treatment="" also="" blocked="" the="" stz-induced="" overproduction="" of="" pro-inflammatory="" cytokines="" tnf-α="" (21.8%,="" p="" <="" 0.01),="" il-6="" (14.0%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" il-1β="" (15.2%,="" p=""><>
4. Umræður
Sykursýki er versnandi og langvinn efnaskiptasjúkdómur sem einkennist aðallega af blóðsykrishækkun. Sem stendur er FPG sértækur mælikvarði á styrk glúkósa í blóði, OGTT er viðkvæm greiningarviðmiðun um snemmbúna óeðlilega losun glúkósa, á meðan HbA1c er mikið notaður sem gulls ígildi fyrir blóðsykursstjórnun endurspeglar meðalglúkósagildi yfir 120 dögum fyrir prófið ( Nagy o.fl., 2018; Gan o.fl., 2018). FPG, OGTT og HbA1c eru notuð klínískt til að greina og meðhöndla forsykursýki og sykursýki (Chai o.fl., 2017). Í rannsókn okkar er ljóst að FPG hjá rottum með sykursýki sem fengu TGCT (100 mg/kg og 200 mg/kg) var marktækt lækkað samanborið við DC hópinn. Eins og gögnin sýnd í OGTT og AUC-G, var skert glúkósaþol og glúkósaupptökuhraði snúið við með TGCT hjá rottum með sykursýki. Á sama tíma var niðurstaðan einnig studd af mælingum á HbA1c innihaldi. Þessar upplýsingar bentu til þess að TGCT bætti lífeðlisfræðilega vísitölu sykursjúkra rotta með því að stjórna blóðsykursjafnvægi.
Mynd 3. Breytingin á FPG hjá rottum með sykursýki meðan þær eru gefnar með TGCT í 6 vikur.
Skert insúlínseyting og IR gegna mikilvægu hlutverki í þróun blóðsykursfalls. Að miða á annað hvort þeirra er viðeigandi til að bæta blóðsykursstjórnun og koma í veg fyrir T2DM (Szoke og Gerich, 2005; Punthakee o.fl., 2018). Nokkrar tegundir rannsókna hafa greint frá því að blanda af fituríku mataræði og lágskammta STZ sé áhrifarík leið til að framkalla T2DM í tilraunum með dýrum. Lágskammtar STZ veldur vægri skerðingu á insúlínseytingu sem líkist meira síðari stigum T2DM (Gheibi o.fl., 2017). Í þessari rannsókn eykur TGCT hvorki marktækt insúlínseytingu né endurheimtir brishólma hjá rottum með sykursýki, jafnvel þótt insúlín og fjöldi hólma í hópum sem fengu TGCT væri hærri en í DC hópnum. Þessar niðurstöður eru í samræmi við fyrri rannsókn á db/db músum (Xiong o.fl., 2013). Niðurstöður okkar sýndu marktæka þyngdaraukningu hjá rottum með sykursýki sem voru meðhöndlaðir með TGCT, sem má skýra með smá aukningu á insúlíni sem getur hindrað niðurbrot próteina í vöðvavef (Adams o.fl., 2019). Ennfremur sýndi niðurstaða ISI að TGCT bætti augljóslega IR rotta með sykursýki sem er í samræmi við fyrri skýrslu (Kong o.fl., 2018), sem gaf nýjar vísbendingar um hugsanlegan virkni á sykursýkislækkandi áhrifum TGCT.
Eins og við vitum öll, er PKB/GSK3 leið ein mikilvægasta insúlínboðaleiðin, hefur verið stungið upp á því að miðla insúlínframkölluðum glýkógenmyndun (Zheng o.fl., 2015). HK og PK virka sem hugsanleg lyfjamarkmið í lyfjafræðilegri meðferð sykursýki. Lækkuð HK og PK virkni hefur verið staðfest í IR, á meðan virkjun HK og PK veldur meiri glýkógenforða eða glýkólýsu sem framleiðir fyllri orku með því að nýta blóðsykur (Hu o.fl., 2014). Í þessari rannsókn jók TGCT meðferð samtímis tjáningu fosfórýleraðra próteina á PKB og GSK3, leiddi til marktæks viðsnúnings í starfsemi HK og PK og endurheimti verulega glýkógeninnihaldið í lifur og vöðvum þegar blóðsykurinn lækkaði. Þessar niðurstöður bentu til þess að TGCT virkjaði lykilensím insúlínboðaleiðarinnar og veitti ennfremur vísbendingar um að insúlínnæmi væri raunverulega bætt hjá rottum með sykursýki.
Tafla 2 Áhrif TGCT á insúlínseytingu og kolvetnaumbrotsensím hjá rottum með sykursýki.
Langtíma sykursýki stuðlar einnig að því að efla LDL-C og lækka HDL-C gildi sem valda truflun á blóðfitu (Jayashankar o.fl., 2016), og blóðfituhækkun er viðurkennd vísbending um vanstarfsemi æðaþels og hættu á hjarta- og æðasjúkdómum í sykursýki (Shahwan o.fl., 2019). Í rannsókn okkar lækkaði TGCT (200 mg/kg) magn TC, TG og LDL-C verulega og jók magn HDL-C í rottum með sykursýki, sem er í samræmi við fyrri skýrslur um að Cistanche tubulosa hafi í raun stjórnað lípíðinu. umbrot í músum (Shimoda o.fl., 2009; Xiong o.fl., 2013). Þessar niðurstöður bentu til þess að TGCT gæti verið gagnlegra fyrir sykursjúka einstaklinga með óeðlilegar blóðfitur.
STZ er breiðvirkt sýklalyf sem hefur mikil sértæk eitrunaráhrif á brishólmsfrumur sem stafa af aukningu á ofuroxíðradikala og aftur á móti lélegri blóðsykursstjórnun (Ghosh o.fl., 2015; Swain o.fl., 2020 ). Á sama tíma er oxunarálag einnig mikilvæg orsök IR í fjölmörgum umhverfi (Taniguchi o.fl., 2006). IR og sykursýki tengjast minni virkni andoxunarensíma, eins og SOD og GSH-Px (Styskal o.fl., 2012). Fyrri rannsóknir höfðu gefið til kynna að bæling á oxunarálagi gæti lækkað blóðsykur hjá rottum með sykursýki (Lim o.fl., 2012; Gao o.fl., 2016). Í þessari rannsókn endurheimti meðferð með TGCT marktækt frumuvörn SOD og GSH-Px og minnkaði MDA gildi hjá rottum með sykursýki, sem sýndi sig að TGCT hefur eiginleika í andoxun.
Helstu innihaldsefnin í TGCT eru PhGs og heildarinnihald echinacoside, acteoside og isoacteoside er meira en 661 mg/g. Plöntur sem búa yfir miklum andoxunarefnum, svo sem PhG, reyndust almennt hafa blóðsykurslækkandi áhrif (Morikawa o.fl., 2014; Shimada o.fl., 2017; Spínola o.fl., 2019). Þess vegna veltum við því fyrir okkur að sykursýkisáhrif TGCT gætu að hluta til verið rakin til andoxunarvirkni PhGs. Með hliðsjón af innihaldi echinacosides í TGCT er þörf á frekari rannsóknum til að kanna áhrif echinacosides á IR og sykursýki in vivo og in vitro líkan.
Það er almennt viðurkennt að sykursýki er bólgusjúkdómur. Bólgusýtókín eins og TNF- , IL-6 og IL-1 geta truflað boðferil insúlínviðtaka og leitt enn frekar til IR (Bastard o.fl., 2006). Bólga virðist vera raunhæft lyfjamarkmið í meðhöndlun á IR, og þar með sykursýki (Chen o.fl., 2015). Í núverandi rannsókn gæti TGCT lækkað magn TNF-, IL-6 og IL-1, sem sýndi fram ábólgueyðandi áhrif. Þetta getur verið annar sykursýkislyfjaaðferð TGCT hjá rottum með sykursýki.
Uppsöfnuð sönnunargögn sýna að viðvarandi hár blóðsykur veldur óeðlilegum uppbyggingu og virkni próteina og lípíða í blóðrásinni, sem leiðir til glýsoxunar og peroxunar og stuðlar síðan að myndun bólgueyðandi frumudrepna. Á sama hátt leiða aukin bólgusýtókín til framleiðslu hvarfgjarnra súrefnistegunda og annarra hvarfgjarnra hluta, sem stuðlar að oxunarálagi og oxunarskemmdum. Þetta hefur í för með sér vítahring (Aghadavod o.fl., 2016; Domingueti o.fl., 2016). Þess vegna getur lækkun blóðsykurs og lípíða átt þátt í andoxunar- og bólgueyðandi áhrifum TGCT. Að vissu leyti er nákvæmlega sykursýkislyfjakerfið ekki alveg ljóst og þarfnast frekari rannsókna.
5. Niðurstaða
Í stuttu máli gaf þessi rannsókn til kynna að TGCT væri áhrifaríkt lyf til að meðhöndla blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun í mataræði/STZ-völdum sykursýkisrottum. Ennfremur gætu sykursýkislækkandi áhrifin að miklu leyti tengst andoxunarefnum og bólgueyðandi eiginleikum TGCT. Þessi rannsókn myndi setja fram möguleika á að kynna TGCT í sykursýkismeðferð. Hins vegar er nákvæmur sykursýkislyfjaaðferð TGCT enn óviss og frekari rannsóknir in vivo og in vitro eru nauðsynlegar.
Cistanche var áhrifaríkt lyf til að meðhöndlablóðsykurshækkunogblóðfituhækkun.
