Cistanche Tubulosa verndar dópamínvirkar taugafrumur með stjórnun á apoptosis og glial cell-afleiddum taugakerfisþáttum: in vivo og in vitro-Ⅱ

Hegðunarpróf

Sundpróf (Zhu o.fl., 2014)

Samhæfing líkamshreyfinga hjá músum var mæld með sundprófi. Mýsnar voru settar hver fyrir sig í vatnsgeymi (25 cm á hæð og 10 cm í þvermál) sem innihélt 10 cm af vatni og prófaðar í rólegu umhverfi til að skrá kyrrstöðutíma þeirra yfir 5 mín.

Opið vettvangspróf (Kawai o.fl., 1998)

Hreyfivirkni var mæld með því að nota Open field prófið. Mýsnar voru prófaðar í rólegu og dauft upplýstu umhverfi og settar hver fyrir sig í 30 cm × 30 cm × 15 cm gagnsæ akrýlílát með 6 cm × 6 cm aðskilnaðarrist neðst. Mýsnar fengu 10 mínútur til að laga sig að umhverfinu og síðan var flutningur á ristnúmeri og uppeldistíðni einstakra músa mæld fimm sinnum í röð til að fá meðalgildi.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Sýnataka úr heilavefjum

Fyrir vefsýni voru mýsnar gefnar að vild með ókeypis aðgangi að vatni og fengu lyfjainngrip í 14 daga samfleytt. Fjórar mýs í hverjum hópi voru valdar og afhausaðar fljótt. SN (Bregma: -2,75 mm -2,92 mm) frá hverju dýri var einangrað og sett á ís. Heilavefur var skolaður með 0,9% ísköldum natríumklóríðlausn til að fjarlægja blóð og þurrkaðir á síupappír áður en þær voru geymdar við -80◦C. Fjórar mýs úr hverjum hópi voru svæfðar í kviðarhol og brjóst þeirra opnuð. Innrennslisnál var síðan sett í vinstri slegil hvers dýrs. Til að fjarlægja blóð úr blóðrásarkerfinu var hægra gáttaviðhengið skorið og dýrið var gefið með 4◦C venjulegu saltvatni þar til lifrin varð föl til að tryggja stöðugt gegnflæði. Þegar frárennsli hægra gáttar varð tært, var hvert dýr blandað með 4% paraformaldehýð festaefni. Eftir gegnflæðið var heilavefur hvers dýrs síðan krufður vandlega og festur eftir í 4% paraformaldehýði í 24 klst. Fastir heilavefir voru síðan skolaðir undir rennandi vatni, þurrkaðir í röð af etanóllausnum og hreinsaðir í xýlenlausn. Í kjölfarið fylgdi paraffínídýfing og innfelling.

Breytingar á DA magni mælt með HPLC

Nanóduftið SN úr hverjum hópi var sett í ísbað sem innihélt 0,9% natríumklóríðlausn (1:9 hlutfall). Heilavefurinn var einsleitur með því að nota úthljóðsfrumuröskun og skilinn í skilvindu við 1200 rpm í 20 mínútur við 4◦C til að fá ofanvatnið. Fyrir HPLC var Hypersil AA-ODS súla (2,1 mm × 200 mm, 5 µm) við 30◦C súluhitastig notuð. Flúrljómunargreining var framkvæmd við 280 nm λex og 340 nm λem. Inndælingarrúmmálið var 10 µL.

Tjáning á TH, GDNF, GFR 1 og Ret greind með ónæmisvefjaefnafræði

Parafínhlutar (5 µm þykkir) af einstökum heilavef voru einangraðir úr hverju dýri og settir í 40◦C heitt vatnsbað til að fletja út og festast við glerglas. Allar vefglærurnar voru ræktaðar í 60◦C ofni í 3–6 klst., fylgt eftir með xýlenvaxun, hallandi etanólþurrkun og mótefnavaka endurheimt með því að rækta í sítrónusýrujafna og hita í örbylgjuofni í 20 mínútur. Vefglærurnar voru síðan ræktaðar í 3% H2O2 lausn við stofuhita í 10 mín. Eftir að hafa verið þvegið þrisvar sinnum í PBS, voru vefskírnar ræktaðar með venjulegu sermi í lokuðu hólfi við stofuhita í 20 mín. Ónæmisvefjaefnafræðileg litun fór fram samkvæmt leiðbeiningum framleiðanda. Motic Med 6.0 myndgreiningartæki var notað til að reikna út gildi samþættrar ljósþéttni í jákvætt lituðu frumunum.

Western blotgreining í heilavefjum músa

Þessi rannsókn var metin próteintjáningu týrósínhýdroxýlasa (TH), GDNF, GFR 1, Ret, Bcl2 og Bax. Heilalýsatið úr hverjum hópi var einsleitt í 3{{10}} mín á ís, fylgt eftir með lághitaskilvindu, 20,000 rpm, við 4 ◦C í 5 mín til að safna ofanvatninu. Próteinsýnin voru aðskilin við stöðugan þrýsting með því að nota 10% SDS-PAGE hlaup eins og lýst er hér að ofan. Aðal mótefnastyrkur: TH 0,15 mg/ml, GDNF 0,5 mg/ml, GFR 1 0,8 mg/ml, Ret 0,63 mg/ml, Bcl-2 0,34 mg/ml og Bax 0,11 mg/ml. Aðferðin var sú sama og að ofan.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA FOR ANTI ALD AND-ALZHEIMER PHGS75% ECH 30% ACT 12%

Tölfræðigreining

Þessi rannsókn notaði SPSS 20.0 tölfræðihugbúnað fyrir gagnavinnslu og greiningu. Færugildi voru gefin upp sem meðaltal ± staðalfrávik (¯x ± S). ANOVA var notað fyrir einþátta gagnagreiningu. LSD eða Games-Howell prófið var notað til að bera saman hópana. P< 0.05 (or P < 0.01) was considered as a statistically significant difference.

NIÐURSTÖÐUR

Virku efnisþættirnir í C. tubulosa Nanopowder

Á bilinu 200–400 nm skönnun var ECH í C. tubulosa og VER í 330 nm með hámarks frásogstopp, sem kom fram innan 20 mín. ICA hafði hámarks frásogstoppa við 270 nm og birtist eftir 20 mínútur (Mynd 1A). Niðurstöðurnar sýndu að neikvæðu sýnin trufluðu ekki uppgötvunina (Mynd 1B). Sýnin og samanburðarhópurinn höfðu sömu litskiljunartoppa og neikvæða sýnið hafði engan. Þetta sýndi að önnur innihaldsefni sýnisins trufluðu ekki efnisþáttinn sem verið var að mæla. Þar að auki geta þrír þættirnir og aðliggjandi toppar náð grunnlínu aðskilnaðar og aðskilnaðarstigið var meira en 1,5.

C. tubulosa Nanopowder Minnkað MPP+ -Valdi frumueiturhrif í MES23.5 frumum

Lífvænleiki MES23.5 frumna minnkaði marktækt með auknum styrk MPP+. Mynd 2F sýnir marktæk frumudrepandi áhrif mismunandi styrks MPP+.

C. tubulosa nanopowder minnkaði MPP+-framkallað frumueiturhrif og jók lífvænleika MES23.5 frumna. Mynd 2G sýnir að C. tubulosa nanopowder skammtar upp á 10–250 µg/mL höfðu skammtaháð verndandi áhrif á MPP+-meðhöndlaðar MES23.5 frumur.

Frumufræðileg áhrif C. tubulosa Nanopowder

Venjulegar MES23.5 frumur höfðu góða frumuviðloðun og voru snældalaga með skýrum frumumörkum og taugamótum. MPP+-skemmdar MES23.5 frumur sýndu lélega viðloðun og rýrnun og margar voru stöðvaðar í fjölmiðlum með samdrættar taugamót. Þessar frumur voru samansafnaðar, minnkaðar og kringlóttar með lofttæmum inni og kjarnarnir sundruðust eða hrundu saman. C. tubulosa nanopowder í mismunandi skömmtum bætti frumugerð MES23.5 frumna í mismunandi gráðum með því að bæta frumuviðloðun og taugamótaúthreinsun burðarhópsins. MES23.5 frumur í háskammta C. tubulosa meðferðarhópnum sýndu formgerð sem var svipuð og venjulega viðmiðunarhópnum (myndir 2A–E).

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á TH tjáningu og apoptosis í frumunum

Mynd 3 sýnir marktæka minnkun á tjáningu TH próteina í burðarefnishópnum. Tjáning TH próteina jókst misjafnlega í hópum sem fengu mismunandi skammta af C. tubulosa. Hins vegar sýndi LSD prófið að enginn marktækur munur var á hópunum þremur sem fengu meðferð.

Mynd 4 sýnir niðurstöður apoptosis mats með því að nota frumuflæðismælingu. Hlutfall apoptosis í burðarefnishópnum var marktækt hærra en í hinum hópunum. Frumur sem voru meðhöndlaðar með mismunandi skömmtum af C. tubulosa nanopowder sýndu mismikla lækkun á apoptotic hraða samanborið við burðarefnishópinn. Frumur í mið- og háskammta meðferðarhópnum fyrir C. tubulosa höfðu mestu bata á apoptotic tíðni samanborið við aðra C. tubulosa meðferðarhópa. LSD próf sýndi að enginn marktækur munur var á milli tveggja meðhöndluðu hópanna en marktækur munur á lágskammta hópnum líka.

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á Bcl2/Bax próteintjáningu í frumum

Mynd 5 sýnir að tjáning Bcl2 próteins í frumum burðarhópsins var marktækt minni samanborið við venjulega samanburðarhópinn. Aftur á móti var tjáning Bax próteins í frumum úr burðarefnishópnum marktækt meiri en í venjulegum samanburðarhópi. C. tubulosa meðferðarhópar sýndu aukna tjáningu Bcl2 próteina og minnkaða tjáningu Bax próteina í MPP+-meðhöndluðum MES23.5 frumum. Á milli þriggja meðhöndluðu hópanna var marktækur munur á LSD prófinu. Þessi áhrif voru skammtaháð.

Hegðunarpróf

Niðurstöður sundprófsins bentu til þess að mýsnar í ökutækjahópnum hefðu tiltölulega langa kyrrstöðu, sem jókst með tímanum. Á degi 14 höfðu mýsnar í burðarefnishópnum marktækt lengri kyrrstöðu en mýsnar í venjulegum samanburðarhópnum. Kyrrstöðutími músanna í

lágskammtinnC. tubulosaMeðferðarhópurinn var ekki marktækur frábrugðinn hópnum hjá músunum í burðarefnishópnum. Hins vegar var kyrrstöðutími músanna í háskammta C. tubulosa meðferðarhópnum marktækt minni en hjá músunum í burðarefnishópnum.

Niðurstöður Open field prófsins benda til þess að eftir MPTP-framkallaðan skaða í músunum hafi mýsnar í burðarefnishópnum sýnt marktæka minnkun á getu þeirra til sjálfkrafa virkni eins og sést af uppeldistíðni. Eftir 14-dags gjöf áC. tubulosa nanópúður, mýsnar í miðlungs- og háskammta meðferðarhópunum höfðu marktækt hærri uppeldistíðni samanborið við mýsnar í burðarefnishópnum (myndir 6A, B).

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á DA innihald í músum

Breytingar á DA innihaldi SN voru ákvarðaðar með HPLC. Í ljós kom að DA-innihald í heila ökutækjahópsins minnkaði verulega. DA innihald í heila PD músa í lágskammta C. tubulosa meðferðarhópnum var ekki marktækt frábrugðið músunum í burðarefnishópnum. Hins vegar,C. tubulosa meðferðjók DA gildi í heila PD músa á skammtaháðan hátt. Heili PD músa sem fengu háskammta C. tubulosa hafði marktækt hærra DA innihald en heili músa í burðarefnishópnum (Mynd 6C).

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á TH tjáningu í músum

Fjöldi TH-jákvæðra frumna og magn TH próteintjáningar í SN PD-músa af völdum MPTP var lægri samanborið við mýs í samanburðarhópnum. Eftir C. tubulosa meðferðina jókst fjöldi TH-jákvæðra frumna og magn TH próteintjáningar í SN PD-músa af völdum MPTP, með marktækum mun á háskammta C. tubulosa meðferðarhópnum og burðarefnishópnum. með LSD prófi; og það var marktækur munur á hópunum þremur sem fengu meðferð (Mynd 7).

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á próteintjáningu GDNF og viðtaka þess, GFR 1 og Ret í músum

Próteintjáning GDNF og viðtaka þess, GFR 1 og Ret, í jákvætt lituðu frumunum, var metin með ónæmisvefjafræði. Western blot greining var notuð til að meta prótein tjáningarstig í SN mismunandi hópa músa. Niðurstöðurnar fyrir mismunandi hópa voru svipaðar með því að nota tvær greiningaraðferðirnar. Tjáning GDNF og viðtakapróteina þess, GFR 1 og Ret, í jákvætt lituðum frumum í SN músanna í burðarefnishópnum, var marktækt minni en í músunum í eðlilega samanburðarhópnum. Mismunandi skammtar af C. tubulosa meðferð jók fjölda GDNF-, GFR 1- og Ret-jákvæðra frumna (myndir 8A–S).

Próteintjáning GDNF, GFR 1 og Ret í SN músanna í burðarefnishópnum var marktækt minni en í músunum í samanburðarhópnum. Aukinn meðferðarstyrkur afC. tubulosa nanopoweraukið tjáningu þessara próteina verulega. Próteintjáning GDNF, GFR 1 og Ret í SN músanna í háskammta C. tubulosa meðferðarhópnum var marktækt meiri en í músunum í burðarefnishópnum (P< 0.01; Figures 8T, U). 

Áhrif C. tubulosa Nanopowder á próteintjáningu Bcl2/Bax í músum

Bcl2 prótein tjáning minnkaði marktækt og Bax prótein tjáning var verulega aukin í SN músa í burðarefnishópnum (P< 0.01) compared with the mice in the normal control group. High-dose C. tubulosa treatment significantly increased Bcl2 protein expression and significantly reduced Bax protein expression in the brains of the vehicle mice (P < 0.01; Figure 9). LSD test showed there was no significant difference between the middle-dose and high-dose groups but a significant difference between the low-dose group. 

UMRÆÐA

PD og Apoptosis

PD er taugahrörnunarsjúkdómur. Samkvæmt Zhang o.fl. (2005), er algengið 10,7% hjá kínverskum íbúum eldri en 55 ára og 1,67% hjá þeim eldri en 65 ára. Fjöldi PD-sjúklinga hefur aukist árlega með hröðun alþjóðlegrar öldrunar, sem leggur mikla fjárhagslega byrði á fjölskyldur sjúklinga og samfélagið í heild. Í heilanum taka dópamínvirkar taugafrumur aðallega þátt í myndun og seytingu DA. Þeir eru víða dreifðir í miðtaugakerfinu og staðsettir fyrst og fremst í SN (80%). TH er lykilhraðatakmarkandi ensímið fyrir DA myndun. Þannig dregur hömlun á TH virkni úr DA myndun (Huot og Parent, 2007). Helstu meinafræðilegar og lífefnafræðilegar breytingar á PD eru apoptosis dópamínvirkra taugafrumna í SN, marktæk minnkun á nigrostriatal DA og myndun Lewy bodies í dópamínvirkum taugafrumum (Dexter og Jenner, 2013). Orsök PD felur í sér tengda erfðaþætti, umhverfisþætti og öldrun taugakerfisins (Allam o.fl., 2005). Meingerð PD er enn óljós í nútíma læknisfræði. Síðan seint á sjöunda áratugnum hefur uppbótarmeðferð með levódópa verið notuð með góðum árangri til að meðhöndla PS og hefur verið viðurkennt sem mikil tímamót í PD meðferð. Hins vegar veldur langtímanotkun þessarar meðferðar aukaverkanir og meðferðin meðhöndlar ekki undirliggjandi orsakir PD (Del Sorbo og Albanese, 2008). Þess vegna eru virkar rannsóknir á nýjum lyfjum eða meðferðaraðferðum sem miða að vernd dópamínvirkra taugafrumna mikilvægar til að meðhöndla PS.

Í fyrri rannsóknum benti notkun á endanlega deoxýnukleótidýl transferasa-miðluðum dUTP nick-enda merkingu til þess að 0,6%–4,8% af dópamínvirkum taugafrumum í SN sjúklinga með PD sýndu frumudauða (Mochizuki o.fl., 1996). Rafeindasmásjárskoðun sýndi apoptótísk einkenni, þar á meðal litþéttingu og apoptotic líkama í dópamínvirkum frumum (Anglade o.fl., 1997). Tompkins o.fl. (1997) framkvæmdu útbyggingargreiningu á krufningu á heilavef úr sjúklingum með PD, AD og dreifðan Lewy-líkamssjúkdóm (DLBD). Þeir fundu apoptotic líkama í þéttu lagi SN í PD og DLBD sjúklingum, sem gefur óyggjandi vísbendingar um taugafrumufrumu í PD og tengdum sjúkdómum. Þess vegna er minnkun eða bæling á frumudauða í dópamínvirkum taugafrumum grundvallaratriði fyrir PD meðferð.

Fyrri rannsóknir sýndu að MPTP framkallaði PD-lík einkenni. MPTP fer yfir blóð-heila þröskuldinn og umbrotnar af gerð B mónóamínoxíðasum í stjarnfrumum. Því er síðan breytt í eitrað MPP+, sem safnast fyrir í hvatberum dópamínvirkra taugafrumna í gegnum próteininntöku DA flutningstækisins. Það myndar þannig umfram súrefni sindurefna sem hindra flókna I virkni hvatbera öndunarkeðjunnar og ATP nýmyndun. Þessir atburðir stuðla enn frekar að myndun sindurefna og oxunarálagsviðbrögðum og leiða að lokum til hrörnunar og dauða dópamínvirkra taugafrumna. Þess vegna notaði þessi rannsókn MPP+ til að koma á burðarefni in vitro í MES23.5 dópamínvirkum taugafrumum og MPTP til að örva burðarmús til gagnkvæmrar sannprófunar. Samkvæmt niðurstöðum MTT prófunarinnar dró MPP+ verulega úr lífvænleika MES23.5 frumna, sem bendir til þess að MPP+ hafi frumudrepandi áhrif á dópamínvirkar taugafrumum. Niðurstöðurnar sýndu einnig fram á að C. tubulosa jók tjáningu and-apoptotic próteina á áhrifaríkan hátt og hamlaði aukningu MPP+-framkallaðrar frumudauða.

PD og GDNF

GDNF er taugakerfisþáttur, sem var fyrst einangraður af Lin o.fl. (1993). Lin o.fl. (1993) sýndu einnig að GDNF hafði sérstök næringaráhrif á dópamínvirkar taugafrumur í miðheila rotta. GDNF, neurturin (NTN), persephin (PSP) og artemin (ART) mynda GDNF fjölskylduna. Þau eru byggingarlega svipuð og virkniskyld seytuprótein (Kotzbauer o.fl., 1996; Baloh o.fl., 1998; Milbrandt o.fl., 1998; Woodbury o.fl., 1998).

GDNF viðtakinn samanstendur af tveimur þáttum. Fyrsti þátturinn, GFR , er festur við ytri himnu glýkósýlfosfatidýlínósítóls (GPI) og festur við yfirborð connexins. Annar þátturinn er Ret próteinið. Rannsóknir hafa sýnt að til eru fjórar mismunandi gerðir af GFR: GFR 1, GFR 2, GFR 3 og GFR 4. GFR 1 er viðtaki GDNF með mikilli sækni (Onochie o.fl., 2000; Chen o.fl., 2001; Lindahl o.fl., 2001). Ret prótein er starfhæfur viðtaki GDNF. Homodimer sameindin GDNF binst beint við GFR 1 til að mynda fléttur og hefur samskipti við Ret, sem leiðir til dimerization og virkjun Ret. Vegna sjálffosfórunar Ret virkjar Ret nokkrar algengar TH-boðaleiðir. Í fjarveru Ret próteins veldur GDNF próteinfosfórun MAPK, PI-3 og PLC-, auk mRNA tjáningar og virkni C-fos í gegnum viðtakaprótein þess, GFR 1 (He et al., 2008).

Rannsóknir hafa sýnt að GDNF hafði sterkustu verndandi áhrif á dópamínvirkar taugafrumur (Rangasamy o.fl., 2010; Campos o.fl., 2012). Í ökutækjum sem nota MPTP og 6-hýdroxýdópamín (6-OHDA) til að valda skemmdum á dópamínvirkum taugafrumum, verndar GDNF dópamínvirkar taugafrumur með því að draga úr frumudauða og stuðla að axonal vexti til að framkalla aðgreining stofnfrumna (Lucas o.fl., 2012; Littrell o.fl., 2013). Lin o.fl. (1993) sýndu að GDNF stuðlaði sérstaklega að lífvænleika, aðgreiningu og axonal vexti dópamínvirkra taugafrumna til að stuðla að upptöku DA í taugafrumum. Rannsóknin sýndi einnig að GDNF kom ekki aðeins í veg fyrir bráða eiturhrif heldur létti einnig langtíma eiturverkanir MPP+ eða 6-OHDA í dópamínvirkum taugafrumum, og kom ennfremur í veg fyrir frumudauða í stressuðum eða skemmdum frumum (Yu o.fl., 2010). Að auki stuðlaði GDNF að útbreiðslu og aðgreiningu taugastofnfrumna í átt að dópamínvirkum taugafrumum í miðheila (Lindsay, 1995) til að bjarga dópamínvirkum taugafrumum frá afturgráðri hrörnun (Hong-Juan o.fl., 2011).

Rannsóknir hafa sýnt að GDNF tjáning í SN minnkaði verulega í dýrafarartækjum (Yang o.fl., 2010). Þetta bendir til þess að það gæti verið einn af leiðum meinmyndunar í PD rottum. Inndæling á 5-15 µg/d GDNF í hliðarhvolf eða striatum á MPTP-örvuðu burðardýri í þrjá mánuði í röð stuðlaði að nigrostriatal viðgerð á dópamínvirka kerfinu í burðardýrinu (Grondin o.fl., 2002). Rannsóknir á GDNF meðferð við PD í ökutækjum dýra hafa sýnt að inndæling GDNF í heila í mismunandi heilasvæði, svo sem SN, caudate nucleus og lateral ventricle, bætti hreyfitruflanir í tengslum við PD dýralíkön, þar með talið minni hreyfivirkni, vöðvastífleika og skjálfti (Grondin o.fl., 2002). Hins vegar getur GDNF ekki farið beint í gegnum blóð-heilaþröskuldinn. Þess vegna felur staðbundin heilainndæling á GDNF í sér verulega áhættu og erfiðleika við klíníska notkun. Enn er verið að rannsaka umsóknir um að kynna utanaðkomandi GDNF í gegnum örkúlur með stýrða losun, hylki með langvarandi losun og veirugen (Liang o.fl., 2010; Yang o.fl., 2010; Qiao o.fl., 2012). Í ljósi takmarkana ýmissa aðferða til að koma utanaðkomandi GDNF inn í heilann, eru taugavarnarefni sem stuðla að losun innræns GDNF mikilvæg fyrir klíníska notkun.

PD ogC. tubulosaNanópúður

PD er algengari hjá miðaldra fullorðnum og öldruðum. Kenningin um TCM telur að PD sé fyrst og fremst staðsett í heilanum og sé aðallega vegna lifrar- og nýrnaskorts, auk lífsorku og blóðskorts. Samkvæmt þessari kenningu ætti PD meðferð þannig að einbeita sér að því að endurlífga nýru og beinmerg.Yang o.fl. (2010)notaðar slembiraðaðar, tvíblindar og lyfleysu-stýrðar klínískar rannsóknir og komust að því að samsett meðferð með Madopar og nýrna-tonifying uppskriftum létti hreyfivandamál sjúklinga með PD. Meðferðarniðurstaðan var betri en ein meðferð með Madopar. Meðferðarárangur TCM einlyfjameðferðar eða lyfjaávísunar við PD hefur verið staðfest í PD dýralíkönum og klínískum notkunum. TCM forrit til að styrkja nýru og efla blóðrásina drógu úr skömmtum einlyfjameðferðar við PD með Madopar. Sumar rannsóknir hafa bent til þess að TCM hafi bætt einkenni PD og verndað dópamínvirkar taugafrumur, sem gætu hafa verið nátengdar eflingu innrænnar GDNF tjáningar (Hong-Juan o.fl., 2011; Qiao o.fl., 2012).

Nýra-tonifying efnasambandið sem notað var í þessari rannsókn,C. tubulosananópúður, innifalinnCistanche, epimedium, ogRhizoma polygonati. Nútíma rannsóknir benda til þess að efnasamsetningCistancheer ECH, sem verndar dópamínvirkar taugafrumur í SN í MPTP-völdum PD músum og hindrar minnkun DA og DA flutningsefnisins (Zhao o.fl., 2010). Að auki kemur það í veg fyrir 6-OHDA-framkallaða lækkun á DA og verndar striatal dópamínvirkar taugafrumur (Chen o.fl., 2007). Epimedium hindrar virkjun kaspasa-3 og gegnir taugaverndandi hlutverkum (Liu o.fl., 2011). Epimedium flavonoids stuðla á áhrifaríkan hátt að fjölgun og sérhæfingu taugastofnfrumna (Yao o.fl., 2010).

Í þessari rannsókn,C. tubulosananopowder andmælti aukningu MPP+-framkallað frumudauða á skammtaháðan hátt. Það bætti TH tjáningu verulega íin vitroburðarefni og hafði marktæk and-apoptotic áhrif í dópamínvirkum taugafrumum. MPTP-framkallaðar burðarmýsnar sýndu hegðunartruflanir og dró verulega úr TH tjáningu í miðheilavefjum og DA stigum, sem eru dæmigerð sjúkleg einkenni PD. Mismunandi skammtar afC. tubulosananópúður stytti kyrrstöðutímann, jók sjálfvirkni, bætti hegðunartruflanir, hækkaði DA gildi í heilanum og jók TH tjáningu í farartækjum. Þessar niðurstöður bentu til þessC. tubulosananópúður hafði verndandi áhrif í dópamínvirkum taugafrumum og bætti þar með hegðunarröskun ökutækja. Mismunandi skammtar afC. tubulosananópúður jók tjáningu GDNF próteins og viðtakapróteina þess í heila burðarmúsa. Stórir skammtarC. tubulosameðferðin stýrði Bcl2 tjáningu verulega og minnkaði Bax tjáningu, sem benti til þessC. tubulosananópúðurgæti stuðlað að GDNF tjáningu og seytingu í MPTP-skemmdum músarheila. Að auki gæti það haft taugaverndandi áhrif í dópamínvirkum taugafrumum og lágmarkað frumudauða taugafrumu í gegnum taugakerfisstuðningshlutverk GDNF.

Þessi rannsókn sýndi þaðC. tubulosananópúður hafði verndandi áhrif í dópamínvirkum taugafrumum í báðumin vitroogin vivoog aukin TH tjáning til að bæta DA innihald. Það bætti einnig hegðunarraskanir í MPTP-völdum burðarmúsum, stjórnaði próteintjáningu GDNF og viðtakapróteina þess í SN, og hafði and-apoptotic áhrif í PD músunum. Verkunarháttur sem liggur til grundvallar klínískum áhrifumC. tubulosananopowder í PD getur falið í sér að auka innihald innræns GDNF í heilanum og draga þar með úr skemmdum á dópamínvirkum taugafrumum.

NATURAL CISTANCHE TUBULOSA TIL AÐ BÆTTA KYNFERÐ PHGS75% ECH 30% ACT 12