Núverandi klínísk notkun á in vivo genameðferð með AAV 5. hluti

Kerfisbundin AAV öryggissjónarmið

Lágmarksáhyggjur af öryggi til skamms tíma hafa verið til staðar vegna kerfisbundinnarAAV gjafar á 120-földu bili af vektorskammtum (5 1012 til 6 1013 mg/kg) sem notaðir voru í dreyrasýkirannsóknum (Tafla 1 og 2).

AAV (adeno-associated virus) gjöf er tækni sem nú er mikið notuð á sviði genameðferðar. Á undanförnum árum hafa fleiri og fleiri rannsóknir staðfest að AAV gjöf getur einnig bætt minni að einhverju leyti.

Kjarninn í AAV gjöf er að koma genum með lækninga- eða bætandi áhrif inn í frumur manna til að ná fram meðhöndlun á ákveðnum sjúkdómi eða einkennum. Í rannsókninni á minni munu vísindamenn kanna innleiðingu minnistengdra gena í heila músa og komast að því að þessar mýs geta sýnt betra minni.

Nánar tiltekið endurspeglast minnisbætandi áhrifin af AAV gjöf aðallega í tveimur þáttum. Í fyrsta lagi geta sum gen styrkt tengsl taugafrumna og þar með styrkt upplýsingaskipti milli taugafrumna og gert minnismyndun stöðugri og áreiðanlegri. Í öðru lagi geta sum gen stuðlað að útbreiðslu og sérhæfingu taugastofnfrumna og myndað þar með fleiri nýjar taugafrumur í heilanum, sem gerir minnisforða heilans ríkari.

Í stuttu máli er sambandið á milli AAV gjafar og minnis jákvætt. Þrátt fyrir að genameðferðartækni hafi ekki enn verið mikið notuð, hafa tengdar vísindarannsóknir leitt í ljós mikla möguleika hennar og þróunarhorfur fyrir okkur. Í framtíðinni, með stöðugum framförum í tækni og dýpkun rannsókna, teljum við að þessi tækni muni leggja meira af mörkum til heilsu og vellíðan manna. Það má sjá að við þurfum að bæta minnið og Cistanche getur bætt minnið verulega vegna þess að það hefur andoxunar-, bólgueyðandi og öldrunaráhrif, sem getur hjálpað til við að draga úr oxun og bólguviðbrögðum í heilanum og vernda þannig heilsu heilans. taugakerfi. Að auki getur Cistanche einnig stuðlað að vexti og viðgerð taugafrumna og þar með aukið tengsl og virkni tauganeta. Þessi áhrif geta hjálpað til við að bæta minni, námsgetu og hugsunarhraða og geta einnig komið í veg fyrir vitsmunalegan truflun og taugahrörnunarsjúkdóma.

Smelltu á Vita til að bæta skammtímaminni

Um það bil 5 einstaklingar í 3 rannsóknum upplifðu sjálftakmörkuð viðbrögð við innrennsli með vektor í skömmtum 2 10126 1013 mg/kg, sem einkenndust af hita, vöðvaverkjum og/eða lágþrýstingi, sem birtast í samræmi við meðfædda ónæmissvörun.

141.150.152 Vísbendingar um skammtatakmarkandi eiturverkanir af almennu AAV innrennsli eru studdar af klínískum rannsóknum á dreyrasýki sem fela í sér: samþykki á Zolgensma (1 1014 mg/kg) með öryggisviðvörun um eiturverkanir á lifur eftir innrennsli, grunur um virkjun á lyfjum (5 í DMD trilyfjum) 10133 1014 mg/kg) með frumufæð og eiturverkunum á nýru sem afleiddar, og 3 dauðsföll í 3 1014-vg/kg hópi XLMTM rannsóknarinnar við framvindu lifrar- og gallsjúkdómsins sem fyrir er, 46 vikum eftir innrennsli með vektor.

13.176.177 Samsett greining á þessum athugunum er í gangi og skiptir máli fyrir alla almenna AAV vinnu og felur í sér hugsanlegan eðlislægan mun á AAV sermigerðum varðandi ónæmissvörun. Í ljósi þess að allar AAV sermisgerðir umbreyta lifrarfrumum, hafa langtíma öryggissjónarmið aðallega beinst að hættunni á lifrartruflunum, stökkbreytingum, stökkbreytingum. sem leiðir til lifrarfrumukrabbameins (HCC).

Þó að forklínísk gögn, sem eru aðallega ósamþættanleg, benda til þess að atburðir AAV-samþættingar eigi sér stað á skammtaháða hátt með vali fyrir samþættingu á stöðum með virkri umritun, eru vefsértækir hvatar verndandi gegn krabbameinsmyndun.178–180 Samanlagt myndi þetta styðja notkun á lægsta mögulega árangursríka vektorskammtur með lifrarfrumusértækum örva til að lágmarka hættu á eiturverkunum.

Hemophilia is a provocative model to study AAV-related HCC genotoxicity because 90% of severe hemophilia patients >35 ár smitaðist af iatrogenic lifrarbólgu C veiru (HCV), sem er þekktur áhættuþáttur fyrir þróun HCC.

181–185 Nýlega birtar 15-ára eftirfylgnigögn um 4 HB einstaklinga studdu engar vísbendingar um eiturverkanir á lifur eða aðrar langtíma eiturverkanir; hins vegar voru ályktanir takmarkaðar af skorti á staðfestri þrávirkni transgena í umbreyttum lifrarfrumum.186

FVIII/FIX Öryggi transgena: segamyndun og áhætta á mótefnamyndun

Allar HA klínískar rannsóknir nota B-domain-eydd FVIII (BDD-FVIII) transgen, sem heldur fullri procoagulant virkni á sama tíma og AV pökkunartakmarkanir (4,7 kb) og eykur tjáningu.

187–189 Næstum allar HA tilraunir nota staðlaðan FVIII B-domain þunga og létta keðjutengil, FVIII-SQ.190 Ein tilraun er að nota annan BDD-FVIII, FVIII-V3, þar sem 6 N-tengdum glýkósýleringarstöðum til viðbótar var bætt við SQ tengilinn til að bæta tjáningu. 154.191HB tilraunir hafa alhliða aðlagað FIX-Padua (FIX-R338L) transgenið, sem gefur 8-falt meiri sértæka virkni miðað við villigerð FIX.

192.193 Miðað við þekkta tíðni alló-hamlandi mótefna, vekur „hemlar“ myndun í alvarlegu HA (30%) og HB (5%) og notkun á FVIII-SQ og FIX-R338L afbrigðum transgenum fræðilegar áhyggjur af ónæmissvörun við prótein afleitt erfðagena.

194.195 Í samræmi við 2 áratuga reynslu af rFVIII-SQERT, sem sýnir enga aukna hættu á hemlum, hafa engir einstaklingar sem fá HA genameðferð þróað hemla. virka FVIII afbrigði (skoðuð í Samelson-Jones og Arruda199) og geta á sama hátt verið örugg með auknum lækningalegum ávinningi.

Hins vegar krefjast skráningarviðmiða rannsókna marktækrar fyrri útsetningar fyrir FVIII/FIX próteini og útiloka sjúklinga með sögu um hemla. Sem slík endurspegla fyrirliggjandi gögn um genameðferð sjúklinga sem eru ólíklegastir til að þróa hemla. Engu að síður er lítil hætta á myndun hemla eftir genameðferð studd enn frekar af gögnum frá músum og hundum sem sýna fram á hæfni lifrarfrumnastýrðs genaflutnings til að framkalla FVIII, FIX eða FIX-R338L þol.200–203

Þessi forklíníski árangur styður framtíðarrannsókn á genaflutningi fyrir framköllun þols, sem er sérstaklega viðeigandi fyrir HA-sjúklinga með hemla204 og aðrar sjúkdómar (td Pompe-sjúkdómur; skoðað í Doerfler et al.205).

Varðandi hættu á segamyndun, benda fyrirliggjandi lífefnafræðileg gögn til þess að FIX-R338L sé virkjað og óvirkjuð á svipaðan hátt og villigerð FIX og ekki í eðli sínu segamyndun.193

Ennfremur sýndu músagögn segamyndunartilvik í FIX-R338L og villigerð FIX í fylgni við supratherapeutic FIX: C og voru ekki sértæk fyrir FIX-R338L.201

Faraldsfræðilegar rannsóknir hafa sýnt fram á að oflífeðlisfræðileg FIX: C er hófleg óháð segamyndun í bláæðum með áhættuþáttum (stuðlahlutfall [OR] 1,84.0) miðað við yfirlífeðlisfræðilega FVIII (OR8.821.3).206–208 Margfeldi FIX-R338L rannsóknir náð FIX: C á bilinu eðlilega eða væga dreyrasýki án öryggisáhyggju.

Nýleg gögn, einni FIX-R338L rannsókn greindi frá segamyndun hjá einstaklingi sem náði FIX: C > 200% af eðlilegu (með eins-þrepa prófun [OSA]) með hugsanlega margvíslegum þátta segamyndunarsjúkdómum, þar á meðal offitu, nýrnabilun og nýlegri stöðvun af beinu segavarnarlyfi145 til inntöku (meintur bakslags segamyndun209).

Engu að síður undirstrikar þessi athugun, ásamt þekktum faraldsfræðilegum gögnum um virkni þátta og segamyndun, mikilvægi þess að viðhalda tjáningu innan meðferðarglugga, sérstaklega þegar um er að ræða fylgikvilla með segamyndun.

Spurningar um verkun HA og HB genameðferðar

Epidemiological data may guide target therapeutic FVIII/FIX expression. Potentially targeting FVIII/FIX: C, >10%–150% af eðlilegum flutningi gens eftir gena er studd af bæði fyrrnefndri forsegamyndun í tengslum við oflífeðlisfræðilega FVIII/FIX: C206–208 og tiltækum HA náttúrusögugögnum sem sýna fram á að FVIII: C af R12% af eðlilegu (með OSA) nægi til að koma í veg fyrir sjálfsprottnar liðblæðingar.210

Mikilvægt er að bæði transgena afurðirnar, FVIII-SQ og FIX-R338L, sýna breytilegar virknimælingar í OSAversus chromogenic assay (CSA) ákvörðunarþáttum þáttavirkni sem hægt er að endurskapa í rannsóknum. bendir til þess að misræmi í greiningu tengist FIX-R338L lífefnafræði.192.201.211.212

Skilningur á því hvaða próf spáir best fyrir um blóðtruflanir í lífi FVIII/FIX-R338Lis af lifrarfrumum er viðeigandi til að leiðbeina klínískri stjórnun vegna þess að viðvarandi FVIII: C/FIX: C, eftir því hvaða prófun er notuð, fer yfir klínísk viðmiðunarmörk vægrar/í meðallagi dreyrasýki, 152.155 eðlilegt. FVIII:C/FIX: C (Harringtonet al., 2020, WFH Virtual Summit, ráðstefna),145.146 og ofurmeðferð FVIII:C/FIX: C (Harrington et al., 2020, WFH Virtual Summit, ráðstefna).145

Bráðabirgðagögn FVIII mótefnavaka eru í fylgni við CSA-ákvörðuð FVIII: C,153 en bráðabirgðasvipgerðargögn sem styðja OSA-ákvörðuð FVIII: C tengjast lifrarfrumumafleiddum FVIII in vivo virkni,152 benda til þess að auðveldara sé að umbreyta lifrarfrumum-afleiddum FVIII í frumkvilla þess.

Nákvæm mæling á blóðstöðvunarvirkni transgena er nauðsynleg til að lýsa þolanlegu úrvali af lækningalegri FVIII/FIX tjáningu. Í samræmi við skýrslur í kímerísku músarlíkani af lifrarfrumum manna sem sýna allt að 7-faldan mun á flutningi á milli músa, 213 margfeldi HA og HB tilraunir hafa sýnt fram á 10-faldan breytileika í FVIII:C/FIX: C með sama vektor og skammti (Harrington o.fl., 2020, WFH Virtual Summit, ráðstefna).145,149,150,153

Hluta af þessum breytileika má skýra, að hluta til, með tilgátu frumuónæmissvörunar við kapsíðpeptíðum sem umbreyttar lifrarfrumur koma fram sem geta leitt til minnkaðrar eða taps á tjáningu transgena og þar með takmarkað virkni.214

Að auki geta vektor CpG mótíf hugsanlega verið ónæmisörvandi og stuðlað að kapsíðsvörun;215 vissulega hefur CpG auðgun kassettu verið tengd við tap á tjáningu transgena þrátt fyrir inngrip stera í 3 HB rannsóknum.140,143,216

Í grófum dráttum, mörg skref frá innrennsli ferju til tjáningar transgena (endurskoðað í Li og Samulski217) með tilheyrandi möguleika á breytileika þýðir líklega að nauðsynlegt verður að þola margs konar lækningatjáningu transgena, þó vonandi sé minna en 10-falt.

Að lokum, þó að það sé ekki skilgreint, getur ending transgenatjáningar í HA/HB klínískum rannsóknum upplýst aðrar AAV lifrarfrumu-stýrðar erfðameðferðir. Klínískar upplýsingar úr fyrstu árangursríku almennu AAV rannsókninni, gerðar í HB, 163.164 speglamælingar í hundum HA og HBdata eftir AAV-miðlaðan genaflutning, sem sýna varanlega tjáningu 8 árum eftir genaflutning.139.164.218.219

Aftur á móti, fyrsta árangursríka HA genameðferðarrannsóknin greindi frá minnkandi tjáningu 14 ára eftir vektor,151 þannig að birt 3-ár FVIII: C lækkaði um 35%–80% af gildum árs 1 hjá 6 af 7 einstaklingum í 6 {{ 10}}vg/kg árgangur, áætlaður leyfilegur skammtur.

Nýlega sýndi önnur HA rannsókn stöðuga og varanlega tjáningu FVIII í 23,3 ár hjá 5 einstaklingum (5 10111 1012 vg/kg hópum), sem styður möguleikann á stöðugri og varanlegri FVIII tjáningu af lifrarfrumum.152

Nokkrar tilgátur hafa verið settar fram til að hugsanlega útskýra minnkun á FVIII tjáningu sem kom fram í fyrstu HA rannsókninni150 sem fela í sér: FVIII ófalt prótein svörun (UPR) sem greint var frá í ólíkum tjáningarkerfum með andstæðum gögnum í HA múslíkönum eftir AAV miðlað FVIII genaflutning220–222 eða vektorsértæka eiginleika (td framleiðsluvettvangur, stærð snælda, skammtur, hylki osfrv.).

Athyglisvert er að í fyrstu árangursríku HA rannsókninni var einstaklingurinn með viðvarandi tjáningu á 3. ári með FVIII: C 100% af eðlilegu, en FVIII: C meðal einstaklinganna sem misstu tjáningu byrjaði eða fór yfir á bilinu væg og í meðallagi HA, 150.151 gildi sem voru stöðug og varanlegur í annarri rannsókn.152 Þótt bráðabirgðatölur og ekki endanlegar, gætu þessi gögn bent til þess að sá lækkun á FVIII: C eða stöðugri tjáningu sé ekki FVIII tjáningu háð, sem gerir FVIII UPR að ólíklega ríkjandi sökudólgi fyrir missi á tjáningu. Árangur í HA genameðferð er nýlegur og áframhaldandi athugun mun upplýsa væntingar um endingu FVIII.

Ending tjáningar er sérstaklega mikilvæg þegar haft er í huga að allir einstaklingar þróa almennt hátítra AAV NAb eftir innrennsli AAV vektor í kerfi, sem líklega útilokar endurtekna gjöf sömu AAV sermisgerð.

Þar sem meirihluti gagna sem styðja NAb með háum titli útiloki altæka AAV verkun, hefur bakhjarl greint frá greinanlegri tjáningu transgena í kjölfar almenns AAV5 vektor í NHPs eða mönnum sem eru AAV5 NAb jákvæðir.148,223

Tvær prófanir í gangi, sem geta veitt frekari innsýn, skrá Nab-jákvæða einstaklinga (ClinicalTrials.gov: NCT03520712 ogNCT03569891). Engu að síður er langlífi AAV húmorsónæmis studd af 15-árs eftirfylgni af fyrstu almennu AAV rannsókninni, sem sýnir viðvarandi, fjölsermisgerða, krosshvarfandi AAVNAbs við sermisgerðinni með innrennsli og öllum öðrum prófuðum.186

Þessar upplýsingar eru í samræmi við athuganir hjá mönnum eftir útsetningu fyrir AAV í umhverfinu og innrennsli AAV vektor í dýralíkönum sem sýndu viðvarandi, fjölsermisgerða, krossviðbragðaNAbs.224–228

Samanlagt benda fyrirliggjandi gögn til þess að með núverandi aðferðum sé innrennsli einu sinni á ævi AAV vektorinnrennsli bæði markmið meðferðar og skylda vegna NAb-myndunar.

Í stuttu máli, þriggja áratuga rannsókn hefur betrumbætt AAV erfðameðferð við dreyrasýki til að ná endurteknum sönnunargögnum árangri og útlistað framúrskarandi spurningar sem þarf til að koma genameðferð áfram.

Óvenjuleg virkni í genameðferð með dreyrasýki veitir umtalsverða bjartsýni um að svör verði auðkennd við framfarir nær lokamarkmiðinu að ná á öruggan og áreiðanlegan hátt varanlegri og stöðugri FVIII/FIX meðferðartjáningu sem getur bætt svipgerð dreyrasýkis.

LSDs: Yfirlit yfir klíníska genameðferð

LSD eru hópur arfgengra efnaskiptasjúkdóma sem einkennast af uppsöfnun stórsameinda inni í lýsósum. Samanlagt eru LSD tiltölulega algengar sjúkdómar (1:5,000 til 1:5.500), þó sjaldgæft sé fyrir sig.229–231

LSD hafa áhrif á mörg líffærakerfi en hafa eitt skilgreiningarkerfi ríkjandi, svo sem ofstækkun hjartavöðvakvilla hjá sjúklingum með ungbarnasjúkdóm Pompe, skerta miðtaugakerfi hjá börnum með CNL2 eða lifrar- og vöðvastælkun hjá börnum með Gaucher-sjúkdóm af gerð I.230

Í ljósi klínísks misleitni þeirra hefur það verið áskorun að finna árangursríkar meðferðir með einu viðurkenndu meðferðinni, ERT, sem skapaði fylgikvilla af aukinni lifun.232

Eftir því sem algengi þessara sjúkdóma eykst með tilkomu nýburaskimun, verða ný lækningaleg inngrip, eins og genaskipti, mikilvæg til að takast á við allar birtingarmyndir LSD.230,233,234

Í þessum hluta ræðum við framfarir sem hafa orðið við að þróa genauppbótarmeðferðir fyrir suma af algengari LSD: Pompe-sjúkdómnum, Gaucher-sjúkdómnum, Fabry-sjúkdómnum, slímfjölsykrum (MPS) sjúkdómnum og taugafrumu ceroid lipofuscinoses (NCL) (tafla 1) .

For more information:1950477648nn@gmail.com