4.2. In vitro fjölgun

In vitro fjölgun, eða örfjölgun er afbrigði af gróðurfarsmáta fjölgunar sem næst með því að nota plöntuafleiddar útplöntur sem ræktaðar eru við smitgát í in vitro aðstæður [87]. Það býður upp á möguleika á að framleiða mikinn fjölda plantna sem hægt er að kanna til að ná verðmætum umbrotsefnum á sama tíma og draga úr ofnýtingu villtra og í útrýmingarhættu [88]. Skylt er að nota aðgreindar plöntur (örræktaðar plöntur) þegar lífvirka sameindin er eingöngu framleidd í sérhæfðum plöntulíffærum eða vefjum (td ilmkjarnaolíum). Annar kostur við notkun plantna sem fjölgað er í glasi er tengdur stöðugleika þeirra og meiri uppskeru af afleiddum umbrotsefnum. Notkun in vitro ræktunarkerfa gerir kleift að framleiða óháð árstíðabundnum takmörkunum og hraðri og skilvirkri einangrun á markvissu lífvirku sameindinni, ásamt áreiðanleika og fyrirsjáanleika framleiðslu [25].

Glýkósíð af cistanche getur einnig aukið virkni SOD í hjarta- og lifrarvef og dregið verulega úr innihaldi lipofuscins og MDA í hverjum vef, hreinsar í raun ýmsar hvarfgjarnar súrefnisradicals (OH-, H₂O₂, osfrv.) og verndar gegn DNA skemmdum af völdum af OH-róttækum. Cistanche phenylethanoid glýkósíð hafa sterka hreinsunargetu sindurefna, meiri afoxunargetu en C-vítamín, bæta virkni SOD í sæðisviflausn, draga úr innihaldi MDA og hafa ákveðin verndandi áhrif á virkni sæðishimnu. Cistanche fjölsykrur geta aukið virkni SOD og GSH-Px í rauðkornum og lungnavef í tilraunamúsum af völdum D-galaktósa, auk þess að draga úr innihaldi MDA og kollagens í lungum og plasma og auka innihald elastíns, hafa góð hreinsunaráhrif á DPPH, lengja tíma súrefnisskorts í öldruðum músum, bæta virkni SOD í sermi og seinka lífeðlisfræðilegri hrörnun lungna í öldruðum tilraunamúsum. Með frumuformfræðilegri hrörnun hafa tilraunir sýnt að Cistanche hefur góða andoxunargetu og hefur tilhneigingu til að vera lyf til að koma í veg fyrir og meðhöndla öldrunarsjúkdóma í húð. Á sama tíma hefur echinacoside í Cistanche umtalsverða getu til að hreinsa DPPH sindurefna og getur hreinsað hvarfgjarnar súrefnistegundir, komið í veg fyrir niðurbrot á kollageni af völdum sindurefna og hefur einnig góð viðgerðaráhrif á anjónaskemmdir af sindurefnum af týmíni.

Smelltu á cistanche Chemist vöruhús

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Sumar rannsóknir hafa bent á skilvirkni in vitro fjölgunar hvað varðar framleiðslu lífvirkra efnasambanda. Goyal o.fl. (2013) komust að því að lowbush bláberjaklón sem fengust með örfjölgun sýndu hærra flavonoid og fenól innihald samanborið við þau sem þróuð voru með hefðbundinni fjölgunaraðferð [89]. Greint var frá svipuðum niðurstöðum í Ziziphora senior L. af Dakah o.fl. (2014) [90]. Höfundarnir komust að því að plöntuþykkni Ziziphora senior L. sem hefur verið fjölgað í glasi sýndi meiri róttæka hreinsunarhæfni en villtar plöntur. Þeir útskýrðu einnig þennan áberandi mun með streituskilyrðum sem myndast við ræktun in vitro eða tilvist vaxtarstilla plantna, sem geta haft örvandi áhrif á framleiðslu pólýfenóls [90]. Huperzia serrata, mikilvæg hefðbundin jurt í kínverskri menningu, er þekkt fyrir að framleiða dýrmætt efnasamband, Huperzine A (HupA). Huperzia serrata útdrættir fengnir úr örfjölguðum plöntum sýndu aukna andoxunarvirkni. Hins vegar er framleiðsla á HupA enn minni í örfjölguðum plöntum en villtum. Hypericin innihald jókst í kjölfarið í Hypericum hookerianum örfjölguðum plöntuútdrætti í samanburði við útdrættinn sem myndaður er úr villtum plöntum [91]. Í in vitro ræktun Salvia officinalis, greindist abietane díterpene aðeins í sprotaræktun en ekki í frumusviflausnum, kalli eða loðnum rótum [92]. Þrátt fyrir ofangreint, getur fenólsamsetning og andoxunarvirkni í sumum tilfellum verið lægri í örfjölguðum plöntum samanborið við villtar, eins og í Cichorium pumilum Jacq [93], Caralluma tuberculata [94] og Alocasia longiloba Miq [95] .

4.3. Kalógenesis og frumu sviflausnir

Plöntur sýna athyglisverða þroskamýkt fyrir frumuaðgreiningu, þar sem það er aðaleinkenni plöntufrumna. Vegna þessa framúrskarandi eiginleika geta plöntur myndað óskipulagðan frumumassa, kallaðan calluse, til að bregðast við umhverfisþvingunum, líklega innrás sýkla eða líkamlegum skemmdum [96]. Stofnun callusræktunar byggir að mestu á aðgreiningu frumna. Þetta er hægt að skilgreina sem ferlið þar sem þroskaðar eða sérhæfðar frumur missa aðgreindan eiginleika og verða ungar (afgreindar) [97].

Með flutningi þeirra yfir í fljótandi miðil geta kallusræktunarklumpar sundrast í litla bita, einingar, eða jafnvel stakar frumur, þar sem frumusvifaræktun er náð. Callus er venjulega ólíkur. Frumusviflausnir eru möguleg uppspretta lífvirkra efnasambanda sem eru unnin úr jurtaríkinu [97,98]. Frumusviflausnir ná yfir einsleitan frumuhóp, sem framleiðir einsleita og hraða næringar- og plöntuvaxtarstýringar. Þeir mæta einnig auðveldlega nokkrum líftæknilegum aðferðum eins og elicitation, forvera fóðrun og lífumbreytingu eða lífumbreytingu, svo og fjöldaframleiðslu í lífreactorum (skala upp) [7]. Nokkur mikilvæg lífvirk efnasambönd sem eru unnin úr plöntum hafa verið framleidd með því að nota callogenesis og frumusviflausnartækni, þar sem meirihlutinn var fengin með frumusviflausnum [98]. Helstu PDBCs sem hafa verið framleidd með frumusviflausnum eru Echinan 4 P, Acetos 10 P, Teoside 10 og Teupol 50 P [99.100].

Margar rannsóknir hafa greint frá virkni frumusviflausna til að framleiða æskileg lífvirk efnasambönd. Til dæmis var ginsenósíð framleiðsla fengin með Panax quinquefolium frumusviflausnum sem þróaðar voru í MS miðli í viðurvist 1 mg/L af 2.4-díklórfenoxýediksýru og 0,25 mg/L af Kinetin [1 01]. Framleiðsla shikoníns var metin úr frumusviflausnum af Onosma bublotrichum í MS æti sem bætt var við 0,2 mg/L af IAA og 2,10 mg/L af Kinetin fyrir calluses og í SH æti fyrir frumusviflausnir [102]. Glycyrrhiza uralensis frumusviflausnir gátu framleitt umtalsvert magn af flavonoids í Murashige og Skoog miðli sem bætt var við blöndu af 2,4-D, NAA og BA og framkallað með metýljasmonati [103]. 20- hýdroxýekdýson var fengið úr bæði Achtranthes bidentate og Vitex glabrata frumu sviflausnum sem ræktaðar voru í viðurvist bæði NAA og 0,2 mg/L af BA fyrir Achtranthes bidentate og tilvist 2,4-D og BA fyrir Vitex glabrata [104].

Nokkrar fyrri rannsóknir hafa undirstrikað mikla möguleika callus og frumuræktunar við meðferð húðsjúkdóma. Dilochos biflorus stofnfrumuræktun vatnsleysanlegur útdráttur var einkenndur af Belmonte o.fl. (2014) fyrir mikið magn af ísóflavónum, aðallega daidzein, genistín og glúkósíðafleiður þeirra. Höfundarnir komust að því að útdrátturinn sem myndast sýndi áberandi hamlandi virkni útfjólubláa roða, sem undirstrikaði verndandi áhrif þessara plöntuafleiddu efnasambanda gegn UV geislun, sérstaklega gegn sólbruna og sólarroði [105]. Síðar, Imparato o.fl. (2016) notaði gervilíkön fyrir húð til að sýna fram á útfjólubláa verndargetu Dilochos biflorus frumuræktunarþykkni á ECM íhlutum [106]. Þessi framúrskarandi húðverndandi virkni tengdist getu útdráttarins til að hreinsa sindurefna, hindra kollagenasaframleiðslu á húðinni og varðveita kollagenbyggingu í allt að 72 klst. eftir útsetningu fyrir UVA geislun [106]. Fiðrildarunnur (Buddleja davidii) útdrættir sem fengnir voru með frumusvöðrunarræktun framleiddu mikið magn af verbascoside, fenýlprópanóíð glýkósíð efnasamband þekkt fyrir fjölhæfa verndandi eiginleika (andoxunarefni, klóeyðandi, bólgueyðandi). Að kanna húðfræðilega eiginleika útdrættanna sem myndast sýndi sterka húðviðgerðargetu og fyrirbyggjandi virkni húðbólgu þessa útdráttar, sem rekja má til sterkrar hömlunar á kollagenasavirkni og bælingu bólgueyðandi þátta [107]. Bengal kaffi (Coffea bengalensis) plöntufrumuræktunarþykkni eru koffínlaus og sýna mikla möguleika til notkunar í húðumhirðu. Til dæmis var sýnt fram á að vatnsleysanlegt þykkni úr Coffea bengalensis frumuræktun olli kollageni I og II nýmyndun í trefjafrumum, ýtti undir lípasavirkni og örvaði tjáningu vökvatengdra gena í keratínfrumum [108].

5. Helstu líftækniaðferðir til að auka framleiðslu á lífvirkum efnasamböndum úr plöntum

Plöntufrumu- og vefjaræktun (PCTC) býður upp á efnilegt líftæknitól til að búa til fjölda jurtaefna í lyfjafræðilegum tilgangi. Hins vegar eru aðeins nokkur vel heppnuð tilvik fáanleg á markaðnum vegna lágmarks plöntuefnaframleiðni, sem er ófullnægjandi til að standa straum af ræktunarkostnaði [76]. Þannig hafa rannsóknir á síðasta áratug beinst að því að efla framleiðslu á dýrmætum plöntuefnaefnum án þess að auka framleiðslukostnaðinn til að auka notkun in vitro ræktunartækni sem „efnaverksmiðjur“ [109]. Nokkrar aðferðir, þar á meðal eru framköllun, efnaskiptaverkfræði, hreyfingarleysi, gegndræpi og tveggja fasa kerfi, hafa verið notaðar í stórum dráttum til að auka framleiðslu PDBCs (Mynd 2) [77].

5.1. Útrás

Uppruni er ein skilvirkasta aðferðin sem notuð er nú á dögum til að bæta líftækniframleiðslu á PDBC. Uppruni krefst notkunar sérstakra efnasambanda, almennt þekktur sem elicitors, til að hvetja til varnar plantna og koma af stað nýmyndun og framleiðslu efri umbrotsefna [110]. Hægt er að greina á milli tveggja mismunandi tegunda elicitors: abiotic og biotic elicitors. Abiotic elicitors safna öllum ólíffræðilegum efnum, eins og ólífrænum efnasamböndum, til dæmis málmjónum eða söltum (kalsíumklóríð, silfurnítrat, magnesíumsúlfat, kvikasilfursklóríð, kóbaltklóríð, sinkjónir osfrv.), sem vitað er að örva framleiðslu á lífvirk efni í gegnum efnaskiptaaðlögun plantna þeirra [43]. Ólíkt abiotic elicitors, líffræðileg elicitors hafa líffræðilegan uppruna. Þau eru ýmist notuð sem hráþykkni eða að hluta til hreinsaður sýkill eða afurðir sem eru unnar úr plöntum. Þeir geta annað hvort verið úr flókinni samsetningu, eins og sveppa- og gerseyði, eða sérstakri samsetningu eins og glýkóprótein, hreinsað kítósan, algínat, xantan, fjölsykrur, osfrv. [111]. Nokkrar breytur, þar á meðal eru elicitor tegund, styrkur, útsetningartími, ræktunartegund, miðilssamsetning, frumulína, stig og aldur ræktarinnar, eru helstu þættirnir sem hafa áhrif á skilvirkni elicitation aðferðarinnar í PDBC framleiðslu [112] .

Uppruni hefur verið mikið notaður til að auka PDBC framleiðslu in vitro ræktun. Nokkrar skýrslur hafa undirstrikað skilvirkni þessarar aðferðar. Framleiðsla Pueraria cannoli sviflausnarfrumna með því að nota salisýlsýru aukið ísóflavónóíð framleiðslu og uppsöfnun, nánar tiltekið, khwakhurin, daidzein, puerarin og genistin, sem eru sameindir sem sýna mikla öldrunareiginleika [57]. Í Solanum xanthocarpum leiddi ræktun kallusræktar með því að nota blátt ljós til hámarksframleiðslu á metýl-koffíni, esculetin, koffínsýru og scopoletin. Þessar sameindir eru þekktar fyrir mikla andoxunar-, bólgueyðandi, sykursýkis- og öldrunarvirkni [113]. NaCl-framkallað saltstreitunotkun á ræktaða kardún (Cynara cardunculus L. var altilis) kallus jók heildarfenól- og andoxunarefnisinnihald, sem leiddi til aukinnar pro-kollagens og aquaporin framleiðslu í húðfrumum og eykur þar með framleiðslu lífvirkra efnasambönd sem hægt er að nota í snyrtivörublöndur [114]. Methyl jasmonate elicitation beitt á Isatis indigotica loðrótarræktun sýndi framúrskarandi árangur í framleiðslu lignans. Það leyfði einnig uppgötvun AP2/ERFs TFs sem hafa verið bendlaðir við framleiðslu þessa flokks lífvirkra efnasambanda, sem og uppstýrð lífgerfðaefni, sem undirstrikar mikilvægi þess að kalla fram við auðkenningu á helstu stjórnunaraðferðum sem hægt er að nota fyrir efnaskiptaverkfræði in vitro ræktun [115]. Önnur dæmi um virkni þess að kalla fram örvun PDBC framleiðslu eru sýnd í töflu 3.

5.2. Undanfari og næringarefnafóðrun

Forefnisfóðrun er líftæknileg stefna sem veltur á getu plantna og plöntufrumurækta til að umbreyta forverum (bættu við fjölmiðlaræktina) í æskilegar vörur með því að nota fyrirliggjandi ensím [135,136]. Þessi tækni hefur víða verið notuð til að koma af stað framleiðslu á sérstökum efnasamböndum. Til dæmis hafa fjölmargar skýrslur sýnt fram á skilvirkni undanfarafóðurs við örvun PDBC nýmyndunar. Línum albúm loðnar rótarræktanir fóðraðar með þekktum lignan forvera, barrtrjáaldehýði, leiddu til talsverðrar aukningar á pínoresinóli, lariciresinóli og podophyllotoxin framleiðslu [137]. Í Centella asiatica laufafleiddum kall- og frumusviflausnum náðist uppsöfnun asiaticosíðs með því að bæta amínósýrum við ræktunarmiðilinn, nánar tiltekið leusín [138]. Karppinen o.fl. (2007) greint frá svipuðum niðurstöðum fyrir framleiðslu hyperforin úr Hypericum perforatum sprotaræktum. Til dæmis komust höfundarnir að því að gjöf ísóleucíns og valíns í skotræktina var ábyrg fyrir framleiðslu á hyperforíni. Með því að fylgjast með innsetningu ísóleucíns og valíns með því að nota merkt form þessara amínósýra, uppgötvuðu höfundar að þessar tvær amínósýrur voru felldar inn í asýl hliðarkeðju bæði hyperforin og hyperforin [138].

Samkvæmt sömu meginreglu og undanfarafóðrun miðar næringarefnafóðrun að því að auka afrakstur PDBCs með því að stilla eðlis- og efnafræðilega þætti ræktunarmiðilsins. Sýnt hefur verið fram á að þessi aðferð er áhrifarík til að auka lífmassa og framleiðslu á ginsenosíði úr ginseng-rótarræktum. Eins og greint var frá í [139], jókst lífmassaframleiðsla og magn ginsenosíðs þegar ræktunin var endurnýjuð með nýútbúnum ræktunarmiðli. Svipaðar niðurstöður voru einnig tilkynntar um framleiðslu á koffín aukaafurðum frá Echinacea purpurea óvæntum rótarræktum [140] og taxol framleiðslu úr Taxus chinensis frumu sviflausnum [141].

5.3. Efnaskiptaverkfræði

Efnaskiptaverkfræði er skilgreind sem framleiðsla ákveðinna efna eða sameinda, svo sem lyfja, efna, eldsneytis og lyfja, með því að trufla efnaskiptaferla í frumum [142]. Það gefur glænýtt sjónarmið til að skilja betur PDBC lífmyndunarleiðir með oftjáningarrannsóknum. Það getur einnig falið í sér bælingu annarra leiða (samkeppnisferla) til að auka efnaskiptaflæði tiltekinna lífmyndunarleiðarmiðlara til að tryggja aukna framleiðslu [143]. Meginmarkmið þessarar stefnu er að hvetja til frumuvirkni með því að meðhöndla frumustarfsemi með raðbrigða DNA tækni. Hingað til hafa nokkrar aðferðir, svo sem innleiðing gena sem eru einangruð frá sömu tegund eða mismunandi lífverum, hvatar sem efla markgenatjáningu (myndandi tjáning markgena með því að nota 35S hvata, til dæmis), eða truflandi tjáningu markgena eða gena (antisense , RNA truflun eða CRISPR/Cas9 tækni), hafa verið notuð til að ná þessum tilgangi [144]. Algengasta dæmið um erfðameðferð er notkun Agrobacterium tumefacient-miðlaðrar erfðabreytingar, sem getur gert ráð fyrir innleiðingu á æskilegu geni.

Erfðafræðilega truflun á milliefni í lífmyndunarferlum er einnig hægt að framkvæma með því að nota aðrar aðrar umbreytingaraðferðir eins og umbreytingu frumefna, líffræði (smávörpusprengjuárás), lípósómmiðlaða umbreytingu eða frjókornaleiðir [143]. Efnaskiptaverkfræði býður upp á marga kosti til að auka framleiðslu lífvirkra efnasambanda með því að oftjáa gena (ábyrg fyrir framleiðslu stjórnunarensíma) sem taka þátt í lífmyndunarferlum þeirra [145]. Hins vegar, í ljósi þess hversu flókið eftirlitsferlið er í plöntufrumum og tilvist mikilvægra og hraðatakmarkandi ensíma sem bera ábyrgð á endurgjöf stjórnun á gnægð lífvirkra efnasambanda, er framleiðsla PDBCs með efnaskiptaverkfræði takmörkuð. Þannig þarf viðbótarrannsóknir til að bera kennsl á hraðatakmarkandi skref og reglugerð þeirra [146,147].

5.4. Hreyfingarleysi

Óhreyfanleiki er ein af lykilaðferðunum sem hægt er að beita til að auka framleiðslu á PDBC í PCTC kerfum. Það byggir á notkun hlaupfylkis sem gerir klefi í frumu. Á sama tíma verða frumur fyrir háum styrk jóna til að hlutleysa óæskileg áhrif á efnaskipti frumna. Þessi stefna hefur laðað að vísindamenn og vísindamenn um allan heim þar sem hún gerir ráð fyrir aukningu á lífvænleika frumna og stöðugleika lífvirku efnasambandanna sem framleidd eru, auk aukningar á framleiðslu æskilegra sameinda [148]. Fyrir frumufestingu eða hreyfingarleysi er hægt að nota nokkur efni, eins og agarósa, algínat, agar og pólýakrýlamíð ásamt algínati, sem hlaupfylki. Alginatfjölliður eru algengustu efnin sem notuð eru til að hreyfa frumur, þar sem þær sýna bestan árangur hvað varðar framleiðslu PDBC. Til dæmis leiddi Eurycoma longifolia frumusamsöfnun með 2,5 prósent af algínatfjölliða í þrjár vikur til verulegrar aukningar á framleiðslu 4H-imídasóls-4-eins, dósaþynningar-6-eins og strictosidine-syntasa samanborið. við óhreyfðar frumur [149]. Fyrir kítósanasaframleiðslu frá Gongronella sp. frumur, mesta framleiðslan náðist með því að nota frumustöðvun með kalsíumalgínat (E404) hlaupi ásamt pólýúretan froðu við pH 5,5 [150]. Í Juniperus chinensis, Premjet o.fl. (2007) komust að því að framleiðsla á podophyllotoxin jókst um 96-98 prósent í föstum frumum með því að nota algínatfjölliða [151]. Plumbago rosea-óhreyfðar frumur með því að nota E404 leiddu til þrefaldrar aukningar á framleiðslu plumbagins, mikilvægu lífvirku efnasambandsins sem greint er frá í þessari plöntutegund, samanborið við frumur sem ekki eru fangar [152,153]. Hagstæð áhrif frumustöðvunar má útskýra með því að hlaup (fjölliða) fylkið myndar viðeigandi dreifingarstig yfir óhreyfðu frumurnar, sem bætir lífefnafræðileg samskipti. Fjölliðafylki kallar sjálfkrafa á stofnun frumusamsetninga og dregur þar með úr ósjálfstæði frumna á ræktunarmiðlinum, sem leiðir til hærri afraksturs PDBCs [148]. Þrátt fyrir að frumustöðvun auki PDBC framleiðslu, eru lífvirk efnasambönd oft föst og oft geymd í frumulofttæmum. Þannig er frumustöðvun og framleiðsluferlið efnahagslega háð getu frumunnar til að seyta æskilegu lífvirku efnasamböndunum inn í aðliggjandi miðil, sem getur átt sér stað náttúrulega með því að nota náttúrulega (óvirkan og virkan flutning) eða gervi (permeabilization stefnu) seytingaraðferðir [135].

5.5. Gegndræpi

Eins og getið er hér að ofan eru PDBC venjulega föst í sérhæfðum líffærum eða frumubyggingum, venjulega í frumulofttæmum. Þess vegna getur losun PDBC í ræktunarmiðilinn ásamt viðeigandi hreinsunaraðferð gert kleift að endurheimta æskileg efnasambönd. Gegndræpistefnan byggir á notkun efnafræðilegra eða eðlisfræðilegra aðferða til að auka gegndræpi plöntufrumuhimna. Auðvelt er að útfæra efnamiðlaða gegndræpi með því að nota lífræn leysiefni, svo sem dímetýlsúlfoxíð [DMSO] og ísóprópanól, og fjölsykrur eins og kítósan [135]. Taxól, hexadecan, díbútýlþalat eða dekanól voru notuð til að auka gegndræpi Taxus chinensis frumuræktar [141]. Aðrar gegndræpiaðferðir, svo sem rafsvið og hljóðgjöf, er hægt að beita til að endurheimta PDBCs úr frumulofttæmum [135]. Athugið að uppsöfnun PDBC er hægt að breyta annaðhvort með endurgjöf (hömlun) á nýmyndun afurða eða með niðurbroti lífvirkra efnasambanda í fjölmiðlum. Hægt er að forðast þessa hindrun með því að fjarlægja vöru á staðnum, sem felur í sér beinan vökva-vökva eða vökva-fast efni aðskilnað [154], þar sem hið síðarnefnda sýndi betri árangur en vökva-vökva ræktunarkerfið. Fyrir fast-fljótandi kerfi eru XAD4, XAD7 plastefni og virk kol almennt notuð. Til dæmis var áður sýnt fram á að notkun XAD7 bætti framleiðslu ajmalicíns og serpentíns í C. roseus, plumbagin í Pityriasis rosea, alkalóíða í Eschscholzia californica og taxuyunnanine C í Taxus chinensis [155–158]. XAD4 var beitt með góðum árangri við framleiðslu á anthraquinone frá Morinda elliptica [159].

6. Framleiðsla andoxunarefna fyrir snyrtivörublöndur með líftækni

PCTC tækni ásamt mismunandi líftækniaðferðum sem miða að því að framleiða mikið magn af PDBC hefur leitt til þróunar á nokkrum snyrtivörum með öldrun og húðverndandi virkni. Sumar þeirra hafa fengið einkaleyfi og nokkrar snyrtivörur hafa verið þróaðar af leiðandi fyrirtækjum í snyrtivöruiðnaðinum. Hér að neðan eru nokkur dæmi um einkaleyfi sem hafa verið skráð á síðasta áratug. Þeir voru valdir af handahófi til að sýna áþreifanlega notkun líftækni, aðallega plöntuvefsræktunartækni, við mótun galenískra og snyrtivara:

• Einkaleyfi skráð í Bandaríkjunum af Blum o.fl. árið 2012, í tengslum við þróun óaðgreindra plöntufrumna úr Malus domestica cv Uttwiler Spaetlauber ávöxtum og notkun þeirra við mótun snyrtivara til að tryggja vernd stofnfrumna gegn bæði innri og ytri streituþáttum, stuðla að fjölgun stofnfrumna og forvarnir. af frumudauða (e. patent US 8.580.320 B2). Úr þessum frumusviflausnum hafa verið þróaðar mismunandi snyrtivörur, þar á meðal eru hverfandi krem, fljótandi smyrsl, öflugir hármaskar og augnkrem. Skilvirkni þróuðu snyrtivöruefnanna hefur verið prófuð á stofnfrumum sem eru upprunnar úr naflastrengjum, hársekkjum og trefjafrumum.

• Syringa vulgaris plöntufrumur voru teknar til með góðum árangri úr in vitro ræktun plöntuvefja við smitgát í vaxtarílátum ásamt sérstökum plöntuvaxtarstillum af ítölsku teymi (Dal Monte o.fl., 2006; Einkaleyfisnúmer: US 7,718,199 B2). Vatnsútdráttur var gerður á frumusviflausnum sem eru fengnar úr kallus. HPLC prófílgreining leiddi í ljós að umtalsvert magn af verbascoside og verbascoside var til staðar. Útdrættirnir sem eru unnin af frumusvöðvum sýndu sterka andoxunar- og hreinsunarvirkni gegn sindurefnum. Þar að auki sýndu þróuðu útdrættirnir frábæra eiginleika gegn hárlosi vegna getu þeirra til að hamla 5-alfa redúktasa og lípoxýgenasa. Útdrættirnir sem mynduðust sýndu einnig sterka and-tyrosinasa virkni og athyglisverða húðhvítandi eiginleika.

• Óaðgreindar frumur lithimnuplantna (Iris pallida, Iris germanica og Iris florentina) voru búnar til af Breton og Gueniche árið 2001. Galenic efnablöndur voru þróaðar úr mynduðu frumunum. Í kjölfar fullyrðinga uppfinningamannanna innihéldu þróuðu efnablöndurnar sólarvörn, með virkum efnum sem tryggðu vernd utanfrumu fylkispróteina, svo sem gegn útfjólubláu geislun, með ensímhömlun á MMP próteinum (Breton og Gueniche árið 2001, einkaleyfisnúmer: EP 1 174 120 B1).

• Leontopodium alpinum óaðgreindar frumur sem fengnar voru með in vitro frumuræktun voru notaðar til að móta snyrtivörur af frönskum uppfinningamönnum (Gracioso o.fl.). Uppgötvunin var gefin út sem einkaleyfi af uppfinningamönnum árið 2016 (Einkaleyfisafsetning árið 2015, einkaleyfisnúmer: WO 2016/113659 A1). Varan sem þróuð var var lögð til sem snyrtimeðferð til að endurheimta frumujafnvægi á aldrinum húðar og auka umbrot frumna og orkuvirkni.

• Óaðgreindar frumur af Marrubium vulgare voru notaðar sem hráefni til að þróa snyrtivörur af Ringenbach o.fl. fyrir þekkt snyrtivörufyrirtæki. Einkaleyfið var skráð árið 2016. Fyrir þetta einkaleyfi var útbúið snyrtivörusamsetning úr plöntufrumum sem fengnar voru með in vitro frumuræktunarferlinu. Uppfinningamennirnir lögðu til þessa snyrtivörublöndu fyrir staðbundnar meðferðir til að bæta almennt ástand húðar, útlit og viðhengi, nánar tiltekið, fyrir aðdráttarhola og ófullkomleika í húðinni. Úr virka efninu sem uppgötvaðist hafa mismunandi galenísk samsetningar verið þróaðar, þar á meðal eru krem, serum, vefjagrímur og hreinsikrem (Einkaleyfisnúmer: WO 2017/163174 A1).

• Snyrtiefnasamsetning var þróuð af ítölsku teymi (Tito o.fl.) árið 2016. Uppfinningin sem þetta einkaleyfi nær til beinist að notkun líkamsfósturvísa þriggja plöntutegunda: Lotus japonicus, Citrus limon og Rosa gardenia. Útdrættirnir sem myndast hafa sýnt mikla virkni gegn ófullkomleika í öldrun húðar og innihalda endurnýjun húðar og vefja (Einkaleyfisnúmer: WO 2016/ 173867 A1).

• Snyrtivara með getu til að vernda húðina gegn þurrkun og/eða koma í veg fyrir skemmdir á útfjólubláum geislum var þróuð úr Camellia sinensis var assamica óaðgreindri stofnfrumuræktun af Berry o.fl. Þróuð vara fékk einkaleyfi árið 2017. Skilvirkni uppfinningarinnar var prófuð í húðtrefjum úr fullorðnum mönnum. Samkvæmt uppfinningamönnum sýndu framleidda teþykknin bólgueyðandi eiginleika, komu í veg fyrir þurrkun húðfrumna og vernduðu húðfrumur fyrir útfjólubláu geislun (Einkaleyfisnúmer: WO 2017/178238 A1).

7. Ályktanir

Húðöldrun er eitt algengasta húðvandamálið sem hefur áhrif á húð manna og útlit hennar, sem leiðir til bilunar í viðgerð sárs, hrukkuþróunar og taps á húðlit og teygjanleika. Nokkrar efnafræðilegar vörur hafa verið þróaðar í gegnum árin til að koma í veg fyrir öldrun húðarinnar og draga úr áhrifum hennar. Hins vegar hafa nokkur vandamál komið upp við notkun efnavara, aðallega tengd frumunæmi, ofnæmi og aukaverkunum sumra efnavara og efna. Að öðrum kosti hafa verið lagðar til náttúrulegar og plöntuafurðir á grundvelli framúrskarandi eiginleika þeirra. Hins vegar er þróun lífvirkra efna sem eru unnin úr plöntum mjög háð plöntuefni, sem getur verið fyrir áhrifum af bæði innri og ytri þáttum. Plöntuvefsræktunartækni getur skilað gríðarlegu magni af einsleitu plöntuefni óháð þessum þáttum til að tryggja næga framleiðslu lífvirkra efnasambanda. Að auki er hægt að framleiða PDBC með því að nota líftæknilegar aðferðir eins og framköllun, efnaskiptaverkfræði, næringar- og undanfara fóðrun, hreyfingarleysi og gegndræpi. Þessi vinna kynnti yfirgripsmikla úttekt á líftækniaðferðum sem notuð eru til að framleiða lífvirk efnasambönd, með áherslu á andoxunarefni sem sýna öldrunareiginleika. Einnig er fjallað um nokkur dæmi um plöntuvefsræktunartækni sem notuð er við framleiðslu snyrtivara til að undirstrika mikilvægi líftæknilegra verkfæra fyrir sjálfbæra framleiðslu á PDBC.

【Frekari upplýsingar:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】