Að meta andoxunarefni, hvítun og öldrunareiginleika hrísgrjónapróteina vatnsrofsefna

Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Hui-Ju Chen 1,2, Fan-Jhen Dai 2, Cheng-You Chen 3, Siao-Ling Fan 2, Ji-Hong Zheng 4, Yu-Chun Huang 2, Chi-Fai Chau 1, Yung-Sheng Lin 3, 4,5,* og Chin-Shuh Chen 1,*

Ágrip:Plöntuafleidd prótein vatnsrof hafa hugsanlega notkun í næringu. Rice proteinhydrolysates (RPH), frábær uppspretta próteina, hafa vakið athygli fyrir þróun snyrtivara. Hins vegar hafa fáar rannsóknir greint frá hugsanlegri beitingu RPH ógreiningar og þessi rannsókn skoðaði þærandoxunarefnivirkni og hamlandi virkni húðeyðandi ensíma. Niðurstöðurnar gáfu til kynna að heildarþéttni fenóls og flavonoids væri 2.06 ± 0,13 mg gallínsýrujafngildi/g RPH og 25,96 ± 0,52 µg quercetin jafngildi/g RPH, í sömu röð. RPH sýndu skammtaháða virkni til að hreinsa sindurefna úr 1,1-dífenýl-2-píkrýlhýdrasýli [hálfhámarks hamlandi styrkur (IC50)=42,58 ± 2,1 mg/g RPH] og 2 ,20-asínó-bis (3-etýlbensóþíasólín-6-súlfónsýra) (IC50=2.11 ± 0.88 mg/g RPH), skammtaháð minnkunargeta (6.95 ± 1.40) mg C-vítamínjafngildi/g RPH) og frásogsgetu súrefnisróteinda (473 µmól Trolox jafngildi/g RPH). Styrkur RPH lausnarinnar sem þarf til að ná 50 prósenta hömlun á hýalúrónídasa ogtýrósínasavirkni var ákveðin 8,91 og 107,6 mg/ml, í sömu röð. Þessi rannsókn sýndi fram á að RPHs hafaandoxunarefni, andhyaluronidasa og antityrosinasa starfsemi fyrir framtíðar snyrtivörur.

Leitarorð:hrísgrjón prótein vatnsrof;andoxunarefni; hýalúrónídasa;týrósínasa; Snyrtivörur

cistanchehvítunáhrifá húðinni tilandoxun

1. Inngangur

Útsetning fyrir útfjólublári geislun er ábyrg fyrir ljósöldrun (eða ytri öldrun); Andstæðar, hvarfgjarnar súrefnistegundir sem framleiddar eru í umbrotum frumna og rýrnun líffræðilegrar starfsemi eru ábyrg fyrir innri öldrun [1,2]. Unnin matvæli innihalda oft náttúrulegandoxunarefnieins og katekín, askorbínsýra, tókóferól, rósmarínsýra og fenólseyði úr ýmsum plöntum. Rannsóknir á náttúrulegum andoxunarefnum taka nú tillit til óhefðbundinna uppruna. Náttúrulega fenginandoxunarefnieru eftirsóknarverðari en efnafræðilega framleiddandoxunarefniþar sem greint hefur verið frá því að sum tilbúin andoxunarefni séu krabbameinsvaldandi [3]. Hrísgrjón (Oryza sativa) er aðal mataræði fyrir fólk um allan heim, sérstaklega þá sem búa í Asíu. Árleg hrísgrjónaframleiðsla heimsins er um það bil 741 milljón tonn [4]. Í Asíulöndum eru hrísgrjón að sögn uppspretta 75% af orkunotkun yfir 2 milljarða manna [5]. Mikil hrísgrjónaframleiðsla skilar sér í samsvarandi magni af aukaafurðum. Afgangsafurðin úr hrísgrjónaframleiðslunni inniheldur meirihluta prótein kornsins (~60–85 prósent) en er hent eða notuð til að fóðra dýr [6-8]. Peptíð fengin úr ýmsum vatnsrofsefnum próteina virka sem mögulegandoxunarefni[9]. Náttúruleg og óeitruð andoxunarefni geta því hugsanlega verið unnin úr matarpróteinvatnsrofi. Fjölmargir fræðimenn hafa notað lípíðrík líkön og greint frá vatnsrofsefnum próteina sem og mjólkur-, zein- og sojapróteinpeptíð sem hafa mikilvæga andoxunareiginleika, þar á meðal hreinsun sindurefna, hömlun á mat og in vitro lípíðperoxun og klómyndun umbreytingarmálma [10– 12].

Hýalúrónsýra (HA) hjálpar til við að endurnýja húðina vegna þess að hún eykur seigju, inniheldur raka og gerir utanfrumuvökva minna gegndræpi. Vegna framúrskarandi vatnsheldni eykur HA ungleika, raka og sléttleika húðarinnar og dregur úr hrukkum [13,14]. Því miður minnkar magn HA í húðinni náttúrulega með aldrinum. Hýalúrónídasi er ensím sem eyðileggur HA, sem veldur tapi á styrkleika, sveigjanleika og raka húðarinnar, sem aftur leiðir til öldrunar húðarinnar. Þess vegna er hægt að meðhöndla hrukkur með því að hindra hýalúrónídasa og viðhalda HA innihaldi húðarinnar [15,16]. Ensím sem framleiðir melaníntýrósínasastuðlar mikilvægt að hraðatakmarkandi skrefi ferlisins þar sem melanín er framleitt. Þess vegna eru litarefnissjúkdómar almennt meðhöndlaðir og húðbjartari er náð með því að hamla eða minnkatýrósínasavirkni [17,18].

Í nokkrum rannsóknum hefur komið í ljós að kornpróteinvatnsrof og peptíðin sem hægt er að fá úr þeim hafa andoxunarefni, blóðþrýstingslækkandi og æxlishemjandi áhrif [19,20]. Jákvæð framlag til heilsu manna af peptíðum og próteinum sem koma frá matvælum eru smám saman viðurkennd [21]. Neytendur krefjast þess í auknum mæli að snyrti- og heilbrigðisiðnaðurinn noti náttúruleg lífvirk efnasambönd. Rice proteinhydrolysates (RPH) hafa vakið athygli sem frábær uppspretta próteina. Hins vegar hafa fáar rannsóknir greint frá lýsingu og virknigreiningu á RPH. Þess vegna var þessi rannsókn metin andoxunarvirkni og hýalúrónídasa ogtýrósínasa-hamlandi virkni RPHs.

2. Niðurstöður og umræður

2.1. Heildarfenólstyrkur (TPC) og heildarflavonoidinnihald (TFC)

Staðallinn í TPC prófinu var gallsýra í nokkrum styrkjum. Hærri gleypni gaf til kynna hærri TPC. TPC RPH sýnanna var fengin með því að setja ljósgleypnigildi RPH sýnanna inn í gallsýrukvörðunarferilinn. Með því að reikna RPH styrkinn á móti fenólstyrknum (Mynd 1a), fékkst meðaltal TPC upp á 2.06 ± 0.13 mg GAE/g RPH. TFC upp á 25,96 ± 0,52 µg QE/gRPHs fékkst með því að fylgja svipaðri aðferð (Mynd 1b). Mynd 1c tengir frekar TPC og TFC af RPH sýnunum. Það sýnir að sambandið milli TPC og TFC er hægt að tjá sem y=0.0121x plús 0,0659, þar sem x og y eru TPC og TFC, í sömu röð.

TPC RPHs innihélt styrk fenólamínósýra og fenólsambönd peptíðanna. Samspil próteina og fenólefnasambanda felur almennt í sér samgild og ósamgild tengsl. Fenólsambönd losna við ensímvatnsrof. Sérstök ensím geta verið mest fær um að eyða prótein-pólýfenólfléttum; þetta leiðir til þess að meiri fjöldi fenólefnasambanda og peptíða með fenólhópum, eins og týrósíni, losnar [22]. Greint hefur verið frá sterkri fylgni á milli heildarfjölfenólinnihalds korna og líffræðilegrar virkni þeirra. Vel þekkt er að pólýfenól hafa sterka andoxunarvirkni [23]. Þrátt fyrir að finnast í minna magni, gætu terpenar [24] eða seskvíterpenar [25] í hrísgrjónum einnig stuðlað að andoxunarvirkni.

2.2. Virkni andoxunarefna

2.2.1. Róttækar hreinsunarvirkni DPPH Free Radicals

Mynd 2 sýnir DPPH hreinsivirkni sindurefna í RPH lausninni. Í ljós kom að meiri styrkur lausnarinnar leiddi til meiri virkni. Hámarks hamlandi styrkur (IC50), sem er útdráttarstyrkurinn sem hægt er að hreinsa helming allra DPPH sindurefna fyrir, var 42,58 ± 2,1 mg/ml af hrísgrjónapeptíðum.

2.2.2. Hreinsunarvirkni ABTS sindurefna

ABTS hreinsivirkni RPHs, sem sýnd er á mynd 3, var meiri þegar meiri styrkur útdráttar var notaður. IC50 var 2,11 ± 0,88 mg/mL af hrísgrjónapeptíðum. Þessi niðurstaða gaf til kynna að RPHs hefðu sterka ABTS virkni til að hreinsa sindurefna. Amínósýrurnar sem innihalda brennistein, þar á meðal Met og Cys, og vatnsfælnar amínósýrur, þar á meðal Ala, Val, Ile, Leu, Met, Cys, Tyr, Phe, Try og Pro, gætu verið mikilvægir þættir með tilliti til ABTS sindurefna. hreinsunarvirkni.

Í þessari rannsókn var IC50 gildi ABTS hreinsiefnishreinsunarvirkni lægra en DPPH virkni sindurefnahreinsunar, sem er í samræmi við niðurstöður Jatropha curcas L. fræskeljar og kjarna [28] og jujube ávaxtafræja og hýði [29]. Þessi niðurstaða samsvarar einnig skýrslunni um vatnsrof úr hrísgrjónaklípróteinum með 43,98–66,25 µmól Trolox jafngildi/g sýni og 403,28–430,12 µmól Trolox jafngildi/g sýnis fyrir DPPH sindurefnahreinsandi virkni og ABTS sindurefnahreinsandi virkni [27], í sömu röð.

Ein hugsanleg ástæða er munurinn á leysni milli DPPH sindurefna (olíuleysanlegt) og ABTS sindurefna (olía/vatnsleysanlegt) [30,31]. Andoxunarmöguleiki hrísgrjónaklíðpróteina vatnsrofsefna var undir áhrifum af mólþyngdarsniði þess, amínósýrusamsetningu og vatnsfælni [32].

2.2.3. Minnkunargeta

Niðurstöður mælinga á minnkunargetu fyrir RPHs eru sýndar á mynd 4. Minnkunargetan jókst með styrk RPHs. Lækkunargetan var 6,95 ± 1,40 mg VCE/g RPH, sem gefur til kynna að RPHs séu áhrifarík andoxunarefni.

2.2.4. Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC)

ORAC prófið hefur kosti umfram aðrar aðferðir til að ákvarða andoxunarvirkni, þar á meðal hvarfefnin sem notuð eru eru peroxýrótefni með svipaðan hvarfmáta og afoxunarmöguleika og lífeðlisfræðileg oxunarefni; heildarhleðslan og róteininguna semandoxunarefniviðbrögð líkjast þeim í mannslíkamanum [33]. ORAC-aðferðin hefur einnig líffræðilega þýðingu fyrir virkni andoxunarefna í mannslíkamanum. Mynd 5 sýnir niðurstöður ORAC greiningar á RPH og Trolox staðlinum í ýmsum styrkjum. ORAC var dregið úr aðhvarfsjöfnu kvörðunarferilsins sem tengir nettó AUC við Trolox styrkinn. Niðurstöðurnar gáfu til kynna að RPH hefði ORAC upp á 473 µmól TE/g RPH.

Andoxunarpeptíð eða amínósýrur er hægt að fá með ensímpróteinvatnsrofi, sem leiðir til mjög virkrar gegn oxunarefnum [34]. Klómyndun málmjóna, hömlun á lípíðperoxun og hreinsun sindurefna á líffræðilega virkum peptíðum eru ábyrgir fyrir andoxunarvirkni þeirra. Hægt er að slökkva á sindurefnum og hægt er að slökkva á tjáningu próteina og ensíma sem draga úr oxandi streitu og stjórna þeim með andoxunarpeptíðum. Andoxunarvirkni próteinvatnsrofs og peptíða er að sögn háð röð amínósýra og stærð peptíðsins, sem hafa áhrif á vatnsrofsaðstæður, próteingjafa og gerð próteasa [35]. Samkvæmt Adebiyi o.fl. [36] er hægt að brjóta stærsta meltanlega hrísgrjónaklíðpróteinið í smærri hluta með subtilisíni, sem leiðir til meiri próteinafraksturs og innihalds. TPC og andoxunarvirkni vatnsrofs getur haft áhrif á sérhæfni ensíma. Þess vegna gæti andoxunarvirkni peptíðs verið undir áhrifum af eiginleikum próteingjafans, sérhæfni ensímsins og magni vatnsrofs [37].

Það eru margar skýrslur um að nota próteasa (eins og Alcalase, viðskiptaheiti asubtilisíns A frá Bacillus tegundum) til að vatnsrjúfa prótein úr plöntum til að fá andoxunarpeptíð. Í þessu sambandi er sojaprótein eitt af próteinum sem mest hefur verið tilkynnt um [38]. Ennfremur er einnig að finna alkalasa vatnsrof á hrísgrjónaklípróteini. Við ákjósanlegar aðstæður framleiddi alkalasavatnsrof á glutinous hrísgrjónaklíði prótein vatnsrof með IC50 gildið 0.87 ± 0.02 mg/mL í DPPH hreinsun sindurefna [39]. Í rannsókn okkar var IC50 gildi RPHs 42,58 ± 2,1 mg/ml. Þrátt fyrir að IC50 gildi í DPPH sindurefnahreinsun í þessari rannsókn hafi ekki verið eins áhrifarík og úr hrísgrjónaklíðpróteini, þá var ABTS sindurefnahreinsun (IC50=2.11 mg/ml) áhrifaríkari en sojapróteinvatnsrof sem fengin voru með Alcalasehydrolysis ( IC50=2.93 mg/ml) [40].

2.3. Hýalúrónídasa hamlandi virkni

Próteinleysandi ensím, hýalúrónídasi, er að finna í húðinni og hvatar niðurbrot HA í utanfrumu fylkinu [41]. Þessi rannsókn notaði tannínsýru sem jákvæða stjórn til samanburðar. Mynd 6 sýnir að tannínsýra hafði meiri hömlun á hýalúrónídasavirkni; IC50 var 0.14 mg/mL, svipað gildinu sem Nishida o.fl. (0,121 mg/ml; 71,1 mM) [42]. Aftur á móti var reiknað IC50 upp á 8,91 mg/ml fyrir RPH lausnina. Þessi niðurstaða RPH lausnarinnar samsvaraði fyrra IC50 gildi okkar, 7,61 mg/ml [43]. Prótein, fjölsykrur og jurtauppruna- og tilbúin efnasambönd eru meðal efnasambanda þar sem hýalúrónídaseinhemlar eru til staðar. Þessir hemlar hjálpa til við að viðhalda jafnvægi HA nýmyndunar og niðurbrots [44]. Lágur styrkur HA í húðinni veldur þurrki og hrukkum. Þess vegna er hömlun á virkni hýalúrónídasa leið þar sem formgerð húðarinnar getur batnað og öldrun hennar seinkað.

2.4. Týrósínasa-hamlandi virkni

Prótein vatnsrof úr náttúrulegum uppsprettum hafa tilhneigingu til að hamlavirkni tyrosínasa. In vitro týrósínasa hömlunarprófið er venjulega notað til að meta hvernig húðhvítunarefni hafa bein áhrif á virkni týrósínasa [45]. Með því að taka þátt í þrepinu til að takmarka melanínmyndun hraða, hvatar týrósínasi L-týrósín hýdroxýleringu í L-DOPA og síðan oxun þess síðarnefnda í o-dópakínón. Þegar æskilegt er að koma í veg fyrir nýmyndun melaníns getur hömlun á virkni L-tyrosinasa skipt sköpum. Hér,týrósínasavar notað til að mæla RPH andtyrosinasa virkni. Eins og sýnt er á mynd 7 náði styrkurinn107,6 mg/ml 50 prósenta hömlun á virkni tyrosinasa. Askorbínsýra sýndi hátýrósínasa-hamlandi virkni (IC50=0.098 mg/mL), sem var svipuð 0.102 mg/mL sem Seo et al. greint frá [46].

Vatnsrofsefni úr hrísgrjónaklíðspróteinum sýndu verulega hátttýrósínasa-hamlandi virkni [47,48]. Týrósínasa-hamlandi virkni RPH lausnarinnar getur stafað af amínósýrusniði peptíða. Schurink o.fl. lýst því árangursríkutýrósínasa-hamlandi peptíð samanstanda af arginínleifum og fenýlalaníni [49]. Týrósínasa-hemjandi virkni er hægt að bæta með vatnsfælnum amínósýruleifum (td alaníni), og framleiðslu á melaníni getur truflað alanín [50]. Að auki, Zhang o.fl. einnig greint frá því að hrísgrjónprótein vatnsrof gæti dregið úr melaníninnihaldi og tyrosinasavirkni í UVB-framkölluðu frumu líkaninu [51].

cistanche líkamsbygging

2.5. Amínósýrusnið og MW RPHs

Próteininnihald hrísgrjónanna eftir að sterkju hefur verið fjarlægt í þessari rannsókn var 23,56 prósent þyngdar, og vatnsrofsstig sýnisins sem vatnsrofið var með próteasa var 9,36 prósent. Tafla 1 sýnir samsetningu amínósýra í RPH. Í sýninu innihéldu hver 100 g 5,18 g af amínósýrum. Varðandi amínósýruþættina voru RPHs ríkin alanín, leusín, arginín, glútamínsýra og aspartínsýra. Hver 100 g af sýninu innihélt 1,73 g af vatnsfælnum amínósýrum (alanín, valín, leusín, ísóleucín, prólín, fenýlalanín og cystein) alls. Þessi niðurstaða var gjörólík fyrri skýrslu okkar [43] í amýlasalausninni og meðferðarhitastigi hennar til að fjarlægja sterkju. Innihald vatnsfælna amínósýra var 1,90 sinnum hærra en fyrri skýrsla okkar. Lægra meðferðarhitastig (60 ◦C) í þessari rannsókn getur komið í veg fyrir afeitrun próteina í miklu magni, þannig að virkni amínósýra gæti varðveitt betur. Að auki er svipuð niðurstaða einnig fengin frá öðrum sveppaamýlasa og glúkóamýlasa til að sykra sterkju í hvítu hrísgrjónaklíði [52].

Rannsóknir hafa leitt í ljós að vatnsfælnar amínósýrur líkjastandoxunarefnimeð því að auka leysni sem byggir á fitu í próteinvatnsrofsefnum og peptíðum frá ýmsum próteingjöfum, þannig að stuðla að samspili við sindurefna [38,53]. Sumar amínósýrur voru tilkynntar af Chen o.fl. [54] að almennt séandoxunarefni; sýrurnar sem nefndar eru voru tryptófan, cystein, metíónín, týrósín og histidín. Í þessari rannsókn samanstanda arómatískar amínósýrur (fenýlalanín, týrósín og tryptófan) af 0,53 g/100 g RPH. Þess vegna voru þessar amínósýrur sem koma frá peptíð líklega ábyrgar fyrir andoxunarvirkni RPHs.

Að auki hafa prótein sem eru vatnsrof í styttri peptíð mismunandi MW dreifingu og sumir vatnsfælin hópar sem eru brotnir inn í heildar náttúrupróteinsameindirnar verða venjulega fyrir vatnsfasanum. Þetta tengist því að próteinsameindirnar eru skipulagslega endurraðaðar og því virkum eiginleikum próteinsins [55,56]. Tricine-SDS-PAGE gögnin bentu til þess að MW RPHs væri á bilinu 5-35 kDa (Mynd 8a).

Mynd 8b sýnir hlutfallslegt innihald ýmissa MW í RPH. Í heildina voru 45,24 prósent af öllu próteininu í aðalbandinu (MW ≈ 2,4 kDa). Svipaðar niðurstöður fengust varðandi peptíð vatnsrofsefna úr hrísgrjónklíðpróteinum. Hæsta andoxunarvirkni sem Thamnarathip o.fl. [37] var það fyrir peptíð með MW=6–50 kDa. Að auki eru tengsl milli virkni próteinvatnsrofsefna og MW dreifingar og samsetningar amínósýra [57]. Þetta skýrir andoxunarvirkni RPHs sem sést í þessari rannsókn.

2.6. Eiturefnapróf á frumum

Lítil eiturhrif á frumur eru nauðsynleg til notkunar í framtíðinni. Til að meta frumueiturhrif og lífsamrýmanleika RPHs var frumulífvænleiki hráar 264,7 frumna í RPH lausn mæld með MTT aðferð. Eins og sýnt er á mynd 9 var lífvænleiki frumna yfir 100 prósent þegar hún var meðhöndluð með 25–2000 µg/mL RPH í 24 klst. og 48 klst. Niðurstöður gefa til kynna ótrúlega litla frumueiturhrif RPHs. Þess vegna er mögulega hægt að nota RPH sem snyrtivörur með mjög litla frumueiturhrif.

3. Efni og aðferðir

3.1. Hvarfefni

Járn(III)klóríð, 2,20-asínó-bis(3-etýlbensóþíasólín-6-súlfónsýra) (ABTS), Trolox(6-hýdroxý-2,5 ,7,8-tetrametýlkróman-2-karboxýlsýra), l-3,4-díhýdroxýfenýlalanín(L-DOPA), 1,1-dífenýl-2- píkrýlhýdrasýl (DPPH) og tríklórediksýra voru fengin frá Alfa Aesar (Tewksbury, MA, Bandaríkjunum). 2,20-azóbis(2-metýlprópíónamídín) tvíhýdróklóríð (AAPH), fenólhvarfefni Folin-Ciocalteu, gallsýra, askorbínsýra, sveppirtýrósínasa, og flúrskinsnatríum var keypt frá Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Bandaríkjunum). Natríumkarbónat var fengið frá Riedel-de Haën (Seelze, Þýskalandi). Að lokum fengust kalíumferrísýaníð, natríumvetnisfosfat og natríum tvívetnisfosfat frá Showa Chemical (Tókýó, Japan).

3.2. Undirbúningur RPH

RPHs voru útbúin eins og áður hefur verið lýst, nema að sveppaamýlasi var notaður til að sykra sterkjuna í hrísgrjónamjöli og forðast skemmdir á amínósýrum af völdum bakteríalamýlasa vatnsrofs við háan hita [43,58]. Hundrað grömm af hrísgrjónamjöli var lagt í bleyti í 1000 ml af eimuðu vatni sem innihélt 0,5 prósent sveppaamýlasa (Genencor, NY, USA); blandan var síðan hituð í 24 klst í 60 ◦C ( pH 4,2), eftir það var því leyft að kólna niður í stofuhita. Miðflótta var framkvæmd í 10 mínútur við 1968 × g til að fjarlægja afganginn af flotinu. Eftir að 20-falt vatni og 2 ml af 0,1 prósent vatnsrofspróteasa (Healthmate, Changhua, Taiwan) var bætt við óleysanlega hlutann, var lausnin hrist og ræktuð í 4 klst við 55 ◦C. PH-stat aðferðin var notuð til að viðhalda sýrustigi lausnarinnar á besta stigi og 85 ◦C hitun var síðan framkvæmd í 10 mín óvirkjun forensíms. Óleysanlegi hluti sem eftir var var fjarlægður með skilvindu í 15 mínútur við 3075 × g. Frostþurrkun var framkvæmd á flotinu, sem síðan var geymt við -20 ◦C fyrir notkun.

3.3. Andoxunarvirkni RPHs

3.3.1. Heildarfenólstyrkur (TPC)

Folin–Ciocalteu aðferðin til að uppgötva TPC RPHs var notuð [59]. Í fyrsta lagi var 200 µL af Folin-Ciocalteu fenólhvarfefni (0,3M) blandað jafnt í gegnum 5-mín hristing með 200 µL af RPH lausn, og við þessa blöndu var 400 µL af afjónuðu (DI) vatni og 200 µL af 10 prósent (w/v) natríumkarbónatlausn bætt við. Blandaða lausnin gekkst undir 60 mínútna ræktun í myrkri við stofuhita. Það var síðan skilið í skilvindu í 15 mínútur við 3000 snúninga á mínútu. Mælingin notaði 100 µL af floti. Til að ákvarða TPC (eining: mg) gallsýrujafngildis (GAE) fyrir hvert gramm af þurru RPH sýni (eining: mg GAE/g RPHs), voru gögn um sjóngleypni sett inn í staðlaða feril sem táknar gallsýru. Gleypið var náð við 700 nm með því að nota EpochMicroplate litrófsmæli (BioTek, VT, USA).

3.3.2. Heildarflavonoid innihald (TFC)

TFC var fengið eftir nálgun Wathoni o.fl. með smávægilegum breytingum [60]. Fyrst var blandað saman 500 µL af hverju sýni og 2 prósent (w/v) álklóríðlausn. Hvarflausninni var blandað vandlega saman og látin standa í 10 mínútur og gleypni við 415 nm var metin. Greint er frá niðurstöðunni í míkrógrömmum af quercetin jafngildi (QE) á hvert gramm af þurru RPH sýninu (µg QE/g RPHs).

cistanche líkamsbygging

3.3.3. DPPH Free Radical Scavenging Activity

Fyrst var 198 µM DPPH etanóllausn (50 µL) og RPH-lausnin eða DI-vatn (0,5 µL; sýnishornið og samanburðurinn, í sömu röð) blandað saman og síðan látin standa í 30 mínútur í myrkri við stofuhita. Í kjölfarið náðist gleypni lausnarinnar við 517 nm. Hlutfallsleg hreinsunarvirkni var reiknuð út með því að ákvarða gleypnimuninn á milli sýnis og samanburðar. Hátt DPPH hreinsivirkni sindurefna endurspeglaðist af lítilli sjóngleypni. Í DPPH hreinsivirkni mati RPH lausnarinnar var staðallinn sem notaður var C-vítamín [61-63].

3.3.4. Hreinsunarvirkni ABTS sindurefna

Aðferðin sem Wu o.fl. var notað til að meta andoxunarvirkni RPH lausnarinnar [64]. Fyrst var 7 mM ABTS stofnlausn (250 µL) hvarfað með 2,45 mM kalíumpersúlfati (250 µL) til að gefa ABTS sindurefna katjónina (ABTS• plús ), þar sem blöndunni var haldið í 16 klst við 4 ◦C í myrkri áður en það var notað. Eftir jafnvægi í myrkri við stofuhita var 0,1 M fosfat-buffuð saltvatn (PBS; pH 7,4) notað til að þynna lausnina í 0,70 ± 0,02 gleypni við 734 nm. Síðan, í 180 µL af þynntri ABTS lausn, var 20 µL af Trolox (jákvæð stjórn) eða RPH lausninni (sýni) bætt við. Blandan var síðan sett í 10 mín af ræktun við stofuhita. Þessi rannsókn ákvað ljósgleypni við 734 nm; Lægri gleypni samsvaraði meiri ABTS hreinsivirkni sindurefna. Staðallinn sem notaður var til að meta ABTS-hreinsunarvirkni RPH-lausnarinnar var andoxunarefnið Trolox.

3.3.5. Minnkunargeta

Járnafoxandi andoxunarefnismælingin var notuð til að ákvarða heildar andoxunarvirkni RPH lausnarinnar. Eins og greint var frá af Lin o.fl. [29], RPH lausninni (200 µL) var blandað jafnt saman við 1 prósent (w/v) K3Fe(CN)6 og 0,2 M PBS jafnalausn (pH 6,6; 100 µL hvor) .Í 20 mínútur var 50 ◦C vatnsbað notað til að hita blönduna; eftir að blandan var fjarlægð úr baðinu var hún kæld hratt í 3 mín. Í kjölfarið var bætt við 10 prósent (w/v) tríklórediksýru (100 µL) og 10-mín skilvindu við 3000 rpm. Þessu var fylgt eftir með útdrætti á flotinu (400 µL) og samræmdu blöndun þess við 0. 1 prósent (w/v) FeCl3 (100 µL) og DI vatn (400 µL). Fe4[Fe(CN)6]3 fékkst með 10-mín. hvarf þessarar blöndu í myrkri. Í kjölfarið gaf hærri sjóngleypni (mæld við 700 nm) til kynna meiri minnkunargetu. Staðlað C-vítamín var notað til að ákvarða C-vítamín-jafngildi (VCE) innihald á gramm af RPH.

3.3.6. Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC)

Þessi rannsókn fékk ORAC með því að breyta áður greindri aðferð [65]. Eftir upplausn RPH sýnisins í eimuðu vatni var RPH lausninni (50 µL) blandað saman við flúorljómun (10 µM) í 96-brunn örtítraplötu. Lausnin gekkst undir 15-mín ræktun við 37 ◦C og síðan bætti við 50 µL af AAPH (500 mM). Á 5 mínútna fresti og yfir samtals 120 mínútur var flúrljómun skráð (λex og λem=485 og 528 nm, í sömu röð). Andoxunargeta RPHs var uppgötvað út frá flúrljómunarhrörnunarhvarfi með því að reikna flatarmálið undir ferilnum (AUC) ). Við útreikning á RPH ORAC var staðallinn 15–250 µM Trolox. Greint er frá ORAC sem míkrómól af Trolox jafngildi (TE) pergram af þurru RPH sýni (µmol TE/g RPH).

3.4. Hýalúrónídasa hamlandi virkni

Hýalúrónídasa hömlunarprófið var gert með því að nota {{0}}brunn örplötu og aðferð sem áður hefur verið tilkynnt um með smávægilegum breytingum [40]. N-asetýlglúkósamín losnaði við hvarf hýalúrónídasa við HA hvarfefnið. Þegar einhver hemill var til staðar minnkaði losun N-asetýlglúkósamíns, þar sem þessi losun greinist með því að fá 600-nm gleypni. HA var fellt út með súrri albúmínlausn sem samanstendur af 0,1 M asetatbuffi (pH 3,9) og albúmíni í sermi nautgripa (1 mg/ml). Sýnislausnin og 5 mg/ml hýalúrónídasa fóru í 20-mín. ræktun við 37 ◦C. Í ræktunarblönduna var HA (1{{20}}0 µL; 5,0 mg/ml í 0,1 M asetatbuffi) síðan bætt við. Frekari ræktun við 37 ◦C í 40 mínútur var framkvæmd. 0,1 ml 0,4 M basískri bóratlausn var bætt við til að stöðva ensímhvarfið.

3.5. Týrósínasa-hamlandi virkni

Þessi rannsókn metin andtyrosinasa virkni RPHs með því að nota áður tilkynnt siðareglur með breytingum [66]. Ensímlausn (135 U/mL) var útbúin með því að leysa upp tyrosinasa í 20 mM fosfatjafna (pH 6,8). Að auki var DI-vatn notað til að undirbúa 1,25 mM L-DOPA lausn. Síðan var 40 µL af ýmsum styrkjum af RPH sýnislausnum blandað saman við 40 µL af tyrosinasa lausn og 120 µL af L-DOPA lausn. Í 30 mínútur var þessari blöndu haldið við 37 ◦C í prófinu á hömlun RPHs átýrósínasastarfsemi. Litrófsmælir (FLUOstar Omega MicroplateReader, BMG Labtech GmbH, Þýskalandi) var notaður til að fá 475-nm gleypni. Allar mælingar voru gerðar þrisvar sinnum. Frásog samsvarandi hóps þegartýrósínasavar ekki til staðar var dregið frá. Ensímhömlunarhraði var ákvarðaður sem

3.6. Einkenni RPHs

3.6.1. Amínósýrusnið

Þessi rannsókn uppgötvaði amínósýrusamsetningu RPHs. Fyrst, í 24 klst. og við 115 ◦C, var 4 M metansúlfónsýra notuð til að vatnsrjúfa sýnin í lofttæmdum lokuðum glösum. Tvö Waters 510 leysigjafakerfi og amínósýrugreiningartæki (L 8900; Hitachi, Tókýó, Japan) voru notuð til að aðskilja afleidda amínósýrur á aSpherisorb ODS2 súlu sem mælist 25 m. × 64,6 mm. Í þessari rannsókn voru notuð eftirfarandi leysiefni: (a) natríumasetat (0,14 M) og tríetýlamín (850 µL/L; pH 5,6) og (b) 60 prósent asetónítríl, þar sem hallinn var 0 prósent í 2 mínútur; 0–42 prósent í 15,5 mínútur (kúpt ferill); og 100 prósent í 4 mínútur. Tvítekin sýni voru tekin til að mæla amínósýrusnið við 254 nm [67,68].

3.6.2. Mólþyngd (MW) próteins

Í samræmi við aðferð Schäggers [69] og við afoxandi aðstæður fékk þessi rannsókn MW dreifingu með tricine-natríum dodecyl sulfate (SDS)-polyacrylamidegel rafskaut (PAGE) með smávægilegum breytingum. Sýnislausn (30 g/L SDS, 0.375 MTris-HCl, 0,125 g/L Coomassie Brilliant Blue G-250 og 75 g/ L glýseról; pH 7) var notað til að dreifa frostþurrkuðu sýninu, með skilvindu síðan framkvæmd fyrir hleðslu. Alls 20 µL 2-merkaptóetanóli var bætt við 1 ml af tricine-SDS-PAGE sýninu. Sýnið var hitað við 100 ◦C í 90 s. Sýnisbrunnur var hlaðinn með hverju sýni og ólituðu próteini Standard Broad Range (Bio-Rad Laboratories, Þýskalandi) með því að nota örsprautu. Rafskaut var síðan framkvæmd - fyrst við stöðugt 30 mV þar til allt sýnið var innifalið í stöflunarhlaupinu og síðan þar til það var lokið við stöðugt 100 mV. Í kjölfarið var 0,02 prósent Coomassie Brilliant Blue R-250 lausn sett á fyrir gellitun. Alger bakgrunnslitun á hlaupunum var framkvæmd með því að hrista hlaupin í 10 prósenta ediksýru yfir nótt. Að lokum var hlaupmyndin greind til að bera kennsl á próteinböndin í brautunum; þessi greining var gerð í ImageJ (USNational Institute of Health, Bethesda, MD, Bandaríkjunum). Staðlað merki voru notuð til að fá kvörðunarferil sem MW var metið út frá. Í stuttu máli var fyrsta skrefið að ákvarða lengd flæðis (Rf) hvers bands frá toppi aðskilnaðarhlaupsins. Þetta annað skref var útreikningur á kvörðunarferlinum með því að nota Rf og log (MW) fyrir staðlað merki með tilteknu MW. MW ákvörðun var framkvæmd með því að nota Rf ofprotein bands í RPH.

3.7. Frumueiturhrifagreining

Hráar 264,7 frumur voru ræktaðar í Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) með háum glúkósa sem innihélt 10 prósent nautgripasermi (FBS), 4,5 g/L glúkósa, 1 prósent sýklalyfjalausn (100 einingar/ mL penicillín og 100 µg/mL Streptomycin), 4 mM L-Glutamin og 1,5 g/Lsodium bicarbonate við 37 ◦C og 5 prósent CO2. Eiturhrif hráar 264.7 frumna fyrir RPHs voru mæld með 3-(4,5-dímetýlþíasól-2-ýl)-2,5 dífenýl-tetrasólíumbrómíði (MTT) útbreiðsluprófunaraðferð . Um það bil 1 × 104 frumur í hverri brunn voru húðaðar í 96-brunnsplötur. Eftir 24 klst. var ýmsum styrkjum RPH (0–2000 µg/mL) bætt inn í frumurnar. Eftir 24 og 48 klst. ræktun var 100 µL af MTT lausn (0,5 mg/ml) bætt við. Bláir formazankristallar sáust þegar þeir voru skoðaðir í smásjá. DMEM var fjarlægt og 100 µL af dímetýlsúlfoxíði (DMSO) var bætt við í hverri brunn. Gleypið var mæld með örtítraplötulesara. Lífvænleiki frumna (prósent) var síðan reiknaður út sem [A570 (meðhöndlaðar frumur) - A570 (bakgrunnur)] / [A570 (ómeðhöndlaðar frumur) - A570 (bakgrunnur)] × 100 prósent [70].

3.8. Tölfræðigreining

Skýrslan fyrir hvert vatnsrofssýni var meðalgildi úr þremur óháðum endurteknum tilraunum og ákvörðunum. Niðurstöður gefnar upp í meðaltali ± staðalfráviki (SD) voru greindar með einstefnu ANOVA og Duncan's post hoc prófi með því að nota StatisticalAnalysis System (útgáfa 20.0; SPSS, Armonk, NY, USA). Gildin p < 0,05="" voru="" talin="" vera="" tölfræðileg="">

4. Niðurstöður

Þessi rannsókn skoðaði virkni RPHs. Niðurstöður tilrauna leiddu í ljós að RPHs innihéldu fenólsambönd og flavonoids og sýndu margvíslega andoxunarvirkni, svo sem DPPH og ABTS hreinsunarvirkni, minnkunargetu og ORAC. Að auki hamluðu RPHs í rauntýrósínasaog hýalúrónídasavirkni. Próteasinn var mikilvægur þáttur sem hafði áhrif á MW mynstur RPHs. Greining á RPH gefur til kynna möguleika þeirra til notkunar sem innihaldsefni í snyrtivörum.

cistanche líkamsbygging

Heimildir

1. Ichihashi, M.; Ando, ​​H.; Yoshida, M.; Niki, Y.; Matsui, M. Ljósmyndun á húð. Anti-aging Med. 2009, 6, 46–59. [Krossvísun]

2. Kim, J.-S.; Kim, D.; Kim, H.-J.; Jang, A. Verndunaráhrif asnahúð gelatínvatnsrofsefna á UVB-framkallaða ljósöldrun á trefjafrumum í húð manna. Ferli. Biochem. 2018, 67, 118–126. [Krossvísun]

3. Carocho, M.; Ferreira, IC Yfirlit um andoxunarefni, foroxunarefni og skyld deilur: Náttúruleg og tilbúin efnasambönd, skimunar- og greiningaraðferðir og framtíðarsjónarmið. Food Chem. Toxicol. 2013, 51, 15–25. [Krossvísun]

4. Guo, X.; Zhang, J.; Ma, Y.; Tian, ​​S. Hagræðing takmarkaðrar vatnsrofs próteina í hrísgrjónaleifum og lýsing á hagnýtum eiginleikum afurðanna. J. Food Proc. Varðveisla. 2013, 37, 245–253. [Krossvísun]

5. Park, H.-Y.; Lee, K.-W.; Choi, H.-D. Hrísgrjónaklíð innihaldsefni: Ónæmisbælandi og lækningavirkni. Mataraðgerð. 2017, 8.935–943. [CrossRef] [PubMed]

6. Zhou, K.; Canning, C.; Sun, S. Áhrif hrísgrjónapróteins vatnsrofsefna sem framleidd eru með örverupróteasum og ofsíun á sindurefna og oxun kjötfitu. LWT 2013, 50, 331–335. [Krossvísun]

7. Piu', LD; Tassoni, A.; Serrazanetti, DI; Ferri, M.; Babini, E.; Tagliazucchi, D.; Gianotti, A. Nýting á fljótandi aukaafurð sterkjuiðnaðarins til að framleiða lífvirk peptíð úr vatnsrofnum próteinum úr hrísgrjónum. Food Chem. 2014, 155, 199–206. [Krossvísun]

8. Ferri, M.; Graen-Heedfeld, J.; Bretz, K.; Guillon, F.; Michelini, E.; Calabretta, MM; Lamborghini, M.; Gruarin, N.; Roda, A.;Kraft, A.; o.fl. Peptíðbrot fengin úr aukaafurðum úr hrísgrjónum með umhverfisvænu ferli sýna heilsutengda lífvirkni í glasi. PLOS ONE 2017, 12, e0170954. [Krossvísun]

9. Wen, C.; Zhang, J.; Zhang, H.; Duan, Y.; Ma, H. Plöntuprótein-afleidd andoxunarefni peptíð: Einangrun, auðkenning, verkunarmáti og notkun í matvælakerfi: Yfirlit. Trends Food Sci. Tækni. 2020, 105, 308–322. [Krossvísun]

10. Phelan, M.; Aherne, A.; FitzGerald, RJ; O'Brien, NM Lífvirk peptíð sem eru unnin af kaseini: Líffræðileg áhrif, iðnaðarnotkun, öryggisþættir og eftirlitsstaða. Alþj. Dairy J. 2009, 19, 643-654. [Krossvísun]

11. Udenigwe, CC; Aluko, RE Lífvirk peptíð sem eru unnin úr matarpróteinum: Framleiðsla, vinnsla og hugsanlegur heilsufarslegur ávinningur. J. Food Sci. 2012, 77, 11–24. [CrossRef] [PubMed]

12. Fardet, A.; Rock, E. In vitro og in vivo andoxunarmöguleikar mjólkur, jógúrts, gerjuðrar mjólkur og osta: frásögn um sönnunargögn. Nutr. Res. 2018, 31, 52–70. [Krossvísun]

13. Leach, JB; Kathryn, AB; Charles, WPJ; Christine, ES Ljóskrossbundin hýalúrónsýruhýdrógel: Náttúruleg, niðurbrjótanleg vefjaverkfræði vinnupallar. Líftækni. Bioeng. 2003, 82, 578–589. [Krossvísun]

14. Jegasothy, SM; Zabolotniaia, V.; Bielfeldt, S. Virkni nýrrar staðbundinnar nanó-hýalúrónsýru hjá mönnum. J. Clin. Aesthet.Dermatol. 2014, 7, 27–29.

15. Ndlovu, G.; Fouche, G.; Tselanyane, M.; Cordier, W.; Steenkamp, ​​V. In vitro ákvörðun á öldrunarmöguleikum lækningajurta í fjórum suðurhluta Afríku. BMC viðbót. Varamaður. Med. 2013, 13, 304. [Krossvísun]

16. Jiratchayamaethasakul, C.; Ding, Y.; Hwang, O.; Ég, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-W.; Lee, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Lee, S.-H. In vitro skimun á elastasa, kollagenasa, hýalúrónídasa og týrósínasa hamlandi og andoxunarvirkni 22 halófýtuplöntuútdrátta fyrir ný snyrtivörur. Fiskur. Aquat. Sci. 2020, 23, 1–9. [Krossvísun]

17. Kang, M.; Park, S.-H.; Ó, SV; Lee, SE; Yoo, JA; Nho, YH; Lee, S.; Han, BS; Cho, JY; Lee, J. Andstæðingur-melanogenic áhrif resorcinol eru miðlað með bælingu cAMP boð og virkjun p38 MAPK boð. Biosci. Líftækni. Biochem.2018, 82, 1188-1196. [Krossvísun]

18. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Melanóvaldandi áhrif Croton roxburghii og Crotonsublyratus laufa í -MSH örvuðum B16F10 frumum. J. Tradit. Viðbót. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef] [PubMed]

19. Rizzello, CG; Nionelli, L.; Coda, R.; Gobbetti, M. Nýmyndun krabbameinsfyrirbyggjandi peptíðs Lunasin með mjólkursýrubakteríum meðan á súrdeigsgerjun stendur. Nutr. Krabbamein 2012, 64, 111–120. [CrossRef] [PubMed]

20. Rizzello, CG; Tagliazucchi, D.; Babini, E.; Rutella, GS; Saa, DLT; Gianotti, A. Lífvirk peptíð úr matríum úr jurtamat: Rannsóknarstraumar og ný líftækni fyrir myndun og endurheimt. J. Virka. Matvæli 2016, 27, 549–569. [Krossvísun]

21. Coscueta, ER; Campos, DA; Osório, H.; Nerli, BB; Pintado, M. Ensím sojaprótein vatnsrof: Tól fyrir lífvirka framleiðslu matvæla. Food Chem. X 2019, 1, 100006. [Krossvísun]

22. Aydemir, LY; Yemenicioglu, A. Eru próteinbundin fenól andoxunarefni í belgjurtum óséður hluti af ísjakanum? J. Plant. Biochem. Physiol. 2013, 1, 1–3. [Krossvísun]

23. Huang, SH; Ng, LT Magngreining á pólýfenólinnihaldi og lífvirkum innihaldsefnum sumra hrísgrjónaafbrigða í atvinnuskyni í Taívan. J. Food Compos. endaþarm. 2012, 26, 122–127. [Krossvísun]

24. Yoshitomi, K.; Taniguchi, S.; Tanaka, K.; Uji, Y.; Akimitsu, K.; Gomi, K. Rice terpene synthase 24 (OsTPS24) kóðar jasmonate móttækilega monoterpene synthasa sem framleiðir bakteríudrepandi -terpinene gegn hrísgrjónasýki. J. Plant. Physiol. 2016, 191.120–126. [Krossvísun]

25. Kamolsukyeunyong, W.; Sukhaket, W.; Pitija, K.; Thorngkham, P.; Mahatheeranont, S.; Toojinda, T.; Vanavichit, A. RiceSesquiterpene gegnir mikilvægu hlutverki í antixenosis gegn Brown Planthopper í hrísgrjónum. Plöntur 2021, 10, 1049. [CrossRef][PubMed]

26. Liu, Y.; Wang, Z.; Li, H.; Liang, M.; Yang, L. In vitro andoxunarvirkni hrísgrjónapróteins fyrir áhrifum af basískri gráðu og meltingu próteasa í meltingarvegi. J. Sci. Food Agric. 2016, 96, 4940–4950. [CrossRef] [PubMed]

27. Phongthai, S.; D'Amico, S.; Schoenlechner, R.; Homthawornchoo, W.; Rawdkuen, S. Brotunar- og andoxunareiginleikar hrísgrjónaklíðpróteina vatnsrofs örvaða með meltingarvegi í meltingarvegi in vitro. Food Chem. 2018, 240, 156–164. [CrossRef][PubMed]

28. Huang, S.-L.; Wang, W.-H.; Zhong, X.-Y.; Lin, C.-T.; Lin, W.-S.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Andoxunareiginleikar Jatropha curcas L. Seed Shell and Kernel Extracts. Appl. Sci. 2020, 10, 3279. [Krossvísun]

29. Lin, Y.-S.; Lin, W.-S.; Tung, J.-W.; Cheng, Y.-C.; Chang, M.-Y.; Chen, C.-Y.; Huang, S.-L. Andoxunarefnisgeta Jujube FruitSeeds og Peel Pulp. Appl. Sci. 2020, 10, 6007. [Krossvísun]

30. Shahi, Z.; Sayyed-Alangi, SZ; Najafian, L. Áhrif tegundar ensíma og vinnslutíma á vatnsrofsgráðu, rafhleðslubönd og andoxunareiginleika vatnsrofsaðra próteina sem eru unnin úr fitusýrðu Bunium persicum Bioss. pressuköku. Heliyon 2020, 6, e03365. [CrossRef] [PubMed]

31. Xie, H.; Huang, J.; Vá, MW; Hu, J.; Xiong, H.; Zhao, Q. Áhrif slökkvunar á köldu og heitu ensími á byggingar- og virknieiginleika hrísgrjónaprótínvatnsrofs. Food Chem. 2021, 345, 128784. [Krossvísun]

32. Rani, S.; Pooja, K.; Pal, GK. Könnun á hrísgrjónapróteinum vatnsrofsefnum og peptíðum með sérstakri tilvísun til andoxunarmöguleika: Computational afleidd nálgun til að ákvarða lífvirkni. Trends Food Sci. Tækni. 2018, 80, 61–70. [Krossvísun]

33. Bisby, RH; Brooke, R.; Navaratnam, S. Áhrif oxunarmöguleika andoxunarefna í súrefnisradical absorption getu (ORAC) prófun. Food Chem. 2008, 108, 1002–1007. [Krossvísun]

34. Elías, RJ; Kellerby, SS; Decker, E. Andoxunarvirkni próteina og peptíða. Crit. Séra Food Sci. Nutr. 2008, 48, 430–441.[CrossRef] [PubMed]

35. Minn, Y.; Li-Chan, E.; Jiang, B. (Ritstj.) Lífvirk prótein og peptíð sem hagnýt matvæli og næringarefni; Wiley-Blackwell:Hoboken, NJ, Bandaríkjunum, 2010; bls. 29–42.

36. Adebiyi, AP; Adebiyi, AO; Yamashita, J.; Ogawa, T.; Muramoto, K. Hreinsun og lýsing á andoxunarpeptíðum sem eru unnin úr vatnsrofsefnum úr hrísgrjónklíði. Eur. Food Res. Tækni. 2008, 228, 553–563. [Krossvísun]

37. Thamnarathip, P.; Jangchud, K.; Nitisinprasert, S.; Vardhanabhuti, B. Auðkenning á peptíðmólþunga úr hrísgrjónabranprotein vatnsrofs með mikilli andoxunarvirkni. J. Cereal Sci. 2016, 69, 329–335. [Krossvísun]

38. Tacias-Pascacio, VG; Morellon-Sterling, R.; Siar, E.-H.; Tavano, O.; Berenguer-Murcia, Á.; Fernandez-Lafuente, R. Notkun alkalasíns við framleiðslu lífvirkra peptíða: endurskoðun. Alþj. J. Biol. Makrómol. 2020, 165, 2143–2196. [CrossRef] [PubMed]

39. Sarringkarin, W.; Laokuldilok, T. Hagræðing á framleiðsluskilyrðum glutinous hrísgrjón klíð prótein vatnsrofs með andoxunareiginleika. CMU J. Nat. Sci. 2017, 16, 1–18. [Krossvísun]

40. Zhang, Q.; Tong, X.; Qi, B.; Wang, Z.; Li, Y.; Sui, X.; Jiang, L. Breytingar á andoxunarvirkni alkalasa-vatnsrofs sojabaunahýdrólýsats undir herma meltingu í meltingarvegi og flutningi yfir þekju. J. Virka. Matvæli 2018, 42, 298–305. [Krossvísun]

41. Tu, PTB; Tawata, S. Eiginleikar ilmkjarnaolíanna úr tveimur afbrigðum af Alpinia zerumbet, andoxunarefni, öldrun og melanógenandi eiginleika. Sameindir 2015, 20, 16723–16740. [Krossvísun]

42. Nishida, Y.; Sugahara, S.; Wada, K.; Toyohisa, D.; Tanaka, T.; Ono, M.; Yasuda, S. Hamlandi áhrif etýlasetatsútdráttar úr perum af Scilla scilloides á lipoxýgenasa og hýalúrónídasavirkni. Pharm. Biol. 2014, 52, 1351–1357. [Krossvísun]

43. Chen, H.-J.; Dai, F.-J.; Fan, S.-L.; Huang, Y.-C.; Chau, C.-F.; Lin, Y.-S.; Chen, C.-S. Hreyfifræði hýalúrónídasahömlunar með hrísgrjónum (Oryza sativa L.) próteinhýdrólýsati. Appl. Sci. 2020, 10, 9087. [Krossvísun]

44. Girish, K.; Kemparaju, K. Galdralímið hyaluronan og strokleður þess hyaluronidase: Líffræðilegt yfirlit. Lífvísindi. 2007, 80,1921–1943. [CrossRef] [PubMed]

45. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Khan, MTH; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AA Alhliða yfirlit um týrósínasahemla. J. Ensím. Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 279–309. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Seo, EJ; Hong, ES; Choi, MH; Kim, KS; Lee, SJ Andoxunarefni og húðhvítandi áhrif Rhamnus yoshinoi útdráttar. Kóreumaður J. Matur Sci. Tækni. 2010, 42, 750–754.

47. Ochiai, A.; Tanaka, S.; Tanaka, T.; Taniguchi, M. Rice Bran Prótein sem öflug uppspretta andmelanógenandi peptíða með Tyrosinase-hemjandi virkni. J. Nat. Framl. 2016, 79, 2545–2551. [CrossRef] [PubMed]

48. Kubglomsong, S.; Theerakulkait, C.; Reed, RL; Yang, L.; Maier, CS; Stevens, JF Einangrun og auðkenning á týrósínasahamlandi og koparklóbindandi peptíðum úr vatnsrofnu albúmíni úr hrísgrjónaklí. J. Agric. Food Chem. 2018, 66, 8346–8354.[CrossRef]

49. Schurink, M.; van Berkel, WJ; Wichers, H.; Boeriu, CG Ný peptíð með týrósínasa hamlandi virkni. Peptíð 2007, 28.485–495. [Krossvísun]

50. Ishikawa, M.; Kawase, I.; Ishii, F. Samsetning amínósýra dregur úr litarefni í B16F0 sortuæxlisfrumum. Biol. Pharm.Bull. 2007, 30, 677–681. [CrossRef] [PubMed]

51. Zhang, R.; Wei, Y.; Li, M.; Cai, M.; Gu, R.; Ma, Y.; Chen, L.; Wang, J. Melanogenesis áhrif hrísgrjónapróteins vatnsrofs og þess einkennandi peptíð Leu-Leu-Lys, Leu-Pro-Lys og pyroGlu-Lys á UVB-framkallaðar húðþekju melanocyte frumur úr mönnum. Food Funct. 2020, 11, 8757–8767. [Krossvísun]

52. Wang, Y.; Cai, D.; Hann, M.; Wang, Z.; Qin, P.; Tan, T. Opin gerjunarframleiðsla á l-mjólkursýru með því að nota hvítt hrísgrjónklíð með samtímis sykrun og gerjun. Bioresour. Tækni. 2015, 198, 664–672. [CrossRef] [PubMed]

53. Pan, M.; Jiang, TS; Pan, JL Andoxunarvirkni repjupróteinvatnsrofs. Food Bioprocess. Tækni. 2009, 4, 1144–1152.[CrossRef]

54. Chen, HM; Muramoto, K.; Yamauchi, F.; Nokihara, K. Andoxunarvirkni hönnuð peptíð byggð á andoxunarpeptíðinu sem er einangrað úr meltingu sojabaunapróteins. J. Agric. Food Chem. 1996, 44, 2619–2623. [Krossvísun]

55. Liu, Q.; Kong, B.; Xiong, YL; Xia, X. Andoxunarvirkni og hagnýtir eiginleikar svínaplasmapróteinvatnsrofs undir áhrifum vatnsrofs. Food Chem. 2010, 118, 403–410. [Krossvísun]

56. Lemes, A.; Sala, L.; Ores, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Yfirlit yfir nýjustu framfarir í dulkóðuðum lífvirkum peptíðum úr próteinríkum úrgangi. Alþj. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef] [PubMed]

57. Wang, J.-S.; Zhao, M.-M.; Zhao, Q.-Z.; Jiang, Y.-M. Andoxunareiginleikar papain vatnsrofs af hveiti glúteni í mismunandi oxunarkerfum. Food Chem. 2007, 101, 1658–1663. [Krossvísun]

58. Gao, M.-T.; Kaneko, M.; Hirata, M.; Toorisaka, E.; Hano, T. Nýting hrísgrjónaklíðs sem næringargjafa fyrir gerjunarmjólkursýruframleiðslu. Bioresour. Tækni. 2008, 99, 3659–3664. [CrossRef] [PubMed]

59. Huang, WY; Lin, YR; Ho, RF; Liu, HY; Lin, YS Áhrif vatnslausna á útdrátt af grænu telaufum. Sci. Heimur J. 2013,2013, 368350. [CrossRef]

60. Wathoni, N.; Shan, CY; Shan, WY; Rostinawati, T.; Indradi, RB; Pratiwi, R.; Muchtaridi, M. Einkenni og andoxunarvirkni pektíns úr indónesískum mangóstanberki (Garcinia mangostana L.). Heliyon 2019, 5, e02299. [Krossvísun]

61. Tsai, C.-C.; Chan, C.-F.; Huang, W.-Y.; Lin, J.-S.; Chan, P.; Liu, H.-Y.; Lin, Y.-S. Notkun Lactobacillus rhamnosus SpentCulture Supernatant í andoxunar-, hvítunar- og rakasöfnun fyrir snyrtivörur. Sameindir 2013, 18, 14161–14171.[CrossRef]

62. Huang, W.-Y.; Lee, P.-C.; Hsu, J.-C.; Lin, Y.-R.; Chen, H.-J.; Lin, Y.-S. Áhrif vatnsgæða á upplausn Yerba Mate ExtractPowders. Sci. Heimur J. 2014, 2014, 1–6. [CrossRef] [PubMed]

63. Chan, C.-F.; Wu, C.-T.; Huang, W.-Y.; Lin, W.-S.; Wu, H.-W.; Huang, T.-K.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Andoxun og sortumyndun Hindrun á ýmsum Dendrobium tosaense útdrætti. Molecules 2018, 23, 1810. [CrossRef] [PubMed]64. Wu, C.-T.; Agrawal, DC; Huang, W.-Y.; Hsu, H.-C.; Yang, S.-J.; Huang, S.-L.; Lin, Y.-S. Virknigreining á eyttum kaffimoluðum útdrætti sem fæst með vatnshitaaðferðinni. J. Chem. 2019, 2019, 1–8. [Krossvísun]

65. Dorta, E.; Rodríguez-Rodríguez, EM; Jiménez-Quezada, A.; Fuentes-Lemus, E.; Speisky, H.; Lissi, E.; López-Alarcón, C. Notkun ORAC (Oxygen Radical Absorbance Capacity) prófunar til að spá fyrir um getu mangó (Mangifera indica L.) aukaafurða til að hindra oxun kjötpróteina. Matur endaþarm. Aðferðir 2016, 10, 330–338. [Krossvísun]

66. Lin, Y.-S.; Chen, H.-J.; Huang, J.-P.; Lee, P.-C.; Tsai, C.-R.; Hsu, T.-F.; Huang, W.-Y. Hreyfifræði týrósínasahemjandi virkni með notkun Vitis vinifera laufþykkni. BioMed Res. Alþj. 2017, 2017, 5232680. [CrossRef] [PubMed]

67. Bidlingmeyer, BA; Cohen, SA; Tarvin, TL Hröð greining á amínósýrum með því að nota pre-dálka afleiðugerð. J. Chromatogr. BBiomed. Sci. Appl. 1984, 336, 93–104. [Krossvísun]

68. Asai, TT; Oikawa, F.; Yoshikawa, K.; Inoue, N.; Sato, K. Kollagenpeptíð úr matvælum, prólýl-hýdroxýprólín (Pro-Hyp) og hýdroxýprólýl-glýsín (Hyp-Gly) auka vöxt frumræktaðra músahúð trefjablasta með því að nota fóstursermi laus við hýdroxýprólýl peptíð. Alþj. J. Mol. Sci. 2019, 21, 229. [Krossvísun]

69. Schägger, H. Tricine–SDS–PAGE. Nat. Protoc. 2006, 1, 16–22. [Krossvísun]

70. Diao, J.; Chi, Z.; Guo, Z.; Zhang, L. Mung baunaprótein vatnsrofið mótar ónæmissvörun í gegnum NF-kB feril í fitufjölsykru-örvuðum RAW 264.7 átfrumum. J. Food Sci. 2019, 84, 2652–2657.[Krossvísun]