Samsetningsgreining á Cistanche Tubulosa: Aðskilnaður og uppbygging fenýletanóíð glýkósíðs og neolignan glýkósíðs
Mar 14, 2022
Tengiliður:joanna.jia@wecistanche.com
Innihaldsefni Cistanche Tubulosa (Schrenk) Hook. F. II.1) Einangrun og uppbygging nýs fenýletanóíð glýkósíðs og nýs nýs nýs glýkósíðs
Fumio Yoshizawa,* a Takeshi Deyama/ Nobuo Takizawa/ Khan UsmanghaniJ og Mansoor Ahmad6
Central Research Laboratories, Yomeishu Seizo Co., Ltd., a 2132-37 Nakaminowa, Minowa-machi, Kamiina-gun, Nagano 399-46, Japan og lyfjafræðideild, lyfjafræðideild háskólans í Karachi? Karachi-32, Pakistan. Tekið fyrir 9. nóvember 1989
Nýttfenýletanóíð glýkósíðnefnt tubuloside E (I), og nýttneolignan glýkósíð, dehýdródíkóniferýl alkóhól yO-0-D-glúkópýranósíð (II), voru einangruð úr heilum plöntum afCistanche tubulosa (Schrenk) Hook. f. (Orobanchaceae), together with dehydrodiconiferyl alcohol 4-O-^-D-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-a-L- rhamnopyranoside (IV), isosyringalide S'-a-L-rhamnopyranoside (V), (+ )-syringaresinol O-^-D-glucopyranoside (VI), ( + )-pinoresinol O-^-D-glucopyranoside (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxycatalpol (IX), 8-epiIoganic acid (X), 20-hydroxyecdysone (XI), 8-hydroxygeraniol l-j?-D-glucopyranoside (XII) and syringin (XIII). The structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethyl O-a-L-rhamnopyranosyl-(l ->3)-2-O-asetýl-4-Op-kúmaróýl-^-D-glúkópýranósíð á grundvelli efnafræðilegra sannana og litrófsgagna.
Leitarorð Cistanche tubulosa-, Orobanchaceae;fenýletanóíð glýkósíð;iridoid; túbúlósíð E; dehýdródíkóniferýl alkóhól glýkósíð; syringalide rhamnoside;neolignan glýkósíð; 13C-NMRMOE
fenýletanóíð glýkósíð í cistanche
Í fyrri grein greindum við frá einangrun og skipulagsákvörðun nýrrafenýletanóíð glýkósíð, túbúlósíð A一D úr heilum plöntum afCistanche tubulosa(Schrenk) Krókur. f. (Orobanchaceae) í Pakistan.
Þessi ritgerð fjallar um einangrun og uppbyggingarskýringu nýsfenýletanóíð glýkósíð, nefnt tubuloside E (I), og nýttneolignan glýkósíð, dehydrodiconiferyl alcohol ■/-QgD-glucopyranoside (II), auk einangrunar 11 þekktra efnasambanda, dehydrodiconiferyl alcohol 4-OgD-glucopyranoside (III), syringalide A 3'-aL-rhamnopyranoside (IV), ísósýringalíð 3'-aL-rhamnópýranósíð (V), (plús )-sýringaresinól OgD-glúkópýranósíð(VI), (plús )-pínoresinól OgD-glúkópýranósíð (VII), liriodendron (VIII), 6-deoxýkatalpól (IX) , 8- epiloganic acid (X), 20-hydroxyecdyson (XI), 8-hydroxygeraniol 1-gD-glucopyranoside (XII) og syringin (XIII). Efnasambönd VI, VIII一X, XII og XIII voru áður einangruð úr Cistanche salsa?'
Túbúlósíð E (I) var einangrað sem myndlaust duft, C31H38O15 -3/2H2O, [a】D -134.0 gráðu (MeOH). Innrauða (IR) litrófið gaf til kynna tilvist hýdroxýlhópa (3430cm-1), samtengdra estera (1734cm-x), tvítengis (1634cm-1) og arómatískra hringa ( 1608 og 1518 cm-1). Róeindakjarnasegulómun 0H-NMR) litróf I sýndi merki vegna metýlhóps rhamnósa 0 1.07 (3H, d, J= 6 Hz)], asetoxýlhóps {{22} }.98 (3H, s)], bensýlmetýlenróteindir 0 2.72 (2H, t, J—1 Hz)], glúkósaómerísk róteind 0 4.54 (1H, d, J{{ 32}} Hz)], rhamnoseanomeric róteind 0 5.00 (1H, br s)], tvær olefinic róteindir [<5 6.34,="" 7.66="" (1h="" each,="" d,="" j="16" hz)]="" and="" aromatic="" protons="" 0="" 6.50—7.46="">
Við asetýleringu gaf efnasamband I oktaasetatið (la), en 】H-NMR litróf þess sýndi fimm alifatíska asetoxýlhópa 0 1.87, 1.95, 2.02 (3H hver, s), 2.10x2 (6H, s)] og þrír arómatískir asetoxýlhópar [<5 2.27,="" 2.28,="" 2.31="" (3h="" each,="" s)].="" as="" shown="" in="" table="" i,="" the="" carbon="" nuclear="" magnetic="" resonance="" (13c-nmr)="" spectrum="" of="" i="" was="" almost="" identical="" with="" that="" of="" 2'-acetylacteoside="" (ib)「)except="" for="" the="" signals="" due="" to="" the="" ^-coumaric="" acid="">
Við metanólýsu á I með asetýlklóríði í metanóli greindust metýl p-kúmarat og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhól við þunnlagsskiljun (TLC) og hágæða vökvaskiljun (HPLC).
Súr vatnsrof á I með 10 prósent brennisteinssýru gaf glúkósa og ramnósa í hlutfallinu 1 á móti 1.
From the above results, the structure of tubuloside E (I) was established as 2-(3,4-dihydroxy phenyl)ethy 1 O-a-L- rhamnopyranosyl-( 1 -^3)-2-(?-acetyl-4-O-/>-kúmaróýl-^- D-glúkópýranósíð.
Efnasamband III var einangrað sem myndlaust duft, [a]D - 56,4 gráður (MeOH). Ensímvatnsrof III gaf aglýkóni (Illb) sem myndlaust duft, [0]270 —11300, [a]D —31,6 gráður (MeOH) og glúkósa. Efnasambönd Illb og III voru auðkennd sem dehýdródíkóniferýlalkóhól3,4) og 4-O-#-D-glúkópýranósíð,3,4) þess, í sömu röð, með samanburði við ósvikin sýni (TR,】H- og 13C-NMR litróf) .
Efnasamband II var einangrað sem myndlaust duft, [a]D 一 7,4 gráður (MeOH), en IR litróf þess gaf til kynna að hýdroxýlhópur (3430 cm-1) væri til staðar og arómatískur hringur (1614,1522,1502 cm) T). 〔H-NMR II sýndi merki vegna tveggja arómatískra metoxýlhópa 0 3.74, 3.80 (3H hvor, s)], bensýlróteind 0 5.45 (1H, d, J{{ 16}}Hz)], tvær trans olefinic róteindir 0 6.17 (1H, dt, J= 16, 7 Hz), d 6,58 (1H, d, J= 16 Hz)] og fimm arómatískar róteindir 0 6.7一7.1 (5H, m)]. Við asetýleringu gaf efnasamband II hexasetatið (Ila), en 'H-NMR litróf þess sýndi fimm alifatísk asetýlmerki 0 2.01, 2.03, 2.09, 2.06 (3H, 3H, 3H, 6H)]. Ensím vatnsrof II gaf aglýkóni (lib) og glúkósa. Efnasamband lib var einangrað sem myndlaust duft, [a]D plús 34,8 gráður (MeOH), þar sem IR, iH- og 13C-NMR litróf voru nánast eins og Illb, að undanskildum [a]D gildi og hringlaga tvíhyrning (CD) ) litróf.
Alger uppsetning lib var útskýrð með því að bera saman CD litróf þess við Illb og III, en staðalefnafræði þeirra var staðfest í birtum gögnum.4) CD litróf lib sýndi A& plús 14100 (270) og plús 15200 (283) sem jákvæð hámark hins vegar sýndi Illb A& -11300 (270) og -10990 (283) sem neikvæð hámark. Þessar staðreyndir benda til þess að lib og Illb séu handhverfur hvor af annarri. Staðalefnafræði lib verður að vera sú sem sýnd er á mynd 1.
Þannig var staðfest að efnasamband II væri dehýdródíkó niferýl alkóhól mónóglúkósíð. Staða glúkósa
í sömu röð. Tilfærslur samsvarandi kolefnis við að fara í II frá lib voru -4,4 og plús 7,3 ppm, sem benti til þess að glúkósýlhluti í II væri tengdur hýdroxýlhópnum við Cy' atóm.5)
Út frá ofangreindum niðurstöðum var efnasamband II staðfest sem dehýdródíkóniferýl alkóhól y'-O-^-D-glúkópýranósíð.
Efnasambönd IV og V voru einangruð sem myndlaust duft (IV, C29H36O14 • 5/2H2O; V, C29H36O14- 1/2H2O). IR litrófið benti til þess að hýdroxýlhópa (3400cm7), tvítengi (1634cm-1) og arómatískir hringir (1606 og 1518cm-1) væru til staðar. Við asetýleringu gáfu efnasambönd IV og V oktaasetötin ( IVa, Va), þar sem 1H-NMR litróf sýndu fimm alifatísk asetoxýlmerki og þrjú arómatísk asetoxýlmerki, í sömu röð. Efnasambönd IVa og Va voru auðkennd sem syringalide A 3'-aL-rhamnopyranoside octaacetat og ísósýringalid 3'-aL-rhamnopyranoside oktaacetat, í sömu röð með samanburði á (以 IR og 】H-NMR) við ósvikin sýni.6) The 'H- 13C-NMR litróf IV og V studdist við þessar byggingar (sjá tilraunaverkefni). Efnasambönd VI—XIII voru auðkennd sem (plús)-sprautur-esínól O-少-D-glúkópýranósíð (VI),2c) (plús)-pínoresinól O- jS-D-glúkópýranósíð (VII),7) liriodendrin (VIII),2Z,) 6-de-oxýkatalpól (IX),2c) 8-epiloganic acid (X),2fl) {{50} }hýdró-xýecdýson (XI),8) 8-hýdroxýgeraníól 1-0-D-glúkópýranósíða (XII) og syringín (XIII),2d) í sömu röð, með samanburði við ósvikin sýni
Tilraunakennt
Bræðslumark voru ákvörðuð á Mitamura örbræðslumarkstæki og eru óleiðrétt. Ljóssnúningur var mældur með JASCO DIP-140 stafrænum skautamæli. IR litróf voru skráð með Hitachi 279-30 IR litrófsmæli og útfjólubláu (UV) litróf með Hitachi 200-20 litrófsmæli. CD litróf voru skráð með JASCO J-20A CD litrófsmæli og massaróf (MS) með JEOL JMS-100. 'H-NMR og 13C-NMR litróf voru skráð með JEOL FX-90Q vél (89,55 og 22,5 MHz, í sömu röð).
Efnabreytingar eru gefnar upp á d (ppm) kvarðanum með tetrametýlsílan (TMS) sem innri staðal. Skammstafanir sem notaðar eru fyrir kjarnasegulómun (NMR) gögn eru sem hér segir; s, einhleypa; d, tvöfaldur; t, þríhyrningur; q, kvartett; br, breiður. Gasskiljun (GC) var keyrð á Shimadzu GC-4CM tæki með logajónunarskynjara. HPLC var framkvæmt á Hitachi 655A-11 vél. Kísilgel (Wako gel C-300) var notað fyrir súluskiljun. Kísilgel 60 F254 (Merck) forhúðaðar plötur voru notaðar fyrir TLC og uppgötvun var framkvæmd með því að úða 10 prósent H2SO4 fylgt eftir með upphitun.
Einangrun
Heilar plöntur afcistanche tubulosa(7 kg), safnað í desember 1986, í Karachi, Pakistan, voru dregin út með MeOH (20 1 x 2) undir bakflæði. Útdrátturinn var þykktur við lækkaðan þrýsting og leifin var leyst í vatni. Þessi sviflausn var dregin út með EtOAc mettuðu með vatni. Vatnslagið var sett í Diaion HP-20 (Nippon Rensui Co.) súlu og þvegið með H2O og síðan skolað með MeOH. MeOH elúatið (140 g) var litskiljað á pólýamíð C-200 (Wako Pure Chemical) súlu með því að nota H2O og síðan MeOH til að gefa tvo hluta (hluti 1, H2O elúat; hluti 2, MeOH elúat). Hluti 1 var þykkt til að gefa leif. Leifin var litskiljuð á kísilgelsúlu með því að nota CHCl3-MeOH-H2O endurtekið. Eftir endurtekna litskiljun á HPLC (súla, Develosil ODS-10, 20 x 250 mm; leysir; H2O-CH3CN eða H2O-MeOH), voru 10 efnasambönd einangruð [II (45mg), III (40mg), VI (35mg) ), VII (43mg), VIII (12mg), IX (8mg), X (10mg), XI (20mg), XII (10mg) og XIII (3,6mg)]. Brot 2 var meðhöndlað á sama hátt og brot 1 og gaf efnasambönd I (150 mg), IV (10 mg) og V (10 mg).
Tubuloside E (I)
Formlaust duft, [a]p3 —134.0 gráðu (c= 1.5, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C31H38O15 -3/2H2O: C, 54,98; H, 6,10. Fundið: C, 55,01; H, 5,98. IR cm-1: 3430,1732, 1634, 1608,1518. ]H·NMR (MeOH-4) 3: 1,07 (3H, d, J=6Hz, CH3 af ramnósa), 1,98 (3H, s, OAc), 2,72 (2H, t, J{ {37}}Hz, Ar-CH2~), 4,54 (1H, d, J=8Hz, Hl af glúkósa), 5.00 (1H, brs, Hl af ramnósa), 6,34 ( 1H, d, J= 16Hz, Ar-CH=CH-), 6,5x6,8 (3H, arómatískt H), 6,80 (2H, d, J-9Hz, H{ {65}}; H-5'), 7,46 (2H, d, J=9Hz, H-2; H-6Z), 7,66 (1H, d, J= 16 Hz, Ar—CH=CH—). 13C-NMR: Tafla L
Dehydrodiconiferyl Alcohol y^-O-^-D-GIucopyranoside (II)
Formlaust duft, [a]^5 —7,4 gráður (c= 1.6, MeOH). IR cm"1: 3430, 1614, 1522, 1502. UV klst nm: 227 (sh), 280. H·NMR (DMSO-rf6) J: 3,74, 3,80 (3H hver, s, OCH3), 5,45 (1H, d,丿=6Hz, Ha), 6,17 (1H, dt,丿=16, 7Hz, H-#), 6,58 (1H, d〃= 16Hz; H-az) , 6,7—7,1 (5H, m, arómatískt H). 13C-NMR: Tafla I.
Dehydrodiconiferyl Alcohol 4-Oj8-D-Glucopyranoside (III)
Formlaust duft, [a]^5 -56.4.(c= 1.1, MeOH). IR cm-1: 3400, 1604, 1566, 1502. UV 11 nm; 222, 277. XH-NMR (DMSO-(76) 6: 3,76, 3,82 (3H hver, s, OCH3), 5,52 (1H, d, J-7 Hz, Ha), 6,18 (1H, dt, J=16, 7 Hz, H-^), 6,49 (1H, d,<7=16 hz,="" h-"),="" 6.7—7.2="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="">
Syringalide A 3'-(xL-Rhamnopyranoside (IV)
Formlaust duft, endaþarm. Reiknað fyrir C29H36O14 • 5/2H2O: C, 56,11; H, 5,94. Fann: C, 56,4{{107}}; H, 6,04. IR cm— prósent 3400, 1606, 1518. 】H・NMR (MeOH-J4) d: 1,15 (3H, d, J-6 Hz, CH3 af rhamnósa), 2,90 (2H, t, J{{27) }} Hz, Ar-CH2-), 4,46 (1H, d, J=8Hz, Hl glúkósa), 5,27 (1H, brs, Hl rhamnósa), 6,35 (1H, d, J-16Hz, Ar—CH=CH—), 6,6—7,3 (3H, arómatískt H), 7,68 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH {{54 }} CH-). 13C-NMR (CD3OD) 8: 130,6 (Cl), 116,1 (C-2), 130,8 (C-3, 156,6 (C-4), 116,1 (C-6 ), 72,1 (Ca, rham-2, 3), 36,2 (C-8), 127,6 (Cr), 114,6 (C2), 149,6 (C・3'), 146,6 (C{{94) }}'),116,4 (C-5'), 123,1 (C-6'),168,2 (C・a'),115,2 (C书),147.0 104.0 (glú-1), 76,0
(glú-2), 81,5(glú-3), 70,3 (glú-4), 75,9 (glú-5), 62,3 (glú-6), 102,8 (rham-1), 73,7 (rham-4), 70,5 (rham-5), 18,3 (rham-6).
Ísósýringalid S^aL-Rhamnópýranósíð (V)
Formlaust duft, endaþarm. reiknað fyrir C29H36O14-1/2H2O: C, 56,31; H, 5,96. Fundið; C, 56,4{{70}}; H, 6,04. IR 唸cm-1: 3420, 1608, 1518. XH-NMR (MeOH-J4) d: 1,09 (3H, d,丿=6Hz, CH3 af ramnósa), 2,80 (2H, t, J-6 Hz, Ar-CH2-), 4,40 (1H, d, J=8Hz, Hl glúkósa), 5,23 (1H, br s, Hl rhamnósa), 6,37 (1H, d, J-18Hz, AsCH=C旦'一),6,6—7,2 (3H, arómatískt H), 7,71 (1H, d, 丿=18Hz, Ar -CH=CH-y 13C-NMR (CD3OD) S: 131,4 (Cl), 116,3 (C-2), 144,5 (C-3X 146,0 (C-4 ), 117,0 (C-5), 121,2 (C-6), 72,2 (Ca), 36,5 (C/), 127,1 (Cr), 116,8 (C-2\ 69, 131,2 (C-3\ 5'),161,2 (C-4'),168,2 (CH), 114,7 (C-^), 147,5 (Cy), 104,1 (glú-1), 76,1 (glú-2), 81,5 (glú-3),
70,2 (glú-4), 75,9 (glú-5), 62,3 (glú-6), 102,8 (rham-1), 72,1 (rham-2, 3 ), 73,7 (rham-4), 70,6 (rham-5), 18,4 (rham-6).
(plús)-Syringaresinol Oj?-D-Glucopyranoside (VI)
Formlaust duft, [a]g5 —14.4.(c=0.1, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C28H36O13: C, 57,93; H, 6,25. Fundið: C, 58,01; H, 6,26. IRv^cm-1: 3430, 1600, 1518. 】H・NMR (DMSO"6).: 3.78 (12H, s?OCH3 x 4), 6.60, 6.66 (2H hver, s, arómatísk H).
(plús)-Pinoresinol O-^-D-Glucopyranoside (VII)
Formlaust duft, [a]^5 plús 38,9 gráður (c=0.6, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C26H32O11T/2H2O: C, 58,97; H, 6,28. Fundið: 58,94; H, 6,29. IR cm-1: 3425, 1606, 1516. 】H-NMR (C5D5N) W 3,77, 3,80 (3H hver, s, OCH3), 6,9—7,7 (6H, m, arómatísk H).
Liriodendron (VIII)
Litlausar nálar (MeOH), mp 255一257 gráður, [a]p5 -9.2 gráður (c=L3, pýridín). IR cm-1: 3400, 1598, 1510. XH-NMR (DMSO/6)<5: 3.78="" (12h,="" s,="" och3x4),="" 6.67="" (4h,="" s,="" aromatic="">
6-Deoxycatalpol (IX)
Litlausar nálar (MeOH), mp 204—206 gráður, [a]p5 -50.1 gráðu (c=0.7, MeOH). Anal, Calcd for C15H22O9: C, 52,02; H, 6,40. Fundið: C, 52,12; H, 6,41. IR 唸cm-1: 3400, 1658. 】H・NMR (D2O) 3:
l. 3—1,9 (1H, m, H-6), 2,1—2,7 (3H, m, H-5, H-6, H-9), 3,65 (1H, s-líkt, H-7), 3,90, 4,35 (2H, ABsystem, J=13Hz, H-10), 4,92 (1H, d, J=7 Hz, arómerískt H), 5,10 (1H, dd, J=6, 4Hz, H-4), 5,12 (1H, d, J-10Hz, Hl), 6,38 (1H, dd, 1Hz, H-3).
{{0}}Epiloganic Acid (X) Litlausar nálar (MeOH), mp 147一149 gráður, [a]p5 — 135.0 gráður (c= 1.0, pýridín ). endaþarm. reiknað fyrir C16H24O10H2O: C, 48,73; H, 6,65. Fundið: C, 48,60; H, 6,70. IR v;cm-1: 3400, 1680, 1640, 1430. 】H・NMR (C5D5N)<5: 1.18="" (3h,="" d,="" j="7Hz," ch3),="" 2.2—2.5="">
m, H-6), 2,60 (1H, m, H-8), 3,08 (1H, dt, J=3, 8,5Hz, H-9), 3,58 ( 1H, m, H-5), 5,40 (1H, d, J=7,5Hz, anómerískt H), 5,91 (1H, d〃=3Hz, Hl), 7,92 (1H) , s, H-3).
20-Hydroxyecdyson (XI)
Kristallað fast efni, mp 241一242 gráður, [a]p5 plús 70.0 gráður (c= LI, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C27H44O7: C, 67,47; H, 9,23. Fundið: C, 67,28; H, 9,18. IR cm-1: 3440, 1646. XH-NMR (C5D5N) 1,06 (3H, s, H-19), 1,20 (3H, s, H-18), 1,36 (6H, s, H-26, H-27)? 1,58 (3H, s, H-21), 6,24 (lH,d, J=2Hz, H-7). 13C-NMR (C5D5N): 38,0 (Cl),
68,2 (C-2, C-3), 32,5 (C・4), 51,5 (C-5), 203,7 (C-6), 121,8 (C-7), 166,3 (C-8), 34,6 (C-9), 38,8 (C-10), 21,3 (C-ll), 31,9 (C {{30}}), 48,2 (C-13), 84,4 (C-14), 32,1 (C-15), 21,6 (C-16 ), 50,2 (C-17), 18,0 (C-18), 24,6 (C-19), 77,0 (C-20), 21,8 (C-21 ), 77,7 (C-22), 27,6 (C-23), 42,7 (C-24), 69,8 (C-25), 30,1 (C-26 , 27).
8-Hydroxygeraniol 1-^-D-GIucopyranoside (XII)
Litlausar nálar (MeOH), mp 58—60 gráður, [a]^5 —40,1.(c=L2, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C16H28O71/2H2O: C, 56,29; H, 8,56. Fundið: C, 56,40; H, 8,50. IR cm"1: 3350, 1670, 1446. XH-NMR (C5D5N)<5: 1.72,="" 1.59="" (3h="" each,="" s,="" ch3),="" 2.04="" (4h,="" brm,="" h-4,="" h-5),="" 4.80="" (1h,="" d,="" j="7.5Hz," anomeric="" h),="" 5.56="" (2h,="" brt,="" j="7Hz,">
Syringin (XIII)
Litlausar nálar (MeOH), mp 188一189 gráður, [a]^5 — 15,3 gráður (c=0.4, MeOH). endaþarm. reiknað fyrir C17H24O9: C, 55,13; H, 6,53. Fundið: C, 54,83; H, 6,50. IR cm-1: 3400, 1592, 1514. 'H-NMR (DMSO/6)W 3,78 (6H, s, OCH3 x 2), 6,3—6,5 (2H, m, —CH=CH—), 6,72 (2H, s, arómatískt H).
Asetýlering á I Efnasambandi I (50 mg) var leyst upp í pýridíni (1 ml) og ediksýruanhýdríði (1 ml) og látin standa við stofuhita yfir nótt. Hvarfblöndunni var hellt í ísvatn og síðan dregin út með EtOAc. EtOAc útdrátturinn var þykktur við lofttæmi og leifin var litskiljuð á kísilgelsúlu með því að nota bensen-asetón (5:1) til að gefa oktaasetatið (la) (35 mg). IR cm"1: 1760, 1638, 1604, 1508. iH-NMR(CDC13)(5: 1,02 (3H, d, J=6Hz, CH3 af rhamnósa), 1,87, 1,95, 2,02 (3H hver, s, OAc), 2,10 (6H, s, OAc x 2), 2,27, 2,28, 2,31 (3H hver, s, Ar-OAc), 2,90 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH{ {43}}), 6,38 (1H, d, J=16Hz, AR~CH=CH-), 6,80—7,15 (3H, m, arómatískt H), 7,24 (2H, d, J-9 Hz, H-3\ H・5'), 7,55 (2H, d,丿=9Hz, H-2, H-6), 7,72 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-).
Asetýlering II og III
Efnasambönd II og III (20 mg hvor) voru asetýleruð á sama hátt og lýst er fyrir efnasamband I og gáfu hexasetötin [Ila (12mg), Illa (15mg)]. Ila: IR 唸顋 cm-1: 1754, 1608, 1506. 】H・NMR (CDC13) 5: 2,01, 2,03, 2,09 (3H hver, s, OAc), 2,06 (6H, 2, OAc) ), 2,30 (3H, s, OAc), 3,84 (3,95 (3H hver, s, OCH3), 5,54 (1H, d, 丿=6Hz, Ha), 6,05 (1H5 dt, J{{38} }, 7Hz, H-^), 6,53 (1H, d, «/= 16Hz, H-a'), 6,8x7,1 (5H, m, arómatísk H). Illa: IR v^cm 1: 1760, 1604, 1516. 】H-NMR (CDC13)<5: 2.05="" (9h,="" s,="" oac="" x="" 3),="" 2.08="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.11="" (3h,="" s,="" oac),="" 3.80,="" 3.92="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 5.51="" (1h,="" d,="" j="7Hz," h-a),="" 6.14="" (1h,="" dt,="" j="16," 7hz,="" h-#),="" 6.62="" (1h,="" d,丿="16Hz,">
(5H, m, arómatískt H).
Asetýlering á IV og V
Efnasambönd IV og V voru asetýleruð á sama hátt og lýst er fyrir efnasamband I og gáfu oktaasetötin [IVa, Va]. IVa: IR 唸児 cmT: 1754, 1636, 1514. 】H・NMR (CDC,) W 1,03 (3H? d, J=6Hz, CH3 af rhamnósa), 1,87, 1,94, 1,99 (hvert) s, OAc), 2,09 (6H, s, OAcx2), 2,28 (6H, s, OAcx2), 2,30 (3H, s, OAc), 2.86 (2H, t, J=6 .6Hz, Ar■-CH?—), 3,67 (2H, t, J=7,2Hz Ar-CH2~CH2-), 6,35 (1H, d, J=16Hz , AsCH=CU—), 6,87—7,35 (3H, m, Ar—7,09 (4H, q, J=8,6Hz, A2/B2/gerð), 7,65 (1H, d, J =16Hz, Ar CH=CH ). Va: IR cm-1: 1750, 1636, 1608, 1514. ^-NMR (CDC13) 1,03 (3H, d,<7= 6="" hz,="" ch3="" for="" rhamnose),="" 1.87,="" 1.94,="" 2.02="" (3h="" each,="" s,="" oac),="" 2.09="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.28="" (6h,="" s,="" oac="" x="" 2),="" 2.31="" (3h,="" s,="" oac),="" 2.86="" (2h,="" t,="" j="6.6" hz,="" ar-ch2-),="" 3.73="" (2h,="" t,=""><7=6.6 hz,="" ar="" ch2-ch2-),="" 6.34="" (lh,d,="" j="16" hz,="" ar—ch="" —="" ch—),="" 6.78—7.20="" (3h,="" m,="" ar—h),="" 7.31="" (4h,="" q,=""><7=8.5>
A2zB/gerð), 7,71 (1H, d, «/=16Hz, Ar-CH=CH ).
Metanólgreining á I
Efnasamband I (u.þ.b. 1 mg) var kælt með bakflæði með metanólískum 5% CH3COC1 (2 ml) í 30 mín., og síðan var hvarfefnið gufað upp í lofttæmi. Tilvist metýl p-kúmarats og 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhóls í leifinni var greint með TLC [CHCl3-MeOH (10:1)] og HPLC [dálki, Develosil ODS -7 (4,6 x 250 mm); leysir, 55 prósent MeOH; skynjari (UV), 220 nm; flæðihraði, 1,0 ml/mín]. Metýl p-kúmarat; Rf 0,82, ;R (mín) 8,8, 3,4-díhýdroxýfenetýlalkóhól; 0,31, tR (mín.) 3,2.
Sýra vatnsrof IA
lausn af efnasambandi I (2 mg) í 10 prósent H2SO4 (1 ml) var hituð í sjóðandi vatnsbaði í 30 mín. Lausnin var látin fara í gegnum Amberlite IR-45 súlu og þétt til að gefa leif, sem var minnkað með natríumbórhýdríði (ca. 3 mg) í 1 klst. Hvarfblandan var látin fara í gegnum Amberlite IR-120 súlu og þétt þar til hún varð þurr. Bórsýra var fjarlægð með eimingu með MeOH og leifin var asetýleruð með ediksýruanhýdríði (1 dropi) og pýridíni (1 dropi) við 100 gráður í 1 klst. Hvarfefnin voru gufuð upp í lofttæmi. Glucitól asetat og ramnitól asetat greindust í hlutfallinu 1 á móti 1 úr efnasambandi I með GC. Ástand: súla, 1,5 prósent OV-17, 3 mm x 1,5 m; súluhiti, 180 gráður; burðargas, N2 (30ml/mín). tR (mín): 2,0 (ramnitól asetat), 5,5 (glúsítól asetat).
Ensímvatnsrof á II og III efnasambandi II
(13 mg) eða III (40 mg) var vatnsrofið með sellulasa (40 mg) í vatni (1 ml) í 2 klst við 37 gráður. Hvarfblandan var dregin út með EtOAc. EtOAc útdrátturinn var þéttur í lofttæmi til að gefa leifina, sem var litskiljuð á HPLC [dálki, Develosil ODS-10 (20 x 250 mm); leysir. II: H2O-CH3CN (77,5:22,5); III: H2O-CH3CN (80:20); skynjari (UV), 205 nm; flæðihraði, 6,0 ml/mín] sem gefur lib (3,3 mg), Ilb (5,7 mg). lib: [a]^5 plús 34,8 gráður (c=0.3, MeOH). CD (c=3,3mg/10ml, MeOH) [0]25 (nm): 1740 (330), 15200 (283), 14100 (270), 0 (247), - 16700 (232) ). IR 唸E; cm"1: 3380, 1606, 1520, 1500. UV nm: 276. MS m/z (prósent): 358 (M plús, 53), 340 (M plús -H2O, 100), 338 (58), 325 ( 47), 310 (23), 162 (41), 151 (36), 137 (59). XH-NMR (asetón-J6)<5: 3.55="" (1h,="" brt,=""><7=6hz, h-g),="" 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3),="" 4.19="" (2h,="" brd,="" j-5hz,="" h-yz),="" 5.56="" (1h,="" d,="" j="6," 5="" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,=""><7=16, 5="" hz,="" h-#),="" 6.56="" (1h,="" brd,="" j="16Hz," hh),="" 6.7—7.1="" (5h,="" m,="" aromatich).="" 13c-nmr:="" tablel.iiib:="" [a]-31.6°="" (c="0.6," meoh).="" cd="" (c="2.28mg/lOml," meoh)="" [0]25="" (nm):="" 2200="" (330),="" 0="" (310),="" -10990="" (283),="" -11300="" (270),="" 0="" (242),="" 5650="" (232).="" 0-nmr="" (acetone-j6)=""><5: 3.84,="" 3.87="" (3h="" each,="" s,="" och3="" x="" 2),="" 4.19="" (2h;="" brd,="" j="5Hz," h"'),5.56="" (1h,="" d,丿="6.5" hz,="" h-a),="" 6.23="" (1h,="" dt,丿="16," 5="" hz,="" h・#),="" 6.52="" (1h,="" d,="" j="16" hz,="" h-az),="" 6.7一7.1="" (5h,="" m,="" aromatic="" h).="" 13c-nmr:="" table="" i.="" the="" ir="" and="" uv="" spectra="" were="" similar="" with="" that="" of="">
ViðurkenningVið erum þakklát prófessor A. Ueno og Dr. T. Miyase, University of Shizuoka, fyrir mælingar á NMR og CD litróf, og fyrir dýrmætar tillögur þeirra, og Dr. M. Kikuchi, Tohoku College of Pharmacy, fyrir að veita ekta sýnishorn.
Tilvísanir og athugasemdir
1) H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani og M. Ahmad, Chem. Pharm. Bull., 35,3309 (1987).
2) a) H. Kobayashi og J. Komatsu, Yakugaku Zasshi, 103, 508 (1983); b) H. Kobayashi, H. Karasawa, T. Miyase og S. Fukushima, Chem. Pharm, Bull., 33, 1452 (1985); c) Idem, ibid., 33, 3645 (1985); d) H. Karasawa, H. Kobayashi, N. Takizawa, T. Miyase og S. Fukushima, Yakugaku Zasshi. 106, 721 (1986).
3) HD Ludemann og H. Nimz, Die Makromolekulare Chemie., 175, 2393 (1974).
4) a) H. Achenbach, J. Grob, XA Dominguez, G. Cano, JV Star, LC Brussolo, G. Munoz, F. Salgado og L. Lopez, Phytochemistry. 26, 1159 (1987); b) AN Binns, RN Chen, HN Wood og DG Lynn, Proc. Natl. Acad. Sci. Bandaríkin, 84, 980 (1987); c) DG Lynn, RH Chen, KS Manning og HN Wood, ibid., 84, 615 (1987).
5) T. Deyama, T. Ikawa, S. Kitagawa og S. Nishibe, Chem. Pharm. Bull., 35, 1803 (1987).
6) M. Kikuchi, Y. Yamauchi og F. Tanabe, Yakugaku Zasshi, 107, 350 (1987).
7) M. Chiba, S. Hisada, S. Nishibe og H. Thieme, Phytochemistry, 19, 335 (1980).
8) a) H. Hikino, Y. Hikino, Fortschritted. Chem. Org. Naturst., 28, 256 (1970); b) RW Miller, J. Clardy, J. Kozlowski, KL Mikolajczak, RD Plattner, RG Powell, CR Smith, D. Weisleder og Q.-T. Zheng, Planta Medica, 1985, 40.
