Blóðsykurslækkandi og blóðsykurslækkandi áhrif Blueberry Anthocyanins með AMPK virkjun: In vitro og in vivo rannsóknir Part 2
Mar 27, 2022
Vinsamlegast hafðu sambandoscar.xiao@wecistanche.comfyrir meiri upplýsingar
3. Úrslit
3.1.In vitro rannsóknir
3.1.1. Áhrif My, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á lífvænleika frumna í HepG2 frumum sem örva háan glúkósa
Hár glúkósa veldur oxunarálagi í lifur og stuðlar að frumueiturhrifum [28]. Samkvæmt rannsókn okkar lækkaði örvun með háum glúkósa (HG, 30 mM:35,67±1,90 prósent) í 24 klst verulega frumulífleikann í 35,67 prósent samanborið við venjulegan glúkósa(NG, 5,5 mM:100 prósent) örvaðar frumur. Minnkun á lífvænleika frumna útskýrði að hár glúkósa truflaði lifrarfrumujafnvægi og leiddi til frumudauða sem olli niðurbrotiglúkósaneysla og upptaka og eykur þannig insúlínviðnám. Formeðferð með 5 ug/mL malvidíni (Mv), malvidín-3-glúkósíði (Mv-3-glc), malvídín-3-galaktósíði (Mv-3-ga) og bláberjumantósýanínútdráttur (BAE) bætti glúkósaneyslu og upptöku eftir 24 klst af mikilli glúkósaræktun með því að auka verulega frumulífleikann um 99,04 prósent, 97,76 prósent, 96,47 prósent og 110,72 prósent, í sömu röð. Bláberja anthocyanin útdráttur. {12}} prósent )bættu HepG2 frumuþrótt meira en malvidín og malvidínafleiður. Malvídin (Mv: 99,04 ± 1,49 prósent) gæti verndað frumuna örlítið meira en afleiður hennar. Sykursýkisáhrif malvidín-3-glúkósíðs (Mv-3-glc: 97,76± 1,82 prósent) voru örlítið en ekki marktækt meiri en malvidín-3-galaktósíð (Mv-3-gal:96,47 ±1,71 prósent )(Mynd 1).
Vinsamlegast smelltu hér til að vita meira
3.1.2. Andoxunaráhrif Mvy, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á ROS gildi í HepG2 frumum sem örva háan glúkósa
StyrkleikiflúrljómunROS í HepG2 frumum sem voru meðhöndlaðar með eðlilegum glúkósa var lágt. Eftir örvun með háum glúkósa jókst flúrljómunarstyrkur ROS marktækt (Mynd 2). ROS gildi jókst marktækt 6-falt þegar það var útsett fyrir háum glúkósa í 24 klst (HG:3309,62± 23,82 A U.) í samanburður við venjulegan glúkósa (NG:560,41 ±26,38 A U.). Þetta gaf til kynna að magn hvarfgjarns súrefnis
hafði aukist og oxunarálag á lifur hafði átt sér stað.Flúrljómunstyrkleiki ROS í HepG2 frumum minnkaði eftir formeðferð með 5 ug/mL af Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE í 24 klst (Mynd 2A). Formeðferð með Mv,Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE hamlaði verulega ROS-myndun um 89,48 prósent, 81,54 prósent, 84,57 prósent og 92,38 prósent, í sömu röð (Mynd 2B). anthocyanin þykkni (BAE:769,83±20,41 A U.) lækkaði marktækt magn ROS meira en malvidín og afleiður þess. Malvidin (Mv:849,53± 31,43 A U.) sýndi verulega sterkariandoxunarefniáhrif en afleiður þess. Andoxunaráhrif malvídín-3-galaktósíðs (Mv-3-gal:984,66 ± 18,77 A U.) voru marktækt meiri en malvídín-3-glúkósíðs (Mv-3-glc: 1067,83± 20,85 A U.
3.1.3.Áhrif My, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á umbrot glúkósa í HepG2 frumum og flotefnum sem örva mikið af glúkósa
Gluconeogenesis er örvað með virkjun umritunarþáttar FOXO1, þar sem víxlverkunin við co-activator þess, PGCl , gæti aukið tjáningarstig glúkógenmyndunar (PEPCK og G6Pase) [29]. Blóðsykurslækkandi áhrif Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á PEPCK og PGCl- í HepG2 frumum sem örvuðu mikið af glúkósa voru metin með Western Blot (mynd 3), en á FOXO1 og G6Pase í háglúkósaörvaða HepG2 flotanum voru metin með því að nota ELISA (tafla 1). PEPCK gildi í HepG2 frumum jókst 1.87-falt í sykursýkishópnum samanborið við samanburðarhópinn. Niðurstöður okkar, sem sjá má á mynd 3A, sýndu að BAE, malvídín og afleiður þess höfðu svipaða getu til að minnka uppstjórnun PEPCK tjáningarstigs í HepG2 frumum af völdum glúkósa um 89,02 prósent 87,36 prósent, 92,59 prósent, og 97,84 prósent, í sömu röð. Tjáningarmagn PGC-1 í HepG2 frumum jókst 1.75-falt í hópi sykursjúkra (háan glúkósa) samanborið við samanburðarhópinn (ekki glúkósa), en Mv, Mv-3- glc, Mv-3-gal og BAE sneru þessari breytingu verulega við. Formeðferð með BAE sýndi sterkustu getu til að lækka PGC-1 (93,22 prósent lækkun) í HepG2 frumum af völdum glúkósa meira en malvidín (63,49 prósent lækkun) og afleiður þess mv-3-glc (59,21 prósent) lækkun) og mv-3-gal (55,57 prósent lækkun) sem sýndu svipaða getu til að lækka PGC-1 magn í HepG2 frumum af háum glúkósa völdum (Mynd 3B).
Cistanche getur bætt ónæmi
Tafla1 sýnir að með eðlilegum frumum var tjáning FOXO1 2.12-falt hærri í meðferð með háum glúkósa samanborið við meðferð án glúkósa. FOXO1 ofvirkjun örvuð af háum glúkósaskilyrðum gæti framkallað bólgueyðandi þætti hjá sykursjúkum og stuðlað að fitusöfnun [30]. FOXO1 uppstjórnun við háan glúkósa var hamlað með formeðferð með Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE, þannig að hamlandi áhrifin á FOXO1 í HepG2 frumum af völdum glúkósa voru 89,73 prósent, 89,94 prósent, 72,71 prósent og 76,64 prósent, í sömu röð (tafla 1). Tjáningu G6Pase var mjög uppstýrt þegar það var útsett fyrir háum glúkósa samanborið við venjulegan glúkósahóp en þessi áhrif voru minnkuð af BAE, malvidíni og afleiðum þess. Þessi efnasambönd drógu úr uppstýringu á tjáningarstigi G6Pase í HepG2 frumum af völdum glúkósa. Hindrandi áhrif Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á G6Pase í háglúkósaörvuðum HepG2 floti voru um 74,12 prósent, 85,89 prósent, 72,33 prósent og 77,58 prósent, í sömu röð (T) 1).
ELISA var einnig notað til að meta blóðsykurslækkandi áhrif Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á fosfórun GSK3 á Ser9 óvirku formi í háglúkósaörvuðu HepG2 floti, en Western Blot var notað til að meta fosfórun GS á Ser641 óvirku formi í HepG2 frumum sem örvuðu mikið af glúkósa. Tjáningarstig fosfórunar á GSK3 á Ser9 óvirku formi var hátt í óörvuðum frumum en tjáningarstig fosfórunar GS á Ser641 óvirku formi var lágt. Þegar það var útsett fyrir háum glúkósa var tjáningarstig fosfórunar á GSK3 á Ser9 óvirku formi mjög lækkað niður í 1.3-falt (tafla 1), og tjáningarstig fosfórunar GS á Ser641 óvirku formi var mjög uppstillt í 2.6-falt. Þessi tilraun sýndi að BAE, malvidín og afleiður þess höfðu sömu getu til að auka fosfórun glýkógenólýsuensíms GSK3 á Ser9 óvirku formi í HepG2 frumum af völdum háglúkósa. Formeðferð með Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE jók verulega fosfórun GSK3 á Ser9 óvirku formi um það bil 1.54-falt, 1.78-falt , 2.08-falt og 2.12-falt í sömu röð (tafla 1). Niðurstöðurnar sýna stórkostlega aukningu á GS-virkni. Formeðferð á BAE, malvidíni og afleiðum þess sýndi sömu getu til að auka GS nýmyndun með því að draga úr fosfórun GS á Ser641 óvirku formi í HepG2 frumum af völdum háglúkósa. Formeðferð með Mv,Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE dró marktækt úr p-GS/GS tjáningu í 82,94 prósent, 85,99 prósent, 89,83 prósent og 96,22 prósent í HepG2, í sömu röð (mynd .3C). Að auki sýndi formeðferð á BAE, malvídíni og afleiðum þess getu til að hindra uppstjórnun á GLUT2 tjáningarstigi glúkósaflutningsefnis í HepG2 frumum af mikilli glúkósa völdum í þessari tilraun. Hindrandi áhrif Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á GLUT2 í háglúkósaörvuðum HepG2 floti voru 74,59 prósent, 80,38 prósent, 54,68 prósent og 58,51 prósent T, í sömu röð (1) ).
3.1.4. Áhrif Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á fituefnaskipti í HepG2 frumum sem örva háan glúkósa og flot
Áhrif mikillar fitusöfnunar í lifur af völdum glúkósa á ACC og HMGCR í HepG2 floti voru metin með ELISA (tafla 1), en fosfórun ACCat Ser79 og SREBP-1cin
HepG2 frumur voru metnar með því að nota Western Blot (mynd 4). Formeðferð á HepG2 frumum af völdum háglúkósa með Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE hamlaði ACC virkni með því að auka verulega fosfórun ACC á Ser79 óvirku formi um 1.{{8} }fold,1.87-fold,2.18-fold, og 1.97-fold, í sömu röð (Mynd.4B). Meðferð með háan glúkósa jók marktækt tjáningarstig ACC co-activator, SREBP-1c, í HepG2 frumum. BAE hafði sterkasta getu til að hindra ACC virkni með því að minnka uppstjórnun SREBP-1c tjáningarstig, næstum því sama stig og stjórnin. Malvídin-3-galaktósíð minnkaði einnig marktækt uppstjórnun á SREBP-1c tjáningarstigi í næstum því sama magn og viðmiðunarstig. Malvídín (78,59 prósent) og malvídín-3-glúkósíð (77,53 prósent) sýndu einnig getu til að draga úr tjáningu SREBP-1c í HepG2 frumum af völdum háglúkósa en ekki í sama mæli og malvídín{{33 }}galaktósíð (92,72 prósent) eða BAE (95,58 prósent) (Mynd 4A). Meðferð með háan glúkósa jók marktækt ACC og HMGCR tjáningu í HepG2 floti. Formeðferð með BAE, malvidíni og afleiðum þess leiddi til hindraðrar kólesterólmyndunar í svipuðum mæli með því að hindra uppstjórnun á ACC og HMGCR tjáningargildum.
Mynd 4.Stjórnunaráhrif Mv,Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE á hlutfallslegt próteinmagn fitumyndunar í HepG2 frumum sem örva mikið af glúkósa.(A)SREBP-1c ,(B)p-ACC/ACC fellingarbreyting og (C)Tilboðsleg vestræn flekabönd eru sýnd. Súlur tákna meðalgildi±SD (n=3).*,**,og*** gefa til kynnaP<><0.01,and><0.001 compared="" with="" the="" control="" ng;##="" and="" ###="" indicate=""><0.01 and=""><0.001 compared="" with="" the="" hg="">
Formeðferð með Mv, Mv-3-glc,Mv-3-gal og BAE lækkaði ACC tjáningu um 67,93 prósent, 70,71 prósent, 62,12 prósent, og 68,43 prósent, í sömu röð, og minnkaði HMGCR tjáningu um 68,72 prósent, 68,18 prósent, 77,55 prósent og 72,94 prósent, í sömu röð (tafla 1).
Aftur á móti sýndi formeðferð með BAE sterkasta hæfnina til að hindra niðurstýringu á tjáningu fitusýringsensíms HSL í HepG2 floti af völdum háglúkósameðferðar, síðan malvidín-3-glúkósíð, malvídín og malvídín{{3} }galaktósíð. Formeðferð með Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og BAE jók tjáningargildi HSL um 89,69 prósent, 89,59 prósent, 76,07 prósent, og 68,68 prósent, í sömu röð (tafla 1).
3.1.5.Áhrif My, Mv-3-GLC, Mv-3-gal og BAE á AMPK virkjun í háglúkósaörvuðum HepG2 frumum
AMPK er aðal eftirlitsaðili lifrar og glúkólípíðajafnvægis í öllum líkamanum [31].AMPK er virkjað með því að auka fosfórun Thr172[32]. Fosfórun AMPK á Thr172 virku formi í HepG2 frumum var marktækt minnkuð í háglúkósahópnum samanborið við hópinn sem ekki var glúkósa. BAE sýndi sterkasta getu til að virkja AMPK í HepG2 frumum af völdum háglúkósa samanborið við malvidín og afleiður þess. Formeðferð með Mv, Mv-3-GLC, Mv-3-gal og BAE jók marktækt p-AMPK/AMPK tjáningarstig um það bil 1.32-falt,1.26-falt, 1.39-falt, og 1.91-falt, í sömu röð (Mynd 5A og B) sem benti til þess að þeir hefðu svipaða hæfileika til að virkja AMPK í HepG2 frumum sem valda háum glúkósa.
3.2.In Vivo rannsóknir
3.2.1. Áhrif BAE á líkams- og vefjaþyngd í músum af völdum sykursýki
Inntaka bláberjaantósýaníns í fimm vikur til C57BL/6J músa hafði verulega (P<0.0001)effect on="" the="" body="" weight,="" since="" the="" control="" had="" a="" significant="" high="" body="" weight="" compared="" to="" the="" diabetic="" model="" group,="" while="" bae="" treatments="" alleviated="" the="" bodyweight="" decrease="" of="" diabetic="" mice="" (fig.="" 6a).="" in="" blueberry="" anthocyanin="" extracts="" -low="" concentration="" (bae-l)and="" blueberry="" anthocyanin="" ex-tracts-high="" concentration="" (bae-h)="" treatments,="" daily="" administration="" of="" bae="" had="" no="" significant="" differences="" on="" body="" weight="" indicating="" its="" dose-independent="" manner="" (p="">0.05). Ennfremur sýnir tafla 2 þyngd valinna innri líffæra músa. Niðurstöður sýndu að þyngd var aðeins svipuð og viðmiðunarhópurinn. Hins vegar, samanborið við samanburðarhópinn, var þyngd lifur, milta og hóstarkirtli marktækt mismunandi (P<0.05)in bae-l.="" moreover,="" there="" was="" no="" statistical="" significance="" in="" the="" liver="" length="" and="" body="" width="" among="" treatments="" (p="">0.05).
3.2.2. Áhrif BAE á blóðsykur og glúkósa í þvagi í músum af völdum sykursýki
Það var verulegt (P<0.0001)elevation in="" fasting="" blood="" glucose="" in="" model="" mice="" as="" compared="" to="" the="" control="" group,="" implying="" that="" the="" diabetic="" model="" of="" mice="" was="" successful.="" however,="" supplementation="" of="" bae="" to="" model="" mice,="" bae-l="" and="" bae-h="" for5="" weeks="" resulted="" in="" significant="" recovery="" of="" fasting="" blood="" glucose="" levels(fig.="" 6b)="" and="" ameliorated="" glucose="" tolerance="" (fig.6c)="" in="" diabetic="" mice.="" the="" control="">
Mynd 5. Virkjunaráhrif BAE á umbrot glúkólípíða miðja AMPK boðleiðina in vitro og in vivo. (A)p-AMPK/AMPK falt breyting með Mv, Mv-3-GLC, Mv-3-gal , og BAE í háglúkósaörvuðum HepG2 frumum og (B) dæmigerð Western blot-bönd þeirra eru sýnd. (C)p-AMPK/AMPK faltbreytingar vegna BAE-Land BAE-H í músum af völdum sykursýki og (D) sýndar eru dæmigerðar Western blot-bönd þeirra. Súlur tákna meðalgildi±SD(n=3 fyrir frumur í endurtekinni tilraun, n=4-6 fyrir mýs).*,**,og*** gefa til kynna P<><0.01,and><0.001 compared="" with="" the="" group/the="" control;#,##,and###="" indicate=""><><0.01,and <="" 0.001="" compared="" with="" the="" model="" hg="" group/the="" induced="" diabetic="" mice.="" maintained="" a="" constant="" glucose="" level="" during="" that="" period.="" compared="" with="" the="" control,="" the="" bae-l="" group="" notably="" reduced="" the="" blood="" glucose="" level="" in="" diabetic="" mice="" from="" week="" 2.="" similarly,="" high-dose="" bae="" obviously="" reduced="" the="" blood="" glucose="" levels="" from="" week="" 2="" with="" continued="" gradual="" reduction="" until="" week="" 4.="" bae="" at="" two="" doses(100="" mg/kg="" and="" 400="" mg/kg="" per="" day)significantly="" decreased="" blood="" glucose="" levels="" in="" diabetic="" mice="" at="" 30,="" 60,="" and="" 120="" min="" after="" glucose="" load="" during="" glucose="" tolerance="" test.="" these="" results="" indicate="" that="" dietary="" inclusion="" of="" bae="" for="" 5="" weeks="" can="" effectively="" regulate="" glucose="" metabolism="" in="" diabetic="" mice.="" the="" diabetic="" model="" of="" mice="" drank="" more="" water="" and="" produced="" more="" urine="" than="" the="" control="" group.="" the="" supplementation="" of="" bae="" to="" the="" model="" group="" could="" lessen="" the="" symptoms="" of="" polydipsia="" and="" polyuria="" in="" diabetic="" mice.="" moreover,="" bae-l="" and="" bae-h="" treatments="" significantly="" decreased="" urine="" glucose=""><0.01 and=""><0.001, respectively,="" fig.7d).="" the="" levels="" of="" excreted="" urine="" showed="" significant="" increases="" in="" the="" model="" group="" compared="" to="" control,="" indicating="" that="" the="" former="" group="" of="" mice="" suffered="" from="">
3.2.3. Áhrif BAE á þríglýseríð, heildarkólesteról og insúlínmagn í sermi af völdum sykursýkismúsum
Gjöf BAE (100 mg/kg og 400 mg/kg á dag) hafði marktæk áhrif á lípíðmagn í músum af völdum sykursýki. Heildarkólesteról og þríglýseríð hækkuðu marktækt (P<0.01)in model="" mice="" in="" comparison="" to="" the="" control(fig.7a="" and="" b).="" bae-treatment="" only="" induced="" a="" slight="" decrease="" in="" blood="" lipid="" indexes="" but="" there="" was="" no="" significant="" difference="" with="" the="" model="" diabetic="" mice(p="">0.05). Meðferð BAE-H leiddi til marktækrar lækkunar heildar kólesteróls og þríglýseríða (P<0.01)and the="" levels="" of="" these="" parameters="" were="" similar="" to="" the="" control="" (p="">0.05). Á hinn bóginn sýnir mynd 7C insúlínmagn í sermi músa eftir fimm vikna meðferð. BAE-L og BAE-H lækkuðu marktækt (P<0.001) the="" insulin="" levels="" in="" serum="" of="" induced="" diabetic="" mice.="" these="" results="" indicate="" that="" the="" inclusion="" of="" dietary="" bae="" for="" 5="" weeks="" can="" effectively="" ameliorate="" insulin="" resistance="" in="" diabetic="">
3.2.4. Áhrif BAE á andoxunarefni og glúkósaflutningsmagn í lifur í músum af völdum sykursýki
Í þessari rannsókn voru áhrif BAE á andoxunarensímvirkni SOD og GSH-PX í sykursýkismúsum metin til að skýra hvort blóðfitulækkandi og blóðsykurslækkandi áhrif BAE tengdust vernd andoxunarvarnakerfisins. Eins og sýnt er á mynd 8A og B hafði líkanhópurinn marktæka lækkun á virkni SOD og GSH-PX samanborið við samanburðarhópinn (P<0.05). after="" bae="" treatment,="" the="" activity="" of="" sod="" was="" significantly="" increased="" (p=""><0.01)in bae-l="" and="" bae-h="" when="" compared="" with="" the="" model="" group.="" moreover,="" the="" gsh-px="" activity="" of="" the="" bae-h="" group(400="" mg/kg="" bae)was="" significantly="" higher="" than="" the="" model=""><0.05). glut2="" is="" the="" main="" glucose="" transporter="" in="" the="" plasma="" membranes="" of="" hepatocytes,="">
Mynd 6. Áhrif BAE á líkamsþyngd og blóðsykursgildi í músum af völdum sykursýki. (A) Líkamsþyngd og (B) Blóðsykursbreyting músa úr viðmiðunar-, líkaninu, BAE-L og BAE-H hópunum við magaslöngu í fimm vikur, og (C)Glúkósaþol músa úr viðmiðunarlíkaninu, BAE- L, og BAE-H hópar eftir magaslöngu í fimm vikur. Súlur tákna meðalgildi±SD (n=6).*,** og *** gefa til kynna P<><0.01, and=""><0.001 compared="" with="" the="" ng="" group/the="" control;#,##,and="" ###="" indicate=""><><0.01,and><0.001 compared="" with="" the="" model="" hg="" group/the="" induced="" diabetic="" mice.="" the="" effects="" of="" bae="" on="" glucose="" glut2="" content="" in="" induced="" diabetic="" mice="" were="" studied="" (fig.8c).="" glut2="" levels="" in="" mice="" liver="" were="" not="" statistically="" affected="" by="" bae="" treatments="" but="" were="" significantly="" higher="" in="" diabetic="" mice="" treated="" with="" bae,="" compared="" to="" the="" model="">
3.2.5. Áhrif BAE á AMPK virkjun í sykursýkismúsum af völdum
AMPK-boðaleið er einn af meginþáttum frumuorkujafnvægis, sem hægt er að viðurkenna sem lykilmarkmið í forvörnum og meðferð offitu og sykursýki. Áhrif BAE á
AMPK boðleiðin í músum af völdum sykursýki er sýnd á mynd 5C og D. Magn AMPK lækkaði verulega (P<0.001)in the="" model="" group="" in="" comparison="" with="" the="" control.="" groups="" with="" bae="" showed="" the="" strongest="" ability="" to="" activate="" ampk="" compared="" to="" the="" control.="" moreover,="" bae-l="" and="" bae-h="" showed="" similar="" ability="" to="" activate="" ampk="" in="" samples="" from="" diabetic="" mice,="" and="" also="" significantly="" increased="" p-ampk/ampk="" expression="" levels="" by="" about="" 0.54-fold="" and="" 0.45-fold,="" respectively="">
4. Umræður
Sykursýki er langvinn efnaskiptasjúkdómur sem hefur áhrif á stóran hluta íbúa um allan heim. Bláber eru rík af anthocyanínum sem hafa verið rannsökuð fyrir fjölmörg jákvæð áhrif þeirra á heilsu manna. Anthocyanín geta bætt truflun á efnaskiptum fitu og glúkósa, sem eru grundvallaráhættuþættir offitu og sykursýki. Markmið þessarar rannsóknar voru að kanna blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif bláberjaþykkni sem er ríkt af anthocyanínum á HepG2 frumur og af völdum sykursýkismúsum, auk þess að kanna undirliggjandi aðferðirnar. Inntaka BAE in vivo í 5 vikur dró verulega úr blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun hjá músum með sykursýki. Í þessari rannsókn komumst við að því að gjöf BAE, bæði 100 mg/kg og 400 mg/kg á dag gæti dregið úr líkamsþyngdartapi. Hins vegar lækkuðu BAE meðferðir marktækt þríglýseríð og kólesteról í sermi hjá sykursjúkum músum. Tilvist kólesteróllækkandi efnasambanda sem geta virkað sem hemlar á sumum ensímum eins og hýdroxýl metýl glútarýl CoA redúktasa, sem tekur þátt í myndun kólesteróls eða dregur úr frásogi kólesteróls í þörmum, gæti verið þáttur sem má rekja til kólesteróllækkunarinnar. eign BAE [33]. Ennfremur leiddi BAE til marktækt lækkaðs hámarks glúkósa innan 2 klst., sem er stutt af öðrum höfundum [34-36] sem greindu frá hugsanlegum sykursýkislækkandi áhrifum anthocyanins. Of mikið oxunarálag í líkamsfrumum gegnir mikilvægu hlutverki í þróun sykursýki og viðvarandi blóðsykurshækkun sykursýki gæti einnig leitt til aukinnar oxunarálags í líkamanum [37], þess vegna gæti hömlun eða minnkun oxunarálags verið viðbótarmeðferð til að koma í veg fyrir eða seinka tíðni sykursýki. Greint hefur verið frá því að anthocyanín gætu hugsanlega haft andoxunargetu við mikla oxunarálag eins og offitu og kólesterólhækkun [38]. Niðurstöður okkar sýndu marktækt aukna virkni SOD stiga í BAE-H meðferð. Þessar upplýsingar bentu til þess að BAE gæti bælt streitu oxunarefna með því að bæta virkni SOD, sem mætti rekja til blóðsykurslækkunar og blóðfitulækkandi áhrifa BAE. Svipaðar niðurstöður um jákvæð áhrif BAE á andoxunarvörn voru einnig staðfest í lifur og hippocampus vefjum, sem kom í ljós með styrktum andoxunarensímvirkni þar á meðal SOD [39]. Anthocyanins gætu bætt truflun á efnaskiptum fitu og glúkósa, sem eru mikilvægir áhættuþættir fyrir
sykursýki og offita. Einn af mikilvægum þáttum fyrir frumuorkujafnvægi er AMPK boðleiðin, sem hægt er að viðurkenna sem lykilmarkmið í forvörnum/meðhöndlun sykursýki og offitu [40]. Brisfrumur í lifur verða fyrir áhrifum af glýoxíðstreitu vegna þess að lítið magn af ROS afeitrandi ensímum er þar [41]. Glýoxíðstreita í lifur er mikilvægur þáttur í framgangi sykursýki þar sem það dregur úr insúlínörvun insúlínboðapróteina og veldur insúlínviðnámi[41]. Aukningin á ROS eftir 24 klst af mikilli glúkósaörvun sýndi að hár glúkósa truflaði lifrarfrumujafnvægi og leiddi til frumudauða. Minnkun á lífvænleika frumna eftir 24 klst af mikilli glúkósaörvun leiddi til insúlínviðnáms og olli truflun á neyslu og upptöku glúkósa. Formeðferð með BAE, malvidíni og afleiðum þess dró úr myndun ROS og bætti lífvænleika frumna í þessari rannsókn.BAE sýndi sterkasta andoxunarhæfni til að halda -frumum frá eiturverkunum á lifur af völdum glýoxíðstreitu í lifur, fylgt eftir með malvídíni, malvídín-3-galaktósíði, og malvídín-3-glúkósíð. Hýdroxýleringar- og metoxýlunarmynstur malvídíns-3-glúkósíðs og malvídíns-3-galaktósíðs á 3,5-dímetoxýsetum í B-hringnum veitti þessum andoxunareiginleikum [42]. Formeðferð með BAE leiddi til mestrar getu til að vernda lifrarfrumur gegn eiturverkunum á lifur af völdum oxunarálags. Hins vegar sýndi malvídin einnig getu til að hindra ROS-myndun. Þess vegna hefur bláberja anthocyanin þykkni tilhneigingu til að þróast sem næringarefni gegn sykursýki til að hindra insúlínviðnám af völdum oxunarálags í lifur til að koma í veg fyrir sykursýki. Mynd 9 sýnir fyrirhugaðar aðferðir til að bæta blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun með AMPK virkjun með BAE. AMPK er sameind sem hefur virkni í lifur, beinagrindarvöðvavef, fituvef og undirstúku. Venjulega virkjað af næringarefnaskorti, endurheimtir það orkujafnvægið á tvo megin vegu í gegnum flókið kerfi af virkjuðum sameindum niðurstreymis [43]. Í fyrsta lagi örvar AMPK glúkósaupptöku og lípíðoxun til að auka framleiðslu á ATP og í öðru lagi slekkur það á orkunotkunarferlum. AMPK tekur þátt í ferlum sem stjórna fitu- og glúkósaefnaskiptum. Uppstjórnun AMPK með lækkun á hvarfgjörnum súrefnistegundum með BAE gæti leitt til jákvæðra áhrifa á að draga úr blóðsykri og blóðfituhækkun hjá sykursjúkum. Þegar AMPKvirkni eykst hamlar hún mörgum þáttum sem taka þátt í nýmyndun glúkósa þar á meðal PGCl , FOXO1, PEPCK, G6Pase og GS sem aftur lækkar nýmyndun glúkósa [43,44]. Samkvæmt þessari rannsókn hamlar það virkni GLUT2 sem dregur úr flutningi glúkósa. Það eykur einnig virkni GSK3 sem tekur þátt í glýkógenlýsu og eykur þar með glýkógenlýsuvirkni frumunnar. Allt þetta leiðir til lækkunar á blóðsykri. AMPK hamlar einnig þáttum sem gegna hlutverki í lípíðmyndun þar á meðal HMGCR sem tekur þátt í myndun steróla og ísóprenoids, SREBP-1 sem stuðlar að fitusýrumyndun og ACC sem er virkt í fitumyndun og að auki stuðlar AMPK að virkni HSL sem tekur þátt í fitusundrun [43,45]. Þessi starfsemi getur síðan leitt til lækkunar á blóðfitu. BAE, malvídín og afleiður þess sýndu sterka getu sína til að auka AMPK virkjun með fosfórýleringu á Thrl172 virku formi í insúlínóháðum ferli. Þess vegna er hægt að líta á BAE, malvidín og afleiður þess sem hugsanleg næringarefni til að bæta insúlínnæmi í lifrarfrumum og auka glúkósajafnvægi.
Gluconeogenesis hvetur endanlega losun glúkósa í blóðrásina, þar sem oftjáning hans í lifur myndi leiða til insúlínviðnáms og hækkunar á framleiðslu glúkósa í lifur [46]. Insúlín hamlar beint glúkógenmyndun og virkjana þess og dregur þannig úr magni blóðsykurs í blóði [29]. Niðurstöður okkar sýndu að BAE, malvídín og afleiður þess draga úr myndun glúkósa í lifur með því að bæla glúkógenmyndun (PEPCK og G6Pase) og samvirkja þess (PGC-1 og FOXO1) í insúlínóháðum ferli. Þess vegna gætu BAE, malvídín og afleiður þess bætt insúlínnæmi og svörun við hækkunum á blóðsykri eftir máltíð og hindrað þannig glúkógenmyndun og virkjana þess. Óþarfi glúkósa sem er ekki nýtt sem tafarlaust eldsneyti fyrir orku er upphaflega geymt sem glýkógen [47]. Glýkógensyntasi (GS) myndar glýkógen úr glúkósa, en glýkógensyntasa kínasi 3 (GSK3p) hamlar virkni GS með því að breyta glýkógeni í glúkósa. Insúlín hamlar glýkógenólýsu með því að óvirkja GSK3, sem eykur þar af leiðandi
glýkógenmyndun með því að auka GS virkni í lifrarfrumum[48]. Í þessari rannsókn gætu BAE, malvídín og afleiður þess bætt insúlínnæmi með því að virka sem áhrifaríkur GSK3 hemill og GS örvandi í insúlínóháðum ferli.
GLUT2 er tvíátta flutningsefni sem tekur upp glúkósa í frásogsfasa (glýkólýsu) og losar hann út í blóðrásina við glúkógenmyndun og glýkógenólýsu [49]. Þegar utanfrumustyrkur glúkósa eykst fer meiri glúkósa inn í brisfrumu í gegnum lágsækni glúkósaflutningstækisins GLUT2 [50]. GLUT2 oftjáning í lifur dregur úr glúkósaörvaðri insúlínseytingu og eykur hættuna á fastandi blóðsykurshækkun og T2DM [4]. Malvidin ásamt sykri í bláberjaþykkni kom í veg fyrir skyndilega hækkun glúkósa með því að minnka GLUT2 tjáningarstig. Sykur sem inniheldur flavonoid gæti dregið úr glúkósaflutningi og frásog með því að minnka frásogshraðann, en anthocyanin sjálft er ekki borið burt af GLUT2 [51]. Hið fyrra væri gagnlegt til að draga úr skyndilegri aukningu glúkósa. Anthocyanin og GLUT2 samsetning átti sér stað í gegnum vatnssækna hluta, þ.e. 3-glúkósýlhlutann og B hringinn fyrir einglúkósíðið, 5-glúkósýlhlutinn, A hringinn fyrir glúkósíðið og A eða B hringinn fyrir aglýkóna [52]. Í þessari rannsókn lækkuðu BAE, malvídín og afleiður þess oftjáningu GLUT2 í lifrarfrumum og héldu þannig jafnvægi á glúkósaörvaðri insúlínseytingu í brisfrumum og minnkaði einnig glúkósaflutning og frásog í blóðrásina. .
Oftjáning fitumyndunar, það er ACC, SREBP-1c, HMGCR og HSL hjá offitusjúklingum, hefur verið sterklega tengd sykursýki og fitulifursjúkdómum [53]. Formeðferðir með BAE, malvidíni og afleiðum þess gætu hafa gert ACC óvirkt með því að valda aukningu á fosfórýleringu á ACC á Ser79 óvirku formi. . Þessar formeðferðir hamluðu einnig nýmyndun fitusýra með því að draga úr tjáningu á ACC cO-virkja, SREBP-1c. 3-Hýdroxý-3-metýlglútarýl kóensím A redúktasi (HMGCR) gegnir mikilvægu hlutverki í myndun kólesteróls [55]. Hormónaviðkvæmur lípasi (HSL) miðlar losun frjálsra fitusýra í æðakerfi [56]. BAE, malvídín og afleiður þess minnkuðu á áhrifaríkan hátt kólesterólmyndun og frí fitusýruflæði inn í æðakerfi með því að lækka marktækt HMGCR og HSL tjáningu í lifrarfrumum. Einnig var greint frá því að stór skammtur af BAE gæti bælt uppsöfnun seramíðs, diacylglycerols, triacylglycerols og kólesteróls í sermi og þannig komið í veg fyrir truflun á efnaskiptum fituefna [57]. Þess vegna gegnir BAE hlutverki sem blóðfitulækkandi næringarefni sem dregur á áhrifaríkan hátt úr nýmyndun fitusýra og kólesteróls og eykur fitusýruoxun og stuðlar þar að leiðandi að lípíðajafnvægi. Samkvæmt niðurstöðum okkar hafa BAE, malvidín og afleiður þess hugsanleg blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif til að meðhöndla sykursýki með AMPK virkjun sem eykur insúlínnæmi með því að hindra glúkógenmyndun og fitumyndun í lifrarkrabbameinsfrumum manna og með því að draga úr flutningi glúkósa inn í blóðrásina.
5. Niðurstaða
Blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif anthocyanin þykkni úr rabbiteye bláberjaræktun in vitro og in vivo hafa verið rannsökuð í þessari rannsókn. Niðurstöðurnar sýndu að oxunarálag í lifur jókst marktækt vegna hás glúkósa, sem jók ROS allt að 6-falt og minnkaði lífvænleika frumna. Formeðferð með Mv, Mv-3-glc, Mv-3-gal og bláberja anthocyanin þykkni (BAE) dró verulega úr þessum skaða með því að lækka ROS kynslóðina og auka lífvænleika frumna. Þessar niðurstöður sýna að BAE, malvídín og afleiður þess hafa öfluga andoxunargetu til að vernda lifrarfrumur gegn oxunarhnignun með því að draga úr myndun ROS og auka lífvænleika frumna. Þess vegna gætu þessar formeðferðir á áhrifaríkan hátt dregið úr myndun fitusýru og kólesteróls og dregið úr hringrás óbundinna fitusýra í æðum. BAE gæti dregið verulega úr blóðsykri og blóðfituhækkun í músum af völdum sykursýki með marktækri lækkun á líkamsþyngdartapi, glúkósa og lípíðmagni. Andoxunarvirkni SOD og AMPK virkjunar var sérstaklega bætt með BAE. BAE, malvídín og afleiður þess reyndust vera áhrifarík næringarefni gegn sykursýki með blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi virkni. Þeir virkjaðu á áhrifaríkan hátt AMPK sem aftur á móti bætti insúlínnæmi og verndaði líkamann gegn oftjáningu á glúkógenmyndun og fitumyndun; því gætu þeir í raun viðhaldið glúkólípíðjafnvægi og komið í veg fyrir sykursýki. Þessar niðurstöður benda til þess að BAE gæti haft mikil sykursýkislækkandi áhrif in vitro og in vivo, og anthósýanín, sem er eitt af aðal innihaldsefnum bláberjaþykknisins, gegnir mikilvægu hlutverki við blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi virkni.
Þessi grein er dregin út af https://doi.org/10.1016/j.redox.2021.102100 Móttekin 21. júlí 2021; Móttekið í endurskoðuðu formi 9. ágúst 2021; Samþykkt 11. ágúst 2021
