Anterior Thalamic Nuclei: A Critical Substrat For Non-spatial Paired-associated Memory in Rots Part 2

2|EFNI OG AÐFERÐIR

2.1|Dýr og búsetuskilyrði

Karlkyns Long-Evans rottur (12 mánaða gamlar; að meðaltali 630 g) voru geymdar í þriggja eða fjögurra manna hópum í Makrolon búrum (48 28 22 cm) á öfugum 12- klst ljós-myrkri hringrás (ljósin kveikt kl. 20:00 ).

Hegðunarpróf áttu sér stað í myrkri fasa ljósahringsins, fimm lotur á viku; athuganir staðfestu að rottur voru tiltölulega virkari í myrkri fasanum. Rottum var haldið við 85% af líkamsþyngd sem var laus við fóðrun með vatni að vild; fæða var að vild fyrir og eftir aðgerð til bata eftir aðgerð.

Skurðaðgerð er ferlið við að meðhöndla sjúkdóma og bæta líkamlega heilsu. Bataferlið eftir aðgerð krefst sérstakrar athygli. Auk líkamlegrar bata krefst góðrar líðan einnig að einblína á endurheimt minni. Sterk tengsl eru á milli bata eftir aðgerð og minni.

Við aðgerðina hafa þættir eins og mótlætisviðbrögð líkamans og áhrif svæfingalyfja oft áhrif á minnisvirkni heilans. Eftir að líkaminn hefur jafnað sig skaltu huga að góðu mataræði, hóflegri hreyfingu og nægum svefni. Á batatímabilinu utan sjúkrahússins verður þú að halda áfram að forðast óhóflega starfsemi og viðhalda þægilegu ástandi líkamans.

Auk lífsvenja eru sanngjarnar sálfræðilegar breytingar einnig gagnlegar til að endurheimta heilsu og minni. Slakaðu á sjálfum þér, haltu friðsælum huga og hjálpaðu þér að laga þig að endurheimt minni. Á sama tíma ættir þú að taka virkan þátt í afþreyingu og eiga samskipti við ættingja og vini til að halda heilanum virkum og bæta vitsmuna- og minnishæfileika þína. Hægt er að auka þessa virkni smám saman og er hægt að framkvæma í grundvallaratriðum einu sinni í viku.

Í stuttu máli, bataferlið eftir aðgerð krefst alhliða athygli. Að viðhalda góðum lífsvenjum og sálfræðilegum aðlögunum gegnir mjög mikilvægu hlutverki við að stuðla að líkamlegum bata og endurheimt minni. Við skulum horfast í augu við það á jákvæðan hátt, með fullu trausti og von. Við þurfum að bæta minnið og Cistanche deserticola getur bætt minnið verulega, því Cistanche deserticola getur einnig stjórnað jafnvægi taugaboðefna, eins og aukið magn asetýlkólíns og vaxtarþætti. Þessi efni eru mjög mikilvæg fyrir minni og nám. Að auki getur Kjöt einnig bætt blóðflæði og stuðlað að súrefnisgjöf, sem getur tryggt að heilinn fái nægileg næringarefni og orku og þar með bætt heilaþrótt og úthald.

Smelltu vita leiðir til að bæta heilastarfsemi

Allar verklagsreglur voru í samræmi við samþykktar leiðbeiningar frá dýrasiðanefnd háskólans í Kantaraborg. Fjórir rottahópar voru stofnaðir með slembivali eftir kynningu fyrir skurðaðgerð í geislamyndaarm völundarhúsi (RAM) og flugbraut. Hóparnir fjórir voru tvíhliða ATN-skemmdir með eða án snefils á milli lyktar- og hlutaörvunar þegar þeir voru þjálfaðir í pöruðu-tengdu verkefninu og samsvarandi tveimur Sham-skemmdum hópum.

Lokaúrtaksstærðir voru (1) Sham-No Trace=7 (þ.e. Sham-skemmdarhópur með ekkert bil á milli lyktar og hlutaráreita sem notuð eru í pöruðu tengdu verkefninu); (2) Sham-Trace=7 (Shamlesion hópur gefinn 10-s ummerki á milli framsetningar lyktarinnar og hlutarins áreiti); (3) ATN-No Trace=8; og (4) ATN-Trace=9. Önnur rotta með ATN meinsemd var útilokuð vegna þess að hún uppfyllti ekki meinsemdarviðmiðin (sjá hér að neðan).

2.2|Skurðaðgerð

Rottur voru svæfðar með ísóflúrani (örvun 4%; viðhald 2,5%) og settar í stereótaxískt tæki með eyrnastöngum (Kopf, Tujunga, CA). Framtennistöngin var stillt á 7,5 mm fyrir neðan hljóðlínu til að lágmarka skaða á fornix.

Í hvoru heilahveli var tveimur innrennsli beint að framhvelkjarna (AV; efri og neðri), og eitt innrennsli var beint að framhliðarkjarna (AM). Í hverri skurðaðgerð var notað eitt óvirkt anterior-posterior (AP) hnit miðað við Bregma-Lambda fjarlægð einstakrar rottu (öll gildi inmm). Fyrir AV sár voru AP hnitin: 2,20 fyrir B–L 6,9–7,2; 2,25 fyrir B–L 7,3 til 7,6; 2.30 fyrir B–L Stærri en eða jafnt og 7,7. AV-innrennsli var gert við 5,68 og 5,73 fyrir neðan dura og 1,52 til hliðar við miðlínu.

AM innrennslið var gert {{0}}.1 mm framarlega en AV hnitið, 5.76 fyrir neðan dura og 1.16 hliðar; fyrsta AM meinsemdin var gerð eftir að hafa lokið öllum AV innrennslum og hófst gagnhliða síðasta AV meinsemdinni. 0.15 M N-metýl-d-aspartat (NMDA; Sigma, CastleHill, NSW) í 0,1 M fosfatbuffi (pH 7,20) var gefið inn á hvern stað með 0,04 ul á mínútu í gegnum 2.5-ulHamilton sprauta (Reno, NV, Bandaríkjunum) með örinnrennslisdælu (Stoelting, Wood Dale, IL).

AV siteper heilahvel fékk {{0}}.12 og 0.10 ul fyrir dorsaland ventral sites, í sömu röð; 0,06 ul var notað fyrir hvern AM-stað. Sprautanálin hélst á staðnum í 3 minper hlið, eftir innrennsli.
Sýndarskemmdaaðgerðir notuðu sömu aðferð, en nálin var lækkuð niður í 1 mm fyrir ofan efri AV og AM-skemmdina með innrennsli.

2.3|Atferlisverkefni

Átta arma vinnsluminni staðfesti skert staðbundið minni hjá rottum með ATN-skemmdir eftir aðgerð. Flugbrautarbúnaður var notaður til að þjálfa rotturnar í öllum verkefnum sem ekki eru staðbundin, það er einföld lykt og einfaldur hlutur mismunun og lykt–hlutur og lykt–slóð–hlutur pöruð verkefni.

Fyrir aðgerð voru rottur sem höfðu takmarkað matvæli venjast átta arma vinnsluminni, sem lýst er hér að neðan, til að ná í 0,1 g súkkulaðistykki (Foodfirst LTD Auckland, NZ) og aðlagast opnun og lokun armhurða. Á rauðri Perspex flugbraut (Mynd 1) voru rottur einnig mótaðar þannig að þær stinga í nefið 2-cm hringlaga hvíta plasthettu sem var 10 cm fyrir ofan gólfflöt í miðju þunns svamps á glærri Perspex innleggi sem var fest við endaveggurinn.

Þeir voru líka mótaðir til að ýta (með nefi eða loppu) hlut sem var á hjörum aftan á botni hans ofan á matarholu sem var innfelldur í miðju 5 8,5 3 cm viðarkubba. Maturinn innihélt súkkulaðibita (og geymdi óaðgengilegan mat undir holunni). Hluturinn sem notaður var til forþjálfunar var ekki notaður aftur. Eftir aðgerð fengu rottur til bata, bæði vinnsluminni og flugbrautina.

2.4|Staðbundið vinnsluminni í vinnsluminni

Eftir skurðaðgerð var staðbundið vinnsluminni prófað með því að nota vinnsluminni sem staðsett er í miðju gluggalausu herbergi (3 3 m). Völundarhúsið var með grámála 35 cm breiðri viðarmiðstöð með átta álörmum (65 cm á lengd og 8,6 cm á breidd, með 4,5 cm háum brúnum), hækkaðir 67,5 cm yfir herbergisgólfið. Tærir Perspex-veggir (19 cm á lengd og 25 cm á hæð) teygðust meðfram annarri hlið hvers handleggs frá miðstöðinni til að koma í veg fyrir að rottur hoppa á milli handleggja.

Svartur matarbrunnur úr tré (5 8,5 3 cm), með óaðgengilegum mat undir, var settur á enda hvers handleggs. Við prófun voru 2 0,1 g súkkulaðistykki til staðar í hverjum mat í byrjun hvers matar. réttarhöld. Glærar perspexguillotine hurðir, sem hægt var að lyfta undir miðstöðina með hjólakerfi, stýrðu aðgangi að hnúðarmunum.

Tíu dagar í röð af formlegri þjálfun í RAM voru notaðir til að prófa staðbundið vinnsluminni. Rottunni var komið fyrir í miðstöðinni og 10 sekúndum síðar voru allir átta armarnir opnaðir og rottunni leyft að velja sem skilgreint sem báðir afturfætur yfir handleggsþröskuldi. Þegar rottan hafði farið inn í handlegg voru allar hurðir lokaðar og hún var bundin við handlegginn í 15 s, sama hvort hún valdi rétt.

Rottunni var síðan hleypt aftur inn í miðmiðstöðina og henni haldið þar í 10 sekúndur áður en allar hurðir voru opnaðar aftur til að leyfa annað handlegg. Réttarhöldunum lauk þegar rathadinn heimsótti alla átta armana, 20 armaval hafði verið valið eða 10 mínútur liðnar.

2,5|Verkefni sem ekki eru staðbundin: Einföld mismunun og pöruð tengslanám

Bæði einföld mismunun og pöruð tengd verkefni notuðu sömu rauðu Perspex flugbrautina (93 26 26 cm) sem var sett á 75-cm hátt borð (Mynd 1). Hægt var að skipta flugbrautinni með þremur lóðréttum lausum hurðum (redPerspex, 26 26 cm) sem voru valdar út frá tilteknu hegðunarverkefni. Að því er varðar kynninguna þá var 6,5 6 8 mm þunnur svampurinn með hettuna á miðjunni súkkulaðimatarverðlaun (Mynd 1).

Svampurinn var festur við færanlega hurð á flugbrautinni (fyrir pöruð tengd verkefni) eða endavegg flugbrautarinnar (fyrir einfalda mismununarverkefnið). Annar hurðarsvampur var notaður fyrir hverja lykt, sem var dreypt við hlið ílátsins með 5 ml af sólblómaolíu blandað með 20 ul af ilmkjarnaolíum úr Nýja Sjálandi.

Lyktin var sítróna og negull fyrir pöruð verkefni, og kanill og lime fyrir einföld mismununarverkefni, eða hið gagnstæða í hópum með mótvægi. Léttir og sjónrænir hlutir (Mynd 1) voru festir með löm aftan á botninum við toppinn á matarholunni þannig að rotta gæti auðveldlega ýtt hlutnum aftur (annað hvort nef eða loppu) til að leita í brunninum að matarverðlaunum.

Viðargrind (1,8 m á hæð frá gólfi 1,3 m á breidd), með svörtum gluggatjöldum, lokaði öllum hliðum prófunarsvæðisins til að draga úr staðbundnum vísbendingum meðan á prófun stendur.

Einföld mismunun (aðeins lykt; aðeins hlutur) og pöruð tengd verkefnin notuðu „fara/ekki fara“ aðferð.

Fyrsta tilraunin fyrir hverja lotu hófst með því að halda rottunni á upphafssvæðinu í 120 sekúndur til að aðlagast þema aftur; síðari tilraunir notuðu 20 sekúndur á þessu upphafssvæði. Allrats fengu 12 fjöldarannsóknir á daglegri lotu, með sixgo (verðlaun) og sex no-gos (ekki verðlaunað) rannsóknum í slembivalsaðri röð. Ekki voru keyrðar fleiri en þrjár eða þrjár tilraunir án aksturs í röð í lotu.

Ekkert af fjórum mismunandi pörunum af lykt-hlutörvun var endurtekin í samfelldum tilraunum. Rétt atriði í einföldum mismununarverkefnum og réttum áreitispörum í pöruðum tengdum verkefnum var mótvægi milli rotta.

Fyrir einfalda lyktarmismunun var svar skilgreint sem nef stungið í hettuna í miðju lyktarblandaðs svamps; að þefa aðeins af svampinum var talið vera neitun. Matur var alltaf til staðar í hettunni í miðju svampsins fyrir lyktar-hlutapöruð verkefnin; go/no-go þátturinn hér vísar til þess hvort hlutnum hafi verið ýtt til að sýna hvort matarverðlaun hafi verið undir honum, við enda flugbrautarinnar.

Fyrir hluti var svar skilgreint sem hvers kyns ýta með nefi eða loppu sem hallaði hlutnum aftur á bak. Seinkun frá því að síðustu hurðinni var lyft og þegar rottan hafði samskipti við lyktina (nef stungið í hettuna; til að mismuna einfaldri lykt) eða við hlutinn (ýttur aftur á lömina, fyrir einfalda mismunun á hlutum og pöruð tengd verkefni) var mælt með hljóðlátri skeiðklukku (Dick Smith, Nýja Sjáland).

Áhorfandinn sat innan við gluggatjöldin og við hlið flugbrautarinnar til að opna hurðirnar og skrá hegðun. Tilraun var merkt sem „rétt“ ef rottan svaraði á innan við 8 sekúndum á ferðinni eða svaraði ekki fyrir 8 sekúndur í tilraunum sem ekki voru á ferð.

2.6|Einföld mismunun

Helmingur rottanna fékk þjálfun í einföldu lyktarmismununarverkefninu, fylgt eftir með einföldu hlutum mismunun og öfugt fyrir hinn helminginn. Töf á milli hurðar X (mynd 1a) og víxlverkunar við lykt eða hlut við enda flugbrautarinnar var skráð. Rottur voru þjálfaðar í einföldu lyktar- og einfaldri mismununarverkefni þar til þær náðu viðmiðinu (80% rétt á 2 dögum í röð).

Fyrir einfalda lyktarmismununarverkefnið var ein lykt sett fram í hverri tilraun. Rétturinn til að greina á milli hvora tveggja lykta var parað við matarverðlaun kynnt í svampinum í lok hólfs B (Mynd 1a).

Í einföldu aðgreiningarverkefninu var einn hlutur settur fram í hverri tilraun í lok hólfs B (ekki sýnt á mynd 1). Therat þurfti að læra hvor af tveimur hlutum var paraður við matarverðlaun sem lögð voru fram undir hlutnum.

2.7|Pöruð tengd verkefni (rekja og ekki rekja) Þessi verkefni notuðu nýtt skipulag á lóðrétt færanlegum hurðum (Mynd 1). Rotturnar lærðu hvor af tveimur lykt-hlutapörum yrði verðlaunuð (td Lykt 1 + ObjectA og Odor 2 + Object B) og hvaða pörun var ekki verðlaunuð (þ.e. Lykt 1 + Object B og Oodor 2 + Hlutur A).

Burtséð frá pöruninni fengu rottur alltaf verðlaun fyrir framsetningu lyktarinnar þegar þeim var hleypt inn í annað hólf flugbrautarinnar. Þetta var hólf C fyrir „sporlaus“ ástandið þar sem hólf A var ekki notað og hólf B var upphafshólfið. Lyktin var í lok hólfs B vegna „spora“ ástandsins, þar sem hólf A var notað sem upphafsbox.

Rottur í sporaástandi urðu fyrir 10-s töf á milli kynningar á lykt og áreiti hluta, með því að halda þeim í hólfi C, en rottur í sporlausu ástandi urðu fyrir hlutnum strax í kjölfar samspils þeirra við lyktina (eftir borðað verðlaunin). Við bæði spora- og sporlausar aðstæður skráðum við biðtíma til að fara yfir hólf D, frá því að DoorZ var lyft þar til rottan hafði samskipti við hlutinn eða sleppti því að hafa samskipti við hann í 8 sekúndur.

Tveir hópar rotta (Sham-skemmd og ATN-skemmd) voru þjálfaðir í lykt-hlutapöruðum-tengdum verkefnum (No Trace Groups), og tveir samsvarandi hópar voru þjálfaðir í theodor-trace-hlut-tengdu verkefni (Trace group) þar til þeir náð viðmiðun (80% réttar tilraunir yfir 3 daga) eða að hámarki 50 dagar.

2.8|Varðveislupróf eftir kaup

Varðveisla á pöruðu samstarfsverkefninu fyrir hvaða rottu sem er var framkvæmd 5 dögum eftir að viðmiðuninni var náð eða eftir 50 daga þjálfun. Í þessari lotu voru notaðar 12 fjöldaprófanir með verðlaunum/óverðlaunum á einum degi á sama hátt og áður var notað fyrir þá rottu.

2.9|Vefjafræði

2.9.1|Perfusion og vefjasöfnun

Á 3 dögum fyrir varðveisluprófið kynntust stakar rottur tómt hreint búr í 90 mínútur í dimmu rólegu herbergi. Strax eftir síðustu prófunina í innilokunarprófinu var rottunni komið fyrir í búri sínu í kunnuglega dimmu rólegu herberginu 90 mínútum fyrir gegnflæði.

Rottur voru djúpt svæfðar með natríumpentóbarbital (125 mg/kg) og blóðflæði gegnum hjartað með saltvatni og síðan paraformaldehýð [4% PFA í 0.1 M fosfatbuffi (PB)] til að festa heilann. Heilar voru eftirbundnir í 4% PFA og síðan að lágmarki 48 klst. í langtímalausn (20% glýseról í 0.1 M PB). Kórónum 40-μm hlutum var safnað með því að nota frostmikrótóm (Thermo Fisher, Bretlandi) og geymdir í frystivarnarlausn (30% glýseról, 30% etýlen glýkól í 0,1 M PB) við 20 C þar til unnið er fyrir ónæmisvefjafræði.

Krónuhlutunum var safnað í tvær aðskildar seríur. Fyrsta röðin tók samfellda hluta í fimm kryovöglum fyrir ónæmisvefjafræði (þ.e. einn af hverjum fimm). Þessi röð innihélt fremri hluta hluta frá framhliðarberki að skilrúmssvæði (u.þ.b. {{0}},7 til 0,6 mm frá Bregma) og aftari blokk frá miðlæga thalamus (u.þ.b. 3,5 mm frá Bregma) að caudal. afturmildarberki.

Önnur röðin tók samfellda hluta til að sannprófa mein. Þessum hlutum var safnað í fjórar frystiföt frá framanverðu ATN að aftari miðlungs thalamus (u.þ.b. 0,6 til 3,5 mm frá Bregma).

2.9.2|Neu-N litun og ATN-skemmdir

Frjáls-fljótandi hlutar um allt ATN-svæðið voru þvegnir (3 10 mín.) í 0.1 M fosfat-buffuðum saltvatni með Triton-X (0.2%; PBSTx) fyrir ræktun í innrænum peroxidasablokkandi jafnalausn í 30 mín [1% vetnisperoxíð (H2O2), 50% metanól (CH3OH) í 2%PBSTx].

Hlutar voru ræktaðir yfir nótt við 4 C inanti-NeuN aðal mótefni (1:5000; monoclonal-MouseCat# MAB377; Millipore, California USA) í PBSTx með 1% eðlilegu geitasermi (NGS; Life Technologies, NZ).

Ofgnótt mótefnajafna var fjarlægt með PBSTx og fylgt eftir með ræktun í bíótínýleruðu geit-and-mús aukamótefni (1:1000 Cat# BP-9200-50: VectorLaboratories, California USA) yfir nótt við 4 C í PBSTx og 1% NGS. Hlutar voru settir í ExtrAvidin (peroxidasa samtengd; 1:1000; Sigma, NSW Australia), PBSTx og 1% NGS í 2 klst við stofuhita.

Til að fjarlægja umfram ExtrAvidin og Triton X{{0}} voru hlutarnir þvegnir í PBS, PB og síðan Tris buffer (pH 7,4 í eimuðu H20) til að undirbúa hlutana fyrir sjón með nýútbúnu díamínóbensídíni ( DAB 0,05%; Sigma, í 0,01% H2O2 í Tris buffer).

DAB hvarfið (um það bil 5 mín) var stöðvað með því að nota Tris jafnalausn (1 10 mín þvott) og hlutar voru settir í PB við 4 C yfir nótt áður en þær voru settar á gelatínaðar glærur og látnar þorna. Glerurnar voru þurrkaðar í gegnum alkóhól (70%–100%) áður en þær voru hreinsaðar með inxýleni og settar á með DPX (06522; Sigma-Aldrich) og yfirhylki.

Fjöldi Neu-N-jákvæðra frumna í ATN var notaður til að ákvarða umfang meinsins. Þetta notaði hluta frá bæði vinstra og hægra heilahveli fyrir hvern af hverjum fjórum 40-μm hluta um allt ATN og svæðið sem mælt var með ImageJ (NIH, Bandaríkjunum). NeuN-jákvæð frumulitun var mynduð við 5 markmið á LeicaDM6 B uppréttri smásjá og DFC7000T myndavél (Leica Microsystems, Þýskalandi).

Sjálfvirk talning frumanna var fengin með ImageJ (myndgreiningarhugbúnaði, National Institute of Health, NIH, Bandaríkjunum). Svæðið í kringum taugafrumur á ATN svæðinu var handvirkt valið og myndunum var breytt í {{0}}bitagráskala, bakgrunnurinn var dreginn frá (veltingur=40), breytt í grímu og vatnaskilaaðgerðinni var beitt, og allar taugafrumur yfir þröskuldi ('MaxEntropy' þröskuldur, hringlaga 0.5–1.0) voru taldar.

Uppgötvunarþröskuldurinn var sá sami fyrir alla hluta.Sjálfvirkir NeuN-litaðir frumukjarnar voru taldir í níu af sýndarrottunum (fimm í Sham-Trace hópnum og fjórir í Sham-No Trace hópnum) til að tjá frumufjölda í ATN.

Sjálfvirkar talningar á NeuN-lituðum kjarna af hlífðarfrumum í öllum ATN-skemmdum rottum voru bornar saman miðað við meðaltalningu á NeuN frumum sem sáust í sýndarrottunum. Viðunandi skemmdir voru skilgreindar þannig að þær náðu viðmiðuninni um 50% tap á frumum í ATN, með að lágmarki 25% á hvert heilahvel. Þetta er í samræmi við viðmið fyrir ATN-skemmdir í fyrri rannsóknum (Mitchell & Dalrymple-Alford, 2005, 2006; Perry et al., 2018).

2.9.3|Zif268 ónæmisvefjafræði

Frjáls fljótandi hlutar voru unnar á svipaðan hátt og NeuN, en ræktaðir í kanínu fjölstofna Zif268 aðal mótefni (Egr-1; 1:1000 Cat# sc-110; Santa CruzBiotechnology, USA) í 72 klst. 4 C í PBSTx með 1%NGS, fylgt eftir með ræktun í bíótínýleruðu geita-antikanínumótefni (1:1000: Vector LaboratoriesBA-1000) yfir nótt í PBSTx og 1% NGS.

Eftir DAB-sýn (18 mín.) var Zif268-jákvæð frumulitun á hverju áhugasvæði mynduð með 10 hlutefni með ljóssmásjá (Leica, Þýskalandi). Sjálfvirk talning frumanna var fengin í gegnum mynd J ( NIH, USA) á sama hátt og NeuNpositive frumur, nema hringlaga var stillt á 0.65–1.0.

Talningar á Zif268-jákvæðum frumum fyrir öll svæði notuðu sama þröskuldalgrím, með á milli tveggja og sex hluta fyrir hvert áhugasvæði í hverri rottu. Notað var meðaltal Zif268-jákvæð frumufjölda á mm2 yfir hluta (frá báðum heilahvelum) innan áhugasvæðis.

2.10|Gagnagreining

ANOVA með Statistica (v13; Dell Inc.) var gerð til að prófa meðalmun á milli rottahópanna fjóra (Sham-No Trace, Sham-Trace, ATN-No Trace og ATNTrace). Endurteknum mæliþáttum var bætt við í marga daga (RAM og einföld mismunun), prufukubbum (pöruð tengd verkefni) og Zif268 talningar yfir skyld svæði eða undirsvæði sem vekja áhuga.

ANOVA fyrir bæði vinnsluminni og einföld mismununarverkefni bar saman fjóra hópa til að staðfesta að tveir sýndarskemmdir og tveir ATN-skemmdir væru í samræmi við hvor annan, en athugaðu að það var enginn snefilþáttur í vinnsluminni eða einföldum mismununarverkefnum. Fyrir bæði einfalda mismunun og pöruð tengd verkefni á flugbrautinni var gagnkvæm umbreyting á leynd gögnum í einstökum tilraunum notuð til að tryggja einsleitni dreifni.

Á hverjum prófdegi mynduðu umbreyttu töfin meðaltöf fyrir hverja af sex prófunum sem ekki voru verðlaunuð og sex verðlaunuðu tilraunirnar. Fyrir einföldu mismununarverkefnin greindum við meðaltal leyndarmunar (meðaltal verðlaunatilrauna að frádregnum meðaltali óverðlaunaðra prófana) en ekki verðlaunaðra og óverðlaunaðra prófana sérstaklega vegna bilunar í gagnageymslu.

Allar þrjár leynd mælingar voru tiltækar fyrir pöruð tengd minnisverkefni (ekki verðlaunaðar tilraunir, verðlaunaðar tilraunir og leynd munur). Til að gera grein fyrir margþættum samanburði og jafnvægi á villum af tegund I og tegund II notuðum við marktektarstigið p < 0.02 fyrir hegðunargreiningar þar sem það voru þrjár tengdar mælingar í pöruðu tengdu verkefninu (prófanir sem ekki eru verðlaunaðar, verðlaunaðar prófanir og meðaltalsmunur á leynd).

Það voru sex frumgreiningar á áhugasvæðum fyrir Zif268 tjáningu, svo marktækt í þessum greiningum var stillt á p < 0.01. Posthoc Newman–Keuls (NK) próf mátu parslegan hópmun. Einföld aðaláhrifagreining var notuð þegar marktækar milliverkanir voru sem innihéldu endurteknar mælingar.

3|NIÐURSTÖÐUR

3.1|Sannprófun á skemmdum

Allar nema ein af 18 rottum með ATN sár uppfylltu apriori viðmiðunina um 50% tvíhliða skaða á ATN og að lágmarki 25% á hvert heilahvel. Miðgildi tvíhliða skaða var 76% fyrir báða ATN-skemmdahópa (bil:ATN-No Trace, 61%–93%; ATN-Trace, 63%–93%;Mynd 2). Rottan sem var útilokuð hafði aðeins viðunandi mein í einu heilahveli (alls 48%, 75% til vinstri og 20% ​​til hægri).

Mynd 2d sýnir að NeuN-talningin fyrir ATN-taugafrumur í ATN-skemmdarrottunum (M=3388, SD=2024) voru allt langt undir þeim gildum sem fundust í sýndarskemmdarrottunum (M=15, 339, SD=1065; þessi talning var svipuð því sem Frost o.fl., 2020 greindi frá). Átta af 17 skemmdarrottum (fjórar í Trace hópnum og fjórar í No-Trace hópnum) höfðu hvorki skaða á miðlungs thalamus (MD) né reunions/rhomboid (Re/Rh) kjarna og tiltölulega litlar skemmdir voru á þessi mannvirki í níu rottum sem eftir eru með sár.

Þegar MD skaði kom upp var það í fremri hliðum sem liggja að hlið ATN. Svo, MD skemmdir voru metnar frá u.þ.b. {{0}}.72 til +2.10 mm frá Bregma, þar sem það var á bilinu 0% til 41% tap á frumum í heild sinni hópur (miðgildi=21%). Þegar Re/Rh tjón varð var það líka við hliðina á ATN svæðinu, þannig að það var metið um það bil 1,08 til 2,04 mm frá Bregma, þar sem það var á bilinu 0% til 33% (miðgildi=6%). Athugaðu að þessi prósentuskaðagildi tákna ekki allt MD- og Re/Rh-svæðið, vegna þess að aftari svæði beggja kjarna voru ósnortin í öllum ATN-skemmdum rottum.

For more information:1950477648nn@gmail.com