Blóðsykurslækkandi og blóðsykurslækkandi áhrif Cistanche Tubulosa

Tengiliður: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Netfang:audrey.hu@wecistanche.com

Blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif Cistanche tubulosain tegund 2 sykursýki db/db músa

Wen-Ting Xiong, o.fl

Ágrip

Etnólyfjafræðilegt mikilvægi:Þurrkaður safaríkur stilkur afCistanchetubulosa (Schenk) R. Wight er einn hluti af hefðbundnum kínverskum lyfseðlum fyrir sykursýki. Hins vegar hafa engar nútímalegar vísindaskýrslur verið til að staðfesta þessa hefðbundnu fullyrðingu um Cistanche tegundina fyrr en nú. Þannig var kannað áhrifin afCistanchetubulosaum glúkósajafnvægi og blóðfitu í sermi í karlkyns BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) músum, líkan af sykursýki af tegund 2.

Efni og aðferðir:Verbascoside og echinacoside innihaldCistanchetubulosaduft var metið með því að nota HPLC. Heildarfenólinnihald, fjölsykruinnihald og andoxunarvirkniCistanchetubulosaduft var einnig metið. Þá, mismunandi skammtar afCistanche tubulosa(jafngildir 120,9, 72,6 eða 24,2 mg verbascoside/kg) voru gefin til inntöku einu sinni á dag í 45 daga handa karlkyns db/db músum. Aldurssamsvörunar db/þ mýs voru notaðar sem venjuleg viðmið. Líkamsþyngd, fastandi blóðsykur, blóðsykur eftir máltíð og insúlínþolspróf voru mæld meðan á tilrauninni stóð. Á þeim tíma sem fórnin fór fram var blóði safnað til að mæla insúlínmagn, jafnvægislíkan mat á insúlínviðnámi (HOMA-IR) og heildar kólesteról, þríglýseríð, HDL-c, LDL-c og VLDL-c gildi; lifur og vöðvi var safnað til að mæla glýkógenmagn.

Niðurstöður: Cistanchetubulosabæla verulega hækkuð blóðsykursgildi á fastandi maga og blóðsykur eftir máltíð, bætt insúlínviðnám og blóðfituhækkun og bæla niður líkamsþyngdartap indb/db mýs. Hins vegar,Cistanchetubulosahafði ekki marktæk áhrif á insúlínmagn í sermi eða glýkógenmagn í lifur og vöðvum.

Niðurstaða:Þessi rannsókn veitir vísindalegar sannanir fyrir hefðbundinni notkun áCistanchetubulosatil að meðhöndla sykursýki, sem bendir til þessCistanchetubulosahefur möguleika á að þróast í virkt fæðuefni eða lyf til að koma í veg fyrir blóðsykurshækkun og meðhöndla blóðfituhækkun.

Leitarorð:Cistanchetubulosa, sykursýki af tegund 2,Blóðsykurslækkandi áhrif, blóðsykurslækkandi áhrif

1. Inngangur

Sykursýki (DM) er versnandi og flókin efnaskiptasjúkdómur sem einkennist aðallega af óeðlilega háu blóðsykri (blóðsykursfalli) (Tiwari og Rao, 2002; Stumvollet al., 2005; Nathan o.fl., 2009). Um það bil 90 prósent af 347 milljón sjúklingum með sykursýki um allan heim eru með tegund 2 (óinsúlínháð) DM (Danaei o.fl., 2011). Þrír helstu efnaskiptagallar stuðla stöðugt að blóðsykrishækkun hjá sjúklingum með DM af tegund 2: Skortur á insúlínseytingu, hátt framleiðsla glúkósa í lifur og insúlínviðnám (Bavenholm o.fl., 2001). Tegund 2 DM getur stytt lífslíkur og er veruleg læknisfræðileg og efnahagsleg byrði (Gakidou o.fl., 2011)

Meingerð DM af tegund 2 er margþætt og hefur verið tengd bæði erfðaþáttum og lífsstílsþáttum (Stumvoll o.fl., 2005). Lífsstílsinngrip ásamt inntökuand-blóðsykurshækkunlyf eru dæmigerð aðferð til að stjórna tegund 2 DM. Lyf til inntökuandstæðingur-blóðsykurshækkunáhrif með því annaðhvort að bæta úr þremur helstu efnaskiptagöllunum sem valda blóðsykrishækkun eða með því að draga úr aukningu á blóðsykursgildum eftir máltíð með því að hindra meltingu og frásog kolvetna í þörmum.

Þrátt fyrir að margir flokkar áhrifaríkra lyfja hafi orðið viðurkennd val fyrir læknismeðferð hjá flestum sjúklingum með DM tegund 2, hafa nokkur þessara tilbúnu lyfja alvarlegar aukaverkanir. Til dæmis auka rósíglítazón og pioglitazón tíðni hjartadreps, hjartabilunar og útlægs bjúgs, og eru tengist aukinni hættu á krabbameinsvaldandi áhrifum og jafnvel dauða eftir langvarandi notkun (Nissen og Wolski, 2007; Zhang o.fl., 2007; Home o.fl., 2009). Þess vegna er brýn þörf fyrir uppgötvun annarra lyfja sem myndu hafa blóðsykurslækkandi virkni en hafa færri aukaverkanir. Samanborið við gerviefni, náttúrulega unninblóðsykurslækkandilyf, eins og jurtir og hefðbundin lyf, hafa langa notkunarsögu og geta verið almennt öruggar hugsanlegar heimildir umblóðsykurslækkandilyf (Yeh o.fl., 2003).

Cistanche, ættkvísl sníkjudýra sem tilheyra Orobanchaceae fjölskyldunni, er almennt notað sem hefðbundið lyf við lækningasjúkdómum og ófrjósemi, samkvæmt kínversku lyfjaskránni (Chinese Pharmacopoeia Commission, 2010). Eins og skráð er í kínverskum læknisfræðibókum eins og BenCao TuJing og Nature ofDrug, hefur Cistanche ættkvíslin einnig verið soðin með kindakjöti, kartöflum eða hrísgrjónum til að framleiða styrkjandi fæðu til að meðhöndla skerðingu af völdum álags í hundruðir ára, sem bendir til þess að Cistanche ættkvíslin sé óhætt að taka munnlega.

Í hefðbundinni kínverskri læknisfræði er DM nefnt einkennin „Xiao Ke“ og hefur verið meðhöndlað um aldir með kínverskum jurtum. Þurrkaður safaríkur stilkur Cistanche tegundarinnar er venjulega notaður sem hluti af níu lyfseðlum gegn sykursýki ("Xiao Ke Fang") í hefðbundnu kínversku læknisfræðibókinni Sengji Zonglu. Hins vegar, hingað til, hafa engar nútímavísindalegar skýrslur verið til að staðfesta þessa hefðbundnu fullyrðingu um Cistanche-tegundina.

Cistanchetubulosa(Schenk) R. Wight, Cistanche tegund sem sníklar rætur Tamarix plöntunnar – sem er aðallega ræktuð í kringum Taklamakan eyðimörkina – hefur nýlega verið notuð til að framleiða skyndite til notkunar sem hagnýtur matur (DaZhongWeiShengBao, 2010; Baidu Pedia, 2011) .

Cistanchetubulosainniheldur umtalsvert magn af fenýletanóíð glýkósíðum (PhGs), iridoids, lignönum, alditólum, fásykrum, fjölsykrum og rokgjörnum efnasamböndum eins og palmiticacid og línólsýru (Song o.fl., 2000; Jiang og Tu, 2009). Helstu virkir þættir Cistanche tegundanna eru taldir vera PhG (Xie o.fl., 2006; Jiang og Tu, 2009).Cistanchetubulosaog greint hefur verið frá því að innihaldsefni þess, svo sem PhG, fjölsykrur og fjölfenól, hafi gott andoxunarefni (Denget al., 2004; Pellati et al., 2004; Frum et al., 2007; Sui et al., 2011; Wang o.fl., 2011), áhrifum gegn háþrýstingi (Ahmad o.fl., 1995) og kólesterólskorti (Shimoda o.fl., 2009). Fjölmargar skýrslur hafa bent til þess að PhG, fjölsykrur og fjölfenól beitablóðsykurslækkandiáhrif eða hafa jákvæð áhrif af tegund 2 DM með hreinsun sindurefna og mótun á oxunarálagi af völdum glúkósa (Pinto o.fl., 2010; Saltiel, 2001; Gulati o.fl., 2012). Þessir þættir og lífvirkni afCistanchetubulosabenda til þess að það gæti hugsanlega verið notað til meðferðar á tegund 2 DM. Vegna skorts á skýrslum sem lýsa áhrifum afCistanchetubulosavið meðhöndlun á DM, taldi það þess virði að kanna sykursýkitengda virkniCistanchetubulosa. Þannig skoðuðum við áhrifin afCistanchetubulosaum blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun í BKSdb/db músum (BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J, Jackson Laboratory stocknumber 00642), líkan af tegund 2 DM sem sýnir marga eiginleika DM manna, þar á meðal versnandi blóðsykurshækkun, insúlínviðnám og offitu (Hummel). o.fl., 1966; Nishina o.fl., 1994; Uchida o.fl., 2005; Srinivasan og Ramarao, 2007).

2. Efniviður og aðferðir

2.1. Efni

Verbascoside (hreinleiki 493 prósent) og echinacoside (hreinleiki 493 prósent) voru keypt frá National Institute for Food and Drug Control (Peking, Kína). HPLC bekk metanól var keypt frá Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, Bandaríkjunum). Acarbose var keypt frá Bayer (West Haven, CT, Bandaríkjunum). Hreinsað vatn var framleitt með því að nota aMillipore Milli-Q Integral 3 System og Q-POD Milli-Q System (Bedford, MA, Bandaríkin).

2.2. Cistanche tubulosa duft undirbúningur

Þurrkaðir safaríkur stilkar afCistanchetubulosa(Sýniskóði 109092, ræktað í Hetian, Xinjiang, Kína) var keypt frá Xinjiang Guru Biology Co. Ltd. vandlega, innsiglað í litlum umbúðum til að einangra duftið frá ljósi og raka og geymt við 4 1C.

2.3. Auðkenning Cistanche tubulosa

Þurrkaður safaríkur stilkur sýnis 109092 var auðkenndur út frá formfræðilegum eiginleikum þeirra af prófessor DeXiang Gu og prof.Xin Liu, sem eru sérfræðingar í Cistanche tegundum. Sýnin voru auðkennd frekar með DNA raðgreiningu. Heildar erfðafræðilegt DNA var einangrað úr sýni 109.092 með AxyPrep™ MultisourceGenomic DNA Kit (Axygen, CA, Bandaríkjunum). ITS svæðið sem innihélt 5.8S rDNA brotið var magnað upp með því að nota grunnröð af ITS1/ITS2 5′ CGT AAC AAG GTT TCC GTA GAA 3′ og 5′ TTA TTG ATA TGCTTA AAC TCA GCG GG 3′ (BGI Genomics, Shenzhen, Kína), með aðferð sem Schneeweiss o.fl. (Schneeweiss o.fl.,2004). Magnað DNA var raðgreint með BGI (BGI Genomics, Shenzhen, Kína) og niðurstaðan borin saman viðCistanchetubulosa5.8s rDNA röð á GenBank.

2.4. HPLC greining

Tvær doktorsgráður, echinacoside og verbascoside, voru notaðar sem gæðastaðlar fyrirCistanchetubulosa, samkvæmt kínversku lyfjaskránni (kínverska lyfjaskrárnefndin, 2010). HPLC er það sem oftast er notað fyrir eigindlega og magngreiningu PhGs. Þannig er verbascoside og echinacoside innihaldCistanchetubulosavoru ákvörðuð eftir áður birtri HPLC aðferð okkar (Zhao o.fl., 2011). Í stuttu máli, 0,1 gCistanchetubulosadufti var bætt út í 1{{10}} ml af hreinsuðu vatni og hrært kröftuglega í hringhristara (Vortex-Genie 2, Scientific Industries, Bohemia, New York, Bandaríkjunum) í 10 mín við stofuhita. Fasta efnið var dregið út aftur tvisvar við sömu aðstæður. Útdrættirnir voru sameinaðir, stilltir í 50 ml, og skilvindur við 12,000g í 5 mín. Fljótandi vökvinn var síaður í gegnum 0,45 μm-pore pólýtetraflúoretýlen (PTFE) sprautusíu (Pall, Ann Arbor, MI, Bandaríkjunum). Síðan var 20 ul af flotinu sprautað í HPLC kerfið (Binary HPLC Pump 1525, RefractiveIndex Detector 2414, Photodiode Array Detector 2996; Waters,Milford, MA, USA) sem innihélt Symmetry C18 súlu (4,6 mm 5 250 mm, μm; Waters) og Guard súlu (3,9 mm 20 mm, 5 mm; Waters); kerfinu var stjórnað með EmpowerPros hugbúnaði (Waters, Milford, MA, Bandaríkjunum) með flæðihraða 1 ml/mín við 30 1C. Hreyfanlegur fasi var gerður með því að blanda leysi A (0,5 prósent (V/V) ediksýru vatnslausn) og leysi B (metanól) til að mynda línulegan halla upp á 25–40 prósent B á 0–10 mínútum. Viðhaldstími fyrir echinacoside og verbascoside var 10,4 mín og 13,6 mín, við hámarks UV gleypni 330 nm.

2.5. Greining á heildarfenólinnihaldi, fjölsykruminnihaldi og andoxunarvirkni Cistanche tubulosa

2.5.1. Undirbúningur sýnis

Cistanchetubulosaútdráttur var útbúinn með hreinsuðu vatni með því að nota áður birta aðferð okkar (Zhao o.fl., 2011) með smávægilegum breytingum, til að ákvarða heildarfenólinnihald, fjölsykruinnihald og andoxunarvirkni (mynd 1). Í stuttu máli, 1 gCistanchetubulosadufti var bætt út í 15 ml hreinsaðs vatns við stofuhita, hrært kröftuglega í hringiðu með því að nota hringhristara í 5 mínútur og flotið var endurheimt með skilvindu við 3000g í 15 mínútur. Úrkoman var dregin út aftur tvisvar við sömu aðstæður. Samsetta flotið var stillt á 50 ml með hreinsuðu vatni og látið fara í gegnum 0,45 μm-pore PTFE sprautusíu (Pall) fyrir greiningu.

2.5.2. Greining á heildarfenólinnihaldi

Heildarfenólinnihald var ákvarðað með því að nota Folin-Ciocalteureagent og gallic sýru sem viðmiðunarefnasamband, eins og lýst er af Singleton og Rossi (Dubois o.fl., 1956; Singleton og Rossi, 1965) með smávægilegum breytingum. Í stuttu máli, 0,1 ml afCistanchetubulosaútdrætti var blandað saman við {{0}},9 mL hreinsað vatn og 5 mL Folin-Ciocalteu hvarfefni (áður þynnt 10-falt með eimuðu vatni), leyft að standa við 25 1C í 3,5 mín., síðan var 4 ml af natríumbíkarbónati (7,5 prósent w/v) lausn bætt við blönduna og ræktuð við {{10}}C í 60 mínútur. Frásog var mæld við 765 nm með litrófsmæli (Perkin Elmer λ 25 UV–visible, Waltham, MA, Bandaríkjunum). Heildarfenólinnihald var ákvarðað með því að nota staðlaða feril sem var búin til með gallsýru (0–0,6 mg/ml) sem staðal. Niðurstöður voru reiknaðar sem milligrömm gallínsýrujafngildi (GAE)/1 gCistanchetubulosagróft duft. Öll próf voru endurtekin fjórum sinnum.

2.5.3. Greining á innihaldi fjölsykru

Fjölsykruinnihaldið íCistanchetubulosavar mældur með fenól-brennisteinssýruaðferðinni (Dubois o.fl., 1951; Duboiset al., 1956). Í stuttu máli var 1 ml af viðeigandi þynntu Cistanchetubulosa þykkni og 0,5 ml fenóllausn sett í skrúfað loks rör, sem voru lokuð og hrært í hringiðu. Síðan var 2,5 ml af óblandaðri brennisteinssýru bætt beint við fljótandi yfirborðið innan 5 s. Glösunum var síðan lokað, hrært í hvirfli í 5 sek., ræktað í 2 mínútur við 100 1C og leyft að kólna niður í stofuhita fyrir greiningu. Frásog var mæld við 490 nm með litrófsmæli (Perkin Elmer λ25 UV–sýnilegt) á móti 70 prósenta metanóleyðslu. Fjölsykruinnihaldið var ákvarðað með því að nota staðlaða feril sem búin var til með glúkósa (0-100 mg/ml) sem staðal. Niðurstöður voru reiknaðar sem prósent fjölsykra/Cistanchetubulosagróft duft. Öll próf voru endurtekin þrisvar sinnum.

2.5.4. Greining á heildarvirkni andoxunarefna

AndoxunarvirkniCistanchetubulosaútdráttur, akarbósi og rósíglítazón voru ákvörðuð með 2,2'-amínó-dí(2-etýlbensóþíasólínsúlfónsýru-6)ammóníumsaltprófun (ABTS) og járnjón (Fe3þ) afoxunarprófun ( FRAP) með því að nota viðskiptasett (Beyotime, Haimen, Kína). Með viðeigandi oxunarefnum er hægt að oxa ABTS í grænt ABTS þ; andoxunarefni geta hindrað þetta ferli. Heildar andoxunarvirkni andoxunarefna getur endurspeglast með gleypni ABTS þ við 734 nm. Frásog var mæld við 734 nm (ABTS) með því að nota örplötulesara (Epoch, Bio-Tek, Richmond, VT, USA), með Trolox (ABTS) asan andoxunarefni staðall. Niðurstöður ABTS prófsins voru reiknaðar sem mM Trolox Equivalent Andoxidant Capacity (TEAC)/1 g duft.

Við súr skilyrði geta andoxunarefni endurheimt ferrictripyridyltriazine (Fe3þ-TPTZ) í blátt Fe2þ-TPTZ. Heildar andoxunarvirkni andoxunarefna getur endurspeglast af gleypni Fe2þ-TPTZ við 593 nm. Frásog var mæld við 593 nm (FRAP) með því að nota örplötulesara (Epoch), með FeSO4 (FRAP) sem andoxunarstaðli. Niðurstöður FRAP prófsins voru reiknaðar sem mM FeSO4 jafngild andoxunargeta (FEAC)/1 g duft. Öll próf voru endurtekin fjórum sinnum.

2.6. Áhrif Cistanche tubulosa á blóðsykurshækkun í db/db músum

2.6.1. Dýr og meðferðarhópar

Karlkyns BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J (db/db) mýs og aldurssamsvörun arfblendna gotfélaga þeirra sem ekki eru með sykursýki (db/þ) voru vinsamlegast veittar við 5–6 vikna aldur af National ResourceCenter for Mutant Mice Model Dýrarannsóknarmiðstöð Nanjing háskólans (Nanjing, Kína). Dýraumhirðin og tilraunaaðferðirnar voru samþykktar af siðanefnd tilraunadýra á lífvísindasviði Sun Yat-sen háskólans (samþykktarkóði 0046500) og voru framkvæmdar samkvæmt reglugerðum um dýratilraunir í Kína. Dýrin voru geymd í 2272 1C-sértæku sýklafríu (SPF) herbergi við 6075 prósent raka í 12 klst ljós-myrkri hringrás og fengu hreinsað AIN-93G fæði (Trophic Animal Feed High- tech Co., Ltd., Nantong, Kína) og útvegaði hreinsað vatn að vild.

Sjö dögum eftir komu var db/þ músunum sem ekki voru með sykursýki gefið hreinsað vatn (fartæki) sem venjulegur samanburðarhópur fyrir sykursýkishópa (n¼7), en sykursýkis db/db mýsnar voru vigtaðar af handahófi skipt í 6 hópa (n¼8) til að rannsaka áhrifin afCistanchetubulosaí db/db músum með sykursýki af tegund 2 (tafla 1). Thedb/þ mýs voru gefin burðarefnið til inntöku og db/db mýs fengu burðarefnið til inntöku, rósíglítazón (0,52 mg/kg/dag), acarbose (19,5 mg/kg/dag), eða þrír skammtar afCistanchetubulosa(jafngildir 120,9, 72,6 eða 24,2 mg verbascoside/kg/dag og vísað til sem CT120.9, CT72.6 eða CT24.2, í sömu röð) í 45 daga. Skammtarnir afCistanchetubulosavoru settar í samræmi við skammtinn af hrádufti sem mælt er með í lyfjaskrá Alþýðulýðveldisins Kína (PPRC);Cistanchetubulosaskammta af 120,9, 72,6 og 24,2 mg verbascoside/kg/dag sem samsvarar 5-faldri, 3-faldri og 1-faldri þynningu af hráduftsskammtinum sem mælt er með af PPRC. Öll prófunarsýni til inntöku voru leyst upp í hreinsuðu vatni í hæfilegum styrk til að gefa svipað magn af prófsýnum til músa með sömu líkamsþyngd. Heildarmagnið sem gefið var var o1 ml og prófsýnin voru gefin til inntöku í hvern hóp músa á hverjum degi á milli 16:30 og 17:30 í 45 daga. Fylgst var með líkamsþyngd og blóðsykursgildum allan tilraunatímann. Í lok tilraunarinnar (dagur 50) föstuðu mýsnar í 14 klst. og blóðsýnum var safnað úr augnæð, ræktað við stofuhita í 30 mínútur, skilið í skilvindu og sermissýnin voru geymd við 70 1C í frekari prófun. Í kjölfarið voru mýsnar aflífaðar. Lifrin og beinagrindarvöðvinn var tekinn upp, þvegin í ísköldu saltvatni til að fjarlægja blóðið, snöggfryst í fljótandi köfnunarefni og geymd við 70 1C til frekari prófunar.

2.6.2. Greining á fastandi blóðsykursgildi (FBG), inter-peritonealinsúlínþolpróf (ITT) og fastandi sermi insúlínmagn (FINS)

Fastandi blóðsykursgildi voru mæld eftir 14 klst. föstu áður en dýratilraunin hófst (0 dagar), á 1. degi{{10}} og á 5 daga fresti á dögum 20.–45. með því að nota blóðsykurseftirlitskerfi (ACCU-CHEK Active, Roche DiagnosticsGmbH, Mannheim, Þýskalandi). Hækkunin á FBG-gildum (FBG prósentuhækkunargildi: FBG-aukning prósent ) á degi x(dagur 20–45) voru reiknuð út með því að nota (BGday x BGday 0)/BG0 dag 100, til að tákna hækkun á FBG-gildum fyrir hvern hópur miðað við upphafleg FBG gildi þeirra. Blóðsykurmagn eftir máltíð var ákvarðað 120 mínútum eftir inntöku glúkósa (2 g/kg líkamsþyngdar) á degi 40.

ITT var framkvæmt á 45. degi tilraunarinnar eftir föstu yfir nótt (14 klst.). Blóðsykursgildi í bláæð í rófu var mæld fyrir insúlíninndælingu (0 mín.) og 30 mín., 60 mín eftir inndælingu insúlíns milli kviðarhols (0,1 ae/kg líkamsþyngdar). Glúkósasvörun á meðan ITT var gefið upp sem samþætt svæði undir ferlum fyrir insúlín (AUCinsulin), reiknað með trapisureglunni (Vishwakarma o.fl., 2003). Í lok tilraunarinnar voru föstu insúlínmagn í sermi greind með því að nota rottu/músinsúlín ELISA settið frá Millipore (Bedford, MA, Bandaríkjunum); sermisýnin voru útbúin eftir leiðbeiningum settsins. The Homeostatic Model Assessment of Insulin Resistance (HOMA-IR) index var reiknað út með eftirfarandi formúlu: HOMA-IR¼fastandi insúlín (ng/ml) fastandi blóðsykur (mmól/L)/22,5 (Matthews o.fl., 1985).

2.6.3. Greining á blóðfituþéttni í sermi

Styrkur heildarkólesteróls (TC), háþéttni lípópróteins kólesteróls (HDL-c) og þríglýseríða (TG) í sermi var ákvarðaður með því að nota ensímsett (Biosino Biotechnology &Science Inc., Peking, Kína). Lágþéttni lípóprótein kólesteról (LDL-c) gildi voru reiknuð sem TC-TG/5 – HDL-c, en mjög lágþéttni lípóprótein kólesteról (VLDL-c) var reiknuð sem TG/5, samkvæmt jöfnu Friedewald (Friedewald) et al., 1972). Blóðæðastuðullinn var reiknaður út sem (TC HDL-c)/HDL-c.

2.6.4. Greining á glýkógenmagni í lifur og beinagrindarvöðvum

Frosnir lifur og beinagrindarvöðvar voru unnar fyrir glýkógengreiningu strax eftir að þeir voru fjarlægðir úr 70 1C frystinum. Glýkógeninnihald lifrar og beinagrindarvöðva var mælt með því að nota glýkógensett í verslun (Jiancheng, Nanjing, Kína) byggt á aðferð Keppler og Decker (Keppler og Decker, 1974). Frásog sýnanna við 505 nm var mæld eftir að glösin voru kæld niður í stofuhita. Magn glýkógens í hverju vefjasýni var gefið upp sem mg glúkósa á hvert g af vefjum.

2.7. tölfræðigreining

Allar niðurstöður eru gefnar upp sem meðaltal7SEM og voru greindar með ANOVA af tölfræðilegum pakka Félagsvísindahugbúnaði (SPSS 16.0, Chicago, IL, USA) eða GraphPad Prism 5 (La Jolla, CA, USA). HOMA-IR vísitölurnar voru einnig metnar með því að nota tveggja úrtaks óháða t-prófið eftir logaritmíska umbreytingu. AUC gildin voru reiknuð út með GraphPad Prism 5. P gildi undir 0.05 voru talin gefa til kynna tölfræðilega marktækan mun.

3. Úrslit

3.1. Auðkenning Cistanche sýnis

Niðurstöður röðunarinnar benda til þess að mögnuðu röðin sé sú sama ogCistanche tubulosagen fyrir 5.8S rDNA að hluta og fullkominni röð (614 núkleótíð; Gen-Bank aðgangsnúmer AB217871). Á grundvelli formfræðilegra eiginleika þess og 5.8S rDNA gena röð, er sýni 109.092 auðkennt semCistanchetubulosa.

3.2. Magnbundin ákvörðun á verbascoside innihaldi og echinacoside innihaldi Cistanche tubulosa

Innihald verbascoside og echinacoside íCistanchetubulosavoru magngreind með því að nota viðeigandi staðla. Theverbascoside og echinacoside innihald afCistanchetubulosavoru 2,66 prósent og 11,59 prósent, í sömu röð. HPLC litskiljunin afCistanchetubulosaútdráttur er sýndur á mynd 2.

3.3. Heildarfenólinnihald, fjölsykrurinnihald og andoxunarvirkni Cistanche tubulosa

Heildarfenólinnihald íCistanchetubulosavar 66,2970,44 mg GA/g. Fjölsykruinnihaldið íCistanche pípur var10,1570,26 prósent. ABTS og FRAP prófin gáfu til kynna að virkni andoxunarefna væri 1,3970,06 mM TEAC/g og 1,6170,04 mM FEAC/g fyrirCistanchetubulosa, {{0}}.1570.01 mM TEAC/gand 0,1270,01 mM FEAC/g fyrir akarbósa og 0,1670,01 mMTEAC/g og 0,1370,01 mM FEAC/g fyrir rósíglítazón, í sömu röð.

3.4. Blóðsykurslækkandi áhrif Cistanche tubulosa í db/db músum

Niðurstöður okkar sýndu þaðCistanche tubulosagæti bælt hækkað blóðsykursgildi á fastandi maga og hækkað blóðsykursgildi eftir máltíð, aukið insúlínnæmi og dregið úr líkamsþyngdartapi (BW) db/db músa með sykursýki. Almennt,Cistanchetubulosavar áhrifaríkara við að lækka blóðsykursfall á meðan á tilrauninni stóð, og ennfremur var Cistanche tubulosa betri en acarbose til að bæta insúlínviðnám (p-gildin eru sýnd hér að neðan).

3.4.1. Áhrif Cistanche tubulosa á líkams- og lifurþyngd

Í samanburðarhópi fyrir sykursýki jókst BW stöðugt á fyrstu 25 dögum. Hins vegar, með framgangi sykursýki, lækkaði BW í sykursýkisstjórnunarmúsunum lítillega á degi 30 (viðbótartafla 1). ÍCistanchetubulosahópa, allir þrír skammtar afCistanchetubulosadró úr hraða þyngdartaps samanborið við sykursýkisstjórnunarmýs (án þýðinga, viðbótartafla 1). Í jákvæða samanburðarhópnum leiddi rósíglítazón til marktækrar aukningar á líkamsþyngd frá degi 20 samanborið við samanburðarhóp sykursýki (po0.05). Aftur á móti hægði akarbósi á hraða þyngdartaps samanborið við samanburðarhóp með sykursýki. Í venjulegum samanburðarhópi jókst líkamsþyngd stöðugt meðan á tilrauninni stóð og var marktækt lægri en viðmiðunarhópur fyrir sykursýki (po0,001).

Í lok tilraunarinnar jukust lifrarþyngd og lifrar/líkamsþyngdarhlutfall aðeins marktækt í rósiglitazónhópnum (po0.001) samanborið við samanburðarhópinn fyrir sykursýki.

3.4.2. Áhrif Cistanche tubulosa á blóðsykursgildi

Cistanchetubulosabirtistblóðsykurslækkandihefur áhrif á indb/db mýs eftir 20 daga inntöku og gæti stjórnað FBG stigi og FBG-hækkun prósentugildi í langan tíma á db/db músum á skammtaháðan hátt, eins og gefið er til kynna með marktækt minni föstu og eftir máltíð. blóðsykursgildi (mynd 3, tafla 2). Í samanburðarhópi fyrir sykursýki jókst magn FBG stöðugt meðan á tilrauninni stóð og var um það bil 6 sinnum hærra en venjulegur samanburðarhópur á degi 45 (28.3071.027 mmól/L á móti 4.6670.350 mmól/L; po0.001). Allir þrír skammtar afCistanchetubulosahamlaði marktækt tilhneigingu FBG til að aukast í db/db með mýkingu í allri tilrauninni, þar sem CT120.9 sýndi sterkustu blóðsykurslækkandi áhrif (dagur 20, 35 og 45: po{{1{{ 16}}}}.001; dagur 40: po0.05 á móti sykursýkisstjórnun). Í jákvæðu samanburðarhópunum hamluðu rósíglítazón (0,52 mg/kg) og akarbósi (19,5 mg/kg) einnig marktækt tilhneigingu FBG til að aukast í db/db músum í allri tilrauninni (dagur 2{{41} } til 45: po0.001, dagur 10: po0.05, rosiglitazonevs. sykursýkisstjórnun; dagur 35: po0.001, dagur 40: po0.01, dagur 20 og 45: po0. 05, acarbose vs. sykursýkisstjórnun). Hins vegar hafði akarbósi (19,5 mg/kg) minni áhrif en rósíglítazón (dagur 20: po0,05; dagur 30: po0,01; dagur 35–45: po0,001) og CT120,9 (dagur 45: po0,001) . Í venjulegum samanburðarhópi hélst FBG stigið stöðugt meðan á allri tilrauninni stóð og var marktækt lægra en í samanburðarhópi fyrir sykursýki (po0,001).

Eftir gjöf í 20 daga,Cistanche tubulosahamlaði verulega hækkun á blóðsykri í db/db músum (mynd 3). FBG-aukning prósenta gildi sykursýkisviðmiðunarhópsins og acarbose (19,5 mg/kg líkamsþyngdar) hópsins hækkuðu meðan á tilrauninni stóð. FBG-hækkun prósenta gildin af þremurCistanchetubulosahópum fjölgaði aðeins á degi 30. FBG-hækkun prósenta gildi CT120.9 hópsins hélst stöðug á milli dags 30 og dags 45, á meðan CT72.6 og CT24.2 jukust óverulega (p40.05) eftir degi 45. Í lok dags. tilraunin, þrír skammtar afCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 og CT24.2) dró verulega úr aukningu á FBG-hækkun prósentum um 181,5 prósent, 151,72 prósent og 123,58 prósent í samanburði við sykursýkishópinn (PO{{) 24}}.001), í sömu röð. Frá degi 20 til dags 40 voru prósentugildi fyrir FBG aukningu í Cistanche tubulosa hópunum þremur lægri eða svipuð og acarbose hópnum (p40.05). Á degi 45 var FBG-hækkunarhlutfallið í CT120.9 hópnum marktækt lægra en acarbose hópnum (po0.01).

Cistanchetubulosasýndu skammtaháð blóðsykurslækkandi áhrif (tafla 2). Í lok tilraunarinnar voru FBG gildi CT120.9 hópsins marktækt lægri en sykursýkisviðmið, acarbose og tveir aðrirCistanchetubulosahópar (CT120.9 vs. acarbose, CT72.6 og CT24.2, po0.01; CT120.9 vs. sykursýkisstjórnun, po0.001; Tafla 2). Í lok tilraunarinnar voru FBG stigin af þremurCistanchetubulosaHópar (CT120.9, CT72.6 og CT24.2) höfðu aukist um 53,41 prósent, 83,19 prósent og 111,33 prósent, í sömu röð, samanborið við upphaflega FBG gildi þeirra, en FBG gildi í viðmiðunarhópi sykursýki og acarbose hópnum jukust um 2134. prósent og 150,76 prósent . Af þremur skömmtum af Cistanche tubulosa sem prófaðir voru, leiddi aðeins CT120.9 til stöðugt lægri FBG gildi á allri tilrauninni. CT72.6 og CT24.2 voru minna áhrifarík við að draga úr FBG stiginu en CT120.9 (tafla 2, viðbótarmynd 1). FBG gildi CT120.9 hópsins hækkuðu aðeins frá degi 30, en FBG gildi hinna tveggjaCistanchetubulosahópum og acarbose hópnum fjölgaði hraðar. Frá degi 10 til 40, FBG stigin af þremurCistanchetubulosahópar voru lægri eða svipaðir og theacarbose hópurinn (19,5 mg/kg líkamsþyngdar); þessi munur var ekki tölfræðilega marktækur (p40.05).

Á degi 40 dró CT120.9 marktækt niður hækkun á blóðsykursgildi eftir máltíð (po0,05, tafla 2) 2 klst. eftir einn skammt af glúkósa til inntöku (2 g/kg). Áhrif CT120.9 á blóðsykursgildi eftir máltíð í db/db músum voru sambærileg við 19,5 mg/kg acarbose (p40.05). Áhrif CT72.9 og CT24.2 voru minni en rósíglítazón (po0,001).

3.4.3. Áhrif Cistanche tubulosa á fastandi insúlínmagn í sermi og insúlínþol milli kviðarhols

Niðurstöður FINS sýndu að eftir inntöku í 45 daga hækkaði CT120.9 insúlínmagn í sermi (p40.05) óverulega í db/db músum um 40.73 prósent, en rósíglítazón hækkaði marktækt insúlínmagn í sermi um 58.90 prósent (po0,05 á móti sykursýkisstjórnun; tafla 3).

HOMA-IR stuðullinn var reiknaður út til að meta magn insúlínviðnáms og skorts frumuvirkni til fastandi blóðsykursfalls. Í samanburði við sykursýkishópinn bætti CT120.9 HOMA-IR systemicinsúlín næmisvísitöluna óverulega um 15,30 prósent (p40,05), en rósíglítazón bætti marktækt HOMA-IR stuðulinn um 35,30 prósent (á móti PO0,001). sykursýkisstjórnun; tafla 3). ITT var notað til að meta áhrifCistanchetubulosaum insúlínnæmi eftir utanaðkomandi insúlínsprautu. Niðurstöður sýndu að CT120.9 bætti insúlínsvörun í db/db músum með sykursýki. Áhrif CT120.9 voru sambærileg við rósíglítazón og voru betri en acarbose.CT12{{10}}.9 og rósíglítazón lækkuðu verulega blóðsykursgildi við 0 mín (fyrir insúlín) innspýting,po0.001 á móti sykursýki) og 30 mín (po0.01 fyrir CT120.9,po0.001 fyrir rósíglítazón) eftir inndælingu insúlíns (mynd 4). CT120.9 og rósíglítazón minnkuðu AUCinsúlín um 27,92 prósent og 43,89 prósent samanborið við sykursýkisstjórnun. Enginn marktækur munur var á blóðsykursgildum í CT120.9 og rósíglítazón hópnum hvenær sem var á meðan á ITT stóð. Blóðsykursgildi CT120.9 hópsins voru marktækt lægri en acarbose eftir 0 mín (fyrir insúlín inndælingu,po0.01: CT120.9 á móti acarbose), 30 mín (po0.01:CT120.9 vs. acarbose) og 60 mín. (po0.05: CT120.9 vs. acarbose) eftir inndælingu insúlíns (mynd 4). CT120.9 lækkaði AUCinsúlínið um 28,79 prósent samanborið við acarbose. Acarbose, CT72.6 og CT24.2 höfðu engin marktæk áhrif á AUCinsúlín eða blóðsykursgildi á hverjum tímapunkti ITT. Bæði FIN og ITT niðurstöður venjulegs samanburðarhóps voru marktækt lægri en hjá samanburðarhópi fyrir sykursýki (po0.05: FIN;po0.001: ITT).

3.4.4. Áhrif Cistanche tubulosa á glýkógenmagn í lifur og beinagrind

Glýkógenmagn í ýmsum vefjum er bein spegilmynd af insúlínnæmi, þar sem insúlín stuðlar að glýkógenútfellingu innan frumu. Rósíglítazón lækkaði marktækt glýkógenmagn í lifur um 59,61 prósent (po0.001), og jók glýkógenmagn í vöðvum um 33,93 prósent (po0,05 á móti sykursýkisstjórnun). CT24.2 lækkaði glýkógenmagn í lifur um 30,41 prósent (po0,05 á móti sykursýkisstjórnun). Minni skammtar af Cistanche tubulosa höfðu engin marktæk áhrif, hvorki lifur eða beinagrindarvöðva glýkógengildi.

3.5. Blóðvæðandi áhrif Cistanche tubulosa í db/db músum

Til að meta áhrifCistanchetubulosaá blóðfituskorti ákváðum við magn heildarkólesteróls, TG, HDL-c, LDL-c og VLDL-c í db/db músum. Niðurstöður okkar sýna þaðCistanchetubulosagetur bætt blóðfituhækkun með því að auka HDL-c gildi, minnka TG, LDL-c og VLDL-c gildi auk þess að lækka kólesterólmagn í db/db músum. CT120.9 (po0.05) og CT24.2(po0.001) lækkuðu marktækt TC gildi hjá sykursýki db/db músum (Tafla 3 ) samanborið við sykursýkisstjórnun. Af öllum tilraunahópum minnkaði aðeins CT24.2 marktækt magn TG(po0.05) og VLDL-c (po0.05) samanborið við sykursýkisstjórnun. Allir þrír skammtar afCistanchetubulosalækkaði LDL-gildið verulega (po0.01 fyrir CT120.9, po0.05 fyrir CT72.6, po0.001 fyrir CT24.2, á móti sykursýkisstjórnun) . Allir þrír skammtar afCistanchetubulosa(CT120.9, CT72.6 og CT24.2) hækkaði HDL-gildið óverulega um 9,78 prósent, 7,32 prósent og 7,78 prósent (p40,05 á móti sykursýkisstjórnun).

Af þessum fitubreytum er lágt HDL-c/TC gildi mikilvægasti óháði áhættuþátturinn fyrir kransæðasjúkdóm.CT120.9 (po0.05) og CT24.2 (po0.001 vs. sykursýkisstjórnun) hækkaði HDL-c/TC stigið marktækt. Æðarmyndandi stuðull, sem er áhættuþáttur kransæðasjúkdóms, lækkaði um alla þrjá skammta afCistanchetubulosa(po{{0}}.001 fyrir CT120.9 og CT24.2, po0.01 fyrir CT72.6 á móti sykursýkisstjórnun).

Í jákvæða samanburðarhópnum hækkaði rósíglítazón marktækt magn TC (po{0}}.001) og LDL-c (po0.01) samanborið við sykursýkisstjórnun. Rósíglítazón hækkaði einnig marktækt HDL c gildi um 57,32 prósent (po0,001) en hafði engin jákvæð áhrif á HDL-c/TC gildi eða æðamyndunarvísitölu. Akarbósi hafði ekki marktæk áhrif á blóðfituvísitölu í db/db músum.

4. Umræður

Þessi rannsókn var hönnuð til að kanna hugsanlega blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi virkniCistanchetubulosa.

Niðurstöður in vitro prófsins bentu til þessCistanchetubulosainniheldur vel þegið magn af fenól- og fjölsykrum og sýnir góða andoxunarvirkni. Heildarfenólinnihald íCistanche tubulosaer lægra en heildarfenólinnihald te (Ankolekar o.fl., 2011) og kaffi (Chu o.fl., 2011) og hærra en margra annarrablóðsykurshækkunjurtir eins og trönuber (Pinto o.fl., 2010), þang (Nwosu o.fl., 2011), kjúklingabaunir (Sreerama o.fl., 2012) og nokkrar af hefðbundnum lækningajurtum sem notaðar eru við meðhöndlun á tegund 2 DM (Gulatiet al., 2012). Fjölsykruinnihald Cistanche tubulosa er lægra en fjölsykruinnihald Panax ginseng (Wanget al., 2011) og te (Chu o.fl., 2011) og hærra en margra annarra.blóðsykurslækkandijurtir eins og Aloe vera L. (Hu o.fl., 2003), jujuba (Sun o.fl., 2011), Polyporus umbellatus (Tian o.fl., 2007), Rheum palmatum (Ni o.fl., 2007) og nokkrar af hinar hefðbundnu lækningajurtir sem notaðar eru við meðhöndlun á tegund 2 DM (Gulatiet al., 2012). Plöntur með hátt innihald andoxunarefna, eins og pólýfenól og fenýletanóíð glýkósíð (PhGs), eru oft auðkennd með sykursýkisvirkni, sem er að minnsta kosti að hluta til vegna getu þeirra til að draga úr oxunarálagi (Pinto o.fl., 2010; Saltiel, 2001; Gulati o.fl., 2012). Niðurstaðan okkar fyrir andoxunarefni er í samræmi við fyrri skýrslur (Arthur o.fl., 2011;and-Baoet al., 2010; Funes o.fl., 2009) sem benti til þessCistanchetubulosahefur umtalsverða andoxunareiginleika. TEAC gildi og FRAP gildi Cistanche tubulosa voru hærra en grænkál, gulrót, agúrka, grænt salat, sellerí (Pellegrini o.fl., 2003) og nokkrar aðrar plöntur með góð andoxunaráhrif sem notuð voru til að meðhöndla sykursýki (Rahimi o.fl. , 2005), og var mun hærra en akarbósi og rósíglítazón. Fyrri klínískar rannsóknir hafa sýnt fram á að -lípósýra (Konrad o.fl., 1999) eða önnur andoxunarefni (Paolisso o.fl., 1992) gætu bætt insúlínnæmi hjá insúlínþolnum og/eða sykursjúkum sjúklingum. Þannig er Cistanchetubulosa uppspretta andoxunarefna sem geta haft verndandi áhrif gegn sykursýki og langvarandi fylgikvillum sykursýki.

Cistanche tegundir hafa verið notaðar sem styrkjandi fæða eða lyf í hundruðir ára, sem bendir til þess að óhætt sé að taka þær til inntöku. Fyrri skýrsla um 14 daga bráða eiturhrifapróf sýndiCistanchetubulosaþykkni tilheyrir raunverulegu óeitruðu: Hámarksþolsskammti (MTD) afCistanchetubulosaþykkni reyndist vera 410 g/kg í músum. Engin dánartíðni var skráð í 14 daga eftirliti og prófaðar mýs úr hverjum hópi sýndu engin ofurmerki um eiturverkanir í 24 klst. og 14 daga athugun (Zhang o.fl., 2012). Stærsti skammtur í tilraun okkar, 5,084 g CTAE/kg BW/dag, sem jafngildir 9,10 g hrádufti/kg í músum, er mun lægri en MTD. Þannig er skammturinn öruggur í tilraun okkar.

Týpa 2 DM er einn algengasti og alvarlegasti efnaskiptasjúkdómurinn í heiminum og einkennist aðallega af blóðsykrishækkun. Í þessari rannsókn tókum við upp BKS.Cg-Dock7m þ/þ Leprdb/J(db/db) mýs sem líkan af tegund 2 DM til að kanna áhrifCistanchetubulosaá glúkósa og lípíðumbrotum in vivo. db/dbmýs eru vel viðurkennd erfðafræðileg nagdýralíkan af lífsstílstengdum efnaskiptasjúkdómum, sem er sérstaklega gagnlegt til að meta sykursýkis- og offitulyf. Þessi músastofn ber breytingu á leptínviðtakageninu, sýnir blóðsykurshækkun, blóðfituhækkun, insúlínviðnám og offitu eftir 6-7 vikna aldur (Hummel o.fl., 1966; Nishina o.fl., 1994; Uchida o.fl., 2005; Srinivasan og Ramarao, 2007).

Með versnun sykursýki gæti lítilsháttar lækkun á líkamsþyngd sykursýkisviðmiðunarhópsins (viðbótartafla 1) stafað af lækkuðu plasmainsúlínmagni sem á sér stað hjá sykursýkisdb/db músum á aldrinum 10-12 vikna (Hummel o.fl., 1966) og aukin efnaskiptavirkni í db/db músum með sykursýki (Trayhurn, 1979). Lækkað hlutfall þyngdartaps í öllum þremur skömmtum afCistanche pípurkann að stafa af því aðCistanchetubulosaeinnig hækkuð þéttni theseruminsúlíns (tafla 3), sem er gagnlegt fyrir DM. Rósíglítazón leiddi til marktækrar aukningar á líkamsþyngd, sem er þekkt aukaverkun rósíglítazóns. Marktækt aukin lifrarþyngd og lifrar/líkamsþyngdarhlutfall í rósíglítazón hópnum (po0.001) bentu til þess að rósíglítazón gæti valdið fitusöfnun og virknibreytingum í lifur.

Niðurstöður in vivo prófunarinnar sýndu þaðCistanche píplar gætubæla hækkuð blóðsykursgildi á fastandi maga og hækkuð blóðsykursgildi eftir máltíð og aukið insúlínnæmi db/db músa. Almennt,Cistanchetubulosavar áhrifaríkara við að draga úr blóðsykri og blóðfituhækkun og bæta insúlínviðnám en akarbósi meðan á tilrauninni stóð.

Eftir 20 daga inntöku,Cistanchetubulosahamlaði verulega aukinni tilhneigingu til FBG stigs og FBG-hækka prósentugildi á db/db músum stöðugt. Í lok tilraunarinnar,Cistanchetubulosasýndi sittblóðsykurslækkandiáhrif á skammtaháðan hátt. Þessar niðurstöður benda til þessCistanchetubulosagetur hugsanlega virkað sem hugsanlegt blóðsykurslækkandi lyf þegar það er gefið í viðeigandi skömmtum. Losun glúkósa á sér stað í beinagrindarvöðvum eftir máltíð, en magn FBG ræðst fyrst og fremst af glúkósaúttakinu í lifur. Niðurstöður FBG sýndu þaðCistanchetubulosabætti verulega glúkósaframleiðslu í lifur db/db músa; léleg framleiðsla glúkósa í lifur er einn af þremur helstu efnaskiptagöllum í DM af tegund 2 sem stuðla að blóðsykrishækkun (Bavenholm o.fl.,2001). Á degi 30 voru prósentugildi fyrir FBG aukningu í samanburðarhópi sykursýki lægri en búist var við, sem gæti skýrt þá staðreynd að aðeins CT72.6 (po0.01), acarbose (po0.05), andrósíglítazón ( po0.001) dró verulega úr aukningu á FBG samanborið við viðmiðunarhóp fyrir sykursýki.

Samanlagt benda niðurstöðurnar í töflu 2 til þessCistanchetubulosastjórnaði á áhrifaríkan hátt hækkuðum blóðsykursgildum eftir máltíð eftir glúkósahleðslu, sem bendir til þess að Cistanche tubulosa sé frambjóðandi lyf til að draga úr blóðsykri eftir máltíð. Hátt blóðsykursgildi eftir máltíð er óháður áhættuþáttur fyrir fylgikvilla í hjarta- og æðasjúkdómum sem tengjast DM af tegund 2 (Ceriello, 2005; Blaak o.fl., 2012). CT120.9 bældi marktækt hækkun á blóðsykursgildi eftir máltíð, sem bendir til þess að CT120.9 hafi bætt skert glúkósaþol db/db músa með sykursýki, og áhrifin voru sambærileg við 19,5 mg/kg acarbose. Hins vegar voru blóðsykurslækkandi áhrif CT120. 9 var minna álag en rósíglítazón.

Skortur á insúlínseytingu og insúlínviðnám eru tveir af þremur helstu efnaskiptagöllum í tegund 2 DM sem stuðla að blóðsykrishækkun (Bavenholm o.fl., 2001). Greiningarniðurstaða okkar af theFINS sýndi að stór skammtur afCistanchetubulosaendurheimt skortinsúlínseytingu í db/db músum að einhverju leyti. Því bældi Cistanchetubulosa á áhrifaríkan hátt hækkuð blóðsykursgildi fastandi og eftir máltíð (tafla 2) að hluta til með því að örva insúlínseytingu. Blóðsykurshækkun og blóðfituhækkun hafa aukinn oxunarálag á beta-frumur og hvatbera fyrir utan aðal sykursýkissjúkdóminn. Það eru til in vitro og in vivo vísbendingar um að langvarandi útsetning fyrir háu magni blóðsykurs og lípíða sé skaðlegar tóbetafrumur, sem veldur skorti á insúlínseytingu, skertri insúlíngenatjáningu og framkalli frumudauða vegna frumudauða (Pitocco o.fl., 2010). Þar sem andoxunarefni gætu verndað beta-frumulínur og einangraðar eyjar gegn skaðlegum áhrifum frá útsetningu fyrir háum glúkósastyrk (Kaneto o.fl., 1996, Tajiri o.fl., 1997), getur Cistanche tubulosa bætt insúlínseytingu með andoxunaráhrifum sínum.

Alvarlega skert insúlínþol sykursýkisviðmiðunarhópsins staðfesti insúlínþolið ástand db/db músanna. TheITT niðurstöður sýndu að stór skammtur afCistanchetubulosabætt insúlínviðnám í db/db músum, sem var sambærilegt við rósíglítazón og betra en acarbose, sem bendir til þess aðCistanchetubulosahefur öfluga insúlín-næmandi eiginleika.

Glúkósajafnvægi er aðallega stjórnað af lifur og beinagrind. Mesta losun glúkósa á sér stað í lifur og beinagrindarvöðvum, með glýkógen sem aðal innanfrumuform geymsluglúkósa (Saltiel, 2001). Glýkógenmagn í ýmsum vefjum endurspeglar beinlínis insúlínnæmi, þar sem insúlín stuðlar að glýkógenútfellingu innan frumu. Insúlínörvað glýkógeninnihald minnkar verulega hjá dýrum með insúlínviðnám, í hlutfalli við hversu insúlínskortur er (Chandramohan o.fl., 2008). Hins vegar,Cistanchetubulosahafði engin jákvæð áhrif á glýkógengeymslu í lifur eða beinagrind.

Efnaskiptasnið tegund 2 DM einkennist af skertri glúkósaefnaskiptum og insúlínviðnámi, oft ásamt blóðfituskorti (Cha o.fl., 2005). Blóðfituhækkun er einn af helstu áhættuþáttum hjarta- og æðasjúkdóma í DM. Einkennandi einkenni blóðfitufalls af völdum sykursýki eru hár þríglýseríð (TG) styrkur í plasma, lágþéttni lípóprótein kólesteról (HDL-c) styrkur, aukin lágþéttni lípóprótein kólesteról (LDL-c) styrkur og aukin mjög lágþéttni lípóprótein. styrkur kólesteróls (VLDL-c) (Mooradian, 2009). Eftir að hafa verið meðhöndluð meðCistanchetubulosaí 45 daga lækkuðu magn heildarkólesteróls, TG, LDL-c og VLDL-c í db/db músum á meðan HDL-c gildi voru aukin, sem gefur til kynna aðCistanchetubulosahafði jákvæð áhrif á blóðfituhækkun og gæti dregið verulega úr hættu á æðakölkun, kransæðasjúkdómum og fylgikvillum sykursýki (tafla 3). Cistanche tubulosa lækkaði marktækt TC gildi, sem er í samræmi við fyrri skýrslu (Shimoda o.fl., 2009). Verkunarháttur Cistanche tubulosa bætir blóðfituhækkun getur tengst miðlun mRNA tjáningar í lifur sem tengist flutningi kólesteróls og umbrotum (Shimoda o.fl. ., 2009). Þó að algengi kólesterólhækkunar sé ekki aukin í DM, getur lækkun kólesteróls dregið úr hlutfallslegri hættu á hjarta- og æðasjúkdómum hjá sjúklingum með DM (Mooradian, 2009). vísitölu, sem eru áhættuþættir kransæðasjúkdóma, sem gefur til kynna að Cistanche tubulosa sé gagnlegt við stjórnun á bæði sykursýki og hjarta- og æðasjúkdómum. Jákvæða viðmiðunarlyfið rósíglítazón hækkaði marktækt TC-stig, sem skiptir máli fyrir aukna hættu á framgangi sykursýki og hjarta- og æðasjúkdóma.

5. Niðurstaða

Að lokum bjóðum við upp á fyrstu sýninguna á blóðsykurslækkandi ogblóðfitulækkandiáhrifumafCistanchetubulosadb/db mýs af tegund 2 sykursýki.Cistanchetubulosaeðlileg blóðsykurshækkun endurheimti insúlínnæmi og minnkaði blóðfituhækkun. Að einhverju leyti,Cistanchetubulosabætti alla þrjá helstu efnaskiptagallana sem stuðla að blóðsykrishækkun í tegund 2 DM.Þannig,Cistanchetubulosasýnt fram á mikla möguleika á að koma í veg fyrir framgang sjúkdóms af tegund 2 og draga úr hættu á æðakölkun, kransæðasjúkdómum og fylgikvillum sykursýki. Sem hefðbundin kínversk lyf og tonic matvæli, gæti Cistanchetubulosa verið þróað frekar í lyf, lyfjafræðileg matvæli eða fæðubótarefni í framtíð. Hins vegar er þörf á frekari rannsóknum til að bera kennsl á lífvirka efnisþáttinn og skýra aðferðirnar sem bera ábyrgð á blóðsykurslækkandi lyfinublóðfitulækkandiáhrifumafCistanchetubulosa.

Viðurkenningar

Þessi vinna var studd af styrkjum frá National KeyTechnology R&D Program í 11. fimm ára áætlun Kína (2007BAI32B06) og Leiðandi Group Office State Council of Poverty Alleviation and Development (2008-3A).

Viðauki A. Aukaefni

Viðbótargögn sem tengjast þessari grein er að finna í netútgáfunni á http://dx.doi.org/10.1016/j.jep.2013.09.027.

Úr: „Blóðsykurslækkandi og blóðfitulækkandi áhrif Cistanche tubulosa“ eftirWen-Ting Xiong, o.fl

---W.-T. Xiong o.fl. / Journal of Ethnopharmacology 150 (2013) 935–945