Carboxypeptidase E Skilyrt Knockout Mýs sýna náms- og minnisbrest og taugahrörnun Part 2

Nissl og ónæmisflúrljómun litun

Dýr fengu gegnblæði með 4% paraformaldehýði og frystir hlutar af heilavef fengust. Heilavefjum var skipt í 30 µms hluta fyrir Nissl, doublecortin (DCX), CPE og MAP2 litun.

Á undanförnum árum, með stöðugri þróun lækningatækni, hafa fleiri og fleiri fólk byrjað að huga að því hvernig eigi að bæta minni sitt til að takast á við sífellt flóknari og hraðari lífsins. Á sama tíma hefur doublecortin smám saman orðið eitt af heitustu umræðuefnum.

Svo hvað er doublecortin? Doublecortin er efni í heilanum sem gegnir mikilvægu hlutverki við að efla og viðhalda minnisvirkni. Það dreifist aðallega í taugamótunum á milli taugafrumna í heilanum. Það getur stjórnað spennu taugafrumna og stuðlað að miðlun upplýsinga milli taugafrumna og þar með bætt vitræna getu og minni manna.

Sumar rannsóknir hafa sýnt náið samband milli styrks tvíkortíns og minnis. Til dæmis hafa sumir eldri fullorðnir marktækt lægra magn tvíkortíns og á sama tíma minnkar minnið. Ekki nóg með það, sumir taugasjúkdómar, eins og Alzheimerssjúkdómur og Parkinsonsveiki, tengjast einnig lækkuðu tvíkortínmagni.

Hins vegar, ekki hunsa að doublecortin er ekki panacea. Það getur aðeins hjálpað fólki að bæta minni sitt að vissu marki, en það getur ekki leyst öll minnisvandamál. Að auki, þó að sumar tilraunir hafi sýnt að tvíkortín viðbót geti aukið vitræna hæfileika og námshæfileika, geta þessar tilraunir ekki sannað að fullu að tvíkortín geti bætt greind manna.

Þess vegna, ef þú vilt bæta minni þitt, er ekki nóg að bæta við tvíkortín eingöngu. Margir aðrir þættir geta hjálpað til við að bæta minni. Til dæmis getur það hjálpað fólki að bæta minnið að hreyfa sig meira, halda góðu viðhorfi, reglulegri vinnu og hvíld o.s.frv.

Í stuttu máli, það er vissulega ákveðið samband á milli tvíkortíns og minnis, en við ættum ekki að gera of miklar væntingar til tvíkortíns. Þetta þýðir ekki að við ættum ekki að borga eftirtekt til doublecortin. Þvert á móti þurfum við að skilja hlutverk þess dýpra til að viðhalda og bæta líkamlega heilsu okkar betur. Við skulum vinna saman að því að bæta minni okkar! Það má sjá að við þurfum að bæta minni okkar. Cistanche deserticola getur bætt minni verulega, því Cistanche deserticola getur einnig stjórnað jafnvægi taugaboðefna, svo sem aukið magn asetýlkólíns og vaxtarþátta. Þessi efni eru mjög mikilvæg fyrir minni og nám. Að auki getur kjöt einnig bætt blóðflæði og stuðlað að súrefnisgjöf, sem getur tryggt að heilinn fái nægilega næringarefni og orku og þannig bætt heilaþrótt og úthald.

Smelltu á vita bætiefni til að auka minni

Kanína andDCX mótefni (1:1000; Cell Signaling Technology, Boston, Bandaríkin, 4604S), músa and-CPE mótefni (1:1000; BD bioscience, New Jersey, USA,610758), kanína and-GFAP mótefni (1:200; Cell Signaling Technology, 80788), og kanínu and-MAP2 mótefni (1:1000; Cell Signaling Technology, 8707) voru notuð fyrir ónæmisflúrljómun.

Auka mótefnin voru Alexa Fluor 594 geit and-mús auka mótefni (1:1000; Invitrogen, Carlsbad, CA, 11005) eða Alexa Fluor 594 geit and-kanínu auka mótefni (1:1000; Invitrogen, 11012). Hlutfallslegur flúrljómunarstyrkur MAP2 og GFAP í hippocampal Sub og dmPFC við ×100 stækkun var reiknaður út með ImageJ hugbúnaði (National Institutesof Health, USA).

Western blotting

Hippocampal og PFC vefir voru útbúnir eins og áður hefur verið lýst [22]. Hljómsveitir voru greind með ImageJ hugbúnaði. Próteinsýni voru keyrð á 10% SDS-pólýakrýlamíð hlaup rafdrættisgelum og fluttar ontónítrósellulósahimnur (0,22 μm; Millipore, Billerica, MA, Bandaríkjunum).

Eftir blokkun með 5% fitulausri mjólk var himnan þeytt með mótefnum gegn músa and- -aktín mótefni (1:1000, CST, 4967S), músa and-CPE mótefni (1:1000; BD bioscience, 610758), músa and- BDNF mótefni (1:600, Abcam, Bretlandi, ab108319), kanína and-p-TrkB mótefni (1:1000; Boster, Wuhan, Kína, BM4437), kanína and-AKT (1:2000, frumumerkjatækni, 4691S) , og anti-p-AKT (1:2000, Cell Signaling Technology, 23430S) yfir nótt við 4 gráður.

Eftir þvott voru himnurnar ræktaðar með IgG mótefnum gegn músum eða kanínu í 1 klst við stofuhita. Prótein tjáningarstig fyrir hvert sýni var staðlað í -aktín.

tölfræðigreining

Gögn voru greind með einhliða dreifigreiningu (ANOVA) fyrir marga hópa. Greining var framkvæmd með því að nota GraphPad Prism 8.0 (PrismGraphPad hugbúnaður). Öll gildi eru auðkennd með meðaltali ± staðalvillum (SEM). P < 0.05 var talið marktækt.

NIÐURSTÖÐUR

Greining á líkamsþyngd og glúkósa í plasma

Mýs á aldrinum 1-20 vikna voru notaðar til að greina líkamsþyngd og glúkósa í plasma (mynd 1a). Niðurstöðurnar sýndu að ekki var marktækur munur á líkamsþyngd meðal WT, CPEflox/− og CPEflox/flox músa. Fastandi og efnaskiptamagn glúkósa inplasma var metið við 10 vikna aldur (mynd 1b). Við fundum mismun á einhverri tegund meðal WT, CPEflox/− og CPEflox/flox dýra.

Nám og minnistap hjá CPEflox/flox músum

Frá opnu sviði próf, við fram að það var enginn munur á hvern arfgerð hópur fyrir vegalengd ferðast í opnu sviði tæki (Mynd. 2a). Þetta gefur til kynna að sjálfstætt og fyrirspurnarhegðun CPEflox/flox músa hafi ekki haft áhrif. Fyrir nám og minni í músum notuðum við hlutgreiningarpróf (mynd 2b). Við sáum að CPEflox/flox mýs eyddu marktækt minni tíma í nýja hluti en WT mýs. Y-völundarhús og FCT-skammtíma var gerð til að meta skammtímaminni í músum (mynd 2c-e).

Í Y-völundarprófinu eyddu WT og CPEflox/− mýs meiri tíma í skáldsögunni en CPEflox/flox mýs. Fyrir skammtíma FCT var skammtíma varðveisla CPEflox/flox músa verri en hjá WT og CPEflox/− músum. Fyrir langtímaminni varðveislu (Mynd 2f) benti hræðsluskilyrðingarprófið til þess að WT og CPEflox/− mýs hefðu marktækt betra minni fyrir fótlost en CPEflox/flox mýs.

CPEflox/flox mýs sýna subiculum (Sub) hrörnun

Við notuðum western blotting til að einkenna tjáningu CPElevels í hippocampus samanborið við innra stjórnpróteinið -aktín (mynd 3a, b). Niðurstöðurnar sýndu að CPE prótein í hippocampus CPEflox/flox músa minnkaði verulega. Eftir streitufyrirmyndina hrörnaði undirsvæði CPEflox/flox músa alveg, en ekki áður en þær klæðast, á meðan myndun WT músa í hippocampal var ósnortinn (mynd 3c).

CPEflox/flox mýs sýna lækkun á GFAP og MAP2 styrkleika og TrkB merkjum í hippocampus

Við metum tjáningu á Akt/mTOR-miðluðum BDNF/TrkBpathway-tengdum próteinum. Western blot greining á BDNF próteini sýndi að samanborið við WT mýs sýndi innihald BDNF próteins í hippocampus CPEflox/flox músa jafnt magn samanborið við WT og CPEflox/− mús (mynd 4a, b). P-TrkB prótein minnkaði marktækt í CPEflox/flox músum samanborið við WT og CPEflox/− músum (mynd 4a, c).

Niðurstöðurnar bentu til þess að CPEflox/flox mýs sýndu lækkun á hippocampal fosfórýleruðu Akt og fosfórýleruðu mTOR tjáningu samanborið við WT mýs (mynd 4a, d, e). Niðurstöður ónæmisflúrljómunar sýndu minnkaða CPE tjáningu í hippocampal Sub (mynd 4f, g). Við notuðum and-MAP2 ónæmislitun til að sýna MAP2 styrkleika í hippocampal Sub og hilus svæðinu (mynd 4f).

Niðurstöður ónæmisflúrljómunar sýndu minnkaðan MAP2 styrkleika í Sub andhilus af CPEflox/flox músum en ekki í WT og CPEflox/- músum (mynd 4f, h,i). Að auki sýndi DCX ónæmislitun að taugamyndun í DG hippocampus í CPEflox / - músum var svipuð og í WT músum en verulega minnkað í CPEflox / flox músum (mynd 4f, j). TheGFAP styrkleiki í hippocampal Sub var marktækt lægri í CPEflox/flox músunum en í WT músunum (mynd 4f, k).

CPEflox/flox mýs sýna lækkun á GFAP og MAP2 styrkleika í dmPFC

Við notuðum Western blotting til að einkenna tjáningu CPElevels í dmPFC samanborið við -aktín (mynd 5a, b). Niðurstöðurnar sýndu að CPE prótein í dmPFC CPEflox/flox músa minnkaði marktækt. Eftir streitufyrirmyndina sýndu niðurstöður ónæmisflúrljómunar minnkað MAP2 styrkleiki í dmPFCCPEflox/flox músum en ekki í WT músum (mynd 5c, d). Að auki var GFAP styrkleiki í dmPFC marktækt lægri í CPEflox/flox mýsetan í WT músum (mynd 5c, e).

UMRÆÐA

Í þessari rannsókn bjuggum við til CPE-cKO mús til að rannsaka svipgerð CPE sem missir virkni í taugafrumum heilans. Fyrri rannsókn sýndi að CPE-KO mýs þróa með sér offitu og sykursýki og verða þyngri við 8 vikna aldur en WT mýs [5]. Mælingar okkar sýndu að engin marktæk breyting var á líkamsþyngd, plasma glúkósagildum og glúkósaþoli CPEflox/flox músa samanborið við WT músa.

Atferlisrannsóknir komust að því að streitufyrirmyndin fyrir CPEflox/flox mýs skerði nám og minni. Að auki leiddi streita og minnkuð CPE-tjáning í undirhrörnun hippocampus, minnkuð taugamyndun í DG og minni taugaþéttni í hippocampal Sub og dmPFC.

CPE er forhormónvinnsluensím sem vinnur próhormón, sem klýfur C-enda grunnleifarnar frá forvera enkefalíns til að mynda enkefalín [23]. Sem aneuroprotective þáttur gegnir CPE mikilvægu hlutverki í fósturvísis- og heilaþroska eftir fæðingu [24].

Tilviksskýrsla benti til þess að arfhreinn stökkbreyting í CPE geninu tengist klínískum svipgerðum sem samanstanda af offitu, vitsmunalegri fötlun og kynkirtlaskorti [2]. CPEfitu/fitu mýs sýna lækkun á magni CPE og aukningu á magni próinsúlíns, sem styður hlutverk CPE í insúlínröskun [25]. Sjálfkrafa punktstökkbreytingar í CPE draga úr ensímvirkni, sem leiðir til alvarlegrar offitu [4]. CPE-KO mýs þróa með sér sykursýki og þessar mýs hafa hátt glúkósagildi við 8-10 vikna aldur.

Hátt glúkósagildi hélst í um það bil 2 mánuði og byrjaði síðan að lækka, sem bendir til afturkræfa sykursýkissvipgerðar [26]. Rannsókn okkar sýndi fram á að það var enginn marktækur munur á CPEflox/flox og WT músum í plasmaglúkósagildum og glúkósaþoli við 10 vikna aldur. CPE-KO mýs byrja að þyngjast við um það bil 4 vikna aldur og þær eru þyngri en WT got eftir 8 vikur [27]. Sýnt hefur verið fram á að CPE-KO mýs sýna aukna fæðuneyslu.

Aukin neysla er afleiðing óviðeigandi merkja sem stjórna mataræði, sem felur í sér jafnvægi orexigenic og anorexic taugapeptíða í undirstúku [5]. Réttþroska þessara taugapeptíða krefst rétts flutnings og vinnslu þessara taugapeptíða, þar sem CPE gegnir mikilvægu hlutverki [28].

Við skráðum líkamsþyngd músanna frá 1 til 20 vikum og niðurstöðurnar sýndu að CPEin-taugafrumurnar sem eytt var höfðu ekki áhrif á líkamsþyngd. Í rannsókn okkar breytti CPE-cKO ekki þyngd eða glúkósaneyslu. Það getur verið að skilyrt útsláttur CPE í taugafrumum hafi ekki áhrif á merki sem stjórna mataræði. Þess vegna er slík CPE-cKO mús dýrmætt líkan til að rannsaka svipgerð CPEin taugafrumna í heila sem missir virkni.

CPE gegnir margvíslegum hlutverkum í miðtaugakerfinu, þar á meðal að viðhalda eðlilegri vitrænni virkni, réttri taugabyggingu og lifun taugafrumna [3]. CPE er talið gegna hlutverki í vinnslu frumunnar á forverapróteinum. Það hefur einnig taugavarnarvirkni, óháð ensímvirkni þess, og virkar utanfrumu sem taugakerfisþáttur [25]. Sýnt hefur verið fram á nýtt hlutverk CPE í taugaþroska og greiningu nærlægra dendrita, sem er nauðsynlegt fyrir flutning og myndun taugafrumna í heilaberki [29]. CPE-KO mýs undir streitu sem skortir CPE virkni sýna margar hegðunarfrávik, þar á meðal náms- og minnisbrest [30]. Fyrri rannsóknir hafa metið náms- og minnisferli þegar dýrin voru um það bil 2 mánaða þegar þyngd músanna var nýbyrjuð að víkja [31].

Streita hefur verið viðurkennt að hafa áhrif á hippocampus á ýmsum stigum greiningar [32]. Atferlisfræðilega hafa rannsóknir komist að því að streita truflar almennt ýmis hippocampusháð nám og minnisverkefni [20]. Taugarannsóknir hafa leitt í ljós að streita breytir í kjölfarið mýkt taugamóta og eldeiginleika hippocampal taugafrumna [33]. Skipulagslega hafa rannsóknir sýnt að streita breytir formgerð taugafrumna bælir myndun nýrra taugafrumna í taugafrumum í tannbeininu og dregur úr rúmmáli hippocampus [34]. Við gerðum mótmælagreiningu, Y-völundarhús og hræðsluskilyrðingarpróf á CPEflox/flox músum við 10 vikna aldur. Til að bera kennsl á hluti sýndu WT mýs augljóst val fyrir nýjum hlut.

Aftur á móti tókst CPEflox/flox músum ekki að sýna hvaða hlut sem er á þessum tímabilum. Y völundarhúsið var notað til að meta skammtímaminni músa. WT mýs voru forvitnari en CPEflox/flox mýs að kanna svæði sem ekki höfðu heimsótt áður . Að auki var hræðsluástandsprófið notað til að meta skammtíma- og langtímagreiningarminni.

WT mýs voru áhrifaríkari við að þekkja skilyrt áreiti en CPEflox/flox mýs. Það skal tekið fram að skilyrtar CPE KO mýs voru nýlega búnar til undir Pomc hvata, sem slær út frumur sem tjá própíómelanókortín. Þessar CPE-cKO mýs sýndu eðlilega lífeðlisfræði, hegðun og magn taugapeptíða [35]. Aftur á móti sýndu skilyrtu CPE KO mýsnar okkar undir Camk2apromotornum skert minni og taugahrörnun, sem styður tilgátuna um að CPE sé taugaverndandi prótein gegn streitu [36].

Rannsóknir á CPE-KO músum hafa leitt í ljós mörg stig afbrigðileika. Hegðunarlega séð sýna CPE-KO mýs þunglyndislíka hegðun og námsörðugleika. Raflífeðlisfræðileg greining sýndi að langtímastyrking hippocampus inCPE-KO músanna var skert. Formfræðileg greining sýndi að hippocampus hrörnaði eftir streitu þegar CPE var slegið út [31]. CPE er stjórnað undir mismunandi tegundum streitu og er mikilvægt til að vernda taugafrumur [3]. Ekki hefur verið greint frá áhrifum skorts á CPEpróteini á prefrontal heilaberki undir streitu.

Það er enginn vafi á því að hegðun náms og minnis krefst samspils milli stórra heilaneta. Minni og innköllun eru háð víxlverkunum milli prefrontalcortex og hippocampus [37]. Þess vegna gegnir hippocampal prefrontal cortex hringrásin lykilhlutverki í vitrænni stjórnun og styrkingu minnis [38]. Í CPE-KO músum olli brottfelling CPE próteins skaða á CA3 taugafrumum hippocampal [39].

Fyrri rannsókn gaf til kynna að frávanastreita stjórnar seytingu sykurstera og hvetur taugafrumum í DG granulosacells til að auka seytingu glútamats, sem leiðir til örvandi eiturverkana og dauða CA3 taugafrumna í CPE-KO músum [40]. Það getur verið að cKOaf ​​CPE geninu í taugafrumum hafi minni áhrif á innkirtlakerfið.

Það hefur einnig verið sýnt fram á að eftir tímabundna hnattræna blóðþurrð voru taugafrumur á CA1 svæðinu viðkvæmari og sýndu aðeins tímabundna aukningu á CPE tjáningu [41]. Erfðabreytingar á undirsvæðum hippocampus hafa gefið til kynna sérstaka virkni í námi og minni [42]. Klassísk „trisynaptic“ hringrás (DG > CA3 > CA1 > Sub) er staðfræðilega röðuð og að hluta til óskarast bak-til-bak-, miðgildi, milli-til-milli- og kvið-til-kviðvörpun [43].

Meginskipulag myndun spendýra í hippocampal er einátta hringrás, þar sem upplýsingarnar sem sendar eru frá yfirborðslagi entorhinal cortex til DG eru unnar í röð í CA undirsviðinu: CA3, CA2 og CA1. Dorsal CA1 sendir aðalvörpun sína beint til innra entorhinal cortex layer 5 eða óbeint í gegnum dorsal Sub (hjáveituhringrás) [42].

Einn af áhugaverðu mununum á milli beinna og óbeinna úttaksleiða hippocampus er sá að í þeim síðarnefnda, dorsal Subprojects to entorhinalcortex layer 5 og mörg cortical og subcortical heilasvæði [44]. Sumar klínískar rannsóknir hafa sýnt að DG og CA undirsviðin eru valin virkjuð við myndun þáttaminnis, á meðan Sub er virkur meðan á endurminningunni stendur [45].

Í þessari rannsókn minnkaði tjáning CPE próteins í hippocampus og dmPFC í CPEflox/flox músum verulega. Þess vegna leiða taugaskemmdir og frumudauði á undirsvæðinu til minnisskorts. Hjá CPEflox/flox músum getur taugasjúkdómur stafað af hlutauppbótaraðferðum, þar með talið meiðslum á hippocampalSub og dmPFC taugafrumum.

Stjörnufrumur miðla þroska-, lífeðlisfræðilegum og meinafræðilegum ferlum [46]. Þeir eru taldir vera lykilstuðningsþættir taugafrumna sem veita uppbyggingu og efnaskiptastuðning fyrir taugafrumum [47]. Stjörnufrumur hafa áhrif á nýliðun og virkni taugafrumna á staðbundnu og netstigi [48]. Við komumst að því að fjöldi stjarnfrumna í hippocampal Sub og dmPFC minnkaði verulega, hugsanlega vegna þess að CPE er mikilvægt í aðgreiningu taugastofnfrumna í stjarnfrumur [49].
BDNF er talið vera mikilvægur eftirlitsaðili margra streituvalda [50]. Það stjórnar taugamótaflutningi og langtímastyrkingu í hippocampus og tekur þátt í myndun ákveðinna forma af minni [51]. Nýlega var gefið til kynna að CPE væri mikilvægur vaxtar- og trophic þáttur sem verndar hippocampus gegn streitu-völdum pýramída taugafrumudauða og vitrænni skerðingu [36]. Í þessari rannsókn komumst við að því að tjáning BDNF var jöfn og í WT músum. Þessi niðurstaða gefur til kynna að þrátt fyrir tjáningu á svipuðu magni BDNF, sýna CPEflox/flox mýs algjöra taugahrörnun með alvarlegri streitu.

NIÐURSTAÐA

Í stuttu máli gefur þessi rannsókn til kynna að CPEflox/flox mýs hafi skerta lærdóm og minni undir streituhugmyndinni sem felur í sér tilfinningalega og líkamlega streitu sem tengist frávennum.

Lækkuð CPE-tjáning og streitufyrirmynd leiddi til hrörnunar hippocampus undirhrörnunar, minnkaðrar taugamyndunar í DG og minnkaðra taugaþéttleika í hippocampal Sub og dmPFC.

HEIMILDIR

1. Cawley NX, Wetsel WC, Murthy SR, Park JJ, Pacak K, Loh YP. Nýtt hlutverk karboxýpeptíðasa E í innkirtla- og taugastarfsemi og krabbameini. Endocr Rev.2012;33:216–53.https://doi.org/10.1210/er.2011-1039

2. Durmaz A, Aykut A, Atik T, Özen S, Ayyıldız Emecen D, Ata A, et al. Ný orsök offituheilkennis sem tengist stökkbreytingu í karboxýpeptíðasa erfðaefninu hjá þremur systkinum með offitu, þroskahömlun og hypogonadotropic hypogonadism. J Clin Res Pediatr Endocrinol. 2021;13:52–60.https://doi.org/10.4274/jcrpe.galenos.2020.2020.0101

3. Ji L, Wu HT, Qin XY, Lan R. Krufning karboxýpeptíðasa E: eiginleikar, aðgerðir og meinalífeðlisfræðileg hlutverk í sjúkdómum. Endocr Connect. 2017;6:R18–R38.https://doi.org/10.1530/ec-17-0020

4. Naggert JK, Fricker LD, Varlamov O, Nishina PM, Rouille Y, Steiner DF, o.fl. Ofurpróinsúlín í blóði í offitu fitu/fitu músum tengist karboxýpeptíðasabreytingu sem dregur úr ensímvirkni. Nat Genet. 1995;10:135–42.https://doi.org/10.1038/ng0695-135

5. Cawley NX, Zhou J, Hill JM, Abebe D, Romboz S, Yanik T, o.fl. Karboxýpeptíðasa E knockout músin sýnir innkirtla- og hegðunarbrest. Innkirtlafræði. 2004;145:5807–19.https://doi.org/10.1210/is.2004-0847

6. Bosch E, Hebebrand M, Popp B, Penger T, Behring B, Cox H, et al. BDV heilkenni: nýheilkenni með mikilli offitu og taugaþroska seinkun sem líkist Prader-Willi heilkenni. J Clin Endocrinol Metab. 2021;106:3413–27.https://doi.org/10.1210/clinem/dgab592

7. Chen H, Jawahar S, Qian Y, Duong Q, Chan G, Parker A, o.fl. Missense polymorphism í karboxýpeptíðasa E geni manna breytir ensímvirkni. HumMutat. 2001;18:120–31.https://doi.org/10.1002/humu.1161

8. Zhu X, Wu K, Rife L, Cawley NX, Brown B, Adams T, o.fl. Karboxýpeptíðasi E er nauðsynlegur fyrir eðlilega taugamótasendingu frá ljósviðtökum til innri sjónhimnu. J Neurochem. 2005;95:1351–62.https://doi.org/10.1111/j.1471-4159.2005.03460.x

9. Griego E, Herrera-López G, Gómez-Lira G, Barrionuevo G, Gutiérrez R, Galván EJ. Virk tjáning TrkB viðtaka á innri frumum og pýramídafrumum á svæði CA3 í hippocampus rottu. Taugalyfjafræði 2021;182:108379https://doi.org/10.1016/j.neuropharm.2020.108379

10. Xiao L, Sharma VK, Toulabi L, Yang X, Lee C, Abebe D, o.fl. Neurotrophic factor 1, nýtt trópín er mikilvægt til að koma í veg fyrir streitu af völdum hippocampal CA3 frumudauða og vitræna truflun í músum: samanburður við BDNF. TranslPsychiatry. 2021;11:24https://doi.org/10.1038/s41398-020-01112-w

For more information:1950477648nn@gmail.com