tlhTungumál
Saga / Þekking / Innihald

Þekking

Cistanche Glyside Rg1 dregur úr öldrunarvöldum lifrartrefjum með því að hindra NOX4/NLRP3 bólgueyðandi í SAMP8 músum

May 29, 2023

Ágrip.Öldrunfylgir oftlifrarskaðaogbandvefssjúkdómur, sem leiðir að lokum til lækkunar ílifrarstarfsemi. Hins vegar vélbúnaður aflifrarskaða af völdum öldrunarogbandvefssjúkdómurer enn ekki að fullu skilið, eftir því sem við best vitum, og sem stendur eru engar árangursríkar meðferðarúrræði í boði fyrir öldrun lifrar. Tilkynnt hefur verið um að Cistanche Glycoside Rg1 (Rg1) hafi öflug áhrif gegn öldrun vegna öflugs andoxunar- og bólgueyðandi virkni. Þessi rannsókn miðar að því að kanna verndandi áhrif og undirliggjandi verkunarmáta Rg1 inlifrarskaða af völdum öldrunarogbandvefssjúkdómurinnöldrunarhraðamúsar sem hafa tilhneigingu til 8 (SAMP8) músa sem fengu meðferð í 9 vikur.

chinese herbs for liver aging

Smelltu hér til að fá frekari upplýsingar um Cistanche öldrunarmeðferð fyrir lifur

Vefjameinafræðilegar niðurstöður sýndu að uppröðun lifrarfrumna var röskuð, hrörnun eins og lofttæmi átti sér stað í meirihluta frumna og kollagen IV og TGF‑ 1 tjáningarstig, sem greind var með ónæmisvefjafræði, var einnig marktækt uppstýrt í SAMP8 hópnum. Rg1 meðferð batnaði verulegalifrarskaða og bandvefsmyndun af völdum öldrunar, og lækkaði marktækt tjáningarstig kollagens IV og TGF‑ 1. Að auki sýndu díhýdró etýlen litun og Western blotting niðurstöður að Rg1 meðferð dró verulega úr magni hvarfgjarnra súrefnistegunda (ROS) og IL-1 , og lækkaði tjáningarstig NADPH oxidasa 4 (NOX4), p47phox, p22phox, fosfórýleruð-NF-NF-κB, caspase-1, apoptosis-tengd flekkalíkt prótein sem inniheldur C-terminal caspase nýliðunarlén og NLR fjölskyldu pýrín lénið sem inniheldur 3 (NLRP3) inflammasome, sem var marktækt uppstýrt í lifrarvef aldraðra SAMP8 músa. Að lokum benda niðurstöður þessarar rannsóknar til þess að Rg1 geti minnkaðlifrarskaða og bandvefsmyndun af völdum öldrunarmeð því að draga úr NOX4-miðluðu ROS oxunarálagi og hamla NLRP3 bólgueyðandi virkjun.

chinese herbs for liver aging


Kynning

The number of individuals >Spáð er að 65 ára gömul um allan heim muni aukast úr 524 milljónum árið 2010 í ~1,5 milljarða árið 2050 (1). Aldraðir einstaklingar eru sérstaklega viðkvæmir fyrir þróunlangvinnir sjúkdómar, þar á meðallifrartrefjun(2).

Lifrartrefjun er kraftmikið ferli sem tengist stöðugri útfellingu og upptöku utanfrumuefnisins, aðallega fibrillar collagen (3), sem er oft fyrsta skrefið í byggingarfræðilegri röskun og truflun á starfsemi sem kemur í veg fyrir eðlilega starfsemi lifrarinnar (4). Ef ómeðhöndlað er getur lifrartrefjun leitt til langt gengið skorpulifur og lifraræxli (4). Safnaðar vísbendingar hafa bent til þess að næmi fyrir bandvefsmyndun í lifur og lifrarbólgu aukist verulega með aldri (5). Því er enn mikilvægt að rannsaka öldrun lifrar og tilheyrandi undirliggjandi aðferðir til að koma með nýjar aðferðir til að koma í veg fyrir öldrunartengda lifrartrefjun.7


Meingerð öldrunar er flókin. Undanfarin 40 ár eða svo hefur oxunarálag í auknum mæli verið viðurkennt sem þáttur í öldrunartengdum sjúkdómum (6-8). Oxunarálag er framkallað af ójafnvægi milli framleiðslu hvarfgjarnra súrefnistegunda (ROS) og hreinsunargetu andoxunarkerfisins (9,10). Greint hefur verið frá því að of mikil framleiðsla á ROS getur valdið skemmdum á próteinum, lípíðum og DNA, sem leiðir til margvíslegra sjúkdóma, svo sem Alzheimerssjúkdóms, sykursýki, hjartabilunar, langvarandi þreytuheilkennis og krabbameins (11). NADPH oxidasi (NOX) er ein helsta uppspretta ROS og fjölskylda NOX próteina er samsett úr himnuundireiningunni (NOX1-5), p22phox og umfrymisundireiningunum p67phox, p47phox og
Rac1 (12,13). Rétt er að taka fram að NOX4 er virkt ensím og hefur reynst vera mikið tjáð í lifur, sérstaklega í lifrarfrumum, lifrarstjörnufrumum og trefjafrumur (14). Vaxandi vísbendingar hafa bent til þess að oxunarálag af völdum NOX4-afleiddrats ROS geti gegnt lykilhlutverki í lifur bandvefsmyndun (15).


Langvinn bólga er annað mikilvægt ferli sem á sér stað við öldrun vegna lágstigs hækkunar á bólgumiðlum í blóðrás (16). Bólga er algengt einkenni margra aldurstengdra meinafræði, svo sem veikleika og hjarta- og æðasjúkdóma (17), sem stuðla að versnun vefjaskerðingar (18). Greint hefur verið frá því að bólga gegndi einnig mikilvægu hlutverki við aldurstengda lifrarskaða (19). Inflammasome, sem eru stór umfrymi fjölpróteinfléttur, samanstanda af NLR fjölskyldu pýrín léni sem inniheldur (NLRP), umfrymismynstur

viðurkenningarviðtaka fyrir kaspasa-1 og apoptosis-tengt flekklíkt prótein sem inniheldur C-terminal caspase recruitment domain (ASC). Samkvæmt niðurstöðum fyrri rannsókna kom í ljós að NLRP3 inflammasome, tegund inflammasome sem er tjáð alls staðar í fjölmörgum vefjum, þar á meðal lifur, tekur þátt í þróun lifrartrefjunar og framvindu lifrarskaða og aldurstengdra lifrarsjúkdóma ( 20-22). Þegar það er virkjað af ýmsum ertandi efnum, eins og ATP og kólesterólkristöllum, svo og bakteríu-, veiru- og sveppasýklum (23,24), bregst NLRP3 bólgueyðandi við bólgu með því að stuðla að þroskun röð bólgueyðandi frumudrepna, eins og IL-1 og IL-18 (25). Að auki hefur verið greint frá því að óhófleg ROS uppsöfnun hafi virkjað NLRP3 bólgusjúkdóminn í lifur meðan á öldrun stendur, sem að lokum leiddi til öldrunartengdra lifrarsjúkdóma (26).


Öldrunarhraða músin er tilhneigingu til 8 (SAMP8) er líkan af flýttri öldrun eingöngu af erfðafræðilegum uppruna, sem hefur ekki verið beitt neinni tilraunameðferð(27). Fyrri rannsóknir hafa greint frá því að SAMP8 mýs sýndu umfangsmikla lifrarhrörnun, þar á meðal fituhrörnun í lifur, lifrarfrumublöðrumyndun sem einkennist af bólgnum frumum, brennisteinsdrepi og bólgu og bandvefsbólgu (28,29). Meðal þessara athugana var lifrartrefjun algengasta og marktækasta meinafræðilega breytingin (5). Að auki hafa SAMP8 mýs einnig óeðlilegar niðurstöður úr lifrarprófum, svo sem marktæk hækkun á alanín amínótransferasa (ALT) og aspartat amínótransferasa (AST) gildi (30). Hins vegar eru enn engar árangursríkar aðferðir og lyf til að seinka öldrun lifrar og öldrunartengdum lifrarskaða og bandvefsmyndun.
Ginseng has been used for >2,000 ár og sýnir fram á nokkur jákvæð áhrif, svo sem að bæta lifrarheilbrigði og seinka öldrun (31). Cistanche Glycoside Rg1 (Rg1) er eitt af virku innihaldsefnunum í ginseng (32). Greint hefur verið frá því að Rg1 hafi verndandi áhrif á taugaskemmdir með hömlun á taugafrumum af völdum oxunarálags (33). Ennfremur reyndist Rg1 batna
hjartavöðvakvilla af völdum sykursýki með því að hamla frumudauða af völdum endoplasmic reticulum (ER) streitu í sykursýkisrottum (34). Fyrri rannsóknir okkar komust að því að Rg1 gæti verndað gegn öldrunartengdum nýrnaskaða og taugafrumum með því að hindra NOX4/2 (35,36). Hins vegar, eftir því sem við best vitum, er enn óþekkt hvort Rg1 verndar gegn öldrunartengdum lifrarskaða og bandvefsmyndun. Þessi rannsókn miðar að því að kanna hvort Rg1 meðferð bæti öldrunartengda lifrarskemmdir og bandvefsmyndun með því að hindra NOX4/NLRP3 boð til að draga úr oxunarálagi og bólgu í lifur við öldrun.



efni og aðferðir

Animals and treatment. In total, 9 male senescence‑accelerated resistant mouse 1 (SAMR1) and 45 male SAMP8 mice (both age, 6 months; weight, 30‑40 g) were purchased from the Department of Experimental Animal Science, Peking University Medical Science Center (Beijing, China). The mice were maintained in an environmentally controlled room (temperature, 22‑25˚C; relative humidity, 50‑70%) under a 12‑h light/dark cycle with unlimited access to food and water. The SAMP8 mice were randomly divided into five groups (n=9 in each group): i) SAMP8 model group; ii) SAMP8 + apocynin (50 mg/kg) group; iii) SAMP8 + tempol (50 mg/kg) group; iv) SAMP8 + Rg1 (5 mg/kg) group; v) SAMP8 + Rg1 (10mg/kg) group; and vi) SAMR1 mice group, which were used as the control group. The treatments were administered intragastrically (0.1 ml/10 g body weight), and the mice treated with either apocynin (MilliporeSigma), tempol (MilliporeSigma) or Rg1 (content >98 prósent; Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd.) einu sinni á dag í 9 vikur. SAMP8 og SAMR1 hóparnir voru meðhöndlaðir með eimuðu vatni í 9 vikur. Eftir 9 vikna meðferð var sex músum í hverjum hópi fórnað með leghálsi. Lifurnar voru teknar og geymdar við ‑80˚C til síðari notkunar í Western blotting tilraunum, eða settar fyrir.

í 4 prósent paraformaldehýði í 24-48 klst. við stofuhita til vefjafræðilegrar skoðunar. Tilraunaaðferðirnar voru samþykktar af dýrasiðanefnd Anhui Medical University (samþykki nr. LLSC20160183; Hefei, Kína) og framkvæmdar í samræmi við leiðbeiningar um umönnun og notkun tilraunadýra (37).

chinese herbs for liver aging

Greining á ROS. Magn ROS framleiðslu í lifur á þremur músum sem eftir eru í mismunandi hópum músa greindust með því að nota díhýdróetýlen (DHE) litun. Í stuttu máli var 100 µM DHE (0,1 ml/10 g; Beyotime Institute of Biotechnology) sprautað í gegnum halaæð í hverjum hópi músa (n=3). Eftir 30 mínútur voru dýrin aflífuð með leghálsi og lifur voru fjarlægðar og felldar inn í ljósskurðarhitaefnasamband (Sakura Finetek USA, Inc.) við -20˚C í 2 klst. Lifrarvefirnir voru síðan skornir í 10µm hluta með því að nota frosið ör

tome (Leica CM3050; Leica Microsystems GmbH) við ‑20˚C. Hlutarnir voru skolaðir með PBS og ræktaðir með 5 mg/l Hoechst 33258 lausn (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) við stofuhita í 5 mínútur. Síðan voru hlutarnir innsiglaðir með flúrljómandi slökkviefni (Beyotime Institute of Biotechnology) og sýndir með flúrljómunarsmásjá (Olympus IX72; Olympus Corporation; stækkun, x400). Image Pro Plus 6.0 hugbúnaður (Media Cybernetics, Inc.) var notaður til að greina meðalþéttleika rauðra flúrljómunar úr þremur slembivalnum sjónsviðum í hverjum hluta til að gefa til kynna ROS framleiðslu.



Sjúkleg skoðun á lifrarvef.

Formfræðilegar breytingar í lifur voru skoðaðar með H&E, periodic acid-Schiff (PAS) og þríkróm litunaraðferðum Masson. H&E litun er algengasta aðferðin til að fylgjast með sjúklegum breytingum í vefjum (38). Í stuttu máli voru lifrarsýni fest í 4 prósent paraformaldehýði í 24-48 klst., þurrkuð og paraffín-innfelld, síðan skorin í 5-µm þykka hluta. Lifrarhlutar (n=4) voru afparaffínaðir í xýleni og endurvatnaðir í flokkuðum alkóhólröðum (vatnsfrítt etanól, 85 prósent etanól, 75 prósent etanól), síðan litað með hematoxýlíni í 3 mínútur og eósíni í 30 sek. Öll þessi skref voru framkvæmd við stofuhita. Hlutarnir voru innsiglaðir með hlutlausu plastefni og skoðaðir með ljóssmásjá (Olympus IX72; Olympus Corporation; stækkun, x200).


PAS litun er oft notuð til að greina uppsöfnun súrra glýkópróteina til að meta lifrarskaða (39). Fyrir PAS litun voru vefjahlutarnir (n=4) afparaffínaðir og endurvökvaðir, samkvæmt aðferðinni sem lýst er fyrir H&E litun. Síðan voru hlutar litaðir með Schiff lausn í 10 mínútur (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.), fylgt eftir með hematoxýlíni í 3 mínútur. Öll þessi skref voru framkvæmd við stofuhita.



Masson's trichrome litun er mikilvæg aðferð til að meta kollagenútfellingu í lifrarvef (40). Fyrir þríkróm litun Massons voru hlutar (n=4) afparaffínaðir og endurvötnaðir, samkvæmt aðferðinni sem lýst er fyrir H&E litun. Síðan voru hlutar litaðir með hematoxýlíni, aðgreindir með súru etanóli og litaðir í Masson's blárri lausn (Beijing Solarbio Science & Technology Co., Ltd.), fylgt eftir með litun með Fuchsin í 8 mín. Frumurnar voru síðan þvegnar með fosfómólýbdínsýru í 2 mínútur og litaðar með anilínbláu í 5 mínútur. Öll þessi skref voru framkvæmd við stofuhita. PAS- og Masson's trichrome-litaðar frumur voru sýndar með ljóssmásjá (Olympus IX71; stækkun, x400). Jákvæðu svæði PAS-litunar virtust fjólublá og Masson's trichrome lituð kollagenblátt. Niðurstöður PAS og Masson's trichrome litunar í lifur voru greindar á þremur sviðum af handahófi af
skoða í hverjum hluta með Image-Pro Plus hugbúnaði (Media Cybernetics, Inc.). Meðalþéttleiki PAS og jákvæðra svæða Masson var reiknaður út til að meta hversu mikið lifrartrefjun er.



Ónæmisvefjaefnalitun.

Hlutarnir sem eru innfelldir í paraffíni (n=4) voru afparaffínaðir og endurvatnaðir, samkvæmt aðferðinni sem lýst er fyrir H&E litun. Síðan voru hlutar ræktaðir með 3 prósent H2O2 í 10 mínútur við 37˚C til að hindra innræna peroxidasavirkni áður en þeim var sökkt í sjóðandi natríumsítratbuffi í 7 mínútur í örbylgjuofni til mótefnavaka. Hlutarnir voru síðan ræktaðir með 10 prósent geitasermi (cat. nr. C0265; Beyotime Institute of Biotechnology) við 37˚C í 30 mínútur til að hindra ósértæka bindingu. Hlutarnir voru síðan ræktaðir með eftirfarandi aðal mótefnum við 4˚C yfir nótt: Kanínu fjölstofna and-kollagen IV (1:100; Bioworld Biotechnology, Inc.; vörunúmer BS1072), kanína fjölstofna and-NLRP3 (1:100; Bioworld Biotechnology, Inc.; vörunúmer BS90949) og kanínufjölstofna anti-TGF-1 (1:100; Abcam; vörunúmer ab92486).

Eftir frummótefnaræktunina voru hlutarnir hitaðir aftur í 37˚C í 30 mínútur og þvegnir þrisvar sinnum með PBS. Síðan voru hlutar ræktaðir með fjölliða-tengdu sauðfé and-kanínu IgG peroxidasa-conjugered secondary mótefni (1:500; Affinity Biosciences; cat. no. S0001) við 37˚C í 1 klst, síðan þvegið þrisvar sinnum með PBS. Frumur voru síðan ræktaðar með DAB til að framleiða brúna litun í 30 sek, síðan litaðar með hematoxylini í 3 mínútur bæði við stofuhita og innsigluð með hlutlausu plastefni. Litaðar frumur voru sýndar í smásjá (Olympus IX71; stækkun, x400).
Image-Pro Plus hugbúnaður var notaður til að greina tjáningarstig kollagens IV, TGF-1 og NLRP3 í þremur tilviljanakenndum sjónsviðum frá hverjum hluta lifrarvefs.


Western blotting.

Heildarprótein var dregið úr lifrarvef (n{{0}}) með því að nota RIPA leysistuðpúða (cat. nr. P0013B; Beyotime Institute of Biotechnology) og sjálfvirka hraðslípuvél (Jinxing Industrial Development Co.,Ltd. .) við 65 Hz í 60 sekúndur við 4˚C. Heildarprótein var magnmælt með því að nota BCA próteingreiningarsett og próteinin (20 µg) voru aðskilin með 8-15 prósent SDS/PAGE. Aðskildu próteinin voru síðan flutt yfir á PVDF himnur (MilliporeSigma) og læst með 5 prósent undanrennu í TBS-0,05 prósent Tween-20 (TBST) jafnalausn í 1 klst við stofuhita. Himnurnar voru síðan ræktaðar með eftirfarandi aðal mótefnum yfir nótt við 4˚C: Anti-NLRP3 (1:1,000; Bioworld Biotechnology, Inc.; vörunúmer BS90949), and-ASC (1:1) ,000; BIOSS; vörunúmer bs-67412-R), anti-caspase-1(1:1,000; Abcam; vörunúmer ab1872), anti-IL-1 (1:500; Abcam;cat. no. ab9722), anti-NOX4 (1:1,000; Bioworld Biotechnology, Inc.; cat. no. BS60435), anti-p47phox (1:1,{ {40}}; Bioworld Biotechnology, Inc.; vörunúmer BS4852), anti-p22phox (1:1,000; Bioworld Biotechnology, Inc.; vörunúmer BS60290), anti-NF-κB p65 (1:1,000; Wuhan Service Technology Co., Ltd.;

köttur. nei. GB11142), and-fosfórýlerað (p)-NF-κB p65 (1:1,000; Wuhan Service Technology Co., Ltd.; cat.nr.GB11142-1) og and-GAPDH (1:5) ,000; Affinity Biosciences; vörunúmer AF7021).

Eftir frummótefnaræktunina voru himnurnar þvegnar með TBST þrisvar sinnum (10 mín í hvert skipti) og ræktaðar með HRP-tengdu geita-anti-kanínu IgG (1:10,000; Affinity Biosciences; tegund nr. S 0001) og geit-and-mús IgG (1:10.000 Affinity Biosciences; vörunúmer S0002) aukamótefni í 1 klst. við stofuhita. Próteinbönd voru sýnd með því að nota ECL sett (Bio-Rad Laboratories, Inc.) og Bioshine Chemi Imaging System (Q4600 Mini; Shanghai Bioshine Technology). Sjónþéttleiki hvers bands var hálf-magnaður með ImageJ 1.53a hugbúnaði (National Institute of Health) og staðlað í GAPDH tjáningu.


Tölfræðigreining.

Öll gögn eru sett fram sem meðaltal ± SD af Stærra en eða jafnt og 3 óháðar tilraunir. GraphPad Prism 8.0 hugbúnaður (GraphPad Software, Inc.) var notaður til að framkvæma tölfræðilegar greiningar. Einhliða ANOVA fylgt eftir með Tukey's post hoc prófi var gerð til að bera saman mun milli hópa. P< 0.05 was considered to indicate a statistically significant difference.


chinese herbs for liver aging

Niðurstöður

Rg1 meðferð bætir vefjameinafræðilegar breytingar í lifur í SAMP8 músum. Niðurstöður H&E litunar leiddu í ljós að í SAMR1 samanburðarhópnum voru mörkin áumfrymi og kjarni lifrarfrumna voru skýr. Thelifrarfrumum var raðað í strengi frá miðbláæð tilnærliggjandi svæði, og fitudropar voru tilefnibandamaður fylgdist með. Í samanburði við SAMR1 hópinn, frumurnaraf SAMP8 hópnum voru ekki skýrt skilgreindir, kjarnarnirvoru fjarverandi eða djúplituð og voru kreist til hliðar(svartar örvar). Fyrirkomulag lifrarfrumna var óeðlilegtog óreglulegar og flestar frumurnar sýndu lofttæmingarlíkar

chinese herbs for liver aging

chinese herbs for liver aging

image


Mynd 1. Áhrif Rg1 meðferðar á vefjameinafræðilegar breytingar í lifur í SAMP8 músum. (A) H&E litun á lifur (Kvarðastöng, 100µm; Stækkun, x200). Svörtu örvarnar gefa til kynna að frumur SAMP8 hópsins hafi ekki verið skýrt skilgreindar, kjarnarnir voru fjarverandi eða djúpt litaðir og voru kreistir til hliðar. (B) PAS-litun á lifur (Kvarðastöng, 50 µm; Stækkun, x400). (C) Jákvætt PAS litunarsvæði (staðlað í SAMR1 hóp). Gögn eru sett fram sem meðaltal ± SD; n=4. **P<0.01 vs. SAMR1; ##P<0.01 vs. SAMP8. SAMP8, senescence‑accelerated mouse prone 8; SAMR1, senescence‑accelerated resistant mouse 1; PAS, periodic acid‑Schiff; Rg1, Cistanche Glycoside Rg1. 


hrörnun í SAMP8 hópnum. Hins vegar sýndu tempol (50 mg/kg), apocynin (50 mg/kg) og Rg1 (5 og 10 mg/kg) meðferðarhópar verulegan bata í vefjameinafræði í lifur samanborið við SAMP8 hópinn (mynd 1A). Niðurstöður PAS-litunar bentu einnig til þess að lifrarfrumurnar væru léttlitaðar, með jafnri dreifingu jákvæðra svæða innan frumanna í SAMR1 hópnum. Samanborið við SAMR1 hópinn jókst uppsöfnun jákvæðra fjólubláa litunar í lifrarfrumum marktækt í SAMP8 hópnum, sem bendir til þess að umtalsverð lifrarfrumuáverka hafi verið í öldruðum músum (mynd 1B og C). Í samanburði við SAMP8 hópinn minnkaði uppsöfnun jákvæðrar litunar marktækt í meðferðarhópunum tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg) (mynd 1B og C). Þessar niðurstöður bentu til þess að Rg1 gæti verulega bætt lifrarskaða af völdum öldrunar hjá músum. Rg1 meðferð dregur úr fibrosis í lifur í SAMP8 músum. Til

kanna hvort Rg1 dregur úr öldrunartengdri lifrartrefjun, kollagenútfelling var mæld í lifrarvef með því að nota Masson's litun. Niðurstöðurnar sýndu að bláu jákvæðu svæðin voru marktækt aukin í lifrarvef SAMP8 hópsins samanborið við SAMR1 hópinn (Mynd 2A og B). Hins vegar, samanborið við SAMP8 líkanhópinn, var magn kollagenútfellingar marktækt lækkað í meðferðarhópunum tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg) (mynd 2A og B). Að auki var tjáningarmagn kollagens IV og TGF-1 mæld í lifrarvef með því að nota ónæmisvefjaefnafræðilega litun.

Niðurstöður kollagen IV litunar leiddu í ljós að kollagen IV var tjáð í litlu magni í lifrarvefjum í SAMR1 hópnum (Mynd 3A og C). Hins vegar, samanborið við SAMR1 hópinn,

tjáningarmagn kollagens IV var marktækt uppstýrt í SAMP8 hópnum (mynd 3A og C). Hins vegar, samanborið við SAMP8 hópinn, minnkaði meðferð með tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg) marktækt kollagen IV útfellingu, sérstaklega í Rg1 (10 mg/kg) hópnum (Mynd 3A og C). Ennfremur, svipað og kollagen IV, var tjáning TGF-1 einnig marktækt aukin í SAMP8 hópnum samanborið við SAMR1 hópinn og minnkaði marktækt eftir meðferð með tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg), sérstaklega í Rg1 (10 mg/kg) hópur (mynd 3B og D). Þessar niðurstöður bentu til þess að öldrun gæti valdið lifrarvefsvefsmyndun og meðferð með tempol, apocynin og Rg1 gæti bætt lifrarvefsbindingu verulega við öldrun.


Rg1 meðferð dregur úr ROS framleiðslu og NOX4 tjáningu í lifur SAMP8 músa. ROS er mikilvægur þáttur í þróun fifibrosis í lifur (41). Í þessari rannsókn var ROS rannsaka, DHE, notað til að greina magn ROS framleiðslu í lifrarvef. Niðurstöðurnar sýndu að lítið magn af ROS framleiðslu var í lifrarvef SAMR1 hópsins. Hins vegar, samanborið við SAMR1 hópinn, jókst magn ROS framleiðslu marktækt í SAMP8 hópnum (mynd 4A og B), en miðað við SAMP8 hópinn, tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg) meðferð marktækt minnkaði magn ROS framleiðslu í lifrarvefjum (mynd 4A og B). Til að staðfesta áhrif NOX4 á ROS uppsöfnun við öldrun voru tjáningarmagn NOX4 tengdra próteina greind. Niðurstöðurnar sýndu að, samanborið við SAMR1 hópinn, var tjáningarmagn NOX4, p22phox og p47phox í lifrarvefjum marktækt uppstýrt í SAMP8 hópnum (mynd 5A-D).

Hins vegar, samanborið við SAMP8 hópinn, minnkaði meðferð með tempol, apocynin og Rg1 (5 og 10 mg/kg) marktækt tjáningarmagn NOX4, p22phox og p47phox í lifrarvef við öldrun (mynd 5A-D). Þessar upplýsingar bentu til þess að Rg1 meðferð gæti bætt oxunarálagsáverka af völdum ROS í lifrarvef með því að hindra NOX4 við öldrun í músum.



Þér gæti einnig líkað